專利名稱：一種行氣血中藥成分的篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥成分篩選領(lǐng)域，具體涉及一種"行氣血"中藥成分的 篩選方法；本發(fā)明利用激光多普勒微血管功能測(cè)定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通 過穴位篩選出中藥中具有提高微血管舒縮活動(dòng)振幅的中藥成分；該篩選方 法包括的步驟依次為確定穴位、導(dǎo)入藥物、測(cè)定數(shù)據(jù)、整理分析數(shù)據(jù)。
背景技術(shù)：
增強(qiáng)經(jīng)絡(luò)的"行氣血"功能是中藥治療疾病的最大特色和優(yōu)勢(shì)，古醫(yī) 書所記載的大部分中藥都具有"行氣血"功能。而至目前，有關(guān)如何衡量 經(jīng)絡(luò)的"行氣血"功能，如何判定中藥對(duì)其調(diào)節(jié)作用，尚無研究和.報(bào)道。
現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)理論基本上屬于對(duì)抗醫(yī)學(xué)范疇，對(duì)抗醫(yī)學(xué)的致命缺 陷有二 l.對(duì)致病因子即對(duì)抗目標(biāo)不明的疾病，無有效的治療措施；2.由 于病原體與機(jī)體細(xì)胞、疾病細(xì)胞與正常細(xì)胞間廣泛的分子同質(zhì)性，故在現(xiàn) 代醫(yī)學(xué)理論指導(dǎo)下研發(fā)的治療性藥物根本無法回避其毒副作用的問題。
現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)存在諸多缺陷，其原因在于其理論體系還很不完善。 現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)的指導(dǎo)理論是，細(xì)胞是構(gòu)成生命體的最基本單位，致病 因子導(dǎo)致細(xì)胞的功能受損是發(fā)生疾病的根本原因，消除致病因子和調(diào)控受 損細(xì)胞的功能是治療疾病的基本措施。此理論的缺陷在于忽視了生命體 在漫長(zhǎng)的進(jìn)化中形成了一套維持細(xì)胞環(huán)境的結(jié)構(gòu)，忽視了此結(jié)構(gòu)抗致病因 子傷害的功能下降或喪失進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞微環(huán)境失衡是發(fā)生疾病的根本原 因，忽視了通過改善此結(jié)構(gòu)及其功能進(jìn)而改善細(xì)胞微環(huán)境達(dá)到治療疾病目 的的措施。
由于中(獸)醫(yī)藥學(xué)中，治則的確定，勿需深入了解具體的致病因子 (在古代也不可能了解)，僅需辨明致病因子誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的證候即可； 藥物基本無毒副作用。故通過加強(qiáng)中(獸)醫(yī)藥學(xué)的研究，彌補(bǔ)現(xiàn)代(獸) 醫(yī)藥學(xué)的不足、完善現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)的理論，是眾多現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)研究工作者的渴望。然而，歷經(jīng)半個(gè)多世紀(jì)的中(獸)醫(yī)藥學(xué)的現(xiàn)代科學(xué) 之研究，不但無任何實(shí)質(zhì)性的進(jìn)展、未獲得機(jī)理明確和成分明確的新(獸) 藥，不但對(duì)現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)發(fā)展無重大的推動(dòng)，反而引來了反對(duì)中醫(yī)存 在的聲音。導(dǎo)致此局面的根本原因在于中(獸)醫(yī)藥學(xué)防治疾病的現(xiàn)代 科學(xué)內(nèi)涵一直沒有突破；眾多的研究者將在現(xiàn)代(獸)醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)下 的對(duì)天然藥物的研究理解為對(duì)中藥的研究。由鑒于此，闡明中(獸)醫(yī)藥 學(xué)防治疾病的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵，在此基礎(chǔ)上探索、構(gòu)建篩選中藥有效成分的 方法，已成中(獸)醫(yī)藥學(xué)現(xiàn)代研究的關(guān)鍵問題。
因此，科研中和實(shí)際生產(chǎn)中均需要提供一種全新"行氣血"中藥成分 的篩選方法，能夠方便、快捷、有效地篩選出具有"行氣血"功能的中藥 成分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種"行氣血"中藥成分的篩選方法；本發(fā)明利 用激光多普勒微血管功能測(cè)定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通過穴位篩選出中藥中 具有提高微血管舒縮活動(dòng)振幅的中藥成分；該篩選方法包括的步驟依次 為確定穴位、導(dǎo)入藥物、測(cè)定數(shù)據(jù)、分析數(shù)據(jù)；本發(fā)明篩選出多種具有 提高相關(guān)經(jīng)穴皮內(nèi)微血管舒縮活動(dòng)振幅的功能的、并具有廣泛藥理作用的 中藥成分。
