專利名稱：一種含有蛋白酶抑制劑的口服胰島素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本項(xiàng)發(fā)明涉及到高分子化學(xué)技術(shù)，更特別的是，這種技術(shù)可應(yīng)用于胰島素的口服 途徑給藥中多聚體凝膠組分的合成。這種組合物可以用來制備治療糖尿病的藥物。
背景技術(shù)：
生物界研究成果大大的擴(kuò)大了蛋白類藥物在疾病治療方面的應(yīng)用。然而，由于缺 乏一種方便有效的藥物給藥途徑，使得蛋白類藥物的應(yīng)用受到很大的限制?？诜緩浇o藥 是最舒適和方便的方法，但是通常這種方法不能夠應(yīng)用于蛋白類藥物。因?yàn)榈鞍最愃幬?必須要克服人體內(nèi)的三道屏障(1)在胃器官中由于強(qiáng)酸性環(huán)境和蛋白水解酶作用而被分 解；(2)在小腸中被胰蛋白酶降解；(3)多肽組分中三種以上的氨基酸在腸道中不易被吸 收。如何能夠中和蛋白水解酶的降解作用是最具挑戰(zhàn)性的課題。這也是為什么蛋白水解作 用是限制蛋白類藥物經(jīng)胃腸道給藥的最重要的因素。因此，能夠通過口服途徑給藥的蛋白 或多肽類藥物到達(dá)最終目的地(循環(huán)系統(tǒng))，就必須能夠耐受化學(xué)和酶的作用，并且能夠穿 過腸粘膜。人體內(nèi)的胰島素由胰腺合成，被分泌到與肝門靜脈連接的血管中。這種血管中 同時(shí)將腸道中消化所得的產(chǎn)物送往肝臟。胰島素的作用就是控制肝臟對(duì)于消化產(chǎn)物的吸收 作用。在正常情況下，這種消化原料和控制劑同時(shí)產(chǎn)生并且被送往組織器官。因此，肝臟控 制胰島素通過的量。I型糖尿病患者胰臟不能夠產(chǎn)生胰島素，需要給病人皮下注射胰島素針 劑。在這種情況下，肝臟顯然不能夠控制體內(nèi)胰島素的含量，通常會(huì)導(dǎo)致一系列并發(fā)癥，例 如動(dòng)脈硬化，心臟病，腦功能受限等。胰島素的主要給藥途徑為皮下和肌肉注射。這種方法 在重復(fù)了幾百次甚至上千次以后，患者的生理和心理都會(huì)感到不適。因此，口服胰島素具有 很大優(yōu)點(diǎn)。多年來，人們一直致力于研究一種能夠抵抗消化蛋白，并且能夠通過腸粘膜滲透 入血液中的口服胰島素藥物制劑。針對(duì)這一問題，提出了幾種解決方案，包括將胰島素分子自身進(jìn)行修飾，例如將C 端氨基酸殘基用更穩(wěn)定的甘氨酸殘基替換；胰島素分子的疏水化；制備單糖衍生物或者將 胰島素分子和其它蛋白相結(jié)合。然而，卻始終沒有能夠應(yīng)用于口服給藥的胰島素制劑。解決這一問題的方法之一是將胰島素和能夠提高其腸道壁穿透力并且協(xié)助其進(jìn) 入血液中的復(fù)合物聯(lián)合使用。能夠應(yīng)用于這一途徑的化合物有脂肪酸鹽，表面活性劑，膽汁 鹽類和螯合化合物。對(duì)于腸道壁滲透性增強(qiáng)就能夠使得到達(dá)血流中的有活性的胰島素含量 增加，但是如果只是將胰島素直接經(jīng)過食道和胃而送入腸道中，即使服用很大的劑量，該胰 島素也不具有療效，如果將胰島素和蛋白酶抑制混合使用，那么在腸道給藥時(shí)，就能夠保護(hù) 胰島素不被蛋白酶破壞。利用含有蛋白酶抑制劑，胰島素和能夠提高腸道滲透力的組合物 的混合組分，通過口服途徑給藥時(shí)，可以達(dá)到相同的效果。最近，比較熱門的口服胰島素制備方法是將胰島素用外殼包裹。這種外殼能夠保 護(hù)胰島素通過消化道，然后在小腸中分解，釋放出有活性的胰島素。