專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種治療實(shí)體腫瘤的伯舒替尼緩釋植入劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療實(shí)體腫瘤的伯舒替尼緩釋植入劑，屬于藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
。(二)
背景技術(shù)：
癌癥的研究雖已取得了較大進(jìn)展，但其死亡率仍居各種常見(jiàn)死因的前列。最新的數(shù)據(jù)表明，2006年我國(guó)有300萬(wàn)人死于癌癥。癌癥發(fā)病率逐年上升且呈年輕化趨勢(shì)，有資料顯示，在不到20年的時(shí)間里，我國(guó)癌癥發(fā)病率上升了69%，死亡率增長(zhǎng)了29.4%。據(jù)世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計(jì)，到2020年全球癌癥發(fā)病率將增加百分之五十，發(fā)病人數(shù)增到一千五百萬(wàn)。預(yù)計(jì)2020年我國(guó)每年將有400萬(wàn)人死于癌癥?；熥鳛榘┌Y常用的治療方法之一，然而數(shù)十年來(lái)的臨床經(jīng)驗(yàn)表明，常規(guī)化療對(duì)許多腫瘤特別是實(shí)體腫瘤的化療效果并沒(méi)明顯提高，關(guān)鍵的問(wèn)題在于常規(guī)化療不能在腫瘤所在部位獲得長(zhǎng)時(shí)間有效藥物濃度。低濃度長(zhǎng)期藥物刺激不僅不能有效治療腫瘤，還易導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生或促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)擴(kuò)散，的因此，探討一種有效的治療癌癥的方法或藥物已經(jīng)成為目前研究的熱點(diǎn)。最新的研究表明，伯舒替尼(Bosutinib，SKI-606，7-alkoxy-4-[(2，4-dichloro-5-methoxyphenyl)amino]-3-quinoliiiecarboiiitrile)X寸Src激酶活性具有明顯的抑制作用，對(duì)耐伊馬替尼的慢性髓細(xì)胞白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)、急性淋巴細(xì)胞白血病(acutelymphocyticleukemia,ALL)以及其他血液系統(tǒng)癌癥有較好的效果。然而該要單獨(dú)用于治療其它腫瘤的效果不清楚。雖然與其它抗癌藥聯(lián)合對(duì)某些腫瘤可能具有一定的作用，但通過(guò)常規(guī)途徑給藥所引起的全身毒副作用限制了其臨床應(yīng)用。(三)
發(fā)明內(nèi)容基于以上對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的考査，本發(fā)明對(duì)其它腫瘤進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)伯舒替尼對(duì)肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌及直腸癌等實(shí)體腫瘤具有較為明顯的作用效果。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)伯舒替尼局部緩釋對(duì)甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實(shí)體腫瘤也具有很好的治療作用。然而，常規(guī)方法難以發(fā)揮其抗瘤效果。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時(shí)，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種緩釋植入劑，用于治療實(shí)體腫瘤，不僅效果明顯，其全身毒性明顯減輕。本發(fā)明治療實(shí)體腫瘤的緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑含抗癌有效量的伯舒替尼、緩釋輔料和一定量的緩釋調(diào)節(jié)劑，其中各組成成分的重量比為(1)伯舒替尼0.1%-50%(2)緩釋輔料50%-99%(3)緩釋調(diào)節(jié)劑0-15%本發(fā)明的伯舒替尼在緩釋植入劑中的重量百分比以O(shè).1%到50%為優(yōu)選，以5%-30%為最優(yōu)選。伯舒替尼可為各種鹽，以磷酸鹽和鹽酸鹽(伯舒替尼)為優(yōu)選。本發(fā)明的緩釋輔料主要選自聚乳酸(PLA)、乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)(p(LAEG-E0P))、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)(p(DAPG-E0P))中的一種或其組合。其中聚乳酸(PLA)的分子量峰值為5000-15000、10000-20000、20000-35000或30000-50000;其中以5000-15000、15000-35000、35000-45000為優(yōu)選，以15000-35000為最優(yōu)選。乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000;其中以5000-15000、15000-35000、35000-45000為優(yōu)選，以15000-35000為最優(yōu)選。乙醇酸與羥基乙酸的重量百分比為90:10，80:20，70:30，60:40，50:50或40:60;其中以80:20，70:30，60:40，50:50為優(yōu)選，以60:40和50:50為最優(yōu)選。聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)中對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比為10:90，20:80，30:70，40:60，50:50或60:40;其中以80:20，70:30，60:40，50:50為優(yōu)選，以60:40和50:50為最優(yōu)選。聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)的分子量峰值為10000-15000、15000-25000、25000-35000或35000-60000，其中以10000-15000、15000-35000、35000-45000為優(yōu)選，以15000-35000為最優(yōu)選。為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明抗癌緩釋植入劑的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)緩釋輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。此類(lèi)起調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)稱(chēng)為緩釋調(diào)節(jié)劑，選自木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、甘露醇、山梨醇、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合。緩釋調(diào)節(jié)劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。