本發(fā)明的目的是由下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，利用激光多普勒微血管功能測(cè) 定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通過穴位篩選出中藥中具有提高微血管舒縮活動(dòng)振 幅的中藥成分；該篩選方法包括的步驟依次為
I .確定穴位
根據(jù)中藥成分所屬原藥的歸經(jīng)選取將要導(dǎo)入中藥成分的試驗(yàn)穴位，再 確定試驗(yàn)動(dòng)物身上所述的試驗(yàn)穴位，最后確定穴位的精確位置，并作標(biāo)記；
II.導(dǎo)入藥物
A.配制生物成分樣品
將所述的中藥成分溶于0.9%生理鹽水，使其使用濃度為0. 1-0. 2%，得到生物成分樣品；采用所述的0.9%生理鹽水作為陰性對(duì)照； B.將所述的生物成分樣品加入加樣儀器內(nèi)；
III. 測(cè)定數(shù)據(jù)
A. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥前血流量結(jié)果；
B. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥后血流量結(jié)果；
在測(cè)定的過程中，所述的激光多普勒的檢測(cè)位點(diǎn)即為離子導(dǎo)入儀的導(dǎo) 入所述的生物成分樣品的位點(diǎn)；
IV. 整理分析數(shù)據(jù)
將整個(gè)血流量檢測(cè)過程中得到的血流量變化結(jié)果中的血流量變化曲 線進(jìn)行壓縮處理，得到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅的變化；
如果該微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說明該成分具有"行氣血"的功
能；
選取振幅變化均勻的一段所述的血流量變化曲線進(jìn)行頻率分析，可得 到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，將該相對(duì)功率值進(jìn)行比較
該相對(duì)功率值升高，即說明微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說明所述的 中藥成分具有"行氣血"的功能，即說明微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說
明所述的中藥成分具有"行氣血"的功能；所述的導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn) 動(dòng)的相對(duì)功率值的變化情況為導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為導(dǎo)藥前的相對(duì)功率值
的1.2—3.7倍。
本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)
1. 本發(fā)明源于對(duì)經(jīng)穴實(shí)質(zhì)和針灸機(jī)理的突破，其的技術(shù)方案顯著有別 于已有的研究和技術(shù)；
2. 本發(fā)明利用激光多普勒微血管功能測(cè)定儀結(jié)合利用離子導(dǎo)入儀，根 據(jù)血流量的變化篩選治療心血管病藥物的研究已有報(bào)道，但利用中藥成分 所屬原藥的歸經(jīng)選擇穴位、根據(jù)微血管舒縮活動(dòng)振幅的變化篩選藥物的方 法則尚無報(bào)道；3. 本發(fā)明除了能篩選行血的中藥成分外，還能直接用于了解中藥、中 藥方劑的水浸液是否具有行氣血的作用；
4. 本發(fā)明篩選藥物的過程快速、無創(chuàng)傷、結(jié)果判斷直觀。


圖1:穴位點(diǎn)(上)與非穴位點(diǎn)(下)的微血管群自律運(yùn)動(dòng)圖； 圖2:同一經(jīng)脈線上不同穴位點(diǎn)間微血管群同步舒縮運(yùn)動(dòng)圖； 圖3:不同經(jīng)脈線上穴位點(diǎn)間微血管群同步舒縮運(yùn)動(dòng)圖； 圖4:電刺激對(duì)穴位點(diǎn)有序態(tài)微血管群自律運(yùn)動(dòng)圖5:艾灸某一穴位后同一經(jīng)線上其它穴位點(diǎn)有序態(tài)微血管群自律運(yùn) 動(dòng)圖6 :艾灸某一穴位后對(duì)側(cè)同名經(jīng)上其他穴位點(diǎn)有序態(tài)微血管群自律 運(yùn)動(dòng)圖7:重量百分比為0. 9%的NaCl溶液對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖8:小檗堿對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖9 :苦參堿對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖10:綠原酸對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖ll:川芎嗪對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖12:黃芪苷對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖13:淫羊藿苷對(duì)微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅影響圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1:
一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，利用激光多普勒微血管功能測(cè) 定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通過穴位篩選出中藥中具有提高微血管舒縮活動(dòng)振 幅的中藥成分。該篩選方法包括的步驟依次為如下
I .確定穴位
選取將要導(dǎo)入中藥成分的試驗(yàn)穴位，再用中獸醫(yī)常規(guī)定位方法確定試 驗(yàn)動(dòng)物身上所述的試驗(yàn)穴位，最后用低電阻穴位測(cè)定儀確定穴位的精確位 置，并作標(biāo)記；所述的選取方法為根據(jù)中藥成分所屬原藥的歸經(jīng)選取將要導(dǎo)入中藥 成分的試驗(yàn)穴位，該選取方法屬于中獸醫(yī)常規(guī)理論，記載于《中藥學(xué)》(顏 正華，人民衛(wèi)生出版社)、《中藥藥理學(xué)》(沈映君，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社) 和《中獸醫(yī)學(xué)》(于船，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社)；
本實(shí)施例中要導(dǎo)入的中藥成分為小檗堿，是中藥黃連的成分之一；黃 連性苦、寒，歸心、肝、胃和大腸經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位選取大腸經(jīng) 中的前三里穴；該穴位位于試驗(yàn)動(dòng)物的前臂外側(cè)上部，橈骨上、中l(wèi)/3交 接處，腕橈側(cè)伸肌與指總伸肌之間的肌溝中；左右側(cè)各一穴，任選一穴； 所述的定穴方法記載于《中獸醫(yī)學(xué)》(于船，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社)；
所述的試驗(yàn)動(dòng)物為選取性情溫順、體質(zhì)健康的成年比格犬，品種不限； 該試驗(yàn)動(dòng)物不需要麻醉；
II.導(dǎo)入藥物
A. 配制生物成分樣品
將所述的中藥成分溶于重量百分比為0.9%的NaCl溶液，使其使用濃 度為0.1-0.2%,得到生物成分樣品；該中藥成分為標(biāo)準(zhǔn)品，純度為95%以 上；購(gòu)自中國(guó)藥品生物藥品檢定所；采用所述的重量百分比為0.9。/。的NaCl 溶液作為陰性對(duì)照；
本實(shí)施例中所用的中藥成分為小檗堿；
B. 將所述的生物成分樣品加入加樣儀器內(nèi)； 加樣方法的具體步驟為
a. 用注射器在所述的加樣層中滴加所述的生物成分樣品；所述的加樣 采用的儀器為內(nèi)壁置有加樣層的電極固定器，購(gòu)自PerimedAB公司；所 述的加樣的量為O.lml;
b. 將光纖探頭置入固定器，使光纖探頭和固定器在同一平面內(nèi)，用醫(yī) 用膠布粘接固定器背側(cè)；
. 對(duì)準(zhǔn)標(biāo)記的所述的試驗(yàn)穴位，將探頭和固定器完全固定在試驗(yàn)動(dòng)物 的皮膚表面，避免探頭、固定器緊壓皮膚影響局部血液循環(huán)；III. 測(cè)定數(shù)據(jù)
A. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥前血流量結(jié)果；
所述的測(cè)定采用的儀器是多普勒血流儀，型號(hào)PF5010，購(gòu)自瑞典
Perimed公司；
具體的操作為設(shè)置多普勒時(shí)間常數(shù)至0.2，選用激光多普勒血流監(jiān) 測(cè)單元；待設(shè)置完成，監(jiān)測(cè)對(duì)象穩(wěn)定，血流量出現(xiàn)穩(wěn)定的正弦性周期性變 化時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)記錄，得到導(dǎo)藥前血流量結(jié)果；
在測(cè)定的過程中，所述的激光多普勒的檢測(cè)位點(diǎn)即為離子導(dǎo)入儀的導(dǎo) 入所述的生物成分樣品的位點(diǎn)；
B. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥后血流量結(jié)果；
具體的操作為在連續(xù)記錄所述的導(dǎo)藥前血流量結(jié)果5min后，打開 離子導(dǎo)入儀開關(guān)，導(dǎo)入所述的生物成分樣品，繼續(xù)動(dòng)態(tài)記錄25min，得到 導(dǎo)藥后血流量結(jié)果；整個(gè)過程中保證探頭及電極位置的恒定；
所述的離子導(dǎo)入儀的準(zhǔn)備工作應(yīng)在所述的血流量測(cè)定檢測(cè)之前完成；
所述的準(zhǔn)備操作為連接該離子導(dǎo)入儀電極線，將陽(yáng)極連于固定器電 極，陰極粘連在離穴位10-15cm處皮膚；調(diào)節(jié)所述的離子導(dǎo)入儀電流和時(shí) 間，使導(dǎo)入電流為0.16A，導(dǎo)入時(shí)間為60s;
離子導(dǎo)入儀的型號(hào)為儀PF 382b，購(gòu)自瑞典Perimed公司；
IV. 整理分析數(shù)據(jù)
