專利名稱：包含腺苷受體激動劑或拮抗劑的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于癌癥的領(lǐng)域，與癌癥的治療或想要消除癌癥治療中的 副作用的治療有關(guān)。
現(xiàn)有技術(shù)
下面列出 一些與描述本發(fā)明工藝狀況相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)。通過下列所 列出的文獻的黑體字部分可以得到這里所列舉的參考文獻。
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本發(fā)明的背景骨髓中毒是一種最常見的、嚴重的化療并發(fā)癥，是限制化療藥物給 藥劑量的因素之一。它導(dǎo)致的病人生命危險的發(fā)病率和實際的死亡率 高于其它的化療副作用，并且還會導(dǎo)致住院天數(shù)的增加。此外，藥物 誘導(dǎo)的骨髓抑制限制了大量的、對患有惡性腫瘤病人可能更有效的化療劑量的給藥。解決這種不利后果的幾種方法包括使用鋰、前列腺E、 干擾素、乳鐵傳遞蛋白和粒細胞-巨噬細胞菌群刺激因子生長因子 (GM-CSF)和粒細胞-菌落刺激因子生長因子(G-CSF)。到目前為止，生 長因子例如G-CSF的使用是治療患有噬中性白細胞細胞減少癥病人的 一種權(quán)威的方法。它可以刺激造血原始粒子的增殖和和分化，還能控 制噬中性粒細胞和巨噬細胞的功能活性。但是，G-CSF的治療很昂貴， 并且，由于它是一種重組細胞蛋白，所以它有伴隨的副作用。腺苷是一種內(nèi)源性嘌呤核苷，普遍存在于哺乳動物細胞中。腺苷存 在于血漿和其它細胞外液體介質(zhì)中，它的多數(shù)生理學(xué)效應(yīng)通過細胞表 面的受體而發(fā)揮出來，是一種重要的調(diào)節(jié)蛋白。它由代謝活躍或受應(yīng) 力的細胞釋放進入細胞外環(huán)境。已知它是通過跟與Al， A2和A3膜受 體有關(guān)的G-蛋白結(jié)合來起效的(1—2)。腺苷與其受體的相互作用引發(fā)了 信號滲出途徑，主要是腺苷酸環(huán)化酶受動器系統(tǒng)，它利用cAMP作為第 二信使。雖然與Gi蛋白結(jié)合的Al和A3受體抑制了腺苷酸環(huán)化酶并導(dǎo) 致細胞內(nèi)cAMP的水平下降，但是與Gs蛋白結(jié)合的A2受體可以激活腺 苷酸環(huán)化酶，從而增加cAMP的水平(3)。由于幾乎在所有的細胞中都可以發(fā)現(xiàn)腺苷的特定表面受體，所以幾 乎所有的機體器官系統(tǒng)在某種程度上都要受其局部釋放的調(diào)節(jié)。這包 括心臟電生理學(xué)性質(zhì)的調(diào)節(jié)，神經(jīng)傳遞素釋放的鎮(zhèn)靜和抑制以及高血 壓蛋白原酶釋放的調(diào)節(jié)和腎中血管緊張的調(diào)節(jié)(4-"。腺苷對免疫系統(tǒng)發(fā) 揮著各種作用，包括通過抑制細胞因子釋放而發(fā)揮的抗炎活性，抑制血小板凝聚的作用，誘導(dǎo)促紅細胞生成素的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)淋巴細胞功能 (8—")的作用。此外，發(fā)現(xiàn)腺苷在一些中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的調(diào)節(jié)、傷口 痊愈、利尿和控制疼痛中也有一定的作用。還證明腺苷能誘導(dǎo)正常細
胞的廣泛增殖"1—M)。這種細胞生長的調(diào)節(jié)作用可能是間接的通過上述 的腺苷酸環(huán)化酶受動器系統(tǒng)來實現(xiàn)的。在最近的研究中發(fā)現(xiàn)腺苷作為一種化學(xué)保護劑，其活性可能與其能 刺激骨髓細胞的增殖有關(guān)。此外，還發(fā)現(xiàn)腺苷對腫瘤細胞有抑制作用，這種作用顯然是通過G0/G1細胞循環(huán)抑制和減少端粒信號(telomeric s igna 1)來實現(xiàn)的(17—18)。這種雙重作用使腺苷變成了癌癥治療的很有吸 引力的設(shè)想。本發(fā)明的概述根據(jù)本發(fā)明可以發(fā)現(xiàn)腺苷A3受體激動劑(A3RAg)有一種雙重功 效， 一方面它們可以抑制惡性細胞的增殖，另一方面它們可以抵消化 療的毒副作用。A3RAg化合物可以明確地抑制胂瘤細胞的增殖和生長， 與抗腫瘤細胞毒素的藥物協(xié)同作用可以減少腫瘤負荷，可以誘導(dǎo)骨髓 細胞和白細胞細胞的增殖和分化，并且能抵消其它藥物尤其是化療藥 物的毒副作用。而且，根據(jù)本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)A3RAg可以通過一 系列的給藥 形式包括非胃腸道給藥，特別是口服給藥的形式來發(fā)揮這些活性。依 據(jù)本發(fā)明進一步發(fā)現(xiàn)一些A3RAg活性可以通過其它的腺苷Al或A2受 體的激動劑和拮抗劑來進行模擬腺苷Al受體激動劑(AlRAg)與A3RAg 共同承擔(dān)誘導(dǎo)G-CSF分泌的活性；腺苷A2受體激動劑(A2RAg)與A3RAg 共同承擔(dān)抑制惡性細胞增殖的活性；以及腺苷A2受體拮抗劑(A2RAn) 與A3RAg共同承擔(dān)抵消藥物毒副作用的活性，例如治療或預(yù)防白細胞 減少癥。本發(fā)明在其最廣泛的意義上涉及了活性成分得到下列治療學(xué)/生 物學(xué)效果之一的應(yīng)用誘導(dǎo)機體內(nèi)G-CSF的產(chǎn)生或分泌；預(yù)防或治療 藥物的毒副作用或預(yù)防或治療白細胞減少癥，尤其是藥物誘發(fā)的白細 胞減少癥；以及抑制異常細胞的生長和增殖?；钚猿煞挚梢允茿3RAg 或可以產(chǎn)生這些治療效果的腺苷受體系統(tǒng)激動劑或拮抗劑，該效果是 指通過使用A3RAg而可以得到的的效果。本發(fā)明提供了一些具體的實施方案。第一個實施方案被稱為
"G-CSF-誘導(dǎo)實施方案，，，包括活性成分的應(yīng)用，所說的活性成分可 以是能夠在受治療者機體內(nèi)導(dǎo)致G-CSF分泌的A犯Ag或AlRag。已知 G-CSF可以刺激造血原細胞的增殖和分化，并且能夠控制噬中性粒細 胞和巨噬細胞的功能活性。因此，G-CSF誘導(dǎo)劑例如上面提及的這些 誘導(dǎo)劑，可能具有#>高的治療學(xué)價值，例如，在抵消(即預(yù)防、減少或 改善)骨髓中毒性方面。以這個實施方案為依據(jù)的是一種誘導(dǎo)受治療者機體內(nèi)G-CSF分 泌的方法，包括給予受治療者一定數(shù)量的活性成分，該活性成分包括 A3RAg、 AlRAg以及A3RAg與AlRAg的聯(lián)合構(gòu)成的組。與這個實施方案相一致的還有另外一種治療處理的方法，該方法 包括給予受治療者所需有效量的所說的活性成分以達到治療作用，所 說的治療作用包括誘G-CSF的產(chǎn)生或分泌。通過這一實施方案進一步 提供了一種用所說的活性成分制造一種可誘導(dǎo)G-CSF分泌的藥物組合 物的應(yīng)用。通過這一實施方案也提供了一種用于在機體內(nèi)誘導(dǎo)G-CSF 產(chǎn)生或分泌的藥物組合物，該組合物包含可藥用的負栽的有效量的所 述活性成分。根據(jù)本發(fā)明的另外一個實施方案，在這里被稱為"白細胞減少癥 -預(yù)防實施方案"或更明確的稱為"噬中性白細胞細胞減少癥-預(yù)防實 施方案，，，活性成分被用于由骨髄中毒導(dǎo)致的白細胞減少癥的預(yù)防或 治療，所說的活性成分可以是A3RAg，或A2Ran。根據(jù)這一實施方案，可以提供一種誘導(dǎo)受治療者骨髓或白細胞細 胞增殖或分化的方法，該方法包括給予受治療者有效量的活性成分， 該活性成分選自由A3RAg、 腺苷A2Ran以及A3RAg或A2Ran的聯(lián)用組 成的組。通過這一實施方案還提供了一種預(yù)防或治療白細胞減少癥的 方法，方法包括給予受治療者所需有效量的所說的活性成分。這一實施 方案進一步提供了 一種所說的活性成分用來制造一種誘導(dǎo)骨髓或白細 胞細胞增殖或分化的藥物組合物的應(yīng)用。這一實施方案還進一步提供 了一種所說的活性成分用來制造一種預(yù)防或治療白細胞減少癥的藥物 組合物的應(yīng)用。該藥物組合物可以;故用于預(yù)防或治療白細胞減少癥。
