專利名稱：：作為crf1受體拮抗劑的噻唑吡唑并嘧啶類的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及新的蓉唑吡唑并嘧咬化合物、其藥物組合物以及其作為CRF1受體拮抗劑在治療精神病學和神經(jīng)內分泌障礙、神經(jīng)病學疾病和代謝綜合征中的用途。
背景技術：
：促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)是一種41個氨基酸的肽，其是垂體前葉分泌阿黑皮素原(POMC)衍生肽的主要生理調節(jié)物。除其對垂體的內分泌作用外，CRF的免疫組織化學定位還證明，該激素在中樞神經(jīng)組織中具有廣泛的下丘腦外(extrahypothalamic)分布并且產(chǎn)生與其在腦中的神經(jīng)遞質或神經(jīng)調節(jié)物作用相一致的廣鐠自律、電生理和行為作用。還有跡象表明，CRF在整合免疫系統(tǒng)對生理學、心理學和免疫學應激物的響應方面具有重要作用。下面的疾病中涉及CRF:阿爾茨海默病、亨廷頓舞蹈病、進行性核上性麻痹、肌萎縮性側索硬化、帕金森病、癲癎、偏頭痛、酒精和物質濫用以及相關的戒斷癥狀、肥胖、代謝綜合征、先天性腎上腺增生、庫欣病、高血壓、中風、腸易激惹綜合征、應激誘導的胃潰瘍、經(jīng)前期綜合征、性功能障礙、早產(chǎn)、炎性障礙、變態(tài)反應、多發(fā)性硬化、內臟痛、睡眠障礙、垂體腫瘤或異位垂體源腫瘤(ectopicpituitary-derivedtumors)、慢性疲勞綜合征和纖維肌痛。已經(jīng)鑒定了CRF受體亞型CRF1和CRF2,其在腦中的分布不均，從而表明可能的功能多樣性。例如，廣泛分布的腦CRF1受體強烈參與與環(huán)境應激物接觸時伴隨的情緒性。顯然是CRF1而不是CRF2受體介導選擇致焦慮才羊(selectanxiogeniclike)4亍為。更離散的間隔/下丘腦(hypothalmic)分布和供替代選擇的內源性配體的可用性表明CRF2受體具有不同的功能。例如，據(jù)報道，一種相對于CRF1受體而言對CRF2具有優(yōu)先親合性的新CRF-族神經(jīng)肽在不產(chǎn)生用選擇性CRF1激動作用所觀察到的行為活化特性的情況下抑制食欲。在另一些情況中，CRF2激動作用產(chǎn)生與CRF1拮抗劑或CRF1基因缺失所報道的那些作用相似的作用。例如，雖然已經(jīng)提出用CRF2激動劑作為抗肥胖藥，但是CRF1拮抗劑對肥胖而言也可能是一種重要的治療。在WO94/13676、WO97/29109、WO98/08847和WO98/03510中描述了可用作CRF拮抗劑的某些吡咯并[2，3-司嘧啶類、吡咯并[3，2-司嘧啶類、吡唑并1，5-"1嘧啶類、1，2,3-三唑并[4，5-W吡啶類和吡唑并l，5-fl-l，3，5-三溱類。本發(fā)明提供了可用作CRF1受體拮抗劑的新的噻唑吡唑并嘧啶類。由于上述原因，希望發(fā)現(xiàn)對于精神病學和神經(jīng)內分泌障礙、神經(jīng)病學疾病和代謝綜合征的治療而言為可能有價值的治療劑的新的有效的選擇性CRF1拮抗劑。此外，由于大多數(shù)可商購獲得的CNS和心血管藥物表現(xiàn)出不良的生物利用度和藥動學性質，還希望發(fā)現(xiàn)相對于已知CRF拮抗劑如CP154526和NBI30775而言具有良好生物利用度和藥動學性質的新化合物。發(fā)明概述在一個實施方案中，本發(fā)明提供了式I化合物或其藥學上可接受的鹽，式I其中6R，和I^獨立地是乙基或正丙基；W是氫、Cl、Br、甲基、三氟曱基或甲氧基；R4是氫、Br、RaRbN-、曱氧基甲基、正丁基、乙酰氨基、吡啶-4-基、Ra和Rb獨立地是氫、CrC3烷基、H2NCH2CH2-、(CH3)3COC(0)NHCH2CH24CH3CH2CH2NHCH2CH2-。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含式I化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的賦形劑。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的抑郁、焦慮、酒精或物質濫用、肥胖、高血壓、代謝綜合征、腸易激惹綜合征、癲癎、中風、睡眠障礙、變態(tài)反應、偏頭痛、經(jīng)前期綜合征、不孕、性功能障礙、先天性腎上腺增生、庫欣病、早產(chǎn)、應激誘導的胃潰瘍、炎性障礙、垂體腫瘤或異位垂體源腫瘤、慢性疲勞綜合征、纖維肌痛、內臟痛或多發(fā)性硬化的方法，其包括給需要其的患者施用治療有效量的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及式I化合物或其藥學上可接受的鹽在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療抑郁、焦慮、酒精或物質濫用、肥胖、高血壓、代謝綜合征、腸易激惹綜合征、癲癎、中風、睡眠障礙、變態(tài)反應、偏頭痛、經(jīng)前期綜合征、不孕、性功能障礙、先天性腎上腺增生、庫欣病、早產(chǎn)、應激誘導的胃潰瘍、炎性障礙、垂體腫瘤或異位垂體源腫瘤、慢性疲勞綜合征、纖維肌痛、內臟痛或多發(fā)性硬化。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于治療抑郁、焦慮、酒精或物質濫用、肥胖、高血壓、代謝綜合征、腸易激惹綜合征、癲癎、中風、睡眠障礙、變態(tài)反應、偏頭痛、經(jīng)前期綜合征、不孕、性功能障礙、先天性腎上腺增生、庫欣病、早產(chǎn)、應激誘導的胃潰瘍、炎性障礙、垂體腫瘤或異位垂體源腫瘤、慢性疲勞綜合征、纖維肌痛、內臟痛或多發(fā)性硬化的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于治療的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。發(fā)明詳述如上文和整個本申請的說明書中所用的那樣，除非另有說明，否則下面的術語應被理解為具有下列含義"烷基，，是指在鏈中具有1至5個碳原子的飽和脂族烴基，其可以是直鏈的或支鏈的。"藥學上可接受的賦形劑，，是指用于增進制劑特性的藥學上可接受的配制栽體、溶液或添加劑。該類賦形劑必需與制劑中的其它成分相容并且對其接受者無害，它們是本領域技術人員所眾所周知的(參見例如/^m/"gtows尸Aflr附flcewricfl/5We"ces，第19版，MackPublishingCompany,1995)。"藥學上可接受的鹽，，是指本發(fā)明的化合物相對無毒的無機和有機酸加成鹽和堿加成鹽。這些鹽可以在化合物的最后分離和純化中原位制備。具體而言，酸加成鹽可通過分別將純化的游離堿形式的化合物與適宜的有機酸或無4幾酸反應并分離由此形成的鹽來制備(參見例如/^附Z"gto/is/Viar附acew,/ca/5Wewc^s，第19版,MackPublishingCompany,1995)。"治療有效量，，或"有效量"是指將在組織、系統(tǒng)、動物或人中引起研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師所尋求的生物學或醫(yī)學響應或者所需的治療作用的本發(fā)明式I化合物或包含本發(fā)明式I化合物的藥物組合物的量。術語"治療"等包括減緩和逆轉障礙的進展。這些術語還包括即使障礙緩解、改善、減弱、消除或減輕了障礙或病癥的一種或多種癥狀。術語"治療"以及類似術語還包括防止性(例如，預防性)治療和姑息性治療。疾病的預防表現(xiàn)為疾病的發(fā)作被拖延或延遲。分子結構中的符號"——"表示該特定取代基的連接位置。當任何變量在任何組分或在式I中出現(xiàn)一次以上時，其定義在每次出現(xiàn)時都是彼此獨立的。而且，只有當取代基和/或變量的組合產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時，該類組合才是允許的。在選擇本發(fā)明的化合物時，本領域普通技術人員將意識到各種取代基、即R、W等是根據(jù)化學結構連接性的眾所周知的原則來進行選擇的。按照本公開物中所用的標準命名法，首先描述指定側鏈的末端部分，然后描述朝向連接點的毗鄰官能團。例如，芳基羰基氨基烷基取代基與芳基-C(O)-NH-烷基-等同。本發(fā)明包括下列實施方案，它們可以被進一步組合(a)式I化合物，其中R和I^是乙基；(b)式I化合物，其中R，和R"是正丙基；(c)式I化合物，其中R"是C1、Br、甲基或三氟曱基;(d)式I化合物，其中R3是C1;(e)式1化合物，其中R3是Br;(f)式I化合物，其中R4是RaRbN-、吡啶-4-基、嗎啉-4-基或n(g)式H匕合物，其中R"是嗎啉-4-基；(h)式I化合物，其中R4是n」；(i)式I化合物，其中Ra和Rb獨立地是C廣C3烷基；(j)式I化合物，其中R'和I^是乙基，W是C1，R"是嗎啉-4-基；(k)式1化合物，其中W和I^是正丙基，W是C1，W是嗎啉-4-基;(1)式I化合物，其中W和F^是乙基，R"是Br，R"是嗎啉-4-基；(m)式1化合物，其中Ri和I^是正丙基，R"是Br，W是嗎啉-4-基;(n)式I化合物，其中Ri和R2是乙基，R3是C1，W是n9(o)式I化合物，其中Ri和F^是正丙基，W是C1，R"是n(p)式I化合物，其中R'和I^是乙基，R"是Br，W是N(q)式I化合物，其中R'和R2是正丙基，R3是Br，R"是N」；(r)式I化合物或其藥學上可接受的鹽用于治療抑郁或焦慮的用途；(s)式I化合物或其藥學上可接受的鹽用于治療酒精或物質濫用的用途；(t)式i化合物或其藥學上可接受的鹽用于治療酒精或物質濫用以及相關的戒斷癥狀的用途；(u)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出S500nM的Ki值；(v)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出《50nM的Ki值；(w)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出《5nM的KH直；(x)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出S500nM的Ki值，并且相對于CRF2而言選擇性與CRF1結合(即，更低的Ki);(y)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出《50nM的Ki值，并且相對于CRF2而言選擇性與CRF1結合(即，更低的Ki);(z)式I化合物或其藥學上可接受的鹽，對于CRF1結合而言，其表現(xiàn)出《5nM的Ki值，并且相對于CRF2而言選擇性與CRF1結合(即，更4氐的Ki);和/或(aa)相對于一些已知的CRF拮抗劑(例如，CP154526和NBB0775)而言，具有優(yōu)良的生物利用度和藥動學性質的具體例舉的化合物，如實施例15。本發(fā)明的化合物優(yōu)選被配制為通過各種途徑施用的藥物組合物的形式。該類組合物優(yōu)選用于口服施用。該類藥物組合物和制備該類藥物組合物的方法在本領域中是眾所周知的(參見例如/^附/"gtow..77^S"Vwce/V""/ce尸/ifl/7Wflqv,A.Gennaro等人編l辱，第19版，MackPublishingCo.,1995)。式I化合物一般在寬的劑量范圍內都有效。例如，每天的劑量通常落在約0.0001至約30mg/kg體重范圍內。在一些情況中，低于上述范圍下限的劑量水平可能就遠遠足夠了，而在另一些情況中，可以使用更大的劑量而不會導致任何有害的副作用，因此，上述劑量范圍并非旨在以任何方式對本發(fā)明的范圍進行限制。應當清楚的是，實際施用的化合物的量將由醫(yī)師根據(jù)相關的情況來確定，所述情況包括所治療的病癥、所選擇的施用途徑、被施用的實際化合物或化合物組合、各患者的年齡、體重和響應情況以及患者的癥狀的嚴重程度。式I化合物是CRF-1拮抗劑并且因此可用于治療能通過降低CRF1受體的品質(tone)或興奮性(stimulation)來治療的病癥。已經(jīng)表明促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)(—種41個氨基酸的肽，其是垂體前葉分泌阿黑皮素原(POMC)衍生肽的主要生理調節(jié)物)[J.Rivier等人，7Va".爿ow/.(T/SJ)80:4851(1983);W.Vale等人，213:1394(1981)j與許多醫(yī)學病癥有關。例如，除其對垂體的內分泌作用外，CRF的免疫組織化學定其在腦中的神經(jīng)遞質或神經(jīng)調節(jié)物作用相一致的廣謙自律、電生理和行為作用W.Vale等人，Wee.Prag.好w附.7d39:245(1983);G.F.Koob，尸er^.&/muAM.2:39(1985);E.B.DeSouza等人，/7Vew簡d5:3189(1985)j。