緩釋輔料還可為流質(zhì)，如，但不限于芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理沖液、以及半固態(tài)物質(zhì)，如(但不限于)果凍、糊劑、軟膏等，上述緩釋輔料適用于含或不含添加劑的組合物緩釋植入劑的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進(jìn)展情況及治療反應(yīng)。但其原則是在能夠降低腫瘤細(xì)胞的修復(fù)能力，增加化療作用效果的同時(shí)并不明顯增加藥物的毒性反應(yīng)。有效劑量為10-1000毫克/患者，以100-500毫克/患者為理想，以150-200毫克/患者為最理想。本發(fā)明可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定?？芍瞥筛鞣N劑型，如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑、植入緩釋劑、緩釋注射劑等，其中植入劑主要為緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及模樣；可經(jīng)各種途徑給藥，如動(dòng)脈、皮下、肌肉、皮內(nèi)、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，如腫瘤所在部位、是否手術(shù)或轉(zhuǎn)移、腫瘤體積大小、腫瘤類(lèi)別、病人年齡、身體狀況、生育狀況及要求等。為于腫瘤所在部位獲得有效藥物濃度，可選擇性地動(dòng)脈灌注，腔內(nèi)灌注(intracavitary),腹腔(iiitr即erito廳l)或胸腔(intr即leural)及椎管內(nèi)(intraspiiial)給藥，也可臟器內(nèi)放置，如腸腔內(nèi)、膀胱內(nèi)、宮腔內(nèi)、陰道內(nèi)、胃內(nèi)及食道內(nèi)等。在各種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動(dòng)脈、瘤內(nèi)、瘤周注射為主，以瘤內(nèi)、瘤周或瘤腔放置緩慢釋放的形式為優(yōu)選，如可選用可種緩釋泵、緩釋膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋植入劑、緩釋注射劑?？捎萌我獾姆椒ㄖ苽洌?，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌緩釋植入劑也可包裝脂質(zhì)體中。組合物的有效成分可均勻地包裝于整個(gè)緩釋輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過(guò)直接擴(kuò)散或經(jīng)多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。緩釋植入劑中各組份及其在組合物中的重量百分含量?jī)?yōu)選下列之一(A)1%-5%的伯舒替尼和95%-99%的聚乳酸；(B)5%-10%的伯舒替尼和90%-95%的聚乳酸；(C)10%-15%的伯舒替尼和85%-90%的聚乳酸；(D)15%-25%的伯舒替尼和75%-85%的聚乳酸；(E)25%-40%的伯舒替尼和60%-75%的聚乳酸；(F)1%-10%的伯舒替尼和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(G)10%-20%的伯舒替尼和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(H)20%-30%的伯舒替尼和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(I)30%-40%的伯舒替尼和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5%-15%的伯舒替尼和85%-95%的聚苯丙生；(K)15%-35%的伯舒替尼和65%-85%的聚苯丙生；(L)5%的伯舒替尼和95%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(M)10%的伯舒替尼和90%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(N)20%的伯舒替尼和80%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(0)30%的伯舒替尼和70%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(P)5%的伯舒替尼和95%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(Q)10%的伯舒替尼和90%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(R)20%的伯舒替尼和80%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(S)30%的伯舒替尼和70%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)。緩釋植入劑中各組份及其在組合物中的重量百分含量進(jìn)一步優(yōu)選下列之一(A)1%-5%的伯舒替尼和85%-98%的聚乳酸和0.5%-15%的甘露醇；(B)5%-10%的伯舒替尼和90%-95%的聚乳酸和0.5%-10%的山梨醇；(C)10%-15%的伯舒替尼和85%-90%的聚乳酸和0.5%-10%的氯化鈉；(D)15%-25%的伯舒替尼和75%-85%的聚乳酸和0.25%-5%的甘露醇；(E)25%-40%的伯舒替尼和60%-75%的聚乳酸0.1%-8%的山梨醇；(F)1%-10%的伯舒替尼和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0.5%-15%的甘露醇；(G)10%-20%的伯舒替尼和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和O.5%-10%的山梨醇;(H)20%-30%的伯舒替尼和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和O.5%-10%的氯化鈉;(1)30%-40%的伯舒替尼和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和O.25%-5%的甘露醇;(J)5%-15%的伯舒替尼和85%-95%的聚苯丙生和1%-5%的甘露醇；(K)15%-35%的伯舒替尼和65%-85%的聚苯丙生和0.25%-7.5%的甘露醇；(L)5%的伯舒替尼和92%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2%的氯化鈉；(M)10%的伯舒替尼和85%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(N)20%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(0)30%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(P)5%的伯舒替尼和92%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2%的氯化鈉；(Q)10%的伯舒替尼和85%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(R)20%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(S)30%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇。緩釋植入劑用于治療實(shí)體腫瘤，包括腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、淋巴瘤、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛、的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。因此，本發(fā)明的應(yīng)用是用于制造治療上述腫瘤的上述各種藥物制劑，其中以針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及緩釋植入劑為優(yōu)選，以緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑為最優(yōu)選。該抗癌緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。由于本發(fā)明抗癌緩釋植入劑可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學(xué)治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強(qiáng)。因此在局部緩慢釋放的同時(shí)可與上述非手術(shù)療法合用，從而使其抗癌效果進(jìn)一步加強(qiáng)。當(dāng)與上述非手術(shù)療法合用時(shí)，本發(fā)明抗癌緩釋植入劑可與非手術(shù)療法同時(shí)應(yīng)用，也可在非手術(shù)療法實(shí)施前幾天內(nèi)應(yīng)用，其目的在于盡可能增強(qiáng)腫瘤的敏感性，從而為根治各種人體及動(dòng)物原發(fā)和轉(zhuǎn)移實(shí)體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應(yīng)用價(jià)值及顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。當(dāng)局部應(yīng)用時(shí)，該組合物可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實(shí)體腫瘤周?chē)蛄鲶w內(nèi)，也可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實(shí)體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內(nèi)。本發(fā)明的主要成份以生物可容性物質(zhì)為支持物，故不引起異物反應(yīng)。支持物體內(nèi)放置后可降解吸收，故不再手術(shù)取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長(zhǎng)局部藥物濃度，同時(shí)可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應(yīng)。對(duì)顱外實(shí)體腫瘤具有明顯的治療作用。本發(fā)明抗癌組合物可通過(guò)許多方案予以實(shí)施，其目的只是為了進(jìn)一步說(shuō)明，并非對(duì)本發(fā)明的實(shí)施加以任何限制。試驗(yàn)一、伯舒替尼對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。為驗(yàn)證伯舒替尼對(duì)其它腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，本試驗(yàn)將伯舒替尼(15ug/ml)加到體外培養(yǎng)24小時(shí)的各種腫瘤細(xì)胞中(表1)，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)并計(jì)算其對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率(％)。腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率(％)=((對(duì)照組細(xì)胞數(shù)-試驗(yàn)組細(xì)胞數(shù))/對(duì)照組細(xì)胞數(shù))X100%表1<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>試驗(yàn)一的結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，伯舒替尼對(duì)所試腫瘤的生長(zhǎng)均有明顯抑制作用(P〈0.05)，其中對(duì)。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為實(shí)體腫瘤的治療提供了新的選擇。含有伯舒替尼的緩釋植入劑可制成任意劑型或形狀，但以植入的緩慢釋放劑為優(yōu)選。本發(fā)明緩釋植入劑的制備方法如下1、將稱(chēng)重的緩釋輔料放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解均勻，有機(jī)溶劑的量不嚴(yán)格限定，以充分溶解為宜。2、加入稱(chēng)重之抗癌有效成份重新?lián)u勻?？拱┯行С煞菖c緩釋輔料的用量比例因具體要求而定。3、去除有機(jī)溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。4、將干燥后的固體組合物根據(jù)需要制成各種形狀。5、分裝后射線(xiàn)滅菌(射線(xiàn)劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。具體實(shí)施例方式實(shí)施例一、將稱(chēng)重(80mg)的緩釋輔料(分子量為15000-25000的聚乳酸(PLA))放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解混勻(以充分溶解為準(zhǔn))后，加入20毫克伯舒替尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得到緩釋植入劑含20%伯舒替尼。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為18-26天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-25天。實(shí)施例二按實(shí)施例一所述方法制成緩釋植入劑，但所含之抗癌有效成分為下列之一(A)1%的伯舒替尼和和99%的聚乳酸；(B)5%的伯舒替尼和和95%的聚乳酸；(C)10%的伯舒替尼和90%的聚乳酸；(D)15%的伯舒替尼和85%的聚乳酸；(E)20%的伯舒替尼和80%的聚乳酸。實(shí)施例三將稱(chēng)重(85mg)的緩釋輔料(分子量為15000-25000的PLGA，50:50)放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解混勻(以充分溶解為準(zhǔn))后，加入15mg伯舒替尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得到緩釋植入劑含15%伯舒替尼。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為22-28天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為23-28天。