將整個(gè)血流量檢測(cè)過程中得到的血流量變化結(jié)果中的血流量變化曲 線用Perimed分析軟件進(jìn)行壓縮處理，得到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅 的變化；
如果該微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說明該成分具有"行氣血"的功
能；
選取振幅變化均勻的一段所述的血流量變化曲線進(jìn)行頻率分析，可得 到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，將該相對(duì)功率值進(jìn)行比較該相對(duì)功率值升高，即說明微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說明所述的 中藥成分具有"行氣血"的功能，即說明微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說 明所述的中藥成分具有"行氣血"的功能；
本實(shí)施例中，NaCl為陰性對(duì)照。從圖7可以看出用藥前后最大的功率 峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為6.1周/分鐘，此頻率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥前后相對(duì)功率值分別 為1.07和1.08，差異不大。
本實(shí)施例中，如圖8所示，在導(dǎo)入小檗堿5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流量 升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即振 幅提高；用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻率 分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為6.6周/分鐘，此 頻率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為2.65，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為1.53;所述的 導(dǎo)藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率 值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的1.732倍。由此可知，所述的小檗堿能夠顯著提 高微血管自律運(yùn)動(dòng)的振幅，說明所述的小檗堿具有"行氣血"的功能。
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法建立在以下研究確 定的理論基礎(chǔ)之上-
一.提出并證實(shí)經(jīng)絡(luò)的實(shí)質(zhì)是微血管系統(tǒng)、經(jīng)脈的實(shí)質(zhì)是皮內(nèi)處于相 對(duì)低血壓區(qū)的有序態(tài)微血管網(wǎng)絡(luò)、穴位的實(shí)質(zhì)是穴區(qū)皮內(nèi)呈有同步舒縮功 能的微血管群。
通過對(duì)皮膚組織進(jìn)行切片觀察，及體表皮膚經(jīng)脈與穴位點(diǎn)微血管生理 特點(diǎn)測(cè)定，證實(shí)了經(jīng)脈和穴位點(diǎn)微血管群同時(shí)具有形態(tài)有序性和功能有序 性的特點(diǎn)，形成了對(duì)經(jīng)脈和穴位實(shí)質(zhì)問題的獨(dú)特觀點(diǎn)。為闡明經(jīng)穴的實(shí)質(zhì) 提供了形態(tài)學(xué)和生理學(xué)實(shí)驗(yàn)資料。經(jīng)脈線區(qū)皮內(nèi)微血管網(wǎng)絡(luò)存在的結(jié)構(gòu)有 序和功能有序的特性能合理地闡明絕大多數(shù)的經(jīng)絡(luò)現(xiàn)象，闡明了不同經(jīng)脈 穴位間的差異，闡明了穴區(qū)皮內(nèi)微血管的功能特性，確定了穴位的實(shí)質(zhì)。
l.研究方法概述
1.1.形態(tài)學(xué)研究
在低阻線取寬3 mm、長(zhǎng)5-10 mm、深度達(dá)肌肉或骨膜的組織塊；或者以穴位為中心，取直徑3-5mm深及皮下組織的組織塊；同時(shí)取臨近低阻線 或者穴位區(qū)的皮膚組織作為對(duì)照，制作石蠟切片，H.E.染色后在光鏡觀察 分析。
1. 2 .生理學(xué)研究
以在健康的成年比格犬為研究對(duì)象，利用激光多普勒微循環(huán)血流測(cè)定 儀，測(cè)定經(jīng)穴區(qū)微血管群的生理活動(dòng)特點(diǎn)，并與臨近非經(jīng)穴區(qū)進(jìn)行比較。
2 .結(jié)果
2. 1 .形態(tài)有序性
組織學(xué)研究表明，只有皮膚是所有經(jīng)脈和穴位共有的結(jié)構(gòu)，其他諸如 筋膜、骨骼肌、骨膜等在經(jīng)穴區(qū)的分布都沒有普遍性；肯定了小型豬低阻 線區(qū)皮內(nèi)微血管分布較相鄰部位皮膚顯著豐富，且具有普遍性；肯定了小 型豬低阻線區(qū)皮內(nèi)微血管的分布具有結(jié)構(gòu)有序的特性，即經(jīng)脈區(qū)皮內(nèi)微血 管具有沿經(jīng)伸展的特性。
