專利名稱：：一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種外用藥物組合物，具體涉及一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑。
背景技術(shù)：
：蜂膠是一種安全、無毒、溫和、有效的天然抗生素。近幾十余年來，大量的文獻資料證明，蜂膠對眾多種細菌、真菌、病毒同時具有抑制、殺滅作用，被稱為珍貴的天然廣譜抗生素物質(zhì)。目前，中國已成為世界上蜂膠生產(chǎn)量最多、而且是出口量最大的國家，長期以來由于缺乏對蜂膠的藥用價值進行系統(tǒng)深入的研究，國內(nèi)蜂膠市場的開發(fā)是九十年代初剛剛起步，雖然在國內(nèi)市場上已出現(xiàn)少量蜂膠保健產(chǎn)品，但90%以上仍處于低水平的開發(fā)利用，檢索證明國內(nèi)外尚未以蜂膠為原料開發(fā)出有價值、有影響、能代表高水平的藥物?，F(xiàn)有的皮膚病治療藥物市場主要是供應(yīng)化學(xué)藥與生物制劑，尚缺乏用于皮膚病治療的純中藥或天然藥物制劑.與中藥相比較，化學(xué)藥物雖然短時期內(nèi)療效明顯，但長期用藥不安全，毒副作用明顯,且藥效極期不穩(wěn)定，停藥后易使病情反復(fù)，治療成本較高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點，提供一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑。一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，由以下按重量百分比的組份制成蜂膠0.2-5%;95%乙醇1-20%;吐溫803-20%;冰片0.04-0.3%;甘草酸單銨鹽0.5-8%;余量為蒸餾水。所述噴劑優(yōu)選各組份的重量百分比為蜂膠0.8-3%;95%乙醇5-18%;吐溫804-10%;冰片0.05-0.15%;甘草酸單銨鹽0.7-4%;余量為蒸餾水。所述噴劑最優(yōu)選各組份的重量百分比為蜂膠1.2%;95%乙醇15%;吐溫805%;冰片0.1%;甘草酸單銨鹽2.5%;余量為蒸餾水。蜂膠作為主藥，取其消炎抗菌的功效。從加強其藥效協(xié)同作用及藥物穩(wěn)定性等方面來考慮，選取甘草酸單銨鹽做為協(xié)同作用的另一主藥。蜂膠不溶于水，用95%乙醇溶解提取其中的總黃酮類物質(zhì)時，無論是超聲、手動研磨或是攪拌機攪拌都很難完全溶解，所以選擇了吐溫80作為助溶劑加入其中幫助溶解。另外考慮到藥物是噴射到身體的表面創(chuàng)傷處，也選擇了有冰涼觸感的冰片作為芳香劑和收斂劑。一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，其制備方法如下取蜂膠加入95%乙醇中，邊攪拌邊加入吐溫80，然后緩慢加入蒸餾水，得到溶液1，將甘草酸單銨鹽高溫下，溶于蒸餾水中，溶解后冷卻，邊攪拌溶液l，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2，最后將冰片溶于95%乙醇中，將其加入到溶液2中，調(diào)節(jié)PH為4-6，裝瓶后即得噴劑。上述調(diào)節(jié)PH的試劑為氫氧化鈉或鹽酸。其中，蜂膠由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所提供，其質(zhì)量符合農(nóng)業(yè)部部頒標(biāo)準(zhǔn)；甘草酸單銨鹽購自內(nèi)蒙呼和浩特天壇甘草制品有限責(zé)任公司，含量》98.00%。產(chǎn)品代號Q/HTG04-1998。本發(fā)明的噴劑具有療效穩(wěn)定、毒副作用小、用藥安全，治療成本較低，適用于防治戰(zhàn)傷和特需環(huán)境引發(fā)的疾病的需要，能夠較好解決部隊在特需軍事環(huán)境下特需藥品的需要，亦可作為同類民用藥物資源的補充。具體實施例方式實施例1-6為配制本發(fā)明噴劑2000ml的制備方法，實施例7-11為本發(fā)明噴劑的藥理、藥效學(xué)實驗。