脂質(zhì)體，水凝膠，微囊或 可被生物體降解的多聚體材料可以用來制作這種衣殼。文章(U. S. Pat. No. 5，049，545)中，將胰島素固定在了一種多聚體水凝膠中制成混合物，可以通過注射途徑給藥。這種多聚體是由淀粉，葡聚糖，聚氧乙烯，聚乙烯吡咯烷 酮，交聯(lián)膠原質(zhì)，蛋白和其衍生物，包括蛋白水解酶抑制劑所組成。這種含有胰島素的復(fù)合 物對(duì)蛋白水解酶的耐性增強(qiáng)，并且使得胰島素在血流中的作用時(shí)間延長(zhǎng)。然而，這項(xiàng)工作中 合成的含有胰島素的多聚體混合物在消化酶的作用下卻不能夠顯示出足夠的穩(wěn)定性，因此 無法應(yīng)用于口服途徑。文章(Saffran，M.，Kumar, G. S.，et al, Biochem. Soc. Trans.)中，描述了一種含 有胰島素的多聚體混合物，這是一種含有胰島素的凝膠膠囊，被苯乙烯和羥乙基甲基纖維 素和二乙烯基苯含氮衍生物交聯(lián)所得的共聚物所包裹?？诜o藥后，胰島素被釋放后，在穿 過腸道壁進(jìn)入血液的過程中，交聯(lián)共聚物在腸道微生物作用下被降解。這種混合物的缺點(diǎn) 是在消化酶的作用下穩(wěn)定性會(huì)降低，因而滲透入血流中的胰島素活性降低。口服給藥3-4 小時(shí)后，共聚物在大鼠體內(nèi)的含量為1到40mg/大鼠(以胰島素計(jì)算)，平均血糖濃度最大 降低了 25% (從 384mg. /100ml.到 287mg. /100ml)。文章(Damge，C.，J. Controlled Release,)中，合成了一種球狀微囊，它是一種生 物可降解的聚異丁烯-2-氰基丙烯酸酯，直徑為250-350nm。胰島素在其內(nèi)以液體形式分 布。然而，這種微囊制劑在經(jīng)口服給藥后，只有在胰島素劑量(100U/kg)很高的情況下，才 能起到明顯降血糖效果(25% )，并且只有在給藥六天之后，該藥物才能開始發(fā)揮作用。與本發(fā)明最相關(guān)文章(Greenley, R. Z.，Broun, T. M.，et al, Polymer Prepr.)中 提到了一種高分子聚合物，這種聚合物是將胰島素固定在了被蛋白水解酶抑制劑所修飾的 交聯(lián)共聚物上。這種共聚物實(shí)質(zhì)上是一種聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸和三乙烯糖脂類的交聯(lián) 產(chǎn)物，抑肽酶_蛋白酶抑制劑作為抑制劑。這種混合物的缺點(diǎn)是，合成的聚合物水凝膠對(duì)于 消化酶的抗性很低，導(dǎo)致胰島素的血液穿透率降低。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較的優(yōu)勢(shì)，采用卵類粘蛋白做蛋白水解酶抑制劑，卵類粘蛋 白可以和蛋白水解酶特異性結(jié)合，一個(gè)分子卵類粘蛋白可以結(jié)合兩個(gè)分子蛋白酶，從而避 免胰島素被蛋白水解酶降解破壞，胰島素在卵類黏蛋白的保護(hù)下，可以不被消化道中的胰 蛋白酶破壞，順利到達(dá)小腸。到達(dá)小腸后，卵類黏蛋白上的糖基組分和腸道壁上的外源凝集 素發(fā)生特異性結(jié)合，從而使得含胰島素凝膠體能夠聚集在腸道壁上，胰島素被釋放，并滲透 入血液。