專利名稱：異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物配方及制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種大工業(yè)化生產脂質體組合藥物配方及制備方法，其特征是，發(fā)明主題是用溶解超濾_噴霧干燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍干燥法，以統(tǒng)一的配方、工藝、設備既可大工業(yè)化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業(yè)化生產脂質體藥物口服制劑。
背景技術：
我國制藥技術，原料藥制備技術和國際先進水平差距僅5年以內，有的已達到或超過國際先進水平，制劑技術要落后國際先進水平20年?，F大量的是生產二代普通制劑， 而三代緩釋、控釋劑，尤其是四代脂質體等靶向制劑目前僅處于實驗室研究階段。原因有1、現有生產、科研制備脂質體藥物技術注射劑與口服制劑配方、工藝、設備不統(tǒng)一，既浪費資源、能源，投資大，又質量不高，污染環(huán)境。2、現有技術中可能使脂質體藥物工業(yè)化生產的方法有高壓勻質法、超聲波法、有機溶劑干燥法、噴霧干燥法、流化床包衣法、單相溶液冷凍干燥法。高壓勻質法及超聲波法粒徑可控，但是高能破碎，對原料藥有破壞；后四種方法對粒徑不可控且粒徑分布不集中， 有機溶劑殘留，有泄漏、沉淀、凝聚、磷脂腐敗等質量問題；3、現有脂質體制備方法使脂質體藥物載體的包封率不能達100%，各批次波動、變化大；泄漏率大，失去脂質體藥物意義；4、生產過程折騰多，耗能費時，設備投資大，處方、工藝不穩(wěn)靠、不成熟，導致制劑質量不可控、不穩(wěn)定、重現性差；5、滅菌、除熱原方法不當，全程無菌、無熱原操作難以保障，對脂質體藥物缺乏高度無菌觀念，致使脂質體藥物在細菌侵蝕下腐敗，包封率遞降，泄漏率遞增，有效期極短，幾乎失去藥用價值；6、注射劑不溶解性粒子數及粒徑超標；7、原料藥、磷脂及輔料、溶劑選材大多沒有國家藥品質量標準，有專利也批不了新藥證書及生產批文，注冊難度很大，時間很長；8、脫離中國實情，從開發(fā)到得到脂質體新藥生產批文，花費近10年時間，耗資 2000萬元以上，再好的藥品發(fā)明專利，絕大多企業(yè)不敢投資開發(fā)?？梢?，在國家進行醫(yī)療改革及國家基本藥物制度時期，從已經進入國家基本藥物二代制劑中選銷量大產品提升到第四代的脂質體制劑，進行制劑技術創(chuàng)新，消除其副作用及不良反應，這樣藥品銷量大，投資回收時間短。達到安全、有效、優(yōu)質、經濟這一基本原則
發(fā)明內容
本發(fā)明目的是克服上述現有技術的缺陷。本發(fā)明的主題是用溶解超濾_噴霧干燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍干燥法，以統(tǒng)一的配方、工藝、設備既可大工業(yè)化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業(yè)化生產脂質體藥物口服制劑。提供工業(yè)化生產脂質體組合藥物的規(guī)范配方及規(guī)范制備方法。形成二代藥物制劑創(chuàng)新提升到四代靶向制劑。本發(fā)明是通過以下技術方案實現的 本發(fā)明工業(yè)化生產脂質體組合藥物的規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥0.05-0.202、磷脂原料0. 50-4. 003、抗氧劑0.01-0.064、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑1.00-6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑 2. 00-8. 006、表面活性劑0. 01-0. 057、乙醇彡75%濃度(體積比，乙醇水彡75%，干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 01-0. 05M濃度pH值5. 0-8.0 (干燥時揮發(fā)至盡)適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡) 與注射用磷酸鹽等體積所述原料藥為水溶性強特性，配方劑量是現有二代對應口服或注射劑制劑最小規(guī)格制劑量的三分之一到五分之一。優(yōu)選異環(huán)磷酰胺。所述磷脂原料的平均分子量都定義以800D計算，磷脂原料是氫化大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿的組合物，摩爾數比為1-5 0.5的組合物。所述磷脂的抗氧劑是還原型谷胱甘肽。所述磷脂膜分子態(tài)稀釋劑，又是抗氧劑，是二巰丙醇。所述脂質體載藥體分散劑，又為賦型劑，為木糖醇。
