專利名稱：丹酚酸b的抗血栓應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥產(chǎn)品的新用途，特別涉及丹參提取物丹酚酸B在治療和預(yù)防血栓中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
丹參為中國(guó)的傳統(tǒng)中藥，其主要水溶性成分包括丹參酸甲酯，次甲丹參醌，丹參酚，乙， 丙，e-谷甾醇，3，4 -二羥基苯甲醛，丹酚酸A，丹酚酸B，兒茶精，蕓香甙，原兒茶醛，原 兒茶酸，紫草酸，乳酸，維生素E等.丹酚酸B是丹參的主要水溶性成分之一。
丹酚酸類化合物具有很強(qiáng)的抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、清除超氧陰離子和羥基自由基的作用。其 中丹酚酸A和B活性最強(qiáng)。丹酚酸B對(duì)腦缺血-再灌注損傷所致線粒體損傷和神經(jīng)細(xì)胞凋 亡有明顯抑制作用?？煽笴a印ase-3高表達(dá)PC]2細(xì)胞的凋亡，還可抑制B淀粉樣蛋白 (Ae卜/K))纖維形成及Ae l-40所致PC12細(xì)胞線粒體損傷和細(xì)胞凋亡。屬?gòu)?qiáng)抗氧化藥， 且能消除細(xì)胞內(nèi)鈣超載。
血管中的血栓是心血管是心腦血管疾病發(fā)生與致命性的決定因素。對(duì)于易感人群來(lái)說(shuō)， 抗血栓藥則被廣泛地認(rèn)為是一種降低這種風(fēng)險(xiǎn)有效的方法。臨床上，阿斯匹林由于其可 以抑制血小板聚集，因而己經(jīng)普遍地應(yīng)用于這種用途。然而，阿斯匹林易導(dǎo)致出血的副 作用促使人們開(kāi)發(fā)出新型抗血栓的治療方案。
血栓主要由于血管內(nèi)皮損傷所致，隨著活性氧簇的產(chǎn)生而產(chǎn)生，而那些活性氧簇則促進(jìn) 血小板和白細(xì)胞表達(dá)出選擇蛋白和粘附分子從而粘附于內(nèi)皮。超氧化物歧化酶(S()D)， 以及維生素C和E報(bào)道具有抗血栓的作用。抗粘附分子的單克隆抗體也發(fā)現(xiàn)具有抑制白 細(xì)胞粘附于內(nèi)皮細(xì)胞的作用。因此，可以設(shè)想通過(guò)抑制活性氧簇的產(chǎn)生和粘附分子的 表達(dá)可能在早期中斷血栓形成的過(guò)程。
本發(fā)明人在對(duì)丹參中的提取物丹酚酸B進(jìn)行的研究過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)丹鼢酸B具有延遲血栓發(fā)作的作用。 發(fā)明內(nèi)容.-
本發(fā)明提供一種丹參提取物的新的治療用途。所述新的治療用途，是用丹參提取物丹酚 酸IW臺(tái)療和預(yù)防血栓,.
