專利名稱：一種用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于卷煙毒理學(xué)評價及相關(guān)技術(shù)檢測領(lǐng)域，具體涉及一種用靈長目動物構(gòu)建卷煙減害功效的評價方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)中，為了減少吸煙給人類帶來的危害，世界衛(wèi)生組織(WHO)已將“反吸煙”列為二十一世紀(jì)衛(wèi)生領(lǐng)域的三大主要行動目標(biāo)(抗瘧疾、反吸煙和助貧困)之一。在評價吸煙對機體損害時，有必要建立一個合適的吸煙動物模型來研究煙霧所含毒物的損傷機制。目前，用于吸煙染毒試驗的動物主要有嚙齒目(如小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠等)和靈 長目動物如猴子等。肺癌動物模型也多選擇小鼠、大鼠、地鼠、羊和狗等動物，還沒有關(guān)于猿猴等靈長類的報道。從與人類的相似性考慮，采用猴子、猩猩等作為動物模型最好，但是猴子和猩猩等大型靈長類動物數(shù)量少、價格昂貴、遺傳和飼養(yǎng)管理困難。中國樹鼠句(Tupaia Belangeri Chinensis)是中國特有的小型靈長目實驗動物,為低等靈長目動物。中國樹駒其腦重與體重之比為I : 45，與人的I : 40和獼猴的I : 45極為相似。既往研究表明中國樹駒的視上核主部出現(xiàn)OT(催產(chǎn)素，Oxytoc in)能神經(jīng)元的部位在終板血管器頭側(cè)，距第三腦室最前壁約90 y m處，相對于大鼠的視上核終板血管器更前；中國樹斷!的室旁核尾側(cè)部OT能及VP (加壓素,Vasopressin)能神經(jīng)元的分布也比大鼠的要復(fù)雜。同時，中國樹駒視上核和室旁核OT能神經(jīng)元胞體數(shù)目比大鼠的要多得多，說明其OT能神經(jīng)元所接觸的神經(jīng)調(diào)控表面積要比大鼠的精細(xì)，并復(fù)雜得多。而VP能神經(jīng)元胞體比OT能神經(jīng)元的大，與人類的相似，這也是中國樹駒屬于靈長目的一個可能的佐證。因此，這種小型、廉價的靈長目動物已經(jīng)廣泛用于醫(yī)學(xué)研究，包括病毒、神經(jīng)、消化、泌尿、生殖、免疫和社會生物學(xué)方面?，F(xiàn)有技術(shù)中，動物染毒試驗的吸入接觸途徑有兩種，一種是靜式吸入，一種是動式吸入。靜式吸入是將實驗動物置于一個稱為染毒箱的密閉容器內(nèi)，加入一定量的易揮發(fā)的液態(tài)化合物或一定體積的氣態(tài)化合物，在容器內(nèi)形成所需要的受試化合物濃度的空氣環(huán)境，對動物進(jìn)行試驗。動式吸入是將實驗動物置于空氣流動的染毒箱中，染毒箱裝備有新鮮空氣補入與含受試化合物空氣排出的動力系統(tǒng)和隨時補充受試化合物的配氣系統(tǒng)，在動態(tài)環(huán)境下對動物進(jìn)行試驗。卷煙行業(yè)也需要對煙草的毒性進(jìn)行動物試驗，但現(xiàn)有技術(shù)的動式吸入系統(tǒng)不適用于煙草的動物試驗。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，本方法選用中國樹駒作為試驗動物，采用一種特殊設(shè)計的主動吸煙裝置，使受試動物處于模擬抽煙的狀態(tài)，進(jìn)而觀察動物在該狀態(tài)下的情況，測得真實的試驗數(shù)據(jù)，對卷煙有害程度進(jìn)行合理的評價。