實施例1取蜂膠16g，加入9596乙醇100ml，充分?jǐn)嚢琛Ｔ龠厰嚢柽吋尤胪聹?80，132ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水768ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽50g，9(TC高溫溶于1000ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45'C，邊攪拌溶液1，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取2g冰片溶于llml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的PH值約為5，裝瓶后即得噴劑。實施例2取蜂膠100g，加入95。/。乙醇388ml，充分?jǐn)嚢?。再邊攪拌邊加入吐?80，377ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水623ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽40g，9(TC高溫溶于600ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45°C，邊攪拌溶液1，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取3g冰片溶于12ml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的ra值約為5.5，裝瓶后即得噴劑。實施例3取蜂膠4g，加入95%乙醇25ml，充分?jǐn)嚢琛Ｔ龠厰嚢柽吋尤胪聹?80，57ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水1413ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽10g，9(TC高溫溶于500ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45°C，邊攪拌溶液1，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取lg冰片溶于5ml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的PH值約為5，裝瓶后即得噴劑。實施例4取蜂膠60g，加入95。/。乙醇434ml，充分?jǐn)嚢?。再邊攪拌邊加入吐?80，94ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水461ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽140g，9(TC高溫溶于1000ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45°C，邊攪拌溶液l，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取0.8g冰片溶于10ml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的PH值約為6，裝瓶后即得噴劑。實施例5取蜂膠24g，加入95Q/o乙醇300ml，充分?jǐn)嚢?。再邊攪拌邊加入吐?80，189ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水276ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽160g，9(TC高溫溶于1200ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45°C，邊攪拌溶液l，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取6g冰片溶于33ml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的PH值約為5.5，裝瓶后即得噴劑。實施例6取蜂膠24g，加入95Q/o乙醇330ml，充分?jǐn)嚢琛Ｔ龠厰嚢柽吋尤胪聹?80，95ml，充分?jǐn)嚢?。然后緩慢加入蒸餾水550ml，得到溶液1。精密稱取甘草酸單銨鹽50g，90。C高溫溶于1000ml的蒸餾水中。溶解后冷卻至45。