為此，本發(fā)明提供一種藥物新用途，即用丹參提取物丹酚酸B制備一種治療和預(yù)防血栓 的藥物。
本發(fā)明所述的丹酚酸B是現(xiàn)有技術(shù)，可以從市場(chǎng)上買到，也可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)制備，符 合藥用標(biāo)準(zhǔn)即可。優(yōu)選純度〉50%，更優(yōu)選純度〉90%，最優(yōu)選純度>98°/。。 本發(fā)明所述制備的藥物，是用上述丹參提取物丹酚酸B作為藥物活性成分制備成的藥物 制劑組合物。
本發(fā)明的藥物制劑組合物，根據(jù)需要可以含有藥物可接受的載體，其中丹酚酸B作為藥 物活性成分，其在制劑中所占重量百分比可以是0.1-99.9%，其余為藥物可接受的載體。 本發(fā)明的藥物制劑組合物，以單位劑量形式存在，所述單位劑量形式是指制劑的單位， 如片劑的每片，膠囊的每粒膠囊，口服液的每瓶，顆粒劑每袋，注射劑的每支等。 本發(fā)明的藥物制劑組合物可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、 薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、 沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬 膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑、貼劑。
本發(fā)明的中藥制劑，其口服給藥的制劑可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀 釋劑、壓片劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤(rùn)劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。 適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括淀 粉、聚乙烯吡咯垸酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤(rùn)滑劑包括，例如硬 脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤(rùn)劑包括十二垸基硫酸鈉。
可通過(guò)混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進(jìn)行反復(fù)混合可使活性物 質(zhì)分布在整個(gè)使用大量填充劑的那些組合物中。
口服液體制劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者 可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常 規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、輕乙基纖維素、羧 甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘 油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山 梨酸，并且如果需要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。
對(duì)于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的活性物質(zhì)和無(wú)菌載體。根據(jù)載體和濃度， 可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過(guò)將活性物質(zhì)溶解在一種載體中， 在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過(guò)濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、
防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這 種組合物冰凍，并在真空下將水除去。
本發(fā)明的中藥制劑，在制備成藥劑時(shí)可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體，所述藥 物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸 半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、 EDTA二鈉、EDTA鈣鈉， 一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、 醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳 酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露 糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯垸酮、甘油、土溫8()、
瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、e —環(huán)糊精、磷脂類材料、
高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的制劑在使用吋根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日服卜:W欠，每次1-2()齊U，