所述表面活性劑是去氫膽酸鈉。脂質體組合藥物的各藥效原料都應有國家標準，并且都是藥用注射劑級的國家標準。既符合國家GMP規(guī)范，又符合國家《藥品注冊管理辦法》的規(guī)定，以利產業(yè)化開發(fā)。本發(fā)明還提供所述組質體組合藥物的規(guī)范制備方法(1)將木糖醇配料量在注射用磷酸鹽緩沖液中溶解成木糖醇的10%的重量百分比溶液，將此溶液在121°C蒸汽滅菌20分鐘，當溶液溫度為20-25°C時，用截留分子量1000D 的超濾膜的超濾柱超濾，除溶液中的熱原及熱原分子片段，取超濾得到的溶液；再在室溫下，等分超濾得到的溶液，分為A、B溶液，將A、B溶液分別用5% -8%的分析純氫氧化鈉溶液調pH值8. 5，將A、B溶液分別經0. 05 μ m以下孔徑的膜濾過，除去不溶性粒子、高價金屬離子、金屬離子的沉淀物，再將A、B溶液分別用8%的分析純的鹽酸溶液調pH值為 5. 0-8. 0 ；水溶性強的原料藥異環(huán)磷酰胺用適量注射用水溶解完全，用截留分子量1000D的膜超濾，除熱原，所得超濾溶液合并到B溶液中攪拌均勻，再經0. 05 μ m孔徑以下膜濾過，除去原料藥溶液中菌、不溶性粒子；原料藥液要求檢驗熱原及不溶性粒子合格才能允許加入 B溶液中；(2)將A溶液在制備藥用注射劑級的噴霧干燥機中，按噴霧干燥常法，A溶液由設備頂部的噴霧噴咀中與潔凈度100級壓縮空氣(由壓縮機來，室溫)混合噴出，與設備底部進入的溫度150°c -190°c 100級潔凈空氣(由引風機引來，高溫)氣液逆流混合，噴霧干燥成120-150目左右多孔粒子干粉；干燥完畢，干燥物料存放在此設備底部備用；(3)分別加 入脂溶性的磷脂、磷脂分散劑到乙醇中攪拌溶解完全，制成比重在1. 0 至1. 2的溶液，經過截留分子量1000D的膜超濾，再經0. 05 μ m以下孔徑膜濾過，除去熱原、 細菌、不溶性粒子；(4)將第(2)步制備的A溶液的組合物干燥顆粒，放到沸騰包衣機中，按沸騰包衣及沸騰干燥常法操作，先將第(3)步制備的磷脂乙醇溶液等體積分三份；在設備底部改為弓丨入無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的室溫純氮氣流，在40°C -65°C溫度下， 對第2步制得的木糖干燥物粒子進行沸騰流化狀態(tài)下包衣先將第一份的(三分之一體積的)磷脂乙醇溶液，由泵輸送到設備中部的包衣噴咀中與經壓縮的潔凈級別為100級純氮氣混合，呈噴霧狀噴到機中沸騰高度為400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集處，在沸騰物料粒子表面包衣，沸騰下的物料同時高度均勻地混和及分散，并極快地使溶劑揮發(fā)，形成多孔固體包衣薄層，第一個三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸騰干燥15分鐘，再將第一步制備的B溶液也等分三份，將第一份B溶液的體積的三分之一溶液在無水、無菌、 無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的100級純氮氣流中，按上述操作包衣，包衣后，沸騰干燥20分鐘，這樣進行了第一次包衣_干燥操作；重復上述包衣_干燥操作，分別進行第二、 第三次兩種溶液的第二份、第三份的三分之一體積的溶液按上述操作，進行磷脂液與B溶液的交替包衣-干燥操作，最外層包衣層是溶于水的原料藥、木糖醇的組合物的微孔干燥物層，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中殘留水份< 1.0%，殘留的二巰丙醇<0.2% ； 注意，水溶性的原料藥，則是原料藥及木糖醇在B溶液中對A溶液的干燥顆粒三次包衣；(5)在配料罐中加入與第一步用的注射用磷酸鹽溶液等體積的注射用水，在罐內充氮氣與罐外壓持平，100轉/分鐘攪拌速度下，加熱至60士5°C;調攪拌轉速為500-700轉 /分鐘，在罐內充氮氣下，在30分鐘至60分鐘內把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐中；加完包衣干燥物后，在罐內充氮氣環(huán)境下，保持溫度60士5°C，并在100轉/分鐘攪拌下保持60-120分鐘；再在100轉/分鐘攪拌下，把罐內藥液冷卻到30-40°C;再在100轉/分鐘攪拌下，分別加入抗氧劑谷胱甘肽及去氫膽酸鈉溶解完全，并調整藥液PH值5. 0-8. 0 ；(6)在保藥液持溫度在30士5°C范圍內，在0. 1-0. 2Mpa氮氣壓下，用0. 15μπι膜濾過第5步制得的藥液，取濾過的藥液，得到粒徑小于150nm的脂質體藥液，按藥劑學允許該藥品的劑量分裝脂質體藥液到西林瓶中，并半加塞，在冷凍干燥機組的冷凍干燥箱中常法冷凍干燥；至藥品固體殘留水分為小于2%，二巰丙醇殘留量為小于0. 