專利名稱：一種用于治療肝纖維化的中藥組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥組合物，特別是用于治療肝纖維化的中藥組合物。
背景技術(shù)：
在我國(guó)的許多慢性疾病中，由于病毒性、酗酒、藥物等原因?qū)е碌母窝追浅Ｆ毡椋?從病毒感染和酗酒導(dǎo)致的慢性肝損傷經(jīng)常會(huì)引起肝纖維化和肝硬化?？紤]到肝組織的生理 特征和重要意義，以及治療和預(yù)防肝疾病的重要性，急需開發(fā)出治療和預(yù)防肝纖維化的藥 物。肝纖維化為前病理狀態(tài)，其中在諸如肝炎的慢性肝病中的損傷的肝組織不能修復(fù) 成正常組織，但是作為體內(nèi)適應(yīng)性反應(yīng)的一部分其能轉(zhuǎn)化成纖維組織如膠原。血清透明質(zhì) 酸(HA)、層粘蛋白(LN)、III型前膠原肽(plllnp)、I型膠原水平、肝組織中羥脯氨酸含量 等是肝纖維化的指標(biāo)成分，這些成分多寡反映纖維化的輕重；在纖維化過程中，結(jié)締組織生 長(zhǎng)因子(CTGF)、金屬基質(zhì)蛋白酶組織抑制物-I(TIMP-I)等是肝纖維化的重要介質(zhì)，CTGF升 高使纖維化程度加重，TIMP-I降低，可使形成的纖維降解，如能及時(shí)調(diào)節(jié)或阻斷之，則肝纖 維化可以逆轉(zhuǎn)；谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性反映肝損傷的程度。多種中藥包括單味藥在體內(nèi)和體外表現(xiàn)出肝保護(hù)功能，比如紅花、三七、赤芍、 桃仁、丹參等。趕黃草、冬蟲夏草即為其中之一，趕黃草為虎耳草科扯根菜屬植物扯根菜 (Penthorumchinense Pursh)的干燥地上部分，為苗族民間的草藥，主要分布于四川、貴州、 湖南等地。趕黃草具有清熱利濕、活血散瘀、平肝健脾之功效，廣泛用于治療各型肝炎、膽囊 炎、脂肪肝等疾病。冬蟲夏草具有補(bǔ)虛損、益精氣，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中顯示具有肝保護(hù)和治療肝 纖維化作用。但到目前為止，還沒有任何一個(gè)單味藥作為預(yù)防和治療肝纖維化的藥物上市，雖 然市場(chǎng)上有一些預(yù)防和治療肝纖維化的藥物中成藥，但大都是至少包含6味以上藥材的大 處方，比如復(fù)方鱉甲軟肝片含有11味藥材。大處方有諸多的弊端，比如藥味過多致所含化 學(xué)成分復(fù)雜，含量控制與藥效關(guān)聯(lián)度差，浪費(fèi)資源等。在現(xiàn)有技術(shù)中，趕黃草與冬蟲夏草沒有合用的文獻(xiàn)報(bào)道，更沒有趕黃草提取物與 冬蟲夏草合用可以預(yù)防治療肝纖維化的報(bào)道。本發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)了趕黃草提取物和冬蟲夏 草合用具有協(xié)同效果而完成。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療肝纖維化的中藥組合物。本發(fā)明公開了 一種藥物組合物，含有趕黃草提取物、冬蟲夏草。中醫(yī)本無肝纖維化一病，根據(jù)其臨床表現(xiàn)，多歸屬于“脅痛” “積聚” “瘀血” “痞證” 范疇。中醫(yī)認(rèn)為肝纖維化病因多因濕邪、疫毒等外邪侵襲，損傷肝臟，著而不去，其基本病機(jī) 為“血瘀阻絡(luò)、濕熱內(nèi)蘊(yùn)、肝腎不足”，因此補(bǔ)肝益腎，除濕化瘀即為肝纖維化的治療原則。 趕黃草清熱除濕化瘀，冬蟲夏草扶正益腎，二者合用體現(xiàn)了中醫(yī)治病必求于本的精神。
在本發(fā)明中，趕黃草采用其莖、葉的乙醇提取物。趕黃草提取物是將趕黃草莖切 段，與其葉，按質(zhì)量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小時(shí)， 提取液濃縮，噴霧干燥所得。 在本發(fā)明中，應(yīng)將冬蟲夏草干燥后經(jīng)粉碎成粉末狀后使用；出于環(huán)保、降低成本及 工業(yè)化的角度出發(fā)，更適宜于選擇發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體來代替天然冬蟲夏草，發(fā)酵冬蟲草 夏菌絲體為中國(guó)冬蟲夏草菌(拉丁學(xué)名為Cordyc印S sinensis (Berkeley) Sacc)的無性 型-中國(guó)被毛孢(拉丁學(xué)名為Hirsutella sinensis)采用工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)的冬蟲夏草菌 絲體，比如杭州中美華東制藥有限公司生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體，為了方便于后續(xù)工藝， 可將菌絲體干燥后粉碎成粉末狀(以下簡(jiǎn)稱蟲草粉)。