專利名稱：一種復(fù)合功能脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及脂質(zhì)體的制備方法，具體涉及一種復(fù)合功能脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體(Liposome)是于1965年被Bangham博士發(fā)現(xiàn)并命名的，其結(jié)構(gòu)維以雙分 子膜為夾層囊壁的閉合囊泡。各種脂質(zhì)和脂質(zhì)混合物均可用于制備脂質(zhì)體，而磷脂是最常 用的。磷脂的主要成分是磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸 等。磷脂是細(xì)胞膜的主要成分，因此脂質(zhì)體在結(jié)構(gòu)類似于人體細(xì)胞，對人體細(xì)胞具有高度的 親和性。磷脂為兩親性分子，其結(jié)構(gòu)中含有親水基團(tuán)(磷酸基團(tuán)和含氮的堿基)，及疏水基 團(tuán)(兩個較長的烴鏈)。在某一特定濃度條件下，極性基團(tuán)面向兩側(cè)水相，而非極性基團(tuán)的 烴鏈彼此面對面締合成一個穩(wěn)定的雙分子層結(jié)構(gòu)。利用脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可在雙層分子中 間加載親油性成分，而在球心處密封包埋親水性成分。構(gòu)成脂質(zhì)的另一類物質(zhì)是膽固醇，它 的疏水性較親水性強(qiáng)，嵌在磷脂形成的雙分子層中間，主要起著改變純磷脂層性質(zhì)的作用， 它像“緩沖劑” 一樣起著調(diào)節(jié)膜結(jié)構(gòu)“流動性”的作用。脂質(zhì)體廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品、化妝品和基因工程領(lǐng)域。其中一個重要的應(yīng) 用是作為藥物載體。將藥物包裹在脂質(zhì)體的水相和膜相內(nèi)，控制脂質(zhì)體的靶向作用使其富 集于病變部位將藥物釋放，從而可以減少所需藥物的劑量，也大大避免了藥物對人體正常 部位的損害。近年來立體穩(wěn)定脂質(zhì)體的研制大大提高了脂質(zhì)體在體內(nèi)的穩(wěn)定性，使得脂質(zhì) 體作為藥物載體在治療癌癥等疾病方面正在走向?qū)嵱秒A段。隨著化妝品向功能化、專業(yè)化 和系列化發(fā)展，透明質(zhì)酸、脂質(zhì)體、神經(jīng)酰胺和表皮生長因子等生物工程制劑較多地應(yīng)用在 護(hù)膚品中，1986年法國Lancome公司首次推出名為“Capture”的脂質(zhì)體化妝品。脂質(zhì)體的 穩(wěn)定性得到改善后，被用作化妝品活性組分的傳送體系，增加化妝品的效果、貯存和保護(hù)組 分；使用時可控制釋放(緩釋)脂質(zhì)組分的作用。維生素C也叫抗壞血酸，是一種水溶性的維生素，具有良好的抗氧化功能，可以用 來促進(jìn)骨膠原和粘多糖合成、減少自由基對皮膚的損害、延緩衰老，同時可以抑制皮膚異常 色素的沉積以及酪氨酸酶的活性，減少黑色素的形成，所以被廣泛應(yīng)用在美白和抗氧化美 容護(hù)膚化妝品中。但維生素C易于氧化變質(zhì)，若用普通方法將它直接加入膏霜基質(zhì)，三個月 就會全部失去作用，而且維生素C是水溶性的，不易滲透到皮膚角質(zhì)層，故很難充分發(fā)揮效 用。若經(jīng)脂質(zhì)體包封后，可增加維生素C的穩(wěn)定性，并使其具有較長的功效。水楊酸是一種常用的化妝品添加劑，有去除角質(zhì)、收縮毛孔、清除黑頭粉刺，淡化 細(xì)紋及皺紋的作用。其作用原理為水楊酸可以溶解角質(zhì)間的構(gòu)成形物質(zhì)，使角質(zhì)層產(chǎn)生脫 落，所以能去除積聚過厚的角質(zhì)層，促進(jìn)新陳代謝。但水楊酸的水溶液呈酸性，有一定刺激 性，且一般為先溶于乙醇再加入化妝品中，必將添加一定的乙醇，所以會對敏感性的皮膚造 成不適甚至過敏。