根據(jù)被稱為"毒性預(yù)防實施方案，，的具體實施方案，上述的活性成分(即A3RAg或A2Ran，以及其結(jié)合三者其中之一)被用于抵消藥物例 如化療藥物或ne邁oleptic藥物的毒副作用。后一實施方案提供了一種用于預(yù)防或治療藥物毒副作用的方法， 該方法包括給予受治療者所需有效量的活性成分，該活性成分選自由 A3RAg， A2RAn和A3RAg與A2Ran的組合組成的組。這一實施方案也提 供了 一種所說的活性成分用來制造用于預(yù)防或治療藥物誘導(dǎo)毒性的藥 物組合物的應(yīng)用。這一實施方案還進一步提供了 一種用于預(yù)防或治療 藥物毒副作用的藥物組合物，該組合物包括有效量的所說活性成分和 可藥用載體.通常來說為了抵消藥物誘導(dǎo)的白細胞減少癥或藥物誘導(dǎo)的大多數(shù) 毒副作用，人們有時希望能制備一種具有這樣的毒副作用藥物與所說 的活性成分二者一起給藥。因此本發(fā)明也提供了一種藥物組合物，該 組合物中包含能對受治療的患者引起所說的毒副作用的藥物和所說的 活性成分；本發(fā)明還提供了一種所說的活性成分用來制造一種這樣的 藥物組合物的應(yīng)用。包括在所說的組合物中的所說的活性成分是預(yù)防 或治療該毒副作用的有效量。根據(jù)被稱為"增殖-抑制實施方案"的另一實施方案，活性成分可 以被用于選擇性的抑制異常細胞的生長，例如胂瘤細胞的生長，所說 的活性成分可以是A3RAg， A2RAg，或二者的組合。依據(jù)這一實施方案可以提供一種抑制受治療者體內(nèi)異常細胞生長 的方法，該方法包括給予受治療者治療量的活性成分，該活性成分選 自由A3RAg， A2Rag以及A3RAg和A2Rag的組合組成的組。這一實施 方案也提供了 一種所說的活性成分用于制造一種抑制異常細胞生長的 藥物組合物的應(yīng)用。這一實施方案還進一步提供了一種用于抑制異常 細胞生長的藥物組合物，該組合物包含所說的活性成分和可藥用載體。在本發(fā)明的實施方案中，給藥的活性成分想要達到雙重的治療效 果抑制異常細胞的生長和減少能引起這種毒副作用的藥物的毒副作 用。 本發(fā)明優(yōu)選的活性成分為A3RAg。本發(fā)明優(yōu)選的活性成分給藥途徑 為口服給藥。但是這種優(yōu)選并沒有將其它活性成分或活性成分的給藥 途徑排除在外。活性成分的給藥劑量，尤其當(dāng)其中的活性成分為A3RAg時，優(yōu)選地 少于100ng/kg體重，典型的是少于50ng和更理想的是l-l(Vg/kg體重。本發(fā)明的詳細描述根據(jù)本發(fā)明，某種活性成分，尤其是腺苷受體激動劑和拮抗劑，能 夠提供新的治療用途。在一個實施方案，G-CSF-誘導(dǎo)實施方案中，一 些這樣的活性成分被用于間接的從細胞中產(chǎn)生和分泌G-CSF。在另外 一個實施方案，毒性預(yù)防實施方案中， 一些這樣的活性成分被用于抵 消藥物如化療或nemoleptic藥物的毒副作用。在進一步的實施方案， 白細胞減少癥-預(yù)防實施方案中， 一些這樣的活性成分被用于抵消白細 胞減少癥，尤其是藥物誘發(fā)的白細胞減少癥。還是依據(jù)本發(fā)明的實施 方案，增殖抑制實施方案， 一些這樣的活性成分被用于選擇性地抑制 異常細胞的生長。在這里所使用的"白細胞減少癥，，的定義涉及循環(huán)的白細胞數(shù)量的 減少。雖然白細胞減少癥的特征是血液中的噬中性粒細胞數(shù)目減少(謹 中性白細胞細胞減少癥)，但是有時會可能也發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)淋巴細胞、單核 細胞、噬酸性細胞或噬堿性細胞的數(shù)目減少。由噬中性粒細胞的產(chǎn)生減少或過量脾分離產(chǎn)生的白細胞減少癥可 能是由遺傳性或先天性疾病引起的。然而白細胞減少癥主要是在用藥 物進4亍治療后被觀察到的，所用的藥物如細胞減少(cytoreductive) 的癌癥藥物、抗甲狀腺的藥物、吩噻噪、抗驚厥藥、青霉素、磺胺和 氯霉素。一些抗腫瘤藥造成的白細胞減少癥是一種可以預(yù)測的副作用。在下文中，由于藥物造成的白細胞數(shù)量或噬中性白細胞數(shù)量的減少 在此將被定義為"藥物誘導(dǎo)的白細胞減少癥"或"藥物誘導(dǎo)的中性白 細胞減少癥"。而且不論何時提及細胞減少癥，都應(yīng)明白特別涉及的是 "噬中性白細胞細胞減少癥"。此外，"白細胞減少癥的預(yù)防和治療"的定義應(yīng)當(dāng)理解為白細胞數(shù) 量減少的過程被減少，完全預(yù)防或如果此類減少已經(jīng)發(fā)生時， 一種增 加白細胞數(shù)量的操作，其中所說的白細胞數(shù)量減少否則可能發(fā)生。白 細胞減少癥可以通過一 系列的副作用而表現(xiàn)出來，例如被一些重要的 感染物和其它感染物感染的可能性增加。"白細胞減少癥的預(yù)防或治療"的定義也可以理解為改進代表白細胞減少癥結(jié)果的這樣的參數(shù)的 意思。此處藥學(xué)上或治療學(xué)上的"有效量"是由一些可能是現(xiàn)有技術(shù)中已 知的因素來決定的。該量必須能有效的達到想要的治療效果，取決于 治療的類型和方法。對于熟練的技術(shù)人員而言，該量顯然是能有效的 改善生存率、使病人快速痊愈、使癥狀得到改善或消除的數(shù)量，或者 是本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員選擇的其它合適的指標(biāo)。例如，當(dāng)所說的活性成分被給藥用于誘導(dǎo)G-CSF的產(chǎn)生時，活性成分的有效量可以是能 從外周血液單核細胞、內(nèi)皮細胞或成纖維細胞中產(chǎn)生和分泌G-CSF的 量，G-CSF在這些細胞中被制造，例如，刺激成熟的粒細胞原始粒子 轉(zhuǎn)換成成熟的噬中性粒細胞。在將活性成分給藥用于抵消藥物誘導(dǎo)的 白細胞減少癥的情況中，活性成分的有效量可以是使個體免于遭受由 藥物誘導(dǎo)的白細胞數(shù)量減少，尤其是噬中性粒細胞數(shù)量減少的情況的 量；可以是使已經(jīng)減少的該類細胞增加，如恢復(fù)到正常水平或有時高 于正常水平的活性成分的量；等等。在將活性成分給藥用于減少藥物 的毒副作用的情況中，活性成分的量可以是例如有效的恢復(fù)由于用藥 而導(dǎo)致的體重減少的量。在將活性成分給藥用于抑制異常細胞生長的 情況中，正如下文中詳細描述的那樣，有效量可以是抑制受治療者體 內(nèi)該類細胞增殖以及甚至消除胂瘤的量。在將活性成分給藥用于增強 抗癌的化療藥物的作用的情況中，有效量可以是增強化療處理的癌癥 特效藥毒性的量；或者是達到想要達到的效果但減少了所需減少化療 藥物或藥物組合物的量的量，即減少了腫瘤負載；等等。 一個有效量 的實施方案是每天A3RAg的給藥量少于lOO^ig/kg體重，典型的為少
于50pg/kg體重和優(yōu)選的少于10pg/kg體重，例如約3-6jig/kg體重。 盡管有時可以將這樣的日劑量分成幾個劑量在一天內(nèi)給藥或?qū)滋斓?劑量合成一個單劑量每隔幾天給病人用一次藥，尤其實緩釋制劑的情 況，但是這樣的A3RAg量仍是有代表性的每日給藥單劑量。根據(jù)本發(fā)明，活性成分優(yōu)選A3RAg。 A3RAg是一種非選擇性激動劑 (any agonist)，它與A3受體結(jié)合，然后將A3受體激活就得到本發(fā)明 的一種治療效果。應(yīng)當(dāng)注意的是有時A3受體也與其它的受體如Al和 A2受體相互作用。但是，依據(jù)本發(fā)明所使用的A3RAg通過A3受體來 發(fā)揮主要作用(即可以通過與其它腺苷受體相互作用而發(fā)揮一些次要 作用)。通過實施方案，以本發(fā)明為依據(jù)的活性成分是一種核苷衍生物。術(shù) 語"核苷"意指包含糖，優(yōu)選核糖或脫氧核糖，或嘌呤或嘧咬堿或糖與 嘌呤或嘧啶堿優(yōu)選經(jīng)由N-糖基鍵連接的結(jié)合物的任何化合物。"核普 衍生物"的定義在這里表示如上文所定義的天然的核苷，合成的核普 或通過對其進行基團的插入、刪除或環(huán)外的和內(nèi)環(huán)的化學(xué)修飾而得到 的核苷或通過構(gòu)象修飾而得到的有想要的生物學(xué)作用的衍生物。本發(fā)明優(yōu)選的活性成分的實施方案為A3RAg。以本發(fā)明的實施方案為依據(jù)，活性成分是如下通式(I)所示的核苷 衍生物其中！^是C「d。烷基，d-d。羥基烷基，d-d。羧烷基或C廣d。氰基烷 基或如下通式(II)所示的基團
其中:- Y是氧、硫或碳原子；—X丄是H、 C廣d。烷基、RTNC(-0)-或H0RC-，其中r和Rb可能是相 同或不同的基團，選自氫、C「d。烷基、氨基、d-d。卣代烷基、C「C10 氨基烷基、d-d。BOC-氨基烷基、和C3-d。環(huán)烷基或相互連接形成一個 包含2至5個碳原子的雜環(huán)，和r選自d-d。烷基、氨基、C廣d。卣代 烷基、d-d。氨基烷基、d-d。B0C-氨基烷基以及C3-d。環(huán)烷基； —Xs是H、羥基、d-d。烷基氨基、d-d。烷基酰氨基或d-d。羥基烷基；-乂3和1分別是氫、羥基、氨基、酰氨基、疊氮基、囟素、烷基、烷 氧基、羧基、次氮基、硝基、三氟基、芳基、烷芳基、巰基、硫代酸酯、硫醚、-0C0Ph、 -0C(-S)0Ph或X3和1都是與> C-S相連形成 5元環(huán)的氧、或Xs和X3形成分子式如(III)所示的環(huán)其中『和R"分別是d-d。烷基；-R2選自氫、鹵素、d-d。烷基醚、氨基、酰肼基、d-d。烷基氨基、 烷氧基、d-d。硫代烷氧基、硫代吡啶基、C廣d。鏈烯基；C廣d。炔基、 巰基以及C廣d。硫代烷基；以及R3是-NR^基，R4是氫或選自烷基、取代烷基或芳基-NH-C (Z)-， Z是0、 S、或NR、 Ra的含義同上，