C，邊攪拌溶液l，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2。最后稱取2g冰片溶于20ml的95%乙醇中，將其緩緩加入到溶液2中，調(diào)節(jié)溶液的PH值約為4.5，裝瓶后即得噴劑。下面結(jié)合藥理、藥效學(xué)實驗來說明該噴劑的藥效結(jié)果。實施例7抑菌作用液體試管抑菌法實驗菌株及來源乙型溶血性鏈球菌A群為中國人民解放軍第302院收治的急性咽峽炎，猩紅熱患者咽部分離所得；腦膜炎雙球菌A群、B群，單核細胞增多性李斯特氏菌、肺炎雙球菌，為302醫(yī)院的收治流腦、化膿性腦脊髓膜炎患者血液或腦脊液中分離獲得；乙型溶血性鏈球菌B群為世界衛(wèi)生組織質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)株；產(chǎn)黑色素擬桿菌、消化鏈球菌均購自中國人民解放軍第三O四醫(yī)院燒傷外科中心實驗室。實驗方法二倍濃縮的水解酪蛋白MH肉湯1毫升，加等量按實施例1方法配制的噴劑，配成1:1倍稀釋的噴劑肉湯。再與普通營養(yǎng)肉湯倍比稀釋至第七管，噴劑藥液的稀釋濃度順序排列為1:2，1:4，1:8，1:16，1:32，1:64，1:128，各加入上述已知菌液0.1毫升，搖勻，37°C24h后觀察結(jié)果。在乙型溶血性鏈球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎球菌每管加入小牛血清0.1毫升，以利細菌生長，每株測定以培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯作對照。厭氧菌按厭氧菌生長培養(yǎng)，牛心腦浸液代替普通肉湯稀釋噴劑，每株菌重復(fù)測試兩次。判定標(biāo)準(zhǔn)對照管細菌生長良好，肉湯混濁或有沉淀，取O.l毫升傳血平板，為該菌的純培養(yǎng)。如果測定管肉湯清，無混濁或沉淀，取0.1毫升液體傳備平板，無菌生長或僅生長1—5個菌落，均視為有抑制作用。實驗結(jié)果表1本發(fā)明噴劑對金黃色葡萄球菌等菌株抑菌試驗結(jié)果實驗菌株(編號)噴劑最低抑實驗菌株(編號)噴劑最低抑菌菌濃度濃度乙型溶血性鏈球菌A群乙型溶血性鏈球菌B群(1)1:2(7)1:1(2)1:2腦膜炎雙球菌A群(1)1:16(3)1:128(2)1:6(4)1:4腦膜炎雙球菌B群1:32(5)1:4月巿炎球菌1:2(6)1:1單核細胞增多性李斯特氏1:1菌產(chǎn)黑色素擬桿菌1:4消化鏈球菌1:1由表1可知，本發(fā)明的噴劑對引起急性咽峽炎與猩紅熱的致病菌乙型溶血性鏈球菌A群有良好的直接抑菌效果，臨床標(biāo)本分離的6株菌無耐藥株；腦膜炎雙球菌A群、B群對低濃度的本發(fā)明噴劑敏感；對齒齦炎、牙周炎的致病菌產(chǎn)黑色素擬桿菌和消化鏈球菌有抑制效果。實施例8抗炎作用1)小鼠耳廓二甲苯致炎試驗將昆明種小鼠(雌雄兼用，體重1822g)隨機分為5組，每組10只。陰性對照組、陽性藥組、給藥組三個劑量組。陽性藥組給氫化可的松軟膏(規(guī)格:10g:100mg，北京雙吉制藥有限公司，批號20060924)，涂藥量為0.lg，給藥組給本發(fā)明實施例6制備的噴劑，三個劑量分別為每次0.15、0.3和0.6ml，實驗當(dāng)日給小鼠耳廓分別涂藥1次，lh后各組以蒸餾水洗去藥物，用干棉球擦凈。給小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml/只，左耳作對照，15min后處死，用直徑6mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，分別稱重，以左、右耳片重量之差為腫脹程度。計算各組腫脹度，求出腫脹抑制率。其中，腫脹抑制率(％)=(陰性對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/陰性對照組平均腫脹度X100。/。本發(fā)明的噴劑3個劑量組對二甲苯所致小鼠耳廓腫的有明顯抑制作用，與陰性對照組比較有顯著性差異(P〈0.01,〈0.05),且隨著劑量增大而抑制作用增強，結(jié)果見表2。表2本發(fā)明噴劑對小鼠耳廓二甲苯致炎的抗炎作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與陰性對照組比較，f<0.05,尸<0.012)大鼠蛋清足跖腫脹試驗將Wistar大鼠(雌雄各半，體重120180g)隨機分為6組，每組10只。