實(shí)施例四按實(shí)施例三所述方法制成緩釋植入劑，所不同的是所含之抗癌有效成分為下列之一(1)1%-10%的伯舒替尼和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(2)10%-20%的伯舒替尼和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(3)20%-30%的伯舒替尼和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(4)30%-40%的伯舒替尼和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(5)5%的伯舒替尼和95%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(6)10%的伯舒替尼和90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(7)20%的伯舒替尼和80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(8)30%的伯舒替尼和70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物。實(shí)施例五將稱(chēng)重(85mg)的緩釋輔料(分子量為25000-40000的PLGA，75:25)放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解混勻(以充分溶解為準(zhǔn))后，加入10mg伯舒替尼和5mg甘露醇，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得到緩釋植入劑含10%伯舒替尼。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為26-30天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為25-32天。實(shí)施例六按實(shí)施例五所述方法制成緩釋植入劑，所不同的是所含之抗癌有效成分為下列之一(1)1%-10%的伯舒替尼和90%-99%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0.5%-15%的甘露醇；(2)10%-20%的伯舒替尼和80%-90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0.5%-10%的山梨醇；(3)20%-30%的伯舒替尼和70%-80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0.5%-10%的氯化鈉；(4)30%-40%的伯舒替尼和60%-70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和0.25%-5%的甘露醇(5)5%的伯舒替尼和92%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和2%的氯化鈉；(6)10%的伯舒替尼和85%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(7)20%的伯舒替尼和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(8)30%的伯舒替尼和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇。實(shí)施例七將85mg聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)為50:50)放入容器中，加入IOO毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入15mg伯舒替尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得含重量百分比15%伯舒替尼緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為8-13天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為8-12天。實(shí)施例八按實(shí)施例七所述方法制成緩釋植入劑，但所不同的是所含抗癌有效成分為下列之一(1)1%-15%的伯舒替尼和85%-95%的聚苯丙生；(2)15%-35%的伯舒替尼和65%-85%的聚苯丙生；(3)5%的伯舒替尼和95%的聚苯丙生；(4)10%的伯舒替尼和90%的聚苯丙生；(5)15%的伯舒替尼和85%-95%的聚苯丙生；(6)20%的伯舒替尼和80%的聚苯丙生。實(shí)施例九將80mg聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)為30:70)和5mg氯化鈉放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入15mg伯舒替尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得含重量百分比15%伯舒替尼緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-14天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為12-18天。實(shí)施例十按實(shí)施例十所述方法制成緩釋植入劑，但所不同的是所含抗癌有效成分為下列之一(1)5%-15%的伯舒替尼和85%-95%的聚苯丙生和1%-5%的甘露醇；或(2)15%-35%的伯舒替尼和65%-85%的聚苯丙生和0.25%-7.5%的甘露醇。實(shí)施例十一將85mg緩釋輔料(分子量為15000-30000的聚乳酸(PLA))和10mg甘露醇放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解混勻(以充分溶解為準(zhǔn))后，加入5毫克伯舒替尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線(xiàn)滅菌，得到緩釋植入劑含5%伯舒替尼。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為18-26天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-24天。實(shí)施例十二按實(shí)施例十一所述方法制成緩釋植入劑，所用緩釋輔料選自下列之一或其組合(A)1%的伯舒替尼和和95%的聚乳酸和4%的甘露醇；(B)5%的伯舒替尼和和93%的聚乳酸和2%的甘露醇；(C)10%的伯舒替尼和85%的聚乳酸和5%的甘露醇；(D)15%的伯舒替尼和82%的聚乳酸和3%的氯化鈉；(E)20%的伯舒替尼和78%的聚乳酸和2%的氯化鈉。實(shí)施例十三按實(shí)施例l到十一所述方法制成緩釋植入劑，所用緩釋輔料選自下列之一或其組合a)分子量為5000-15000、10000-20000、20000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)b)分子量為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA);c)聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP):癸二酸(SA)共聚物)，對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比為10:90、20:80、30:70、40:60、50:50或60:40在上述緩釋的基礎(chǔ)上，本發(fā)明進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)體內(nèi)植入伯舒替尼對(duì)腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、直腸癌、卵巢癌、皮膚癌、淋巴瘤、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它實(shí)體腫瘤也具有很好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時(shí)，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。