還有跡象表明，CRF在整合免疫系統(tǒng)對生理學、心理學和免疫學應激物的響應方面具有重要作用[參見例3口J.E.Blalock，尸/y;wWog/cfl//^v&m^69:1(1989);J.E.Morley，丄^5W.41:527(1987)j。及CRF[D.M.Nielsen,h/e78:909-919;H.E.Kunzel等人，/尸^W/"^/d37:525-533;D.R.Gehkrt等人，/.T^"r附""/.509:145-153。認為CRF還參與下列疾病的病因學和病理生理學阿爾茨海默病、亨廷頓舞蹈病、進行性核上性麻痹和肌萎縮性側索硬化，因為這些疾病涉及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中CRF神經(jīng)元功能障礙關于綜述，參見E.B.DeSouze，尸m"/ce23:59(1988)j。已經(jīng)表明長期施用CRF產(chǎn)生多巴胺系統(tǒng)損害，這表明其在帕金森病中起作用[E.Izzo等人，尸/r"/7m^0/.B"c/ie附.J5e/^v.81:701-708(2005)j。其中有CRF參與的其它神經(jīng)病學障礙包括癲癎[T.Z.Baram等人，Bm/"770:89-95(1997)I和偏頭痛[T.C.Theoharides等人，￡>/oc77Vio/ow136:5745-5750(1995)1。已經(jīng)表明CRF參與酒精和物質濫用以及相關的戒斷癥狀[D.H.Overstreet等人，尸/i"r附"a/.i/ocAe附.Be/iflv.77:405-413;Y.Shaham等人，尸5^/^/7/^f附""/05jW"/」137:184-190j。此外，有跡象表明CRF在各種內分泌障礙和心血管疾病如肥胖[E.Timofeeva和D.Richard,/Vewraert^cW朋^g^66:327-340(1997)1、代謝綜合征A.M.Ward等人，Afeto^似附53:720-726(2004)]、先天性腎上腺增生[D.P.Merke和G.B.CutlerJr.,￡m^ct,7io/.M""6.C7/w.TVoW/i爿附.30:121-135(2001)1、庫欣病[M.Labeur等人，Cwr.7^g"s/附附聰e￡>i^/oct.Z)&on/.4:335-342(2004)1，高血壓R.J.Briscoe等人，Bm/"881:204-207(2000)和中風[S.L.Stevens等人，J.F/ow23:1151-1159(2003)I中起作用。已經(jīng)表明胃紊亂如腸易激惹綜合征[Y.Tache等人，/.Swg.S叩pl:16-22(2002)I和應激誘導的胃潰瘍K.E.Gabry等人,Afo/.7:474-483，433(2002)1與CRF有關。此外，還表明CRF在女性健康的各個領域例如經(jīng)前期綜合征[F.Facchinetti等人，尸sjc/^^挑,Me".56:418-422(1994)1、不孕L.Ghizzoni等人，五w^cn"o/o^;138:4806-4811(1997)1、性功能障礙[J.E.Jones等人，爿附.丄/"fegr.Owi/;.283:R591-597(2002)j和早產(chǎn)[P.D.Wadhwa等人，J附./.06W".G^w"o/.191:1063-1069(2004)1中起作用。還有跡象表明CRF在12免疫系統(tǒng)中具有重要作用，表明其有治療炎性障礙[A.Gravanis和A.N.Margioris，Cwr.Af^/.C7^附.12:1503-1512(2005)1、變態(tài)反應[L.K.Singh等人，5m,"5e/mv,/附附ww.13:225-239(1999)1、多發(fā)性硬化和其它自身免疫性障礙[C.Benou等人，丄174:5407-5413(2005)l的潛能。除前述疾病夕卜，還表明在內臟痛M.Nijsen等人,7VewragflWnew^w/.3/o"7117:423-432(2005)1、睡眠障礙[T,M.Buckley和A.F.Schatzberg，/C7k￡>i^cnVio/.tW^"6.卯:3106-3114(2005)]、垂體腫瘤或異位垂體源胂瘤[K.D.I)ieterich等人，/.C"w.M"a6.83:3327-3331(1998)、慢性疲勞綜合征和纖維肌痛[G.Neeck和L.J.Crofford，及&"附.Z)kC7/".A^幼J附.26:989-1002(2000)1中也涉及CRF。已經(jīng)鑒定了CRF受體亞型CRF1和CRF2，其在腦中的分布不均[D.T.Chalmers等人，17:166-72(1996)1，從而表明其可能的功能多樣性[S.C.Heinrichs等人，尸e/mVtes71:15(1997)1。例如，廣泛分布的腦CRF1受體強烈參與與環(huán)境應激物接觸時伴隨的情緒性[G.Liebsch等人，尸印"V/^59:229-39(1995);D.W.Schulz，/WAS93:10477-82(1996)j。顯然，是CRF1而不是CRF2受體介導選擇致焦慮樣行為[Heinrichs等人，1997。更離散的間隔/下丘腦分布[D.T.Chalmers等人，丄A^wwsc/.15(10):6340-50(1995)j和供替代選擇的內源性配體的可用性[J.Vaughan等人，AWw^378:287-92(1995)1表明CRF2受體具有不同的功能角色[Heinrichs等人，1997。例如，據(jù)報道，一種相對于CRF1受體而言對CRF2具有優(yōu)先親合性的新CRF-族神經(jīng)肽在不產(chǎn)生用選擇性CRF1激動作用所觀察到的行為活化特性的情況下抑制食欲(H.Tezval等人，尸M4S101(25):9468-9473(2004)1。在一些情況中，CRF2激動作用產(chǎn)生與CRF1拮抗劑或CRF1基因缺失所報道的那些作用相似的作用[S.C.Heinrichs，7>emfe&尸/mnMflco/og/cfl/Sdewc^20(8):311國5(1999)。例如，雖然已經(jīng)提出用CRF2激動劑作為抗肥胖藥，但是CRF1拮抗劑對肥胖而言也可能是一種重要的治療C.Contoreggi等人，A^wnwi&cnVio/og);80(2):111畫23(2004)J。制備本發(fā)明的化合物本發(fā)明的所有化合物都可以化學制備，例如，通過按照下面所述的合成途徑來制備。但是，下面的討論并非旨在以任何方式對本發(fā)明的范圍進行限制。例如，所述各途徑的特定合成步驟可以以不同方式組合，或者與來自不同流程圖的步驟聯(lián)合，從而制備另外的式I化合物。各步驟的產(chǎn)物可以用常規(guī)方法來回收，所述方法包括萃取、蒸發(fā)、沉淀、色譜法、過濾、研磨、結晶等。在下面的流程圖中，除非另有說明，否則所有取代基均如前面所定義，適宜的試劑在本領域中是眾所周知和可理解的。流程圖1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>可以按照流程圖1中所述的反應來形成式(6a，b)、(7)或8(a-c)的化合物。一種適宜的式(6a,b)、(7)或(8a-c)的化合物是其中基團定義如下的化合物R1和112如式I中所定義，R3a=H或CH3，R3b=Br或CH3，R3c=H、CH3或Br。在流程圖1的步驟1中，用氯氧化磷(phosphorousoxychloride)和二曱基苯胺在惰性溶劑如曱苯中在溶劑的回流溫度下將式(l)的吡唑并[l，5-aj嘧啶-7-酮轉化成7-氯-2，5-二甲基-吡唑并l，5-al嘧啶。在步驟2中，使式(3)的格氏試劑(X=CI或Br)與式(2)的氯化物在惰性溶劑如曱苯中在回流溫度下反應，得到式(4)的7-烷基吡唑并嘧啶?；蛘撸梢匀绮襟E3、4和5中所示的那樣獲得式(4)的7-烷基吡唑并嘧啶。在步驟3中，將乙酰乙酸乙酯用式(4a)的酰卣在存在氯化鎂的情況下進行?；玫绞?4b)的二酮基-S旨。將式(4b)的二酮基-酯在Krapcho條件下脫羧，得到式(4c)的二酮。例如，將(4b)在二甲基亞砜中在約130至170。C的溫度下加熱以進行脫羧。在步驟5中，將式(4c)的二酮與3-氨基-5-甲基吡唑在質子溶劑如曱醇、乙醇或乙酸中環(huán)化，得到式(4)的7-烷基吡唑并嘧啶。優(yōu)選的條件在約0至60。C的溫度下使用乙酸。在步驟6中，用過量的N-碘琥珀酰亞胺在乙腈中將式0)的吡唑并嘧啶官能化成式(5)的碘代吡唑并嘧啶。在流程圖1的步驟7或8中，使式(5)的碘代吡唑并嘧啶與噻唑卣化鋅在Negishi交叉偶聯(lián)反應中反應，得到式(6a)或(6b)的噻唑基吡唑并嘧啶(Jensen，J.;Skjaerbaek,N.;Vedso，P.Sj;"^ew、2001，128)。所述噻唑鹵化鋅是用本領域技術人員眾所周知的方法產(chǎn)生的。例如，在步驟7中，將2-三曱基硅烷基噻唑用正丁基鋰、仲丁基鋰或叔丁基鋰處理，然后用ZllCl2進行鋰-鋅交換。將有機鋅試劑與式(5)的碘代吡唑并嘧啶在存在鈀催化劑例如二氯li，i，-雙(二苯基-膦基)二茂鐵]鈀(n)二氯甲烷的情況下在惰性溶劑如THF中在回流溫度下偶聯(lián)約12至36小時，得到式0a)的噻唑吡唑并嘧啶?；蛘撸诓襟E8中，用5-溴-4-曱基噻唑和鋅金屬產(chǎn)生噻唑溴化鋅并基本如步驟7中所述的那樣將其用于Negishi交叉偶聯(lián)中，得到式0b)的噻唑15P比唾并嘧淀。在流程圖1的步驟9中，將式(6a，b)的噻唑溴化，得到式(7)的溴代或二溴代噻唑，其中R3b=Br或CH3。根據(jù)R3a是CH3還是H,將噻唑分別用1或2叫N-溴琥珀酰亞胺溴化。式(8a-c)的烷基噻唑是在步驟11中由式(6a，b)的蓉唑獲得的或者在步驟10中由式(7)的溴代瘞唑獲得的。在步驟10中，用正丁基鋰、仲丁基鋰或叔丁基鋰進行卣素-鋰交換，得到噻唑鋰試劑，隨后使其與親電子試劑如烷基卣如碘曱基曱基醚或碘丁烷反應。在步驟ll中，通過用正丁基鋰、仲丁基鋰或叔丁基鋰去質子化和隨后與親電子試劑如碘曱基曱基醚或碘丁烷反應來形成蓬哇鋰試劑。本領域技術人員應當意識到，可以容易地對噻唑環(huán)系進行官能化，可以容易地制備噻唑中間體如2-三甲基硅烷基-噻唑(Dondoni，A.等人/Org.C7^附.1988，5J，1748)。5-渙-4-曱基噻唑是通過用溴在乙酸中對4-曱基噻唑進行溴化來獲得的(Collins,I.J.等人，WO2003093252,2003年11月13曰)。通過使乙酰乙酸乙酯與5-曱基-27/-吡唑-3-基胺在回流的乙酸中進行縮合可容易地制得2，5-二曱基-4好-吡唑并[l，5-al嘧啶-7-酮(1)。流程圖2可以按照流程圖2中所述的反應來形成式(9)、(10)或(11)的化合物。一種適宜的式(9)、(10)或(11)的化合物是其中基團定義如下的化合物R1、R2、Ra和Rb如式I中所定義，R3b=Br或CH3,R4a=-NRaRb或-N-嗎啉基，"het"具有所述的定義。在步驟1中，使式(7)的溴代噻唑與雜環(huán)鋅試劑在Negishi交叉偶聯(lián)反應中偶聯(lián)，得到式(9)的噻唑雜環(huán)。例如，將1-甲基-1，2，4-三唑在約-80至-65。C下用正丁基鋰、仲丁基鋰或叔丁基鋰處理、然后用氯化鋅處理，并且在原位與式(7)的溴代噻唑反應。該反應優(yōu)先在惰性溶劑如THF中在存在鈀催化劑如二氯[l，l，-雙(二苯基-膦基)二茂鐵l釔(II)二氯曱烷或四(三苯基膦)4巴(0)的情況下進行。將反應溫熱至回流溫度。或者，雜環(huán)鋅試劑由鹵代雜環(huán)如4-碘吡啶和鋅金屬形成。在流程圖2的步驟2中，中間體2-曱酰基噻唑是通過用正丁基鋰、仲丁基鋰或叔丁基鋰進行離素-鋰交換、然后與N-甲酰基嗎啉反應來形成的。使甲酰基噻唑在存在有機胺如嗎啉的情況下進行還原胺化，得到式(10)的嗎啉基甲基塞唑。還原胺化在本領域中是眾所周知的，通常使用無機硼氫化物試劑如硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉。優(yōu)選的條件在惰性溶劑如二氯曱烷或THF中使用三乙酰氧基硼氫化鈉。在步驟3中，用式-NRaRb的胺或用嗎啉使式(7)的溴代噻唑進行置換反應，得到式(ll)的氨基噻唑。該反應在惰性溶劑如THF或二噁烷中用無機堿如碳酸銫在70至ll(TC下進行。流程圖3可以按照流程圖3中所述的反應來形成式(13)、(14)或(15)的化合物。一種適宜的式(13)、(14)或(15)的化合物是其中R1、R"和R"如式I中所定義的化合物。本領域技術人員應當意識到，可以容易地將4-溴噻唑如式(12)的4-溴蓬唑處理成具有其它官能團。例如，在步驟1中，可以用氯化亞銅將該溴化物脫卣素化，得到式(13)的噻唑，隨后用N-氯琥珀酰亞胺將其氯化，得到式(14)的4-氯噻唑。在流程圖3的步驟3中，在存在處于曱醇中的碘化亞銅(I)的情況下在約100至120。C下在惰性溶劑如二甲基曱酰胺中用甲醇鈉對式(12)的舡溴噻唑進行置換，得到式(15)的4-曱氧基噻唑。(20a〉CF3~^fJ可以按照流程圖4中所述的反應來形成式(17)、(18)、(19)、(20)、(20a)或(21)的化合物。