Cl組生理氯化鈉溶液；C2組為陰性對照；C3組陽性對照(氫化可的松軟膏，規(guī)格10g:100mg，北京雙吉制藥有限公司，批號20060924);C4、C5、C6為本發(fā)明實施例6噴劑的三個劑量組。各組給藥量見表3。實驗前按毛細管放大測量法測定各組大鼠右后足的正常體積，實驗當(dāng)日各組涂藥，lh后，各組右后足跖皮下注射100%新鮮蛋清0.05ml/只，同時再涂藥1次。測定致炎后1、2、4、6h的右后足體積。各大鼠致炎前后足跖體積的差值為腫脹度，比較各組腫脹度的差異。本發(fā)明噴劑高、中、低3個劑量組隨著劑量增大其抑制大鼠足跖腫脹的作用增強。高、中、低劑量組與陰性對照組比較有顯著性差異(P〈0.01,P〈0.05)，與陽性對照組比較無顯著性差異。低劑量組與陰性對照組比較，陰性對照無明顯的抗炎作用，結(jié)果見表3。表3本發(fā)明噴劑對大鼠蛋清足跖腫脹的影響組別給藥量/次致炎前足跖體積(ml)致炎后不同時間足跖腫脹度(ml)1246(h)Cl0.1mL1.08±0.040.52±0.110.56±0.080.48±0.100.42±0.06C2-1.08±0.080.47±0.120.51±0.140.43±0.150.37±0.13C3O.lg1.12±0.070.32±0.13c0.39±0.15c0.33±0.lc0.28±0.12bC40.6ml1.06土0.060.34±0.10e0.38±0.12e0.31±0.08c0.27±0.06cC50.3ml1.12±0.070.36±0.12b0.39±0.07c0.33±0.12b0.29±0.08bC6O.lml1.14±0.050.37±0.llb0.42±0.120.39±0.100.34±0.16注與陰性對照組比較，尸<0.05,戶O.Ol實施例9止癢作用試驗將豚鼠(雌雄兼用，體重250400g)隨機分為5組,每組10只。分別為陰性對照組；陽性對照組(復(fù)方薄荷腦止癢霜，規(guī)格:20g/盒，解放軍第307醫(yī)院制劑室，批號20070324);本發(fā)明實施例6噴劑三個劑量組。各組給藥量見表4。試驗前l(fā)d，給各組豚鼠右后足背剃毛，分別涂藥1次。試驗當(dāng)日，用粗砂紙擦傷足背剃毛處，面積lcm2，各組局部再涂藥1次，末次涂藥后10min，開始在創(chuàng)面處滴0.01。/。磷酸組織胺(規(guī)格:25mg/支，中國藥品生物檢定所，批號:20070203)溶液，0.05ml/次/只，此后每隔3min依0.01%、0.02%、0.03%、0.04%遞增濃度，均為0.05ml/次/只。直至出現(xiàn)豚鼠回頭舔右后足止，以最后出現(xiàn)豚鼠回頭舔右足時所給予的磷酸組織胺總量為致癢閾，記錄并比較各組的致癢閾。本發(fā)明噴劑有明顯提高豚鼠對磷酸組致癢閾的作用，陽性對照組與陰性對照組比較，噴劑高、中劑量組有非常顯著性差異(P〈0.Ol);低劑量組也有顯著性差異(P0.05)。結(jié)果見表4。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與陰性對照組比較，PO.05,尸<0.01實施例10皮膚刺激試驗1)實驗方法實驗動物為健康大耳白種兔(來源于軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物中心)，體重2-3kg，雌雄不分，共6只實驗動物。實驗前將兔背部脊柱兩側(cè)脫毛而不損傷皮膚，脫毛面積為兩側(cè)5X10cm(約為體表面積為10%)。一塊脫毛區(qū)作正常皮膚剌激試驗，分為給藥區(qū)與對照區(qū)。給藥區(qū)涂抹按實施例1制得的噴劑0.2ml;對照區(qū)涂以等量的生理鹽水，用一層油紙兩層紗布覆蓋，再用膠布固定。另一塊脫毛區(qū)作損傷皮膚刺激試驗，給藥前用針頭在脫毛區(qū)皮膚上劃出形擦傷，直徑2cm，以刺傷表皮，不傷真皮，有輕度滲血為度。涂藥方法同前；另一側(cè)作對照。給藥24小時后，用濕紗布洗去藥物；分別記錄l、24、48及72小時給藥部位出現(xiàn)紅斑和水腫的情況。2)皮膚刺激反應(yīng)的評定標(biāo)準(zhǔn)無刺激(-)無異常所見；輕度剌激(+):充血、紅斑；中度刺激(++):紅斑，少量出血點，水腫，少量血疹、小水皰形成；嚴(yán)重刺激(+++):紅腫、皮下出血、水腫、小水皰合并大小皰、糜爛、潰瘍形成。