專利名稱：胚胎運(yùn)輸方法及運(yùn)輸裝置的制作方法
胚胎運(yùn)輸方法及運(yùn)輸裝置本發(fā)明涉及胚胎移植技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種應(yīng)用于胚胎移植過程中的胚胎運(yùn)輸方法及運(yùn)輸裝置。胚胎移植又可以稱之為受精卵移植技術(shù)，主要是指將通過各種技術(shù)得到的胚胎 (自然胚胎或者體外受精胚胎或者克隆胚胎)，經(jīng)過手術(shù)，將其移植到同種的受體雌性動(dòng)物體內(nèi)，后期發(fā)育并能得到后代的新技術(shù)。世界上第一例胚胎移植是由英國人W·希普于1890 年完成的，胚胎移植技術(shù)由此創(chuàng)始。自從胚胎移植技術(shù)應(yīng)用于畜牧業(yè)以來，給其帶來了豐厚客觀的效益，例如，在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)大了優(yōu)良種畜群，方便引進(jìn)國外優(yōu)良品種資源等。1997年Dolly的誕生證實(shí)了體細(xì)胞核移植的可能性，同時(shí)也為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的生產(chǎn)提供一種高效的路徑，即是通過轉(zhuǎn)基因與核移植技術(shù)相結(jié)合來生產(chǎn)動(dòng)物，大大的提高了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的陽性率，通過該技術(shù)順利的得到轉(zhuǎn)基因山羊、綿羊、豬、牛、小鼠等動(dòng)物。無論是得到體外受精胚胎還是體細(xì)胞克隆胚胎，無論是在轉(zhuǎn)基因課題，還是克隆技術(shù)中，胚胎移植是其一整套流程中不可或缺的一步，胚胎移植的成否對課題的進(jìn)行有著直接的影響。胚胎的生產(chǎn)主要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，而一般的胚胎移植操作主要在養(yǎng)殖場內(nèi)。由于運(yùn)輸和疾病預(yù)防的需要，養(yǎng)殖場一般選址都是在遠(yuǎn)離市區(qū)，郊區(qū)，個(gè)別的甚至在山區(qū)里， 從實(shí)驗(yàn)室到養(yǎng)殖場有很長的一段路程。因此當(dāng)胚胎生產(chǎn)后到移植前，需要一段時(shí)間的臨時(shí)輸送和保存。因此選擇合適理想的胚胎輸送方法及其裝置，對于胚胎移植后，胚胎在受體動(dòng)物體內(nèi)的發(fā)育以及妊娠率有著至關(guān)重要的作用，進(jìn)而影響著整個(gè)課題項(xiàng)目的順利開展。實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的是一種日本公司生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)輸送器，該設(shè)備能夠調(diào)節(jié)恒溫，且設(shè)置了防震設(shè)施，可以防止運(yùn)輸過程中劇烈的震蕩對胚胎造成的傷害。但是，該細(xì)胞培養(yǎng)輸送器的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，價(jià)格也不菲。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種在胚胎移植過程中模擬胚胎所在母體環(huán)境的胚胎運(yùn)輸方法。本發(fā)明要解決的另外一個(gè)技術(shù)問題是提供一種可模擬胚胎所在母體環(huán)境且取材容易、操作簡便的胚胎運(yùn)輸裝置。對于胚胎運(yùn)輸方法來說，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是其包括以下步驟1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射滅菌，裝胚胎前用已經(jīng)熱平衡的胚胎培養(yǎng)液(PZiO)潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養(yǎng)液，做兩個(gè)氣段，每段液體0. 5cm左右， 第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養(yǎng)液，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運(yùn)輸中有足夠的營養(yǎng)和氣體供給，然后再做第四，五兩個(gè)氣段，每段約 0. 5cm，最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管端口封口 ；