一種適宜的式(17)、(18)、(19)、(20)、(20a)或(21)的化合物是其中基團定義如下的化合物R1、R2、Ra和Rb如式I中所定義，R4a是-NRaRb或-N-嗎啉基，"het"具有所述的定義。在流程圖4的步驟1中，使式(5)的硪代吡唑并嘧咬和式(6)的5-溴噻唑進行Negishi交叉偶聯(lián)，形成式(17)的二曱基吡咯基瘞唑。例如，將式(16)的5-溴遙唑在約-80至-65。C下用正丁基鋰、仲丁基鋰或^又丁基鋰處理、然后用氯化鋅處理。將有機鋅試劑在原位與式(5)的碘代吡唑并嘧啶反應。該偶聯(lián)反應優(yōu)先在惰性溶劑如THF中在回流溫度下在存在鈀催化劑如雙(三-叔丁基膦)把(O)的情況下進行。在步驟2中，將式(17)的二曱基吡p各基噻唑去保護，得到式(19)的氨基噻唑。將二甲基吡咯用羥胺在乙酸中在約60至100。C的溫度下處理約4至流程圖4het=8小時，優(yōu)選約6小時。在步驟3中，為了形成式(18)的噻唑乙酰胺，使用與步驟2中所用條件相同的條件，不同的是反應持續(xù)約72小時。在流程圖4的步驟4中，用改進的Sandmeyer反應將式(19)的2-氨基噻唑轉化成式(20)的2-溴噻唑。優(yōu)選的條件在約60至80。C的溫度下在乙腈中使用亞硝酸烷基酯如亞硝酸叔丁酯和溴化銅(II)。在步驟5中，用式-NlTRb的胺或用嗎啉使式(20)的2-溴噻唑進行置換反應，得到式(21)的氨基噻唑。該反應在惰性溶劑如甲醇、THF或二噁烷中進行，或者在不使用溶劑的情況下進行，使用過量的胺，反應溫度為約70至110。C。或者，用反應胺和過量的三乙胺或無才幾堿如碳酸銫進行該反應。在式(21)的氨基噻唑的合成中，也考慮各種去保護步驟，如除去氨基甲酸ik丁酯(BOC)，因為在-NRaRb攜帶式I中所定義的其它胺官能團的情況下，為了進行上述反應，這樣的步驟可能是需要的或有益的。適宜的保/VW"力7ig/"OgflmV*5);w^51/51，TheodoraGreene(Wiley畫Interscience》。在流程圖4的步驟6中，以與流程圖2的步驟1中所述方式相似的方式使式(20)的2-溴噻唑與雜環(huán)鋅試劑在Negishi交叉偶聯(lián)反應中偶聯(lián)，得到式(20a)的塞唑雜環(huán)。本領域技術人員應當意識到，式(16)的官能化的噻唑可用本領域中已知的方式來制備。例如，將硫脲與溴代酮如3-溴-1，1，1-三氟丙-2-酮環(huán)化，得到4-三氟甲基-漆唑-2-基胺。隨后用己烷-2，5-二酮對該胺進行溴化和保護，得到(16)。流程圖5R，\乂(5)c〗(22>NR4b=O廣NTNJ,,或20可以按照流程圖5中所述的反應來形成式(23)的化合物。一種適宜的式(")的化合物是其中基團定義如下的化合物W和I^如式I中所定義，R"具有所述定義。使式(5)的碘代吡唑并嘧啶與例如式(22)的4-氯-2-嗎啉代-噢唑進行交叉偶聯(lián)，形成式(23)的吡唑并嘧啶噻唑。例如，將所述反應物在存在硪化銅、醋酸鈀和三苯基膦的情況下用堿如碳酸銫偶聯(lián)。該偶聯(lián)反應優(yōu)先在惰性溶劑如DMF中在約100國150。C下進行4-24小時。本領域技術人員應當意識到，式(22)的官能化的噻唑可用本領域中巳知的方式來制備。例如，可以使2，4-二氯噻唑與嗎啉反應，得到式(22)的2-嗎啉代-噻唑。也可以將2，4-二氯噻唑耗竭性溴化，得到2，5-二溴-4-氯噻唑。隨后用正丁基鋰在THF中在-90。C下進行溴-鋰交換并用水淬滅，得到2—溴-4-氯鎵唑[丄C7w附.尸^Ai"7>"附/..Og丑/卯rg.C/^附.(1972-1999)(2):215-219(1992)。可以用雜環(huán)鋅試劑使2-溴-4-氯噻唑進行Negishi交叉偶聯(lián)反應，得到噻唑-2-基三唑或吡啶。流程圖6可以按照流程圖6中所述的反應來形成式(27)的化合物。一種適宜的式(27)的化合物是其中基團定義如下的化合物Ri和W如式I中所定義，"het"分別具有步驟1或步驟3中所述的定義。21的碘代吡唑并嘧啶與式(24)的溴代噻唑反應獲得雜環(huán)噻唑，例如式(25)的雜環(huán)蓉唑。該反應在存在溴化N-丁基銨和堿如醋酸鉀的情況下用鈀催化劑如具有三(2，4-二-叔丁基-苯基)-磷烷(phosphane)的醋酸把在惰性溶劑如N-甲基吡咯烷酮中在約100-150。C的溫度下進行?；蛘撸诓襟E2中，將式(6a)的噻唑基吡唑并嗜啶碘化，得到式(26)的2-碘噻唑。將該噻唑用二異丙基氨基鋰在-70至-80。C的溫度下處理約1小時，然后用N-碘琥珀酰亞胺在大約相同的溫度下在惰性溶劑如THF中處理。然后進行步驟3，在該步驟中，用與流程圖2的步驟1中所述條件相似的Negishi交叉偶聯(lián)條件形成式(25)的三唑基或4-吡^定基參唑。在流程圖6的步驟4中，將式(25)的噻唑基吡唑并嘧啶溴化，得到式(27)的溴代噻唑。該溴化是用N-溴琥珀酰亞胺在存在少量乙酸的情況下在惰性溶劑如乙腈中進行的。可以如流程圖4的步驟2、3、4和5中所述的那樣進一步對其中het-2，5-二甲基-吡咯-l-基的式(27)的化合物進行修飾，從而獲得本發(fā)明的化合物。本領域技術人員應當意識到，可以用本領域中已知的方法容易地制備式(24)的雜環(huán)噻唑類。例如，可以用l，l-二曱氧基-N，N-二曱基-曱胺將噻唑-2-曱酰胺環(huán)化成三唑，然后用N-曱基-肼處理，獲得三唑基噻唑，隨后可以用N-溴琥珀酰亞胺將其溴化。根據(jù)文獻操作可得到4-噻唑-2-基-吡啶，可將其溴化，得到4-(5-溴-噻唑-2-基)-吡啶。5-溴-2-(2，5-二曱基-吡咯-1-基)-瘞唑可以通過使2-氨基-5-溴噻唑與己烷-2，5-二酮反應來容易地獲得。本文所用的"TLC，，是指薄層色譜；"HPLC，，是指高效液相色譜；"LC/MS"是指液相色譜/質語；"GC/MS"是指氣相色謙/質譜"；"HR-ToF，是指高分辨率的飛行時間(highresolutiontime-of-flight);"APCI"是指大氣壓化學電離；"5，，是指從四甲基硅烷向低磁場的百萬分數(shù)；"THF，，是指四氬呋喃；"EtOAc"是指乙酸乙酯;"MeOH"是指曱醇;"EtOH"是指乙醇;"DMF"是指二甲基甲酰胺。22實施例無需進一步加工，認為本領域技術人員可以用前面的描述來充分實施本發(fā)明。用下面的制備例和實施例來對本發(fā)明進行進一步詳細說明。它們旨在進行舉例說明，而不是要以任何方式對本發(fā)明進行限制。其中的試劑和起始材料可容易地獲得或者可被本領域普通技術人員容易地合成。實施例1-35提供了代表性的化合物并說明了其制備。實施例A-D說明了可用于測定本發(fā)明化合物的生物學性質的各種生物學測定法。本領域技術人員將迅速意識到實施例中所述的操作的適宜變型。本發(fā)明的化合物的名稱是用ChemDrawUltra7.0.1版提供的。鹽是以游離堿加共軛酸的形式來進行命名的。制備例12，5-二曱基-4H-吡唑并1，5-flj嘧"定-7-酮將乙酰乙酸乙酯(128g，0.98mol)滴加到5-曱基-2/f-吡唑-3-基胺(100g,0.95mol的乙酸溶液(500mL)中，同時保持其溫度為25-28°C。將混合物在回流下加熱10小時，然后將其冷卻至室溫。將反應加入到被冷卻至5。C的炎-丁基甲基醚(5L)中，同時保持其溫度低于10°C。將其在5°。下攪拌1小時，過濾。將所得物質真空干燥過夜，得到白色固體(158g，96y。)。制備例27-氯-2,5-二曱基-吡唑并1，5-1嘧啶向2，5-二甲基-4^-吡唑并1，5-"1嘧啶-7-酮(10.0g，61.3mmol)在甲苯(150mL)中的混懸液中加入AyV"二甲基苯胺(9.7mL，76.7mmol)。向這種白色混懸液中滴加三氯氧化磷(phosphorusoxychloride)(11.2mL，122.6mmol)。將其在惰性氣氛下回流3小時，冷卻至室溫并將反應減壓濃縮成棕色油狀物。將該油狀物溶解于乙酸乙酯(250mL)中并用1.0NNaOH堿化。分離出有機相，用乙酸乙酯對堿性水相進行萃取(2x100mL)。將有機相合并，用無7jO克酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，得到棕色固體。將該物質用快速色i普進行純化，用80。/o己烷/20。/。(30。/。THF/己烷)至0%己烷/100%(30%THF/己烷)以20%的增量逐步梯度洗脫，得到淺綠色固體(6.65g，59%)。ES/MSm/z(35C1)182.3(M+l)+。另一種操作將2，5-二甲基吡唑并l，5-a嗜啶-7-酮(20g，122mmol)加入到1，4-二悉烷(60mL)中。將混合物在22。C下攪拌10分鐘，然后加入N，N-二乙基苯胺(20.8mL,128mmol)。將其再攪拌5分鐘，然后歷經(jīng)15分鐘加入三氯氧化磷(11.7mL，126mmo1)。將混合物在22。C下攪拌15分鐘，然后歷經(jīng)35分鐘加熱至80-85。C并將反應在這一溫度下保持1.5小時。將被冷卻的反應混合物緩慢加入到一皮冷卻至0-5。C的磷酸氫二鉀(106.7g，612.82mmol)在水(325mL)中的溶液中，在加入期間保持溫度低于5°C。將混合物在22。C下進行攪拌，然后加入甲基-叔-丁基醚(150mL)。分離有機層，用甲基-叔-丁基醚對水層進行萃取(2x100mL)。將有機部分合并，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠色譜進行純化，用己烷/乙酸乙酯(2/l)進行洗脫，得到黃色固體形式的標題化合物(20.7g，88%)。ES/MSm/z(35C1)182(M+l)+。向一個配有回流冷凝器的烘箱千燥的燒瓶中加入無水THF(40mL)、石典(催化量)、鎂條(1.92g，78.9mmol)和4-溴庚烷(9.4mL，52mmol)。將反應在油浴中加熱至回流。當格氏反應開始時，反應溫度迅速升高。將反應在90。C下再攪拌4小時，冷卻至室溫。使鎂金屬沉降(也可以進行離心)，在正氬氣壓下通過套管將格氏試劑加入到裝有7-氯-2，5-二曱基吡唑并|1，5-"1嘧啶(4.80g，26.3mmol)(位于無水曱苯(20mL)中)的燒瓶中。將反應7-(l-丙基-丁基)-2制備例35-二曱基-吡唑并[l，5-aj嘧啶在惰性氣氛下回流過夜。將反應冷卻至室溫并用水淬滅。用乙酸乙酯(150mL)稀釋，然后加入水(100mL)和飽和氯化銨(50mL)。將水相分離出來并用二氯曱烷(75mL)萃取。將有機相合并，用無7jC硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得殘佘物用快速色語進行純化，用80%己烷/20%(20%乙酸乙酉旨/己烷)至0%己烷/100%(20%乙酸乙酯/己烷)以20%的增量逐步梯度洗脫，得到黃色晶體(3.08g，48。/。)。ES/MSm/z246.3(M+l)+。另一種操作將鎂屑(3.5g，144mmol)和催化量的碘(100mg)在THF(IOOmL)中的混合物在氮氣氣氛下加熱至65°C。加入幾滴純4-溴庚烷并將混合物加熱至反應開始。然后，歷經(jīng)在2小時加入4-溴庚烷(17.6mL，94.9mmol)在THF(42mL)中的溶液，同時保持溫度為65-70。C。將混合物再回流l小時，然后將反應冷卻至22。C。在氮氣氣氛下，將制得的格氏試劑加入到被冷卻至0。C的7-氯-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"j嘧啶(10.2g;53.3mmol)在THF(60mL)中的溶液中。歷經(jīng)45分鐘，通過套管加入鎂試劑溶劑，同時保持溫度低于l(TC。然后將混合物在5。C下再攪拌30分鐘。向這種混合物中加入1()。/。氯化銨水溶液(wt/wt)(125mL)并將其在22。C下攪拌30分鐘。分離有機層并用乙酸乙酯對水層進行萃取(2x25mL)。將有機層合并并用疏酸鈉干燥。對混合物進行過濾并蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠快速色譜對該粗品物質進行純化，用己烷/乙酸乙酯(5/l)進行洗脫，得到標題化合物(8g,62%)。ES/MSm/z246(M+l)+。制備例3a7-(l-丙基-丁基)-2，5-二曱基-吡唑并l，5-"I嘧啶另一種路徑步驟l:3-乙?；?3-氧代-4-丙基-庚酸乙酯將氯化鎂(14.63g，153.70mmol)加入到二氯甲烷(500mL)中，然后一次性加入乙酰乙酸乙酯(19.55mL，20.00g，153.79mmol)并將其在室溫下攪拌1小時。將混合物在水水浴中冷卻并滴加吡啶(24.86mL，24.32g，307.39mmol)。在0。C下在氮氣下向該白色漿液中滴加二-正丙基乙酰氯(25.00g，l53.70mmoles)。在完全加入后，除去冷卻浴，溫熱至環(huán)境溫度并將其攪拌16小時。將反應用1NHCl(400mL)淬滅并分離出底層。將有機部分用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，得到黃色油狀物(34g，86W)。將該物質不進行進一步純化地直接用于下一步。步驟2:5-丙基-辛烷-2，4-二酮將3-乙?；?3-氧代-4-丙基-庚酸乙酯(32，4g，126.39mmol)溶解于二甲基亞砜(IOOmL)和水(5mL)中。