專利名稱：香鱗毛蕨中綿馬素pb在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及香鱗毛蕨中綿馬素PB在抗腫瘤藥物方面的新用途。
背景技術(shù)：
隨著世界環(huán)境的污染加劇、不健康的生活方式以及不科學(xué)的飲食習(xí)慣的增加，癌癥的發(fā)病率在過(guò)去的幾十年中急劇上升，癌癥死亡率也僅次于心血管疾病。癌癥患病率和死亡率的急劇上升，促使世界范圍內(nèi)的抗癌藥物市場(chǎng)不斷擴(kuò)大。近年來(lái)隨著分子腫瘤學(xué)、分子藥理學(xué)的不斷發(fā)展以及對(duì)腫瘤本質(zhì)的逐漸闡明，藥物、基因工程、組合化學(xué)、大規(guī)?？焖俸Y選等先進(jìn)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，加速了新型抗瘤藥物的開發(fā)。目前主要的抗腫瘤藥物有:烷化齊[J，抗代謝藥物，抗腫瘤抗生素，鉬類抗腫瘤藥物，激素類，抗腫瘤植物藥，用于微管和微管蛋白(如:紫杉醇等)，用于拓?fù)洚悩?gòu)酶(如:喜樹堿等)，抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成(如:三尖杉酯堿等)。近年來(lái)，從天然藥物中尋找新的具有抗腫瘤活性的高效低毒物質(zhì)已經(jīng)成為世界醫(yī)藥界的研究熱點(diǎn)。因而，低毒、高效抗腫瘤天然產(chǎn)物類藥物的開發(fā)將會(huì)具有廣闊的市場(chǎng)前景。香鱗毛蕨是鱗毛蕨科中的鱗毛蕨屬(Dryopteris A danson),植物主要分布于北溫帶，全世界約有400種，我國(guó)有300多種。生長(zhǎng)于林下，海拔1000-1700m的碎石坡或火山周圍的巖石縫中，長(zhǎng)成小群落，能產(chǎn)生大量孢子進(jìn)行有性繁殖，也可移苗栽植。鱗毛蕨屬中主要的藥用植物為傳統(tǒng)驅(qū)蟲藥，應(yīng)用歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》；在國(guó)外作為驅(qū)蟲藥使用開始于1750年，后在英國(guó)、德國(guó)、日本和美國(guó)藥典均有收錄。除了傳統(tǒng)的藥理功效外，良好的抗病毒、抗腫瘤、抗菌、消炎、止血及子宮收縮等活性是當(dāng)代研究者們關(guān)注的主要原因。粗莖鱗毛蕨的水提物和醇提物對(duì)乙型肝炎病毒表面抗原有較明顯抑制作用，貫眾的有效成分對(duì)流感病毒、副流感病毒、腺病毒、鼻病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、單純皰疹病毒、乙型腦炎病毒等均有抑制作用。粗莖鱗毛蕨提取物中的總間苯三酚有明顯抗癌活性，對(duì)多種移植性動(dòng)物腫瘤有較強(qiáng)的抑制作用。其優(yōu)點(diǎn)是殺傷細(xì)胞的同時(shí)不損傷宿主的骨髓造血細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)表明，藥物的作用機(jī)制是顯著損傷腫瘤細(xì)胞的線粒體，干擾細(xì)胞呼吸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了從香鱗毛蕨中綿馬素PB在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明以人乳腺癌細(xì)胞、人肺癌細(xì)胞、人胃癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞、人白血病細(xì)胞、人卵巢癌細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞為研究對(duì)象，使用MTT法檢測(cè)香鱗毛蕨中綿馬素PB，對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用，結(jié)果證明，綿馬素PB對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用較明顯。 本發(fā)明通過(guò)裸鼠體內(nèi)實(shí)體瘤抑瘤實(shí)驗(yàn)證明香鱗毛蕨中綿馬素PB具有體內(nèi)抗腫瘤活性。
基于上述研究結(jié)果，本發(fā)明證實(shí)了香鱗毛蕨中綿馬素PB具有治療乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等癌癥的新用途，可用于制備抗腫瘤的藥物。本發(fā)明可以純化的形式與藥學(xué)上適當(dāng)?shù)妮d體一起被使用。可制成的藥物劑型包括片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液或粉針劑，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公認(rèn)的控釋或緩釋劑型。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物的給藥途徑可以是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員普遍知道的任何一種?？梢酝ㄟ^(guò)任何適當(dāng)?shù)姆绞浇o藥，包括非腸道、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔內(nèi)給藥，或者也可以通過(guò)用導(dǎo)管直接灌注給藥。給藥的劑量和頻率依據(jù)年齡、性別、病人狀態(tài)，同時(shí)服用其它藥物、不良反應(yīng)和臨床醫(yī)師考慮到的其它因素而定。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):1.本發(fā)明以新鮮或者干燥香鱗毛蕨為原料，在不破壞植物生態(tài)平衡、不影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的基礎(chǔ)上，對(duì)植物資源進(jìn)行高效合理的利用。2.本發(fā)明中的香鱗毛蕨中綿馬素PB具有低毒不易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，且具有重要的潛在產(chǎn)業(yè)化開發(fā)價(jià)值以及對(duì)人類研究抗癌藥物的重大貢獻(xiàn)。