以下體內(nèi)試驗(yàn)用于說(shuō)明而非對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例十四將70、80、90和95mg分子量峰值為10000-25000的p(LAEG-E0P)分別放入甲、乙、丙、丁四個(gè)容器中，然后每個(gè)中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，分別向四個(gè)容器中加入30mg、20mg、10mg和5mg伯舒替尼，重新?lián)u勻后干燥法制備含30%、20%、10%和5%伯舒替尼的緩釋植入劑。該緩釋劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為26-30天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為25-30天左右。實(shí)施例十五加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例十四相同，但所不同的是P(LAEG-EOP)的分子量峰值為25000-45000，所含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)1%-5%伯舒替尼；(2)5%-10%伯舒替尼；(3)10%-20%伯舒替尼；(4)20%-40%伯舒替尼；(5)5。/。的伯舒替尼和92。/。的p(LAEG-E0P)和2%的氯化鈉；(6)10。/。的伯舒替尼和85。/。的p(LAEG-EOP)和5%的甘露醇；(7)20%的伯舒替尼和75%的？(LAEG-EOP)和5%的甘露醇；(8)30%的伯舒替尼和75%的？(LAEG-EOP)和5%的甘露醇。實(shí)施例十六將70、80、90和95mg分子量峰值為10000-25000的p(DAPG-EOP)分別放入甲、乙、丙、丁四個(gè)容器中，然后每個(gè)中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，分別向四個(gè)容器中加入30mg、20mg、10mg和5mg伯舒替尼，重新?lián)u勻后干燥法制備含30%、20%、10%和5%伯舒替尼的緩釋植入劑。該緩釋劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為18-22天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為22-28天左右。實(shí)施例十七加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例十六相同，但所不同的是P(DAPG-EOP)的分子量峰值為25000-45000，所含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)1%-5%伯舒替尼；(2)5%-10%伯舒替尼；(3)10%-20%伯舒替尼；(4)20%-40%伯舒替尼；(5)5。/。的伯舒替尼和92。/。的p(DAPG-EOP)和2%的氯化鈉；(6)10。/。的伯舒替尼和85。/。的p(DAPG-EOP)和5%的甘露醇；(7)20%的伯舒替尼和75%的？(DAPG-EOP)和5%的甘露醇；(8)30。/。的伯舒替尼和75。/。的p(DAPG-EOP)和5%的甘露醇。實(shí)施例十八、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼對(duì)實(shí)體腫瘤的抑制作用方法和步驟腫瘤細(xì)胞接種于小鼠的右側(cè)腋窩皮下，當(dāng)腫瘤直徑生長(zhǎng)至0.8-1.5cm左右時(shí)(接種后第8天)，將動(dòng)物隨機(jī)分為5組，每組5只。即生理鹽水組(對(duì)照組)、伯舒替尼緩釋植入劑組，用實(shí)施例四所制的緩釋植入劑(5%、10%、20%，簡(jiǎn)稱(chēng)5%組、10%組，和20%組)和伯舒替尼腹腔注射組(i.p.組)，腔注射組劑量同5%緩釋植入劑組。用70%酒精消毒腫瘤表面皮膚，選擇距腫瘤下緣lcm處，剪開(kāi)lmm長(zhǎng)切口，用穿刺針將伯舒替尼植入劑植入腫瘤組織中，不含藥高分子聚合物、伯舒替尼植入劑5%、伯舒替尼植入劑10%、伯舒替尼植入劑20%?？p合切口防止植入劑漏出。每3天用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤大小，植入劑包埋后15天處死動(dòng)物，稱(chēng)體重后完整剝離腫瘤并稱(chēng)瘤重。計(jì)算腫瘤抑制率％，DAS.verl.O藥理學(xué)軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。腫瘤抑制率=(i-給藥組平均瘤重/生理鹽水組平均瘤重)xioo%實(shí)施例十九、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼汀緩釋植入劑對(duì)小鼠肺癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠肺癌的抑瘤作用。所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為15000-30000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50:50)，源自實(shí)施例四。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果表明，伯舒替尼植入劑較腹腔注射效果明顯增強(qiáng)，不同劑量的伯舒替尼植入劑能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。實(shí)施例二十腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠乳腺癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠乳腺癌的抑瘤作用，所用的植入劑來(lái)自實(shí)施例二。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3表3<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表明1%、10%和20%伯舒替尼植入劑的腫瘤抑制率分別為42%、58%、70%，與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.OOl。說(shuō)明伯舒替尼植入劑的抑瘤率明顯超過(guò)伯舒替尼腹腔注射組組，兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性好。實(shí)施例二十一、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠卵巢癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠卵巢癌的抑瘤作用，所用的植入劑為5%、10%和20%聚苯丙生(對(duì)羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸(SA)的重量百分比為50:50)，來(lái)自實(shí)施例八。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>證明不同劑量的伯舒替尼植入劑植入小鼠卵巢癌中能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。