本發(fā)明的技術(shù)方案是ー種用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，含有用于動物實驗的主動吸煙裝置，這種裝置是本申請人的另ー實用新型專利，專利號為2008201907603，實用新型名稱為“用于動物實驗的主動吸煙裝置”。本發(fā)明的方法按以下步驟依次進(jìn)行[I]將ー或數(shù)只小型靈長目實驗動物中國樹駒，每日定時置于用于動物實驗的主動吸煙裝置的染毒箱內(nèi)；[2]開啟所述主動吸煙裝置的模擬抽煙系統(tǒng)的真空泵，設(shè)置壓カ為0. 03MPa,自控斷電重啟間隔時間10s，用樣品卷煙和對照卷煙分別對中國樹駒進(jìn)行煙氣暴露試驗，每天每只中國樹駒在煙氣中的暴露劑量為5支煙，中國樹駒在染毒箱內(nèi)主動吸入煙霧時間為15分鐘/只/天，連續(xù)暴露時間為12周；[3]對連續(xù)暴露12周的中國樹駒及暴露前的中國樹駒，或以不同的卷煙樣品分別對兩組不同的中國樹駒連續(xù)暴露12周后，進(jìn)行以下測試 (I)生物學(xué)行為測試對中國樹駒的飼料攝入率，體重，口腔粘液分泌中的ー種或數(shù)種進(jìn)行測試；(2)血液、生化、抗氧化指標(biāo)的測試對中國樹駒的血液學(xué)常規(guī)指標(biāo)紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板，血清生物化學(xué)指標(biāo)天門冬氨酸轉(zhuǎn)換酶，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶，堿性磷酸酶，總蛋白，白蛋白，總膽固醇，總膽紅素，血糖，尿素氮，肌酐，及球蛋白中的ー種或數(shù)種進(jìn)行測試；(3)生物學(xué)標(biāo)志物表達(dá)的測試包括采用以GAPDH為內(nèi)參照，對中國樹駒的相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)相對量進(jìn)行檢測，以中國樹駒GAPDH/CRCX4/MHC-l/TNF-a /MCP mRNA序列設(shè)計引物，分別檢測外周血，肺組織，心肌組織，支氣管組織的相應(yīng)產(chǎn)物的表達(dá)；(4)組織病理學(xué)指標(biāo)測試對中國樹駒組織病理組織學(xué)變化，及發(fā)病例數(shù)，肺間質(zhì)細(xì)胞增生的程度，膀胱和前列腺病理組織學(xué)檢查和測試；[4]將上述測試數(shù)據(jù)用統(tǒng)計方法進(jìn)行計算，將計算結(jié)果與對照樣的數(shù)據(jù)進(jìn)行差異對比，由此對樣品卷煙有害程度進(jìn)行評價。所述小型靈長目實驗動物中國樹斷!為中國樹斷Iz 南漠西亞種。所述的血液、生化、抗氧化指標(biāo)的測試還包括研究分析煙草暴露對于中國樹駒的造血系統(tǒng)的評價。所述的測試采用全自動血氣分析儀和全自動生物化學(xué)分析儀進(jìn)行。所述生物學(xué)標(biāo)志物表達(dá)按以下方法進(jìn)行自中國樹駒股靜脈采集血液I. 2ml置于經(jīng)肝素抗凝的EP管中；取0. 3ml外周血，用紅細(xì)胞裂解液分離有核細(xì)胞，用Trizol溶液處理，提取總RNA ;以總RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA ；PCR反應(yīng)加入2 u I cDNA, 50 U I反應(yīng)體系包含 lOmMTris-HCl，I. 5mM MgCl2, 50mM KCl,pH 8. 3, 200 u M each dNTP, 2 u I SYBR GreenI 突光染料 and IU TaqDNA polymerase (promega)和 0. 4 U M 引物；反應(yīng)條件預(yù)變性 94°C,5min，變性 94°C，30s，退火 57°C，30s，延伸 72°C，30s，共 45 循環(huán)；最后 72°C，延伸 IOmin ;在退火的過程中搜集熒光信號；用GAPDH作內(nèi)參照；反應(yīng)條件預(yù)變性94°C，5min，變性94°C，30s，退火50°C，lmin,延伸72°C，2min,共45個循環(huán)；最后72°C，延伸IOmin ;在退火的過程中搜集熒光信號，于每次擴增的同時設(shè)置無cDNA的陰性對照；反應(yīng)結(jié)束后做PCR產(chǎn)物熔解曲線驗證PCR產(chǎn)物的特異性；用2_A ACt法計算mRNA的表達(dá)量；經(jīng)頸椎脫臼法處死股動脈放血致死中國樹斷!后，取中國樹斷!