專(zhuān)利名稱(chēng)：一種納豆激酶組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種納豆激酶組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
在現(xiàn)代社會(huì)生活中，人體內(nèi)的血栓常引發(fā)脈管栓塞、腦血栓、中風(fēng)、急性心肌梗塞 等嚴(yán)重的心血管疾病，尤其會(huì)對(duì)中老年人的身體健康造成很大的危害，全世界有血栓患者 1500萬(wàn)，潛在的溶栓劑市場(chǎng)有20億美元。而納豆激酶作為一種新型的預(yù)防和治療人血栓性 心血管疾病的安全生物活性物質(zhì)，自1987年須見(jiàn)洋行博士發(fā)現(xiàn)至今，人們已對(duì)它進(jìn)行過(guò)廣 泛的研究。據(jù)大量科學(xué)研究、臨床試驗(yàn)證實(shí)納豆激酶具有很強(qiáng)的溶解纖維蛋白的作用，能降 低血液粘度、改善血液循環(huán)狀況，維持血細(xì)胞的正常形態(tài)和功能等多種生理功能。因此納豆 激酶制劑主要用于預(yù)防和治療腦血栓、腦中風(fēng)、老年癡呆癥等。開(kāi)發(fā)納豆激酶的口服制劑產(chǎn) 品，作為預(yù)防和治療血栓性疾病具有廣闊的市場(chǎng)前景與深遠(yuǎn)的社會(huì)意義。納豆激酶在25 45°C范圍內(nèi)酶活保持相對(duì)穩(wěn)定，隨著溫度升高，酶迅速失活。溫 度超過(guò)60°C，2小時(shí)內(nèi)酶活力完全喪失。納豆激酶在自然PH狀態(tài)下比較穩(wěn)定PH在4 12 范圍內(nèi)活性相對(duì)穩(wěn)定，PH在7 9范圍內(nèi)活性最為穩(wěn)定，PH低于4時(shí)，迅速變性失活。用傳統(tǒng)的制備腸溶片的方法，即素片包腸溶衣，這種方法不適合于納豆激酶，其原 因是該方法涉及到機(jī)械壓片，而用壓片機(jī)壓片，物料內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生局部高溫，從而會(huì)使納豆激 酶活性喪失。而腸溶膠囊由于具有易破裂、滲漏，崩解遲緩等各種缺點(diǎn)，用腸溶膠囊直接裝 填納豆激酶在使用上也受到了限制。利用微囊制劑工藝(如專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN1766096A所述)，將納豆激酶與藥用輔料混 合，制軟材，制丸芯，噴入包衣液包衣，裝膠囊。制劑釋放度檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果顯示這種制備腸溶 微囊制劑的方法有利于減少納豆激酶體內(nèi)活性損失。但是這種制劑方法存在一定的缺點(diǎn) (1)由于包衣時(shí)溫度較低(30°C)，容易造成微丸的粘連，影響微囊制劑的成型。(2)包衣后 微囊還需一個(gè)低溫(30°C )烘箱內(nèi)的膜愈合過(guò)程，由于溫度較低，所以膜愈合時(shí)間較長(zhǎng)，需8 小時(shí)，在生產(chǎn)上大大地受到了限制。還有技術(shù)(如專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN1714675所述)，納豆激酶和除核心輔料之外的其他輔料的 混合物通過(guò)氣流噴霧干燥被微膠囊化固定在核心輔料上。經(jīng)過(guò)氣流噴霧干燥技術(shù)處理制備的微 膠囊化納豆激酶藥物組合物可直接口服?；钚猿煞旨{豆激酶在哺乳動(dòng)物的胃中不被胃蛋白酶分 解失活，提高了藥物的穩(wěn)定性和有效率。然而使用氣流噴霧干燥技術(shù)存在的缺點(diǎn)就是干燥器的體 積大，傳熱系數(shù)低，導(dǎo)致熱效率低，動(dòng)力消耗大。目前國(guó)內(nèi)工業(yè)規(guī)模的噴霧干燥器，熱效率一般為 30% 50%，國(guó)外帶有廢熱回收的噴霧干燥機(jī)，熱效率可達(dá)到70%，但該設(shè)備只有在生產(chǎn)能力大 于100千克(水)/小時(shí)才有經(jīng)濟(jì)意義。