如卜20袋或粒或片，每劑lmg-iOOOmg。
以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明本發(fā)明的有益效果
丹酚酸B對(duì)于大鼠光化學(xué)反應(yīng)引起的小靜脈血栓的抑制作用
本研究采用微循環(huán)動(dòng)態(tài)觀察系統(tǒng)，以光化學(xué)反應(yīng)引發(fā)的大鼠腸系膜小靜脈血栓為模型考察了丹酚酸，簡(jiǎn)稱SAB，對(duì)于血栓形成以及過(guò)氧化物產(chǎn)生的動(dòng)態(tài)過(guò)程。此外，還使用了
流式細(xì)胞儀(熒光激活細(xì)胞分揀儀[FACS])，體外考察了 SAB對(duì)于大鼠噬中性粒細(xì)胞表
達(dá)CDllh/CD18的作用。血管周圍肥大細(xì)胞脫顆粒也進(jìn)行了研究，用以評(píng)價(jià)SAI3的作用。
在每一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，均采用S0D作為抗氧劑進(jìn)行平行對(duì)照。
材料和方法
動(dòng)物
雄性SD大鼠重20(廣250g，購(gòu)于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物中心，證書號(hào)SCXK 2002-()O()l 。大 鼠喂標(biāo)準(zhǔn)鼠飼料(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物中心)，溫度保持在24土rC，相對(duì)濕度50±1%。實(shí)驗(yàn)前，所有動(dòng)物禁食12小時(shí)，但可以自由飲水。所有動(dòng)物按照北京大學(xué)動(dòng)物研究委員
會(huì)的規(guī)則進(jìn)行處理。
試劑
血口卜啉(H畫l':)購(gòu)于上海紅綠光敏劑研究所(中國(guó)，上海)。DLA購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所(中國(guó)，北京)。SAB購(gòu)于風(fēng)山劍醫(yī)藥公司(中國(guó)，昆明)。二氫羅達(dá)明123(1)1110和苯甲胺藍(lán)購(gòu)于Sigma-Aldrich公司(美國(guó))。FITC標(biāo)記的小鼠抗大鼠CD1 lb單克隆抗體，i'TI'C標(biāo)記的小鼠抗大鼠CD18單克隆抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記的小鼠IGA， k和F1TC標(biāo)記的小鼠lg(;l和k購(gòu)于BD生物科學(xué)公司(美國(guó))。所有使用的其它藥物均為市售最高級(jí)別。腸系膜微循環(huán)的觀察
動(dòng)物采用腹腔注射20%烏拉坦(10ml/kg體重)進(jìn)行麻醉。右頸靜脈和左股靜脈進(jìn)行插管以便注射藥物。腹腔中線切2cm的切口打開(kāi)腹腔，腸系膜回腸部分(距腸系膜尾端1() 15cm的位置)輕輕外翻，掛在自制的透明塑料平臺(tái)上。腸系膜在恒溫槽保持WC并通過(guò)不斷灌注生理鹽水保持濕潤(rùn)。使用倒置的顯微鏡(DM-IRB， Leica， Wc"Jar，德國(guó))通過(guò)透射照明法觀察腸系膜微循環(huán)血流動(dòng)力學(xué)。圖像通過(guò)懸掛于顯微鏡上的攝像機(jī)(,lk一TU5:川，東芝，東京，閂本)傳輸至彩色監(jiān)視器(J2歷，TCI」，惠州，中國(guó))上，并使用I)VD (1)VR — K25，萬(wàn)利達(dá)，廈門，中國(guó))進(jìn)行記錄。在本研究中，選擇那些單一的、無(wú)分支且無(wú)明顯彎曲的、直徑為25 45剛長(zhǎng)度為200wn的血管測(cè)定各項(xiàng)參數(shù)。血栓的誘發(fā)
本實(shí)驗(yàn)中采用了光化學(xué)血栓法。
簡(jiǎn)言之，進(jìn)行l(wèi)()分鐘基礎(chǔ)觀察后，通過(guò)股靜脈注射光敏劑HMMK (lmg/kg體重)。采用熒光顯微鏡的汞燈作光源(100W)照射波長(zhǎng)488nm藍(lán)光光線，通過(guò)20倍目鏡聚焦于單個(gè)的血管上。透射于血管上的光束點(diǎn)直徑大約為250陶。持續(xù)照射直至血栓的達(dá)到血管直徑的一半，通過(guò)顯微鏡觀察30分鐘監(jiān)視血栓形成的動(dòng)態(tài)過(guò)程。給藥
大鼠隨機(jī)分成5組，每組6只。對(duì)照組中，所有動(dòng)物進(jìn)行10分鐘的基礎(chǔ)觀察后，通過(guò)右側(cè)的頸靜脈插管注射生理鹽水(2 ml/kg)，持續(xù)觀察直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。光化學(xué)反應(yīng)組，所有動(dòng)物進(jìn)行IO分鐘的基礎(chǔ)觀察后通過(guò)右側(cè)的頸靜脈插管注射生理鹽水(2ml/kK),進(jìn)行20分鐘的基礎(chǔ)觀察后通過(guò)左側(cè)股靜脈插管注射HMME(l mg/kg體重)并進(jìn)行照射。在光化學(xué)反應(yīng)和S0D+光化學(xué)反應(yīng)組，所有進(jìn)行10分鐘的基礎(chǔ)觀察后通過(guò)右側(cè)頸靜脈注射SAB (l() mg/kg體重)或S()D (12000單位/kg體重)代替生理鹽水進(jìn)行基礎(chǔ)觀察，l()分鐘后繼續(xù)通過(guò)左側(cè)股靜脈注射HMME (1 mg/kg體重)進(jìn)行照射。1兒A、 SAB和S()l)溶于生理鹽水中。在照射開(kāi)始后，持續(xù)觀察30分鐘。血栓形成動(dòng)態(tài)的評(píng)價(jià)