2% ；真空壓塞，軋蓋，檢驗合格后進庫；制成脂質體載藥體的納米粒徑的凍干針劑；此凍干針劑還可配成無菌噴霧劑；(7)在100級無菌級別下，將第6步濾過的濾膜上截留的大于150nm的脂質藥物顆粒洗到10%的按第1步操作、滅菌、除熱原新制備(這新制備定義10%的木糖醇溶液是磷酸鹽緩沖液作溶劑，木醇量和磷酸鹽液量都應依大于150nm粒徑的脂質體藥物量而定， 是新增加的、超過配方中的量)的10%木糖醇溶液中，測定藥液中總磷脂原料的含量，并用滅菌除熱原合格新制備的10%木糖醇溶液調整藥液體積，達到控制藥液中總磷脂含量在 40-80mg/ml ；把這藥液加入到另一配料灌中，沖氮氣下，100轉/分鐘攪拌速度，30-60分鐘內加熱到50士5°C，保持這溫度范圍攪拌60-120分鐘；再保持沖氮氣下，100轉/分鐘轉速， 冷卻藥液至20-25°C，把藥液分裝到316L的不銹鋼托盤中，放到另一臺凍干機組的冷凍干燥箱中，常法冷凍干燥，至藥物固體中水分含量小于2% ；二巰丙醇殘留量為小于0.2% ；得到脂質體藥物固體，把脂質體藥物固體在100級無菌級別下，粉碎至80-100目，按藥劑學允許的劑量，常法制成該藥的無菌腸溶口服制劑，無菌拴劑；

(8)所有操作都應嚴格按照國家GMP規(guī)范中注射劑無菌要求進行，口服制劑也得按注射劑無菌要求進行。本發(fā)明的脂質體藥物，無菌凍干針劑在使用時，當西林瓶內用輸液水化溶解時，磷脂分散劑把脂質體載藥體迅速分散，并在木糖醇液表面張力及表面活性劑作用下，形成粒徑50nm-150nm范圍單室納米粒徑的脂質體載藥粒子均勻分散體系；口服制劑在腸內形成 150-1000nm粒徑粒子，包封率都在100%，脂質體載藥體分散在輸液中6小時內泄漏率5% 以下，不沉淀、不凝聚、不分層，分散均勻，本發(fā)明的藥物口服后在胃腸道液中分散組成單室及多室混合脂質體藥物，提高藥物的治療指數。本發(fā)明的優(yōu)勢有1、溶解超濾_噴霧干燥_分子分散包衣_水化制粒_冷凍干燥生產脂質體組合藥物，以統(tǒng)一的配方、工藝、設備既可大工業(yè)化生產脂質體藥物注射劑，又可大工業(yè)化生產脂質體藥物口服制劑。2、用二代制劑的設備創(chuàng)新及二代制劑工藝的創(chuàng)新組合制備四代靶向制劑，使神秘的脂質體藥物從實驗室實施工業(yè)化穩(wěn)定生產。開拓了脂質體組合藥物的規(guī)范配方、規(guī)范制備方法，而且是注射劑、口服制劑、其它給藥途徑制劑有統(tǒng)一的核心配方及制備方法，在廉價設備內生產，極大地節(jié)省廠房、設備、人力、時間、能源，也可實現三廢零排放。3、本發(fā)明重在理念創(chuàng)新帶來創(chuàng)新技術突破以安全、有效、優(yōu)質、經濟這一基本原貝U，對發(fā)明藥品從選料開始、到制備過程、到使用最終脂質體藥物分散到輸液中全程對藥品的無菌、熱原、粒徑、粒徑分布、包封率、泄漏率、腐敗率、沉降速率、凝聚率、有效期等等都是高要求地、完善地符合這一基本原則，使本發(fā)明藥品產業(yè)化開發(fā)上市風險小。4、本發(fā)明中的藥品核心技術有磷脂原料摩爾數投入量突破現有技術用量，是現有技術用量的5倍，是原料藥的10倍，并且原料藥是選脂溶性或水溶性強于分散劑木糖醇的藥物，磷脂對藥物的包封率大大地大于對木糖醇的包封率，包封率達100% ；同時磷脂原料用量大，存在大量空白脂質體，在體內空白脂質體被巨噬細胞吞噬，使載藥脂質體少被吞噬，療效更高；表面活性劑溶于脂質體磷脂膜層中，對脂質體雙分子層起“封堵”，加固作用， 這因為脂質體表面活性劑是鈉鹽，當溶解生理鹽水及葡萄糖等PH值小于6輸液中，部分其鈉鹽變成不溶于水的酸分子，而進入磷脂雙分子層中，代替膽固醇也起“封堵”、加固脂質體粒子作用，使泄漏率非常小，表面活性劑還有抗脂質體在輸液中的沉淀、凝聚作用，還有加強脂質體分散成均勻的脂質體輸液作用；由于加入磷脂膜分散劑二巰丙醇，在包衣干燥時， 使磷脂膜呈分子態(tài)的微孔固態(tài)分散體，比高壓撞擊破碎的磷脂原料粒子小千萬倍，在包衣時木糖醇取代揮發(fā)的二巰丙醇位置，組成磷脂與木糖醇分子態(tài)微孔固體分散體系，使木糖醇成為脂質體的分散劑；本研究發(fā)現，木糖醇也和甘露醇樣具有保護脂質體載藥體在冷凍干燥時不被小冰渣破壞的保護作用，但甘露醇在靜脈滴注時對血管有刺激作用；二巰丙醇在包衣時抗氧化作用，保護谷胱甘肽、磷脂、原料藥不被氧化，使谷胱甘肽在體內起抗氧化及抗過氧化組用，并保護肝臟不受藥物損害；磷脂材料本研究發(fā)現，氫化大豆卵磷脂這飽和磷脂和多烯磷脂酰膽堿組合物制成脂質體穩(wěn)定、泄漏率低，磷脂對人體無抗原及對肝臟無損害；本發(fā)明的脂質體凍干針劑是制成了脂質體均勻分散體系再冷凍干燥，在重新水化時， 保持脂質體物理及化學性質不變。5、由于上述作用本發(fā)明藥物在輸液中的粒徑、粒徑分布不變，包封率100%、泄漏率< 5%、腐敗率為0%、沉降率為0%、凝聚率為0%，消除了脂質體藥物冰箱儲運、含量及包封率遞降、泄漏率遞升，有效期短于原料藥的四大世界性難題。令人滿意地成為優(yōu)良的可實用的四代制劑。