專利名稱:龍眼核中活性物質(zhì)的提取方法
龍眼核中活性物質(zhì)的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于一種溶劑萃取方法,尤其涉及一種用溶劑萃取生物活性物質(zhì)的方法。
背景技術(shù):
a -葡萄糖苷酶,又叫做a _D_葡萄糖苷水解酶,在生理功能上主要能催化a -1, 4-糖苷鍵水解,從多糖、二糖的非還原端切下葡萄糖,是小腸內(nèi)麥芽糖、蔗糖等寡糖水解的 酶。而a-葡萄糖苷酶抑制劑是通過(guò)抑制a-葡萄糖苷酶的活性,使得葡萄糖的生成和吸 收緩減,從而減少高血糖對(duì)胰腺的剌激。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種能有效抑制a -葡萄糖苷酶活性的龍眼核中活性物質(zhì)的提 取方法。 本發(fā)明所述的提取方法,其工藝方法如下取龍眼核50g,浸于250mL蒸餾水中回 流lh,取上清液;向?yàn)V渣中再加入250mL蒸餾水繼續(xù)回流lh,取上清液。合并兩次的上清液 用85%乙醇浸提,濃縮浸提液,即得龍眼核中活性物質(zhì)。 所得到的龍眼核中活性物質(zhì)對(duì)a -葡萄糖苷酶有較強(qiáng)的抑制活性,且抑制活性在 30 90°C,pH 3. 0 13. 0之間比較穩(wěn)定。這些均顯示出龍眼核所具有的開(kāi)發(fā)降糖食品和 降糖藥物的潛在的價(jià)值。
具體實(shí)施方式
取龍眼核50g,浸于250mL蒸餾水中回流lh,取上清液;向?yàn)V渣中再加入250mL蒸 餾水繼續(xù)回流lh,取上清液。合并兩次的上清液用85%乙醇浸提,濃縮浸提液并定容至 100mL,稀釋100倍,即得5mg/mL的龍眼核中活性物質(zhì)。 取lmL上述龍眼核中活性物質(zhì),0. 1M磷酸鉀緩沖液1. OmL, 20mM PNPG溶液0. 5mL, lOmM酶稀釋緩沖液O. 4mL,37t:水浴反應(yīng)5min后,加入0. lmL的酶溶液,充分搖勻,在37。 c 恒溫水浴中反應(yīng)15min,然后加入0. 2MNa2C032. OmL終止反應(yīng),測(cè)定400nm處的吸光度。做 3個(gè)平行,取平均值。另外,分別以0. 1M磷酸鉀緩沖液和蒸餾水代替底物,測(cè)定樣品的背景 吸收和空白對(duì)照。 其中,酶稀釋緩沖液的制備方法是向pH 7.0,10mM的200mL磷酸鉀緩沖液里加 0. 4mL的牛血清白蛋白。 酶溶液的制備方法是用冰凍的a-葡萄糖苷酶酶稀釋緩沖液溶解干的酶至
0. 05 0. lu/mL(體積活性)。A空o - (A樣品-A背景) 酶活性抑制率Y (%) = - xioo%
A空白 測(cè)得上述龍眼核中活性物質(zhì)對(duì)a -葡萄糖苷酶的抑制率為83. 87%。
權(quán)利要求
一種龍眼核中活性物質(zhì)的提取方法,其特征在于包括取龍眼核50g,浸于250mL蒸餾水中回流1h,取上清液;向?yàn)V渣中再加入250mL蒸餾水繼續(xù)回流1h,取上清液。合并兩次的上清液用85%乙醇浸提,濃縮浸提液,即得龍眼核中活性物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明所述的龍眼核中活性物質(zhì)的提取方法屬于一種溶劑萃取方法,尤其涉及一種用溶劑萃取生物活性物質(zhì)的方法。所述的提取方法,其工藝方法如下取龍眼核50g,浸于250mL蒸餾水中回流1h,取上清液;向?yàn)V渣中再加入250mL蒸餾水繼續(xù)回流1h,取上清液。合并兩次的上清液用85%乙醇浸提,濃縮浸提液,即得龍眼核中活性物質(zhì)。所得到的龍眼核中活性物質(zhì)對(duì)α-葡萄糖苷酶有較強(qiáng)的抑制活性,且抑制活性在30~90℃,pH3.0~13.0之間比較穩(wěn)定。這些均顯示出龍眼核所具有的開(kāi)發(fā)降糖食品和降糖藥物的潛在的價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101744928SQ20081021994
公開(kāi)日2010年6月23日 申請(qǐng)日期2008年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月12日
發(fā)明者黃馳波 申請(qǐng)人:黃馳波