2)先將保溫容器干燥，并用紫外照射消毒，將熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫容器內(nèi)，用電子溫度計(jì)測量保溫容器內(nèi)的水溫為38. 5°C 士0. 2V ；3)放置胚胎將裝有胚胎的麥管插于浮漂中，一并置于保溫容器的溫水中，使得浮漂上的麥管保持直立狀態(tài)，立即合上保溫容器蓋子，交至運(yùn)輸人員；4)胚胎運(yùn)輸將保溫容器置于車內(nèi)或者由坐在車上的運(yùn)輸人員持于手中，運(yùn)輸時(shí)車內(nèi)要避免劇烈的震蕩，護(hù)送至胚胎移植地點(diǎn)；5)胚胎釋放和移植到達(dá)移植目的地，待受體動(dòng)物準(zhǔn)備妥當(dāng)并已經(jīng)找到輸卵管位置，將保溫容器的蓋子打開，將裝載胚胎的麥管取出，拭去麥管周身的水；準(zhǔn)備一無菌的培養(yǎng)皿，在體式顯微鏡下剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養(yǎng)皿內(nèi)；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員完成胚胎移植工作。對于胚胎運(yùn)輸裝置來說，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種胚胎運(yùn)輸裝置，應(yīng)用于胚胎移植過程，包括保溫容器、麥管和浮漂，保溫容器具有抽真空夾層結(jié)構(gòu)，容器內(nèi)存有適量的溫水，浮漂以漂浮狀態(tài)置于在溫水中，將裝載胚胎的麥管豎向插在浮漂中，通過水中的浮漂保持麥管為直立狀態(tài)。作為優(yōu)選，所述的保溫容器為真空保溫杯。作為優(yōu)選，所述的浮漂直徑小于保溫杯的口徑。作為優(yōu)選，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板塊或其他比重較輕且不吸水的輕質(zhì)材料制做。本發(fā)明的有益效果是，使用保溫容器為運(yùn)載工具，利用溫水承載浮漂，使得容器內(nèi)所裝載的胚胎處在一種溫度均勻適當(dāng)，并有輕微震蕩的模仿母體的環(huán)境中，能夠在運(yùn)輸途中能夠保持胚胎的活力，有利于胚胎的發(fā)育，不失為胚胎移植過程中的胚胎運(yùn)輸?shù)囊环N取材容易、操作方便的運(yùn)輸方法和裝置。下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

圖1是本發(fā)明胚胎運(yùn)輸裝置實(shí)施例的示意圖。圖1中，1-杯蓋，2-杯體，3-浮漂，4-麥管，5-溫水。一、所用設(shè)備的組成1)電子溫度計(jì)型號為Tp3001，鄭州海洋儀器儀表有限公司制造，工作電壓0. 5ν, 溫度的解析度為0. rc / °F，測量的準(zhǔn)確度為0. 0°C +80°C。2)保溫杯高真空光口壺，容量為1500ml，杯口直徑為75mm，如圖1所示，該保溫杯的杯體與杯蓋均為不銹鋼抽真空夾層保溫結(jié)構(gòu)，其保溫性能說明為(100°c水注入)6小時(shí)80°C，12小時(shí)72°C，24小時(shí)。本實(shí)施方式直接使用國產(chǎn)真空保溫杯作為運(yùn)載工具， 經(jīng)實(shí)際測量，經(jīng)過4h左右，杯中水溫從38. 5°C僅下降了 1.6°C左右，說明其保溫效果較為理想，能夠滿足胚胎運(yùn)輸?shù)囊蟆?)浮漂用聚苯乙烯泡沫板制成圓盤形，上有麥管插入孔，直徑小于保溫杯的口徑。
二、步驟如下1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射使其無菌，裝胚胎前用已經(jīng)熱平衡的胚胎培養(yǎng)液(PZiO)潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養(yǎng)液(PZiO)，做兩個(gè)氣段，每段液體0. 5cm 左右，第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養(yǎng)液(PZiO)，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運(yùn)輸中有足夠的營養(yǎng)和氣體供給，然后再做第四，五兩個(gè)氣段，每段約0. 5cm,最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管的端口封口。2)先將保溫杯的杯體2與杯蓋1干燥，并用紫外照射消毒，將飲水機(jī)或熱水瓶中的熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫杯的杯體2中，用電子溫度計(jì)測量杯內(nèi)水溫并控制在 38. 50C 士0. 2°C范圍內(nèi)。3)放置胚胎(圖1)放置胚胎將裝有胚胎的麥管4輕輕的插于浮漂3中，一并置于保溫杯的溫水5中，使得浮漂上的麥管4保持直立狀態(tài)，立即合上保溫杯的杯蓋1，交至運(yùn)輸人員；所使用的浮漂3為圓盤形，其直徑略小于保溫杯的口徑，以便放置杯中，并使其漂浮在水中。4)胚胎運(yùn)輸將保溫杯置于車內(nèi)或者由坐在車上的運(yùn)輸人員持于手中，運(yùn)輸時(shí)車內(nèi)打開空調(diào)，車內(nèi)盡量保持恒溫，最好在25°C左右，要避免劇烈的震蕩，護(hù)送至胚胎移植地點(diǎn)；5)胚胎釋放和移植到達(dá)移植目的地，待受體動(dòng)物準(zhǔn)備妥當(dāng)并已經(jīng)找到輸卵管位置，將保溫杯打開，輕輕將麥管取出，用干凈的吸水紙將麥管周身的水拭去；準(zhǔn)備一無菌的培養(yǎng)皿，體式顯微鏡下，使用一無菌剪刀或者手術(shù)剪剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養(yǎng)皿內(nèi)；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員，完成胚胎移植工作。