伯舒替尼植入劑腫瘤抑制率分別為42%、56%、75%，與伯舒替尼局部注射組比較，低劑量組P值等于0.001，中、高劑量組P值均小于0.001。實(shí)施例二十二腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠食道癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠食道癌的抑瘤作用，所用的植入劑選自實(shí)施例六。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>證明不同劑量的伯舒替尼植入劑植入裸鼠模型人食管癌(9706)實(shí)體腫瘤中，均能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。伯舒替尼植入劑腫瘤抑制率分別為46%、56%、76%，與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.001。實(shí)施例二十三、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠胰腺癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠胰腺癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50:50)。伯舒替尼在緩釋植入劑中的含量為5%、10%和30%，來(lái)自實(shí)施例六。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>結(jié)果證明不同劑量的伯舒替尼植入劑植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實(shí)體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.001。實(shí)施例二十四、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠直腸癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠直腸癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50:50)。伯舒替尼在緩釋植入劑中的含量為7.5%、15%和25%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>不同劑量的伯舒替尼植入劑，能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。伯舒替尼植入劑腫瘤抑制率分別為40%、78%、82%，與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.001。實(shí)施例二十五、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠前列腺癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠前列腺癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為P(LAEG-EOP)(分子量為10000-25000)。伯舒替尼在緩釋植入劑中的含量為5%、10%和20%(來(lái)自實(shí)施例十四)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>結(jié)果表明，不同劑量的伯舒替尼植入劑植入裸鼠模型人前列腺癌實(shí)體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。伯舒替尼植入劑腫瘤抑制率分別為36%、48%、76%，與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.001。實(shí)施例二十六、腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠肝癌的抑瘤作用按照實(shí)施例十八所述方法和步驟檢驗(yàn)伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)小鼠肝癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為P(DAPG-EOP)(分子量為10000-25000)。伯舒替尼在緩釋植入劑中的含量為5%、10%和20%(來(lái)自實(shí)施例十六)。伯舒替尼在緩釋植入劑中的含量為7.5%、15%和25%.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表9。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>證明不同劑量的伯舒替尼植入劑，能明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系。伯舒替尼植入劑腫瘤抑制率分別為36%、54%、76%，與伯舒替尼局部注射組比較，P值均小于O.001。另外，腫瘤內(nèi)植入伯舒替尼緩釋植入劑對(duì)胃癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、淋巴瘤、腦腫瘤、子宮頸癌、腎癌等其它實(shí)體腫瘤也具有很好的治療作用，其作用明顯超過(guò)伯舒替尼腹腔注射組和局部注射組。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的又一主要技術(shù)特征，為實(shí)體腫瘤的治療提供了又一新的選擇。權(quán)利要求1.一種治療實(shí)體腫瘤的伯舒替尼緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑含抗癌有效量的伯舒替尼、緩釋輔料和一定量的緩釋調(diào)節(jié)劑，其中，伯舒替尼在緩釋植入劑中的重量百分比為0.1％-50％；緩釋輔料自聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、聚苯丙生、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)中的一種或其組合；緩釋調(diào)節(jié)劑選自木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、甘露醇、山梨醇、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合，其在緩釋植入劑中的重量百分比為0-15％。2.據(jù)權(quán)利要求所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中聚乳酸的分子量峰值為5000-15000、10000-20000、20000-35000或30000-50000。3.據(jù)權(quán)利要求l所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中乙醇酸和羥基乙酸的共聚物的分子量峰值為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000。4.據(jù)權(quán)利要求l所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中乙醇酸與羥基乙酸的重量百分比為90:10，80:20，70:30，60:40，50:50或40:60。5.