專利名稱：藥物左亞葉酸鈉的制備方法和在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于制備治療腫瘤藥物的藥物左亞葉酸鈉的制備方法。
背景技術(shù)：
左亞葉酸鈣是亞葉酸鈣的左旋異構(gòu)體，左亞葉酸鈣由美國惠氏藥品公司首先研制 成功，于1994年首先在英國上市，主要用于抗貧血及在腫瘤藥物治療中的解毒拮抗劑， 現(xiàn)已在包括意大利、加拿大、日本、南非、芬蘭、冰島等10幾個(gè)國家上市，其制劑有 片劑、水針劑及凍干針劑，并已被《歐洲藥典》所收載，國外臨床應(yīng)用已充分證實(shí)了 該藥的安全有效性。亞葉酸另一形式為dl體，即dl-LV,在體內(nèi)dl體不能利用，只是為了延遲LV在 體內(nèi)代謝，使其長期存留，而降低L體在體內(nèi)代謝途徑，并減弱L體的效果。左亞葉 酸不需要被二氫葉酸還原酶還原即可參加利用葉酸鹽作為一碳單位來源的反應(yīng)，且左 亞葉酸可以主動(dòng)或被動(dòng)地通過細(xì)胞膜，左亞葉酸基本作用和葉酸相同，但效果優(yōu)于葉 酸，因?yàn)槿~酸在肝及骨髓中先變?yōu)閬喨~酸才能起作用，而本品為亞葉酸的活性形式。亞葉酸鈣的活性成分是亞葉酸，鈣離子沒有藥理作用，且對(duì)活性沒有幫助。鈣鹽 水溶性較小，不易制成高濃度的制劑，在用法用量上受到限制；有臨床研究資料報(bào)道， 5-FU合并亞葉酸鈣治療過程中，有50%發(fā)生了輸液管堵塞現(xiàn)象；另一方面，血漿中過 高的鈣離子濃度可能引起不必要的副作用，因而亞葉酸鈣常常需要緩慢滴注。2000年 亞葉酸鈉注射液在英國上市，其活性成分與亞葉酸鈣一樣，同為亞葉酸。但鈉鹽良好 的水溶性和生物相溶性，使之成為亞葉酸鈣的替代品。目前國內(nèi)外上市的有，亞葉酸鈣、左亞葉酸鈣及亞葉酸鈉，沒有使用左亞葉酸鈉 的報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)狀，旨在提供一種藥物左亞葉酸鈉的制備方法和在制 備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)方式為，藥物左亞葉酸鈉的制備方法，稱取甘露醇、右旋糖酐、 葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白中至少一種輔料，加入注射用水中溶解，加0.3%的活性炭 煮沸20分鐘，過濾除炭；保持充氮(或不充氮)狀態(tài)下，在混合容器加入注射用水， 攪拌下加入左亞葉酸鈉，使完全溶解，控制PH值在7.0—8.0之間，再加0.05%活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，與已脫炭的輔料混合，經(jīng)0.8ii微孔濾膜過濾至澄清，再經(jīng) 0.22u微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至所需量，攪拌，混勻，測(cè)定中間體含量，無菌和 充氮下分裝或無菌分裝后干燥。每支針劑中左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)為25-250mg，左亞 葉酸鈉與輔料的重量配比為1:0.1 — 1:20。藥物左亞葉酸鈉在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用，左亞葉酸鈉用于制備治療腫瘤的 藥物。本發(fā)明的左亞葉酸鈉解決了亞葉酸鈣中鈣離子沒有藥理作用，易發(fā)生輸液管堵塞 現(xiàn)象及帶來的不必要副作用，它由有效的左旋體和體內(nèi)大量存在的、具有良好的水溶 性的鈉離子組成，使治療更加有效、使用更安全，其制備成粉針劑和針劑，具有作用 迅速、起效快的特點(diǎn)。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的藥物左亞葉酸鈉的制備方法有兩種方法之一、稱取處方量的左亞葉酸，加入注射用水制成混懸液，加氫氧化鈉溶液 (或碳酸鈉、碳酸氫鈉溶液)攪拌使全溶，加入含有甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、氯化 鈉、水解蛋白的至少一種輔料，注射藥劑包括經(jīng)過干燥以后的粉針劑和直接制取的液 劑。方法二、稱取處方量的左亞葉酸鈉，加入注射用水，再加入含有甘露醇、右旋糖 酐、葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白的至少一種輔料，攪拌使全溶制成溶液，注射藥劑包 括經(jīng)過干燥以后的粉針劑和直接制取的液劑。本申請(qǐng)人對(duì)亞葉酸作了藥效學(xué)試驗(yàn)亞葉酸通過連續(xù)增強(qiáng)對(duì)腺苷酸合成酶(TS)的抑制來調(diào)節(jié)5—FU的生化作用， 已經(jīng)得到試驗(yàn)的證實(shí)；亞葉酸和5-FU聯(lián)合用藥的協(xié)同作用已經(jīng)在包括人類各種腫瘤 細(xì)胞株的體外試驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)，亞葉酸異構(gòu)體(6S和6R)對(duì)5—FU的抗腫瘤增強(qiáng)活性，在 HCT-8細(xì)胞得到了量效關(guān)系。lnM (1)-亞葉酸支持細(xì)胞的生長，而(d)-異構(gòu)體不 支持。當(dāng)細(xì)胞用(1)-亞葉酸處理24小時(shí)后，隨著(1)-亞葉酸的濃度的增加，可降 低5-FU抑制濃度的50%。