專利名稱：：小檗堿在治療代謝綜合征中的用途的制作方法小檗堿在治療代謝綜合征中的用途本發(fā)明涉及一種小檗堿在治療代謝綜合征中的新用途。背貴技術(shù)小檗堿(Berberine)又稱黃連素，它是一種異喹啉生物堿，存在于小檗禾斗等4科10屬的許多植物中，其分子式為『201118^)4]+(見圖l)，分子量371.8。它的化學(xué)結(jié)構(gòu)有許多種，包括鹽酸小檗堿，硫酸小檗堿，檸檬酸小檗喊及磷酸小檗堿，其中鹽酸小檗堿的結(jié)構(gòu)被最多地用于臨床。小檗堿化學(xué)結(jié)構(gòu)圖-目前，作為一種高效低毒的廣譜抗菌藥物，小檗堿在臨床上被主要用于治療急慢性腸炎引起的腹灣。小檗堿治療糖尿病的記載首見于魏晉時(shí)的《名醫(yī)別錄》；早在本世紀(jì)初，各國(guó)對(duì)小檗堿已有深入研究；但小檗堿治療糖尿病的臨床價(jià)值真正引起廣泛注意始于本世紀(jì)八十年代。另外，最近一些研究發(fā)現(xiàn)，在血脂異常人群中，小檗堿還具有降低甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)及升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的作用。代謝綜合征(MetabolicSyndrome,MS)是一組以胰島素抵抗為核心的代謝性疾病的總稱，其中主要包括中心性肥胖、糖耐量異常(2型糖尿病(T2DM)或糖調(diào)節(jié)受損(IGR)〕、高血壓和脂代謝紊亂等。而該類患者的心腦血管疾病發(fā)生率顯著高于正常人群，主要表現(xiàn)為冠心病、心梗、心力衰竭、心律失常，口腦卒中。因此，對(duì)代謝綜合征進(jìn)行早期診斷和早期治療將有助于提高人4門3勺生活質(zhì)量同時(shí)降低心腦血管事件的發(fā)生。雖然小檗堿在人體使用已有兩千多年歷史，降糖及降脂作用研究也有一定程度，并已發(fā)現(xiàn)脂肪細(xì)胞和肝細(xì)胞均為小檗堿的重要靶細(xì)胞，小檗堿在體內(nèi)聽起的降糖和糾正脂質(zhì)代謝紊亂作用可能是基于對(duì)上述細(xì)胞的直接作用或間接作用產(chǎn)生的。但目前的國(guó)內(nèi)外研究無論對(duì)小檗堿治療糖脂代謝紊亂的臨床療效還是作用機(jī)制研究上仍然停留在零散的、糖脂各自獨(dú)立的層面上，并且存在著很多的不足，主要表現(xiàn)在1)缺乏大樣本多中心，隨機(jī)雙盲的前瞻性研究多中心和隨機(jī)雙盲試驗(yàn)是波公認(rèn)的對(duì)新藥或藥物新作用評(píng)估的最有效和最客觀的方法，而我國(guó)以《主對(duì)中藥小檗堿的研究由于受到方法學(xué)上的限制、并且人力物力等客觀條件往《主不能滿足大規(guī)模臨床研究需要，再加上對(duì)中藥研究傳統(tǒng)觀念的影響等多重因素，使得已有的臨床研究均僅停留在單中心，小樣本的回顧性臨床分析中，沒有采用國(guó)際公認(rèn)的新藥或藥物新用途研究中基本的隨機(jī)雙盲原則，因此很大程度上影響了研究的準(zhǔn)確性和可信性。同時(shí)，如果能設(shè)計(jì)多中心試驗(yàn)，將對(duì)其結(jié)果的普遍性提供更好的基礎(chǔ)，增強(qiáng)結(jié)論的可靠性。2)雖然糖脂代謝密不可分，但由于以往的臨床及實(shí)驗(yàn)研究多只強(qiáng)調(diào)了小檗堿對(duì)高血糖的積極影響，而只有近期的一篇文獻(xiàn)研究了小檗堿的臨床降脂作用，但當(dāng)中只提及了其對(duì)血脂的影響，而并沒有將糖脂代謝相互聯(lián)系。因此迄今為止，所有臨床試驗(yàn)均只涉及小檗堿對(duì)單一高血糖或單一血脂異?；颊叩淖饔?，而缺乏小檗堿對(duì)兩者同時(shí)存在異?；颊叩呐R床研究。這樣的研究忽略了小檗堿治療前后糖脂代謝的相互關(guān)系和共同變化。另一方面，糖脂代謝異常常同時(shí)存在于代謝綜合征患者中，因此，如果能同時(shí)研究小檗堿對(duì)糖脂代謝的影響，將首次在世界范圍內(nèi)提供小檗堿在人體內(nèi)治療代謝綜合征的客觀依據(jù)。3)對(duì)小檗堿改善胰島素抵抗的研究多停留在動(dòng)物試驗(yàn)和體外研究水平，至^缺乏客觀、精確和有效的人體內(nèi)評(píng)價(jià)。