專利名稱：無花果根和葉在制備肝炎的輔助治療藥物和保健食品中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植物無花果藥材(根和葉)的提取和在醫(yī)藥、保健食品中的用途， 具體地說，是無花果根和葉提取物、提取物制備方法以及其中作為有效成分之一的佛手柑 內(nèi)酯在制備肝炎的輔助治療藥物或保健食品中的用途。
背景技術：
肝臟作為最重要的解毒器官，是許多藥物、外源性化學物質(zhì)的重要靶點。肝損傷是 多種嚴重肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展及最終走向肝功能衰竭的始動環(huán)節(jié)和共同途徑。肝損傷的 發(fā)病機制十分復雜，是多因素、多層面、多靶點上共同作用的結果。各種有害因素所致的肝 損傷可以表現(xiàn)為肝壞死、脂肪肝、膽汁郁積、肝纖維化、肝硬化和肝癌等。我國是肝病流行比 較嚴重的國家，全世界每年有100余萬患者死于肝病，其中1/3在中國。隨著藥物種類的不 斷增加，藥物性肝損害的發(fā)生率也相應上升。藥物性肝損害占整個藥物不良反應的10% 15%，我國藥物性肝炎約占急性肝炎住院患者的10%。國內(nèi)有關二甲基甲酰胺中毒的報告 也屢見不鮮，統(tǒng)計1990年至2007年間共有中毒事件報告54起，中毒人數(shù)達933人。2002 年國家職業(yè)衛(wèi)生標準GBZ85規(guī)定DMF中毒尚無特效解毒劑，治療原則是保肝、對癥和支持 治療。另外，病毒性肝炎以及酒精肝和脂肪肝的發(fā)病率都呈現(xiàn)出明顯的上升趨勢。對肝損 傷的防治目前仍是一個全球性的嚴峻課題。通過建立實驗性肝損傷動物模型，研究肝病的 發(fā)生機制，篩選保肝藥物，探索保肝作用原理，具有十分重要的現(xiàn)實意義。據(jù)《中國植物志》等介紹，無花果(Ficus caricaLinn)為落葉灌木或小喬木，高達 3 10m。全株具乳汁；多分枝，小枝粗壯，表面褐色，被稀短毛。葉互生；葉柄長2 5cm， 粗壯；托葉卵狀披針形，長約1cm，紅色；葉片厚膜質(zhì)，寬卵形或卵圓形，長10 24cm，寬8 22cm, 3 5裂，裂片卵形，邊緣有不規(guī)則鈍齒，上面深綠色，粗糙，下面密生細小鐘乳體及黃 褐色短柔毛，基部淺心形，基生脈3 5條，側脈5 7對。雌雄異株，隱頭花序，花序托單 生于葉腋；雄花和癭花生于同一花序托內(nèi)；雄花生于內(nèi)壁口部，雄蕊2，花被片3 4 ；癭花 花柱側生、短；雌花生在另一花序托內(nèi)，花被片3 4，花柱側生，柱頭2裂。榕果(花序托) 梨形，成熟時長3 5cm，呈紫紅色或黃綠色，肉質(zhì)，頂部下陷，基部有3苞片。花、果期8 11月。我國各地均有栽培。無花果主治咽喉腫痛；燥咳聲嘶；乳汁稀少；腸熱便秘；食欲不振；消化不良，泄瀉 痢疾；癰腫；癬疾。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了無花果根和葉治療肝炎的新用途及其保肝活性的有效成 分佛手柑內(nèi)酯。毒理學實驗表明佛手柑內(nèi)酯大鼠經(jīng)口 LD5tl大于30，000mg/kg，小鼠經(jīng)口 LD5tl 為8100mg/kg，安全性較高。佛手柑內(nèi)酯已經(jīng)作為治療白癜風和牛皮蘚的藥用成分。無花果 根及葉中均含有佛手柑內(nèi)酯，葉中佛手柑內(nèi)酯的含量為0. 39%。以往對佛手柑內(nèi)酯的研究 多集中在其光毒性及抗癌作用。研究表明佛手柑內(nèi)酯能夠抑制肝臟微粒體P450系統(tǒng)，體外 實驗表明佛手柑內(nèi)酯能夠抑制肝臟腫瘤細胞系的生長繁殖。但目前并沒有對于佛手柑內(nèi)酯 拮抗化學性肝損傷方面的研究報道。
佛手柑內(nèi)酯的英文名字為5-Methoxypsoralen其他名稱5_甲氧基補骨脂素、香柑內(nèi)酯。分子式=C12H8O4分子量216·19CAS 登記號484-20_8化學結構式

