專利名稱：：一種陰道用酸性緩沖凝膠制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及陰道用凝膠制劑，具體涉及一種陰道用酸性緩沖凝膠制劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：育齡期女性，陰道粘膜在雌激素作用下，周期性脫落糖原，正常菌群分解代謝這些糖原，生成乳酸等酸性成分，使得陰道腔道內(nèi)環(huán)境呈酸性狀態(tài)(pH3.54.5)。陰道這種酸性環(huán)境有利于乳桿菌等保持優(yōu)勢菌群的地位，同時能夠抑制多種病原微生物的生長。而當(dāng)陰道微生態(tài)菌群處于失調(diào)狀態(tài)時，某些內(nèi)源性菌群或條件致病性微生物以及其它厭氧性菌群的顯著增加，當(dāng)某一類菌群(或滴蟲、支原體)增加到占優(yōu)勢地位時，就出現(xiàn)了陰道炎的臨床癥狀。因此生理性酸性被認(rèn)為是陰道的一個自我保護(hù)機(jī)制吳燕菁，王麗麗，陰道pH值監(jiān)測的臨床應(yīng)用，國外醫(yī)學(xué)計劃生育分冊，2003年22巻第3期148頁。為此，維持正常生理性酸性對預(yù)防和治療陰道細(xì)菌性陰道炎是非常有益的一種措施，可以大大減少抗生素的使用幾率，減少耐藥性的產(chǎn)生。直接使用乳酸進(jìn)行陰道pH調(diào)節(jié)存在諸多缺陷。主要存在以下問題1)乳酸是小分子有機(jī)酸，完全水溶性，沒有緩沖能力，pH過低，可能有剌激性。2)由于正常陰道內(nèi)腺體分泌的體液很快稀釋凝膠，流出體外，一天需要1到2次以上用藥方才有效。但是使用其他酸劑同樣存在類似的障礙。具有多羧酸基團(tuán)的交聯(lián)聚丙烯酸樹脂具有生物粘膜粘附性能，同時還具有一定的pH緩沖容量，已經(jīng)是制藥領(lǐng)域常用的藥用輔料，非常安全。目前臨床上實(shí)際使用的是其鈉鹽，比如最常用的凝膠材料卡波姆，在其成鈉鹽時才具有良好的黏度；溶脹而不溶解的聚卡波非(polycarbophil)是用其鈣鹽為通便劑。用其酸型作為陰道凝膠則具有酸性的pH緩沖容量，可以用作中和堿性物質(zhì)，維持腔道環(huán)境酸性的作用。正如歐洲專利EP1764100A公開的以無水固體狀態(tài)的交聯(lián)聚丙烯酸與小分子固體有機(jī)酸制備成栓劑，用作陰道pH酸性調(diào)節(jié)制劑，具有較長的持續(xù)作用時間。可是栓劑的使用還是非常不便，通常需要用手指推送；同時固體制劑與敏感的粘膜接觸，總是有不適感。美國專利申請?zhí)?9748753公開的聚卡波非為單一功能成分制備的凝膠，具有持久的陰道pH酸性維持作用。中國專利申請00805909.8采用交聯(lián)聚丙烯酸配合角叉菜聚糖和瓊脂糖制備成陰道凝膠藥物載體，可以改變小分子藥物從凝膠中釋放行為，達(dá)到快速釋放與緩釋相結(jié)合的目的。這至少利用該類型材料的生物粘附功能，未發(fā)揮其酸性緩沖能力。滿足具備長效陰道pH酸性維持作用的凝膠制劑，最終使用的成品，不可能靠單一的組份獲得。最適合陰道環(huán)境使用水性凝膠組合物，具有使用方便，易清洗等特點(diǎn)。但每一個處方的配制各不相同。比如，陰道凝膠如果不是最終滅菌的無菌制劑，則必須在配方中包括防腐劑。但防腐劑對陰道粘膜的剌激性以及對正常有益菌比如乳桿菌的影響與安全性和有效性密切相關(guān)。另外，凝膠具有一定粘稠度，對于需要控制pH值凝膠產(chǎn)品，通常需要在生產(chǎn)線上對配料罐內(nèi)的混合物料進(jìn)行pH值調(diào)節(jié)，使用氫氧化鈉溶液調(diào)高，鹽酸溶液調(diào)低，少量酸堿調(diào)節(jié)劑難以混合均勻，又要現(xiàn)場測試PH值，往往需要用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液反復(fù)來回多次調(diào)節(jié)才能獲得設(shè)定的pH值，結(jié)果帶入過量不需要的鹽分和溶劑，使得不同批次的產(chǎn)品差異很大。