而目前，人體內(nèi)評(píng)價(jià)胰島素抵抗的"金標(biāo)準(zhǔn)"為高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗(yàn)，這項(xiàng)技術(shù)操作難度大，精確十生要矜高，而且花費(fèi)較高，因此在國(guó)內(nèi)只有少數(shù)幾家醫(yī)療機(jī)構(gòu)能有實(shí)力開展lt匕]凍祈究。雖然，胰島素抵抗是代謝綜合征的核心，是糖脂代謝性疾病重要的環(huán)節(jié)和聯(lián)系，但迄今為止，還沒有任何研究對(duì)小檗堿改善人體內(nèi)胰島素抵抗進(jìn)行過如此系統(tǒng)精確的評(píng)價(jià)。因此，迫切需要運(yùn)用精確胰島素抵抗檢測(cè)手段對(duì)其進(jìn)行全面評(píng)估。4)已如前述，代謝綜合征是一組以胰島素抵抗為核心的代謝性疾病的總禾?hào)|，并且常伴隨有高血糖、高血脂、中心性肥胖和高血壓等。雖然，目前對(duì)/J、襞堿分別治療高血糖、高血脂及胰島素抵抗等已有報(bào)道，但是對(duì)于小檗堿治療人體內(nèi)代謝綜合征，并且全面觀察后者每一組分治療前后的變化，到目前為止，國(guó)內(nèi)外還沒有報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種小檗堿在治療代謝綜合征中的新用途。通過大樣本多中心和隨機(jī)雙盲的前瞻性試驗(yàn)，揭示了小檗堿同時(shí)對(duì)糖脂代謝的影響，明確了小檗堿治療前后糖脂代謝的相互關(guān)系和共同變化。本發(fā)明首次提供了小檗堿用于人體內(nèi)治療代謝綜合征的臨床新用途。本發(fā)明通過多中心、前瞻性和隨機(jī)雙盲的安慰劑對(duì)照臨床試驗(yàn)證實(shí)，在2型糖尿病合并血脂異?；颊咧校\(yùn)用小檗堿治療后糖脂代謝紊亂得到顯著改善，血壓和體重指數(shù)均顯著下降，并且運(yùn)用高胰島素正葡萄糖鉗夾技術(shù)對(duì)患者治療前后胰島素抵抗改善程度進(jìn)行精確評(píng)估發(fā)現(xiàn)治療組胰島素抵抗程度亦有顯著下降。本發(fā)明的一些重要結(jié)果顯示1)與治療前相比，經(jīng)3月隨訪，治療組空腹血糖、糖負(fù)荷后2h血糖及糖化血紅蛋白(HbAlC)水平較對(duì)照組均有顯著下降；2)經(jīng)3月隨訪，治療組甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)及低密度脂建白膽固醇(LDL-C)水平均有顯著下降，而對(duì)照組治療前后無顯著差異；3)通il胰島素抵抗評(píng)估"金標(biāo)準(zhǔn)"——高胰島素正葡萄糖鉗夾技術(shù)的應(yīng)用顯示，與治療前相比，治療后，葡萄糖利用率(GDR)在用藥組顯著增加，但對(duì)照纟i治療前后變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；4)經(jīng)3月隨訪，治療組體重指數(shù)(BMI)下降昆著低于對(duì)照組，同時(shí)收縮壓和舒張壓在治療組亦顯著下降，且治療后收縮壓在兩組間比較差異顯著，由此提示小檗堿對(duì)改善患者體重及血壓方面也起到了積極有效的作用。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小檗堿在2型糖尿病合并血脂異?；颊咧心芡珺寸改善糖代謝及脂代謝紊亂、胰島素抵抗、中心性肥胖和血壓升高，由此說明小檗堿具有治療代謝綜合征的積極作用。圖1是兩組治療前后空腹血糖變化比較圖；圖2是兩組治療前后總膽固醇(TC)變化比較圖；圖3是兩組治療前后甘油三酯(TG)變化比較圖；圖4是兩組治療前后低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)變化比較圖；圖5是兩組治療前后鉗夾穩(wěn)態(tài)期葡萄糖利用率(GDR)比較圖。其中□為小檗堿組I為對(duì)照組*P<0.0001,#P<0.01,§P<0.05為治療后第l、2、3月分別與治療前比較的各組內(nèi)比較結(jié)果。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式，詳細(xì)描述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施方式僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)邗式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。