的左肺葉、支氣管、心臟組織IOOmg,加入Trizol Iml溶液處理，于勻漿器研磨成混懸液，提取總RNA，以總RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA ;其他步驟同N / .刖。所述組織病理學(xué)指標(biāo)測試按以下方法進(jìn)行采用HE染色、圖像采集系統(tǒng)來進(jìn)行；對連續(xù)暴露12周的中國樹駒用頸椎脫白法處死股動脈放血致死后，將其心臟、肺臟、脾臟、肺臟(左葉)、腎臟、腦、胰腺、睪丸、子宮、前列腺組織，置10%中性福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟包埋切片，用HE染色，圖像采集系統(tǒng)來進(jìn)行光鏡下觀察各器官組織病理學(xué)變化。本發(fā)明的統(tǒng)計方法試驗數(shù)據(jù)用X±5D表示。采用spssll. 5軟件，進(jìn)行方差分析。根據(jù)方差分析結(jié)果，分別采取組間比較T檢驗或wilcoxon秩和檢驗。本發(fā)明的優(yōu)點是采用特有的生物學(xué)分類較高的中國樹駒進(jìn)行煙草毒理及減毒機制的評價研究，由于其不僅對于卷煙煙氣產(chǎn)生的毒理作用具有反應(yīng)敏感、操作方便、飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的特點，同時本方法所采用的評價體系較為完善，評價費用較為低廉，評價結(jié)果相對于其他實驗動物更具有比較醫(yī)學(xué)價值，適用于卷煙減害功效的評價。


附圖I是中國樹駒在動物主動吸煙裝置中吸入濃煙的現(xiàn)象示意；附圖2是動物主動吸煙裝置結(jié)構(gòu)示意圖；附圖3是被試中國樹駒在吸煙后的流涎現(xiàn)象示意；附圖4是被試中國樹駒在吸煙后的咳嗽現(xiàn)象示意；附圖5是被試中國樹駒在吸煙后的咳痰現(xiàn)象示意。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
及有關(guān)技術(shù)問題作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。實施例I本實施例是對煙草暴露的中國樹駒，以未進(jìn)行煙草暴露的中國樹駒為對照組，進(jìn)行本發(fā)明方法中的各項測試，結(jié)果如下與未進(jìn)行暴露的中國樹駒比較，煙草暴露后的中國樹駒呼吸頻率明顯低于對照組，每分鐘咳嗽次數(shù)41次到69次之間，其飼料利用率呈出現(xiàn)一過性減少現(xiàn)象；煙霧暴露時，暴露組中國樹駒表現(xiàn)出抑制到興奮的明顯反應(yīng)，8W后出現(xiàn)對煙霧一定程度的成癮性；同時發(fā)現(xiàn)暴露12W后，暴露組中國樹駒有一例出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀，其運動姿態(tài)發(fā)生明顯改變；煙草暴露12W中國樹駒血清SOD含量明顯下降、血清CREA含量明顯升高，血清MDA的含量未見明顯升高；暴露對于中國樹駒外周血CXCR4及TNF-a mRNA的表達(dá)有明顯的影響；同時，其支氣管CXCR4表達(dá)量亦有顯著變化；肺臟組織病理組織學(xué)變化較對照組嚴(yán)重，從發(fā)病例數(shù)、肺間質(zhì)細(xì)胞增生的程度都較對照組有明顯的區(qū)別；膀胱和前列腺暴露組膀胱內(nèi)均出現(xiàn)顆粒狀凝膠分泌物，前列腺病理組織學(xué)檢查證實該分泌物來自前列腺，對照組均未見明顯的顆粒狀凝膠分泌物存在，可見，受試物的刺激作用可能導(dǎo)致前列腺分泌增加，造成膀胱堵塞，進(jìn)一步導(dǎo)致排尿困難其一系列臨床表現(xiàn)。如果試驗時間延長，可能刺激前列腺增生等情況發(fā)生。出現(xiàn)上述結(jié)果可以判定該高等級煙草毒理及減毒研究模型構(gòu)建成功。本發(fā)明的特點是采用特有的生物學(xué)分類較高的中國樹駒進(jìn)行煙草毒理及減毒機制的評價研究，由于其不僅具有對于香煙煙霧產(chǎn)生的毒理作用具有反應(yīng)敏感、操作方便、飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的特點，同時本模型所采用的評級體系較為完善，評價費用較為低廉，評價結(jié)果相對于其他實驗動物更為具有比較醫(yī)學(xué)價值，適用于煙草減毒作用的評價以及可望作為替代猴子等瀕危靈長目實驗動物的新型藥理、毒理學(xué)模型。下表為幾種煙草毒理評價方法的比較。表I、幾種煙草毒理評價方法的比較