其制劑的生物利用度達(dá)到同劑量皮下注射胰島素20%以上，并且這種多聚體凝膠 的制劑可以用來治療糖尿病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是防止蛋白類藥物被蛋白水解酶水解，從而使得藥物能夠通過消化系 統(tǒng)被吸收。這種方法是將藥物固定于攜帶有糖蛋白(由鴨蛋白中分離得到的卵類黏蛋白) 的水凝膠多聚體上。這種糖蛋白可以抑制蛋白水解酶的作用并且可以作為腸道壁上外源凝 集素的生物特異性配體。提高包含胰島素的多聚物水凝膠對(duì)消化酶的抗性。從而使得該制 備物能夠應(yīng)用于口服給藥。這一目標(biāo)可以通過被蛋白水解酶抑制劑修飾，并且固定有胰島素的水凝膠來實(shí) 現(xiàn)，這種蛋白水解酶抑制劑是由鴨蛋白中分離得到的卵類粘蛋白。卵類粘蛋白是一種糖蛋 白，分子量大約31000。一個(gè)卵類粘蛋白分子包括12. 5%的葡糖胺和7. 8%的其它糖類。鴨蛋中提取卵類粘蛋白，以此作為蛋白酶抑制劑和生物吸收促進(jìn)劑。卵類粘蛋白用丙烯酰氯酰氯化后，與丙烯酰胺連接，再與丙烯酰胺，甲叉雙丙烯酰胺、過硫酸銨、四甲基 乙二胺形成共聚物，然后聚合成高分子聚合體的水凝膠體。將此水凝膠體冷凍干燥，胰島素 溶液分子通過吸收溶脹的方式進(jìn)入水凝膠體網(wǎng)孔中，加入一定量的賦形劑，可進(jìn)一步制備 成腸溶膠囊或腸溶片劑?？诜o藥后，胰島素在卵類黏蛋白的保護(hù)下，可以不被消化道中的 胰蛋白酶破壞，順利到達(dá)小腸。到達(dá)小腸后，卵類黏蛋白上的糖基組分和腸道壁上的外源凝 集素發(fā)生特異性結(jié)合，從而使得胰島素凝膠體能夠聚集在腸道壁上，胰島素被釋放，并滲透 入血液。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較的優(yōu)勢(shì)在于，其制劑的生物利用度達(dá)到同劑量皮下注射胰 島素20%以上，并且這種多聚體凝膠的制劑可以用來治療糖尿病。下面通過實(shí)施例介紹一下工藝過程，但本發(fā)明并不局限于實(shí)施例的內(nèi)容和范圍。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1卵類粘蛋白的分離、提取、純化卵類粘蛋白的分離，首先將100g鴨蛋白放入瓶中，并安裝有攪拌器。將2. 7g三氯 乙酸和27. 3g蒸餾水中，制成溶液。然后將70g乙醇和30g三氯乙酸溶液(總共100g)加 入盛有鴨蛋白的瓶中，以3 5ml/min的速度滴加進(jìn)行攪拌。在所有混合溶液都加入以后， 再繼續(xù)攪拌40min。溫度控制在15 25°C，然后將沉淀過濾，丟棄。濾液轉(zhuǎn)移到瓶中，加入 550g乙醇，將沉淀放入蒸餾水中進(jìn)行透析，溶液冷凍干燥，可得到卵類粘蛋白粗品1. 5g，經(jīng) 離子交換層析柱純化，得卵類粘蛋白純品約0. 9g。實(shí)施例2口服胰島素多聚體水凝膠制備工藝流程①取卵類粘蛋白0. 8g，溶解于100ml0. 1M的NaHC03pH8. 0 8. 4溶液中，在冰浴下 磁力攪拌，緩慢滴加入0. lml丙烯酰氯(避光、低溫保存)，同時(shí)觀察pH變化，加入丙烯酰氯 溶液會(huì)變酸，如果偏酸就用固體NaHC03調(diào)于8. 0 8. 4，冰浴攪拌90min，防止丙烯酰氯逸 出。形成丙烯酰胺卵類粘蛋白的固定化修飾物。②在上述100ml溶液中加入8g丙烯酰胺，0. 4g甲叉雙丙烯酰胺，0. lg-0. 15g過 硫酸銨，于室溫?cái)嚢璩浞秩芙?，倒入圓底燒瓶中，加入0. 2ml四甲基乙二胺，混勻，抽真空 30min,關(guān)閉真空放置60min，得到水凝膠體。