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用于調(diào)節(jié)女性陰道pH值的酸性緩沖凝膠制劑，由交聯(lián)聚丙烯酸類高分子有機(jī)酸與尼泊金酯類的鈉鹽制備而成，具有生物粘附能力和酸堿緩沖容量。該制劑施用于陰道后，具有維持陰道內(nèi)生理性酸性，l次使用可以維持不少于3天的效果；并且該制劑對有益菌乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)沒有殺滅作用，稀釋1倍后也不影響乳酸桿菌的繁殖。通過維持陰道pH值在3-4.5的生理性狀態(tài)，有利于正常的益生菌生產(chǎn)，保持陰道微生態(tài)的平衡，使得不耐酸性PH值的致病菌陰道加德納菌(Gardnerellavaginalis)就不能生長了，從而達(dá)到治療和預(yù)防細(xì)菌性陰道炎的功效。本發(fā)明還提供上述陰道用酸性緩沖凝膠制劑的制備方法，巧妙應(yīng)用尼泊金酯類中的三種化合物，即羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯三者固定比例的混合鈉鹽作為堿劑，革除了常規(guī)凝膠劑制備過程需要使用氫氧化鈉等酸堿試劑進(jìn)行pH調(diào)節(jié)的步驟，使得工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量均一性得到保證；羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯鈉鹽的比例不但實(shí)現(xiàn)了儲存期的防腐效果，同時兼顧施用于陰道后對乳桿菌為代表的健康菌群不產(chǎn)生殺滅或強(qiáng)的抑制作用，幫助恢復(fù)健康菌群抵制條件致病菌能力。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)—種陰道用酸性緩沖凝膠制劑，包括以聚卡波非和卡波姆為組份的酸劑，以羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯三者的鈉鹽為組分的堿劑，以及以由水和甘油為組分的溶劑。以重量份計，所述酸齊U、堿齊U、水和甘油的比例如下堿劑23份酸齊[J3033份甘油120130份水840850份。以重量份計，所述酸劑各組分的比例如下聚卡波非polycarbophil2份卡波姆Carbomer934P1份。以重量份計，所述堿劑各組分的比例如下羥苯甲酯鈉15份羥苯乙酯鈉3份羥苯丙酯鈉2份。所述制劑的pH值為3.3士0.2，且具備合適的緩沖當(dāng)量，5g凝膠中加入10ml0.lmol/L的氫氧化鈉溶液，稀釋后的凝膠pH值仍不大于6.0。這是通過對酸堿組份的精確配伍獲得的最優(yōu)技術(shù)方案，使得產(chǎn)品天然具有精確設(shè)計的PH值。所述制劑施用于人體陰道穹窿部位，具有維持腔道內(nèi)pH值小于4.5超過76小時4的性能。所述制劑對乳酸桿菌(Lactobacillusacidophilus)影響小，用生理鹽水稀釋l倍后即完全沒有抑制作用。這是通過對三種構(gòu)成堿劑的羥苯甲酯、乙酯和丙酯的鈉鹽比例進(jìn)行優(yōu)選獲得的，在該優(yōu)選組成比例和使用比例范圍內(nèi)，產(chǎn)品凝膠具有足夠的防腐性能，但施用部位后對乳桿菌的影響小，在體液的稀釋一倍左右即不影響乳桿菌的生長。這對幫助恢復(fù)陰道健康菌群的自我維持作用是重要的有益性質(zhì)。所述陰道用酸性緩沖凝膠制劑在維持腔道內(nèi)pH時的應(yīng)用。