因此使用氣流噴霧干燥技術(shù)制備納豆激酶微膠囊藥物組 合物不僅在生產(chǎn)工藝上提出了較高的要求，在經(jīng)濟(jì)成本上也是一個(gè)很大的限制。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決其技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種納豆激酶組合物及其制備方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是一種納豆激酶組合物，包括納豆激 酶、成膜材料、成膜劑，所述成膜材料由纖維素酸酯類(lèi)、丙烯酸樹(shù)脂類(lèi)、聚乙烯醇酞酸酯、甲 基丙烯酸共聚物、蟲(chóng)膠、玉米朊中的一種或多種與可溶性溶劑混合而成。其制備方法步驟如下a、按1 (3 19)的重量比例混合成膜材料與溶劑，制備 成膜液；b、按(0.5 2) 1的重量比例將納豆激酶加入到成膜液中，充分混合均勻；C、在 步驟b的混合物中加入0. 5 2倍量的成膜劑，充分混合均勻，并制備成軟材；d、軟材經(jīng)制 粒、40-60 0C干燥和整粒工序制成納豆激酶組合物顆粒。進(jìn)一步說(shuō)明所述成膜劑由水和有機(jī)醇類(lèi)中的一種或兩種混合而成。為了納豆激酶組合物更有益于健康，進(jìn)一步的所述納豆激酶組合物還添加有稀 釋劑。
進(jìn)一步的所述稀釋劑由淀粉類(lèi)、糖類(lèi)、纖維素類(lèi)、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、糖醇類(lèi)中的一種或多 種混合而成。為了根據(jù)客戶(hù)的不同服用習(xí)慣，進(jìn)一步的將所述步驟d制成的納豆激酶組合物 顆粒進(jìn)行劑型轉(zhuǎn)化。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下顯著特征1、制備工藝簡(jiǎn)單易行、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、 生產(chǎn)效率高、工藝生產(chǎn)設(shè)備投資少、與現(xiàn)有技術(shù)相比降低了制造成本低。2、利用簡(jiǎn)單工藝， 有效的改善了制備所得的組合物中納豆激酶的耐酸穩(wěn)定性，并且易人體吸收。
具體實(shí)施例方式一種納豆激酶組合物，包括納豆激酶、成膜材料、成膜劑，所述成膜材料由纖維素 酸酯類(lèi)、丙烯酸樹(shù)脂類(lèi)、聚乙烯醇酞酸酯(PVAP)、甲基丙烯酸共聚物、蟲(chóng)膠、玉米朊中的一種 或多種與可溶性溶劑混合而成，所述成膜劑由水和有機(jī)醇類(lèi)中的一種或兩種混合而成，而 為了納豆激酶組合物更有益于健康，所述納豆激酶組合物還添加有稀釋劑，其稀釋劑的成 分由淀粉類(lèi)、糖類(lèi)、纖維素類(lèi)、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、糖醇類(lèi)中的一種或多種混合而成。其具體配方及用量如下配方用量(％)_納豆激酶10 100000單位成膜液8 20成膜劑8 20稀釋劑0 60所述納豆激酶組合物的制備方法步驟如下a、按1 (3 19)的重量比例混合成 膜材料與溶劑，制備成膜液；b、按(0.5 2) 1的重量比例將納豆激酶加入到成膜液中， 充分混合均勻；C、在步驟b的混合物中加入0. 5 2倍量的成膜劑，充分混合均勻，并制備 成軟材；d、軟材經(jīng)制粒、40-6(TC干燥和整粒工序制成納豆激酶組合物顆粒。為了根據(jù)客戶(hù)的不同服用習(xí)慣，進(jìn)一步的將所述步驟d制成的納豆激酶組合物 顆粒進(jìn)行劑型轉(zhuǎn)化，如膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、散劑等。客戶(hù)通過(guò)服用本發(fā)明的納豆激酶組合物可以有效的預(yù)防和治療腦血栓、腦中風(fēng)、 老年癡呆癥等，下面給出對(duì)本發(fā)明的納豆激酶組合物的檢測(cè)數(shù)據(jù)以及結(jié)果