6、本發(fā)明制備的脂質體藥物，磷脂膜中磷脂是以分子狀態(tài)成固態(tài)溶液分散于磷脂膜吸釋劑及表面活性劑中，且比超聲波法、高壓均勻質破碎磷脂粒子要小千萬倍；在噴霧包衣-干燥中溶劑及二巰丙醇的揮發(fā)使磷脂膜層形成無數微小孔層，這比冷凍干燥法形成網狀結構比表面積要大得多，因為凍干過程中固體中水分子升華揮發(fā)路程比包衣層路程長千萬倍，使網狀結構溶解凝結；又由于磷脂膜層和木糖醇層是磷脂膜分散劑層，在水化時迅速、高度分散磷脂。這三種優(yōu)勢，比現有技術形成的脂質體粒子粒徑更穩(wěn)定、更重現性好地形成納米粒徑范圍，且粒徑呈正態(tài)分布。7、本發(fā)明組合藥物由于選的磷脂是天然磷脂，是人體及微生物細胞膜組成物質， 對病菌、病毒細胞、腫瘤細胞及血管壁破壞處有更好靶向釋藥功能，治療指數高，所以原料藥用量僅是二代藥物的三分之一至五分之一，加上磷脂的包封，原料藥的不良反應幾乎沒有了。原料藥的用量減少，加大磷脂用量，確保包封率達100%，并有“封堵”加固脂質體作用的表面活性劑，所以泄漏率為零。8、本發(fā)明組合藥物的磷脂膜分散劑又是磷脂膜包衣的支撐劑。又是與表面活性劑共同控制前脂質體水化時脂質體粒子大小的物質，它們是由在水溶液中形成一定范圍的表面張力作用所致。木糖醇可對糖尿病、肝病患者供給能量，是理想的磷脂膜分散劑及賦型劑。9、本發(fā)明的組合藥物的磷脂膜稀釋劑，由既溶于乙醇又溶于水，在噴霧干燥時揮發(fā)，形成磷脂膜成分子態(tài)固體分散體系的微孔磷脂膜層，在水化時磷脂膜中磷脂是以分子態(tài)破碎程度并和表面分散劑把磷脂分散到水中，形成均勻的納米粒脂質體載藥體，其中的二巰丙醇又是優(yōu)良的脂質體的抗氧劑，在包衣時保護磷脂及藥物。10、本發(fā)明的組合藥物的表面活性劑作用第一是在磷脂水化時把磷脂分散到水中，第二在進入PH值4. 0-6. 0的輸液中，它又由鈉鹽酸化為分子結構有機酸，又進入脂質體雙分脂層中，起到脂質體“封堵”加固作用，第三在脂質體表面起表面活性劑作用。11、本發(fā)明能使脂質體藥物有效期達一年，采用四個有效措施一是加了抗氧劑， 保護磷脂膜及原料藥不氧化；二是在磷脂分散劑包衣層在磷脂膜包衣層外面，包護磷脂膜層；三是口服制劑也是按注射劑選材、滅菌及無菌操作，消除細菌對磷脂的腐敗分解，這是所有現有脂質體口服制劑乃至注射劑技術重大失誤的地方；四是在脂質體分散于輸液中， 有0. 2%的二巰丙醇絡合輸液中金屬離子，使輸液中帶來的金屬離子不會破壞磷脂及脂質體載藥體，在維生素C-谷胱甘肽-二巰丙醇組合抗氧劑、在脂質體表面活性劑、分散劑共同作用下不泄漏、不沉淀、不分層、不凝聚、不氧化、不腐敗，從而使脂質體載約體真正過了有實際使用價值難關。脂質體載藥體分散在輸液中，由于脂質體本身缺陷及輸液的作用下，使脂質體組合藥物產生質變，也是本發(fā)明彌補現有技術的重大失誤之處。
12、本發(fā)明的脂質體藥物在制備過程中，磷脂液及磷脂分散劑液都經過0.05 μ m 孔徑以下的膜濾過(通常注射劑制備都是經0. 22 μ m膜濾過)，使不溶解性粒子粒徑降至允許值的四分之一，使脂質體水化后粒徑50nm至150nm粒子全為脂質體粒子?？删_測定脂質體載藥體的粒徑及粒徑分布。這也是本發(fā)明彌補現有技術重大失誤的地方。
具體實施例方式
實施例1
原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
1、原料藥是異環(huán)磷酰胺鈉0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物0. 50
3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇1. 00
5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量
8、注射用磷酸鹽緩沖液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量
9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備方法如前所
實施例2原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
1、原料藥是異環(huán)磷酰胺鈉0. 20
2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿
摩爾數1 0. 1的組合物4. 00
3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0. 06
4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇6. 00
5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇8. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 05
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量