③將水凝膠體粉碎，擠壓，過20目篩網(wǎng)，用水凝膠體積數(shù)十倍的注射用水充分磁 力攪拌冼滌，除去丙烯酰胺，卵類粘蛋白等，一天內(nèi)換注射用水3次，用水冼滌4天，濾液用 紫外法監(jiān)控A23(1±2 ( 0. 003.(此為丙烯酰胺的紫外光吸收值)，監(jiān)控A28(1±2 ( 0. 003 (此為卵 類粘蛋白的紫外光吸收值)，達(dá)到要求后，置于凍干機(jī)中冷凍干燥，真空度60mbar，抽真空 48h，凍成粉晶，稱量，得固定化修飾含有卵類粘蛋白的聚丙烯酰胺約8克。④水凝膠體中卵類粘蛋白結(jié)合能力檢測(cè)分別配制0.1M NaHC03 pH8. 4 ；0. 2M KCI-HCI pH 1. 87 ；0. 05M Tris-HCI pH8. 0， 0. 1M NaCI 溶液。備注胰蛋白酶可以與卵類粘蛋白形成類似配體與供體的結(jié)合構(gòu)象，在pH8.0的 條件下，二者可以形成配基結(jié)合，lmol卵類粘蛋白可以結(jié)合2mol胰蛋白酶分子，在pHl. 87
5的條件下，破壞二者的結(jié)合，二者分離，以此特性評(píng)價(jià)卵類粘蛋白結(jié)合量和加入胰島素量。稱取上述0. lg凍干的水凝膠粉，加入3ml 0. 1M pH8. 4的NaHC03溶液，溶脹3小 時(shí)以上。將溶脹的水凝膠體倒入下端接有軟管夾子的&垂熔濾器中，分別依次用0. 1M NaHC03pH8. 4 溶液；0. 2M KCI-HCI pH 1. 87 溶液；0. 05M Tris-HCI pH8. 0,0. 1M NaCI 溶液， 冼滌水凝膠體，洗滌濾液至k華≤0. 003 ；A280±2 ≤ 0. 003。取30mg胰蛋白酶溶于5ml 0. 005N HCI溶液中，充分溶解，加入15ml 0. 05M Tris-HCI pH8. 0,0. lMNaCI溶液，定容至20ml，至此在20ml溶液中有30mg胰蛋白酶。將上述溶液加入上述的G3垂熔濾器中，夾住下端的軟管，用玻璃棒攪拌1. 5小時(shí) 后，打開夾子，用500ml的容器收集流出液，用0. 05M Tris-HCI pH8. 0,0. 1M NaCI沖冼，洗 滌濾液至A23(i±2 ≤0. 003 ；A280±2 ≤ 0. 003。繼續(xù)收集流出液，(其實(shí)收集的是未與卵類粘蛋 白結(jié)合的胰蛋白酶)，精確量取500ml容器中收集液的體積義，測(cè)定A■值，計(jì)算未結(jié)合的胰 蛋白酶的濃度而(未結(jié)合的胰蛋白酶濃度)=A280±2*0. 7 (k = 0. 7，為吸光系數(shù))，& (未結(jié) 合的胰蛋白酶量)=%*&。夾住軟管，加入0. 2M KCI-HCI pHl. 87的溶液，沖冼G3垂熔濾器中的水凝膠體，用 另一個(gè)500ml的容器收集流出液，洗滌濾液至A23Q±2 ( 0. 003 ；A280±2 ( 0. 003，(此部分是卵 類粘蛋白結(jié)合胰蛋白酶量)，精確稱量收集流出液的體積V2，測(cè)定k280±2值，則C2 (結(jié)合的胰 蛋白酶濃度)=A28。±2*0.7，X2 (結(jié)合的胰蛋白量)=C2*V2，30mg-Xl X2(X2比XI精確)， 以此結(jié)果評(píng)判0. lg水凝膠體干粉能結(jié)合多少毫克胰蛋白酶，并以此推斷計(jì)算lg水凝膠干 粉能結(jié)合多少毫克胰蛋白酶。(此指標(biāo)也是佐證卵類粘蛋白在水凝膠體中存在量控制指標(biāo)， 對(duì)控制產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要)。