為了提高藥效，可優(yōu)選粉末粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑15μ以下的發(fā)酵冬蟲 夏草菌絲體微粉(以下簡(jiǎn)稱蟲草微粉)，微粉加工工藝可以通過常規(guī)微粉工藝微粉化而得 到，比如采用機(jī)械沖擊式超微粉碎機(jī)、氣流超碎機(jī)。本發(fā)明公開的藥物組合物中，所述的趕黃草提取物和冬蟲夏草的質(zhì)量比為 1.2-1.7 1，以1.25 1為優(yōu)。若采用發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體代替冬蟲夏草，趕黃草提取物 與其的質(zhì)量比為1.2-1.7 1，以1.25 1為優(yōu)。本發(fā)明所公開的藥物組合物，還可以根據(jù)辯證施治增加其他中藥，如枸杞、丹參、 三七等，以添加枸杞和/或丹參為佳。本發(fā)明還公開了藥物組合物的制備方法，包括趕黃草提取物的制備趕黃草莖切 段，與其葉，按質(zhì)量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小時(shí)， 提取液濃縮，噴霧干燥所得；若還含有其他中藥材，可與趕黃草的莖、葉一起進(jìn)行提取后使 用；冬蟲草夏或發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體可通過常規(guī)的生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)工藝粉碎成粉狀，兩者
混合ο本發(fā)明所公開的藥物組合物，與可藥用載體或賦形劑，制成片劑、膠囊劑或顆粒 劑?？梢赃x擇常規(guī)輔料，以常規(guī)制劑方法制備成片劑、膠囊劑或顆粒劑。本發(fā)明還公開了這種藥物組合物在制備預(yù)防及治療肝纖維化藥物中的應(yīng)用。經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，將趕黃草提取物與冬蟲夏草或其替代品發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體配 伍用于二甲基亞硝胺(DMN)導(dǎo)致的肝纖維化動(dòng)物，可顯著降低血中GPT、透明質(zhì)酸、I型膠 原、層粘蛋白水平，降低肝臟羥脯氨酸含量。而且二者有協(xié)同作用。同樣，將趕黃草提取物 與冬蟲夏草或其替代品發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體配伍用于酒精導(dǎo)致的肝纖維化動(dòng)物，也可顯著 降低血中CTGF、TIMP-1、LN水平，降低肝臟羥脯氨酸含量，而且二者有協(xié)同作用。本發(fā)明基 于上述發(fā)現(xiàn)得以完成。為了證明將趕黃草提取物與冬蟲夏草或其替代品發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體配伍合用 治療肝纖維化具有顯著的協(xié)用效果，本發(fā)明在兩種動(dòng)物模型上進(jìn)行藥效學(xué)研究，其中模型 一是利用二甲基亞硝胺(DMN)損傷肝臟形成纖維化，此模型病理特點(diǎn)相當(dāng)于中醫(yī)主要證候 病機(jī)為濕熱、瘀熱內(nèi)蘊(yùn)，并兼氣虛型。模型二是利用酒精導(dǎo)致的肝纖維化。中醫(yī)認(rèn)為酒毒傷 人，損傷人體正氣，形成濕熱內(nèi)蘊(yùn)，是導(dǎo)致臟腑虧虛之始因。故趕黃草提取物和發(fā)酵蟲草菌 絲體補(bǔ)虛損，清濕熱切合兩種動(dòng)物模型病機(jī)，可較好反映藥物療效。本發(fā)明提供的中藥組合物，處方簡(jiǎn)單，經(jīng)藥效試驗(yàn)，兩者配伍的協(xié)同效果確切，對(duì) 肝纖維化有很好的治療作用。