據(jù)權(quán)利要求l所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中聚苯丙生中對(duì)羧苯基丙烷與癸二酸的重量百分比為10:90，20:80，30:70，40:60，50:50或60:40。6.據(jù)權(quán)利要求所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)的分子量峰值為10000-15000、15000-25000、25000-35000或35000-60000。7.據(jù)權(quán)利要求l所述之抗癌緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)的共聚物的分子量峰值為8000-20000、20000-30000、30000-400008.根據(jù)權(quán)利要求l所述之緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑的抗癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A)1%的伯舒替尼和和99%的聚乳酸；(B)5%的伯舒替尼和和95%的聚乳酸；(C)10%的伯舒替尼和90%的聚乳酸；(D)15%的伯舒替尼和85%的聚乳酸；(E)20%的伯舒替尼和80%的聚乳酸；(F)5%的伯舒替尼和95%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(G)10%的伯舒替尼和90%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(H)20%的伯舒替尼和80%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(I)30%的伯舒替尼和70%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5%的伯舒替尼和95%的聚苯丙生；(K)15%的伯舒替尼和85%的聚苯丙生；(L)5%的伯舒替尼和95%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(M)10%的伯舒替尼和90%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(N)20%的伯舒替尼和80%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(0)30%的伯舒替尼和70%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)；(P)5%的伯舒替尼和95%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(Q)10%的伯舒替尼和90%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(R)20%的伯舒替尼和80%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)；(S)30%的伯舒替尼和70%的聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)。9.根據(jù)權(quán)利要求l所述之緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑的抗癌有效成分中各組份及其在植入劑中的重量百分含量為下列之一(A)1%的伯舒替尼和和95%的聚乳酸和4%的甘露醇；(B)5%的伯舒替尼和和93%的聚乳酸和2%的甘露醇；(C)10%的伯舒替尼和85%的聚乳酸和5%的甘露醇；(D)15%的伯舒替尼和82%的聚乳酸和3%的氯化鈉；(E)20%的伯舒替尼和78%的聚乳酸和2%的氯化鈉；(F)5%的伯舒替尼和92%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和2%的氯化鈉；(G)10%的伯舒替尼和85%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(H)20%的伯舒替尼和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(I)30%的伯舒替尼和75%的乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和5%的甘露醇；(J)5%的伯舒替尼和92.5%的聚苯丙生和2.5%的甘露醇；(K)15%的伯舒替尼和75%的聚苯丙生和10%的甘露醇；(L)5%的伯舒替尼和92%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2%的氯化鈉；(M)10%的伯舒替尼和85%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(N)20%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(0)30%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(P)5%的伯舒替尼和92%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和2%的氯化鈉；(Q)10%的伯舒替尼和85%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(R)20%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇；(S)30%的伯舒替尼和75%的聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)和5%的甘露醇。10.根據(jù)權(quán)利要求l所述之緩釋植入劑，其特征在于所述緩釋植入劑用于制備治療腦腫瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、淋巴瘤、頭頸部腫瘤和起源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物制劑。全文摘要一種治療實(shí)體腫瘤的伯舒替尼緩釋植入劑，其特征在于該緩釋植入劑含抗癌有效量的伯舒替尼、緩釋輔料和一定量的緩釋調(diào)節(jié)劑。實(shí)體腫瘤包括肺癌、食管癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)直腸癌。緩釋輔料主要為乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、聚苯丙生、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯)、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)中的一種或其組合，在其降解吸收的過(guò)程中能將伯舒替尼緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應(yīng)的同時(shí)還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該抗緩釋植入劑不僅能夠降低伯舒替尼的全身毒性反應(yīng)，同時(shí)還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強(qiáng)化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法的治療效果。文檔編號(hào)A61K9/00GK101224185SQ200710202968公開(kāi)日2008年7月23日申請(qǐng)日期2007年12月11日優(yōu)先權(quán)日2007年12月11日發(fā)明者劉恩祥,孔慶忠申請(qǐng)人:山東藍(lán)金生物工程有限公司;孔慶忠