一 .納豆激酶組合物配方如下表(組合物中納豆激酶的活性為1，000FU)
~ZMΓ~035~~1525Γ~5二、納豆激酶組合物檢測(cè)指標(biāo)納豆激酶組合物中納豆激酶活性耐酸性考察1.配制人工胃液、磷酸緩沖液(1)人工胃液0.9ml濃鹽酸加入IOOml容量瓶，加蒸餾水定容至100ml，即得 PHl. 2的人工胃液。(2)ΡΗ7·8磷酸緩沖液甲液磷酸氫二鈉71. 8g，溶于IOOOml水乙液磷酸二氫鈉2. 76g，溶于IOOml水取甲液997. 35ml,乙液92. 65ml混合即得。2.酸破壞分別稱(chēng)取納豆激酶組合物樣品(上述樣品編號(hào)1、2、3、4、5，每個(gè)編號(hào)樣品各取2 份)10份，加入25ml容量瓶中，加IOml人工胃液振搖均勻，水浴37°C放置2小時(shí)，每隔10 分鐘振搖一次。3.中和加IOmlO. 2MPH7. 8磷酸緩沖液，振搖使組合物分散均勻后3000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分
鐘，取上清液待測(cè)。4.纖維蛋白平板法測(cè)定活性保留率(1)纖維蛋白平板的制備稱(chēng)取纖維蛋白原，用30ml0. 1MPH7. 8PBS液配成濃度為0. 2% -0. 5%;稱(chēng)取凝血酶， 用ImlO. 1MPH7. 8PHS液溶解，配成濃度為0. 2% -0. 5%。稱(chēng)取瓊脂粉，加80ml0. 1MPH7. 8PHS 液，配成濃度為1.0% _2.0%，加熱煮沸，冷卻至50°C左右，將纖維蛋白原液與牛凝血酶液 加至瓊脂液中，輕輕搖勻后倒至平皿內(nèi)，用藥匙將氣泡去除，室溫冷卻，用打孔器打孔；
(2)用微量進(jìn)樣器移取各樣品酶液少許加至纖維蛋白平板孔中；(3)將上有樣品酶液的纖維蛋白平板置37°C烘箱內(nèi)溫育4小時(shí)；(4)用游標(biāo)卡尺測(cè)量溶圈直徑，計(jì)算酶活大小。表一納豆激酶組合物樣品耐酸性考察數(shù)據(jù)表 結(jié)論5批樣品耐酸性考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示用本方法制備的納豆激酶組合物在酸性條件 下活性得以改善。用本方法制備的5批納豆激酶組合物與上市3個(gè)產(chǎn)品相比耐酸性(樣品 活性保留率)具有明顯優(yōu)勢(shì)。納豆激酶組合物(樣品編號(hào)01)釋放度檢查方法小杯法，轉(zhuǎn)速100rpm，溫度37°C，釋放介質(zhì)0· lmol/LHCl IOOml中2小 時(shí)，分別于20min、40min、60min、80min、lOOmin、120min取樣，加入PH7. 8硼砂緩沖液中和作 為樣品溶液，測(cè)定酶活；120min取樣結(jié)束后，向杯中加入PH7. 8硼砂緩沖液100ml，繼續(xù)釋放 45分鐘，取樣，測(cè)定酶活。釋放介質(zhì)使用前脫氣處理。酶活測(cè)定方法(1)取試管加入1. 4ml硼砂緩沖液及0. 4ml纖維蛋白原，于37士0. 2°C水浴槽中，靜置5分鐘。(2)上述試管再加入0. Iml牛凝血酶液，并充分震蕩混合，于37士0. 2°C水浴槽中， 靜置10分鐘。(3)反應(yīng)組——步驟2完成，在精準(zhǔn)第10分鐘時(shí)，開(kāi)始加入0. Iml剛剛稀釋之樣 品溶液，并充分震蕩混合5秒，于37士0. 2°C水浴槽中，靜置1小時(shí)，并與20分鐘及40分鐘 后，各再進(jìn)行震蕩混合。對(duì)照組一步驟 2完成，在精準(zhǔn)第10分鐘時(shí)，開(kāi)始加入2ml三氯醋酸甲酯，并充分 震蕩混合，再加入0. Iml剛剛稀釋之樣品溶液，并充分震蕩混合，于37士0.2°C水浴槽中靜 置20分鐘。