本實(shí)驗(yàn)中，測(cè)定了下列參數(shù)用以評(píng)價(jià)形成的血栓。(a)血栓起始時(shí)間，即從照射丌始至血栓出現(xiàn)之間的間隔時(shí)間，后者通過(guò)粘附于血管壁上的血小板進(jìn)行判斷。(b)血栓的半體積時(shí)間，即從照射開(kāi)始至血栓體積到達(dá)血管直徑的一半的時(shí)間。(c)血栓/小靜脈的面積比，即血栓與小靜脈的面積比，使用Image-Pro-Plus軟件(Media Cybt'md門'c;,s公司，美國(guó))，在20()ym長(zhǎng)的小靜脈范圍內(nèi)，分別在照射前以及照射后10、 2()和3()分鐘時(shí)進(jìn)行測(cè)定。
小靜脈壁的氧化應(yīng)激的可視化觀察
如前所述，大鼠腸系膜小靜脈壁的氧化應(yīng)激在另外的動(dòng)物中測(cè)定。簡(jiǎn)言之，腸系膜的灌流液中連續(xù)加入熒光探針二氫羅達(dá)明D冊(cè)(10Wno1/1)，當(dāng)其與過(guò)氧化氫(HA,)反應(yīng)便轉(zhuǎn)化成羅達(dá)明123 (5()5/533 nm)并在488nm波長(zhǎng)下激發(fā)產(chǎn)生熒光。觀察到小靜脈壁上二氫羅達(dá)明的熒光強(qiáng)度，分別在光化學(xué)反應(yīng)前和反應(yīng)后的30分鐘時(shí)通過(guò)高靈敏的攝像機(jī)(W(XI) c;亂、ra C7190,濱松，日本)進(jìn)行記錄，并采用IMAGE-PLUS軟件進(jìn)行分析。將光化學(xué)反應(yīng)前小靜脈壁和靜脈外間質(zhì)的熒光強(qiáng)度差作為基線值，"二氫羅達(dá)明(I)HK)熒光強(qiáng)度比"為光化學(xué)反應(yīng)后30分鐘時(shí)小靜脈壁與靜脈外間質(zhì)的熒光強(qiáng)度差與基線值的比值。肥大細(xì)胞脫顆粒在另外的動(dòng)物中測(cè)定。血管周圍肥大細(xì)胞脫顆粒率的計(jì)數(shù)
在觀察后30分鐘時(shí)，大鼠腸系膜局部應(yīng)用0. 5%甲苯胺藍(lán)進(jìn)行活體染色來(lái)鑒定血管周圍的肥大細(xì)胞。在20倍的目鏡下，在光照區(qū)域的中心隨機(jī)選擇三個(gè)區(qū)域記錄脫顆粒和未脫顆粒的肥大細(xì)胞，計(jì)算脫顆粒的肥大細(xì)胞與所記錄肥大細(xì)胞總數(shù)的比值，表達(dá)為脫顆粒的肥大細(xì)胞百分率(％)。統(tǒng)計(jì)
統(tǒng)計(jì)學(xué)差異采用單因素方差分析法進(jìn)行計(jì)算。P〈0.05為具有顯著性。數(shù)據(jù)表示為平均值
±標(biāo)準(zhǔn)差。
結(jié)果
圖2表示當(dāng)大鼠腸系膜小靜脈暴露于光化學(xué)反應(yīng)初始時(shí)，SAB和SOD對(duì)于血栓的作用?？梢钥吹?，對(duì)照組沒(méi)有觀察到血栓。經(jīng)過(guò)光化學(xué)刺激形成血栓，光化學(xué)反應(yīng)組血栓的起始時(shí)間為13. 77±2. 5:〗s。顯然，預(yù)先給予SAB和SOI)可以延長(zhǎng)光化學(xué)反應(yīng)引發(fā)血栓的時(shí)間，它們的起始時(shí)間為別為39.00士4.20s和52.85士6.08s。
圖3表示了 SAB和S()D對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)引發(fā)的大鼠腸系膜小靜脈血栓半體積時(shí)間的影響。光化學(xué)組血栓半體積時(shí)間為50. 14±3. 85s,而預(yù)先給予SAB沒(méi)有顯著地延長(zhǎng)血栓半體積時(shí)間。
圖d描述了 SAB和SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)中大鼠腸系膜靜脈的血栓/小靜脈的面積比。左邊的部分顯示了面積比率的測(cè)定方法，右側(cè)則是其量化的評(píng)價(jià)結(jié)果。在光化學(xué)反應(yīng)組中，照射后l()、 20和30分鐘時(shí)，面積比率分別為36. 32±3. 90和23. 21 ±5. 11 。照射后20分鐘時(shí)，預(yù)先給予SAB或S()D能顯著減少血栓/小靜脈的面積比，
大鼠腸系膜小靜脈壁熒光強(qiáng)度的測(cè)定對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的氧化應(yīng)激具有指示性的作用，結(jié)果見(jiàn)圖5。如圖所示，對(duì)照組沒(méi)有觀察到二氫羅達(dá)明熒光。相反在光化學(xué)反應(yīng)組，熒光強(qiáng)度在照射后30分鐘時(shí)顯著增加，預(yù)先給予SAB和S0D則可以明顯地抑制小靜脈壁上光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的熒光強(qiáng)度。
觀察:《)分鐘后，對(duì)光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的大鼠腸系膜血管周圍間質(zhì)脫顆粒的肥大細(xì)胞百分率進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，光化學(xué)反應(yīng)刺激能夠明顯增加脫顆粒的肥大細(xì)胞百分率"6.M±7. 65)，而對(duì)照組則為28. 75±2. 27。預(yù)先給予SAB可以明顯地抑制化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的大鼠腸系膜中肥大細(xì)胞脫顆粒，而S0D則沒(méi)有觀察到該作用，見(jiàn)圖6。
