專利名稱：一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)合成方法，具體涉及一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法。背景材料原位凝膠是一種新型的藥物傳遞系統(tǒng)，給藥后在一定的環(huán)境刺激下發(fā)生溶膠_凝膠(so-gel)轉(zhuǎn)變，在給藥部位形成透明的固體和半固體狀的凝膠。在藥物傳遞，細(xì)胞微囊 技術(shù)和組織修復(fù)領(lǐng)域中原位凝膠已展現(xiàn)出巨大的潛力，近年來得到了深入和廣泛的研究。 其中，溫敏原位凝膠化體系因僅僅以溫度作為調(diào)控so-gel轉(zhuǎn)變的因素，避免了有機(jī)溶劑及 其它化學(xué)物質(zhì)的使用，目前已成為研究熱點(diǎn)。已見報(bào)道的溫敏聚合物體系中，聚N-異丙基 丙烯酰胺(PNIPAM)被研究的最為廣泛，其最低臨界溶解溫度(LCST)在32°C左右，接近人 體生理溫度，并可很方便地通過與其它單體共聚而改變，因此被廣泛用于藥物釋放、組織工 程、生物分離等領(lǐng)域。然而，PNIPAM不具備生物降解性，缺乏良好的生物相容性，限制了其 在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。若在PNIPAM聚合物中引入可降解組分使之兼具溫敏性、生物相容性 和可降解性，并用之于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)@示出更強(qiáng)大的生命力。具有以丙烯酸酯封端的聚 乙二醇(PEG)和聚乳酸(PLA)三嵌段共聚物是一種可降解交聯(lián)劑，其中PLA作為一種重要 的生物可降解高分子材料已經(jīng)獲得了美國食品與藥物管理局(FDA)的認(rèn)可，而PEG作為一 種親水性并已經(jīng)獲得FDA的批準(zhǔn)可應(yīng)用于人體的聚合物，具有優(yōu)良的生物相容性和血液相 容性，以及較好的親水性和柔軟性，在體內(nèi)能溶于組織液中，能被機(jī)體迅速排出體外而不產(chǎn) 生任何毒副作用，因此PLA和PEG的共聚物作為可降解的生物材料，已被人們廣泛地用于醫(yī) 藥方面。因此，合成和研究具有溫敏和生物可降解性的原位凝膠，將之用于藥物控制釋放領(lǐng) 域有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法，該合成 方法通過N-異丙基丙烯酰胺與雙烯丙基封端的PLA-PEG-PLA(PLEL)可生物降解交聯(lián)劑聚 合得到原位凝膠，此原位凝膠不僅具有溫敏性，而且具有對生物體無毒性、良好的生物相容 性和生物可降解性，可應(yīng)用于藥物釋放體系、酶的固定、蛋白質(zhì)分離和純化等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng) 域。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是該原位凝膠由N-異丙基丙烯酰胺、引發(fā)劑、雙烯丙基 封端的PLA-PEG-PLA可生物降解交聯(lián)劑在二次蒸餾水中、在無氧的條件下加熱聚合得到； PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn為4000 或6000，LA/PEG摩爾比為3 1、5 1或8 1，依PLEL計(jì)，PLEL與NIPAM質(zhì)量比為 (1-10) (25-75)；引發(fā)劑為過硫酸銨/焦亞硫酸鈉、偶氮二異丁腈、N，N，N'，N'-四甲 基乙二胺或硝酸鈰銨，依NIPAM計(jì)，引發(fā)劑為其質(zhì)量的0. 6% -0. 8%。本發(fā)明的具體步驟如下1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物分別由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn為4000或6000，LA/PEG摩爾比為3 1、5 1或8 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量
1-3倍的二氯甲烷溶解，再用過量于二氯甲烷重量3-4倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與 40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量1-3倍的二氯甲烷溶解后加入圓 底燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°C，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA摩爾比為3:1，AcCl/PLA-PEG-PLA摩爾比為6 1，在電磁攪拌下，在 O0C反應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3-4 倍的石油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取0. 5-15g N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾 水中，待單體充分溶解后加入20-200mg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0-60min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0.6% _0. 8 %的引發(fā)劑溶解在4ml蒸餾水中形成水溶 液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在 50-80°C交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、合成的PNIPAM原位凝膠既具有溫敏性，同時(shí)又克服了 傳統(tǒng)PNIPAM凝膠不可降解和生物相容性差的缺點(diǎn)，而且該水凝膠可在體內(nèi)原位形成，無需 外科手術(shù)的情況下注射入體內(nèi)，避免外科手術(shù)過程中的高度創(chuàng)傷性，加速愈合，減小病人痛 苦，特別當(dāng)用于修復(fù)復(fù)雜形狀的組織時(shí)，原位凝膠具有自適應(yīng)性，可體溫固化，這是傳統(tǒng)水 凝膠不可比擬的。2、通過改變聚乙二醇的分子量和LA/PEG的比率來調(diào)節(jié)該凝膠的凝膠化溫度，使 之在儲(chǔ)藏條件下是自由流動(dòng)的液體，注射進(jìn)入人體后可填充于組織間隙，在體內(nèi)迅速發(fā)生 相轉(zhuǎn)變，達(dá)到局部給藥或延緩藥物釋放的目的。3、原位凝膠合成方法安全可靠，操作簡單，材料易得，反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)介質(zhì)為 水，后處理簡便。


