專利名稱：：用于向皮膚或粘膜施用的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其特征在于，包含藻酸和/或其鹽，并且對皮膚或粘膜細胞的細胞毒性有所降低。此外，本發(fā)明還涉及一種用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法。
背景技術(shù)：
：藻酸具有在與二價或更高價的陽離子(如Ca")進行部分交聯(lián)后變?yōu)槟z(更粘稠)的作用，已知藻酸可以作為用于粘膜(如眼粘膜、鼻粘膜和口腔粘膜)的成分而施用(參見專利文獻l)。還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將含有藻酸的制劑施用于皮膚或粘膜時，存在于皮膚或粘膜上的少量Ca"與藻酸相接觸，使得所述制劑在皮膚或粘膜上凝膠化(更粘稠)，并因此可用于提高制劑在施用部位的滯留和維持活性成分所產(chǎn)生的作用。因為皮膚和粘膜(尤其是粘膜)對刺激和毒性非常敏感，因此給它們施用的成分需要具有低刺激性和低毒性。就刺激性而言，已報道藻酸不僅具有低刺激性，還具有降低其它化合物刺激性的作用(參見專利文獻2)。就細胞毒性而言，已報道藻酸的鈣鹽具有細胞毒性(參見專利文獻3)。然而，迄今為止，還沒有充分地檢查過其它藻酸鹽以及藻酸本身的細胞毒性。近來，對安全性的關(guān)注增加；因此，提供細胞毒性盡可能低的用于向皮膚或粘膜施用的組合物是所期望的。專利文獻1:日本專利申請爿>開No.2002-332248專利文獻2:日本專利申請公開No.2006-517200專利文獻3:日本專利申請4S開No.2001-21222
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的問題本發(fā)明的目的是提供一種用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其特征在于，包含藻酸和/或其鹽，降低對皮膚或粘膜的細胞毒性并且增加安全性。此外，本發(fā)明的目的還在于提供一種用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法。解決問題的技術(shù)方案作為用于解決上述問題的廣泛研究的結(jié)果，本發(fā)明人良現(xiàn)了以下幾點(i)因為常規(guī)的藻酸和/或其鹽是從海帶(tangleweed)等中純化并可為活體所接受的，所以存在分子量為約380至1，000，000多種的藻酸。包含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽占總量的約7至20%(通過GPC方法的峰面積比)。(ii)分子量等于或小于3,500的低分子量級分對粘膜細胞具有細胞*用；然而，分子量大于3,500的級分則對粘膜細胞不具有細胞毒作用。(iii)通過選擇基本上不含有分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽并將它們混合成用于向皮膚或粘膜施用的組合物，可顯著降低用于向皮膚或粘膜施用的組合物的細胞毒性；因此可增加其安全性。本發(fā)明通過做出基于上iOL現(xiàn)的進一步改進而得以完成。具體地，本發(fā)明涉及用于向皮膚和粘膜施用的以下組合物項目1-1:一種用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其特征在于，包含藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含有分子量等于或小于3,500的低分子量級分。項目1-2:根據(jù)項目l-l的所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其中所述藻酸和/或其鹽所包含的分子量為大于等于380至小于等于3,500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。項目1-3:根據(jù)項目l-l的所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其中所述藻酸和/或其鹽的含量為所述組合物總量的0.001~20wt.%。項目1-4:根據(jù)項目l-l的所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為液體制劑。項目1-5:根據(jù)項目l-l的所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目1-6:根據(jù)項目l-l的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為滴眼劑或洗眼劑。此外，本發(fā)明涉及用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的以下方法項目2-1:—種用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法，其包括從所述藻酸和/或其鹽中基本上除去分子量等于或小于3,500的低分子量級分的步驟。項目2-2:根據(jù)項目2-1的所述用于降低的方法，其中所述除去步驟是從藻酸和/或其鹽中除去低分子量級分，從而使得分子量大于等于380至小于等于3,500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。;^發(fā)明還涉及以下用途項目3-1:基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽在制備用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的用途。項目3-2:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物的細胞毒性降低。項目3-3:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述藻酸和/或其鹽所包含的分子量大于等于380至小于等于3,500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。項目3-4:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述藻酸和/或其鹽的含量為基于所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物總量的0.001~20wt.