8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量
9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷麵!鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同
實施例3
原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
1、原料藥是異環(huán)磷酰胺鈉0. 16
2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物3. 06
3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0. 04
4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇5. 705、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇6. 766、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 047、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。實施例4原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是異環(huán)磷酰胺鈉0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物4. 003、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.014、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.057、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。實施例5原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是異環(huán)磷酰胺鈉0.202、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物0.503、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.064、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇1.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇8. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.017、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。實施例6原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是10-羥基喜樹堿0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物0.503、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.010122]4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇1.00
0123]5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2.00
0124]6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.01
0125]7、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。實施例7原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下1、原料藥是10-羥基喜樹堿0.202、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物4.003、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.064、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇6.005、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇 8. 006、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.057、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。實施例8原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
0143]1、原料藥是10-羥基喜樹堿0.13
0144]2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿
0145]摩爾數1 0. 1的組合物3.32
0146]3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.05
0147]4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇5.61
0148]5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇6. 33
0149]6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0.03
0150]7、乙醇80% (ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量
0151]8、注射用磷酸鹽緩沖液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量
0152]9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積
0153]本實施例的規(guī)范制備步驟及方法同前所述。
0154]實施例9
0155]原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
0156]1、原料藥是10-羥基喜樹堿0.05
0157]2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿
0158]摩爾數1 0. 1的組合物4.00
0159]3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0.014、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇6. 00
5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇2. 00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 05
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量
8、注射用磷酸鹽緩沖液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0 適量
9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。
實施例10
原料藥是水溶性強的脂質體組合藥物規(guī)范的各藥效原料摩爾數比如下
1、原料藥是10-羥基喜樹堿0. 20
2、磷脂原料是大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿摩爾數1 0. 1的組合物0. 50
3、抗氧劑是還原型谷胱甘肽0. 06
4、磷脂膜分子態(tài)稀釋劑是二巰丙醇1. 00
5、脂質體載藥體分散劑及賦形劑是木糖醇8.00
6、表面活性劑是去氫膽酸鈉0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥時揮發(fā)至盡)適量
8、注射用磷酸鹽緩沖液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0適量
9、注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽緩沖液等體積制備步驟及方法同前面所述。
技術經濟及質量指標對比
本發(fā)明方法勻質冷凍干燥法流化床包衣法 1、可制劑型口服、注射劑注射劑、口服口服脂質體脂質體載藥體脂質體載藥體載藥體 2、IOOkg/ 批脂
質體設備投資 1600萬元 2600萬元 1200萬元
3、工時24小時/批 48小時/批 8小時/批
4、無菌率100% 90%有限菌落
5、熱原彡 50EU/ml 彡 100EU/ml 彡 300EU/100mg 100% 80% -90% 80% -90%
7、泄漏率^ 20% ^ 20%
8、粒徑nm彡150 彡200 彡2000
0160] 0161] 0162]
0163]
0164]
0165]
0166]
0167]
0168]
0169]
0170]
0171]
0172]
0173]
0174]
0175]
0176]
0177]
0178]
0179]
0180] 0181] 0182]
0183]
0184]
0185]
0186]
0187]
0188]
0189]6、包封率