(4)反應(yīng)組的部分，在步驟3完成，在精準(zhǔn)第1小時(shí)，開(kāi)始加入2ml三氯醋酸甲酯， 并充分震蕩混合，于37士0. 2°C水浴槽中靜置20分鐘。(5)將試管中反應(yīng)物離心，12，OOOrpmlO分鐘。(6)反應(yīng)組及對(duì)照組分別取上清液測(cè)UV275nm之吸光值，并記錄之得反應(yīng)組吸光值 Ar及對(duì)照組吸光值A(chǔ)c。(7)根據(jù)吸光度計(jì)算酶活。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表二釋放實(shí)驗(yàn)2小時(shí)內(nèi)納豆激酶樣品溶液酶活測(cè)定數(shù)據(jù)表 由檢測(cè)結(jié)果可知用本方法制備的納豆激酶組合物中納豆激酶胃內(nèi)釋放度小于90%，確保組合物中大于10%的納豆激酶進(jìn)入到腸中釋放，納豆激酶經(jīng)腸吸收后發(fā)揮生理功效。
權(quán)利要求
一種納豆激酶組合物，其特征是所述納豆激酶組合物包括納豆激酶、成膜材料、成膜劑，所述成膜材料由纖維素酸酯類(lèi)、丙烯酸樹(shù)脂類(lèi)、聚乙烯醇酞酸酯、甲基丙烯酸共聚物、蟲(chóng)膠、玉米朊中的一種或多種與可溶性溶劑混合而成。
2.根據(jù)權(quán)力要求1所述的納豆激酶組合物，其特征是所述成膜劑由水和有機(jī)醇類(lèi)中 的一種或兩種混合而成。
3.根據(jù)權(quán)力要求1所述的納豆激酶組合物，其特征是所述納豆激酶組合物還添加有 稀釋劑。
4.根據(jù)權(quán)力要求3所述的納豆激酶組合物，其特征是所述稀釋劑由淀粉類(lèi)、糖類(lèi)、纖 維素類(lèi)、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、糖醇類(lèi)中的一種或多種混合而成。
5.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆激酶組合物的制備方法，其特征是所述制備方法 步驟如下a、按1 (3 19)的重量比例混合成膜材料與溶劑，制備成膜液；b、按(0. 5 2) 1的重量比例將納豆激酶加入到成膜液中，充分混合均勻；c、在步驟b的混合物中加 入0. 5 2倍量的成膜劑，充分混合均勻，并制備成軟材；d、軟材經(jīng)制粒、40-60°C干燥和整 粒工序制成納豆激酶組合物顆粒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備納豆激酶組合物的制備方法，其特征是將所述步驟d 制成的納豆激酶組合物顆粒進(jìn)行劑型轉(zhuǎn)化。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種納豆激酶組合物及其制備方法。一種納豆激酶組合物，包括納豆激酶、成膜材料、成膜劑，其制備方法為a、按1∶(3～19)的重量比例混合成膜材料與溶劑，制備成膜液；b、按(0.5～2)∶1的重量比例將納豆激酶加入到成膜液中，充分混合均勻；c、在步驟c的混合物中加入0.5～2倍量的成膜劑，充分混合均勻，并制備成軟材；d、軟材經(jīng)制粒、40-60℃干燥和整粒工序制成納豆激酶組合物顆粒。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為1、制備工藝簡(jiǎn)單易行、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、生產(chǎn)效率高、工藝生產(chǎn)設(shè)備投資少，制造成本低。2、利用簡(jiǎn)單工藝，改善了穩(wěn)定性，易人體吸收。
文檔編號(hào)A61K47/38GK101862447SQ201010125220
公開(kāi)日2010年10月20日 申請(qǐng)日期2010年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月16日
發(fā)明者徐華良, 肖潔瑾, 鄒麗萍, 顧瑜 申請(qǐng)人:蘇州市瑋琪生物科技有限公司