專(zhuān)利名稱(chēng)：山莓葉中一種新二萜化合物、制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及山莓葉中一種新二萜新化合物、分離純化制備方法及其在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
背景技術(shù)：
山莓(Rubus corchorifolius L. f)屬薔薇科懸鉤子屬中一種落葉灌木。多生長(zhǎng)于向陽(yáng)山坡、溪邊、山谷、荒地和灌叢中，海拔300m 1500m。除東北、內(nèi)蒙古、青海、新疆、西藏外，全國(guó)均有分布。福建全省各地均有山莓分布，野生資源蘊(yùn)藏量相當(dāng)大。我國(guó)利用山莓的歷史悠久，在古書(shū)《本草拾遺》、《本草綱目》、《名醫(yī)別錄》、《食療本草》中就有山莓藥用 價(jià)值的詳細(xì)記載，其藥用已有上千年歷史。山莓果、根及葉均可入藥。二萜化合物的抗腫瘤活性是十分顯著的。L.Z. Li等(2010)從芫花中得到一個(gè)新的二萜化合物并研究得出其對(duì)人類(lèi)早期的HL-60腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，其IC50值為11.74iiM。Li FS等(2010)從乳香中得到七個(gè)大環(huán)二萜類(lèi)化合物，這七種化合物均對(duì)Bel-7402，Hela和SW-480腫瘤細(xì)胞有抑制作用。盤(pán)永才等(2006)從柳珊瑚中分離得到的三種二萜中，二萜T-7對(duì)腫瘤細(xì)胞KB，P388和L1210等顯示出很強(qiáng)的抑制活性，ED50依次為2. 80、0. 31、0. 22 u g/mL ;二萜T_8、T_9，也有很強(qiáng)的抗腫瘤活性；張敏等人(張敏，2007，藥學(xué)學(xué)報(bào)；張敏，2011，HELVETICA CHIMICA ACTA)從山莓葉中分離得到了四個(gè)新的二萜化合物3 a，16 a，17，19-對(duì)映-貝殼杉烷-四醇和2羰基-16 a -羥基-對(duì)映-貝殼杉烷-17-P-D-葡糖苷。33，16 a，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯，3 P，16 a，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯-17-氧-P -D-葡萄糖苷。陳雪香等人(陳雪香，2010，HELVETICACHIMICA ACTA)從山莓葉中分離鑒定出三個(gè)新化合物化合物分別為93，16 a , 17 三輕基-對(duì)映貝殼杉 _2 酮(9 0 ,16 a , 17-trihydroxy-ent-kaur-2-one), 16 a，17,19 三輕基-對(duì)映貝殼杉-2 酮(16 a , 17,19-trihydroxyl-ent-kaur-2-one), 2 ^ , 3 a ,16 a，17-四輕基-對(duì)映-貝殼杉醇(2 旦，3 a , 16 a , 17~tetrahydroxyI-ent-kauranoI)，且均具有抗腫瘤的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供從山莓中分離出的一個(gè)新二萜化合物，MTT腫瘤活性實(shí)驗(yàn)證明該化合物具有抗腫瘤作用。本發(fā)明所提供的一個(gè)新二萜化合物是從山莓中經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得，化學(xué)名稱(chēng)分別為16 a、17、18-三羥基-對(duì)映-貝殼杉烷-18-0-0 -D-葡
萄糖苷。其結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.山莓葉中一種新二萜化合物，結(jié)構(gòu)式為
2.一種如權(quán)利要求I所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)稱(chēng)取粉碎的山莓葉，加入體積分?jǐn)?shù)濃度60-80%的乙醇水溶液，料液重量體積比為Ig 10ml，攪勻，先超聲提取30min，然后于室溫下浸提48h，過(guò)濾，濾渣再重復(fù)提取一次，合并濾液，濃縮冷凍干備用； (2)將浸膏液用依次用石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇反復(fù)多次萃取，將萃取液分別濃縮，冷凍干燥，分別得石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物； (3)將乙酸乙酯萃取物進(jìn)行中壓硅膠柱色譜分離，用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，再用乙酸乙酯與甲醇進(jìn)行梯度洗脫，洗脫的流速為15mL/min，同時(shí)每管收集的流份量為20mL，收集洗脫液； (4)將洗脫液進(jìn)行壓硅膠柱層析分離純化，用氯仿與甲醇進(jìn)行梯度洗脫，收集的樣品點(diǎn)板合并樣品，收集的樣品點(diǎn)板合并樣品，將樣品進(jìn)行結(jié)晶，得化合物和母液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行洗脫時(shí)，首先用石油醚洗脫，然后用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脫，石油醚和乙酸乙酯的重量配比為20 80。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二萜化合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，用乙酸乙酯與甲醇進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，乙酸乙酯與甲醇的重量配比分別為100 0，40 I,10 1,0 I。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的山莓葉中一種新二職化合物的制備方法,其特征在于,步驟(4)中，用氯仿與甲醇進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，氯仿和甲醇的重量配比分別為25 1,15 1，10 1,5 I。
6.如權(quán)利要求I所述的山莓葉中一種新二萜化合物在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明所提供的一個(gè)新二萜化合物及其制備方法，該化合物的化學(xué)名稱(chēng)為16α、17、18-三羥基-對(duì)映-貝殼杉烷-18-O-β-D-葡萄糖苷，其結(jié)構(gòu)式為該化合物是從山莓中經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得，MTT腫瘤活性實(shí)驗(yàn)證明該化合物具有抗腫瘤作用。
文檔編號(hào)A61K31/7032GK102718809SQ201210183809
公開(kāi)日2012年10月10日 申請(qǐng)日期2012年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月26日
發(fā)明者周麗萍, 曹庸, 陳雪香 申請(qǐng)人:曹庸