具體實(shí)施方案實(shí)例一體外檢測(cè)抗腫瘤細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)細(xì)胞:人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、人肺癌細(xì)胞(A549)、人胃癌細(xì)胞(SGC-7901)、人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-8)、人白血病細(xì)胞(CEM)、人卵巢癌細(xì)胞(H0-4980)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(SHG-44)。均購(gòu)自上海細(xì)胞庫(kù)。

實(shí)驗(yàn)材料:香鱗毛蕨中綿馬素PB，本實(shí)驗(yàn)室制備；生理鹽水，哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)；紫杉醇，上海昊化化工有限公司。方法:(I)分別取處于指數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，用含有10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液稀釋成20000個(gè)細(xì)胞/mL。(2) 96孔板每孔中加入200 μ L細(xì)胞懸液，置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。(3)將香鱗毛蕨中綿馬素PB，用DMSO溶解，每孔中加入一定濃度的藥物，稀釋至需要的工作濃度。同時(shí)以紫杉醇為陽(yáng)性對(duì)照。(4)置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)48h。(5)MTT用無(wú)血清RPMI1640培養(yǎng)液配成5mg/mL溶液，每孔中加入20 μ L，置于37°C>5% CO2孵箱中孵育4h。(6)吸出上清，用培養(yǎng)液洗三次加入100 μ L DMSO溶解沉淀物，用振蕩器搖勻測(cè)定0D570 值。(7)按公式計(jì)算藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率:公式:腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率=(1-實(shí)驗(yàn)組OD/對(duì)照組0D) X 100%根據(jù)48h的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，由OD值計(jì)算生長(zhǎng)抑制率，將抑制率與藥物濃度做圖，得出劑量反應(yīng)曲線，計(jì)算出IC5tl(半數(shù)抑制濃度)值。表I綿馬素PB對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外半數(shù)抑制率
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及了一種香鱗毛蕨中綿馬素PB在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用，其特征在于香鱗毛蕨中綿馬素PB，加入不同的賦形劑后可加工成任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型，且對(duì)于腫瘤細(xì)胞具有良好的活性。
2.權(quán)利要求1所述香鱗毛蕨中綿馬素PB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的腫瘤細(xì)胞包括人乳腺癌細(xì)胞、人肺癌細(xì)胞、人胃癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞、人白血病細(xì)胞、人卵巢癌細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞。
3.權(quán)利要求1所述的治療腫瘤的香鱗毛蕨中綿馬素PB，其特征在于加入不同的賦形劑后可加工成任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型，包括片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液或粉針劑，以 及用現(xiàn)代制藥界所公認(rèn)的控釋或緩釋劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及了一種香鱗毛蕨中綿馬素PB在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)體外活性篩選和體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)證明綿馬素PB對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞具有較好的抑制活性，尤其是MCF-7人乳腺癌細(xì)胞。綿馬素PB加入不同的賦形劑后可加工成任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型。香鱗毛蕨中綿馬素PB，具有毒副作用小，療效確切，抗瘤譜廣，抗多藥耐藥性好，安全可靠等特點(diǎn)。香鱗毛蕨資源豐富，采集方便，提取工藝簡(jiǎn)單，具有重要的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)價(jià)值。
文檔編號(hào)A61P35/00GK103191087SQ201210001618
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2012年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月5日
發(fā)明者付玉杰, 祖元?jiǎng)? 梁璐, 高暢, 王薇, 牟璠松, 羅猛 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué), 付玉杰