但是200umM的(d)-亞葉酸對(duì)5—FU的細(xì)胞毒沒有影 響。在患有結(jié)腸癌的小鼠上能觀察到藥物的協(xié)同作用，但是在患有白血病或晚期 CD8F1乳腺癌的小鼠上沒有觀察到。進(jìn)一步的試驗(yàn)顯示高劑量的亞葉酸(l抑mg/kg/ 天，1-8天)轉(zhuǎn)化為5， 10-亞甲基H4PteGlu聚集在小鼠EMT6乳腺癌細(xì)胞中，而不 是骨髓。5-FU (30mg/kg/天，l-5天)用藥前亞葉酸給藥2小時(shí)，和5-FU單藥相比， 能明顯抑制腫瘤生長。亞葉酸的使用沒有增加對(duì)宿主的毒性。本申請(qǐng)人對(duì)亞葉酸鈉作了藥理毒理研究取健康豚鼠6只，連續(xù)3次腹腔注射左亞葉酸鈉1.25mg/只，然后將其分為兩組， 每組3只，第一組在第一次注射后14日自股靜脈注射左亞葉酸鈉2.5mg/只；第二組 于第一次注射后21日自股靜脈注射左亞葉酸鈉2.5mg/只，觀察給藥后15min內(nèi)產(chǎn)生 的反應(yīng)。結(jié)果6只豚鼠均未出現(xiàn)豎毛、呼吸困難、噴嚏、干嘔、咳嗽等反應(yīng)，也無抽 搐、虛脫或死亡等現(xiàn)象。家兔注射0. 1-0. 5ml (2.5mg/ral)在4h內(nèi)對(duì)紅細(xì)胞不產(chǎn)生溶血和凝聚作用。家兔雙側(cè)股四頭肌肌肉內(nèi)注射2.5rag/ml左亞葉酸鈉溶液設(shè)氯化鈉注射液為對(duì)照 組。給藥48h后，肉眼觀察藥物組2只家兔4塊股四頭肌均未出現(xiàn)充血、變性、壞死 等病理改變。組織病理學(xué)檢查顯示對(duì)照組組織結(jié)構(gòu)正常，肌纖維未見變性、壞死等 形態(tài)學(xué)改變，肌肉間質(zhì)中也未見炎癥等形態(tài)學(xué)改變?？梢娚倭柯匝准?xì)胞浸潤。藥物 組組織結(jié)構(gòu)正常，肌纖維未見變性、壞死等形態(tài)學(xué)改變。肌肉間質(zhì)中可見部分慢性炎 細(xì)胞呈灶狀及小片狀浸潤。家兔耳緣靜脈注射2.5mg/kg，結(jié)果顯示，無刺激性。由以上試驗(yàn)證明，亞葉酸鈉與腫瘤治療藥物有協(xié)同作用，無細(xì)胞毒性，注射無刺 激性。是一安全有效的腫瘤輔助治療藥物。下面舉出本發(fā)明的具體實(shí)施例，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例例1、左亞葉酸鈉凍干粉針劑處方l (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，稱取25g凍干骨架劑甘露醇 加入125ml的注射用水中溶解，加0.3%的活性炭煮沸20分鐘，過濾除炭；稱取50g 左亞葉酸加入60'C的400m注射用水中制成混懸液，滴加5n/nNaOH，攪拌使溶解，并 與已脫炭的甘露醇混合，控制pH值在7.0-8.0之間，再加0.05%活性炭，攪拌15分 鐘，過濾除炭，濾液經(jīng)0.811微孔濾膜過濾至澄清，再經(jīng)0.22u微孔濾膜過濾，放冷， 補(bǔ)加注射用水至600ml，攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量，無菌分裝于1000支西林瓶中， 每瓶根據(jù)中間體測(cè)定結(jié)果確定裝量約0.61111，半加塞、送凍干機(jī)冷凍干燥，蓋緊膠塞， 軋上鋁蓋，貼標(biāo)簽包裝。處方2 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)100mg)，同處方1，不同的是，稱 取50g凍干骨架劑甘露醇加入250ml的注射用水中溶解，稱取100g左亞葉酸加入60 'C的800m注射用水中制成混懸液，放冷，補(bǔ)加注射用水至1200ml,每瓶根據(jù)中間體 測(cè)定結(jié)果確定裝量約1.2ml。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150mg)，同處方1，不同的是，稱 取75g凍干骨架劑甘露醇加入375ml的注射用水中溶解，稱取178g左亞葉酸加入60'C的1200m注射用水中制成混懸液，放冷，補(bǔ)加注射用水至1800ml，每瓶根據(jù)中間體 測(cè)定結(jié)果確定裝量約L8ml。例2、左亞葉酸鈉凍干粉針劑處方1 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，同例1的處方1，不同的是， 稱取25g凍干骨架劑甘露醇加入125ml的注射用水中溶解，稱取53g左亞葉酸鈉加入 60'C的400ml注射用水中制成溶液，放冷，補(bǔ)加注射用水至600ml，每瓶根據(jù)中間體 測(cè)定結(jié)果確定裝量約0.6ml。處方2 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)lOOmg)，同例1的處方1，不同的 是，稱取50g凍干骨架劑甘露醇加入250ml的注射用水中溶解，稱取106g左亞葉酸鈉 加入60'C的800ml注射用水中制成溶液，放冷，補(bǔ)加注射用水至1200ml,每瓶根據(jù) 中間體測(cè)定結(jié)果確定裝量約1.2ml。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150rag)，同例1的處方1，不同的 是，稱取75g凍干骨架劑甘露醇加入375ml的注射用水中溶解，稱取159g左亞葉酸加 入60'C的1200ml注射用水中制成混懸液，放冷，補(bǔ)加注射用水至1800ml,每瓶根據(jù) 中間體測(cè)定結(jié)果確定裝量約1.8ml。