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供無花果根和葉以及佛手柑內(nèi)酯的新用途，即在制備肝炎輔助 治療藥物以及保健食品中的新應用。本發(fā)明的另一目的是提供一種肝炎輔助治療的藥物。本發(fā)明的再一個目的是提供一種肝炎輔助治療的保健食品。本發(fā)明的目的還包括提供制備方便、保健和治療效果好的無花果根和葉提取物及 其制備方法。發(fā)明人按照《2003年度藥物研究技術指導原則——中藥、天然物分冊》(國家食品 藥品監(jiān)督管理局，2003年)、《新藥臨床前研究指導原則》(1993年，國家藥監(jiān)局)和《保健食 品功能學評價程序》(衛(wèi)生部，2003年)等的肝炎輔助治療的藥物以及保健食品方法，對無 花果進行了提取物制備、藥物劑型制備、動物藥理和病理研究。無花果根或葉提取物的制備方法是取無花果根或葉干燥后制成的飲片1000g， 粉碎，水洗3 4次，加水煎煮三次，每次15分鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為 1. 12 1.25的稠膏，繼續(xù)干燥后，制細粉，即得。本品為棕色的顆粒；有特異香氣、味淡甜。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，以無花果根或葉的提取物口服給藥有明顯的效果，血清肝臟生化功 能指標和病理指標都有明顯的改善。以無花果根和葉提取物進行治療時，它可以以粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊、丸劑和液 體藥劑等形式口服給藥；也可以以注射液、栓劑、經(jīng)皮制劑、噴霧劑等形式非經(jīng)腸給藥。無花 果根和葉提取物的有效藥劑，是通過與適當?shù)乃幱脫交煳铮缳x形劑、粘合劑、滲透劑、潤滑 劑等混合而配制成的。無花果根和葉提取物劑量隨患者的病情、給藥途徑、患者的年齡和體重而改變。在 口服給藥情況下，劑量通常為成年人1000 3000mg/天，優(yōu)選為500 IOOOmg/天。在保 健食品應用方面也是同樣的原則。本發(fā)明的優(yōu)點是無花果根和葉可以作為可卡因中毒性肝炎輔助治療的化合物。 可卡因是一種世界范圍內(nèi)流行的興奮劑毒品。在2002年底我國就發(fā)生了 100公斤可卡因走 私的毒品大案。肝炎是可卡因中毒致死的一個重要原因。目前國際上還沒有治療可卡因中 毒性肝炎的公認藥物。無花果的抗毒品可卡因的作用在國內(nèi)和國際上都是首次發(fā)現(xiàn)。除了 抗可卡因的肝臟損傷外，我們同時也觀察到無花果對可卡因誘發(fā)的小鼠異常興奮作用有一定的抑制作用。另外，我們還發(fā)現(xiàn)佛手柑內(nèi)酯是無花果保肝藥效的主要活性成分之一。佛 手柑內(nèi)酯在極低劑量下(80mg/kg)即有明顯的拮抗四氯化碳肝損傷的作用。無花果制備方法比較簡單，植物生長特點研究的也比較透徹，有了一定規(guī)模的種 植基地，所以藥材的來源和經(jīng)濟性都有保障。藥食兩用性植物的市場認同性比較高，市場的 接受度高，市場前景良好。
具體實施例方式下面提供的實施例用于進一步闡明本發(fā)明，而不構成對本發(fā)明范圍的限制。1.材料實施例所用無花果根和葉采自秋天和春天的北京地區(qū)。將無花果根和葉分別晾 干，切成飲片，分別干燥保存。實施例所用佛手柑內(nèi)酯由本實驗室從中藥中提取，經(jīng)質(zhì)譜和核磁分析，鑒定為佛 手柑內(nèi)酯。其它的藥品、試劑和實驗動物，都能方便地市購。2.制備方法例取無花果根飲片或葉lOOOg，粉碎，水洗3次，加水2500ml煎煮，共三次，每次15分 鐘，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.28的稠膏，繼續(xù)減壓濃縮至干，得棕色粉末 47g，即得。稱取一定量的佛手柑內(nèi)酯，用的吐溫-80制備成混懸液，給藥前混勻。應用實例列舉，(1)取Ikg無花果根或葉提取物粉碎并過100目篩，進入適量淀粉混勻，制備顆粒 劑，整粒后進行分裝，每袋2g。(2)取無花果根或葉的提取物lOOOg，羥乙基纖維素10g，壓片制成片劑，放在常溫
干燥器中備用。(3)無花果根和葉提取物溶于水，可以直接按需要使用生理鹽水配制注射液。(4)無花果根和葉提取物溶于水，可以直接配制成口服液。(5)無花果根和葉提取物可以和甘草提取物等藥物配合制成復方合劑用于治療肝 炎。3.試驗方法無花果根或葉的提取物以及主要成分佛手柑內(nèi)酯抗各種藥物中毒性肝炎的輔助 治療藥效研究部分。實驗動物為雄性ICR小鼠或MT (-/")小鼠，體重為22 26g。試驗期間提供足量 的自來水及普通飼料，動物室保持22°C，自動通風。動物的分組與處理將小鼠按體重隨機 分組。中毒性肝炎造模組前3天不給予任何處理，第4天皮下注射造?；衔?。無花果提 取物或佛手柑內(nèi)酯+造?；衔锝M分別以不同劑量灌胃4天，每天1次。第4天灌胃給藥 后30分鐘，皮下或腹腔注射造?；衔锶芤骸Ｔ炷；衔锶径?4小時后，所有動物內(nèi)眥 取血，斷髓處死，立刻留取肝臟，稱重，將最大葉浸于10%的福爾馬林中固定，進行肝臟大體 的觀察和留取肝臟標本，HE染色觀察肝臟病理變化程度。利用7170A自動分析儀，采用酶 聯(lián)-紫外連續(xù)檢測法，測定血清中丙氨酸轉移酶(ALT)和天冬氨酸轉移酶(AST)以及乳酸脫氫酶(LDH)活性。