-和R5，在R4是氬的情況下，Rs選自取代基在一個或多個位置未取代的 或取代的順式-和反式-l-苯乙基、苯甲基、苯乙基或?；桨被?說的取代基選自d-d。烷基、氨基、卣素、d-d。面代烷基、硝基、 羥基、乙酰氨基、d-d。烷氧基以及磺酸或它們的鹽；或R4是苯并二隨 烷甲基、呋喃甲基、L-丙基丙氨酰氨基苯甲基、p-丙氨酰氨基-苯曱 基、T-BOC-e-丙氨酰氨基-苯甲基、苯基氨基、氨基甲酰基、苯氧基 或C,-d。環(huán)烷基；或R5是如下分子式的基團<formula>formula see original document page 15</formula>或上面所定義的化合物的合適的鹽，如三乙胺鹽；或 當(dāng)^選自烷基、取代的烷基、或芳基-NH-C(Z)-的基團時，Rs就是選 自取代的或未取代的雜芳基-NRa-C(Z)-、雜芳基-C(Z)-、烷芳基 -Nr-C(Z)-、烷芳基-C(Z)-、芳基-NR-C(Z)-和芳基-C(Z)-的基團； 其中Z的定義同上。根據(jù)本發(fā)明的這一實施方案，活性成分優(yōu)選如通式(IV)所示的核苷衍 生物<formula>formula see original document page 15</formula>其中X,、 R2和R4的定義同上。
依據(jù)本發(fā)明的這一實施方案優(yōu)選的活性組分一般而言為N6-苯甲基 腺苷-5'-糖醛酰胺及其有A3-選擇性腺苷受體激動劑功能的衍生物。 該類衍生物的例子如N6-2-(4-氨基苯基)乙基腺苷(APNEA) 、 W-(4-氨 基-3-碘苯甲基)腺苷-5'-(N-甲基糖醛酰胺)(AB-MECA)和1-脫氧 -l- {6- [ ({3-碘苯基}甲基)氨基]-9H-嘌呤-9-基} -N-曱基-P -D-呋喃 核糖-酰胺，后者在本領(lǐng)域也被稱為N6-3-碘苯甲基-5'-甲基羧酰氨腺 苷，N6- (3-碘苯甲基)腺苷-5' -N-甲基糖醛酰胺和本文的前文和下文中 縮寫為IB-MECA或IB-MECA的氯化衍生物(R2=C1)，后者在這里被稱為 C1 -1B-MECA ， IB-MECA和C卜IB-MECA是本發(fā)明尤其優(yōu)選的。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，活性成分可以是一般被稱為N^苯 曱基-腺苷-5'-烷基糖醛酰胺-N-氧化物或N6-苯甲基腺苷-5'-N-二烷 基糖醛-酰胺-N'-氧化物的腺苷衍生物。更進一步地，活性成分可以是如下通式(V)所示的黃嘌呤-7-核糖核 苷矛汙生物(V)OH OH其中X是0或S;R6是RaRbNC (=0)-或H0pc-，其中-Ra和Rb可以是相同或不同的基團，選自氫、d-d。烷基、氨基、C廣d。 鹵代烷基、d-d。氨基烷基以及C廣d。環(huán)烷基，或連接在一起形成一個 包含2至5個碳原子的雜環(huán)；以及-Rs是選自d-d。烷基、氨基、d-d。卣代烷基、d-d。氨基烷基、d-d。B0C-氨基烷基和Crd。環(huán)烷基；-117和Rs可以是相同或不同的基團，選自烷基、C「d。環(huán)烷基、順式 -或反式-l-苯乙基、未取代的苯甲基或?；桨被约氨交谝粋€或 多個位置被取代基取代的苯基醚，其中的取代基選自d-d。烷基、氨 基、卣素、d-d。卣代烷基、硝基、羥基、乙酰氨基、d-d。烷氧基以 及磺酸；-R,可選擇的基團包括離素、苯甲基、苯基、C3-d。環(huán)烷基以及C「d。 烷氧基；或這種化合物的鹽，如它們的三乙胺鹽。上述定義的化合物中的一部分以及它們的合成方法詳見US 5， 688， 744; US 5， 773, 423， US 6， 048， 865， WO 95/02604， WO 99/20284 以及WO 99/06053，在這里列出這些文獻作為參考。在GSF誘導(dǎo)實施方案情況中的活性成分可以是AlRag。它是一種有 如下分子式的有代表性的腺普衍生物-K代表低級的垸基、環(huán)烷基，優(yōu)選C3-Cs環(huán)烷基(包括熟知的環(huán)己基和環(huán)戊基包括衍生物，分別被記作CPA和CHA)，環(huán)烷基可以被取代， 例如可以被羥基或低級的烷基取代；Id也可以代表羥基或羥基烷基； 苯基、?；桨?、或低級的烷苯基，所有的基團都可以被一個或多個 取代基取代，如g素、低級烷基、囟代烷基如三氟基曱基、硝基、氰
基、-(CH2)mC02Ra、 -(CH2)raCONR2RaRb、 -(CH2) C0Ra，其中m代表一個從l 到6的整數(shù)；-SORc、 -S02Rc、 -S03H、 -S02NRaRb、 -0Ra、 -SRa、 -NHS02Rc、 -NHC0r、-冊^或-匪118(:021^;其中-IT和Rb分別代表氫、低級烷基、烷酰基、苯基或萘基(后者可以 是被部分飽和的)，烷基可以被取代或未取代的苯基或苯氧基隨意取 代；或當(dāng)^代表-NITRb時，所說的IT和Rb與氮原子一起形成5~或6-元雜環(huán)，該雜環(huán)可任意的包含選自氧或氮的第二雜原子，其中的第二 個氮雜原子可以任意的進一步被氫或低級的烷基取代；或-NRt是如 下通式(VII)或(VIII)所示的基團x其中n是一個從l到4的整數(shù)；-Z是氫、低級的烷基或羥基； -Y是氫、低級的烷基，或0R'，其中R'是氫、低級的烷基或低級的烷 酰基；-A是 一個鍵或低級鏈烯基，優(yōu)選C1-(M鏈烯基；以及 -X和X'分別是氫、低級烷基、低級烷氧基、羥基、低級烷?；⑾趸?、鹵代烷基例如三氟基甲基、鹵素、氨基、單-或雙-低級烷氨基，或當(dāng)X和X'結(jié)合成亞曱二氧基；-r代表低級烷基；-R2代表氫、卣素、取代的或未取代的低級烷基或鏈烯基、低級鹵代烷基或卣代鏈烯基、氰基、乙酰氨基、低級烷氧基、低級烷基氨
基，NRdRe，其中的Rd和IT分別是氫、低級烷基、苯基或被低級烷基取 代的苯基、低級烷氧基、囟素或面代烷基例如三氟基甲基或烷氧基， 或-SRf，其中的Rf是氫、低級烷基、低級烷酰基、苯甲酰基或苯基； -W代表-OCH廠、-NHCH廣、-SCH廣或-NH(OO)-；-R3、 R4和Rs分別代表氫、低級烷基或低級鏈烯基、支鏈或直鏈d-Cu 烷?；?、苯甲?；虮坏图壨榛〈谋郊柞；?、低級烷氧基、鹵素， 或114和R5形成一個五元環(huán)，該五元環(huán)可以隨意的被低級的烷基或鏈 烯基取代；此外R3還可以單獨代表磷酸鹽、 一氫或二氫磷酸鹽、或其 堿金屬或銨或二堿金屬或二銨鹽； -R6代表氫、卣素原子或-一部分R基團(即R,至RJ是分子式為Rg-S0「Rh-的磺基碳氫化合物， 其中的Rg代表的基團選自d-d。脂肪族化合物、苯基和被芳香基取代 的低級烷基，其中作為取代基的芳香基可以是取代或未取代的芳香基， Rh代表一個一價陽離子。合適的一價陽離子包括鋰、鈉、鉀、銨或三 烷基銨，它們在生理條件下可以發(fā)生解離。剩余的R基是氫或卣素原 子、未取代的碳氫化合物或其它任何包含如上所定義基團的非硫物。這里所使用的碳氫化合物鏈可以是直鏈或支鏈。尤其要注意的是， 這里使用的定義"烷基"或"鏈烯基，，指的是直鏈或支鏈的烷基或鏈 烯基。"低級烷基"或"低級鏈烯基，，的定義分別指的是d-d。烷基 或C廣d。鏈烯基，優(yōu)選C廣Ce烷基和C廣。鏈烯基。優(yōu)選的分子式為(VI)的腺苷衍生物是N6-環(huán)戊基腺苷(CPA)， 2-氯 -CPA (CCPA)，和NL環(huán)己基腺普(CHA)衍生物，這些化合物的制備對于 本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員而言是眾所周知的。其它的公知的選擇A1受體的 腺苷衍生物是其中的Ri是?；桨被幕衔?，其中的酰基苯氨基可 以是未取代或取代的，例如可以被羥基、烷基、烷氧基或-CH2C(0)R" 取代，其中的R"是羥基、-NHCH3、 -NHCH2C02C2H5、(乙基甘氨酸鹽)、 tuloidide (其中的甲基部分也可以被卣代烷基替代)、或 CH2C(0)NHC6HXH2C (O)R"，其中的R"'代表一個能得到甲氧基取代基 的基團、酰胺取代基(例如R"'是-NHCFy ,或R"是酰肼、1， 2-二乙