根據(jù)lmol數(shù)卵類粘蛋白可以結(jié)合2mol數(shù)的胰蛋白酶，可初 步推算，lg水凝膠干粉結(jié)合了多少毫克卵類粘蛋白，根據(jù)在動(dòng)物體內(nèi)的藥效情況，初步確認(rèn) lg水凝膠干粉可以保護(hù)多少單位的胰島素。⑤胰島素水凝膠的制備在100ml pH2. 2純化水中，加40mg(lmg胰島素相當(dāng)25U)胰島素，充分溶解。取 10g水凝膠體凍干粉，加入100ml上述胰島素水溶液，充分溶脹吸收，置于凍干機(jī)中冷凍干 燥，真空度60mbar，抽真空48小時(shí)，凍成粉晶，得胰島素水凝膠干粉約10g，每克水凝膠體凍 干粉含胰島素相當(dāng)100U。實(shí)施例3①取卵類粘蛋白0. lg，溶解于100ml 0. 1M的NaHC03 pH8. 0 8. 4溶液中，在冰浴 下磁力攪拌，緩慢滴加入0. 01ml丙烯酰氯(避光、低溫保存)，同時(shí)觀察pH變化，加入丙烯 酰氯溶液會(huì)變酸，如果偏酸就用固體NaHC03調(diào)PH于8. 0 8. 4，冰浴攪拌90min，防止丙烯 酰氯逸出。形成丙烯酰胺卵類粘蛋白的固定化修飾物。②在上述100ml溶液中加入5g丙烯酰胺，0. 5g甲叉雙丙烯酰胺，0. 05g_0. lg過 硫酸銨，于室溫?cái)嚢璩浞秩芙猓谷雸A底燒瓶中，加入0. 05四甲基乙二胺，混勻，抽真空 30min,關(guān)閉真空放置60min，得到水凝膠體。③將水凝膠體粉碎，擠壓，過20目篩網(wǎng)，用水凝膠體積數(shù)十倍的注射用水充分磁 力攪拌冼滌，除去丙烯酰胺，卵類粘蛋白等，一天內(nèi)換注射用水3次，用水冼滌4天，濾液用 紫外法監(jiān)控A23(1±2 ^ 0. 003.(此為丙烯酰胺的紫外光吸收值)，監(jiān)控A28(1±2 ^ 0. 003 (此為卵類粘蛋白的紫外光吸收值)，達(dá)到要求后，置于凍干機(jī)中冷凍干燥，真空度60mbar，抽真空 48h，凍成粉晶，稱量，得固定化修飾含有卵類粘蛋白的聚丙烯酰胺約5克。④水凝膠體中卵類粘蛋白結(jié)合能力檢測(cè)同實(shí)施例2-④⑤胰島素水凝膠的制備在100ml pH2. 2純化水中，加lmg(lmg胰島素相當(dāng)25U)胰島素，充分溶解。取5g 水凝膠體凍干粉，加入50ml上述胰島素水溶液，充分溶脹吸收，置于凍干機(jī)中冷凍干燥，真 空度60mbar，抽真空48小時(shí)，凍成粉晶，得胰島素水凝膠干粉約5g，每克水凝膠體凍干粉含 胰島素相當(dāng)5U。實(shí)施例4①取卵類粘蛋白10g，溶解于100m 0. 11M的NaHC03 pH8. 0 8. 4溶液中，在冰浴 下磁力攪拌，緩慢滴加入1. 0ml丙烯酰氯(避光、低溫保存)，同時(shí)觀察pH變化，加入丙烯酰 氯溶液會(huì)變酸，如果偏酸就用固體NaHC03調(diào)于pH 8. 0 8. 4，冰浴攪拌90min，防止丙烯酰 氯逸出。形成丙烯酰胺卵類粘蛋白的固定化修飾物。②在上述100ml溶液中加入15g丙烯酰胺，0. 75甲叉雙丙烯酰胺，lg過硫酸銨，于 室溫?cái)嚢璩浞秩芙?，倒入圓底燒瓶中，加入5g四甲基乙二胺，混勻，抽真空30min，關(guān)閉真空 放置60min，得到水凝膠體。③將水凝膠體粉碎，擠壓，過20目篩網(wǎng)，用水凝膠體積數(shù)十倍的注射用水充分磁 力攪拌冼滌，除去丙烯酰胺，卵類粘蛋白等，一天內(nèi)換注射用水2次，用水冼滌4天，濾液用 紫外法監(jiān)控A23(1±2 ( 0. 