%。項目3-5:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為液體制劑。項目3-6:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目3-7:根據(jù)項目3-l的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為滴眼劑或洗眼劑。本發(fā)明還涉及以下用途項目4-1:基本上不含有分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽用于避免用于向皮膚或粘膜施用的組合物引起細胞毒性的用途。項目4-2:根據(jù)項目4-l的所述用途，其中所述藻酸和/或其鹽所包含的分子量大于等于380至小于等于3,500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。項目4-3:根據(jù)項目4-l的所述用途，其是在制備細胞毒性降低的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的用途。項目4-4:根據(jù)項目4-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為液體制劑。項目4-5:根據(jù)項目4-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目4-6:根據(jù)項目4-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為滴眼劑或洗眼劑。本發(fā)明還涉及以下用途項目5-1:基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的粘膜的細胞毒性并提高其中所含活性成分在皮膚或粘膜上的滯留的用途。項目5-2:根據(jù)項目5-l的所述用途，其中所述藻酸和/或其鹽所包含的分子量大于等于380至小于等于3，500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。項目5-3:根據(jù)項目5-1的所述用途，其是在制備細胞毒性降低的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的用途。項目5-4:根據(jù)項目5-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為液體制劑。項目5-5:根據(jù)項目5-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目5-6:根據(jù)項目5-1的所述用途，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為滴眼劑或洗眼劑。本發(fā)明還涉及藻酸和/或其鹽的以下用途項目6-1:藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分，用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性。項目6-2:根據(jù)項目6-1的所述藻酸和/或其鹽，其包含基于分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少的分子量大于等于380至小于等于3，500的級分。項目6-3:根據(jù)項目6-1的所述藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為液體制劑。項目6-4:根據(jù)項目6-l的藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目6-5:根據(jù)項目6-1的所述藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為滴眼劑或洗眼劑。本發(fā)明還涉及藻酸和/或其鹽的以下用途項目7-1:藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分，用于避免用于向皮膚或粘膜施用的組合物引起對皮膚或粘膜的細胞毒性和增加其中所含活性成分在皮膚或粘膜上滯留。項目7-2:根據(jù)項目7-1的所述藻酸和/或其鹽，其包含基于分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少的分子量大于等于380至小于等于3,500的級分。項目7-3:根據(jù)項目7-1的所述藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為液體制劑。項目7-4:根據(jù)項目7-1的所述藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。項目7-5:根據(jù)項目7-1的所述藻酸和/或其鹽，其中所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物為滴眼劑或洗眼劑。發(fā)明效果在本發(fā)明的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中，藻酸和/或其鹽的細胞毒性顯著降低；因此，可將其安全地用于對毒性敏感的粘膜。通常使用的藻酸和/或其鹽在溶液中容易沉淀；因此，它們難以配制。本發(fā)明所用的藻酸和/或其鹽可抑制沉淀的形成。因此，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物還具有與常規(guī)使用的藻酸和/或其鹽相比易于配制的優(yōu)點。此外，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物通過所包含的藻酸和/或其鹽在與體液(如汗液和淚液)相接觸時對皮膚或粘膜的作用而具有粘度增加和凝膠強度提高的極好效果。因此，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物可用于避免對皮膚或粘膜的細胞毒性、提高用于向皮膚的作用。本發(fā)明用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法提供了降低對粘膜細胞或皮膚細胞的細胞毒性的藻酸和/或其鹽；因此，所述方法可用之組合物的基礎(chǔ)成分。具體實施例方式I.