胺、-NHC2H5NHC(0)CH3、 4-(羥基-苯基)丙酰、生物素化的乙二胺或 其它任何合適的可以表示上述化合物和Al激動劑的碳氫化合物。根據(jù)本發(fā)明，被用作活性成分的^-取代的腺苷衍生物也可以是這 些含有環(huán)氧化物部分的化合物，更特別的可以是包含腺苷衍生物的環(huán) 烷基環(huán)氧(如氧雜二環(huán)或氧雜三環(huán)，前者如降水片基，后者如金剛烷 基)。其中一些此類的化合物可以用通式(I)來定義，其中的R,是如下通式(IXa)和(IXb)所表示的基團其中的M是如上所定義的低級烷基。有環(huán)氧化N6-降水片基的激動劑化合物的實施方案包括內(nèi)和外型異構(gòu)體，更特別的可以是下列四種異構(gòu)體之一2R-外，2R-內(nèi)，2S-外和 2S-內(nèi)。另外一個W-降水片基衍生物的實施方案是在嘌呤環(huán)^-位包含一 個氧原子。這一化合物被稱為N6-(5， 6-環(huán)氧降冰片-2-基)腺苷-l-氧化 物。有時，AlRAg可以是腺嘌呤衍生物，其中腺苷的p -D-ribollranozyl部分可以:故氳或苯基替代。A2Ran，根據(jù)本發(fā)明可以被使用的是如下分子式(X)所示的1， 3， 7-被取代的黃噤呤的8-苯乙烯基衍生物(X):<formula>formula see original document page 21</formula> 其中Ri和R3是d-&烷基、烯丙基或炔丙基 R7是H、曱基或C廣Cs烷基 n是1到3以及X是離素、三氟基烷基、烷氧基、羥基、硝基、氨基、二烷 基氨基、重氮、異硫氰酸根、節(jié)氧基、氨基烷氧基、烷氧基羰基氨基、 乙酰氧基、乙酰氨基、琥珀酰氨基、4-(4-NH2-A-CHaCH-CHCHJ-SJ-WeO)" 4-(4-AcNH-反-CH2CH-CHCH20)-3， 5-(MeO)2、 4-(4-叔-B0C-NH->^-CH2CH=CHCH20) -3， 5- (MeO) 2分子式為(X)的化合物的具體例子是(3，7-二甲基-l炔丙基 一xantane)。A2Ran可以是如下分子式所示的化合物<formula>formula see original document page 21</formula>或 NH-正如所領(lǐng)會的那樣，本發(fā)明并不僅限于上面提及的A3RAg、 A2RAg 或A2Ran化合物。以本發(fā)明為依據(jù)的化合物可以是如上所規(guī)定的化合物，或也可以 是其鹽或溶劑化物的形式，尤其是其在生理學(xué)上可接受的鹽和溶劑化 物。此外，當(dāng)包含一個或多個不對稱碳原子時，活性成分可以包括上 述活性成分的異構(gòu)體和非對應(yīng)立體異構(gòu)體或其混合物。上述活性成分可藥用的鹽包括這些活性成分與可藥用的有機酸和 無機酸形成的鹽。合適的酸的例子包括煙酸、氯溴酸、磺酸、硝酸、 高氯酸、富馬酸、馬來酸、磷酸、羥乙酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、 對甲苯磺酸、醋酸檸檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸?；钚猿煞挚梢宰鳛闊o活性的物質(zhì)(如前體藥物)給藥，然后在受治 療者的特定部位通過其本能的處理對其進行進一步的修改而將其激 活。在一些情況中，衍生物的諸如本發(fā)明這樣的藥物組合物的治療學(xué) 功能被保留。這些前體藥物也屬于這里所使用的"活性成分"的定義 范疇。同樣，"^Ug" "J/iMg" "WW"" "JMag"和"J^ a/2"的 定義也應(yīng)被理解為包括前體藥物，雖然它們是前體，缺乏拮抗或拮抗 活性(如情況可以是)，但是它們在體內(nèi)有活性。依據(jù)本發(fā)明，A3RAg可以通過篩選來選擇性質(zhì)與IB-MECA活性相類 似的化合物。例如，根據(jù)白細胞減少癥抑制實施方案，可以使用的此類 化合物可以根據(jù)其刺激骨髓細胞和白細胞增殖的能力和隨后其在體內(nèi) 發(fā)揮效力的能力為依據(jù)來進行選擇。對于在增殖抑制實施方案中的化
合物，可以根據(jù)其抑制腫瘤細胞增殖的能力以及隨后在體內(nèi)發(fā)揮這一 活性的能力來進行篩選。AlRAn和A2Ran的活性可以進4亍測定，可以用所描述的與A3RAg 相類似的方法，進行必要的修改，進行篩選。本發(fā)明的藥物組合物可以只包含活性成分本身，也可是活性成分 與其它一些成分結(jié)合，其中所說的其它一些成分如可藥用載體，稀釋 劑，賦形劑，添加劑和/或輔劑，一些本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員所熟知的成 分，例如為了某種目的而加的調(diào)味劑，著色劑，潤滑劑以及一些其它 的藥學(xué)組分。很明顯，本發(fā)明所使用的可藥用載體、稀釋劑、賦形劑、 添加劑通常是惰性、無毒的固體或液體填料，稀釋劑或膠嚢材料，優(yōu) 選不與本發(fā)明的組合物反應(yīng)的物質(zhì)。此外，活性成分也可以與化療藥物結(jié)合給藥，尤其是在白細胞減 少癥預(yù)防實施方案的情況中。因此，本發(fā)明的藥物組合物除了所說的 活性成分外還可以包含一種化療藥物。根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案， 所說的化療藥物是抗癌的化療藥物。應(yīng)當(dāng)清楚的是該術(shù)語意味著任意 一種細胞毒素藥物或為了減少病人的腫瘤腫塊而給予病人的含有兩種 或多種細胞毒素藥物混合物的合劑。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)A3RAg 口服可生物利用，口服給藥時可發(fā)揮其雙重療 效(減少異常細胞增殖和預(yù)防或減少白細胞減少癥)。因此，根據(jù)優(yōu)選 的實施方案，本發(fā)明的藥物組合物被制備用于口服給藥。這種口服組 分可以進一步包含適用于口服給藥的可藥用載體、稀釋劑、賦形劑、 添加劑或輔劑。在本發(fā)明的G-CSF-誘導(dǎo)實施方案中，被公開的藥物組合物被特別 地用于增加從細胞分泌的G-CSF水平。此類化合物可以被用于促進化 療和骨髓移植后噬中性白細胞的恢復(fù)或抑制異常細胞的生長。到目前 為止，此種治療包進行生長因子給藥，已知這種治療方法具有一些不 想要的副作用。此外，眾所周知，G-CSF治療的平均花費是很高的。在本發(fā)明的白細胞減少癥預(yù)防實施方案或毒性預(yù)防實施方案的范 疇中，公開的藥物組合物被用于提高循環(huán)系統(tǒng)中白細胞的水平或抵消
其它的一些毒副作用，例如體重減輕。本發(fā)明的這一點可以被用于多 種臨床情況。很顯然循環(huán)系統(tǒng)中白細胞尤其是噬中性粒細胞的減少會 導(dǎo)致免疫系統(tǒng)弱化?？梢杂帽景l(fā)明的這一點進行治療的免疫系統(tǒng)弱化 的例子是癌癥前期經(jīng)常發(fā)生的或由藥物誘導(dǎo)的白細胞減少癥或藥物誘 導(dǎo)的^中性白細胞細胞減少癥。增殖抑制實施方案對治療與細胞異常生長有關(guān)的多種異常是有效 的，如癌癥，牛皮痺和一些自身免疫性疾病。本發(fā)明的組合物尤其可 用于抑制腫瘤細胞的增殖，優(yōu)選用于抗癌治療。當(dāng)用A3RAg治療淋巴腫瘤組織細胞時，這些細胞增殖的抑制作用 遠遠顯著于用腺苷或'A1，或'A2，激動劑的抑制作用，雖然用A2Rag 也可以發(fā)現(xiàn)有一些活性(參見例圖5A)。這些結(jié)果表明腫瘤細胞增殖的 抑制應(yīng)該主要歸咎于A3RAg與其受體的結(jié)合，但在一定程度上也可以 由A2Rag來模擬。因此，上述令人驚訝的結(jié)果為未來的抗癌細胞抑制 劑藥物提供了一個新的治療學(xué)目標(biāo)。此外，進一步發(fā)現(xiàn)A3RAgs還可以有效的抑制除淋巴瘤之外其它腫 瘤細胞的生長，如黑素瘤或結(jié)腸瘤(參見例圖6)。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人 員能清楚的預(yù)見到用能抑制異常分裂細胞生長同時能通過誘導(dǎo)骨髓細 胞增殖來重建患者免疫系統(tǒng)的非特異性抗癌藥對患者進行治療的優(yōu) 點。圖7A_7B，例如，表明了 A3RAg的不同作用。在這種特定的情況中， 評估了 IB-MECA對腫瘤和正常細胞的作用。與腺苷相比，使用A3RAg獲 得的更顯著的效果可以通過這些結(jié)果更清楚地表現(xiàn)出來。當(dāng)使用A3 受體拮抗藥，MRS-1220時，A3RAg的治療效果是可逆的。體內(nèi)研究證實了體外研究的結(jié)果，將用A3RAg和一種細胞毒劑對 小鼠同時進行治療的結(jié)果與只用細胞毒素藥物對小鼠進行治療的結(jié)果 相比，A3RAg對小鼠表現(xiàn)出一種化學(xué)保護作用(參見例圖8)。此外， 發(fā)現(xiàn)在用A3RAg治療的小鼠的體內(nèi)的病灶數(shù)下降，表明了 A3RAg的化 療活性(參見例圖9)。圖IOA-IOB和19A和19B,例如，表明僅用細胞 毒素藥物進行治療的荷瘤小鼠出現(xiàn)外周血液中白細胞和噬中性粒細胞