003.(此為丙烯酰胺的紫外光吸收值)，監(jiān)控A28(1±2 ( 0. 003 (此為卵 類粘蛋白的紫外光吸收值)，達(dá)到要求后，置于凍干機(jī)中冷凍干燥，真空度60mbar，抽真空 48h，凍成粉晶，稱量，得固定化修飾含有卵類粘蛋白的聚丙烯酰胺約15克。④水凝膠體中卵類粘蛋白結(jié)合能力檢測(cè)同上述實(shí)施例2-④⑤胰島素水凝膠的制備在100ml pH2. 2純化水中，加160mg(lmg胰島素相當(dāng)25U)胰島素，充分溶解。取 20g水凝膠體凍干粉，加入200ml上述胰島素水溶液，充分溶脹吸收，置于凍干機(jī)中冷凍干 燥，真空度60mbar，抽真空48小時(shí)，凍成粉晶，得胰島素水凝膠干粉約20g，每克水凝膠體凍 干粉含胰島素相當(dāng)400U。實(shí)施例5口服胰島素腸溶片或腸溶膠囊制備工藝①1000片或粒膠囊處方成分用量含胰島素的干燥水凝膠100g(200U胰島素微晶纖維素180g預(yù)凝膠淀粉20g羧甲基淀粉鈉12. 5g硬脂酸鎂1. 25g聚乙烯吡咯烷酮(0.2%水溶液)適量
水凝膠體凍干粉g)
②制備工藝將處方量的微晶纖維素和預(yù)凝膠淀粉先混合均勻，加入適量0. 2%聚乙烯吡咯烷 酮水溶液，制軟材，過20目篩，50 60度減壓或常壓干燥，至顆粒完全干燥，過20目篩整 粒，將含胰島素的干燥水凝膠顆粒與上述顆?；旌暇鶆?，加入羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂再次 混合均勻，顆?；旌衔?，裝入腸溶膠囊，每粒凈重量約310毫克，或壓片，每片重量約310毫 克，片子壓力、硬度適中，將胰島素素片包腸溶衣。實(shí)施例6口服胰島素腸溶片或腸溶膠囊在實(shí)驗(yàn)性高血糖動(dòng)物方面的應(yīng)用①實(shí)驗(yàn)性高血糖SD大鼠藥效試驗(yàn)取36只高血糖SD大鼠*，實(shí)驗(yàn)前禁食，試驗(yàn)分 4組，每組9只，空白組，2個(gè)試驗(yàn)組一腸溶膠囊組、陽性藥組一胰島素注射液組；動(dòng)物環(huán) 境安靜、舒適，腸溶膠囊組灌胃給藥，空白組給空白制劑。陽性藥組皮下注射，尾靜脈取血， 用優(yōu)越血糖儀測(cè)血糖值，記錄給藥前每個(gè)動(dòng)物的血糖值，及給藥后30、60、90、120、150、180、 210分鐘的血糖值。高血糖SD大鼠藥效試驗(yàn)結(jié)果如下血糖濃度隨胰島素制備物類型及劑量不同所產(chǎn)生的變化(每組9只大鼠血糖平均 值) *SD大鼠皮下注射劑量為60mg/kg動(dòng)物體重的鏈脲佐菌素誘發(fā)其產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)性糖尿 ?、趯?shí)驗(yàn)性高血糖青紫蘭家兔藥效試驗(yàn)取24只高血糖青紫蘭家兔*，實(shí)驗(yàn)前禁食， 試驗(yàn)分4組，每組6只，空白組，2個(gè)試驗(yàn)組一腸溶膠囊組、陽性藥組一胰島素溶液組；動(dòng)物 環(huán)境安靜、舒適，腸溶膠囊組灌胃給藥，空白組給空白制劑。陽性藥組皮下注射，耳緣靜脈取 血，用優(yōu)越血糖儀測(cè)血糖值，記錄給藥前每個(gè)動(dòng)物的血糖值，及給藥后30、60、90、120、150、 180、210分鐘的血糖值。實(shí)驗(yàn)性高血糖青紫蘭家兔藥效試驗(yàn)結(jié)果如下血糖濃度隨胰島素制備物類型及劑量不同所產(chǎn)生的變化(每組6只家兔血糖平均值) *給青紫蘭家兔耳緣靜脈注射劑量為150mg/kg (分二次給藥)動(dòng)物體重的四氧嘧 啶誘發(fā)其產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)性糖尿病