用于向皮膚或粘膜施用的組合物所述藻酸是由甘露糖醛酸(以下可簡稱為"M")和古洛糖醛酸(以下可簡稱為"G")構(gòu)成的多糖，為嵌段共聚物，其中甘露糖醛酸的均聚物部分(MM部分)、古洛糖醛酸的均聚物部分(GG部分)以及無規(guī)排列的甘露糖醛酸和古洛糖醛酸的部分(MG部分)是無規(guī)鍵合的。在本發(fā)明的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中，使用基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸或其鹽。"基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸"意指其中除去分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸，除了其中不可能被完全除去的分子量等于或小于3，500的低分子量級分以外，所述藻酸不包含低分子量級分。更具體地，作為"基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸"的一個實例，以下描述了當(dāng)進行GPC方法時，分子量大于或等于380至等于或小于3,500的級分(與分子量大于或等于380至等于或小于3，500的分子量相對應(yīng)的總峰面積)占分子量大于或等于380的級分的總量(與分子量大于或等于380的級分相對應(yīng)的總峰面積)的比例(下文簡稱為"分子量等于或小于3,500的比例)為2.5%或更小的藻酸?；诮档蛯ζつw或粘膜細胞的毒性的出發(fā)點，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物中所使用的藻酸中分子量等于或小于3,500的比例優(yōu)選為0至小于2.0%，更優(yōu)選為0至小于1.5%，最優(yōu)選為0至小于1.0%。換言之，本發(fā)明中所使用的藻酸中分子量大于3,500的級分(高分子量級分)占分子量大于或等于380的級分總量的97.5%以上，優(yōu)選為98.0至100%，更優(yōu)選為98.5至100%,最優(yōu)選為99.0至100%。在本發(fā)明中，可通過凝膠滲透色譜方法(GPC方法)測定藻酸的分子量和分子量等于或小于3，500的比例。具體條件示于參比實施例中。對于本發(fā)明中使用的藻酸和/或其鹽而言，甘露糖醛酸與古洛糖醛酸的組成比(M/G比；摩爾比)并非特別限定的。例如，廣泛使用M/G比為0.4至4.0的藻酸。M/G比越小，組合物就越容易開始膠凝。因此，從改善藥理活性成分在施用部位的滯留的觀點來看，M/G比為2.5或更小，優(yōu)選2.0或更小，更優(yōu)選1.6或更小，最優(yōu)選1.0或更小是所期望的。在本發(fā)明中，所述M/G比是通過將藻酸分為幾個組成部刺blockunit)、將其分級并分別進行定量而計算的值；根據(jù)A.Haugetal.，Carbohyd.Res.32(1974)，第217-225頁中所述的方法具體測定所述比值。在本發(fā)明中所用的藻酸和/或其鹽中，MM部分、GG部分和MG部分的比例并沒有特別限定，其可根據(jù)所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物的用途或形式而進行適當(dāng)選擇。本發(fā)明中所用的藻酸的鹽沒有具體限定，只要其形式是基本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸的鹽并且是藥理或生理上可接受的即可，所述藻酸鹽的具體實例包括鈉鹽、鉀鹽、三乙醇胺鹽、銨鹽等。所述藻酸鹽可單獨使用或者以其兩種或更多種類型的任意組合而使用。在本發(fā)明的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中，可使用單一類型的藻酸及其鹽，或者可使用其兩種或更多種類型的任意組合，只要其基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分即可。特別地，將藻酸、藻酸鈉和藻酸鉀優(yōu)選用在本發(fā)明中，因為它們是可溶于水的。從有效實現(xiàn)本發(fā)明效果、易于制備等觀點來看，藻酸是特別優(yōu)選的。可通過對可得到的藻酸和/或其鹽、或根據(jù)常規(guī)方法等由海帶純化的藻酸和/或其鹽進行凝膠過濾除去分子量等于或小于3，500的級分而制得上述分子量范圍的藻酸和/或其鹽?；蛘撸赏ㄟ^將可得到的藻酸和/或其鹽、或根據(jù)常規(guī)方法由海帶純化的藻酸和/或其鹽加入到比水極性低的溶液中并收集所產(chǎn)生的沉淀而制備上述分子量范圍的藻酸和/或其鹽。比水極性低的溶液的具體實例包括低級醇(如甲醇和乙醇)，有機溶劑(如丙酮)，以及它們和水的液體混合物。當(dāng)本發(fā)明中所用藻酸和/或其鹽是由海帶純化而來的時，用作原料的海帶的實例包括來自智利的褐海藻(to臓flwi'gmycgws)、來自智利的丄ess卵iVg/謂'c""s、來自西海岸的巨藻(AfflcwcvsZ/sjpynTmi)、來自南非的五cA:fowiVi附ox/附fl、來自^^f馬尼亞的海洋巨藻(卯加wm附)、A自:i匕歐的褐藻(JscfwAv/fa附)、A自l匕gt的:J匕^r^"帶(丄鵬iVi肌ViA卿r^mi)、來自北歐的掌狀海帶(丄fl附/AmriVi必g/似似)等。在本發(fā)明的用于向皮膚或粘膜施用的組合物中，所述藻酸級分的混合比不是特別限定的，可以根據(jù)所施用粘膜的類型、用于向皮膚或粘膜施用的組合物的形式等進行適當(dāng)選擇。具體地，所述藻酸級分(換算為藻酸的重量)的混合比通常為基于用于向皮膚或粘膜施用的所述組合物的總量的0.001~20wt.%，優(yōu)選0.005~10wt.%。具體地，針對所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物的每種用途的所述藻酸級分(換算為藻酸的重量)的混合比如下當(dāng)所述組合物是眼用組合物時，其通常為0.001~1wt.%，優(yōu)選0.005~1wt.%，更優(yōu)選0.01~0.5wt.o/0，最優(yōu)選0.01~0.2wt.%;當(dāng)所述組合物是鼻用組合物時，其通常為0.001~10wt.%,優(yōu)選0.01~5wt.%，更優(yōu)選0.05~1wt.%;當(dāng)所述組合物是口腔用組合物時，其通常為0.001-20wt.%，優(yōu)選0.01~10wt.%，更優(yōu)選0.015wto/o;當(dāng)所述組合物是直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物時，其通常為0.001~10wt.