1.本發(fā)明實(shí)驗(yàn)方案運(yùn)用多中心，分層隨機(jī)，雙盲和安慰劑對(duì)照方法，共收集初發(fā)2型糖尿病合并一項(xiàng)(或以上)血脂升高患者116例，所有受試者未經(jīng)任何降糖或降脂藥物治療。收集相關(guān)臨床資料〔包括受試者的年齡、性別、身高、體重、血壓、體重指數(shù)(BMI)(BMI-體重/身高2，單位kg/m2)、腰臀圍比(WHR)禾口既往史等〕，在嚴(yán)格飲食控制和合理運(yùn)動(dòng)的基礎(chǔ)上，按雙盲隨機(jī)入組原則力、為小檗堿治療組[給予小檗堿0.5bidp.o.即一天兩次口服，每次五片(0.1g每片)]和安慰劑(同等片數(shù)和用法)對(duì)照組，服藥期三個(gè)月，在此期間比較兩組用藥前后受試者的空腹和餐后兩小時(shí)(OGTT2h)血糖值和胰島素濃度f直，HOMA-胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)值，HbA化值，空腹血脂〔包括甘油三酯(TG)，總膽固醇(TC)，高、低密度脂蛋白膽固醇(HDL-C、LDL-C)，載脂蛋白A、B(ApoA，ApoB)〕，肝腎功能等生化指標(biāo)的差異，同時(shí)，在所有受試者中，隨機(jī)選擇半數(shù)受試者完成用藥前后高胰島素正葡萄糖鉗夾(hyperinsulinemiceuglycemicclamp)試驗(yàn)，并計(jì)算胰島素抵抗禾目關(guān)指標(biāo)〔穩(wěn)、態(tài)期平均葡萄糖輸注率(GDR)〕，以深入評(píng)價(jià)用藥前后的體內(nèi)胰島素敏感性的變化情況。2.本發(fā)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1)治療前后血糖及糖化血紅蛋白(HbA1C)的變化比較本研究通過為期3月的多中心前瞻性和隨機(jī)雙盲臨床研究結(jié)果顯示，與治療前相比，經(jīng)3月隨訪，治療組及對(duì)照組空腹血糖、OGTT2h血糖及糖化血紅蛋白(HbA1C)水平均有顯著改善。治療組空腹血糖在治療后1月已發(fā)生顯著下降(p0.0001)，而對(duì)照組因飲食及運(yùn)動(dòng)干預(yù)在治療后2月亦開始出現(xiàn)空腹血糖的顯著下降(p<0.05)，治療組在治療后空腹血糖下降1.4mmol/L(20.0%)(P<0.0001)，OGTT2h血糖水平下降3.1mmol/L(25.8%)(p<0.0001)，HbA1c水平下降0.9%p<0.0001)，均顯著低于對(duì)照組(p<0.0001)。由于本試驗(yàn)過程中受試者空腹血糖水平普遍較低(入組時(shí)，空菔血糖〈8mmol/L，HbA1C均值為7.5%)，因此，這一降糖效能已十分類似汙目前常用的各類降糖藥物。2)治療前后血脂各指標(biāo)的變化比較同樣，與治療前相比，經(jīng)3月隨訪，治療組甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平均有顯著下降，具體為TG下降35.1%(PO.0001),TC下降18.6%(PO.0001),LDL畫C下降21.7%(PO.0001),而對(duì)照組治療前后無顯著差異。HDL-C值兩組治療前后均無顯著差異(分別為p-0.564，p-0.863)。ANCOVA分析顯示，治療后，治療組TC，TG和LDL-C水平均顯著低于對(duì)照組(分別為p<0.0001，p=0.002和p<0.0001)。且治療組血清TC，TG和LDL-C水平自用藥后1月起即已出現(xiàn)顯著降低(p0.0001)。3)治療前后鉗夾所得葡萄糖利用率(GDR)(反應(yīng)胰島素抵抗程度)的變化比較通過胰島素抵抗評(píng)估"金標(biāo)準(zhǔn)"——高胰島素正葡萄糖鉗夾技術(shù)的應(yīng)用顯示，與治療前相比，治療后，葡萄糖利用率(GDR)在用藥組顯著增加(6.56±2.42vs.7.42±2.37mg/kg/min，p=0.037);但對(duì)照組治療前后變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(5.98士2.46vs.6.06±2.21mg/kg/min，p=0.86)。