研究表明，穴區(qū)皮內(nèi)微血管的分布顯著比非穴區(qū)豐富，微動(dòng)脈的密度 顯著大于非穴區(qū)。血流量的測(cè)定表明，穴區(qū)皮內(nèi)的血流量比非穴區(qū)顯著豐 富，肯定了穴區(qū)皮內(nèi)微血管豐富的組織學(xué)研究結(jié)果。
2.2.功能有序性
由圖1可見，穴位區(qū)皮內(nèi)的微血管群具有同步舒縮的特性，而非穴位 區(qū)皮內(nèi)的微血管舒縮不同步。由圖2和圖3可見，同一經(jīng)脈線上不同穴位 之間，其皮內(nèi)微血管群舒縮活動(dòng)的頻率相同(圖2)，不同經(jīng)脈穴位間皮內(nèi) 微血管群舒縮活動(dòng)的頻率不同(圖3)。
二.發(fā)現(xiàn)并證實(shí)針灸穴位能顯著提高穴區(qū)皮內(nèi)微血管群舒縮活動(dòng)的振幅。
在針灸療法中，患者的"得氣"和針灸師的"滯針"感常作為判斷穴 位是否被激活的依據(jù)。我們研究提出"經(jīng)脈的實(shí)質(zhì)是皮內(nèi)有序態(tài)微血管網(wǎng) 絡(luò)、穴位的實(shí)質(zhì)是皮內(nèi)呈有同步舒縮功能的微血管群"，為進(jìn)一步研究穴 位區(qū)有序態(tài)的微血管群在受到有效刺激后如何體現(xiàn)穴位被激活，檢測(cè)了針 灸后穴位點(diǎn)有序態(tài)微血管群舒縮活動(dòng)特性的變化，以直觀的方法判定穴位的激活。
具體操作是首先確定穴位點(diǎn)，用激光多普勒微循環(huán)血流測(cè)定儀記錄穴 位點(diǎn)有序態(tài)微血管群舒縮活動(dòng)的基礎(chǔ)值，然后施與一段時(shí)間的電刺激，再 次對(duì)同一點(diǎn)的有序態(tài)微血管舒縮活動(dòng)進(jìn)行測(cè)定，觀察其變化。結(jié)果可見電 針刺激后，有序態(tài)微血管群自律運(yùn)動(dòng)的振幅上調(diào)(圖4)，而頻率無顯著變 化。試驗(yàn)顯示穴位被激活的根本因素是顯著提高了穴位區(qū)微血管群舒縮活 動(dòng)的振幅，而振幅的提高，與微血管舒縮活動(dòng)的增強(qiáng)和同步舒縮活動(dòng)的微 血管數(shù)增加呈正相關(guān)。
三發(fā)現(xiàn)并證實(shí)針灸穴位提高了該穴區(qū)皮內(nèi)微血管群舒縮活動(dòng)的振幅 后，能通過擴(kuò)散、沿經(jīng)脈傳遞、在神經(jīng)的節(jié)段性反射發(fā)生共振等途徑使其 它相關(guān)部位的微血管舒縮活動(dòng)振幅提高。
研究己經(jīng)表明，穴位的激活主要表現(xiàn)在皮內(nèi)有序態(tài)微血管群自律運(yùn)動(dòng) 的振幅提高；考慮到針灸具有循經(jīng)傳遞的作用，而穴位的激活如果確實(shí)與 有序態(tài)微血管群自律運(yùn)動(dòng)的振幅提高相關(guān)，那針灸的作用循經(jīng)傳遞后也應(yīng) 能引起同一條經(jīng)上其它穴位點(diǎn)有序態(tài)微血管群自律運(yùn)動(dòng)的振幅提高，為了 證明這一設(shè)想，進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。
研究對(duì)象為健康成年的比格犬，試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為兩部分， 一是針灸某一 穴位點(diǎn)，對(duì)同一經(jīng)線上其它穴位點(diǎn)的影響；二是針灸某一穴位點(diǎn)，對(duì)對(duì)側(cè) 同名經(jīng)上穴位點(diǎn)的影響。用穴位定位儀確定穴位，進(jìn)行標(biāo)記。間隔24小 時(shí)后，按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在某一穴位點(diǎn)刺激，在另一穴位點(diǎn)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)， 并同時(shí)監(jiān)測(cè)臨近非同一經(jīng)線或者同名經(jīng)線上任一穴位點(diǎn)的變化。結(jié)果可見 針灸后，受刺激穴位產(chǎn)生的信息既能影響該穴位所處經(jīng)脈線上的其它穴位 (圖5)，又能影響機(jī)體對(duì)側(cè)的與受刺激穴位同名的穴位及其經(jīng)脈線(圖6)， 而對(duì)照點(diǎn)均無變化。此結(jié)果表明穴位激活后對(duì)組織的影響具有特異性， 針灸的療效與穴位的選擇密切相關(guān)；穴位激活后信息的傳遞是通過直接傳 遞(沿經(jīng)脈線)和神經(jīng)的特異性反射兩條途徑實(shí)現(xiàn)的，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中可 能存在能使頻率相同的微血管群發(fā)生共振的核團(tuán)。
四.通過電針治療椎間盤脫(突)出說明電針能夠顯著改善后軀的微 循環(huán)機(jī)能，這種作用可能通過增加微循環(huán)振幅和舒縮頻率，從流速的變化來看可能也通過擴(kuò)張血管恢復(fù)流速正常，最終實(shí)現(xiàn)增加血流量和血液濃 度的作用。本研究記載于論文"椎間盤脫(突)出犬相關(guān)穴位微循環(huán)變化 及電針效應(yīng)初探"(陳武，婁威等；中國(guó)獸醫(yī)雜志，2004年(第40巻)
第11期)。