例3、左亞葉酸鈉凍干粉針劑處方l(規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg),同例l的處方l,不同的是， 稱取5g右旋糖苷代替甘露醇。例4、左亞葉酸鈉小容量注射劑處方1 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，在無菌狀態(tài)下，用400ml 注射用水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜?，攪拌下加?0g左亞葉酸，得混懸液，加入5% 氫氧化鈉溶液85ml，使亞葉酸完全溶解為鹽，控制pH值在7.0—8.0之間，再加0.05% 活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，濾液經(jīng)0.811微孔濾膜過濾至澄清，再經(jīng)(K22u微孔 濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至2000ml,攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量，無菌和充氮下分 裝于1000支瓶中，密封。處方2 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)100mg),同處方1,不同的是，用 800ml注射用水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜鳎瑪嚢柘录尤?00g左亞葉酸，加入5%氫氧 化鈉溶液170ml，補(bǔ)加注射用水至2000ml。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150mg)，同處方1，不同的是，用 1200ml注射用水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜鳎瑪嚢柘录尤?50g左亞葉酸，加入5%氫氧 化鈉溶液255ml,補(bǔ)加注射用水至2000ml。例5、左亞葉酸鈉小容量注射劑處方l:(規(guī)格:每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)在無菌狀態(tài)下，用注射用水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜?，保持充氮狀態(tài)下加入400ml 的注射用水，攪拌下加入53g左亞葉酸鈉，使完全溶解，控制pH值在7.0—8.0之間， 再加0.05%活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，濾液經(jīng)0.8ii微孔濾膜過濾至澄清，再 經(jīng)0.22|1微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至2000ml，攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量，無 菌和充氮下分裝于1000支瓶中，密封。處方2 (規(guī)格:每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)lOOmg)，同處方1，不同的是，保 持充氮狀態(tài)下加入800ml的注射用水，攪拌下加入106g左亞葉酸鈉，補(bǔ)加注射用水 至2000 ml。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150mg)，同處方1，不同的是，保 持充氮狀態(tài)下加入1200ml的注射用水，攪拌下加入159g左亞葉酸鈉，補(bǔ)加注射用水 至2000 ml例6、左亞葉酸鈉大容量注射劑處方1 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，在無菌狀態(tài)下，用注射用 水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜鳎３殖涞獱顟B(tài)下加入50000ml的注射用水，攪拌下加入 50g左亞葉酸，得混懸液，加入5%氫氧化鈉溶液85ml，使亞葉酸完全溶解為鹽，控 制pH值在7.0—8.0之間，加入900g氯化鈉，再加0.05%活性炭，攪拌15分鐘,過濾 除炭，濾液經(jīng)0.811微孔濾膜過濾至澄清，再經(jīng)0.22u微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至 lOOOOOml，攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量，無菌和充氮下分裝于1000支瓶或袋中，密 封。處方2 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)100mg)，同處方1,不同的是，攪 拌下加入100g左亞葉酸鈉，加入5%氫氧化鈉溶液170ml,加入900g氯化鈉。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150mg)，同處方1，不同的是，攪 拌下加入150g左亞葉酸鈉，加入5%氫氧化鈉溶液255ml,加入900g氯化鈉。