%，優(yōu)選0.0055wt.。/。，更優(yōu)選0.01~2wt.%;當(dāng)所述組合物是皮膚用組合物時，其通常為0.001~20wt.%，優(yōu)選0.01~10wt.%,更優(yōu)選0.01~5wt.%。本發(fā)明的用于向皮膚或粘膜施用的組合物除了上述的藻酸和/或其鹽以外，還可包含活性成分(藥理活性成分、生理活性成分等)。這些成分的實施例包括但不限于解充血劑、調(diào)節(jié)眼肌的藥物、抗炎藥物或收斂劑、抗過敏藥物、維生素、氨基酸、抗菌藥物或消毒劑、糖類、聚合物或其衍生物、纖維素或其衍生物、局部麻醉劑、抗青光眼藥物和抗白內(nèi)障藥物。本發(fā)明中所用藥理活性成分和生理活性成分包括以下成分解充血藥例如a-腎上腺素能藥物如腎上腺素、鹽酸腎上腺素、鹽酸麻黃堿、鹽酸羥甲喳啉、鹽酸四氫哇啉、鹽酸萘喳啉、鹽酸苯福林、鹽酸曱基麻黃堿、重酒石酸腎上腺素、硝酸萘哇啉等，所有這些化合物均可為d-形式、l-形式或dl-形式；調(diào)節(jié)眼肌的藥物例如具有與乙酰膽堿類似的活性中心的膽堿酯酶抑制劑，如甲硫酸新斯的明、托品酰胺、土木香素、硫酸阿托品等；抗炎藥物或收斂劑例如硫酸鋅、乳酸鋅、尿嚢素、s-氨基己酸、吲咪美辛、氯化溶菌酶、硝酸銀、普拉洛芬、奠磺酸鈉、甘草酸二鉀、甘草酸二銨、雙氯芬酸鈉、溴芬那酸鈉、鹽酸小檗堿、硫酸小檗堿等；抗過敏藥物例如左卡巴斯汀、氨來卩占諾(amlexanox)、異丁司特、他扎司特、曲尼司特、異西噴地、二苯特羅、曲普立咬、曲吡那敏、松齊拉敏、美海屈林、芬乙嗪、奧沙米特、曱磺司特、色甘酸鈉、吡嘧司特鉀等；維生素例如視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、鹽酸吡哆醇、黃素腺嘌呤二核苷酸鈉、磷酸吡噴醇、氰鈷銨、泛醇、泛酸鉀、泛酸鈉、抗壞血酸、醋酸生育酚、煙酸生育酚酯、琥珀酸生育酴酯、生育酚琥珀酸釣、泛醒衍生物等；氨基酸例如氨基乙磺酸(?；撬?、谷氨酸、肌酸酐、天冬氨酸鈉、天冬氨酸鉀、天冬氨酸鎂和天冬氨酸鎂鉀、谷氨酸、谷氨酸鈉、谷氨酸鎂、s-氨基己酸、甘氨酸、丙氨酸、精氨酸、賴氨酸、Y-氨基丁酸、Y-氨基戊酸、硫酸軟骨素鈉等，所有這些化合物均可為d-形式、1-形式或dl-形式；抗菌藥物或消毒劑例如烷基多氨基乙基甘氨酸(alkylpolyaminoethylglycine)、氯霉素、磺胺甲基異嗜唑、磺胺異嗜唑、磺胺曱基異嚅唑鈉、磺胺異^惡唑二乙醇胺、磺胺異喁唑單乙醇胺、碘胺甲基異嚅唑鈉(sulfisomezolesodium)、磺胺二曱異嘧咬鈉、氧氟沙星、諾氟沙星、左氧氟沙星、鹽酸洛美沙星、阿昔洛韋等；糖類例如單糖、二糖，尤其是葡萄糖、麥芽糖、海藻糖、蔗糖、環(huán)糊精、木糖醇、山梨醇、甘露醇等；聚合物或其衍生物例如阿拉伯膠、刺梧桐膠、黃原膠、角豆膠、瓜耳膠、愈創(chuàng)木膠(guaiac)、溫百籽、達馬脂、黃蓍膠、安息香膠、剌槐豆膠、酪蛋白、瓊脂、糊精、葡聚糖、角叉菜膠、明膠、膠原、果膠、淀粉、聚半乳糖醛酸、幾丁質(zhì)及其衍生物、殼聚糖及其衍生物、彈性蛋白、肝素、類肝素、硫酸肝素、疏酸類肝素、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、神經(jīng)酰胺、聚乙烯醇(完全或部分皂化的)、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯甲基丙烯酸酯、聚丙烯酸、羧乙烯聚合物(carboxyvinylpolymer)、聚乙烯亞胺、核糖核酸、脫氧核糖核酸、聚乙二醇(macrogol)及其可藥用鹽等；纖維素或其衍生物例如乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羧乙基纖維素、硝酸纖維素等；局部麻醉劑例如鹽酸普魯卡因、鹽酸利多卡因等；抗青光眼藥物例如異丙基烏諾前列酮、腎上腺素、鹽酸阿可樂定、鹽酸卡替洛爾、鹽酸地匹福林、鹽酸杜塞跣胺、鹽酸毛果蕓香堿、鹽酸布那哇噪、鹽酸布拉洛爾、鹽酸倍他洛爾、鹽酸苯呋洛爾、卡巴膽喊、鹽酸左布諾洛爾、腎上腺素二戊酸鹽、溴地斯的明、尼普洛爾(nipradiolol)、馬來酸漆嗎洛爾、拉坦前列腺素等；抗白內(nèi)障藥物例如谷胱甘肽、吡諾克辛和5,12-二氫四氮戊省二磺酸鈉(sodium5，12國dihydroazapentacenedisulfonate)。每種成分的混合比在皮膚施用制劑、粘膜施用制劑等領(lǐng)域中是已知的.因此，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物中上述成分的混合比將根據(jù)所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物的劑型、藥理活性成分或生理活性成分的種類等而進行適當(dāng)選擇。例如，所述藥理活性成分或生理活性成分的混合比可選自基于所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物總量的約0.0001至30wt.%，優(yōu)選約0.001至10wt%。本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物可包含一種成分或添加劑、或者相組合的超過一種的成分或添加劑，其可根據(jù)所述組合物的用途或形式依據(jù)常規(guī)方法選自多種成分和添加劑，只要本發(fā)明的效果不受到影響即可。這些成分或添加劑的實例包括通常用于制備半固體或液體制劑的載體(含水溶劑、水性基質(zhì)或油性基質(zhì)等)，以及各種添加劑如表面活性劑、防腐劑、消毒劑或抗菌藥物、pH調(diào)節(jié)劑、張力調(diào)節(jié)劑(tonicityagent)、螯合劑、緩沖劑和穩(wěn)定劑。