下降的情況，而在化療之后進行A3RAg給藥，產(chǎn)生的結(jié)果是白細胞總 數(shù)恢復(fù)，噬中性粒細胞百分數(shù)增加。因此，可以得出A3RAg具有雙重療效的結(jié)論，它可以作為化療藥 物，也可以作為化學(xué)保護劑。很顯然，A3RAg的這種雙重作用的應(yīng)用 也在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。無論如何，本發(fā)明的藥物組合物的給藥和劑量應(yīng)與良好的醫(yī)學(xué)實 踐相一致，同時考慮每個病人的臨床情況，給藥的部位和方法，給藥 的時間安排，病人的年齡性別、體重和其它一些醫(yī)學(xué)執(zhí)業(yè)人員公知的 因素。本發(fā)明的組合物可以以各種方法給藥?？梢钥诜o藥，皮下給藥， 非胃腸道給藥包括靜脈內(nèi)給藥、動脈內(nèi)給藥，肌肉內(nèi)給藥，腹膜內(nèi)給 藥，或通過鼻內(nèi)給藥，以及鞘內(nèi)給藥和本領(lǐng)域數(shù)量人員公知的輸液給 藥。眾所周知，人的治療過程通常長于動物的治療過程，例如這里例 舉的小鼠。治療的時間與疾病進程和活性成分的效力相對應(yīng)。治療方 案包括在幾天或更長的時間用單劑量或多劑量進行治療。治療時間一 般附隨于疾病進程過程、活性成分效力和被治療的病人種類。當(dāng)本發(fā)明的組合物采用非胃腸道給藥時， 一般被制成單位劑量可 注射的形式(溶液，混懸液，乳劑)。適于注射的藥物制劑包括滅菌水 溶液或分散液和可重新組成滅菌水溶液或分散液的滅菌粉末，可被用 作溶劑和分散介質(zhì)的載體包括，例如水、乙醇、多元醇(如丙三醇、丙 二醇、液體聚乙二醇等等)、其適當(dāng)?shù)鼗旌衔镆约爸参镉?。非水賦形劑，有時也可以被用作活性成分的溶劑系統(tǒng)，如棉籽油、 芝麻油、橄欖油、大豆油、玉米油、向日葵油、或花生油和酯，如肉 豆蔻酸異丙酯。此外，也可以添加能加強組合物的穩(wěn)定性、無菌性和等滲性的各 種添加劑，包括抗菌防腐劑、抗氧劑、螯合劑和緩沖劑。預(yù)防微生物 的作用可以通過各種抗細菌劑和抗真菌劑而得到加強，例如對羥基苯 甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等等。
為了口服給藥，活性成分可以被制成片劑、混懸液、溶液、乳劑、 膠嚢劑、散劑、糖漿劑等等形式，這是藥師通過眾所周知的技術(shù)可以 獲得和使用的。本發(fā)明是通過權(quán)利要求定義的，其內(nèi)容被認為已經(jīng)在說明書中進 行了公開，現(xiàn)在將通過實施例并比照附圖進行描述。應(yīng)當(dāng)清楚的是所 使用的術(shù)語是想盡量是說明書單詞的本意而不是限制因素。雖然前面的說明書詳細描述了本發(fā)明的少數(shù)特定的實施方案，但 是本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)明白，本發(fā)明并不僅限于此，可能會進行 其它一些形式和細節(jié)的變化，這些變化仍不會離開此處公開的本發(fā)明 的范圍和要旨。附圖簡要說明為了理解本發(fā)明以及明白實際如何實施，現(xiàn)在將要通過一些非限制性的實施例，比照附圖，對優(yōu)選的實施方案進行描述，其中

圖1是一個表示體外試驗的結(jié)果的柱形圖，表明了在該體外試驗中 腺苷(Ad)、 DPCPX(—種AlRAn)、 CPA和CCPA(二者都是AlRAg)或 IB-MECA(—種A3RAg)對G-CSF產(chǎn)生的作用。將培養(yǎng)物用改性的RPMI 進行處理作為對照。所得結(jié)果用對照的百分數(shù)表示(對照=100%)。圖2是一個表示通過[m-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗獲得的試驗結(jié)果的柱形圖，該試驗用腺苷、CPA或IB-MECA來刺激骨髓細胞的增殖， 加入((+) G-CSFAb淺色柱)或不加入((-)G-CSFAb-深色柱)抗體來拮 抗G-CSF來進行試驗。試驗結(jié)果表明了抗-g-CSF抗體的中和作用。所 得結(jié)果用所定義的對照的百分數(shù)表示(對照=100%)。圖3A和3B是一個表示通過[H3]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗獲得的試 驗結(jié)果的柱形圖，在該試驗中在存在腺苷、腺苷受體激動劑(圖3A)或 與腺苷受體拮抗劑結(jié)合的腺苷(圖3B)時進行骨髓細胞增殖試驗。受體 激動劑試驗(圖3A)是CPA (一種AlRAg)和IB-MECA (一種A3RAg);受體 拮抗劑試驗(圖3B)是DPCPX (—種AlRAn) 、DMPX (—種A2RAn)和MRS (— 種A3RAn)。所得結(jié)果用在對照上結(jié)合的胸腺嘧啶核苷的增長百分數(shù)來
表示(對照=0%)。圖4表示體外試驗結(jié)果的柱形圖，表明了在不同濃度的 IB-MECA (0. 01 p M， 0. 1 jj M和1. 0 p M)下進行的骨髓細胞增殖試驗。所 得結(jié)果用在對照上結(jié)合的[H3]-胸腺嘧啶核苷百分數(shù)來進行表示(對照 =0%)。柱形下面的數(shù)字是IB-MECA的濃度UM)。圖5A和5B是表示兩個試驗結(jié)果的柱形圖，二者都是在體外試驗中 進行的，是以細胞計數(shù)試驗為基礎(chǔ)，對腺苷以及其拮抗劑對淋巴組織 瘤細胞(Nb2-11C)生長的作用進行了實驗。在圖5A表示的試驗中，對腺 苷、CPA (—種AlRAg)、 DMPA (—種A2RAg)或IB-MECA (—種A3RAg) 對淋巴組織瘤細胞生長的作用進行了試驗。在圖5B表示的試驗中，對 腺苷、DCPX (—種AlRAn)、DMPX (—種A2RAn)或MRS-1220 (—種A3RAn) 對淋巴組織瘤細胞生長的作用進行了試驗。將用RPMI處理過的淋巴組 織瘤細胞作為對照。所得結(jié)果相對對照用抑制生長的百分數(shù)來進行描 述(對照=0%)。圖6是表示不同的腫瘤細胞類型(B16黑素瘤，HTC-116結(jié)腸癌， Nb2-llC淋巴瘤)在存在A3RAg IB-MECA時生長情況的體外試驗柱形 圖。將用RPMI處理過的淋巴組織瘤細胞作為對照。所得結(jié)果相對對照 用抑制百分數(shù)來進行描述(對照- 0 %)。圖7A和7B是表示腺苷或A3RAg、 IB-MECA對腫瘤細胞(Nb2-ll C 淋巴瘤，圖7A)或骨髓細胞(試驗圖7B)生長的作用的體外試驗的柱形 圖。圖7A和7B的結(jié)果分別與對照相比用抑制百分數(shù)和刺激百分數(shù)來 表示(對照=0%)。圖8是表示在用化療藥物(環(huán)磷酰胺)進行治療5天和9天后外周白 血細胞(WBC)數(shù)的體內(nèi)試驗的柱形圖。環(huán)磷酰胺可以單獨(灰色柱)或在 開始給予化療藥物24小時后結(jié)合給予IB-MECA，每天口服(以lml的 溶液)給藥。將用PBS處理過的小鼠作為對照。將WBC數(shù)用百分比表示， 相對對照(對照=0 0/0。圖9是表示對小鼠接種2xl()s的黑素瘤細胞，用環(huán)磷酰胺(CHEMO)、 IB-MECA、 A3RAg與IB-MECA和CHEMO結(jié)合進行化療治療后小鼠黑素瘤
病灶數(shù)的體內(nèi)試驗的柱形圖，用磷酸生理鹽水緩沖液作為對照。圖10A和10B是表示IB-MECA化療活性的體內(nèi)試驗的柱形圖。表 明了在將化療藥物環(huán)磷酰胺(CHEM0)結(jié)合(CHEMO+IB-MECA)或不結(jié)合 IB-MECA給藥后，白血細胞(WBC，圖IOA)和噬中性粒細胞(圖IOB)與 時間的函數(shù)關(guān)系。將用PBS處理過的荷瘤小鼠作為對照。與對照相比 噬中性白細胞數(shù)用百分比來表示(對照=0%)。圖11表示了在開始治療(給予5-FU、 C1-IB-MECA或5-FU和 C1-IB-MECA的結(jié)合)后第7， 10和14天棵鼠體重的對照百分比(未治 療小鼠=100 % )。治療包括5-FU給藥(黑色柱)、5-FU與Cl-IB-MECA (一 種A3RAg)結(jié)合給藥(灰色柱)和C1-IB-MECA單獨給藥(白色柱)。圖12A和12B表示了 C1-IB-MECA對減輕阿霉素誘導(dǎo)的骨髓中毒的 作用的試驗結(jié)果。試驗采用ICR小鼠。圖12A表示白血細胞(WBC)數(shù)而 圖12B表示成核的骨髓細胞數(shù)。在圖12A中，表明了在四個不同時期 的兩種治療的結(jié)果，對照的水平用短劃線表示，而在圖12B中，表明 了兩個不同時期的治療結(jié)果，對照水平用左手邊的柱形表示。圖13表示了抗-G-CSF抗體對對照小鼠、用化療藥物進行治療的小 鼠和用化療藥物結(jié)合C1-IB-MECA進行治療的小鼠的白血細胞(WBC)數(shù) 的作用，這些藥物均為口服給藥(6 jiig/kg體重，在O. 2mlPBS中)。在 注射抗-G-CSF抗體后的WBC數(shù)用戌色柱表示。所有的結(jié)果都用對照的 百分比來表示。(對照=100%)。圖14表示了在注射HCT-116人結(jié)腸瘤細胞后對照組和治療組 (C1-IB-MEC 口服給藥)棵鼠腫瘤大小的發(fā)展情況。圖15表示了與圖14類似的試驗結(jié)果，其中對注射HCT-116人結(jié) 腸瘤細胞后棵鼠腫瘤的大小變化進行了測定。