特點大鼠小鼠猴樹駒
煙霧暴露所需時間75days75 days未見報道84days
物種分類嗤齒目嗤齒目靈長目靈長目
與人類的親緣性遠(yuǎn)遠(yuǎn)近近 _ 煙霧暴露方式動式染毒，集中動式染毒，集中未見，極其困難動式染毒，單只 行為學(xué)指標(biāo)評價不敏感不敏感未見報道敏感，很接近人的_
表現(xiàn)
基因表達(dá)評價不敏感不敏感未見報道敏感 組織病理評價____敏感__未見報道___實施例2本實施例研究日期為2010年2月到2010年8月。本實施例以靈長目實驗動物中國樹駒為研究對象，對比分析中國樹駒置于動物實驗的主動吸煙裝置的染毒箱內(nèi)，分別以卷煙樣品10號、11號進(jìn)行煙霧暴露后，對于實驗動物中國樹駒的減害作用及其機制。試驗方法本研究采用由SHZ-D(III)循環(huán)水多用真空泵(中國鞏義予華儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn))、電磁流量計、自動合閉裝置組成的動物主動吸煙裝置以0. 05Mpa的真空壓、按照燃燒5支樣品煙/只/天的煙氣量作為暴露劑量，將中國樹駒于密閉主動吸煙裝置內(nèi)，其凈吸入煙霧時間為15mins/d/只。暴露周期為12W。試驗結(jié)果實驗結(jié)果表明與10號樣品比較，11號樣品在暴露過程中的中國樹駒的生物學(xué)反應(yīng)具有明顯的變化。其特征表現(xiàn)如下(I)相對于10號樣品，11號樣品暴露期中國樹駒的咳嗽次數(shù)明顯少于10號樣品組。暴露4W后，10號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為53±8次，而11號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為15±13次/min ；暴露8W后，10號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為53 ± 9次/min，而11號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為18±10次/min ;暴露12W后，10號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為59±9次/min，而11號樣品中國樹駒的咳嗽次數(shù)為21±10次/min。可見11號樣品中添加的天然植物提取成分對于中國樹駒具有較明顯的鎮(zhèn)咳作用。(2)相對于10號樣品，11號樣品暴露期中國樹駒的興奮性持續(xù)時間明顯長，興奮性起始時間明顯快。⑶結(jié)果表明煙霧暴露12W的10號樣品組和11號樣品組中國樹駒血常規(guī)指標(biāo)僅EOS和EOS%有明顯差異(p < 0. 05)。(4)煙霧暴露4W，10號樣暴露組和11號樣暴露組BUN指標(biāo)出現(xiàn)顯著區(qū)別(P < 0. 05)，10號樣暴露組指標(biāo)明顯高于11號樣暴露組，反映出10號樣暴露組動物腎臟功能障礙較突出；煙霧暴露8W，10號樣暴露組和11號樣暴露組生化指標(biāo)無明顯差異；煙霧暴露12WS，10號樣暴露組和11號樣暴露組生化指標(biāo)無明顯差異。(5)煙霧暴露12WS，10號暴露組和11號暴露組動物在氣管的CXCR4和TNF-a表達(dá)量上有差異，其中第11號樣品組中國樹駒的上述兩項因子表達(dá)量明顯高于第10號樣品組；與此同時，第11號樣品組中國樹駒心臟MCP表達(dá)量亦明顯高于第10號樣品組的表達(dá)。(6) 11號樣品和10號樣品暴露12WS后中國樹斷!均出現(xiàn)不同程度支氣管肺炎，并可見支氣管周圍肺泡壞死灶，從壞死波及的范圍、壞死灶的大小來看，10號樣品的病變程度明顯比11號樣品要高。