本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的典型成分的實例包括但不限于載體含水溶劑比如水和含水乙醇；表面活性劑例如非離子表面活性劑如聚氧乙烯(以下稱為POE)-聚氧丙烯(以下稱為POP)嵌段共聚物(例如泊洛沙姆407)、乙二胺的POE-POP嵌段共聚物加合物(例如泊洛沙胺)、POE失水山梨醇單油酸酯、POE氬化荒麻油(例如POE(60)氫化蕘麻油)和硬脂酸聚烴氧酯(polyoxylstearate);甘氨酸型兩性表面活性劑如烷&氨基乙基甘氨酸;陽離子表面活性劑如烷基季銨鹽(例如^4L氯銨、節(jié)索氯銨)等，括號內(nèi)的數(shù)字代表所加的摩爾數(shù)；防腐劑、消毒劑或抗菌藥物例如烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽、苯曱酸鈉、乙醇、勤L氯銨、千索氯銨、葡糖酸氯己定、氯丁醇、山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、硫酸羥會啉、苯乙醇、節(jié)醇、雙胍(例如聚六亞甲基雙胍)、Glokill(Rhodia)等；pH調(diào)節(jié)劑例如鹽酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、三乙醇胺、單乙醇胺、二異丙醇胺、硫酸、聚磷酸、丙酸、草酸、葡糖酸、富馬酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸、葡糖酸內(nèi)酯、乙酸銨等；張力調(diào)節(jié)劑例如亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鈉、氯化鎂、乙酸鉀、乙酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、硫代硫酸鈉、硫酸鎂、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、甘油、丙二醇等；螯合劑例如抗壞血酸、依地酸四鈉、依地酸鈉、檸檬酸等；緩沖劑例如檸檬酸鹽緩沖劑、乙酸鹽緩沖劑、碳酸鹽緩沖劑、硼酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑等。更具體地是檸檬酸、檸檬酸鈉、乙酸、乙酸鉀、乙酸鈉、碳酸氬鈉、碳酸鈉、硼酸、硼砂、磷酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀等；穩(wěn)定劑例如二丁基羥基甲苯、氨基丁三醇、甲醛次硫酸氫鈉(雕白粉)、生育酚、焦亞硫酸鈉、單乙醇胺、單硬脂酸鋁、單硬脂酸甘油酯等。本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物的劑型沒有特別限定。可列舉出包括液體、混懸劑、軟骨、乳骨、凝膠、洗劑、粘附劑(adhesivepreparation)、噴霧劑以及氣霧劑的多種劑型。這些劑型中優(yōu)選使用液體?？筛鶕?jù)制劑等依照常規(guī)方法利用合適的基質(zhì)或添加劑制備本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物。本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物的施用部位可以是皮膚或粘膜，優(yōu)選粘膜。作為施用部位的粘膜的類型沒有特別限定，本發(fā)明的組合物可以施用給構(gòu)成活體的多種粘膜。具體地，當(dāng)本發(fā)明的組合物作為用于粘膜施用的組合物使用時，其可用作用于眼粘膜(比如角膜和結(jié)膜)施用的眼用組合物；用作用于鼻腔、耳腔等施用的耳鼻用組合物；用作用于口的牙槽弓、舌、唇，口腔粘膜等施用的口腔用組合物；用于直腸施用的直腸用組合物；用于陰道施用的陰道用組合物；用于尿道施用的尿道用組合物等。上述眼用組合物的實例包括滴眼劑(包括眼科藥物、眼科溶液)、洗眼劑(包括洗眼劑(eyelotion)、洗眼液(collyrium))、眼骨、隱形眼鏡用的溶液、以及隱形眼鏡護理產(chǎn)品(清洗溶液、儲備溶液、消毒溶液、多用途溶液等)。上述滴眼劑和洗眼劑包括可在適當(dāng)位置接觸時滴入的滴眼劑和洗眼劑。本文中使用的術(shù)語隱形眼鏡包括所有類型的隱形眼鏡，包括硬隱形眼鏡(包括可透過氧的硬隱形眼鏡)、軟隱形眼鏡等。上述耳鼻用組合物的實例包括滴鼻劑(包括洗鼻劑(collunarium)和鼻內(nèi)溶液(nasalsolution))、洗鼻劑(包括洗鼻藥物和洗鼻溶液)以及滴耳劑(包括耳鼻用藥物和耳鼻用溶液)。上述口腔用組合物的實例尤其包括口咽藥物(oropharyngealdrug)、漱口劑(mouthwash)等。上述直腸用組合物的實例包括痔掩劑(hemorrhoidalagent)、栓劑等。上述陰道用組合物的實例包括陰道栓劑和陰道乳骨。尿道用組合物的實例包括潤腸劑(demulcent)和表面麻醉劑。在上述施用方法中，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物優(yōu)選作為眼用組合物、更優(yōu)選作為滴眼劑或洗眼劑來使用。在構(gòu)成活體的粘膜中，已知眼粘膜是容易受到細胞毒性的有害作用影響的粘膜之一；然而，本發(fā)明用于向皮膚或粘膜施用的組合物也可用于對細胞毒性的有害作用敏感的眼粘膜，所述組合物具有高安全性而不引起對眼粘膜的細胞毒性。優(yōu)選洗眼劑，因為其大量用于清洗眼粘膜。II.用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法如上所述，可通過從藻酸和/或其鹽中基本上除去分子量等于或小于3,500的低分子量級分而提供對粘膜或皮膚細胞不產(chǎn)生細胞毒性的藻酸和/或其鹽。因此，本發(fā)明還從不同的方面提供了一種用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法，所述方法包括從藻酸和/或其鹽中基本上除去分子量等于或小于3,500的低分子量級分的步驟。在所述降低方法中，用于從藻酸和/或其鹽中基本上除去分子量等于或小于3,500的低分子量級分的方法描述于上述"I.用于向皮膚或粘膜施用的組合物"部分中。III.基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽的用途如上所述，所^本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽可用于制備用于向皮膚或粘膜施用的組合物，尤其是用于向皮膚或粘膜施用的具有降低的細胞毒性的組合物。因此，本發(fā)明還提供了基本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽在制備用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的用途。此外，所述藻酸和/或其鹽可用于避免引起用于向皮膚或粘膜施用的組合物的細胞毒性，所^合物包含含有分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽。因此，本發(fā)明還提供了基本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽用于避免引起細胞毒性的用途。