例7、左亞葉酸鈉大容量注射劑處方1 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，在無菌狀態(tài)下，用注射用 水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜?，保持充氮狀態(tài)下加入50000ml的注射用水，攪拌下加入 53g左亞葉酸鈉，使亞葉酸鈉完全溶解，控制PH值在7.0—8.0之間，加入900g氯化 鈉，再加0.05%活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，濾液經(jīng)0.8ii微孔濾膜過濾至澄清， 再經(jīng)0.2211微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至100000ml,攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量， 無菌和充氮下分裝于1000支瓶或袋中，密封。注也可用葡萄糖代替氯化鈉，或加入抗氧劑。處方2 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)100mg)，同處方l，不同的是，攪 拌下加入106g左亞葉酸鈉，加入900g氯化鈉。處方3 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)150mg),同處方l,不同的是，攪 拌下加入159g左亞葉酸鈉，加入900g氯化鈉。 例8、左亞葉酸鈉大容量注射劑處方1 (規(guī)格每支含左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)50mg)，在無菌狀態(tài)下，用注射用 水和氮?dú)夤嘧⑾礈旎旌先萜?，保持充氮狀態(tài)下加入50000ml的注射用水，攪拌下加入 53g左亞葉酸鈉，使亞葉酸鈉完全溶解，控制PH值在7.0—8.0之間，加入4500g氯化 鈉，再加0.05%活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，濾液經(jīng)0.811微孔濾膜過濾至澄清， 再經(jīng)0.22ii微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至500000ml，攪拌，混勻。測(cè)定中間體含量, 無菌和充氮下分裝于1000支瓶或袋中，密封。例9、左亞葉酸鈉的制備，稱取左亞葉酸100g,加入到400ml無水甲醇中，分次加入氫氧化鈉30g，加入分 子篩40g，常溫下攪拌lh，抽濾，濾除分子篩，濾液中加入400ml丙酮，充分混合均 勻，抽濾，濾餅烘干，得95g左亞葉酸鈉。
權(quán)利要求
1、藥物左亞葉酸鈉的制備方法，其特征在于稱取甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白中至少一種輔料，加入注射用水中溶解，加0.3％的活性炭煮沸20分鐘，過濾除炭；保持充氮(或不充氮)狀態(tài)下，在混合容器加入注射用水，攪拌下加入左亞葉酸鈉，使完全溶解，控制pH值在7.0-8.0之間，再加0.05％活性炭，攪拌15分鐘，過濾除炭，與已脫炭的輔料混合，經(jīng)0.8u微孔濾膜過濾至澄清，再經(jīng)0.22u微孔濾膜過濾，補(bǔ)加注射用水至所需量，攪拌，混勻，測(cè)定中間體含量，無菌和充氮下分裝或無菌分裝后干燥。每支針劑中左亞葉酸鈉以亞葉酸計(jì)為25-250mg，左亞葉酸鈉與輔料的重量配比為1∶0.1-1∶20。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的藥物左亞葉酸鈉的制備方法，其特征在于稱取甘露醇、 右旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白中至少一種輔料，加入注射用水中溶解，加0.3% 的活性炭煮沸20分鐘，過濾除炭，稱取左亞葉酸加入60'C的注射用水中制成混懸液， 滴加5%NaOH，攪拌使左亞葉酸溶解，并與已脫炭的輔料混合，控制pH值在7.0—8.0 之間。
3、 權(quán)利要求l所述的藥物左亞葉酸鈉在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于 將左亞葉酸鈉用于制備治療腫瘤的藥物。
全文摘要
藥物左亞葉酸鈉的制備方法和在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用，涉及一種用于制備治療腫瘤藥物的藥物左亞葉酸鈉的制備方法。藥物左亞葉酸鈉的制備方法有兩種一、稱取處方量的左亞葉酸，加入注射用水制成混懸液，加氫氧化鈉溶液(或碳酸鈉、碳酸氫鈉溶液)攪拌使全溶，加入含有甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白的至少一種輔料，注射藥劑包括經(jīng)過干燥以后的粉針劑和直接制取的液劑。二、稱取處方量的左亞葉酸鈉，加入注射用水，加入含有甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、水解蛋白的至少一種輔料，攪拌使全溶制成溶液，注射藥劑包括經(jīng)過干燥以后的粉針劑和直接制取的液劑。左亞葉酸鈉用于制備治療腫瘤的藥物。
文檔編號(hào)A61K31/519GK101229167SQ200810046919
公開日2008年7月30日 申請(qǐng)日期2008年2月21日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月21日
發(fā)明者齊建新 申請(qǐng)人:齊建新