將該溶液在150。C下加熱6至8小時或者用GC/MS對反應進行追蹤。將反應冷卻，用庚烷萃取(3xl00mL)。將合并的有4幾部分用水(100mL)和鹽水(100mL)洗滌。在50。C下真空濃縮以除去大部分庚烷。得到23.29g油狀物并將其直接用于下一步。步驟3:7-(l-丙基-丁基)-2，5-二甲基-吡唑并ll,5-"l嘧啶將5-丙基-辛烷-2，4-二酮(15g，81.40mmol)混合到乙酸(15mL)中并將其在冰浴上進行冷卻。分批加入5-氨基-3-曱基吡唑(7,91g,81.40mmol)并在環(huán)境溫度下進行攪拌。在3小時后，用GC/MS檢查是否反應完全。GC表明與真實樣品相比存在正確的區(qū)域異構體。蒸餾掉過量的乙酸。加入水(50mL)并用庚烷(50mL)萃取。用鹽水(50mL)對庚烷部分進行洗滌。將有機層用MgS04干燥，過濾，真空濃縮，得到粗品油狀物(15.8g，79。/。)。'H誦R(CDC13):6.39(s，1H);6.31(s，1H);3,75(m，1H);2.55(s，3H);2.45(s，3H);1.71(q，4H);1.23(m，4H);0.85(t，6H)?；救缰苽淅?中所述的那樣用任何一種操作制備下面的化合物。用3-溴戊烷來制備格氏試劑。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>制備例57-(l-丙基-丁基)-3-碘-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"j嘧啶將7-(l-丙基-丁基)-2，5-二曱基-吡唑并口，5-fl]嘧啶(3.08g，12.5mmol)溶解于無水乙腈(25mL)中并以10分鐘的時間間隔加入6份(每份0.70g)N-碘琥珀酰亞胺(4.2g，18.7mmol)。在室溫下攪拌過周末。除去乙腈，用二氯曱烷(IOOmL)對剩下的油狀物進行稀釋。用飽和氯化銨溶液(2x50mL)洗滌。收集有機相，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，得到深紅色的油狀物。用快速色譜對該油狀物進行純化，用100%己烷/0%(20%乙酸乙酉旨/己烷)至0%己烷/100%(20%乙酸乙酉旨/己烷)以50%的增量逐步進行梯度洗脫，得到橙色油狀物(10.97g，87%)。'HNMR(400MHz，CDC13):6.42(s,1H),3.74-3.70(m，1H)，2.58(s，3H),2.46(s，3H),1.74岡1.68(m，4H)，1.28-1.14(m，4H)，0.84(t，/=7.0Hz，6H)?；救缰苽淅?所述的那樣制備下面的化合物。制備例號化學名物理數(shù)據(jù)67-(l畫乙基-丙基)-3曙碘-2,5-二曱基-吡唑并[1,5-1嘧啶1H匿R(400MHz，CDC13):6.44(s，1H)，3.59(m,1H)，2.61(s,3H)，2.49(s，3H)，1.86-1.76(m，4H)，0.85(t，/=7.5Hz，6H)。制備例6的另一種操作將乙酸(lmL)和N-碘琥珀酰亞胺(6.7g，29.9mmol)—次性加入到7-(l畫乙基-丙基)-2,5-二甲基-吡唑并l，5-tfj嘧啶(6g，27.5mmol)在乙腈(60mL)中的溶液中。將混合物在22。C下攪拌2小時。蒸發(fā)掉溶劑，將殘余物吸收于水(50mL)和曱基-叔丁基醚(lOOmL)中。將有機部分分離出來，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(9.2g，96%)。ES/MSm/z344(M+l)+。制備例72-三甲基硅烷基-噻唑將正丁基鋰(20.4mL，51.0mmol，2.5M的己烷溶液)與乙醚(50mL)在一個配有滴液漏斗和溫度計的三頸燒瓶中混合到一起。冷卻至-78。C，滴加27噻唑(4.25g,50.0mmoI)在乙醚(50mL)中的溶液。在完全加入后，將反應混合物在-78。C下攪拌30分鐘，然后加入三曱基氯硅烷(5.4g，50.0mmol)。在-78。C下攪拌l小時，然后溫熱至室溫。通過加入飽和碳酸氬鈉來將反應淬滅。用乙醚萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機部分，用硫酸鈉干燥。過濾并減壓濃縮，得到殘余物。通過蒸餾進行純化，得到8.33g(52-56°C/15mmHg)標題化合物。'H匪R(400MHz，CDC13)8.13(d，1H，/=2.6Hz)，7.54(d，1H，/=2.6Hz)，0.43(s，9H)。制備例85-溴-4-甲基塞哇在0。C下，向4-甲基噻唑(15.0g，152mmol)在乙酸(30mL)中的溶液中加入溴(9.27mL，182mmol)。將反應混合物緩慢溫熱至室溫并攪拌過夜。用二氯曱烷稀釋并用1NNaOH和鹽水洗滌。將有機層用硫酸鈉千燥，過濾，真空濃縮。用硅膠柱色譜對粗產(chǎn)物進行純化，用己烷/乙酸乙酯(5/1)進行洗脫，得到標題化合物(9.94g,37%)。NMR(400MHz,CDC13):58.69(s，1H)，2.43(s，3H)。制備例9瘞唑-2-甲酸乙酯歷經(jīng)15分鐘，向2-三曱基硅烷基噻唑(135g，858.1mmol)在甲苯(1350mL)中的混合物中加入氯曱酸乙酯(98.4mL，1.03mol)在甲苯(1350mL)中的溶液。將反應在22。C下攪拌2小時。將該溶液加到25。/。(wt/wt)碳酸鈉水溶液(5L)上并攪拌30分鐘。分離有機層，用二氯甲烷(2x1L)反萃取水層。將有機層合并并蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(134g，99%)。ES/MSm/z158(M+l)+。制備例10瘞唑-2-曱酰胺將噻唑-2-曱酸乙酯(150g,0.9mol)加入到甲醇(75mL)和30%氫氧化銨水溶液(750mL)的混合物中，將混合物在回流下加熱1小時。然后冷卻至22。C，在真空下蒸發(fā)掉曱醇。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，濾出固體。將分離出來的固體真空干燥，得到標題化合物(98g，85。/。)。ES/MSm/z129(M+l)+。制備例111畫甲基-5-噻唑畫2-基畫1H-[1，2,4三哇將1，l-二甲氧基-AVV-二甲基-曱胺(240mL)冷卻至10。C并分三份加入瘞唑-2-甲酰胺(60g，421mmol)。將混合物在10。C下攪拌30分鐘。然后將混合物在45分鐘內逐漸加熱至回流。蒸餾掉所形成的甲醇，然后將反應加熱至IO(TC達1.5小時。將混合物冷卻至6(TC并通過真空蒸餾除去過量的1，l-二曱氧基-N,N-二甲基-曱胺。將殘余物冷卻至22。C，加入己烷(200mL)。將混合物研磨15分鐘，過濾，將固體干燥至恒重，然后用于下一步。將上面分離出來的固體(68g)加入到乙酸(680mL)中并將混合物冷卻至10°C。以保持溫度低于15。C的速度加入7V-甲基-肼(27mL，509mmol)。將混合物在30分鐘內溫熱至20。C,然后逐漸加熱至90。C。在卯。C下攪拌3()分鐘，然后冷卻至22。C。通過真空蒸餾除去乙酸。將殘余物加到水上，通過加入25。/。氬氧化鈉水溶液調至pH=8。用曱基-叔丁基醚對水層進行萃取(3x600mL)。將有機層合并，蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠色譜對所得的殘余物進行純化，用己烷/異丙醇(9/l)進行洗脫，得到標題化合物(49g，70。/。)。ES/MSm/z167(M+l)+。制備例125-(5-溴-噻唑-2-基)-l-甲基-l仔-l，2，4I三唑歷經(jīng)1小時分三批向曱基-5-噻唑-2-基-lH-[l，2,4I三唑(6.55g;39.4mmoI)和二甲基甲酰胺(32mL)的混合物中加入N-溴琥珀酰亞胺(14g，78.8mmol)。將混合物在22。C下攪拌18小時，然后加入到被冷卻至0-5。C的水29(300mL)中。分離出水層，用甲基-叔丁基醚(2x200mL)萃取。將有機層合并，用7%碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。過濾并蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(9.5g，93。/。)。ES/MSm/z(79Br/81Br)245/247(M+l)+。制備例132，5-二曱基-3-[2-(2-曱基-2好-[1，2,4三唑-3-基)-噻唑-5-基卜7-(1-丙基-丁基)-吡唑并l，5-司嘧啶將5-(5-溴-噻唑-2-基)-l-曱基-lH-[l，2，4三唑(6.5g,23.8mmol)和2,5-二曱基-7-(l-丙基-丁基)-吡唑并l，5-ff]嘧啶(6g，24.5mmol)合并到N-曱基吡咯烷酮(58mL)中并將其在氮氣下攪拌至完全形成溶液。然后，加入溴化四隱N-丁基銨(5.47g，16.7mmol)和醋酸鉀(11.8g，119mmol)并將混合物在氮氣氣氛下加熱至100°C。通過用真空/氮氣清潔三個循環(huán)對該熱混合物進行脫氣。然后加入醋酸4巴(216mg，0.94mmol)和三(2，4-二-叔丁基-苯基)-磷烷(787mg，1.2mmol)。將混合物在125。C下在氮氣下加熱4小時。將混合物冷卻至22。C并加入到水(750mL)中。用曱基-叔丁基醚(3x200mL)對水層進行萃取，將有機部分合并，蒸發(fā)。通過用硅膠墊過濾純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(4/l)進行洗脫。將包含產(chǎn)物的級分合并，蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(7g,72%)。ES/MSm/z410(M+l)+。制備例142，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-3-噻唑-5-基-吡唑并[1，5-"1嘧啶向一個烘箱干燥的燒瓶中加入被溶解于無水THF(30mL)中的2-三曱基硅烷基噻唑(1.765g，11.24mmol)并將其在惰性氣氛下冷卻至-78。C。緩慢加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液，4.5mL，11.24mmol)并在-78。C下攪拌30分鐘。一次性加入無水氯化鋅(2.26g，16.58mmol)并在-78。C下攪拌30分鐘。使反應升至室溫，攪拌30分鐘，加入7-(l-丙基-丁基)-3-碘-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-fl嘧啶(1.624g，5.18mmol)和二氯[l，l，-雙(二苯基膦基)二茂鐵H巴(n)二氯甲烷(0.423g，0.518mmol)。在油浴(90。C)中在惰性氣氛下回流過夜。將反應冷卻至室溫，用飽和碳酸氫鈉淬滅，用乙酸乙酯(150mL)稀釋。將水相分離出來并用乙酸乙酯(75mL)萃取。將有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得殘余物用快速色i普進行純化，用100%己烷/0%(30%THF/己烷)至0%己烷/100%(30%THF/己烷)以10%的增量逐步進行梯度洗脫，得到白色固體(0.720g，420/。)。ES/MSm/z329，0(M+l)+。基本如制備例14中所述的那樣來制備下面的化合物。制備例號化學名物理數(shù)據(jù)157-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基畫3-漆唑-5-基-吡唑并[l，5-aj嘧咬1H醒R(400MHz，CDC13):d8.75(s，1H)，8.75(s，1H)，8,28(s，1H)，6.47(s，1H)，3.62-3.55(m，1H)，2.65(s，3H),2.61(s，3H)，1.89-1.75(m，4H)，0.85(t，6H，/=7，5Hz)，0.85(t,6H，/=7.5Hz)。制備例15的另一種操作在-78。C下，在氮氣下，將正丁基鋰(76.5mL，191mmol，2.5M的己烷溶液)加入到2-三曱基硅烷基噻唑(30g，191mmol)在THF(450mL)中的溶液中，在加入期間保持溫度低于-74。C。將該混合物在-78。C下攪拌30分鐘，然后一次性加入氯化鋅干粉(39.9g，286mmol)并將混合物歷經(jīng)1小時溫熱至22°C。加入7-(1-乙基-丙基)-3-碘-2，5-二甲基-吡唑并[1，5-"1嘧啶(30g，87mmol)和1,1，-雙(二苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(11)(6.5g，8mmol)并將混合物在氮氣下加熱至回流達8小時。將混合物冷卻至22。C并加入10%氯化銨水溶液(45t)mL)。分離有機層并用甲基-叔丁基醚對水層進行洗滌(2x100mL)。將有機部分合并，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(20.4g，78%)。