圖1是不同交聯(lián)劑PLEL用量制得的凝膠分散體的相圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)解決方案，這些實(shí)施例不能理解 為是對技術(shù)方案的限制。實(shí)施例1 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為4000，LA/PEG摩爾比為3 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA摩爾比為3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA摩爾比為6 1，在電磁攪拌下，在0°C反應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3倍 的石油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取0. 5g N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中，待單體充分溶解后加入20mgPLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 6%的過硫酸銨/焦亞硫酸鈉分別溶解在4ml蒸餾水中 形成水溶液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度 控制在50°C交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例2 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為6000，LA/PEG摩爾比為5 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3. 5倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3. 5倍的石 油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取1. Og N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入20mgPLEL，攪拌，通氮?dú)?5min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 7%的偶氮二異丁腈溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液， 依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在65°C 交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例3 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為4000，LA/PEG摩爾比為8 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量4倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量4倍的石油 醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取1. 5g N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入20mgPLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 8%的N，N, N'，N'-四甲基乙二胺溶解在4ml蒸餾 水中形成水溶液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌， 溫度控制在80°C交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?br> 5、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例4 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為6000，LA/PEG摩爾比為3 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°C，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3倍的石油 醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取2. 5g N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入IOOmg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 6%的硝酸鈰銨溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液，依次 倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在50°C交聯(lián) 聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例5 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為4000，LA/PEG摩爾比為5 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3. 5倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3. 5倍的石 油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取5. Og N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入IOOmg PLEL，攪拌，通氮?dú)?5min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 7%的偶氮二異丁腈溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液， 依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在65°C 交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例6 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為6000，LA/PEG摩爾比為8 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量4倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解后加入圓底燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量4倍的石油 醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取7. 5g N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入IOOmg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 8%的過硫酸銨/焦亞硫酸鈉分別溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度 控制在80°C交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例7 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為4000，LA/PEG摩爾比為3 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量1倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3倍的石油 醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取5. Og N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水中， 待單體充分溶解后加入200mg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0.6%的N，N，N'，N'-四甲基乙二胺溶解在4ml蒸餾 水中形成水溶液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌， 溫度控制在50°C交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例8 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn 為6000，LA/PEG摩爾比為5 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量3. 5倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量2倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3. 5倍的石 油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取10. Og N-異丙基丙烯酰胺(MPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水 中，待單體充分溶解后加入200mg PLEL，攪拌，通氮?dú)?5min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 7%的偶氮二異丁腈溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液，依次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在65°C 交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。實(shí)施例9 依以下步驟合成凝膠1、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn為6000，LA/PEG摩爾比為8 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解，再用過 量于二氯甲烷重量4倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與40°C減壓干燥；2、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量3倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°c，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA 摩爾比 3 1，AcCl/PLA-PEG-PLA 摩爾比 6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反 應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量4倍的石油 醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；3、稱取15. Og N-異丙基丙烯酰胺(MPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水 中，待單體充分溶解后加入200mg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0min除去體系中的氧氣；4、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0. 8%的硝酸鈰銨溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液，依次 倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在80°C交聯(lián) 聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去 未反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。
權(quán)利要求
一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法，其特征在于該原位凝膠由N-異丙基丙烯酰胺、引發(fā)劑、雙烯丙基封端的PLA-PEG-PLA可生物降解交聯(lián)劑在二次蒸餾水中、在無氧的條件下加熱聚合得到；PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn為4000或6000，LA/PEG摩爾比為3∶1、5∶1或8∶1，依PLEL計(jì)，PLEL與NIPAM質(zhì)量比為(1-10)∶(25-75)；引發(fā)劑為過硫酸銨/焦亞硫酸鈉、偶氮二異丁腈、N，N，N′，N′-四甲基乙二胺或硝酸鈰銨，依NIPAM計(jì)，引發(fā)劑為其質(zhì)量的0.6％-0.8％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法，其特征在于 合成方法的具體步驟如下(1)、PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物分別由丙交酯(LA)與PEG本體聚合而得，PEG分子量Mn為4000或6000，1^^^6摩爾比為3 1、5 1或8 1，聚合粗產(chǎn)物用過量于其重量 1-3倍的二氯甲烷溶解，再用過量于二氯甲烷重量3-4倍的石油醚沉淀純化，純化后產(chǎn)物與 40°C減壓干燥；(2)、將上述合成的三嵌段共聚物用過量于其重量1-3倍的二氯甲烷溶解后加入圓底 燒瓶中，將燒瓶置于冰浴中，冷卻到0°C，然后一次加入三乙胺(TEA)和丙烯酰氯(AcCl)， TEA/PLA-PEG-PLA摩爾比為3 1，AcCl/PLA_PEG_PLA摩爾比為6 1，在電磁攪拌下，在 0°C反應(yīng)6h，在室溫下靜置24h，過濾，除去三乙胺鹽酸鹽，濾液用過量于二氯甲烷重量3-4 倍的石油醚沉淀，最后在40°C減壓干燥，得到生物可降解交聯(lián)劑(PLEL)；(3)、稱取0.5-15gN-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)置于三頸燒瓶中，溶解在30ml蒸餾水 中，待單體充分溶解后加入20-200mg PLEL，攪拌，通氮?dú)?0-60min除去體系中的氧氣；(4)、依NIPAM計(jì)，將其質(zhì)量0.6% -0. 8%的引發(fā)劑溶解在4ml蒸餾水中形成水溶液，依 次倒入上述溶液中，再通氮?dú)?0min，將裝置密封置于恒溫水浴，攪拌，溫度控制在50-80°C 交聯(lián)聚合，反應(yīng)7h，整個(gè)溶液由無色慢慢變?yōu)槿榘咨?5)、反應(yīng)結(jié)束后，上述乳液放入截留分子量為8000-14000的透析袋透析5d，以除去未 反應(yīng)的單體、交聯(lián)劑最后得到溫敏和生物可降解性PNIPAM原位凝膠分散液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種溫敏和生物可降解性原位凝膠的合成方法，該原位凝膠由N-異丙基丙烯酰胺、引發(fā)劑、可生物降解交聯(lián)劑在二次蒸餾水中無氧的條件下加熱聚合得到；PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物由丙交酯與PEG本體聚合而得，PEG分子量為4000或6000，LA/PEG摩爾比為3∶1、5∶1或8∶1，PLEL與NIPAM質(zhì)量比為(1-10)∶(25-75)；引發(fā)劑為過硫酸銨/焦亞硫酸鈉、偶氮二異丁腈、N，N，N′，N′-四甲基乙二胺或硝酸鈰銨，依NIPAM計(jì)，引發(fā)劑為其質(zhì)量的0.6％-0.8％。該合成方法得到的原位凝膠具有溫敏性、對生物體無毒性、良好的生物相容性和可降解性，可應(yīng)用于藥物釋放體系、酶的固定、蛋白質(zhì)分離和純化等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61K47/32GK101845120SQ201010137759
公開日2010年9月29日 申請日期2010年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月25日
發(fā)明者仲慧, 張維光, 張莉莉, 徐繼明, 王宇峰, 程志鵬, 陳賽博 申請人:淮陰師范學(xué)院