結(jié)論試驗結(jié)果表明相對于無添加天然植物有效成分的10號卷煙樣品，第11號卷煙樣品中添加天然植物有效成分能降低對于靈長目實驗動物中國樹駒因卷煙煙霧暴露所產(chǎn)生的咳嗽頻率，能降低因煙霧暴露所產(chǎn)生的流涎持續(xù)時間，表明有效成分具有顯著的保護(hù)作用，同時，第11號樣品中天然植物有效成分能加速煙霧成分引起中國樹駒的起始性興奮性時間，能有效延長中國樹駒的興奮性維持時間；第11號樣品中天然植物有效成分能顯著性地刺激炎性因子CXCR4以及抗腫瘤因子如TNF- a在外周血以及靶向組織中的表達(dá)。天然植物有效成分對于延緩和減輕卷煙有害物質(zhì) 對于肺組織的病理性損害具有一定的保護(hù)作用。
權(quán)利要求
1.一種用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，含有用于動物實驗的主動吸煙裝置，其特征在于所述的方法按以下步驟依次進(jìn)行 [1]將一或數(shù)只小型靈長目實驗動物中國樹駒，每日定時置于用于動物實驗的主動吸煙裝置的染毒箱內(nèi)； [2]開啟所述主動吸煙裝置的模擬抽煙系統(tǒng)的真空泵，設(shè)置壓力為0.03MPa，自控斷電重啟間隔時間10s，用樣品卷煙和對照卷煙分別對中國樹駒進(jìn)行煙氣暴露試驗，每天每只中國樹駒在煙氣中的暴露劑量為5支煙，中國樹駒在染毒箱內(nèi)主動吸入煙霧時間為15分鐘/只/天，連續(xù)暴露時間為12周； [3]對連續(xù)暴露12周的中國樹駒及暴露前的中國樹駒，或?qū)Σ煌木頍煒悠贩謩e對兩組不同的中國樹駒連續(xù)暴露12周后，進(jìn)行以下測試 (1)生物學(xué)行為測試對中國樹駒的飼料攝入率，體重，口腔粘液分泌中的一種或數(shù)種進(jìn)行測試； (2)血液、生化、抗氧化指標(biāo)的測試對中國樹駒的血液學(xué)常規(guī)指標(biāo)紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板，血清生物化學(xué)指標(biāo)天門冬氨酸轉(zhuǎn)換酶，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶，堿性磷酸酶，總蛋白，白蛋白，總膽固醇，總膽紅素，血糖，尿素氮，肌酐，及球蛋白中的一種或數(shù)種進(jìn)行測試； (3)生物學(xué)標(biāo)志物表達(dá)的測試包括采用以GAPDH為內(nèi)參照，對中國樹駒的相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)相對量進(jìn)行檢測，以中國樹駒GAPDH/CRCX4/MHC-l/TNF-a /MCP mRNA序列設(shè)計引物，分別檢測外周血，肺組織，心肌組織，支氣管組織的相應(yīng)產(chǎn)物的表達(dá)； (4)組織病理學(xué)指標(biāo)測試對中國樹駒組織病理組織學(xué)變化，及發(fā)病例數(shù)，肺間質(zhì)細(xì)胞增生的程度，膀胱和前列腺病理組織學(xué)檢查和測試； [4]將上述測試數(shù)據(jù)用統(tǒng)計方法進(jìn)行計算，將計算結(jié)果與對照樣的數(shù)據(jù)進(jìn)行差異對比，由此對樣品卷煙有害程度進(jìn)行評價。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，其特征在于所述小型靈長目實驗動物中國樹斷!為中國樹斷Iz 南漠西亞種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，其特征在于所述的血液、生化、抗氧化指標(biāo)的測試還包括研究分析煙草暴露對于中國樹駒的造血系統(tǒng)的評價。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，其特征在于所述的測試采用全自動血氣分析儀和全自動生物化學(xué)分析儀進(jìn)行。