本發(fā)明還提供了"上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性、增加用于向皮膚或粘膜施用的組合物中所包含活性成分的滯留的用途。IV.基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽的用途如上所述，基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽可通過包含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽而用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性。因此，本發(fā)明還提供了基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性的藻酸和/或其鹽。此外，所述藻酸和/或其鹽可用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性，滯留。因此，本發(fā)明還提供了基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性、增加用于向皮膚或粘膜施用的組合物中所含活性成分在皮膚或粘膜上的滯留的藻酸和/或其鹽。實施例以下實施例和測試實施例更詳細地舉例說明本發(fā)明，但不應(yīng)解釋為限制其范圍。參比實施例測定藻酸分子量的方法才艮據(jù)以下方法測定藻酸的分子量和分子量等于或小于3，500的比例。首先，將八種已知分子量的支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品用作分子量標(biāo)志物，以通過將GPC方法的保留時間對支鏈淀粉的分子量作圖來繪制校正曲線。然后，將藻酸(校正藻酸樣品)進行GPC方法，根據(jù)前i^制的校正曲線得到藻酸(所述校正藻酸樣品)的估計重均分子量。此外，在使用多角度激光散射檢測器(MALS)作為檢測器以得到重均分子量的情況下，將藻酸(校正藻酸樣品)進行GPC方法，由此校正前述利用支鏈淀粉得到的關(guān)系方程。然后，通過利用此校正關(guān)系方程，測定所述藻酸的分子量和分子量等于或小于3,500的比例。詳細內(nèi)容如下。(1)GPC測定^Hf采用以下測定M進行聯(lián)用液相色鐠法的^滲透色譜方法(GPC方法)。(1-1)檢測器差示折光檢測器或多角度激光散射檢測器(MALS)()多角度激光散射檢測器(MALS):使用DAWN-EOS型多角度激光散射檢測器。(1-1-2)波長i殳定為690urn(半導(dǎo)體激光器)。(1-1-3)第二維里系數(shù)(A2)x濃度(c)設(shè)定為0mol/g。(1-1-4)折光指數(shù)增量(dn/dc)設(shè)定為0.114mL/g。(1國1誦5)溫度設(shè)定為23±2。C。(1-2)柱將三根不銹鋼柱相連使用，每才^分別填充有用于聚環(huán)氧乙烷或聚乙二醇的水溶液的分子量為IO，OOO，OOO、400,000和5,000的排阻限度的親水性乙烯基聚合物(粒徑分別為13Mm、10pm和7Jim).每根不銹鋼柱的內(nèi)徑為7.8mm，長度為30cm。(1-3)柱溫i殳定為35°C。(1-4)流動相使用通過以下方法得到的溶液將11.5g磷酸二氫銨和17.5g氯化鈉溶解在蒸憤水中至總體積為1000mL，并用磷酸將pH調(diào)節(jié)至4.0。(1-5)流動相的^il設(shè)定為0.75mL/分鐘。在4^f究中，基線的穩(wěn)定很重要；因此，溫度控制和儀器平衡必須充分進行，以獲得穩(wěn)定的基線。在參比路徑打開的情況下流動相運行超過一夜后，再在參比路徑關(guān)閉的情況下運行流動相超過一夜。在分析中，室溫不應(yīng)改變；儀器內(nèi)部(比如柱、管和檢測器)的溫度也必須保持恒定。(2)利用分子量標(biāo)志物得到校正曲線將可獲得的作為分子量標(biāo)志物的支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品(八種以上已知分子量為5，卯0~788，000的支鏈淀粉)和葡萄糖分別溶解在上述GPC測定^fr所述的流動相中至0.1w/v。/。的濃度，并將其每100進行下述的GPC方法以獲得其洗脫時間。通過將在y軸上的每種支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品的分子量M的對數(shù)(logl。M)對其在x軸上的洗脫時間作圖而得到支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品的校正曲線，確定所述校正曲線的線性方程(以下方程l)。方程l:y=ax+by:log10Mx:洗脫時間19(3)校正曲線的線性方程的校正(3-1)校正藻酸樣品的制備將1002千海帶(to卿/flw/gfgsc卿)切斷、用水清洗，并在3L0.2wt。/。的疏酸中浸泡2小時。取出提取物，并將殘留物在1L次氯酸鈉(有效氯10.5wt.%)水溶液中浸泡10分鐘，然后收集殘留物，隨后加入3L純化水并靜置10小時。向此溶液中加入同樣體積的以硫酸酸化的甲醇-水溶液(2評^%硫酸、90wt,o/o甲醇、余量為水)，并將所得沉淀通過過濾回收并干燥。將此3g干燥沉淀分批加入到250mL水中并攪拌10分鐘。在確認已均勻^t^水中后，加入0.825g碳酸鈉，并將混合物再攪拌20分鐘以溶解沉淀。在確認沉淀已完全溶解后，加入水至總重量為300g以得到藻酸的粗溶液。向200g此藻酸粗溶液中分批加入1,800mL丙酮，然后攪拌30分鐘，然后通過濾紙((])110mm)過濾溶液。收集濾紙上得到的殘留物，然后在室溫下將其干燥，蒸鎦掉丙酮以得到校正藻酸樣品。(3-2)利用支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品測定校正藻酸樣品的假定重均分子量將以上制備的校正藻酸樣品稱重并在上述GPC測定條件中所述的流動相中溶解成O.lw/v。/。的濃度以制備樣品溶液。將該樣品溶液進行GPC方法以進行分析。在對此校正藻酸樣品進行分析之后的數(shù)據(jù)處理中，將藻酸的峰分為每0.1分鐘洗脫時間的i部分，并通過自動積分方法計算每一部分的面積(An)。此外，將每個部分的洗脫時間代入方程l以計算其M值，所述M值被視為是每一部分藻酸的假定分子量(Mn假定)。此外，將每一部分的面積值(An)除以該部分藻酸的假定分子量(Mn假定)以計算該部分藻酸分子的假定數(shù)目(Nn假定)。將由此計算的假定分子量(Mn假定)和假定分子數(shù)(Nn假定)代入以下方程2中以計算校正藻酸樣品的假定重均分子量(Mw假定)。方程2Mw假定n^!