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有化妝品添加劑容易變質(zhì)或有刺激性等問題，提供一種復(fù)合功能脂質(zhì)體，可以將多種化妝品添加劑包埋，延緩了藥物的氧化變質(zhì)，利用脂質(zhì)體的細(xì) 胞親和性和促皮滲透性來增加藥物的有效吸收度，減少藥物的刺激性。本發(fā)明另一目的在于提供上述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法。本發(fā)明還有一個目的在于提供上述復(fù)合功能脂質(zhì)體的應(yīng)用。本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)一種復(fù)合功能脂質(zhì)體，包括如下組分大豆磷脂、膽固醇、維生素C和水楊酸，四者 的質(zhì)量比為5 7 1.3 1.5 0.8 1.5 1，優(yōu)選為9 2 1. 8 1. 6。本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法包括如下步驟以大豆磷脂、膽固醇、水楊酸和 有機(jī)溶劑作為油相，含維生素C的緩沖液作為水相，經(jīng)第一次乳化形成油包水微乳液，再與 緩沖溶液進(jìn)行第二次乳化，最終形成水/油/水的復(fù)乳，乳化過程由超聲破碎完成，再通過 減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，得到復(fù)合功能脂質(zhì)體。本發(fā)明主要針對在化妝品中的應(yīng)用，因此脂質(zhì)體包埋的藥物中，選用了水楊酸作 為脂溶性藥物，維生素C作為水溶性藥物。但當(dāng)脂溶性藥物和水溶性藥物為其它藥物時，仍 可使用本發(fā)明制備方法。上述制備方法中，所述大豆磷脂、膽固醇和水楊酸的質(zhì)量比優(yōu)選為 4.6、 Γ1. 7 1，最優(yōu)選為5 1.3 1。大豆磷脂的濃度是制備中重要的影響因素之 一，對第二次乳化的時間影響較大。實(shí)驗(yàn)證明，保持其它條件不變時，大豆磷脂具有較廣的 用量范圍，且磷脂的濃度越高越難以形成穩(wěn)定的脂質(zhì)體，第二次乳化的時間越長；而濃度太 小又難以達(dá)到較高的包埋率，因?yàn)橹苄运幬锍煞质羌虞d于雙層分子的中間，對磷脂濃度 有一定限制。脂溶性藥物包封率過低時會引起的后果是藥物在水相中析出，與脂質(zhì)體聚集 而出現(xiàn)分層。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明以水楊酸為脂溶性藥物時，大豆磷脂與脂溶性藥物的質(zhì)量比不 能小于4. 6 1。作為一種優(yōu)選方案，本發(fā)明制備方法所述有機(jī)溶劑為乙醚，加入的量以完全溶解 原料為準(zhǔn)。復(fù)乳法制備的脂質(zhì)體可包含較多的水溶性藥物，所以水溶性藥物的濃度對脂質(zhì)體 穩(wěn)定性影響較小，但維生素C水溶液因酸性太高而不利于形成脂質(zhì)體，所以在制備內(nèi)水相 即維生素C水溶液時，應(yīng)注重調(diào)整其PH值。上述制備方法中，將維生素C溶于Na2HPO4-K2HPO4 緩沖溶液，用少量Na2HPO4水溶液調(diào)整至ρΗ為壙5，配置成濃度0. 04g/mL備用。實(shí)驗(yàn)證明， 當(dāng)內(nèi)水相PH小于4形成的脂質(zhì)體很容易分層。采用復(fù)乳法制備脂質(zhì)體時，加入油相的水溶液在超聲作用下分散為小水滴。磷脂、 膽固醇吸附在水滴表面親水基團(tuán)朝里，疏水基團(tuán)朝外形成一層單分子膜，從而生成油包水 (W/0)初乳。將緩沖水溶液加入乳液后，在超聲下有機(jī)溶劑揮發(fā)，油相中多余的磷脂、膽固醇 在與緩沖液的油水界面迅速生成一層單分子膜，油相中的小水滴穿過油水界面的單分子膜 并被其包圍，疏水基團(tuán)面對面締合，親水基團(tuán)朝向兩側(cè)水相，在水相中形成雙分子層的脂質(zhì) 體結(jié)構(gòu)。