中(獸)醫(yī)指出"氣為血之帥，血為氣之母，血隨氣行，氣滯血瘀"， 可見經(jīng)絡(luò)的"行氣血"功能與微血管功能密不可分。生理學(xué)研究表明，在 組織水平血液在微血管內(nèi)流動(dòng)的主要?jiǎng)恿碓从谖⒀鼙旧淼闹芷谛允?縮運(yùn)動(dòng)，亦即微血管自律運(yùn)動(dòng)。因此，可將微血管自律運(yùn)動(dòng)理解為"氣"， 其振幅的大小可直接反映經(jīng)絡(luò)的"行氣血"功能。前期的研究表明，穴位 區(qū)皮內(nèi)的微血管具有同步舒縮的特性，其內(nèi)的血液流動(dòng)呈規(guī)律的正弦性變 化，并且在針灸作用下其振幅顯著提高。因而，在本實(shí)施例中，以穴位區(qū) 皮內(nèi)微血管自律運(yùn)動(dòng)的振幅為指標(biāo)，篩選能夠提高自律運(yùn)動(dòng)振幅的藥物， 是篩選"行氣血"中藥成分的有效方法。利用本實(shí)施例中所述的方法篩選 的中藥成分與對(duì)應(yīng)中藥在醫(yī)書上記載的"行氣血"功效完全吻合。
實(shí)施例2:
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法與實(shí)施例l相同， 本實(shí)施例所使用的儀器、設(shè)備、試劑與也實(shí)施例l相同；本實(shí)施例中所用 的中藥成分為苦參堿，品質(zhì)與來源與實(shí)施例1相同。
本實(shí)施例中所述的苦參堿，是中藥苦參成分之一；苦參性苦、寒；歸 心、肝、胃、大腸和膀胱經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位為大腸經(jīng)中的前三里 穴；該穴位的選取方法與實(shí)施例l相同。
本實(shí)施例中，如圖9所示，在導(dǎo)入苦參堿5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流量 升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即振 幅提高。用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻率 分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為7.6周/分鐘，此頻 率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為0.311，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為0.245;所述的 導(dǎo)藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率 值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的1.269倍。由此可知所述的苦參堿能夠提高導(dǎo)藥 后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，所述的苦參堿具有"行氣血"的功能。實(shí)施例3:
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法與實(shí)施例l相同， 本實(shí)施例所使用的儀器、設(shè)備、試劑與也實(shí)施例l相同；本實(shí)施例中所用 的中藥成分為綠原酸，品質(zhì)與來源與實(shí)施例1相同。
本實(shí)施例中所述的綠原酸，是中藥金銀花的成分之一，金銀花性甘、 寒；歸肺、胃、大腸經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位為大腸經(jīng)中的前三里穴； 該穴位的選取方法與實(shí)施例1相同。
本實(shí)施例中，如圖10所示，在導(dǎo)入綠原酸5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流 量升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即 振幅提高。用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻 率分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為5.7周/分鐘，此 頻率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為0.99，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為0.70;所述的 導(dǎo)藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率 值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的1.414倍。由此可知所述的綠原酸能夠提高導(dǎo)藥 后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，所述的氨茶堿具有"行氣血"的功能。
實(shí)施例4:
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法與實(shí)施例l相同， 本實(shí)施例所使用的儀器、設(shè)備、試劑與也實(shí)施例l相同；本實(shí)施例中所用 的中藥成分為川芎嗪，品質(zhì)與來源與實(shí)施例l相同。