具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不意味著對(duì)本發(fā)明的任何限制。實(shí)施例1膠囊劑制備1取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體粉，用 QLM-150KA型流化床對(duì)撞式氣流粉碎機(jī)，調(diào)頻范圍為50HZ，頻率設(shè)為32HZ，將蟲草粉粉碎成 粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑15 μ以下的微粉。將趕黃草的莖(切段)與葉，共lOOOg，加6000ml，濃度為80%的乙醇提取2次，每 次1小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥。取按以上制得的蟲草微粉200克，趕黃草提取物250克，加入庶糖酯47克、硬酯酸 鎂3克混合、填充入硬膠囊、制成1000粒(0. 5g/粒)，即得。實(shí)施例2膠囊劑制備2以趕黃草和冬蟲夏草或發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體為基本處方，在此基礎(chǔ)上可按中醫(yī)辨 證擴(kuò)展組方，如對(duì)于血瘀癥明顯者，可加用丹參。趕黃草莖(切段)與葉共750g，丹參450g，加7500毫升，濃度為95%的乙醇提取 1次，每次1小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥。取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草菌粉85克；趕黃草 丹參的提取物140克，混勻，加入25克微粉硅膠，填充入硬膠囊，制成1000粒(0. 25g/粒)， 即得。實(shí)施例3顆粒劑制備將趕黃草莖(切段)與其葉共1200g，加1200ml濃度為20%的乙醇提取3次，每 次2小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥。天然冬蟲夏草，干燥后，打粉過60目篩。取趕黃草提取物IOOOg和天然冬蟲夏草粉800g，加入甜菊糖3g，膠體微晶纖維素 60g，玉米淀粉1137g混合均勻、制粒、干燥、分裝，制成1000袋，3g/袋，即得。實(shí)施例4片劑制備取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體，用TC-30型 流化超音速氣流粉碎分級(jí)機(jī)，將蟲草粉粉碎成粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑10 μ以下的 微粉。將趕黃草莖(切段)與其葉共1000g，W 8000ml，濃度為90%的乙醇提取2次，每 次0. 5小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥。取趕黃草提取物270g和蟲草微粉180g，加入崩解劑交聯(lián)羧甲基纖維素25g、微晶 纖維素25g，混合均勻、制粒、壓片，制成1000片(0. 5g/片)，即得。協(xié)同作用的實(shí)施例以下的實(shí)施例5，實(shí)施例6是兩個(gè)有關(guān)與趕黃草提取物和發(fā)酵 冬蟲夏草菌絲體協(xié)同作用的動(dòng)物試驗(yàn)。
本發(fā)明采用CH0U-TALALAY聯(lián)合指數(shù)法(combination index，Cl)對(duì)藥物聯(lián)合應(yīng)用 的效果進(jìn)行判定，根據(jù)公式計(jì)算聯(lián)合用藥指數(shù)(Cl)，判定聯(lián)合用藥的交互作用,k ζ :CI = Dl combined/Dl alone+D2 combined/D2 alone+ (D1 combined)*(D2combined)/Dl alone氺D2 alone。公式中Dl combined是聯(lián)合用藥中藥物1的劑量；Dl alone是單一用藥中療效與 聯(lián)合用藥相當(dāng)?shù)乃幬?的劑量；D2 combined是聯(lián)合用藥中藥物2的劑量；D2 alone是單一 用藥中療效與聯(lián)合用藥相當(dāng)?shù)乃幬?的劑量。當(dāng)CI < 1提示兩藥有協(xié)同作用，值越小協(xié)同作用越強(qiáng)；CI = 1提示兩藥有相加作 用；CI > 1則說明兩藥有拈抗作用，值越大拈抗作用越強(qiáng)。實(shí)施例5趕黃草提取物和蟲草微粉組合物對(duì)DMN導(dǎo)致的肝纖維化大鼠的治療作用。樣品取按實(shí)施例1所制備的趕黃草提取物和蟲草微粉，用蒸餾水為溶媒配制，各 組動(dòng)物灌胃給予?？瞻讓?duì)照組和模型組用蒸餾水給予。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)方法體重160-170g的大鼠，按0. 2mL/100g的劑量腹腔內(nèi)注射0. 