所述陰道用酸性緩沖凝膠制劑的制備方法，首先將甘油與水混合成為溶劑，加入酸劑，靜置6-12小時，攪拌使溶脹后的酸劑溶解，最后加入堿劑，攪拌使溶解，脫氣，即得該酸性緩沖凝膠制劑。其中，所述酸劑的配制如下聚卡波非為符合美國藥典USP31-NF26Page3021關(guān)于polycarbophil的質(zhì)量指標(biāo)的市售產(chǎn)品，卡波姆為符合歐洲藥典EP6.0pagel416關(guān)于carbomers的質(zhì)量規(guī)定，典型的商品是南京威爾化工有限公司的產(chǎn)品卡波姆，型號為934p。分別稱取上述兩種市售產(chǎn)品，按重量比，2份聚卡波非與1份卡波姆934p混合均勻，作為酸劑備用。其中，所述堿劑的配制如下羥苯甲酯鈉為符合美國藥典USP31-NF26Pagel176關(guān)于MethylparabenSodium質(zhì)量指標(biāo)的市售商品，羥苯乙酯鈉為符合歐洲藥典EP6.0pagel840關(guān)于Ethylparahydroxybenzoatesodium質(zhì)量指標(biāo)的市售商品，羥苯丙酯鈉為符合美國藥典USP31-NF26Page1217關(guān)于PropylparabenSodium質(zhì)量指標(biāo)的市售商品。分別稱取三種上述商品，羥苯甲酯鈉、羥苯乙酯鈉、羥苯丙酯鈉，按重量比15:3:2混合均勻，作為堿劑備用。上述所制得的陰道用酸性緩沖凝膠制劑采用單劑量一次性的鋁管、塑料管、塑料瓶以及陰道推注器進(jìn)行包裝。其中，本發(fā)明所選用的甘油是符合中國藥典2005年版二部68頁關(guān)于甘油的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的市售商品，水是符合藥用水質(zhì)量的自制純凈水。本發(fā)明的陰道用酸性緩沖凝膠制劑的各藥理實(shí)驗(yàn)分別如下—、對乳酸桿菌的影響試驗(yàn)乳酸桿菌是陰道內(nèi)正常菌叢中的優(yōu)勢菌，對維持陰道正常生理環(huán)境起重要作用，考察本品對嗜酸性乳酸桿菌(Lactobacillusacidophilus)影響。采用濾紙片瓊脂擴(kuò)散法考察本發(fā)明的酸性緩沖凝膠劑對培養(yǎng)的乳酸桿菌的生長影響。將MRS培養(yǎng)基與3X瓊脂液按1:l(質(zhì)量比)混合后，12rC，20分鐘滅菌。在超凈工作臺中完成下列操作，每培養(yǎng)皿中加入20mL混合液為底層培養(yǎng)基，凝固后，精取0.3ml新鮮增殖的乳酸桿菌液，注滿已鋪好底層的培養(yǎng)皿中。取無菌并干燥的圓形濾紙片(直徑為6mm)，每片滴加本發(fā)明不同濃度的酸性緩沖凝膠劑樣品溶液(用生理鹽水為稀釋劑)10yl，然后用鑷子將濾紙片輕輕放入培養(yǎng)皿中，對照品的操作類同于樣品，每個培養(yǎng)皿放3個樣品濾紙片，1個陽性對照片和l個陰性對照片，共5片。貼放好后，用無菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平皿表面，蓋好平皿。然后將培養(yǎng)皿放入產(chǎn)生厭養(yǎng)混合氣體的厭養(yǎng)罐中，置于37t:培養(yǎng)箱中厭養(yǎng)培養(yǎng)48小時后取出觀察結(jié)果。用卡尺測量抑菌圈的直徑，試驗(yàn)重復(fù)53次。試驗(yàn)結(jié)果表明，酸性緩沖凝膠劑在濃度100、200和400mg/ml時對培養(yǎng)的乳酸桿菌不產(chǎn)生抑菌圈，不稀釋時可產(chǎn)生直徑為(6.8±0.l)mm的抑菌圈，這是制劑中羥苯酯類的作用。凝膠用于陰道腔道部位后，在該部位的體液具有稀釋作用，使得凝膠對正常菌群沒有抑制作用。