ES/MSm/z301(M+l)+。制備例167-(l-乙基-丙基)-3-(2-碘-噻唑-5-基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-fl嘧啶在-78°〇下，在氮氣氣氛下，將新制備的二-異丙基氨基鋰溶液(150ml;62.4mmol,0.6M的THF溶液)加入到7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-3-漆唑-5-基-吡唑并1，5-"嘧咬(17.8g，62.4mmol)在THF(IOOmL)中的混合物中，在加入期間保持溫度低于-74。C。將該混合物在-78。C下攪拌1小時，然后加入N-碘琥珀酰亞胺(15g，63mmol)在THF(IOOmL)中的溶液，同時保持溫度低于-74。C。將反應逐漸溫熱至22°C，然后加入10%氯化銨水溶液(300mL)。分離有機層，用甲基-叔丁基醚對水層進行洗滌(2x200mL)。將有機層合并，用硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠色鐠對所得的殘余物進行純化，用己烷/丙酮(5/l)進行洗脫，得到標題化合物(15g，60%)。ES/MSm/z427(M+l)+。實施例17-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-3-(4-曱基-噻唑-5-基)-吡唑并[l，5-"l嘧啶將Rieke⑧鋅(10g，位于100mLTHF中，13.2mL，18.48mmol)加入到5-澳-4-甲基噢唑(2.13g,18,48mmol)中并在回流下加熱2小時。將混合物冷卻至室溫，通過離心使鋅沉降。向位于千燥四氫呋喃(IOmL)中的7-(l-乙基-丙基)-3-碘-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"I嘧啶(900mg，2.62mmol)中用氮氣鼓泡，加入有機溴化鋅溶液，然后加入l，l'-雙(二苯基膦基)二茂鐵卜二氯鈀(11)(106mg，0.13mmol)。將反應混合物在回流下攪拌過夜，然后冷卻至室溫。向反應混合物中加入氯化銨溶液并用二氯甲烷萃取。將有機部分用硫酸鈉干燥，過濾，真空除去溶劑。用硅膠柱色譜對粗產(chǎn)物進行純化，用己烷/乙酸乙酯(3/l)進行洗脫，得到標題化合物(652mg，79。/Q)。！11NMR(400MHz,CDC13):58.80(s，1H)，6.48(s，1H)，3.63(m，1H)，2.57(s，3H)，2.43(s，3H)，2.40(s，3H)，1.85(m，4H)，0.90(t,6H，《/=7.3Hz)。ES/MSm/z315(M+l)+。制備例173-(2，4-二溴-噻唑-5-基)-2，5-二甲基-7-(l-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-flj嘧啶將2，5-二甲基-7-(l-丙基-丁基)-3-噻唑-5-基-p比唑并[l，5-fl嘧啶(3.15g，9.59mmol)溶解于乙腈(IOOmL)中并一次性加入N-溴琥珀酰亞胺(4.27g，24.0mmo1)。在惰性氣氛下攪拌過夜并用TLC證實反應進行完全。減壓濃縮，用二氯曱烷(150mL)稀釋油狀物，用水(75mL)洗滌。將有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得的油狀物用快速色譜進行純化，用100%己烷/0%(30%THF/己烷)至0%己烷/100%(30%THF/己烷)逐步梯度洗脫(O-l0-15-20-25-30-35-40-45-50-100%的30。/oTHF/己烷)，得到黃色晶體(3.70g，79%)。ES/MSm/z(79Br81Br)486.7(M+l)+。基本如制備17中所述的那樣制備下面的化合物，不同的是用二氯曱烷作為溶劑。<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>使用l.leqNBS,攪拌3天。實施例43_(4_溴_2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[1，5-"1嘧咬向一個烘箱干燥的燒瓶中加入3-(2，4-二溴噻唑-5-基)-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-tfj嘧啶(0.973g,2,00mmol)、無水二巧惡烷(20mL)、嗎啉(0.872g，10.0mmol)和碳酸銫(1.95g，6.00mmol)。在油浴(105。C)中在惰性氣氛下回流過夜。用LC/MS證實反應完全。用乙酸乙酯(IOOmL)稀釋，用水(50mL)洗滌，用乙酸乙酯(50mL)反萃取水相。將有機相合并，用硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得殘余物用快速色譜進行純化，用100%己烷/0%(40%二氯甲烷/20%乙酸乙酯/2%7N氨的甲醇溶液/38%己烷)至0%己烷/100°/。(40°/。二氯甲烷/20%乙酸乙酯/2%7N氨的甲醇溶液/38%己烷)以10%的增量逐步梯度洗脫，得到灰白色固體(0.878g，89。/。)。ES/MSm/z(79Br)491.7(M+l)+?；救鐚嵤├?中所述的那樣用2.0二曱基胺/THF或嗎啉作為胺、用THF或二,、烷作為溶劑制備下面的實施例。這些反應是在密封的容器或Schlenk管中進行的。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>使用6叫碳酸銫。實施例103一4_澳_2-(2-甲基-2//-[1，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-"l嘧咬向一個烘箱干燥的燒瓶中加入1-甲基-1，2，4-三唑(0,498，6.00mmol)和無水THF(20mL)，在惰性氣氛下冷卻至-78。C。緩慢加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液，2.4mL，6.0mmol)并攪拌30分鐘。一次性加入無水氯化鋅(1.36g，10.0mmol)并在-78。C下攪拌30分鐘。4吏反應溫熱至室溫，攪拌30分鐘，加入3-(2,4-二溴噻唑-5-基)-2，5-二甲基-7-(l-丙基-丁基)-吡唑并[l,5-"j嘧啶(0.973g，2.00mmol)和二氯[l，l，-雙(二苯基膦基)二茂鐵H巴(II)二氯曱烷(0.163g，0.200mmol)。將反應在油浴(90。C)中在惰性氣氛下回流過夜。將反應冷卻至室溫，用水淬滅，用乙酸乙酯(100mL)稀釋。分離出含水部分，用二氯甲烷(50mL)萃取。將有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得殘余物用快速色譜進行純化，用100%己烷/0%(10%乙腈/40%THF/50。/。己烷)至0%己烷/100%(10%乙腈/40%THF/50。/。己烷)以10%的增量逐步梯度洗脫，得到白色固體(0.090g，9V。)。ES/MSm/z(79Br)487.7(M+l)+。另一種制備方法向2，5-二甲基-3-2-(2-甲基-211-[1，2，4三唑-3-基)-噻唑-5-基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[1，5-"1嘧啶(6g，14.65mmol)在乙腈(60mL)中的溶液中一次性加入N-溴琥珀酰亞胺(2.74g,15.4mmol)并在22。C下攪拌10小時。蒸發(fā)掉溶劑，將殘余物溶解于水(50mL)和曱基-叔丁基醚(100mL)的混合物中。分離有機層，用另外的曱基-叔丁基醚對水層進行萃取(2x50mL)。將有機部分合并，蒸發(fā)掉溶劑。通過用硅膠墊過濾來對所得物質進行純化，用己烷/乙酸乙酯(3/l)進行洗脫。將包含產(chǎn)物的級分合并，蒸發(fā)掉溶劑。加入庚烷(25mL)并對固體進行研磨。將固體濾出，真空干燥，得到標題化合物(5.5g,77%)。ES/MSm/z(79Br/81Br)488/4卯(M+l)+。實施例10a3-4一溴_2_(2_甲基_2仏[1，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-fl嘧啶，鹽酸鹽將3-[4-渙-2-(2-曱基-2好-[1，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基]-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-fll嘧啶(750mg，1.54mmol)溶解于丙酮(5mL)中并加入1MHC1的乙醚溶液(1.84mL，1.84mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時并真空濃縮。將殘余物溶解于乙醚/己烷=1/1(5mL)中，4吏所需的HC1鹽結晶(526mg，65%)。ES/MSm/z(81Br)4卯(M+l)+;'H-NMR(CDC13):8.20(s，1H)，6.82(s，1H)，4.21(s，3H)，3.64(m，1H)，2.49(m，3H)，2.44(s，3H)，1.75(m，4H)，1.96(m，4H)，0.81(m,6H)?；救鐚嵤├?0中所述的那樣來制備下面的化合物。實施例編號化學名物理數(shù)據(jù)11*7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-3卄曱基-2-(2-曱基-211-11,2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基j-吡唑并l，5-fll嘧啶ES/MSm/z396(M+l)+用0.5M位于THF中的氯化鋅代替無水氯化鋅。在80。C下加熱3天。實施例123-(4-溴-2-(2-曱基-2H-[l，2，4j三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并l，5-fl嘧啶36在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，0.6mL，1.5mmol)加入到1-甲基-1，2，4-三唑(124.5mg，1.5mmol)在THF(3mL)中的溶液中并攪拌30分鐘。加入無水氯化鋅(409mg，3.0mmol)，繼續(xù)攪拌30分鐘，溫熱至室溫并攪拌2小時。加入3-(2，4-二溴-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-"1嘧啶(229mg，0.5mmol),然后加入四(三苯基膦)鈀(58mg，0.05mmol)并回流過夜。冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，用飽和氯化銨洗滌。將有機部分用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色鐠對粗品物質進行純化，用己烷乙酸乙酯(10:2.5)進行洗脫，得到黃色泡沫形式的標題化合物(77mg)。MS(APCI)m/z(79Br)460.4(M+l)+。從實施例21開始的另一種制備方法將乙酸(lmL)和N-溴琥珀酰亞胺(4.1g，22mmol)加入到7-(l-乙基畫丙基)-2，5-二曱基-3-[2-(2-曱基-2H-[l，2,41三唑-3-基)-噻唑-5-基-吡唑并[l，5-W嘧啶(8g，21mmol)在乙腈(80mL)中的溶液中。將混合物在22。C下攪拌2小時。然后蒸發(fā)掉溶劑，向所得的殘余物中加入水(50mL)和甲基-叔丁基醚(IOOmL)。將有機部分分離出來，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)掉溶劑。將所得的殘余物用異丙醇重結晶，得到標題化合物(8.7g,90%)。ES/MS(m/z):(79Br/81Br)460/462(M+l)+。實施例12a3畫(4-溴-2-(2-曱基-2H-l，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并l，5-司嘧啶，對-曱苯磺酸將3-(4-溴-2-(2-甲基-2H-l，2，4]三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并[1，5-"1嘧啶(50mg，0.109mmol)溶解于丙酮(3mL)中。加入0.25M對-曱苯磺酸水溶液(434.4nL，0.109mmol)，將所得混合物蒸發(fā)至干。加入乙酸乙酯(12mL)以使固體部分溶解。加入甲醇(lmL)以獲得澄清溶液。通過緩慢蒸發(fā)來對該溶液進行濃縮，直至觀察到晶體。通過過濾分離出晶體并在25'C下真空干燥，得到約50mg標題化合物。用使用下列HPLC條件的離子色謙測定該鹽的化學計量柱PhenomenexPhenosphereSAX，4.6x150mm，30。