本實(shí)施例中所述的川芎嗪，是中藥川芎的成分之一；川芎辛、溫，入 肝、膽、心包經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位選取膽經(jīng)中的陽(yáng)陵穴；該穴位位 于試驗(yàn)動(dòng)物的膝關(guān)節(jié)后方，脛骨外髁上緣的凹陷處；左右各一穴，任選一 穴；所述的定穴方法記載于《中獸醫(yī)學(xué)》(于船，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社)。
本實(shí)施例中，如圖11所示，在導(dǎo)入川芎嗪5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流量 升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即振 幅提高。用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻率 分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為6.6周/分鐘，此頻 率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為1.33，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為0.89;所述的導(dǎo) 藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的1.494倍。由此可知所述的川芎嗪能夠提高導(dǎo)藥后 微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，所述的川芎嗪具有"行氣血"的功能。
實(shí)施例5:
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法與實(shí)施例l相同， 本實(shí)施例所使用的儀器、設(shè)備、試劑與也實(shí)施例l相同；本實(shí)施例中所用 的中藥成分為黃芪苷，品質(zhì)與來源與實(shí)施例1相同。
本實(shí)施例中所述的黃芪苷，是中藥黃芪成分之一；黃芪性甘、微溫， 入脾、肺經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位選取肺經(jīng)中的肺俞穴；該穴位位于試 驗(yàn)動(dòng)物軀干部倒數(shù)第三肋間，距背中線12cm的髂肋肌溝中；左右側(cè)各一 穴，任選一穴；所述的定穴方法記載于《中獸醫(yī)學(xué)》(于船，中國(guó)農(nóng)業(yè)出 版社)。
本實(shí)施例中，如圖12所示，在導(dǎo)入黃芪苷5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流 量升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即 振幅提高。用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻 率分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為3.8周/分鐘，此 頻率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為0.55，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為0.36;所述的 導(dǎo)藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率 值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的1.528倍。由此可知所述的黃芪苷能夠提高導(dǎo)藥 后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，所述的黃芪苷具有"行氣血"的功能。
實(shí)施例6:
本實(shí)施例中所述的"行氣血"中藥成分的篩選方法與實(shí)施例l相同， 本實(shí)施例所使用的儀器、設(shè)備、試劑與也實(shí)施例l相同；本實(shí)施例中所用 的中藥成分為淫羊藿苷，品質(zhì)與來源與實(shí)施例1相同。
本實(shí)施例中所述的淫羊藿苷，是中藥淫羊藿的成分之一；淫羊藿性辛、 溫，歸腎經(jīng)，故本實(shí)施例的試驗(yàn)穴位選取腎經(jīng)中的腎堂穴；該穴位位于試 驗(yàn)動(dòng)物最后腰椎與第一間椎脊突之間的凹陷旁開6cm處，左右側(cè)各一穴， 任選一穴；所述的定穴方法記載于《中獸醫(yī)學(xué)》(于船，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社)。
本實(shí)施例中，如圖13所示，在導(dǎo)入黃芪苷5分鐘后穴位區(qū)皮內(nèi)血流量升高，同時(shí)直觀顯示出每個(gè)波形的血流量變化幅度明顯大于導(dǎo)藥前，即 振幅提高。用所述的多普勒血流儀所帶頻率分析軟件進(jìn)行頻率分析，從頻 率分析報(bào)告得出用藥前后最大的功率峰所對(duì)應(yīng)的頻率值為5.2周/分鐘，此
頻率對(duì)應(yīng)的導(dǎo)藥后相對(duì)功率值為1.34，導(dǎo)藥前相對(duì)功率值為0.37;所述的