0190]
0191]
0192]9、產生雜質 3%-5% 10% -20% 5% -10%
0193]結論本發(fā)明技術制備脂質體載藥體與現有勻質冷凍干燥法、流化床包衣法技術制脂質體載藥體相比，本發(fā)明技術經濟及主要質量指標都優(yōu)越于勻質冷凍干燥法，質量指標都優(yōu)于流化床包衣法。藥效學驗證試驗抗腫瘤藥物藥效學試驗選大鼠種瘤模型瓦克癌肉瘤(W256)型。體重50_70g，每組動物10只。設陰性對照組和陽性對照組。陰性對照組注射生理鹽水，陽性對照組采用現售紫杉醇藥品。每天 1次給藥，治療時間15天。停藥24小時后處死動物，解剖剝離瘤塊，稱瘤重，。計算療效評價公式為腫瘤抑制率(C-T)/CX 100%當抑制率大于30%，有效。
項目腫瘤抑制率 %備注現售紫杉醇注射劑50mg/kg腹腔注射70實施例1-5實施例異環(huán)磷酰胺脂質體凍干針劑100mg/kg腹腔注射 · ·75實施例6-10羥基喜樹堿脂質體凍干針劑8mg/kg腹腔注射78實施例1-5實施例異環(huán)磷酰胺脂質體腸溶片120mg/kg 口服8權利要求
1.異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物，其特征是，本發(fā)明的異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物的各藥效原料摩爾數比如下原料藥O. 05 — 0.20磷脂原料0. 50-4. 00抗氧劑0. 01-0. 06磷脂膜分子態(tài)稀釋劑1. 00-6. 00脂質體載藥體分散劑及賦形劑2. 00-8. 00表面活性劑0. 01-0. 05乙醇^ 75%濃度(體積比，乙醇水彡75%，干燥時揮發(fā)至盡)適量注射用磷酸鹽緩沖液0. 01-0. 05M濃度PH值5. 0-8. O (干燥時揮發(fā)至盡)適量注射用水(干燥時揮發(fā)至盡)與注射用磷酸鹽等體積所述原料藥為水溶性強特性，配方劑量是現有二代對應口服或注射劑制劑最小規(guī)格制劑量的三分之一到五分之一；優(yōu)選異環(huán)磷酰胺；所述磷脂原料的平均分子量都定義以800D計算，磷脂原料是氫化大豆卵磷脂與多烯磷脂酰膽堿的組合物，摩爾數比為1-5 0.5的組合物； 所述磷脂的抗氧劑是還原型谷胱甘肽； 所述磷脂膜分子態(tài)稀釋劑，又是抗氧劑，是二巰丙醇； 所述脂質體載藥體分散劑，又為賦型劑，為木糖醇； 所述表面活性劑是去氫膽酸鈉；脂質體組合藥物的各藥效原料都應有國家標準，并且都是藥用注射劑級的國家標準； 既符合國家GMP規(guī)范，又符合國家《藥品注冊管理辦法》的規(guī)定，以利產業(yè)化開發(fā)； 本發(fā)明還提供所述組質體組合藥物的規(guī)范制備方法(1)將木糖醇配料量在注射用磷酸鹽緩沖液中溶解成木糖醇的10%的重量百分比溶液，將此溶液在121°C蒸汽滅菌20分鐘，當溶液溫度為20-25°C時，用截留分子量IOOOD的超濾膜的超濾柱超濾，除溶液中的熱原及熱原分子片段，取超濾得到的溶液；再在室溫下 ， 等分超濾得到的溶液，分為A、B溶液，將A、B溶液分別用5% -8%的分析純氫氧化鈉溶液調 pH值8. 5，將A、B溶液分別經0. 05 μ m以下孔徑的膜濾過，除去不溶性粒子、高價金屬離子、 金屬離子的沉淀物，再將A、B溶液分別用8%的分析純的鹽酸溶液調pH值為5. 0-8. O ；水溶性強的原料藥異環(huán)磷酰胺用適量注射用水溶解完全，用截留分子量IOOOD的膜超濾，除熱原，所得超濾溶液合并到B溶液中攪拌均勻，再經0. 05 μ m孔徑以下膜濾過，除去原料藥溶液中菌、不溶性粒子；原料藥液要求檢驗熱原及不溶性粒子合格才能允許加入B溶液中；(2)將A溶液在制備藥用注射劑級的噴霧干燥機中，按噴霧干燥常法，A溶液由設備頂部的噴霧噴咀中與潔凈度IOO級壓縮空氣(由壓縮機來，室溫)混合噴出，與設備底部進入的溫度150°C -190°C 100級潔凈空氣(由引風機引來，高溫)氣液逆流混合，噴霧干燥成 120-150目左右多孔粒子干粉；干燥完畢，干燥物料存放在此設備底部備用； (3)分別加入脂溶性的磷脂、磷脂分散劑到乙醇中攪拌溶解完全，制成比重在1.0至 1. 2的溶液，經過截留分子量1000D的膜超濾，再經0. 05 μ m以下孔徑膜濾過，除去熱原、細菌、不溶性粒子；(4)將第(2)步制備的A溶液的組合物干燥顆粒，放到沸騰包衣機中，按沸騰包衣及沸騰干燥常法操作，先將第(3)步制備的磷脂乙醇溶液等體積分三份；在設備底部改為引入無水、無菌、無油、無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的室溫純氮氣流，在40°C -65°C溫度下，對第 (2)步制得的木糖干燥物粒子進行沸騰流化狀態(tài)下包衣先將第一份的(三分之一體積的) 磷脂乙醇溶液，由泵輸送到設備中部的包衣噴咀中與經壓縮的潔凈級別為100級純氮氣混合，呈噴霧狀噴到機中沸騰高度為400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集處，在沸騰物料粒子表面包衣，沸騰下的物料同時高度均勻地混和及分散，并極快地使溶劑揮發(fā)，形成多孔固體包衣薄層，第一個三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸騰干燥15分鐘，再將第一步制備的B溶液也等分三份，將第一份B溶液的體積的三分之一溶液在無水、無菌、無油、 無0. 