C;流動相50%乙腈/50%0.025M磷酸鈉緩沖液，pH=4.5;流速=1.5mL/min;檢觀'J:UV，205nm;進樣體積=5運行時間=3分鐘。理論量計算值27.2%甲苯磺酸根；實測值28.4%曱苯磺酸根(三次HPLC運行的均值)。實施例13{4-氯-5-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[1，5-"1嘧啶-3-基1-噻唑-2-基}-二甲基胺向一個烘箱干燥的燒瓶中加入{4-溴-5-2，5-二曱基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-fl嘧啶-3-基-噻唑-2-基-二曱基胺(0.20，0.44mmol)和無水THF(3.0mL)并在惰性氣氛下冷卻至-78。C。緩慢加入正丁基鋰(1.6M己烷溶液，0.42mL,0.67mmol)并攪拌30分鐘。一次性加入N-氯琥珀酰亞胺(0，120g，0.889mmol)并在-78。C下攪拌30分鐘。使反應溫熱至室溫，攪拌5小時，用LC/MS檢查反應進程。用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用飽和氯化銨(50mL)洗滌，用二氯甲烷(50mL)反萃取水相。將有機相合并，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。將所得殘余物用快速色譜進行純化，用100%己烷/0%(25%THF/己烷)至0。/。己烷/100。/。(250/。THF/己烷)以10。/。的增量逐步梯度洗脫，得到白色固體(0.087g，48。/。)。ES/MSm/z(35C1)406.0(M+l)+?；救鐚嵤├?3所述的那樣用上面制得的適宜溴代噻唑來制備下面的實施例。實施例號化學名物理數(shù)據(jù)143-(4-氯-2-嗎啉-4-基-瘞唑-5-基)-2，5-二甲基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-aj嘧啶ES/MSm/z(35C1)448.0(M+l)+15{4陽氯-5-[7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"嗜啶-3-基l-瘞唑-2-基}-二甲基-胺MS(APCI)m/z(35C1)378.0(M+l)+制備例182，4-二氯噻唑將噻唑烷-2，4-二酮(50g，0.43mol)在三氯氧化磷(240mL)中的混合物冷卻至5。C，歷經(jīng)15分鐘加入吡啶(34mL，0.43mol)。將混合物加熱至125°C達4小時，然后冷卻至22。C。通過真空蒸餾除去過量的三氯氧化磷并將殘余物加入到被冷卻至5。C的水(1L)中。將混合物用二氯曱烷(3x400mL)萃取。將有機部分合并，蒸發(fā)掉溶劑，得到標題化合物(50g，76。/。)。EI/MSm/z:(35C135C1/35C137C1/37C137C1)153/155/157(M+l)+。制備例194-氯-2-嗎啉代-噻唑向2，4-二氯瘞唑(34g，0.22mol)在乙腈(425mL)中的混合物中加入碳酸鉀(60.9g,0.44mol)，然后歷經(jīng)30分鐘滴加嗎啉(21.2mL，0.225mol)。將混合物在40。C下回流，然后冷卻至22。C。對混合物過濾并蒸發(fā)濾液。將殘余物用異丙醇(60mL)在22。C下研磨l小時。將固體濾出并真空干燥至恒重，得到標題化合物(34.5g,76%)。ES/MSm/z(35C1)205(M+l)+。實施例163-(4-氯-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l,5-"I嘧咬在氮氣氣氛下，將3-(4-溴-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-flj嘧啶(116mg，0.25mmol)溶解于THF(1.5mL)中并冷卻至-78。C。加入正丁基鋰(O.lmL.2.5M己烷溶液，0.25mmol)并在-78。C下攪拌30分鐘。加入N-氯琥珀酰亞胺(33.4mg，0.25mmol)并再攪拌30分鐘，同時緩慢溫熱至室溫。在攪拌過夜后，通過加入飽和氯化銨溶液將反應淬滅，用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗涂有機層，用硫酸鈉千燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色譜對該粗品物質進行純化，用己烷:二氯曱烷乙酸乙酯(5:5:2)洗脫，得到標題化合物(54mg)。MS(APCI)m/z(35C1)420.6(M+l)+;'H醒R(400MHz,CDC13):6.44(s,1H)，3.79(t，4H,/=4.8Hz),3.63-3.56(m,1H)，3.47(t,4H，/=4.8Hz)，2.55(s，3H)，2.45(s，3H)，1.88-1.75(m，4H)，0.87(t，6H，/=7.5Hz)。從制備例6開始的另一種制備方法將7-(1-乙基-丙基)-3-碘-2，5-二甲基-吡唑并1，5-"1嘧啶(9g，26.2mmol)和4-氯-2-嗎啉代-遙唑(7.5g，36.7mmol)合并到之前用氮氣進行了脫氣的二甲基甲酰胺(卯mL)中。加入碳酸銫(17.8g，55mmol)、硪化亞銅(250mg，1.31mmol)、三苯基膦(550mg，2.09mmol)和醋酸4巴(117mg，0.52mmol)。將混合物加熱至125。C達16小時，然后冷卻至22°C。加入水(卯0mL)并用曱基-叔丁基醚(3x200mL)萃取。將有機部分合并，蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠色語進行純化，用己烷/乙酸乙酯(4/l)進行洗脫，得到標題化合物(6.4g，62%)。ES扁m/z(35C1)420(M+l)+。實施例16a3-(4-氯-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡哇并[l，5-flj嘧，定，鹽酸鹽在50。C下，將3-(4-氯-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2,5-二曱基-p比唑并[l，5-"j嘧啶(1.40g，3.33mmol)溶解于丙酮(10mL)中并冷卻至室溫。加入氯化氬(2M乙醚溶液，2.0mL，4.0mmol)并在超聲波儀中充分攪拌。將溶液濃縮少量，加入最低限度的乙醚以使HC1鹽結晶。將混合物在冷藏器中冷卻過夜。加入另外的氯化氬(2M乙醚溶液，2.0mL,4.0mmo1)，在冷藏器中冷卻。將結晶性物質濾出，干燥，得到標題化合物(1.15g，75%)。ES/MSm/z(35C1)420(M+l)+;NMR(CDC13):9.18(br，1H)，6.86(s，1H)，3.72(m，4H)，3.49(m，1H)，3.39(m，4H)，2.48(s，3H)，2.38(s，3H)，1.79(m，4H)，0.79(m，6H)。實施例173-(4-溴-2-丁基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并l，5-flj嘧啶在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，0.2mL，0.5mmol)加入到3-(2，4-二溴-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并fl,5-tfj嘧啶(230mg，0.5mmol)在THF(3mL)中的溶液中。在30分鐘后，加入1-石輿丁烷(138mg，0.75mmol)并繼續(xù)攪拌1小時。溫熱至室溫并攪拌1小時。通過加入飽和氯化銨溶液來將反應淬滅并用乙酸乙酯萃取。將有機部分用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色譜對該粗品物質進行純化，用己烷/乙酸乙酯(10/1.5)進行洗脫，得到橙色泡沫形式的標題化合物(78mg)。ES/MSm/z(81Br)437.4(M+l)+?；救鐚嵤├?7所述的那樣制備下面的實施例。實施例號化學名物理數(shù)據(jù)183-(4-溴-2-曱氧基曱基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2,5-二曱基-吡唑并[l，5-fl嘧啶MS(APCI)m/z(81Br)424.6(M+l)+實施例197-(1-乙基-丙基)-3-(2-曱氧基曱基-噻唑-5-基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-司嘧啶在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，0.4mL，1.0mmol)加入到7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-3-噻唑-5-基-吡唑并[l，5-aj嘧啶(300mg，1.0mmol)在THF(3mL)中的溶液中。攪拌30分鐘，加入1-碘甲基甲基醚(205mg，1.2mmo1)。繼續(xù)攪拌l小時，然后緩慢溫熱至室溫并攪拌過夜。通過加入飽和氯化銨溶液來將反應淬滅，用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，獲得殘余物。用快速色傳對該粗品物質進行純化，用己烷/乙酸乙酯(10/2)進行洗脫，得到黃色泡沫形式的標題化合物(184mg)。MS(APCI)m/z345.3(M+l)+。實施例203-(4-氯-2-甲氧基甲基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-"嘧咬在-78。C下，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，174mL,0.43mmol)加入到進行著攪拌的7-(1-乙基-丙基)-3-(2-曱氧基曱基-噻唑-5-基)-2，5-二甲基-吡唑并ll，5-aj嘧啶(150mg，0.43mmol)在THF(3mL)中的溶液中。攪拌30分鐘并加入N-氯琥珀酰亞胺(87mg，0.653mmol)。攪拌30分鐘，然后將反應緩慢溫熱至室溫，使反應繼續(xù)進行過夜。通過加入飽和氯化銨溶液來將反應淬滅，用乙酸乙酯萃取，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色譜進行純化，用己烷/乙酸乙酯(10/2)進行洗脫，得到標題化合物(7mg)。MS(APCI)m/z(35C1)379.3(M+l)+。實施例217-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-3-2-(2-甲基-2H-[l，2，4]三唑-3-基)-噻唑-5-基)畫吡唑并[l，5-"j嘧啶將3-(4-溴-2-(2-曱基-2H-ll，2,4I三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并l，5-"I嘧啶(175mg,0.38mmol)和氯化亞銅(1)(132mg，1.33mmol)在DMF(5mL)中進行混合并加熱至120。C達24小時。冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋并用鹽水洗滌。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮，得到殘余物。用快速色譜進行純化，用己烷、然后用己烷/EtOAc(1()/1.8)進行洗脫，得到黃色-橙色固體(45mg)。ES/MSm/z382，0(M+l)+。另一種制備方法在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，57.6mL，144mmol)加入到7V-甲基三唑(11.95g，144mmol)在THF(600mL)中的溶液中，在加入期間保持溫度低于-74。C。然后一次性加入氯化鋅干粉(26g，192mmol)并將混合物在1小時內溫熱至22°C。一次性加入7-(l-乙基-丙基)—3-(2-碘-噻唑-5-基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-"嘧啶(12.5g，29mmol)和四(三苯基)膦鈀催化劑(1,15g，0.01mol)，將混合物在氮氣下加熱至回流達8小時。將混合物冷卻至22。C并加入水(300mL)。分離有機層并用甲基-4又丁基醚萃取水層(2x200mL)。將有機部分合并，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)掉溶劑。通過硅膠墊來進行純化，用己烷/乙酸乙酯(4/l)進行洗脫，得到標題化合物(8g，72%)。ES/MSm/z382(M+l)+。