專利名稱：靜脈注射用aca亞微乳劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗癌藥物靜脈注射用ACA亞微乳劑的制備方法及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立和體內(nèi)外抗腫瘤作用。
背景技術(shù)：
1，-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(1，-Acetoxychavicol acetate，ACA)是一種從姜科植物大高良姜的根莖中提取分離而得到的小分子化合物。是一種具有獨特辛辣感覺的物質(zhì)， 有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、治療胃潰瘍、抗菌和抗艾滋病毒等生物活性。ACA作為一種食品添加劑，最近已經(jīng)被應(yīng)用在飲食和護(hù)理品行業(yè)中。因此，具有很高的藥用價值，但是它在水溶液中不能穩(wěn)定存在，會發(fā)生水解和異構(gòu)化反應(yīng)，使其應(yīng)用受到限制。國內(nèi)對ACA研究僅見少數(shù)有關(guān)其提取及結(jié)構(gòu)確證、活性初篩、以及抗艾滋病作用方面的研究報道，鮮有體內(nèi)外抗腫瘤作用的研究報道。國外研究中，Ito K等發(fā)現(xiàn)， ACA通過Caspase-8活化、NF-κ B失活和下調(diào)抗凋亡蛋白誘導(dǎo)相關(guān)的凋亡，顯著抑制體內(nèi)和體外多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的生長(Ito K, NakazatoT, MurakamiA, etal. Induction of apoptosis in human myeloid leukemic cells by 1 ' -acetoxychavicol acetate through a mitochondrial and Fas-mediated dual mechanism[J]. Clin CancerRes, 2004，10 (6): 2120-2130)。Cheryl T. Campbell 等研究發(fā)現(xiàn) ACA 體外誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡，然抗氧化劑可阻斷ACA誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，由此提示ACA具有以細(xì)胞凋亡通路為分子靶點的抗腫瘤作用(Cheryl T Campbell, Misty Prince, Greg M Landry, etal. Pro-apoptotic effects of 1 ' -acetoxychavicol acetate in human breast carcinoma cells [J], Toxicology Letters, 2007，3 (28) : 151-160)。ACA 對多種腫瘤的增殖和生長有明顯的抑制作用，具有廣譜抗腫瘤效果且沒有明顯的副作用。但其在水溶液中不穩(wěn)定， 易發(fā)生水解和異構(gòu)化反應(yīng)生成另外三種產(chǎn)物，導(dǎo)致療效下降，因而限制了它的使用。ACA的制劑尤其是其靜脈用亞微乳劑及抗腫瘤作用的研究國內(nèi)外尚無任何報道。亞微乳作為一種新型藥物傳遞系統(tǒng)，具有保護(hù)脂溶性藥物、提高藥物穩(wěn)定性、延長藥物作用時間、靶向性好、副作用少等特點，具有較好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有的ACA水溶液不穩(wěn)定，限制其制劑發(fā)展的問題，提供一種新的靜脈注射用ACA亞微乳劑，該亞微乳劑可直接用于靜脈注射，具有良好的藥物穩(wěn)定性及器官靶向性和緩控釋特性。提供一種靜脈注射用ACA亞微乳劑及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的
本發(fā)明的靜脈注射用ACA亞微乳劑，每毫升亞微乳中含有ACA 0. 8^5. 5mg，注射用植物油5(T250mg,乳化劑8 2%ig，助乳化劑l(T30mg，穩(wěn)定劑0^3mg,維生素Elmg,甘油22. 5mg， 無水乙醇0. 8-2mL。
本發(fā)明的亞微乳分散相的平均粒徑為16(Tl80nm。所述注射用植物油為選自大豆油、蓖麻油、茶油、麻油、紅花油、棉籽油、橄欖油中的一種或多種的組合。所述的乳化劑選自蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、氫化大豆磷脂、合成磷脂中的一種或多種的組合。所述的助乳化劑選自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯、膽固醇、殼聚糖中的一種或多種組合。所述的穩(wěn)定劑為油酸或油酸鈉或它們的混合物。本發(fā)明的的靜脈注射用ACA亞微乳劑的制備方法，該方法包括以下步驟
①油相的制備按處方量稱取ACA、乳化劑、穩(wěn)定劑、維生素E以及必要的注射用油，用適量的乙醇溶解，混合后在3(T45° C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，加熱到55、5° C，攪拌均勻，制成油相；
②水相的制備在55、5°C條件下，將助乳化劑、甘油加入到注射用水中，攪拌均勻， 制成水相；
、ACA初乳的制備保證在不斷攪拌的前提下，將制得的油相和水相在55、5° C下混合，并快速攪拌，定容，在勻質(zhì)速度600(Tl2000rpm下勻質(zhì)2 15min，制得ACA初乳；
*夂夂乳的制備將初乳經(jīng)探頭超聲乳化或高壓微射乳化，調(diào)節(jié)PH值Γ9，制得ACA終
乳；