(N11假定x&假定xMn假定)^^1^(Nn假定xM假定)(3-3)校正藻酸樣品的真實重均分子量的測定將校正藻酸樣品稱重并在上述GPC測定條件中所述的流動相中溶解成0,5w/v。/n的濃度以制備樣品溶液。將IOO該樣品溶液進行GPC方法，對該方法而言將多角度激光散射檢測器(MALS)相連接作為檢測器，并通過GPC-MALS方法測定真實重均分子量(Mw真實)。通過Berry作圖分析對所檢測到的單個峰進行重均分子量的計算，并讀出斜率的值。(3-4)線性方程的校正通過校正藻酸的假定分子量(Mn假定)使得利用方程2計算的藻酸假定重均分子量(Mw假定)等于在上述(3-3)GPC-MALS方法中所計算的真實重均分子量(Mw真實)，測定每一部分藻酸的真實分子量(Mn真實)。具體而言，計算b，，使得Mw真實等于通過將以下值代入上述方程2中的Mn假定和Nn假定后所計算得到的值。Mn假定，10nNn假定An/10n利用以下方程3(其中包含以上得到的a和b，)來得到藻酸的真實校正曲線。方程3:y=ax+b，y:log10Malgx:洗脫時間Malg:藻酸的分子量(4)分子量和分子量等于或小于3,500的峰面積的計算對于要測定的藻酸和/或其鹽來說，將通過GPC方法得到的色鐠圖中每一個峰的洗脫時間應(yīng)用到上述方程3中所表示的校正曲線上，從而計算每一個峰的分子量。在本發(fā)明中，利用Agilent1100系列AgilentChemStation(AgilentTechnologies)采用以下i史定條件通過自動積分方法或通過類似方法來計算通過GPC方法得到的色鐠圖中的峰面積。21.初始設(shè)定斜率靈^t度5峰寬10峰面積截除100峰高截除10肩斜'程序0.1秒鐘積分關(guān)閉相應(yīng)于分子量1，100，000的藻酸的洗脫時間BaselineatValleys開相應(yīng)于分子量l，OOO，OOO的藻酸的洗脫時間積分開相應(yīng)于分子量3,500的藻酸的洗脫時間分流峰開相應(yīng)于分子量3,000的藻酸的洗脫時間斜率靈敏度2.5。分子量等于或小于3，500的藻酸的峰面積計算為分子量等于或大于380至等于或小于3,500的藻酸的峰面積。測試實施例11.藻酸的制備其中未除去低分子量級分的藻酸的制備向5g來自智利的干海帶("/gygscg/is)片中加入100水；使混合物在室溫下靜置60分鐘，然后在90~100。C的水浴中加熱30分鐘，同時偶爾用玻璃棒進行攪拌。然后，將混合物在4。C冷卻約3小時，利用濾紙(ADVANTEC,No.2，*110mm)過濾，然后收集濾液。向50mL此溶液中加入450mL丙酮，然后攪拌并以同樣方式通過濾紙過濾，然后收集沉淀。干燥沉淀而得到藻酸(對比實施例1)。其中除去了低分子量級分的藻酸的制備和低分子量級分藻酸的制備將100g來自智利的干海帶U，/mViw&mscg/is)切斷、用水清洗,并在3L0.2wt。/。的硫酸中浸泡2小時。取出提取物，并將殘留物在1L次氯酸鈉(有效氯10.5wt.%)水溶液中浸泡10分鐘，然后收集殘留物，隨后加入3L純化水并靜置10小時。向此溶液中加入同棒體積的以硫酸酸化的曱醇-7JC溶液(2wt.n/。硫酸、90wt/Z。甲醇、余量為水)，并將所得沉淀通過過濾回收并干燥。將此3g干燥沉淀分批加入到250mL水中并攪拌IO分鐘。在確認已均勻^t^水中后，加入0.825g碳酸鈉，并將混合物再攪拌20分鐘以溶解沉淀。在確i人沉淀已完全溶解后，加入水至總重量為300g以得到藻酸的粗溶液。向200g由此獲得的藻酸粗溶液中分批加入1，800mL丙酮，然后攪拌30分鐘，然后通過濾紙(ADVANTEC,No.2,(j)110mm)過濾溶液。收集濾紙上得到的殘留物，然后在室溫下將其干燥，蒸餾掉丙酮以得到未溶解在丙酮中的藻酸級分(即其中除去低分子量級分的藻酸，實施例1)。相反，收集過濾后得到的濾液并在減壓下(100~150mmHg，25°C)蒸憤掉丙酮和水，以得到溶解在丙酮中的藻酸級分(即低分子量級分藻酸；對比實施例2)。2.所制備藻酸的分子量分布的測定通過利用液相色譜法(Agilent1100系統(tǒng)(AgilentTechnologies))，控制器/數(shù)據(jù)處理裝置G2170AJChemStation，泵G1311A，注射器G1329A,檢測器差示折it^測器G1362A(預(yù)設(shè)溫度35。C)，恒溫箱G1316A)并根據(jù)在以上參比實施例中所述的條件和方法，測定上述實施例l和對比實施例1和2中所得到的藻酸中分子量等于或小于3,500的比例。;^L據(jù)上述參比實施例中所述的方法，通過以下步驟測定分子量等于或小于3,500的比例制^^校正藻酸樣品，測定所述校正藻酸樣品的重均分子量，利用支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品(ShodexP-82，ShowaDenko)繪制校正曲線，針對實施例1以^J"比實施例1和2的藻酸計算通過GPC方法所檢測到的每個峰的分子量和所述峰的面積。每種藻敏實施例1以狄比實施例1和2)中分子量等于或小于3,500的比例的結(jié)果如下。表l實施例l對比實施例l對比實施例2分子量小于等于3，500的比例2，3%7.7%12,4%3.所制備藻酸的細胞毒性的評價進行了對上述制備的藻酸(實施例1以及對比實施例1和2)的細胞毒性的測試。首先，通過將每種藻酸在細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)基199(GIBCO)(添加有10%(v/v)胎牛血清(DaiichiKagakuYakuhin))中溶解成0.2或2.0%(w/v)的濃度而制備藻酸溶液。然后，將兔角膜上皮細胞系SIRC(ATCC編號CCL-60)以2.0x105個細;|&/孔鋪板于48孔微孔板(Corning)中，并加入以上制備的藻酸溶液以得到最終濃度為0.1或1.0%(w/v)的藻酸，然后將細胞在37。C、5%<:02和卯％相對濕度的條件下培養(yǎng)。向作為對照的不含所制備藻酸溶液的板孔中加入同樣體積的細胞培養(yǎng)基。在開始培養(yǎng)48小時后，收集上清液，加入用于活細胞檢測的10%(v/v)細胞計數(shù)試劑盒-8(DojinKagaku)的試劑，然后將其在37。C、5%<:02和90%相對濕度的條件下培養(yǎng)l小時。l小時后，利用分光光度計(ThermoElectron)測量通過與活細胞反應(yīng)而進行染色的染料的吸光度(450rnn)。利用所觀察的吸光度的值，以下面的方程計算細胞活力，并評價每種藻酸的細胞毒性。方程5細胞活力(％)=100x(其中加入了每種藻酸溶液的組的吸光度—含有用于活細胞險測的試劑之培養(yǎng)基的吸光度)/(對照組的吸光度-含有用于活細胞險測的試劑之培養(yǎng)基的吸光>1)結(jié)果示于圖1中。