統(tǒng)計分析方法實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差表示。應用EXCEL統(tǒng)計軟件 對實驗結果采用方差分析、t檢驗等方法分析處理，ρ < 0. 05認為組間差異具有顯著性。4.實驗結果(1)無花果根提取物抗可卡因小鼠中毒性肝炎的效果可參見表1。表1無花果根提取物抗可卡因中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(Y 土S) 與可卡因模型組比較，*p < 0. 05，**p < 0. 01(2)無花果根提取物抗四氯化碳小鼠中毒性肝炎的效果可參見表2。表2無花果根提取物抗四氯化碳中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(I 士S) 與四氯化碳模型組比較，*p < 0. 05，< 0.01(3)無花果根提取物抗撲熱息痛小鼠中毒性肝炎的效果可參見表3。表3無花果根提取物抗撲熱息痛中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(3Γ 土S) 與撲熱息痛模型組比較，*p < 0. 05，**p < 0. 01(4)無花果根提取物抗硫代乙酰胺小鼠中毒性肝炎的效果可參見表4。
表4 無花果根提取物抗硫代乙酰胺中毒性肝炎的作用(血清生化指標) ( +S) 與硫代乙酰胺模型組比較，*p < 0. 05，< 0.01(5)無花果根提取物抗二甲基甲酰胺小鼠中毒性肝炎的效果可參見表5。表5 無花果根提取物抗二甲基甲酰胺中毒性肝炎的作用(血清生化指標) (X +S) 與二甲基甲酰胺模型組比較，*p < 0. 05，< 0. 01(6)無花果葉提取物抗可卡因小鼠中毒性肝炎的效果可參見表6。表6無花果葉提取物抗可卡因中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(3Γ 土S) 與可卡因模型組比較，*p < 0. 05，**p < 0. 01(7)無花果葉提取物抗撲熱息痛小鼠中毒性肝炎的效果可參見表7。表7無花果葉提取物抗撲熱息痛中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(7 土S) 與撲熱息痛模型組比較，*p < 0. 05，**p < 0. 01(8)佛手柑內(nèi)酯抗四氯化碳小鼠中毒性肝炎的效果可參見表8。表8佛手柑內(nèi)酯抗四氯化碳中毒性肝炎的作用(血清生化指標)(3Γ 士S) 與四氯化碳模型組比較，*p< 0.05，#p< 0.01。
權利要求
一種治療和預防肝炎的藥物和保健食品，其特征在于含有佛手柑內(nèi)酯。
2.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在制備治療肝炎的藥物及保健食品中的應用。
3.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在治療可卡因中毒性肝炎的藥物及保健食品中的應用。
4.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在治療四氯化碳中毒性肝炎的藥物及保健食品中的應用。
5.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在治療撲熱息痛中毒性肝炎的藥物及保健食品中的應用。
6.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在治療硫代乙酰胺中毒性肝炎的藥物及保健食品中的應用。
7.無花果根和葉及佛手柑內(nèi)酯在治療二甲基甲酰胺中毒性肝炎的藥物及保健食品中 的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了以佛手柑內(nèi)酯為有效成分之一的無花果根和葉在制備治療肝炎輔助治療藥物和保健食品用途。以無花果根和葉以及佛手柑內(nèi)酯為活性成份的藥物和保健食品可有效地治療和預防可卡因中毒性肝炎、四氯化碳中毒性肝炎、撲熱息痛中毒性肝炎、硫代乙酰胺中毒性肝炎和二甲基甲酰胺中毒性肝炎。
文檔編號A61K36/60GK101926852SQ201010245550
公開日2010年12月29日 申請日期2010年8月5日 優(yōu)先權日2010年8月5日
發(fā)明者何月瑩, 劉偉霞, 呂艷, 吳學銀, 姚碧云, 崔蓉, 張寶旭, 敬挺, 李慶偉, 王旗, 王璐, 薛茹, 許珺輝, 賈鳳蘭, 趙鵬, 郝衛(wèi)東, 阮明, 馬秋霞, 魏雪濤, 魏鵬 申請人:北京大學