第一次乳化易于實(shí)現(xiàn)，超聲時間一般為廣2min，水浴溫度為25 35°C。乳化關(guān)鍵在 于水油比例，水相不能超過油相的一半，通常為油相的三分之一或四分之一。因?yàn)橐砸颐褳橛袡C(jī)溶劑，沸點(diǎn)僅為34. 5°C，且超聲促使乙醚揮發(fā)，水相過多時易達(dá)到轉(zhuǎn)相點(diǎn)，當(dāng)再加入2倍以上不含藥物水相時可能發(fā)生轉(zhuǎn)相，即形成0/W乳液而非復(fù)乳。第一次乳化的形成初乳 為均勻渾濁液，放置2min不凝集分層。第二次乳化則取決于超聲功率、時間和大豆磷脂的濃度。乳化時將初乳加入2倍 體積以上不含藥物的水相，實(shí)驗(yàn)中采用pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液。初乳以油相浮 于上層，通過超聲攪拌油相減少，相界面中出現(xiàn)乳化，形成乳液擴(kuò)散至水相中，所需時間為 5^10mino超聲可使乙醚迅速揮發(fā)，初乳粒子運(yùn)動劇烈，能在較短時間內(nèi)穿過單分子膜形成 單室脂質(zhì)體，具有較小粒徑。如果超聲功率過小，會使初乳粒子穿過單分子膜的時間增長， 易成不均勻的多室脂質(zhì)體，粒徑較大且分層時間較短，所以第二次乳化功率應(yīng)保持于100W 以上。油相消失無脂塊，形成均勻略透明乳液可結(jié)束超聲，避免過長時間超聲引起脂質(zhì)體破 裂，使包埋率下降。制備中采用減壓蒸餾去除剩余乙醚，真空度為0.08 0.09Mpa蒸餾時間為 5^15min,水浴溫度為3(T35°C。若調(diào)至較高真空度可不用加熱，更有利于保護(hù)脂質(zhì)體和藥物 不被氧化。本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體可以同時包含脂溶性藥物和水溶性藥物，作為藥物載體 時，可以發(fā)揮多種藥物的效用，并減少藥物的刺激性。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果(1)參照現(xiàn)有脂質(zhì)體制備的文獻(xiàn)記錄，以往脂質(zhì)體多為包埋一種藥物會添加少量 抗氧化劑，所實(shí)現(xiàn)的功能較為單一；本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體可填補(bǔ)這一不足，可以實(shí)現(xiàn)性質(zhì) 相差較大的藥物包含于相同脂質(zhì)體中，在脂質(zhì)體原具備的優(yōu)良性質(zhì)上又節(jié)省了因藥物性質(zhì) 不同導(dǎo)致添加化妝品、藥物時所需的多種處理步驟；(2)本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體性質(zhì)穩(wěn)定，對多種不同性質(zhì)的藥物都有良好的包封率， 提高了藥物的穩(wěn)定性，降低了生產(chǎn)成本，可廣泛用于醫(yī)藥、保健食品、化妝品和基因工程領(lǐng) 域；(3)本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體將維生素C和水楊酸同時包埋在脂質(zhì)體中，延緩了藥 物的氧化變質(zhì)過程，且利用脂質(zhì)體的細(xì)胞親和性和促進(jìn)皮膚滲透性，增加了藥物的有效吸 收度，用于制備化妝品時，可達(dá)到抗氧化、美白等多種功，。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。實(shí)施例1將維生素C溶于少量Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液，滴加Na2HPO4水溶液調(diào)整至pH為 5，用緩沖溶液配置其濃度為0. 04g/mL。取0. 15g大豆磷脂，0. 04g膽固醇，0. 03g水楊酸溶 于4mL乙醚中，加入ImL上述維生素C水溶液，功率為90W，水浴溫度為30°C下超聲2min至 分層消失，形成的均勻渾濁液為初乳。