本實(shí)施方式通過水浴作為載體，為胚胎提供一個(gè)包括適宜的溫度在內(nèi)的最佳的模仿母體的環(huán)境，同時(shí)在運(yùn)輸過程中，胚胎在水浴中有輕微的機(jī)械震蕩，能夠顯著提高胚胎的發(fā)育能力。為此，首先要控制好保溫杯內(nèi)水浴的溫度，胚胎對溫度很敏感，較高或較低的溫度都不利于其后期的發(fā)育，最好是完全模擬母體的溫度。其次是保溫杯最好采用光口式，浮漂應(yīng)為圓盤形，直徑小于瓶口，這樣利于取放胚胎，同時(shí)能夠給胚胎一個(gè)輕微的震蕩環(huán)境。最后，保溫杯內(nèi)的水位不宜過高或過低，水位過高，保溫杯合蓋時(shí)會(huì)擠壓麥管，水位過低，會(huì)影響水浴溫度，使其保溫效果下降。以上雖然結(jié)合附圖描述了本發(fā)明的實(shí)施方式，但是本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以在所附權(quán)利要求范圍內(nèi)做出各種變形或修改。
權(quán)利要求
1.一種胚胎運(yùn)輸方法，應(yīng)用于胚胎移植過程，其包括以下步驟1)胚胎的裝管首先將麥管提前紫外照射使其無菌，裝胚胎前用已經(jīng)熱平衡的胚胎培養(yǎng)液潤洗麥管兩遍，其次吸取胚胎培養(yǎng)液，做兩個(gè)氣段，每段液體0. 5cm左右，第三段液體吸取裝有胚胎的胚胎培養(yǎng)液，該段液體要多一些，并與前后的氣段留有足夠長的具體，保證胚胎在運(yùn)輸中有足夠的營養(yǎng)和氣體供給，然后再做第四，五兩個(gè)氣段，每段約0. 5cm，最后用鑷子在酒精燈上加熱后將麥管端口封口；2)先將保溫容器干燥，并用紫外照射消毒，將熱水與冷的自來水勾兌后倒入保溫容器內(nèi)，用電子溫度計(jì)測量保溫容器內(nèi)的水溫為38. 5°C 士0. 2V ；3)放置胚胎將裝有胚胎的麥管插于浮漂中，一并置于保溫容器的溫水中，使得浮漂上的麥管保持直立狀態(tài)，立即合上保溫容器蓋子，交至運(yùn)輸人員；4)胚胎運(yùn)輸將保溫容器置于車內(nèi)或者由坐在車上的運(yùn)輸人員持于手中，運(yùn)輸時(shí)車內(nèi)要避免劇烈的震蕩，護(hù)送至胚胎移植地點(diǎn)；5)胚胎釋放和移植到達(dá)移植目的地，待受體動(dòng)物準(zhǔn)備妥當(dāng)并已經(jīng)找到輸卵管位置， 將保溫容器打開，將裝載胚胎的麥管取出，拭去麥管周身的水；準(zhǔn)備一無菌的培養(yǎng)皿，在體式顯微鏡下剪開麥管封口段，將胚胎釋放至培養(yǎng)皿內(nèi)；最后用胚胎移植管收集胚胎，交至胚胎移植人員完成胚胎移植工作。
2.一種胚胎運(yùn)輸裝置，應(yīng)用于胚胎移植過程，其特征在于，包括保溫容器、麥管和浮漂， 所述的保溫容器具有抽真空夾層保溫結(jié)構(gòu)，容器內(nèi)存有適量的溫水，浮漂以漂浮狀態(tài)置于在溫水中，將裝載胚胎的麥管豎向插在浮漂中，通過水中的浮漂保持麥管為直立狀態(tài)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的胚胎運(yùn)輸裝置，其特征在于，所述的保溫容器為真空保溫杯。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胚胎運(yùn)輸裝置，其特征在于，所述的浮漂直徑小于保溫杯的口徑。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任何一項(xiàng)所述的胚胎運(yùn)輸裝置，其特征在于，所述的浮漂用聚苯乙烯泡沫板塊或其他比重較輕且不吸水的輕質(zhì)材料制做。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于胚胎移植過程的胚胎運(yùn)輸方法及運(yùn)輸裝置，使用保溫容器為運(yùn)載工具，容器內(nèi)存有溫水，在溫水中放置輕質(zhì)浮漂，利用溫水承載浮漂，使得容器內(nèi)所裝載的胚胎處在一種溫度均勻適當(dāng)，并有輕微震蕩的模仿母體的環(huán)境中，能夠在運(yùn)輸途中能夠保持胚胎的活力，有利于胚胎的發(fā)育，不失為胚胎移植過程中用于胚胎運(yùn)輸?shù)囊环N取材容易、操作方便的運(yùn)輸方法和裝置。
文檔編號A61B17/435GK102172331SQ201110029889
公開日2011年9月7日 申請日期2011年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月27日
發(fā)明者丁建平, 劉亞, 劉曉蕊, 周娜汝, 季索菲, 張子軍, 張宇, 張運(yùn)海, 張遠(yuǎn)亮, 曹鴻國, 李運(yùn)生, 楊盼, 桂濤, 殷宗俊, 焦明慧, 王維, 秦曉煒, 章孝榮, 章美玲, 賈晴, 陶勇, 隨劉才 申請人:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)