權(quán)利要求
一種口服胰島素制劑，它含有多聚體水凝膠、蛋白酶抑制劑、胰島素、填充劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，多聚體水凝膠是一種能夠在水中膨脹的多聚體，這種多聚體水凝 膠，是蛋白酶抑制劑經(jīng)丙烯酰氯酰氯化后，形成固定化修飾，再與丙烯酰胺，亞甲基雙丙烯 酰胺、過硫酸銨、四甲基乙二胺形成的共聚物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，蛋白酶抑制劑選自從鴨和火雞等禽類蛋中分離得到的卵類粘蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，胰島素可以選自動(dòng)物生化提取的或基因工程的胰島素。
5.根據(jù)權(quán)利要求2，一種多聚體水凝膠的組成，各組分的用量為，卵類粘蛋白0.05 20%;丙烯酰氯0. 005% 10 丙烯酰胺5 20%;亞甲基雙丙烯酰胺0. 1%;過硫 酸銨0. 05% ；四甲基乙二胺0.01% 10%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1，含胰島素的多聚體水凝膠制備方法，多聚體水凝膠形成后，經(jīng)粉 碎、洗滌，經(jīng)冷凍干燥工藝凍干，再加入胰島素溶液吸收溶脹后，再凍干，每克干燥水凝膠中 胰島素的含量可以為0. 1 200毫克。
7.根據(jù)權(quán)利要求1，口服胰島素制劑中填充劑，選自微晶纖維素、乳糖、甘露醇、海澡 糖、蔗糖等，用量可以為10 80%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1，口服胰島素采用片劑或膠囊劑，片劑采用包腸溶衣，膠囊采用腸溶 膠囊。
9.根據(jù)權(quán)利要求8，每片或每粒制劑含有胰島素活性為0.1 500U。
全文摘要
一種口服胰島素，該制劑涉及到高分子化學(xué)技術(shù)，這種技術(shù)可應(yīng)用于胰島素的口服途徑給藥中多聚體凝膠組分的合成。本發(fā)明提供了蛋白酶抑制劑-卵類粘蛋白(從鴨蛋中提取的糖蛋白)與丙烯酰胺等聚合形成多聚體凝膠的制備方法，及其制劑的制備方法和在降低高血糖動(dòng)物方面的應(yīng)用，這種卵類粘蛋白首次用于口服胰島素的保護(hù)，這種多聚體凝膠的制劑可以用來治療糖尿病。其制劑的生物利用度達(dá)到同劑量皮下注射胰島素20％以上，該制劑具有用藥方便，避免打針疼痛、和耐受性差的不足，具有很高的使用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K9/48GK101862445SQ20091007178
公開日2010年10月20日 申請(qǐng)日期2009年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月16日
發(fā)明者冷國(guó)慶, 劉賀煜, 安文靜, 張玉華, 李會(huì)成, 李金花, 王 忠, 蘇宏健, 趙華南, 陳玉軍, 高晶, 黃炎 申請(qǐng)人:哈藥集團(tuán)生物工程有限公司