二、安全性試驗(yàn)本發(fā)明的陰道用酸性緩沖凝膠制劑，產(chǎn)品商品名稱為"陰道pH緩沖凝膠"，注冊商標(biāo)為"芭菲"，經(jīng)上海生物材料研究測試中心按GB/T16886.10-2005和GB/T16886.5-2003標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施陰道剌激試驗(yàn)、致敏試驗(yàn)和細(xì)胞毒性試驗(yàn)三項(xiàng)安全評價試驗(yàn)，檢測結(jié)果如下表1所示。結(jié)果表明產(chǎn)品無細(xì)胞毒性、無剌激性和無過敏性，非常安全。表1安全性試驗(yàn)檢測結(jié)果匯總(09)滬生研發(fā)字第939號<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>三、臨床試驗(yàn)5名診斷為細(xì)菌性陰道炎，年齡2540歲女性，婦科檢查中其陰道pH值^4.7;月經(jīng)干凈后第3天的患者，用婦科棉簽取陰道穹窿分泌物，測量pH值，測試用pH試紙為德國Macherey-Nagel公司生產(chǎn)的Pehanon品牌的精密pH試紙，作為基礎(chǔ)pH值；用5g規(guī)格的一次性使用的長尖嘴軟膏管包裝的本發(fā)明的酸性緩沖凝膠制劑，將約3.2g(有效擠出量)施用于陰道穹窿部位，同樣方法測定用藥后24、48、76小時的陰道pH值，結(jié)果如下表2所示。表2用藥前陰道基礎(chǔ)pH值5.2±0.3用藥后24h陰道pH值3.8±0.2用藥后48h陰道pH值3.8±0.2用藥后76h陰道pH值4.2±0.2從以上各試驗(yàn)結(jié)果可以看出本發(fā)明的成品凝膠制劑對有益菌乳桿菌沒有殺滅作用，稀釋后也不影響乳桿菌的繁殖。由于本發(fā)明將速效和長效組合在一個配方中，迅速起效的同時又能維持持續(xù)作用，起始24小時后pH值接近正常值下限3.5，76小時后保持pH值小于4.5。并且由于本發(fā)明揭示的制備方法，其生產(chǎn)過程不需要用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿調(diào)節(jié)pH值，無需頻繁檢測中間體的pH，因而制得的凝膠制劑的pH值準(zhǔn)確地處于3.3±0.2，非常接近生理性陰道pH值下限。采用酸劑和堿劑的特定配比參數(shù)，不需要酸堿調(diào)節(jié)步驟，成品黏度適中，易于施用。具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明的技術(shù)方案。實(shí)施例1配方1)堿劑(以重量份計)羥苯甲酯鈉15份羥苯乙酯鈉3份羥苯丙酯鈉2份2)酸劑(以重量份計)聚卡波非(polycarbophil)2份卡波姆(Carbomer934P)1份3)酸性凝膠制劑堿齊[J2g酸劑30g甘油120g水840g制備方法先將甘油與水混合均勻，加入酸劑，靜置12h，攪拌溶解，再加入堿劑，攪拌溶解，真空脫氣，即得本發(fā)明的酸性凝膠，分裝于5g規(guī)格的鋁塑復(fù)核軟膏管中。實(shí)施例2配方堿劑3g酸劑33g甘油130g水850g7其中酸劑、堿劑配方同實(shí)施例1。制備方法制備方法先將甘油與水混合均勻，加入酸劑，靜置6h，攪拌溶解，再加入堿劑，攪拌溶解，真空脫氣，即得本發(fā)明的酸性凝膠，分裝于5g規(guī)格的鋁塑復(fù)核軟膏管中。。實(shí)施例3配方堿劑2g酸劑31g甘油125g水845g其中酸劑、堿劑配方同實(shí)施例1。制備方法同實(shí)施例l。實(shí)施例4配方堿劑3份酸劑32份甘油125份水845份其中酸劑、堿劑配方同實(shí)施例1。制備方法同實(shí)施例l。實(shí)施例5性能測定一是直接用pH計(型號)測定凝膠的pH值為酸度，二是量取5g凝膠，加入10ml0.lml/L氫氧化鈉溶液，稀釋均勻后用相同pH計測定pH值為緩沖能力。實(shí)施例14制備的酸性緩沖凝膠制劑的結(jié)果如下表3所示。