5% DMN，第 1、2、3周每天1次，連續(xù)3天，第4周隔日1次，連續(xù)3次。對(duì)照動(dòng)物同法注射生理鹽水。于 第28天造模結(jié)束后，將大鼠隨機(jī)分組，設(shè)為對(duì)照組，模型組，模型+趕黃草組(給藥400mg/ kg趕黃草提取物)，模型+蟲草組(給藥蟲草微粉400mg/kg)，模型+趕黃草、蟲草組合組 (給藥趕黃草提取物、蟲草微粉各100mg/kg)；以上各組用藥均1次/d，口服連續(xù)用藥30d 后結(jié)束，以2%戊巴比妥鈉按2ml/kg體重腹腔注射麻醉，后腔靜脈采血，采用ELISA試劑盒 測(cè)試血清HA，LN, I型前膠原肽，血清GPT和肝組織羥脯氨酸含量測(cè)定采用南京建成生物工 程研究所試劑盒測(cè)定。結(jié)果見表1。表1不同藥物組合對(duì)DMN處理大鼠肝纖維化相關(guān)因子的影響
權(quán)利要求
一種藥物組合物，含有趕黃草提取物，冬蟲草夏，其中所述的趕黃草提取物為趕黃草莖切段，與其葉,按質(zhì)量體積比，加6 10倍濃度為20 95%的乙醇，提取2 3次，每次0.5 2小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥所得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征是所述的冬蟲草夏為發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征是所述的發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體為粉末狀。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征是所述的發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體粉，是粒 徑分布在75微米以下，平均粒徑15微米以下的微粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，所述的藥物組合物，其特征是 所述的趕黃草提取物與冬蟲草夏或發(fā)酵冬蟲草夏菌絲體的質(zhì)量比為1. 2-1. 7 :1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征是所述的趕黃草提取物與冬蟲草夏或發(fā) 酵冬蟲草夏菌絲體的質(zhì)量比為1. 25 :1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，還含有枸杞或/和丹參。
8.制備如權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的藥物組合物的方法，制備趕黃草提取物 趕黃草莖切段，與其葉，按質(zhì)量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次 0. 5-2小時(shí)，提取液濃縮，噴霧干燥所得；常規(guī)設(shè)備、工藝粉碎冬蟲草夏或發(fā)酵冬蟲草夏菌 絲體。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，與可藥用載體或賦形劑制成片 劑、膠囊劑或顆粒劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的藥物組合物在制備預(yù)防及治療肝纖維化藥 物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療肝纖維化的中藥組合物及制備方法。本發(fā)明公開的中藥組合物是以趕黃草乙醇提取物、冬蟲夏草或發(fā)酵冬蟲夏草菌絲體為活性成份，添加藥用輔料可以制成各種口服制劑。經(jīng)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，兩味藥材合用，對(duì)肝纖維化的治療有明顯的協(xié)同效果，可用于肝纖維化的預(yù)防與治療。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101953861SQ20101051884
公開日2011年1月26日 申請(qǐng)日期2010年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月26日
發(fā)明者傅旭春, 扈榮, 楊建科, 潘福生, 白海波 申請(qǐng)人:杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)生物工程研究所有限公司;浙江大學(xué)城市學(xué)院