進行了四組試驗對照 組，接受5-FU治療的組，C1-IB-MECA 口服給藥的組和接受5-FU和 C1-IB-MECA聯(lián)合治療的組。圖16是表示在如圖15所描述的試驗進行了 30天后胂瘤大小的柱 形圖。圖17是表示不同濃度(0. 05 n g/ml和0. 5 jli g/ml)的抗-G-CSF抗體(0-無抗體)下測定的C1-IB-MECA誘導(dǎo)的骨髓細胞增殖試驗結(jié)果的 柱形圖。增殖通過[3H]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗來進行測定。圖18表示測定B-16黑素瘤和骨髓細胞增殖的體外實驗的試驗結(jié) 果。增殖通過fH]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗來進行測定。細胞暴露于 0. 01 ju M和0. 1 ju M C1-IB-MECA結(jié)合(白色柱)或不結(jié)合(黑色柱)A3RAg —MRS-15 2 3 。所得結(jié)果以對照百分數(shù)來進行表述(對照=100 %)。圖19A和19B表示了與圖IOA和10B類似的實驗的試驗結(jié)果，用 C1-IB-MECA來進行。圖20表示了測定由IB-MECA或C1-IB-MECA i秀導(dǎo)的骨髓細胞增殖 的體外實驗的試驗結(jié)果。將兩種A3RAg以lnM或10nM的濃度加入骨髓 細胞培養(yǎng)物中，分為加拮抗劑(灰色柱-"(+)拮抗劑")或不加拮抗劑(黑 色柱-"(-)拮抗劑")。 一種A3Ran， MRS-1523，濃度為l隨。增殖 通過[3H]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗來進行測定。所得結(jié)果相對對照用刺 激的百分數(shù)來進行表示(未處理的骨髓細胞作為對照，對照=0%)。試驗結(jié)果 腫瘤細胞使用鼠的腫瘤細胞林(B-16黑素瘤和Nb2 llc大鼠淋巴瘤)。B-16 黑素瘤細胞由美國模式培養(yǎng)物保藏所(ATCC)， Rockville， Maryland 獲得。Nb2-llC大鼠'淋巴瘤細胞[Pines M..和Gertler A. J. of Cellular Biochem. ， 37: 119-129 (1988)]由Dr. A. Gertler， Hebrew 大學(xué)，Israel友情提供。還使用結(jié)腸癌細胞(HCT-116)，由ATCC獲得。在含有1(T/。胎牛血清(FBS， Biological Industries, Beit Haemek， Israel)的RPMI培養(yǎng)基中對細胞進行常規(guī)培養(yǎng)。對細胞進行一周兩次 的轉(zhuǎn)移，將其轉(zhuǎn)移到新準(zhǔn)備的介質(zhì)中。正常細胞使用從C57BL/6J小鼠股骨獲得的骨髓細胞。細胞的制備如前所述[17〗。藥物/化合物使用的藥物有腺苷；腺苷A1受體激動劑CCPA [2-氯46-環(huán)戊 基-腺苷]、CPA (N-環(huán)戊基腺苷)；AlRAn: DPCPX(1， 3-二丙基-8-環(huán) 戊基黃嘌呤)；腺苷A2受體激動劑DMPA(N6-[2-(3，5-二甲氧基苯 基)-2-(2-曱基苯基)-乙基]腺苷)；A2Ran: DMPX(3, 7-二甲基-1-炔 丙基-xantane); A3RAg: IB-MECA (l-脫氧-l-{6-[ ({3-碘苯基}甲基) 氨基]-9H-嘌呤-9-基}-N-甲基-P -D-呋喃核糖醛酰胺))、 CE-IB-MECA(2-氯-NL3-碘苯甲基)- 腺苷-5'-N-甲基-糖醛酰胺；和腺 苷A3受體拮抗劑MRS-1523 (5-丙基-2-乙基-4-丙基-3-乙硫基羰 基)-6-苯基吡啶5-羧酸鹽)和MRS-1200 (9-氯-2-(2-呋喃基)-5-[(苯 基乙?；?氨基][1， 2， 4，]-三唑基[1, 5-c]喹唑啉)。使用抗-鼠科動物G-CSF抗體(兔血清通過使用柱色譜進行蛋白純 化，Cytolab LTD, Weizmann Institute of Science,Israel)。環(huán)磷酰胺購自Taro藥物實業(yè)有限公司。Haifa Bay, Israel。小鼠使用3個月大的，平均體重為25gr的雌性ICR，C57BL/6J小鼠或 (BALB/C血統(tǒng))小鼠。小鼠由Harlan實驗室購得，Jerusalem, ISRAEL。 給小鼠提供標(biāo)準(zhǔn)的顆粒狀食物和自來水。實施例1:腺苷和腺苷受體拮抗劑以及激動劑對G-CSF制造和骨髓細 胞增殖的作用為了驗證腺苷通過刺激G-CSF制造而發(fā)揮作用的假設(shè)，在存在腺苷 或腺苷激動劑或拮抗劑的情況下進行正常細胞培養(yǎng)。為此目的，從C57BL/6J或ICR小鼠股骨獲得的骨髓細胞首先通過 25G的探針進行分散。然后將細胞(3xl0'cells/well,在96孔微量培 養(yǎng)板中)用含有10。/。胎牛血清(FBS)的RPMI培養(yǎng)基在有腺苷(25juM)存
在的情況下對細胞進行培養(yǎng)。腺苷或Al和A3腺苷受體激動劑-CPA (— 種AlRAg， 0. 01 )LiM) ， CCPA(—種AlRAg， 0. 01 pM)，或IB-MECA(—種 A3RAg, 0.01 nM)在沒有腺苷存在的情況下被加入到骨髓培養(yǎng)物中；一 種Al腺苷受體拮抗劑，DPCPX (0. 1 |i M)在存在腺苷(25 ia M)的情況下被 加入到骨髓培養(yǎng)物中。用含有RPMI培養(yǎng)基細胞混懸液和5%FBS的培養(yǎng)物作為上述試驗的 對照。用[3H]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗來評價骨髓細胞的增殖。為此，在 培養(yǎng)30小時之后，每孔用lnCi[3H]-胸腺嘧啶核苷進行脈沖調(diào)制。 在培養(yǎng)48小時之后，進行細胞收獲，用液體閃爍計數(shù)器(LKB， Piscataway， NJ， USA)測定[3H]-胸腺嘧咬核苷吸收。該試驗結(jié)果如圖 l所示，該圖表明AlRAg或A3RAg具有G-CSF的制造功能，這一點與 用腺苷獲得的結(jié)果相似。為了證明腺苷及其激動劑可以通過刺激G-CSF制造而發(fā)揮作用，進 行了一個進一步的試驗，在該試驗中，在存在腺苷(25nM)、 CPA (0.01 iaM)或IB-MECA (0. 01 ji M)情況下將抗-G-CSF抗體(62. 5ng/ml)加入 到加入到骨髓細胞培養(yǎng)物中。用如上所述的方法評價細胞增殖情況。 本試驗的結(jié)果如圖2所示，該圖表明了 G-CSF的抗體抑制了腺苷及其 激動劑對骨髓細胞增殖的刺激作用。這一結(jié)果表明至少有一部分與腺 苷受體相互作用有關(guān)的活性是通過G-CSF的制造而發(fā)揮出來的。當(dāng)使用AlRAg和A3RAg(CPA和IB-MECA)結(jié)合物時，對骨髓細胞增 殖的累計作用進行了評估。該試驗的操作用與如圖l所表明的實驗結(jié) 果相類似的試驗來完成。在被分散之后，在存在腺苷(25 p M) 、CPA (0. 01 ju M) 、 IB-MECA (0. 01 ju M)或IB-MECA和CPA聯(lián)用(各自的濃度為0. 01 jaM)的情況下對細胞進行培養(yǎng)，然后用上述的方法進行進一步的處理。 所得結(jié)果如圖3A所示，該圖表明了 IB-MECA和CPA合用作用加強。為了比較在采用上述的方法之后腺苷受體拮抗劑對骨髓細胞增殖 的作用，單獨用腺苷或采用腺苷與DMPX(—種A2RAn)、 DPCPX(—種 AlRAn) 、 MRS-1220 (—種A3RAn)或DPCPX和MRS-1220的結(jié)合物相結(jié)