Φ終乳經(jīng)過0. 22 μ m微孔濾膜過濾除菌得到靜脈注射用ACA亞微乳劑。步驟(1)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑步驟中，壓力在O.Tlkpa之間，減壓蒸發(fā)的時間控制在0. 5^2h之間。所述探頭超聲乳化步驟中功率為20(T400w，超聲514次；所述高壓微射乳化步驟中，壓力300(Tl8000PSI，勻質(zhì)6 20次。靜脈注射用ACA亞微乳劑在抗腫瘤方面的應(yīng)用。由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供的靜脈注射用ACA亞微乳劑載藥量大、穩(wěn)定性好、可制備成含有不同ACA含量的乳劑；同時建立的ACA含量測定方法靈敏度高、專屬性強(qiáng)，可有效分離ACA及其降解產(chǎn)物；擬定了該藥物制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。該乳劑為血管內(nèi)給藥制劑，與原料藥比較未見毒性的增加，提高了生物利用度，具有明顯的緩釋作用；與原料藥比較體內(nèi)外抗腫瘤作用得到明顯的增強(qiáng)。該乳劑制備工藝簡單易行、質(zhì)量可控，適用于放大制備和工業(yè)化生產(chǎn)。通過上述技術(shù)方案的實施為抗腫瘤創(chuàng)新藥臨床前研究奠定了基礎(chǔ)，也可利用該技術(shù)為其他創(chuàng)新藥研究提供思路。


圖1 ACA亞微乳和ACA原料藥溶液的腫瘤抑制率(％)。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于此。實施例11. 1制備靜脈注射用ACA亞微乳的主要原料
權(quán)利要求
1.一種靜脈注射用ACA亞微乳劑，其特征在于每毫升亞微乳中含有ACA 0. 8^5. 5mg, 注射用植物油5(T250mg，乳化劑8 2%ig，助乳化劑l(T30mg，穩(wěn)定劑Olmg，維生素Elmg，甘油22. 5mg，無水乙醇0. 8-2mL。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靜脈注射用ACA亞微乳，其特征在于亞微乳分散相的平均粒徑160 180nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑，其特征在于所述注射用植物油為選自大豆油、蓖麻油、茶油、麻油、紅花油、棉籽油、橄欖油中的一種或多種的組合。
4.根據(jù)權(quán)利3所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑，其特征在于所述的乳化劑選自蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、氫化大豆磷脂、合成磷脂中的一種或多種的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或4所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑，其特征在于所述的助乳化劑選自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯、膽固醇、殼聚糖中的一種或多種組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靜脈注射用ACA亞微乳，其特征在于所述的穩(wěn)定劑為油酸或油酸鈉或它們的混合物。
7.權(quán)利要求1所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟①油相的制備按處方量稱取ACA、乳化劑、穩(wěn)定劑、維生素E以及必要的注射用油，用適量的乙醇溶解，混合后在3(T45° C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，加熱到55、5° C，攪拌均勻，制成油相；②水相的制備在55、5°C條件下，將助乳化劑、甘油加入到注射用水中，攪拌均勻， 制成水相；③ACA初乳的制備保證在不斷攪拌的前提下，將制得的油相和水相在55、5°C下混合，并快速攪拌，定容，在勻質(zhì)速度600(Tl2000rpm下勻質(zhì)2 15min，制得ACA初乳；④終乳的制備將初乳經(jīng)探頭超聲乳化或高壓微射乳化，調(diào)節(jié)PH值Γ9，制得ACA終乳；⑤終乳經(jīng)過0.22 μ m微孔濾膜過濾除菌得到靜脈注射用ACA亞微乳劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑的制備方法，其特征在于步驟(1) 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑步驟中，壓力在0. rikpa之間，減壓蒸發(fā)的時間控制在0. 5^2h 之間。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑的制備方法，其特征在于所述探頭超聲乳化步驟中功率為20(T400w，超聲514次；所述高壓微射乳化步驟中，壓力 3000 18000PSI，勻質(zhì) 6 20 次。
10.權(quán)利要求1所述的靜脈注射用ACA亞微乳劑在抗腫瘤方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種靜脈注射用ACA亞微乳劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。該亞微乳是用注射用油、乳化劑、助乳化劑、穩(wěn)定劑、抗氧劑、等滲調(diào)節(jié)劑ACA制備的亞微乳。ACA的重量體積濃度范圍為0.8~5.5mg/mL。本亞微乳劑粒徑均勻，平均粒徑為160~180nm。并對其穩(wěn)定性進(jìn)行了考察；擬定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案；對藥物制劑進(jìn)行了與原料藥比較的體內(nèi)外藥效學(xué)研究。本發(fā)明具有制備工藝簡單、載藥量和穩(wěn)定性高、質(zhì)量可控、適合工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。制備的靜脈注射用ACA亞微乳可較好的提高藥物溶解性，與原料藥比較具有明顯的緩控釋和增強(qiáng)的抗腫瘤作用，并未見到毒性作用增加。
文檔編號A61P35/00GK102198096SQ20111014034
公開日2011年9月28日 申請日期2011年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月27日
發(fā)明者何美霞, 華海嬰, 葉啟霞, 姜玉軍, 楊婷, 趙永星, 趙陽 申請人:河南省醫(yī)藥科學(xué)研究院