將初乳加入IOmL pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖 溶液中，功率為100W，水浴溫度為45°C下超聲破碎6min，至油層完全消失，形成均勻略透明 乳液，即為W/0/W復(fù)乳。而后35°C下減壓旋蒸8min，至完全無乙醚氣味。將所制得的脂質(zhì) 體乳液裝入容積為2mL的離心管，離心lh，轉(zhuǎn)速為lOOOOrad/min，取上清液進(jìn)行紫外吸收測量，測得維生素C的包封率為45%，水楊酸的包封率為52%。實(shí)施例2 將0. 15g大豆磷脂，0.04g膽固醇，0.03g水楊酸溶于4mL乙醚中，加入ImLpH為 3. 8，濃度為0. 04g/mL維生素C水溶液，功率為90W，水浴溫度為25°C下超聲2min至分層消 失形成的均勻渾濁液。將制得初乳加入IOmL pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液中，功率 為100W，水浴溫度為40°C下超聲破碎7min，至油層消失形成均勻略透明復(fù)乳。而后30°C下 減壓旋蒸lOmin，至完全無乙醚氣味。將所制得的脂質(zhì)體乳液裝入容積為2mL的離心管，離 心lh，轉(zhuǎn)速為lOOOOrad/min，取上清液進(jìn)行紫外吸收測量，測得維生素C的包封率為32%， 水楊酸的包封率為38%。實(shí)施例3取1.5mL pH為5，濃度為0. 04g/mL維生素C水溶液，加入4mL溶有0. 2g大豆磷脂， 0. 04g膽固醇，0. 04g水楊酸的乙醚溶液中，以功率90W，水浴溫度為30°C下超聲2min至分 層消失，形成均勻渾濁的初乳。將初乳加入IOmL pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液中， 功率為100W，水浴溫度為45°C下超聲破碎6min，至油層完全消失，形成均勻略透明復(fù)乳。而 后35°C下減壓旋蒸lOmin，至完全無乙醚氣味。將所制得的脂質(zhì)體乳液裝入容積為2mL的 離心管，離心lh，轉(zhuǎn)速為lOOOOrad/min，取上清液進(jìn)行紫外吸收測量，測得維生素C的包封 率為40%，水楊酸的包封率為39%。實(shí)施例4取0. 18g大豆磷脂，0. 05g膽固醇，0. 03g水楊酸溶于5mL乙醚中，加入ImLpH為5， 濃度為0. 04g/mL維生素C水溶液，功率為100W，水浴溫度為25°C下超聲1. 5min至分層消 失，形成的均勻渾濁液為初乳。將初乳加入15mL pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液中， 功率為100W，水浴溫度為40°C下超聲破碎8min，至油層完全消失，形成均勻略透明乳液，即 為W/0/W復(fù)乳。而后30°C下減壓旋蒸12min，至完全無乙醚氣味。將所制得的脂質(zhì)體乳液 裝入容積為2mL的離心管，離心lh，轉(zhuǎn)速為lOOOOrad/min，取上清液進(jìn)行紫外吸收測量，測 得維生素C的包封率為42%，水楊酸的包封率為45%。實(shí)施例5稱取0. 16g大豆磷脂，0.03g膽固醇，0.03g水楊酸溶于4mL乙醚中，加入ImL pH 為5，濃度為0. 04g/mL的維生素C水溶液，功率為100W，水浴溫度為25°C下超聲Imin至分 層消失，形成的均勻渾濁液為初乳。將初乳加入12mLpH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶液 中，功率為100WA，水浴溫度為50°C下超聲破碎5min，至油層完全消失，形成均勻略透明乳 液，即為W/0/W復(fù)乳。而后35°C下減壓旋蒸12min，至完全無乙醚氣味。將所制得的脂質(zhì)體 乳液裝入容積為2mL的離心管，離心1. 2h，轉(zhuǎn)速為SOOOrad/min，取上清液進(jìn)行紫外吸收測 量，測得維生素C的包封率為40%，水楊酸的包封率為43%。
權(quán)利要求