合進行細胞培養(yǎng)。結(jié)果如圖3B所示。正如所看到的，A2受體被DMPX 阻斷也可以導(dǎo)致骨髓細胞增殖的增加，這一作用甚至超過了單獨使用 腺苷時的作用。與之相比，用DPCPX或MRS-1220的增殖與單獨使用腺 苷相比，其增加減少了50°/。，而DPCPX與MRS-1220結(jié)合則完全抑制了 增殖。采用不同濃度的IB-MECA (1 M M， 0. 1 p M或0. 01 ju M)對如上所述的被預(yù)先處理過的細胞進行培養(yǎng)。用[m-胸腺嗜啶核苷結(jié)合試驗測定刺激百分數(shù)。結(jié)果如圖3所示，該圖表明IB-MECA以劑量依賴的方式刺 激骨髓的增殖。實施方例2:腺苷及其激動劑對腫瘤細胞生長的調(diào)節(jié)Nb2-11C大鼠淋巴瘤細胞(l. 2xl04個細胞/ml)用96孔微量培養(yǎng) 板，lml含有5%胎牛血清的RPMI培養(yǎng)基培養(yǎng)48小時。向其中加入 25nM腺苷，0. 01 juM腺苷受體激動劑(CPA, —種AlRAg; DPMA, —種 A2RAg或IB-MECA, —種A3RAg)或與腺苷(25 jliM)結(jié)合的0. lpM腺苷 受體拮抗劑(DPCPX, —種AlRAn; DMPX， 一種A2Ran;或MRS-1220， 一種A3RAn)。用含有5%FBS的RPMI培養(yǎng)基細胞混懸液的培養(yǎng)物作為上述試驗的 對照。細胞增殖程度用細胞計數(shù)分析來測定。與腺苷抑制作用的比較結(jié)果見圖5A和5B。正如所看到的這樣，在 用IB-MECA， 一種A3RAg進行培養(yǎng)之后，.Nb2-11C細胞的增殖被明顯的 抑制。在用CPA， 一種AlRAg時觀察不到生長抑制，在使用DPMA， 一 種A2Ran時，可以發(fā)現(xiàn)較弱的生長抑制。CPA不能抑制這兩種腫瘤細 胞的增殖，表明腺苷Al受體不具有這種活性。但是，DMPA和IB-MECA 的抑制作用表明A2和A3腺苷受體分別在抑制作用中擔(dān)當(dāng)一定的角色。此外，可以看出當(dāng)存在DPCPX， 一種AlRAn，本質(zhì)上沒有效果，而 在存在MRS-1220， 一種A3Ran時，腺苷對Nb2-llC細胞增殖的作用基 本上被取消。DMPA， 一種A2Ran，可以發(fā)揮次要的但是仍然很重要的 作用。由這些發(fā)現(xiàn)可以得出腫瘤細胞的生長可以被A3RAg或A2Ran有
效抑制的結(jié)論。用與上面所描述的方法相同的方法，評價A3RAg， IB-MECA對B-16 黑素瘤、HCT-116結(jié)腸瘤和Nb2-llC淋巴瘤生長的抑制。結(jié)果見圖6， 用抑制或增殖的百分數(shù)表示。實施例3:腺苷A3受體激動劑對腫瘤細胞和正常細胞的不同作用用如上所述的試驗方法，檢驗了腺苷、A3RAns和A3RAgs對腫瘤細 胞生長的作用。簡要地說，在有腺苷，或IB-MECA的情況下進行Nb2-IIC淋巴瘤或 骨髓細胞培養(yǎng)。A3RAg的雙重效果如圖7A和7B所示，在刺激骨髓細 胞增殖的同時抑制了肺瘤細胞的生長。實施例4:體內(nèi)研究將40只C57BL6/J小鼠分成四組，每組都用下列方案之一進行處理1. 對照組從腫瘤接種的第一天開始到小鼠被處死為止，每只小 鼠每天腹膜內(nèi)(i. p.)注射lml生理鹽水；2. 化療組 一方面在接種肺瘤細胞24小時后i.p.注射環(huán)磷酰胺， 同時從腫瘤接種的第一天開始到小鼠被處死為止，每只小鼠每天i.p. 注射lml生理鹽水；3. 腺苷A3受體激動劑(A3RAg)組從腫瘤接種的那一天開始到小 鼠被處死為止，IB-MECA每天口服給藥4. A3RAg+化療組 一方面在接種腫瘤細胞24小時后i. p.注射環(huán) 磷酰胺，同時每天以3 p g/kg體重進行IB-MECA 口服給藥在第5天和第9天從小鼠的尾靜脈取血，為計數(shù)白血細胞(WBC)數(shù) 獲得血樣。結(jié)果如圖8所示。此外，在18天后處死小鼠，計算其肺部的黑素瘤腫瘤病灶。結(jié)果 如圖9所示。為了評估A3RAg的化學(xué)保護作用，又進一步的進行了試驗。小鼠用
環(huán)磷酰胺(50mg/kg體重，在0. 3mlPBS中)進行治療。在給予細胞毒素 藥物48和72小時后，小鼠被i.p.注射腺苷(25jug/kg體重)或 IB-MECA(3或6jig/kg，在O. 2mlPBS中)。檢驗白血細胞(WBC)數(shù)和噬 中性粒細胞數(shù)。結(jié)果分別如圖lOA(WBCs)和IOB(噬中性粒細胞)所示。 正如所看到的，與僅僅用IB-MECA進行治療的小鼠相比，僅僅用環(huán) 磷酰胺進行治療的小鼠外周血液中白血細胞和噬中性粒細胞的數(shù)目下 降。當(dāng)腺苷或IB-MECA被給藥時，白血細胞總數(shù)被恢復(fù)，后者有十分 顯著的作用，在168小時(7天)后完全恢復(fù)。實施例5:腺苷A3受體激動劑防止用化療藥物進行治療的小鼠的體重 降低四組棵鼠(BALB/C血統(tǒng))，每組10只，進行如下處理組l:不進行治療的小鼠[請求確認]。 組2:小鼠連續(xù)5天腹膜內(nèi)(i.p.)注射5-氟-尿嘧啶(5-FU， 30mg/kg體 重，在PBS中)組3:小鼠和第二組一樣i.p.注射5-FU,但是是從第二天開始，以后 每隔一天給小鼠口服Cl-IB-MECA(6ug/kg體重，在0. 2mlPBS中)。 組4:小鼠如上接受C1-IB-MECA給藥。 在第7, IO和H天測量小鼠的重量，結(jié)果如圖ll所示。正如所看到的，與對照相比，5-FU對小鼠重量有明顯的作用，在 C1-IB-MECA與5-FU結(jié)合給藥時，可以部分防止其重量的降低。 C1-IB-MECA本身本質(zhì)上并不能引起體重下降。本試驗表明A3腺苷受 體激動劑對化療的一些毒性效應(yīng)有全面的保護作用。實施例6: C卜IB-MECA保護小鼠不受化療藥物阿霉素的骨髓毒性作用 ICR小鼠用阿霉素進行治療(i. p.注射，10mg/kg在0. 5mlPBS中)。 在細胞毒素藥物給藥后24， 48和72小時，C1-IB-MECA(6 jug/kg體重) 小鼠口服給藥。在72小時，96小時，120小時和144小時，將小鼠處 死，取血樣。此外，從小鼠的股骨吸取骨髓，在用Coumassile藍對制
劑進行染色后，對吸取的制劑進行成核細胞的細胞計數(shù)。用三組小鼠進行試驗組l:(對照)小鼠僅僅用PBS給藥。組2:小鼠僅用阿霉素進行治療。組3:和上文一樣進行阿霉素給藥，同時結(jié)合C1-IB-MECA給藥。 白細胞計數(shù)結(jié)果見圖12A,骨髄成核細胞計數(shù)結(jié)果見圖12B。這些 結(jié)果清楚的表明，在C1-IB-MECA給藥時，外周白細胞數(shù)和骨髓成核細 胞數(shù)都有顯著的增加。這是A3RAg明顯具有對抗阿霉素的骨髓毒性作 用的保護作用實施例7:抗G-CSF抗體中和C1-IB-MECA的骨髓保護作用 ICR小鼠被分成如下的六組 組l:對照組-僅進行賦形劑給藥。 組2:用抗-G-CSF抗體(5jig/小鼠)進行調(diào)節(jié)。 組3:化療組-進行環(huán)磷酰胺(CYP-50mg/kg體重)給藥。 組4:化療(50mg/kg體重CYP) +抗-6-08 抗體(5 ja g/小鼠)。組5:化療(50mg/kg體重CYP)+(U-IB-MECA (6 ja g/kg體重)+抗-G-CSF抗體(5jLlg/小鼠)組6:化療(50mg/kg體重CYP) +C1-IB-MECA (6 ja g/kg體重)+抗-G-CSF 抗體(5jag/小鼠)每組有10只小鼠，試驗重復(fù)進行兩次。 CYP為腹膜內(nèi)注射，用0. 2mlPBS作為載體。在環(huán)磷酰胺給藥后48和72小時，C1-IB-MECA 口服給藥(用 0. 2mlPBS)。在化療藥物給藥后72小時，抗-G-CSF抗體靜注給藥(用 0. 2mlPBS)。在化療124小時后采集血樣。用Coulter計數(shù)器確定白血細胞(WBC) 數(shù)，用被May-Grundvald-Giemsa溶液染色的涂片制劑完成不同的細胞 計數(shù)。 WBC計數(shù)結(jié)果見圖13?？梢园l(fā)現(xiàn)，僅用環(huán)磷酰胺治療的小鼠表現(xiàn)出 外周血液WBC數(shù)目下降。在用C1-IB-MECA治療的組，WBC數(shù)和噬中性 粒細胞百分數(shù)顯著高于化療治療的組(沒有表明噬中性粒細胞的轉(zhuǎn)移 結(jié)果)。當(dāng)將抗-G-CSF抗體給予對照組或化療組時，可以觀察到預(yù)期 的WBC數(shù)目的下降。將抗-G-CSF抗體給予用化療藥物和C1-IB-MECA 治療的小鼠，可以消除Cl-IB-MECA的保護作用，這一點可以清楚的從 圖13看出來。由這些結(jié)果可以得出C1-IB-MECA對免疫系統(tǒng)的保護作 用是通過C1-IB-MECA促進G-CSF產(chǎn)生和分泌的活性而發(fā)揮出來的結(jié) 論。實施例8: C卜IB-MECA抑制棵鼠體內(nèi)HCT-116人結(jié)腸癌的發(fā)育通過向棵鼠(BALB/C血統(tǒng))皮下注射lxl06HCT-116人結(jié)腸癌癥細胞 形成腫瘤(Harlan, Jerusalem, Israel)。每隔一天，小鼠口月良6 ju g/kg 體重的C1-IB-MECA(用0. 2mlPBS)來進行治療。僅用賦形劑(PBS)進行 治療的小鼠。每組有IO只小鼠。通過一周兩次測定每一腫瘤相互垂直 的直徑來測定腫瘤的生長速率，根據(jù)公式7i /6 [D晶估計腫瘤的大小。 結(jié)果見圖14?？梢钥吹?，治療組對腫瘤生長有顯著的抑制。用另外一套獨立的實驗對C1-IB-MECA和5-氟尿嘧啶(5-FU)結(jié)合治 療進行試驗。將1X106HCT-116細胞給棵鼠皮下注射。 一天以后，腹膜 內(nèi)注射5-FU(30mg/kg體重，用0. 2mlPBS)，隨后再連續(xù)進行4天。每 隔一天，小鼠以5 jig/kg體重口服C1-IB-MECA(用0. 2mlPBS)。將僅用 賦形劑(PBS)或5-FU進行治療的小鼠作為對照。每組IO只小鼠。通過 一周兩次測定每一腫瘤相互垂直的直徑來測定腫瘤的生長速率，根據(jù) 公式7T /6 [DA]估計腫瘤的大小。結(jié)果見圖15和16。可以觀察到用5-FU， C1-IB-MECA以及 C1-IB-MECA和5-FU結(jié)合治療的腫瘤的生長都顯著的被抑制。20天后， 通過注意腫瘤的質(zhì)量可以清楚的看到C1-IB-MECA和5-FU協(xié)同作用， 尤其如圖16所示(圖16代表的是第30天的結(jié)果)。