結(jié)果見表5，給藥組均未出現(xiàn)紅斑和水腫的情況，本發(fā)明噴劑無皮膚刺激作用。表5皮膚剌激實驗結(jié)果動物編號給藥組對照組1一一2—一3—一4—5—-6——實施例11皮膚過敏試驗豚鼠40只，雌雄各半，體重250-330克。將動物隨機分為4組，每組10只。(1)陰性對照組，(2)按實施例1制得的本發(fā)明噴劑，(3)賦形劑組(所用賦形劑為甘油)，(4)1%2，4—二硝基氯苯(上海試劑一廠生產(chǎn))組(陽性對照組)。實驗前24小時在豚鼠背部左側(cè)，仔細剪出22cm的去毛區(qū)。按皮膚涂抹法給藥。致敏接觸各給藥組分別涂以0.2ml藥液于去毛區(qū)，對照組涂予等量自來水持續(xù)6小時，試驗第一天與第十四天以同樣方式重復(fù)給藥。第28天激發(fā)給藥，用同樣方法將各組藥物分別涂于動物背部右側(cè)去毛區(qū)，6小時后洗去受試物，即刻觀察，然后于24、48及72小時再次觀察皮膚病過敏反應(yīng)情況，按表6-A標(biāo)準(zhǔn)進行評分并按表6-B評價受試藥物的致敏強度，試驗結(jié)果見表7。表7的結(jié)果表明，藥物2，4一二硝基氯苯在激發(fā)給藥6小時后即出現(xiàn)明顯輕、重度紅斑，輕度水腫，致敏率100%，而其他各給藥組均無過敏反應(yīng)。表6-A皮膚過敏反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)皮膚反應(yīng)分值紅斑形成無紅斑0輕度紅斑，勉強可見1中度紅斑，明顯可見2重度紅斑3紫紅色紅斑并有焦痂4水腫形成無水腫0輕度水腫，勉強可見1中度水腫，明顯可見2重度水腫皮膚隆起lmra，輪廓清晰3嚴(yán)重水腫，皮膚隆起lmm以上并有擴大或水泡或破潰4總分8表6-B皮膚致敏性評價標(biāo)準(zhǔn)致敏率(％)皮膚致敏性評價O-IO無致敏性11-30輕度致敏性31-60中度致敏性61-80高度致敏性81-100極度致敏性13表7對豚鼠皮膚過敏反應(yīng)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>權(quán)利要求1、一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，其特征在于，由以下按重量百分比的組份制成蜂膠0.2-5％；95％乙醇1-20％；吐溫803-20％；冰片0.04-0.3％；甘草酸單銨鹽0.5-8％；余量為蒸餾水。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，其特征在于，所述噴劑各組份的重量百分比為蜂膠0.8-3%;95%乙醇5-18%;吐溫804-10%;冰片0.05-0.15%;甘草酸單銨鹽0.7-4%;余量為蒸餾水。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，其特征在于，所述噴劑各組份的重量百分比為蜂膠1.2%;95%乙醇15%;吐溫805%;冰片0.1%;甘草酸單銨鹽2.5%;余量蒸餾水。4、權(quán)利要求1所述防治皮膚損傷與抗感染的噴劑的制備方法，其特征在于，按上述組份和重量百分比配制，取蜂膠加入95%乙醇中，邊攪拌邊加入吐溫80，然后緩慢加入蒸餾水，得到溶液l，將甘草酸單銨鹽高溫下，溶于蒸餾水中，溶解后冷卻，邊攪拌溶液l，邊緩慢加入上述甘草酸單銨鹽溶液中，得到溶液2，最后將冰片溶于95%乙醇中，將其加入到溶液2中，調(diào)節(jié)PH為4-6,裝瓶后即得噴劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種防治皮膚損傷與抗感染的噴劑，屬于中藥制劑領(lǐng)域。該噴劑由以下按重量百分比的組份制成蜂膠0.2-5％；95％乙醇1-20％；吐溫803-20％；冰片0.04-0.3％；甘草酸單銨鹽0.5-8％；余量為蒸餾水；本發(fā)明的藥物是一種防治皮膚損傷與抗感染的中藥噴劑。該噴劑療效穩(wěn)定、毒副作用小、用藥安全，治療成本較低。文檔編號A61P17/02GK101584715SQ20091008716公開日2009年11月25日申請日期2009年6月10日優(yōu)先權(quán)日2009年6月10日發(fā)明者蔡光明,趙艷玲申請人:中國人民解放軍第三○二醫(yī)院