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，其特征在于所述生物學(xué)標(biāo)志物表達(dá)按以下方法進(jìn)行自中國樹駒股靜脈采集血液I. 2ml置于經(jīng)肝素抗凝的EP管中；取0. 3ml外周血，用紅細(xì)胞裂解液分離有核細(xì)胞，用Trizol溶液處理，提取總RNA ;以總RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA ；PCR反應(yīng)加入2 u I cDNA, 50 U I反應(yīng)體系包含IOmMTris-HCl, I. 5mMMgCl2, 50mM KCl，pH 8. 3, 200 u M each dNTP,2u I SYBR Green I 熒光染料 andlU Taq DNApolymerase (promega)和 0. 4 U M 引物；反應(yīng)條件預(yù)變性 94°C,5min，變性94°C，30s，退火57。。，30s，延伸72°C，30s，共45循環(huán)；最后72。。，延伸IOmin ;在退火的過程中搜集熒光信號；用GAPDH作內(nèi)參照；反應(yīng)條件預(yù)變性94°C，5min,變性94°C，30s,退火50°C，lmin,延伸72°C，2min,共45個循環(huán)；最后72°C，延伸IOmin ;在退火的過程中搜集熒光信號，于每次擴增的同時設(shè)置無cDNA的陰性對照；反應(yīng)結(jié)束后做PCR產(chǎn)物熔解曲線驗證PCR產(chǎn)物的特異性；用2_A ACt法計算mRNA的表達(dá)量；經(jīng)頸椎脫臼法處死股動脈放血致死中國樹g句后，取中國樹g句的左肺葉、支氣管、心臟組織IOOmg,加入Trizol Iml溶液處理，于勻漿器研磨成混懸液，提取總RNA，以總RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA ;其他步驟同前。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，其特征在于所述組織病理學(xué)指標(biāo)測試按以下方法進(jìn)行采用HE染色、圖像采集系統(tǒng)來進(jìn)行；對連續(xù)暴露12周的中國樹駒致死后，將其心臟、肺臟、脾臟、肺臟(左葉)、腎臟、腦、胰腺、睪丸、子宮、前列腺組織，置10%中性福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟包埋切片，用HE染色，圖像采集系統(tǒng)，進(jìn)行光鏡下觀察各器官組織病理學(xué)變化。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用靈長目動物模型評價卷煙有害程度的方法，屬于卷煙毒理學(xué)評價及相關(guān)技術(shù)檢測領(lǐng)域。本方法選用中國樹鼩作為試驗動物，采用一種特殊設(shè)計的主動吸煙裝置，使受試動物處于模擬抽煙的狀態(tài)，進(jìn)而觀察動物在該狀態(tài)下的情況，測得真實的試驗數(shù)據(jù)，對卷煙有害程度進(jìn)行合理的評價。本發(fā)明的優(yōu)點是采用特有的生物學(xué)分類較高的中國樹鼩進(jìn)行煙草毒理及減毒機制的評價研究，由于其不僅對于卷煙煙氣產(chǎn)生的毒理作用具有反應(yīng)敏感、操作方便、飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的特點，同時本方法所采用的評價體系較為完善，評價費用較為低廉，評價結(jié)果相對于其他實驗動物更具有比較醫(yī)學(xué)價值，適用于卷煙減害功效的評價。
文檔編號A61K49/00GK102788874SQ20111012526
公開日2012年11月21日 申請日期2011年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月16日
發(fā)明者吳健鴻, 周順長, 宋旭艷, 曾繁典, 魏敏 申請人:武漢市黃鶴樓科技園有限公司, 湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司