進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)測(cè)定了 SAB或SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的大鼠粒細(xì)胞中CD1 lh和CD18表達(dá)的作用，結(jié)果見(jiàn)圖7。顯然，體外光化學(xué)反應(yīng)刺激能夠引起大鼠粒細(xì)胞中CI)llh和CIM8表達(dá)的增加。預(yù)先給予S0D能夠顯著抑制光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的大鼠粒細(xì)胞中CD1 th的表達(dá)，但是SAB沒(méi)有這種作用(A部分)。另一方面，預(yù)先給予SAB和S0D能夠顯著抑制光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的大鼠嗜中性粒細(xì)胞中CD18的表達(dá)。結(jié)論
丹酚酸B是丹參中主要的水溶性成份，為了說(shuō)明其對(duì)于血栓的作用，本實(shí)驗(yàn)利用了大鼠腸系膜光化學(xué)反應(yīng)誘發(fā)的血栓。同時(shí)，使用了微循環(huán)監(jiān)視系統(tǒng)，保證了對(duì)于血栓的動(dòng)態(tài)評(píng)價(jià)，說(shuō)明了丹酚酸B延長(zhǎng)血栓起始時(shí)間，可以抑制光化學(xué)引發(fā)的大鼠腸系膜血栓，該作用可能與其抑制過(guò)氧化物產(chǎn)生和抑制肥大細(xì)胞脫顆粒作用相關(guān)。表明丹酚酸B可以臨床上應(yīng)用于預(yù)防和治療血栓。


圖l， SAB的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
圖2， SAB和SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)刺激的大鼠腸系膜血栓初始時(shí)間的影響。PR代表所在組動(dòng)物只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激。SAB+PR和SOD+PR分別代表所在組動(dòng)物光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給予SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值士標(biāo)準(zhǔn)差"的方式表達(dá)。W<0. ()5與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
圖3， SAB和SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)刺激的大鼠腸系膜血栓半體積時(shí)間的影響。l)K代表所在組動(dòng)物只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激SAB+PR和SOD+PR分別代表所在組動(dòng)物光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給予SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值士標(biāo)準(zhǔn)差"的方式表達(dá)。W<0. 05與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
圖4， SAB和SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)中大鼠腸系膜靜脈的血栓/小靜脈的面積比的影響。左邊的部分顯示了血栓/小靜脈面積比率的測(cè)定方法，右側(cè)則是血栓/小靜脈的時(shí)間進(jìn)程。PR代表所在組動(dòng)物只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激。SAB+PR和S()D+PR分別代表所在組動(dòng)物光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給予SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值土標(biāo)準(zhǔn)差"的方式表達(dá)。*P〈().()5與對(duì)照組比較，#P<(). 05與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
圖5， SAB和SOD對(duì)于光化學(xué)反應(yīng)中大鼠腸系膜靜脈的二氫羅達(dá)明熒光強(qiáng)度比率的影響。
對(duì)照組動(dòng)物不進(jìn)行任何治療。PR代表所在組動(dòng)物只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激。SAB+I)K和
SOD+PR分別代表所在組動(dòng)物光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給予SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值土
標(biāo)準(zhǔn)差"的方式表達(dá)。承P〈0.05與對(duì)照組比較，fflX0.05與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