實施例223-(4-氯-2-(2-甲基-2H-[l，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l,5-fll嘧啶將7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-3-[2-(2-曱基-2H-[l，2，4三唑-3-基)-噻唑_5-基)-吡唑并[1，5-"1嘧啶(20mg，0.052mmol)和N'氯琥珀酰亞胺(7.6mg，0.0569mmol)在二氯甲烷(0.5mL)和乙腈(0.5mL)中的混合物在室溫下在一個小瓶中攪拌過夜。濃縮，獲得殘余物。用快速色譜進行純化，用己烷、然后用己烷/乙酸乙酯(10/1.5)洗脫，得到標題化合物(16mg)。ES/MSm/z(35C1)416.0(M+l)+。實施例237-(1-乙基-丙基)-3-(4-甲氧基-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-"嘧咬將3-(4-溴-2-嗎啉-4-基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并fl，5-"j嘧啶(162mg，0,35mmol)、曱醇鈉(57mg，1.05mmol)和碘化亞銅(1)(67mg，0.35mmol)在曱醇(3mL)中的混合物在一個密封的4-mL小瓶中在120'C下攪拌15小時。冷卻至室溫，通過過濾除去固體，將濾液真空濃縮。用快速色語對殘余物進行純化，用己烷/THF(10/2)進行洗脫。用曱醇將該物質重結晶，得到標題化合物(20mg)。ES/MSm/z416.0(M+l)+。制備例204-溴-5-l7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-p比唑并[l，5-"l嘧啶-3-基卜噻唑-2-甲醛在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(1.6M己烷溶液，0.312mL，0.50mmol)加入到3-(2，4-二溴-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并1，5-fl嘧啶(230mg，0.50mmol)的THF溶液(2.5mL)中并攪拌30分鐘。加入N-曱?；鶈崃?58mg，0.50mmol)的THF(0.5mL)溶液。攪拌1小時，然后將反應在-20。C下儲存過夜。將反應溫熱至室溫，用醚稀釋，通過加入4NHC1(4mL)將其淬滅。將有機相分離出來并用4NHC1(2x4mL)萃取。將含水部分合并，用碳酸氫鈉固體處理至pH^8至9，然后用乙醚萃取。將所有的有機層合并，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色譜對該粗品物質進行純化，用己烷/二氯曱烷/乙酸乙酯(5/5/1)洗脫，得到標題化合物(154mg)。MS(APCI)m/z(81Br)409.0(M+l)+。實施例243-(4-溴-2-嗎啉-4-基-甲基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并[1，5-"1嘧啶將4-溴-5-[7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-fll嘧啶-3-基l-噻唑-2-甲醛(150mg,0.368mmol)、嗎啉(35mg，0.405mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(97mg，0.46mmol)合并到二氯甲烷(3mL)和甲醇(0.5mL)中。攪拌過夜，再加入一些嗎啉(35mg，0.405mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(97mg，0.46mmol)，再攪拌4小時。真空除去溶劑，用二氯甲烷稀釋，用鹽水洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將所得的物質用快速色譜進行純化，用二氯甲烷:2M氨的甲醇溶液(10:l)洗脫，得到一種混合物。用反相柱對混合物進行純化，用水/乙腈(80/20)至水/乙腈(10/卯)洗脫，得到標題化合物(20mg)。ES/MSm/z(81Br)480.0(M+l)+。實施例253-(4-溴-2-吡啶-4-基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2,5-二曱基-吡唑并[l，S-aj嘧P定在-78。C下，在氮氣氣氛下，將正丁基鋰(1.6M己烷溶液，0.312mL，0.5mmol)加入到3-(2，4-二溴-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2,5-二甲基-吡唑并|1，5-"1嘧梵(229mg，0.5mmol)在THF(4mL)中的溶液中。攪拌30分鐘后，加入無水氯化鋅(264mg，1.5mmol)，繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應溫熱至室溫并攪拌1小時。加入4-碘吡啶(103mg，0.5mmol)，然后加入l，l'-雙(二苯基膦基)二茂鐵氯化鈀(II)(二氯甲烷加合物)(0.40.8mg，0.05mmol)。將反應加熱至回流過夜。冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，獲得殘余物。用快速色譜對該粗品物質進行純化，用二氯曱烷:2N氨的甲醇溶液(10:0.75)洗脫，得到一種混合物。用反相柱對混合物進行純化，用水乙腈=80:20至水乙腈=10:卯進行洗脫，得到標題化合物(19mg)。ES/MSm/z(79Br)456.0(M+l)+。制備例214-三氟甲基-噻唑-2-基胺將硫脲(4.0g，52.3mmol)和3-溴-l，l，l-三氟丙畫2-酉同(5.5mL，10g，52.3mmol)加入到乙醇(100mL)中并在50。C下加熱2小時。冷卻至室溫，濃縮至干。將殘余物溶解于水中并用2MNaOH將pH調至>12。用乙醚萃取(4x)。將合并的有機萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。用硅膠色譜對所得材料進行純化(《12<:12)，得到標題化合物(6.9g，79%)。ES/MSm/z169(M+l)+。制備例225-溴-4-三氟甲基-噻唑-2-基胺，氫溴酸鹽將溴(2.0mL，6,28g，39.3mmol)滴加到水浴冷卻的4-三氟甲基-噻唑-2-基胺(6.0g，35.7mmol)在乙醚(60mL)中的溶液中。在完全加入后攪拌1小時，然后溫熱至室溫。通過過濾收集固體并用乙醚洗滌，得到標題化合物(10.5g，90%)。ES/MSm/z(79Br/81Br)247/249(M+l)+。制備例235-溴-2-(2，5-二甲基-吡咯-l-基)-4-三氟曱基-噻唑將己烷-2，5-二酮(3.5mL，3.4g，30.2mmol)加入到5-溴-4-三氟曱基-噻唑-2-基胺氫溴酸鹽(9.0g，27.4mmol)在曱醇(60mL)中的溶液中。在室溫下攪拌過夜。加入磷酸鹽緩沖液(50mL，pH:7)。通過過濾收集沉淀，用水洗滌。將濾餅溶解于CH2Cl2t，用硫酸鈉干燥。過濾并真空濃縮，得到標題化合物(8.2g，92%)。!H醒R(400MHz,CDCl3)d5.91(s，2H)，2.27(s，6H)。實施例263-12-(2，5-二甲基-吡咯-1-基)-4-三氟甲基-噻唑-5-基1-7-(1-乙基-丙基)_2，5-二曱基-吡唑并l，5-"l嘧啶將5-溴-2-(2，5-二曱基-吡咯-l-基)-4-三氟曱基-噻唑(2.2g,6.6mmol)在THF(25mL)中的溶液在干冰浴中進行冷卻。滴加叔丁基鋰(1.7M的戊烷溶液，8.5mL，14.5mmol)。攪拌45分鐘，然后滴加氯化鋅(0.5M的THF溶液，14.6mL，7.3mmol)。攪拌5分鐘并除去冷卻浴。攪拌30分鐘，然后加入7-(l-乙基-丙基)-3-碘-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-flj嘧啶(1.5g，4.4mmol)和雙(三-叔丁基膦)把(0)(450mg，0.9mmol)。回流24小時。將反應冷卻，將混合物傾倒到乙醚中，用水(2x)洗滌。將合并的水層用乙醚洗滌。將合并的有機部分用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮至干。用硅膠色譜對所得的殘余物進行純化(75-100%CH2C12的己烷溶液)，得到標題化合物(1.47g，72%)。HR-ToF-MSm/zC23H26F3N5S+H^々計算值462.1939，實測值462.1915。實施例275-[7-(1-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并1，5-"1嘧啶-3-基1-4-三氟甲基-噻唑-2-基胺將幾胺(2mL，50。/。的水溶液)加入到3-[2-(2，5-二曱基-吡咯-l-基)-4-三氟曱基-噻唑-5-基-7-(l-乙基-丙基)-2,5-二甲基-吡唑并l,5-fll嘧啶(1.1g，2.3mmol)在乙酸(10mL)中的溶液中。將反應加熱至8(TC達6小時。冷卻至室溫。傾倒到乙醚中，用2MNaOH洗滌2次，然后用水洗滌一次。將有機部分用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，真空濃縮至干。用硅膠色譜對所得的殘余物進行純化(40°/。乙酸乙酯的己烷溶液)，得到標題化合物(0.76g，87%)。ES/MSm/z384(M+l)+。制備例243-(2-溴-4-三氟曱基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-tfj嘧咬將溴化銅(11)(540mg，2.4mmol)和亞硝酸叔丁酯(0.36mL，310mg，3.0mmoI)在乙腈(20mL)中的混合物加熱至60°C。加入固體形式的5-[7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并l，5-al嘧啶-3-基I-4-三氟甲基-噻唑-2-基胺(755mg，2.0mmol)。將反應加熱至80。C達2小時。將反應冷卻，傾倒到乙醚中，用水萃取(3x)。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，真空濃縮至干。用硅膠色譜對所得的殘余物進行純化(CH2Cl2)，得到標題化合物(0.77g,87%)。ES/MSm/z(79Br/81Br)447,449(M+l)+。實施例28(5-[7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"I嘧啶-3-基j-4-三氟曱基-噻唑-2-基}-二曱基-胺將一個包含位于曱醇(4mL)中的3-(2-溴-4-三氟甲基-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-fll嘧啶(313mg，0.7mmol)和二曱胺(2M的THF溶液，4mL，8mmol)的密封管加熱至80。C達2小時。將反應冷卻并真空濃縮。用硅膠色i脊對所得的殘余物進行純化，用0-30%乙酸乙酯的CH2C12溶液洗滌，得到標題化合物(0.28g，97%)。HR-ToF-MSm/zC,9H24F3NsS+H+的計算值412.1770，實測值412.1783?；救鐚嵤├?8中所述的那樣制備下面的實施例，不同的是將反應回流8小時。<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>實施例30/V"5-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-tf嘧啶-3-基l-4-三氟甲基-噻唑-2-基}-乙酰胺將羥胺(50%的水溶液，5mL)加入到3-2-(2，5-二曱基-吡咯-l-基)-4-三氟曱基-噻唑-5-基l-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l，5-"I嘧啶(2.4g，5.2mmol)在乙酸(25mL)中的溶液中。將反應加熱至80。C達72小時。將反應冷卻至室溫，傾倒到乙醚中，用2MNaOH(2x)洗滌，然后用水洗滌一次。將有機部分用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干。用柱色譜對所得殘余物進行純化，用40%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到標題化合物(0.28g，13。/0)。HR-ToF-MSm/zC19H22F3N5OS+H+的計算值426.1575，實測值426.1565。實施例31(2-{5-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-"1嘧啶-3-基1-4-三氟曱基-噻唑-2-基氨基}-乙基)-氨基曱酸叔丁酯將(2-氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(0.5mL，506mg，3.2mmol)加入到3-(2-溴-4-三氟曱基-噻唑-5-基)-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[l,5-"I嘧咬(IOOmg，0.22mmol)和三乙胺(0.3mL，222mg，2.2mmol)在曱醇(lmL)中的溶液中。