導(dǎo)藥后相對(duì)功率值大于所述的導(dǎo)藥前相對(duì)功率值，所述的導(dǎo)藥后相對(duì)功率
值為導(dǎo)藥前相對(duì)功率值的3.633倍。由此可知所述的淫羊藿苷能夠提高導(dǎo) 藥后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，所述的淫羊藿苷具有"行氣血"的功
權(quán)利要求
1.一種“行氣血”中藥成分的篩選方法，其特征在于利用激光勒微血管功能測(cè)定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通過穴位篩選出中藥中具有提高微血管舒縮活動(dòng)振幅的中藥成分。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特 征在于該篩選方法包括的步驟依次為I .確定穴位根據(jù)中藥成分所屬原藥的歸經(jīng)選取將要導(dǎo)入中藥成分的試驗(yàn)穴位，再 確定試驗(yàn)動(dòng)物身上所述的試驗(yàn)穴位，最后確定穴位的精確位置，并作標(biāo)記；II. 導(dǎo)入藥物A. 配制生物成分樣品將所述的中藥成分溶于重量百分比為0.9%的NaCl溶液，使其使用濃度為0.1-0.2%，得到生物成分樣品；B. 將所述的生物成分樣品加入加樣儀器內(nèi)；III. 測(cè)定數(shù)據(jù)A. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥前血流量結(jié)果；B. 測(cè)定所述的試驗(yàn)動(dòng)物的導(dǎo)藥后血流量結(jié)果；IV. 整理分析數(shù)據(jù)將整個(gè)血流量檢測(cè)過程中得到的血流量變化結(jié)果中的血流量變化曲 線進(jìn)行壓縮處理，得到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅的變化；選取振幅變化均勻的一段所述的血流量變化曲線進(jìn)行頻率分析，可得 到導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值，將該相對(duì)功率值進(jìn)行比較該相對(duì)功率值升高，即說明微血管自律運(yùn)動(dòng)振幅提高，即說明所述的 中藥成分具有"行氣血"的功能。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的導(dǎo)藥前后微血管自律運(yùn)動(dòng)的相對(duì)功率值的變化情況為導(dǎo) 藥后相對(duì)功率值為導(dǎo)藥前的相對(duì)功率值的1.2—3.7倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的試驗(yàn)動(dòng)物為成年比格犬。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分為小檗堿、苦參堿、氨茶堿、綠原酸、參皂苷、 川芎嗪、黃芪苷、淫羊藿苷中的一種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分小檗堿、苦參堿導(dǎo)入的試驗(yàn)穴位為前三里穴。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分小檗堿、苦參堿、綠原酸導(dǎo)入的試驗(yàn)穴位均為前 三里穴。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分川芎嗪導(dǎo)入的試驗(yàn)穴位為陽(yáng)陵穴。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分黃芪苷導(dǎo)入的試驗(yàn)穴位為肺俞穴。
10. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種"行氣血"中藥成分的篩選方法，其特征在于所述的中藥成分黃芪苷導(dǎo)入的試驗(yàn)穴位為腎堂穴。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥成分篩選領(lǐng)域，具體涉及一種“行氣血”中藥成分的篩選方法；本發(fā)明利用激光多普勒微血管功能測(cè)定儀結(jié)合離子導(dǎo)入儀，通過穴位篩選出中藥中具有提高微血管舒縮活動(dòng)振幅的中藥成分；該篩選方法包括的步驟依次為確定穴位、導(dǎo)入藥物、測(cè)定數(shù)據(jù)、整理分析數(shù)據(jù)。本發(fā)明篩選出多種具有提高相關(guān)經(jīng)穴皮內(nèi)微血管舒縮活動(dòng)振幅的功能的、并具有廣泛藥理作用的中藥成分。本發(fā)明源于對(duì)經(jīng)穴實(shí)質(zhì)和針灸機(jī)理的突破，其的技術(shù)方案顯著有別于已有的研究和技術(shù)；本發(fā)明除了能篩選行血的中藥成分外，還能直接用于了解中藥、中藥方劑的水浸液是否具有行氣血的作用；篩選藥物的過程快速、無創(chuàng)傷、結(jié)果判斷直觀。
文檔編號(hào)A61B5/026GK101683534SQ20091008001
公開日2010年3月31日 申請(qǐng)日期2009年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月17日
發(fā)明者濤 張, 段慧琴, 祥 穆, 索占偉, 格 胡, 虹 董, 武 陳 申請(qǐng)人:北京農(nóng)學(xué)院