圖6， SAB和SOD對(duì)于大鼠腸系膜周圍間質(zhì)脫顆粒的肥大細(xì)胞百分率的影響。對(duì)照組動(dòng)
物不進(jìn)行任何治療。PR代表所在組動(dòng)物只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激。SAB+PR和SOD+PR分
別代表所在組動(dòng)物光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給予SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值士標(biāo)準(zhǔn)差"
的方式表達(dá)。*13〈0.05與對(duì)照組比較，ttP〈0.05與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
圖7， SAB和S()D對(duì)于體外粒細(xì)胞中粘附分子表達(dá)的影響。粘附分子表達(dá)以橫坐標(biāo)上的熒
光強(qiáng)度表示。左側(cè)為CDllb的表達(dá)，右側(cè)CD18的表達(dá)。對(duì)照組粒細(xì)胞不進(jìn)行任何治療。
PR代表所在粒細(xì)胞只受到光化學(xué)反應(yīng)的刺激。SAB+PR和SOD+PR分別代表所在組粒細(xì)胞
在光化學(xué)反應(yīng)前預(yù)先給與SAB和SOD治療。數(shù)據(jù)以"平均值士標(biāo)準(zhǔn)差"的方式表達(dá)^P〈0. 05
與對(duì)照組比較，ttP<0. 05與光化學(xué)反應(yīng)組比較。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1病例
女65歲，清晨突發(fā)腦血栓，通過(guò)CT、核磁共振顯示腦干區(qū)有梗塞，使用丹酚酸B注射液救治，5天一個(gè)療程，第個(gè)療程用完，腿可以運(yùn)動(dòng)了；第2個(gè)療程用完，可以攙扶走路，第3個(gè)療程，拄拐杖能夠行走。
權(quán)利要求
1、丹酚酸B在制備一種治療和預(yù)防血栓藥物中的應(yīng)用。
2、 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其特征在于，所述丹酚酸B能延長(zhǎng)血栓起始時(shí)間。
3、 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其特征在于，所述丹酚酸B被制備成藥物制劑組合物用 于人類血栓疾病。
4、 權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物制劑組合物，以丹酚酸B作為藥 物活性成分，同時(shí)含有藥物可接受的載體，其中丹酚酸B在制劑中所占重量百分 比是().卜99. 9%，其余為藥物可接受的載體。
5、 權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物制劑組合物，在使用時(shí)根據(jù)病人 的情況確定用法用量，可每日服l-3次，每次l-2()劑，每劑lmg-l()OOmg。
6、 權(quán)利要求4的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山 梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨 酸、維生素C、 EDTA二鈉、EDTA鈣鈉， 一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽 或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖 醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯垸酮、甘油、土溫8()、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、e —環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂。
7、 權(quán)利要求5的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物制劑組合物是注射劑。
8、 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其特征在于，丹酚酸B的純度〉50。/。。
9、 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其特征在于，丹酚酸B的純度〉9(f/。。
10、 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其特征在于，丹酚酸B的純度>98°/。。
全文摘要
本發(fā)明涉及中藥產(chǎn)品的新用途，特別涉及丹參提取物丹酚酸B在治療和預(yù)防血栓中的應(yīng)用，本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，丹酚酸B能延長(zhǎng)血栓起始時(shí)間，抑制光化學(xué)引發(fā)的腸系膜血栓。
文檔編號(hào)A61P9/10GK101530409SQ200810052430
公開(kāi)日2009年9月16日 申請(qǐng)日期2008年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月13日
發(fā)明者劉育英, 劉連欹, 凱 孫, 王傳社, 韓晶巖 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司