蒸發(fā)掉甲醇并加熱至80。C過夜。將反應冷卻至室溫并真空濃縮。用柱色傳對所得殘余物進行純化，用10-50%乙酸乙酯的CH2Cl2溶液洗脫，得到標題化合物(O.llg，97%)。ES/MSm/z527.2(M+l)+。用適宜的胺基本如實施例31中所述的那樣制備下面的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>在EtOH中在回流下加熱過夜。蒸發(fā)掉EtOH，在110。C下加熱24小時。在EtOH中在80。C下加熱過夜。k制備該HCI鹽，用EtOAc/己烷重結晶。實施例33/V、(5-7-(l-乙基-丙基)-2，5-二甲基-吡唑并[l，5-"j嘧啶-3-基j-4-三氟曱基-噻唑-2-基}-乙烷-1，2-二胺，鹽酸鹽將(2-{5-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-"1嘧啶-3-基卜4-三氟甲基-噻唑-2-基氨基}-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(101mg，0.192mmol)加入到1MHCl的曱醇溶液(lmL)中。將反應在70。C下加熱過夜。將反應冷卻并由曱醇/乙酸乙酯真空濃縮。用乙酸乙酯對所得的殘余物進行研磨，得到標題化合物(64mg，78%)。ES/MSm/z427.0(M+l)+?；救鐚嵤├?3中所述的那樣制備下面的實施例。<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>實施例A用離體結合進行的體內效力評估為了評估體內效力，用離體結合對本發(fā)明的化合物進行評價。使用D.R.Gehlert等人，fJ尸509:145-153(2005)中所提供的操作，通過口服途徑將化合物施用于大鼠。然后如Gehlert等人所述的那樣對1251-蛙皮降壓肽與小腦的離體結合進行評估。例如，實施例15在10mg/kg下提供65%的抑制。實施例BCRF1濾膜結合測定法在產(chǎn)生具有足夠受體密度以開展結合測定法的重組細胞系方面，通過使用由Stanford許可的Phoenix逆轉錄病毒表達系統(tǒng)克服了以質粒為基礎的人CRF1表達的限制。用穩(wěn)定的HEK-hCRFl細胞系制備膜，如下建立結合反應(200jiL):50jiL1251-蛙皮降壓肽(終濃度為0.2nM)、50jiL化合物和100nLCRFl膜(25fig/反應)。將反應在室溫下孵育2小時，然后通過用預處理的FB微孔玻璃纖維濾板(96孔)過濾來終止反應。將板用水冷的測定緩沖液(50mMtris，12.5mMNaCl，1mMEDTA，10mMMgCl2，0.05%BSA，pH7.2)洗滌兩次，風千過夜，用100pLMicroscint40在MicroBeta計數(shù)器中進行計數(shù)。在存在0.5未標記的蛙皮降壓肽的情況下測定非特異性結合(NSB)。通常一式三份地進行測定，用GraphPadPrism對中值數(shù)據(jù)點作圖。用這種測定法，本發(fā)明具體給出的化合物以低于1的Ki(抑制常數(shù))抑制滾動(roller)/粘附細胞中'"I-蛙皮降壓肽(4nM)的結合。例如，實施例15表現(xiàn)出6.2nM的Ki。實施例CCRF2濾膜結合測定法在產(chǎn)生具有足夠受體密度以開展結合測定法的重組細胞系方面，通過使用由Stanford許可的Phoenix逆轉錄病毒表達系統(tǒng)克服了以質粒為基礎的人CRF2表達的限制。用穩(wěn)定的HEK-hCRF2細胞系制備膜，如下建立結合反應(200nL):501251-蛙皮降壓肽(終濃度為0.2nM)、50jiL化合物和100^LCRF2膜(25^g/反應)。將反應在室溫下孵育2小時，然后通過用預處理的FB微孔玻璃纖維濾板(96孔)過濾來終止反應。將板用冰冷的測定緩沖液(50mMtris，12.5mMNaCl，1mMEDTA，10mMMgCl2，0.05%BSA，pH7.2)洗滌兩次，風干過夜，用100jiLMicroscint40在MicroBeta計數(shù)器中進行計數(shù)。在存在0.5未標記的蛙皮降壓肽的情況下測定非特異性結合(NSB)?；蛘?，用閃爍親近測定法來對化合物進行評價。如下建立該測定法50^1/251-蛙皮降壓肽(終濃度為0.2nM)、50化合物或未標記的蛙皮降壓肽(NSB)和100jiL含250pg麥胚凝集素(WGA)的SPA小珠和CRF2膜(1.5jig/反應)。將板在室溫下孵育4-5小時，然后在200Xg下離心10分鐘。用WallacTrilux閃爍計數(shù)器來對結合的放射性進行評估。通常使用一式三份的測定來對結合進行評估，用GraphPadPrism對中值數(shù)據(jù)點作圖。首先在固定濃度下對化合物進行篩選，如果注意到足夠的活性，則隨后產(chǎn)生濃度-響應曲線。在所述CRF2結合測定法中對本發(fā)明的具體給出的化合物進行了試驗，它們對CRF2受體表現(xiàn)出弱親合性。例如，實施例15在50^M的濃度下表現(xiàn)出11%的抑制。這一結果表明本發(fā)明的化合物對CRF1受體具有選擇性(相對于CRF2而言)。實施例D生物利用度和藥動學性質分布容積(Vdist)是指藥物在機體中的量與藥物在血液或血漿中的濃度之比。分布容積指的是在與血液或血漿中的濃度相同的濃度下，包含機體中的全部藥物量所需的體液體積Vdist=機體中的藥物量/血液或血漿中的藥物濃度(GoodmanandGihnan，s)。對于10mg的劑量和10mg/L的血漿濃度而言，分布容積將為l升。分布容積反映了藥物在血管外組織中的存在程度。大的分布容積反映了與血漿蛋白結合相比化合物傾向于與組織組分結合。在臨床情況中，可以用Vdist來確定獲得穩(wěn)態(tài)濃度的負荷劑量。為了測定分布容積，給雄性SpragueDawley大鼠(N-3)施用1mg/kg的化合物靜脈內單劑量。在給藥后0.08至24小時，在一些時間點收集多個血漿樣品。用LC/MS/MS對血漿樣品進行分析以測定血漿濃度。進行血漿藥動學計算以確定包括Vdist和血漿清除率(Clp)在內的藥動學參數(shù)。本發(fā)明的化合物優(yōu)選具有良好的生物利用度。例如，大部分可商購的CNS和心血管藥物表現(xiàn)出<10L/Kg的人Vdist。與CRF拮抗劑CP154526(Schulz等人，TV",/.爿c"d廣CA^4人93:10477(1996))和NBI30775(Chen等人，Z)rwgDeve/o/7附^^/^^fl^d，65:216(2005))相比(當單獨進行分析時，CP154526和NBI30775分別表現(xiàn)出114L/Kg和76L/Kg的大鼠Vdist)，當單獨進行分析時，本發(fā)明的實施例15在給予1mg/kg的靜脈內單劑量后僅表現(xiàn)出7.2L/Kg的大鼠Vdist。此外，血漿清除率(CLp)是藥物由機體除去速率的量度。按照靜脈內劑量和一級動力學，可以用下列方程確定血漿清除率CLp=劑量/AUC，其中AUC是描述血漿藥物濃度與從0至無窮大時間的函數(shù)關系的曲線下總面積。當單獨進行分析時，在單次靜脈內劑量后，參比物CRF拮抗劑CP154526和NBI37582分別表現(xiàn)出83和306mL/min/kg的大鼠清除率(CLp),而當單獨進行分析時，本發(fā)明的實施例15僅表現(xiàn)出23.6mL/min/kg的大鼠CLp。權利要求1.式I化合物或其藥學上可接受的鹽式I其中R1和R2獨立地是乙基或正丙基；R3是氫、Cl、Br、甲基、三氟甲基或甲氧基；R4是氫、Br、RaRbN-、甲氧基甲基、正丁基、乙酰氨基、吡啶-4-基、嗎啉-4-基、id="icf0002"file="A2007800351450002C2.tif"wi="110"he="21"top="119"left="46"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>Ra和Rb獨立地是氫、C1-C3烷基、H2NCH2CH2-、(CH3)3COC(O)NHCH2CH2-或CH3CH2CH2NHCH2CH2-。2.根據(jù)權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R"是Cl、Br、甲基或三氟甲基。3.根據(jù)權利要求1或2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R3是C1或Br。4，根據(jù)權利要求1至3中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的-7/N、鹽，其中R4是lTRbN-、吡啶-4-基、嗎啉-4-基或N」。5.根據(jù)權利要求1至4中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的義A鹽，其中R"是嗎啉-4-基或N」。6.根據(jù)權利要求1至4中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R"是RaRbN-，Ra和Rb獨立地是C，-C3烷基。7.根據(jù)權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其是3-4-溴-2-(2-甲基-27/-1，2，41三唑-3-基)-噻唑-5-基卜2，5-二甲基-7-(1-丙基-丁基)-吡唑并[l，5-"嘧啶。8.根據(jù)權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其是3-(4-溴-2-(2-甲基-2H-1，2,4j三唑-3-基)-噻唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并[1，5-"1嘧。定。9，根據(jù)權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其是3-(4-氯-2-嗎淋-4-基-塞唑-5-基)-7-(1-乙基-丙基)-2，5-二曱基-吡唑并1，5-1嘧啶。10.—種藥物組合物，其包含權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的賦形劑。11.一種治療患者的抑郁、焦慮、酒精或物質濫用、肥胖、高血壓、代謝綜合征、腸易激惹綜合征、癲癎、中風、睡眠障礙、變態(tài)反應、偏頭痛、經(jīng)前期綜合征、不孕、性功能障礙、先天性腎上腺增生、庫欣病、早產(chǎn)、應激誘導的胃潰瘍、炎性障礙、垂體腫瘤或異位垂體源腫瘤、慢性疲勞綜合征、纖維肌痛、內臟痛或多發(fā)性硬化的方法，其包括給需要其的患者施用治療有效量的權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽。12.—種治療患者的焦慮或抑郁的方法，其包括給需要其的患者施用治療有效量的權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽。13.—種治療患者的酒精或物質濫用的方法，其包括給需要其的患者施用治療有效量的權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽。14.根據(jù)權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其用在治療中。15.根據(jù)權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其用于治療抑郁、焦慮、酒精或物質濫用、肥胖、高血壓、代謝綜合征、腸易激惹綜合征、癲癎、中風、睡眠障礙、變態(tài)反應、偏頭痛、經(jīng)前期綜合征、不孕、性功能障礙、先天性腎上腺增生、庫欣病、早產(chǎn)、應激誘導的胃潰瘍、炎性障礙、垂體胂瘤或異位垂體源胂瘤、慢性疲勞綜合征、纖維肌痛、內臟痛或多發(fā)性硬化。16.根據(jù)權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其用于治療焦慮或抑郁。17.根據(jù)權利要求1至9中任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其用于治療酒精或物質濫用。全文摘要本發(fā)明涉及式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽以及其作為促腎上腺皮質激素釋放因子1(CRF1)受體拮抗劑在治療精神病學和神經(jīng)內分泌障礙、神經(jīng)病學疾病和代謝綜合征中的用途。文檔編號A61P29/00GK101516887SQ200780035145公開日2009年8月26日申請日期2007年9月17日優(yōu)先權日2006年9月20日發(fā)明者C·H·哈姆杜遲,E·J·亨布雷,J·K·邁爾斯,J·L·托特,P·A·希普斯金德,Z·陳,高赤貴子申請人:伊萊利利公司