該結(jié)果與由空腹血糖及胰島素所得HOMAIR指數(shù)結(jié)果相似。這一結(jié)論充分提示，小檗堿在人體中，發(fā)揮了改善胰島素抵抗的重要作用。4)治療前后體重指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)及血壓的變化比較對(duì)次要療效指標(biāo)的研究顯示，經(jīng)3月隨訪，治療組和對(duì)照組體重指數(shù)(BMI)及腰臀比(WHR)均顯著下降，治療組分別為p<0.0001和p=0.019，對(duì)照組分別為p<0.0001和p=0.026。ANCOVA分析顯示，治療組BMI下降值顯著低于對(duì)照組(p-0.016)，而WHR變化，兩組無顯著差異(p=0.256)。而收縮壓和舒張壓在治療組均顯著下降(分別為p=0.001andp=0.002)，而對(duì),照fi收縮壓未見明顯降低而舒張壓顯著下降(分別為p=0.063andp=0.043)。ArCOVA分析顯示，兩組治療后收縮壓變化有顯著差異(卩=0.041)。由此可見，,」、驟堿對(duì)改善患者體重及血壓方面也起到了積極有效的作用。5)其他結(jié)果生化檢查結(jié)果顯示，治療后用藥組谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)，Y-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(Y-GT)與治療前相比均有顯著改善，結(jié)合小檗堿具有顯著^]降低血脂作用，可以推測(cè)，其對(duì)非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)有一定的治療作用。綜上所述，在2型糖尿病合并血脂異常人群中，小檗堿具有顯著的改善受試者空腹及餐后血糖、血脂及胰島素抵抗的作用，同時(shí)它還能有效降低受試者體重及血壓水平。上述治療作用充分提示小檗堿在治療代謝綜合征中具有積極的作用。兩組治療前后生化及臨床資料比較見表1其中AP值表示由配對(duì)t-檢驗(yàn)所得治療前后各組內(nèi)比較結(jié)果'P值表示由ANCOVA分析所得小檗堿組與對(duì)照組治療后結(jié)果比較表1.兩組治療前后生化及臨床資料比較<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>小檗堿作為一種高效低毒的廣譜抗菌臨床藥物為時(shí)已久，長(zhǎng)期服用無明顯釗作用。小檗堿在2型糖尿病合并血脂異?；颊咧心芡瑫r(shí)改善糖代謝及月旨{戈謝紊亂、胰島素抵抗、中心性肥胖和血壓升高，由此說明小檗堿具有治療{戈謝綜合征的積極作用。本發(fā)明首次提供了小檗堿用于人體內(nèi)治療代謝綜合征的臨床新用途，此結(jié)果將為中藥治療代謝綜合征的臨床新用途確立重要地位并提供新的依據(jù)，4吏袓國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)發(fā)揮新的光芒。權(quán)利要求1、一種小檗堿在治療代謝綜合征中的用途。全文摘要本發(fā)明提供一種小檗堿在治療代謝綜合征中的新用途。通過大樣本多中心和隨機(jī)雙盲的前瞻性試驗(yàn)，揭示了小檗堿對(duì)糖脂代謝的影響，明確了小檗堿治療前后糖脂代謝的相互關(guān)系和共同變化。小檗堿作為一種高效低毒的廣譜抗菌臨床藥物為時(shí)已久，長(zhǎng)期服用無明顯副作用。本研究結(jié)果揭示小檗堿在2型糖尿病合并血脂異?；颊咧心芡瑫r(shí)改善糖代謝及脂代謝紊亂、胰島素抵抗、中心性肥胖和血壓升高，由此說明小檗堿具有治療代謝綜合征的積極作用。本發(fā)明首次提供了小檗堿用于人體內(nèi)治療代謝綜合征的臨床新用途，此結(jié)果將為中藥治療代謝綜合征的臨床新用途確立重要地位并提供新的依據(jù)，使祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)發(fā)揮新的光芒。文檔編號(hào)A61K31/4353GK101219141SQ20081003278公開日2008年7月16日申請(qǐng)日期2008年1月17日優(yōu)先權(quán)日2008年1月17日發(fā)明者光寧,張志國(guó),張翼飛,娜朱,李小英,潔洪,王衛(wèi)慶,麗霍,顧衛(wèi)瓊,顧生虹申請(qǐng)人:光寧