實施例9: C1-IB-MECA通過誘導(dǎo)G-CSF產(chǎn)生刺激骨髄細胞增殖在96孔微量培養(yǎng)板中對骨髓細胞(3xl(^細胞/ml)進行培養(yǎng)。向其中加入終濃度為lOnM的Cl-IB-MECA，其中含有或不含有終濃度為0. O5和0. 5 ja g/ml的抗G-CSF-抗體。用[3H]-胸腺嘧啶核苷結(jié)合試驗測定細胞增殖。結(jié)果如圖17所示?？梢钥吹剑?G-CSF抗體以劑量依賴的方式抑制骨髓細胞增殖。這一實驗也表明，C1-IB-MECA的活性是通過G-CSF途徑(包括G-CSF從細胞中分泌)而發(fā)揮出來的。實施例IO:CI-IB-MECA抑制胂瘤細胞生長以及刺激骨髓細胞增殖和分 化在96孔微量培養(yǎng)板中進行B-16黑素瘤細胞(5xl()5細胞/ffll)和骨髓 細胞(3xl(^細胞/邁l)培養(yǎng)。培養(yǎng)物為用10%FTS作為補充的RPMI培養(yǎng) 基。向其中加入終濃度為0. 01 )iM或0. 1 nM的C1-IB-MECA，其中含 有或不含有腺苷A3受體拮抗劑，MRS-1523。用前面提及的[3H]-胸腺 嘧啶核苷結(jié)合試驗測定細胞增殖。結(jié)果如圖18所示。可以看到，在有 MRS-1"3存在時，B-16黑素瘤細胞和骨髓細胞的增殖與對照相比沒有 變化。與此相反，C1-IB-MECA發(fā)揮了抑制B-16黑素瘤細胞增殖和刺 激骨髓細胞的作用。這些結(jié)果表明了 A3腺苷受體激動劑的雙重作用。實施例11: CI-IB-MECA作為化學(xué)保護劑用C1-IB-MECA進行與實施例4類似的實施例，結(jié)果見圖19A和19B， 該圖證明了 C1-IB-MECA的化學(xué)保護活性。實施例12:IB-MECA和CI-IB-MECA對骨髓細胞增殖的作用用如上所述的方法培養(yǎng)鼠的骨髓細胞。在存在或不存在 A3RAn，MRS-1523的情況下，向其中加入濃度為1或10nM的IB-MECA 或C卜IB-MECA。以10nM的濃度加入拮抗劑。結(jié)果如圖20所示。
通過圖20可以看到，IB-MECA和CI-IB-MECA的作用都是劑量依 賴性的。此外，還可以看到，這種作用在很大程度上可以被A3Ran所 抑制。
權(quán)利要求
1.有效量的活性成分在制備達到某一治療效果的藥物組合物的用途，所述療效包括選擇性抑制與需要治療患者自身免疫疾病有關(guān)的異常細胞增生，其中該活性成分為A3選擇性腺苷A3受體激動劑(A3RAg)，該激動劑通過所述腺苷A3受體發(fā)揮其主要作用，所述量少于100μg/kg體重，并且其中所說的活性成分是一種如下通式(I)所示的核苷衍生物其中R1是C1-C10烷基、C1-C10羥基烷基、C1-C10羧烷基或C1-C10氰基烷基或如下通式(II)所示的基團其中-Y是氧、硫或CH2；-X1是H、C1-C10烷基、RaRbNC(＝O)-或HORc-，其中Ra和Rb可能是相同或不同的基團，選自氫、C1-C10烷基、氨基、C1-C10鹵代烷基、C1-C10氨基烷基、C1-C10BOC-氨基烷基、和C3-C10環(huán)烷基或相互連接形成一個包含2至5個碳原子的雜環(huán)，和Rc是選自C1-C10烷基、氨基、C1-C10鹵代烷基、C1-C10氨基烷基、C1-C10BOC-氨基烷基以及C3-C10環(huán)烷基；-X2是H、羥基、C1-C10烷基氨基、C1-C10烷基酰氨基或C1-C10羥基烷基；-X3和X4分別是氫、羥基、氨基、酰氨基、疊氮基、鹵素、烷基、烷氧基、羧基、次氮基、硝基、三氟基、芳基、烷芳基、巰基、硫代酸酯、硫醚、-OCOPh、-OC(＝S)OPh或X3和X4都是與＞C＝S相連形成5元環(huán)的氧、或X2和X3形成分子式如(III)所示的環(huán)其中R′和R″分別是C1-C10烷基；-R2選自氫、鹵素、C1-C10烷基醚、氨基、酰肼基、C1-C10烷基氨基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、硫代吡啶基、C2-C10鏈烯基；C2-C10炔基、巰基以及C1-C10烷基硫基；以及-R3是-NR4R5基，R4是氫或選自烷基、取代烷基或芳基-NH-C(Z)-，，Z是O、S、或NRa，Ra的含義同上，-和R5，在R4是氫的情況下，R5選自取代基在一個或多個位置未取代的或取代的順式-和反式-1-苯乙基、苯甲基、苯乙基或?；桨被?，所說的取代基選自C1-C10烷基、氨基、鹵素、C1-C10鹵代烷基、硝基、羥基、乙酰氨基、C1-C10烷氧基以及磺酸或它們的鹽；或R4是苯并二烷甲基、呋喃甲基、L-丙基丙氨酰氨基苯甲基、β-丙氨酰氨基-苯甲基、T-BOC-β-丙氨酰氨基-苯甲基、苯基氨基、氨基甲?；?、苯氧基或C1-C10環(huán)烷基；或R5是如下分子式的基團當(dāng)R4是選自烷基、取代的烷基、或芳基-NH-C(Z)-的基團時，R5就是選自取代的或未取代的雜芳基-NRa-C(Z)-、雜芳基-C(Z)-、烷芳基-NRa-C(Z)-、烷芳基-C(Z)-、芳基-NR-C(Z)-和芳基-C(Z)-基；其中Z的定義同上；或上面所定義的化合物的合適的鹽。
2.—種如權(quán)利要求1所述的用途，其中所說的活性成分是如下通 式(IV)所示的核苷衍生物表示的A3選擇性A3RAg:<formula>formula see original document page 4</formula>其中X:， R2和Rs的定義同權(quán)利要求1中的一樣。
3. —種如權(quán)利要求2所述的用途，其中所說的活性成分是Nt苯曱 基腺苷-5'-糖醛酰胺。
4. 一種如權(quán)利要求2所述的用途，其中所說的活性成分選自 N6-2-(4-氨基苯基)乙基腺苷(APNEA), N6-(4-氨基-3-碘苯曱基)腺苷 -5'-(N-曱基糖醛酰胺)(AB-MECA)和1-脫氧-l-{6-[ ({3-碘苯基}甲基) 氨基]-9H-嘌呤-9-基}-N-甲基-P -D-呋喃核糖醛-酰胺(IB-MECA)和 2-氯-N6-(2-碘苯曱基)-腺苷5'-N-曱基-糖醛酰胺(C1-IB-MECA)。
5. —種如權(quán)利要求2所述的用途，其中所說的活性成分是一種選 自通式(IV)所示的核苷衍生物的A3選擇性A3RAg，其中XmbNC(=0)-，其中r和Rb可能是相同或不同的基團，選自氬、 d-d。烷基、氨基、C廣d。卣代烷基、C廣d。氨基烷基、和C廠d。環(huán)烷基；-R2選自氫、鹵素、C「d。烷氧基、氨基、C廣d。鏈烯基和C-d。炔 基；以及-R4選自R-和S-l-苯基乙基、未取代千基和在一個或多個位置被 選自d-d。烷基、氨基、鹵素、C廣d。卣代烷基、硝基、羥基、乙酰氨基、Crd。烷氧基和磺基的取代基取代的節(jié)基。
6. 如權(quán)利要求2的用途，其中所述活性成分為選自式(IV)的那 些的A3選擇性A3RAg，其中ir和Rb相同或不同，選自氫或d-d。烷基；FU為氫或卣素； ir是氫，R2是氫，Rs是未取代的節(jié)基；W是d-d。烷基或C廣d。環(huán)烷基，Rs是R-或S-1-苯基乙基或在一個 或多個位置被選自卣素、氨基、乙酰氨基、d-d。囟代烷基和磺基的取 代基取代的芐基，其中所述磺基衍生物為鹽；R2為式Rd-C-C-的C廣d。炔基；或R2是面素、d-d。烷氨基或C「d。烷硫基，r是氫，Rb是C「d。烷基，Rs是未取代的芐基。
7. 如權(quán)利要求l-6任一項的用途，其中所述活性成分為三乙基銨 鹽形式的A3選擇性A3RAg。
8. 如權(quán)利要求l-7任一項的用途，其中所述A3RAg的量是這樣， 它通過A3腺苷受體發(fā)揮其主要作用，基本上不激活A(yù)3腺苷受體之外 的腺苦受體。
9. 如權(quán)利要求1-8任一項的用途，其中所述藥物組合物口服給藥。
10. 如權(quán)利要求1-9任一項的用途，其中所述的量少于50jig/kg體重。
全文摘要
腺苷受體激動劑，尤其是與A3腺苷受體結(jié)合的激動劑，被用于誘導(dǎo)體內(nèi)G-CSF的產(chǎn)生或分泌，預(yù)防或治療藥物的毒副作用，或預(yù)防或治療白細胞減少癥，尤其是由藥物誘發(fā)的白細胞減少癥；和抑制異常細胞的生長和增殖。
文檔編號A61K31/7052GK101164548SQ20071018504
公開日2008年4月23日 申請日期2000年9月8日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月10日
發(fā)明者P·菲施曼 申請人:坎-菲特生物藥物有限公司