001 μ m以上粒徑的粒子的100級純氮氣流中，按上述操作包衣，包衣后，沸騰干燥20 分鐘，這樣進行了第一次包衣-干燥操作；重復上述包衣-干燥操作，分別進行第二、第三次兩種溶液的第二份、第三份的三分之一體積的溶液按上述操作，進行磷脂液與B溶液的交替包衣-干燥操作，最外層包衣層是溶于水的原料藥、木糖醇的組合物的微孔干燥物層，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中殘留水份< 1.0%，殘留的二巰丙醇<0.2% ；注意，水溶性的原料藥，則是原料藥及木糖醇在B溶液中對A溶液的干燥顆粒三次包衣；(5)在配料罐中加入與第一步用的注射用磷酸鹽溶液等體積的注射用水，在罐內充氮氣與罐外壓持平，100轉/分鐘攪拌速度下，加熱至60士5°C;調攪拌轉速為500-700轉/分鐘，在罐內充氮氣下，在30分鐘至60分鐘內把第(4)步制得的包衣干燥物加入到配料罐中；加完包衣干燥物后，在罐內充氮氣環(huán)境下，保持溫度60 士 5°C，并在100轉/分鐘攪拌下保持60-120分鐘；再在100轉/分鐘攪拌下，把罐內藥液冷卻到30-40°C;再在100轉/分鐘攪拌下，分別加入抗氧劑谷胱甘肽及去氫膽酸鈉溶解完全，并調整藥液PH值5. 0-8. 0 ；(6)在保藥液持溫度在30士5°C范圍內，在0.1-0. 2Mpa氮氣壓下，用0. 15 μ m膜濾過第 (5)步制得的藥液，取濾過的藥液，得到粒徑小于150nm的脂質體藥液，按藥劑學允許該藥品的劑量分裝脂質體藥液到西林瓶中，并半加塞，在冷凍干燥機組的冷凍干燥箱中常法冷凍干燥；至藥品固體殘留水分為小于2%，二巰丙醇殘留量為小于0.2% ；真空壓塞，軋蓋， 檢驗合格后進庫；制成脂質體載藥體的納米粒徑的凍干針劑；此凍干針劑還可配成無菌噴霧劑；(7)在100級無菌級別下，將第(6)步濾過的濾膜上截留的大于150nm的脂質藥物顆粒洗到10%的按第1步操作、滅菌、除熱原新制備(這新制備定義10%的木糖醇溶液是磷酸鹽緩沖液作溶劑，木醇量和磷酸鹽液量都應依大于150nm粒徑的脂質體藥物量而定， 是新增加的、超過配方中的量)的10%木糖醇溶液中，測定藥液中總磷脂原料的含量，并用滅菌除熱原合格新制備的10%木糖醇溶液調整藥液體積，達到控制藥液中總磷脂含量在 40-80mg/ml ；把這藥液加入到另一配料灌中，沖氮氣下，100轉/分鐘攪拌速度，30-60分鐘內加熱到50士5°C，保持這溫度范圍攪拌60-120分鐘；再保持沖氮氣下，100轉/分鐘轉速，冷卻藥液至20-25°C，把藥液分裝到316L的不銹鋼托盤中，放到另一臺凍干機組的冷凍干燥箱中，常法冷凍干燥，至藥物固體中水分含量小于2% ；二巰丙醇殘留量為小于0.2% ；得到脂質體藥物固體，把脂質體藥物固體在100級無菌級別下，粉碎至80-100目，按藥劑學允許的劑量，常法制成該藥的無菌腸溶口服制劑，無菌拴劑；(8)所有操作都應嚴格按照國家GMP規(guī)范中注射劑無菌要求進行，口服制劑也得按注射劑無菌要求進行。
2.依權利要求1所述的異環(huán)磷酰胺的脂質體組合藥物，其特征是，按藥劑學允許的劑量，制成異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物的凍干針劑，或口服制劑，或再按常法配制成栓劑、或再按常發(fā)配制成噴霧劑。
3.依權利要求1所述的異環(huán)磷酰胺的脂質體組合藥物，其特征是，異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物的用途是用于抗腫瘤。
全文摘要
本發(fā)明一種異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物，其特征是，公開本發(fā)明的異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥的各組份原料摩爾數比；本發(fā)明還提供所述組質體組合藥物的大工業(yè)化制備方法；其特征是，按藥劑學允許的劑量，制成異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物的凍干針劑，或口服制劑、或噴霧劑、或栓劑；所述的異環(huán)磷酰胺脂質體組合藥物，其特征是，其用途為用于抗腫瘤。
文檔編號A61K9/12GK102218037SQ201110154129
公開日2011年10月19日 申請日期2011年6月10日 優(yōu)先權日2010年7月29日
發(fā)明者劉會梅, 張連印, 王秀麗, 蔡海德, 鄧學峰 申請人:鄧學峰