一種復(fù)合功能脂質(zhì)體，包括如下組分大豆磷脂、膽固醇、維生素C和水楊酸，四者的質(zhì)量比為5~7∶1.3~1.5∶0.8~1.5∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合功能脂質(zhì)體，其特征在于所述大豆磷脂、膽固醇、維生素 C和水楊酸的質(zhì)量比為9 2 1.8 1.6。
3.權(quán)利要求1或2所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于包括如下步驟以大 豆磷脂、膽固醇、水楊酸和有機(jī)溶劑作為油相，含維生素C的緩沖液作為水相，經(jīng)第一次乳 化形成油包水微乳液，再與緩沖溶液進(jìn)行第二次乳化，最終形成水/油/水的復(fù)乳，乳化過 程由超聲破碎完成，再通過減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，得到復(fù)合功能脂質(zhì)體。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述大豆磷脂、膽固 醇和水楊酸的質(zhì)量比為4. 6 8 Γ1. 7 1。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述大豆磷脂、膽固 醇和水楊酸的質(zhì)量比為5 1.3 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為乙 醚，加入的量以完全溶解原料為準(zhǔn)；所述含維生素C的水相是維生素C溶于Na2HPO4-K2HPO4 緩沖溶液，濃度為0. 04g/ml,pH為4 5 ；所述緩沖溶液為pH = 7. 4的Na2HPO4-K2HPO4緩沖溶 液。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述第一次乳化的 水浴溫度為25 35°C，超聲時間為廣2min，功率為9(Tl00W ；所述第二次乳化的水浴溫度為 4(T50°C，超聲時間為5 8min，功率為100W。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述初乳為均勻渾濁 液，放置2min不凝集分層；所述復(fù)乳為均勻略透明乳液，分散相為初乳的微粒，連續(xù)相為不 含水溶性藥物的水相。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于所述減壓蒸餾的真空 度為0. 08 0. 09Mpa，水浴溫度為30 35°C，蒸餾時間為5 15min。
10.權(quán)利要求1或2所述復(fù)合功能脂質(zhì)體作為藥物載體，在降低藥物刺激性中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)合功能脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體包括如下組分大豆磷脂、膽固醇、維生素C和水楊酸，四者的質(zhì)量比為5～7∶1.3～1.5∶0.8～1.5∶1。本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體的制備方法是將大豆磷脂、膽固醇和水楊酸用有機(jī)溶劑溶解作為油相，含維生素C的緩沖液作為水相，經(jīng)乳化形成油包水微乳液，再與緩沖溶液乳化，最終形成水/油/水的復(fù)乳，乳化過程由超聲破碎完成，再通過減壓蒸餾除去有機(jī)溶劑，得到復(fù)合功能脂質(zhì)體。本發(fā)明復(fù)合功能脂質(zhì)體的性質(zhì)穩(wěn)定，同時包含脂溶性藥物和水溶性藥物，發(fā)揮多種藥物的藥效，使脂質(zhì)體的功能復(fù)合化，應(yīng)用于化妝品中，提高了藥物的穩(wěn)定性，降低了生產(chǎn)成本。
文檔編號A61K47/24GK101816632SQ20101016053
公開日2010年9月1日 申請日期2010年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月23日
發(fā)明者何秋星, 王學(xué)文 申請人:廣東藥學(xué)院