表3樣品酸度緩沖能力實(shí)施例13.315.81實(shí)施例23.225.57實(shí)施例33.355.83實(shí)施例43.305.62最后應(yīng)當(dāng)說明的是，以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍中。權(quán)利要求一種陰道用酸性緩沖凝膠制劑，其特征在于，包括以聚卡波非和卡波姆為組份的酸劑，以羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯三者的鈉鹽為組分的堿劑，以及以水和甘油為組分的溶劑；以重量份計，所述酸劑、堿劑、水和甘油的比例如下堿劑2～3份酸劑30～33份甘油120～130份水840～850份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑，其特征在于，以重量份計，所述酸劑各組分的比例如下聚卡波非polycarbophil2份卡波姆Carbomer934P1份。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑，其特征在于，以重量份計，所述堿劑各組分的比例如下羥苯甲酯鈉15份羥苯乙酯鈉3份羥苯丙酯鈉2份。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑，其特征在于，所述制劑的pH值為3.3±0.2。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑，其特征在于，所述制劑施用于人體陰道穹窿部位。6.—種制備權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑的方法，其特征在于，首先將甘油與水混合成為溶劑，加入酸劑，靜置6-12小時，攪拌使溶脹后的酸劑溶解，最后加入堿劑，攪拌使溶解，脫氣，即得該酸性緩沖凝膠制劑，其中該制備過程不需要調(diào)節(jié)中間體和產(chǎn)品的pH值。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述酸劑是由重量比為2:l的聚卡波非與波姆934p混合均勻制備而成的。8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述堿劑由重量比為15:3:2的羥苯甲酯鈉、羥苯乙酯鈉、羥苯丙酯鈉混合均勻制備而成的。9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所制得的陰道用酸性緩沖凝膠制劑采用單劑量一次性的鋁管、塑料管、塑料瓶以及陰道推注器進(jìn)行包裝。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陰道用酸性緩沖凝膠制劑在維持腔道內(nèi)pH時的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種陰道用酸性緩沖凝膠制劑，以聚卡波非和卡波姆為酸劑，以羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯三者的鈉鹽為堿劑，以水和甘油為溶劑，組成具有緩沖容量的pH緩沖體系。本發(fā)明還公開了該制劑的制備方法，制備過程中不需要用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿調(diào)節(jié)pH值，即無需頻繁檢測中間體的pH，使制得的酸性凝膠制劑的pH值準(zhǔn)確地處于3.3±0.2，非常接近生理性陰道pH值下限，1次使用可以維持不少于3天的效果。文檔編號A61K31/78GK101773516SQ20091019939公開日2010年7月14日申請日期2009年11月26日優(yōu)先權(quán)日2009年11月26日發(fā)明者傅麗君,單園園,方通,李若海,沈穎,潘俊芳,王安枝,王暉申請人:上海華拓醫(yī)藥科技發(fā)展股份有限公司