通it^入對比實施例2的1.0%(w/v)的藻酸溶液，產(chǎn)生了高細胞毒性，具體細胞活力為約5%。此外，顯^t鏡，見察也證實了加入了對比實施例2的藻酸的細胞喪失了其粘附能力并漂浮。相反，經(jīng)驗證實施例1的藻酸的毒性與對比實施例1和2的藻酸相比明顯降低。這些結(jié)果揭示了藻酸的細胞毒性來源于成分中所含的低分子量級分。此外，還證實了可通過向用于向皮膚和粘膜施用的組合物中選擇性地加入基本上不含有低分子量級分的藻酸來降低對粘膜細胞的細胞毒性。測試實施例2藻酸剌激性的評價利用實施例1的藻酸制備以下制劑實施例1的滴眼劑。在通過0.22jim孔徑的濾膜過濾后，將所述滴眼劑無菌填充進塑料容器中。制劑實施例l實施例1的藻酸氯化鈉0.44g氯化鉀0.08g硼酸0.3g硼砂0.035g鹽酸適量氫氧化鈉適量純化水適量總體積100mL(pH7)將此滴眼劑施用于5名健康成人(3名男性，2名女性)，并根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)評價剌激感。評價方法+:有刺激感±:有輕湖激感-沒有刺激感所得結(jié)果顯示在表2中。結(jié)果證實了制劑實施例1的滴眼劑^1供了良好的使用感覺；在滴眼后即刻、或甚至滴眼后5分鐘或10分鐘都沒有受試者抱怨有刺激感。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>評價以與制劑實施例1相同的方式(除了使用對比實施例1的藻酸代替實施例1的藻酸以外)制備的滴眼劑(對比制劑實施例1)在滴眼后的刺激性。結(jié)M明，將對比制劑實施例l的滴眼劑滴眼后，一些受試者立即才艮告了刺激感。從以上結(jié)果可以確認，包含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸對粘膜細胞具有細胞毒性，并且可在滴眼時引起刺激感。相比較而言，其中分子量等于或小于3,500的低分子量級分已^L^本上除去的藻酸表明顯著降低對粘膜細胞的細胞毒性，并且在滴眼時不引起刺激感；因此，其在安全性和使用感覺上具有優(yōu)越性。測試實施例3藻酸刺激性的評價制備其中實施例1的藻酸的濃度為0.01g/100mL的滴眼劑(制劑實施例2)和其中實施例l的藻酸的濃度為0.2g/100mL的滴眼劑(制劑實施例3)。對于制劑實施例2和3的滴眼劑而言，除了藻酸和其濃度以外，所含成分與制劑實施例1的成分相同。以與上述測試實施例2相同的方式評價滴眼后制劑實施例2和3的滴眼劑的刺激感。結(jié)果是在滴眼后即刻、甚至在滴眼后5分鐘或10分鐘都沒有受試者抱怨制劑實施例2或3的滴眼劑的刺激性。制劑實施例使用實施例1的藻酸來制備表3至5中所示的制劑(制劑實施例4到11)。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>表4<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>表5<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>圖1A^示藻酸(實施例1和對比實施例1-2)的細胞毒性測試結(jié)果的圖。權(quán)利要求1.一種用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其特征在于，包含藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含有分子量等于或小于3,500的低分子量級分。2.根據(jù)權(quán)利要求1的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其中所述藻酸和/或其鹽所包含的分子量大于等于380至小于等于3,500的級分占分子量大于等于380的級分總量的2.5%或更少。3.根據(jù)權(quán)利要求1的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其中所述藻酸和/或其鹽的含量為所述組合物總量的0.001~20wt.%。4.根據(jù)權(quán)利要求1的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為液體制劑。5.根據(jù)權(quán)利要求1的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為眼用組合物、耳鼻用組合物、口腔用組合物、直腸用組合物、陰道用組合物或尿道用組合物。6.根據(jù)權(quán)利要求1的用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其為滴眼劑或洗眼劑。7.—種用于降低藻酸和/或其鹽的細胞毒性的方法，其包括從所述藻酸和/或其鹽中基本上除去分子量等于或小于3,500的低分子量級分的步驟。8.基本上不含分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽在制備用于向皮膚或粘膜施用的組合物中的用途。9.基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/10.基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性并提高用于向皮膚或粘膜施用的組合物中所含活性成分在皮膚或粘膜上的滯留的用途。11.藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分，用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性。12.藻酸和/或其鹽，所述藻酸和/或其鹽基本上不含分子量等于或小于3,500的低分子量級分，用于避免引起對皮膚或粘膜的細胞毒性和提高用于向皮膚或粘膜施用的組合物中所含活性成分在皮膚或粘膜上的滯留。全文摘要本發(fā)明公開了一種用于向皮膚或粘膜施用的組合物，其特征在于，包含藻酸和/或其鹽，所述組合物對皮膚細胞或粘膜細胞的細胞毒性降低，并且具有更高的安全性。所述用于向皮膚或粘膜施用的組合物包含基本上不含有分子量等于或小于3，500的低分子量級分的藻酸和/或其鹽。文檔編號A61K47/36GK101534863SQ20078004188公開日2009年9月16日申請日期2007年11月9日優(yōu)先權(quán)日2006年11月10日發(fā)明者宮野貴之,春名健一,瀨戶忠史,黑瀨孝弘申請人:日本樂敦制藥株式會社