專利名稱：：一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術領域：
，涉及一種苦瓜降血糖有效部位(KGE)的精制方法，具體是涉及苦瓜中一種降血糖有效部位甾苷類成分的精制方法。
背景技術：
：苦瓜為傳統(tǒng)中藥，古方中多有記載。近年來的國內(nèi)外研究及大量文獻報道顯示，苦瓜具有持續(xù)、高效的降血糖作用，且沒有任何毒副反應。苦瓜中含有的活性成分不僅能夠通過促進P-細胞分泌胰島素來調(diào)節(jié)血糖，同時還具有胰島素樣作用，且口服療效確切。將其開發(fā)成治療n型糖尿病的高效、低毒、廉價的現(xiàn)代中藥制劑，具有廣闊的巿場前景。目前制備苦瓜甾苷類成分的方法主要有水煎煮法、醇沉法、大孔吸附樹脂法等提取工藝。上述工藝存在雜質(zhì)多，有效成分含量低，含有大量糖類，并含有一定易吸潮成份，影響藥效和產(chǎn)品質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術問題，是提供一種苦瓜中降血糖有效部位齒苷類成分的精制方法。采用的技術方案是—1、制備脫色精制前的苦瓜藥液將苦瓜飲片干燥、粉碎，用10-95%乙醇回流提取，回收乙醇，濃縮得浸膏；將浸膏加水稀釋，上大孔吸附樹脂柱吸附，用pH2-8的水洗滌，棄去水洗脫液，再用5%-95%乙醇溶液洗脫，洗脫5-20倍樹脂柱體積，得到脫色精制前的苦瓜藥液。-2、精制過程收集樹脂柱的乙醇洗脫液，按洗脫液體積0.1_50%加入脫色劑，加熱回流0.l-10小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。'調(diào)節(jié)樹脂柱的洗脫體積，使其既能將甾苷類成分洗脫完全，洗脫液中藥物的濃度又適合脫色處理，兩個步驟銜接緊密。釆用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜齒苷含量可達50%以上。本發(fā)明提取的苦瓜齒苷可以直接制成各種制劑，如片劑、膠囊劑、顆粒抓、口服液、丸劑、混懸劑、滴丸劑、微丸劑、口含片、膠丸、軟膠囊、噴霧劑、氣霧劑、巴布劑、貼劑等，為實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化提供了一條新的途徑。"本發(fā)明的苦瓜甾苷提取精制工藝與傳統(tǒng)工藝相比，有以下3個優(yōu)點1、縮小劑量，提高中藥內(nèi)在質(zhì)量和制劑水平?？喙弦掖继崛∥锝?jīng)大孔吸附樹脂(MT)和脫色處理后得到的精制物可使藥效成分高度富集，雜質(zhì)少，-提取率僅為原生藥的1-5%(水煎法為20-30%左右，醇沉法為15%左右)，有利于制成現(xiàn)代劑型的中藥，也便于質(zhì)量控制。一2、減小產(chǎn)品的吸潮性。傳統(tǒng)工藝制備的中成藥大部分具有較強的吸潮性，是中藥生產(chǎn)及貯藏中長期存在的難題。而經(jīng)RAT和脫色處理后，可有效地去除提取物中大量的糖類、無機鹽、黏液質(zhì)等吸潮成分，有利于多種中藥劑型的生產(chǎn)，增強產(chǎn)品的穩(wěn)定性。3、改善制劑外觀顏色，提高有效成分含量。RAT的乙醇洗脫液中加入某種脫色劑加熱回流處理后，所得苦瓜齒苷的顏色為淡黃色或黃色，與脫色前的黃棕色或棕色相比更易于被接受，同時也進一步提高了苦瓜降血糖有效部位中苦瓜甾苷的含量。經(jīng)本工藝提取精制所得有效部位體積小、不吸潮、顏色淺，容易制成外型美觀的各種劑型，尤其適用于顆粒劑、膠囊劑和片劑，使中藥的粗、大、黑制劑升級換代為現(xiàn)代制劑。經(jīng)本工藝提取精制所得的苦瓜甾苷對不同原因所致的不同動物模型的高血糖均有一定程度的降糖作用，并且其降糖作用有的與陽性對照藥物相當甚至更強。本發(fā)明與傳統(tǒng)的溶劑萃取法相比，工藝簡單，工藝流程中不使用毒性易揮發(fā)的有機溶劑、安全可靠，生產(chǎn)成本低，對環(huán)境無污染。具體實施例方式一、'苦瓜降血糖有效部位的精制方法實施例1原料采用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用90%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的7、5倍，提取時間為2、l小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的15倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是l:3,用水洗滌、50%乙醇溶液洗脫15個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積10%加入活性炭，加熱回流2小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。釆用本法苦瓜降il糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50。/。以上。還可以用5%乙醇溶液洗脫。實施例2原料采用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的8、6倍，提取時間為2、2小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的25倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是l:5,用水洗滌、70%乙醇溶液洗脫20個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積7%加入活性炭，超聲處理1.5小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。釆用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50%以上。實施例3卜原料釆用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的10、8倍，提取時間為2、l小時，合并提取液，過il，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的25倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是l:5,用水洗滌、70%乙醇溶液洗脫20個柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積7%加入硅藻土，加熱回流2小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜齒苷。采用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜齒苷含量可達50%以上。實施例4原料釆用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用95%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材直量的8、6倍，提取時間為2、1小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的20倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是1:3,用水洗滌、90%乙醇溶液洗脫12個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積7%加入人1203,超聲處理1.5小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。釆用本法苦瓜齒苷降血糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50%以上。實施例5原料釆用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用90%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的8、8倍，提取時間為2、1小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的15倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是1:4,用水洗滌、90%乙醇溶液洗脫15個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積10%加入氧化鎂，加熱回流1小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。釆用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50%以上。實施例6原料釆用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的8、6倍，提取時間為2、2小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的15倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是l:7，用水洗滌、70%乙醇溶液洗脫20個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積的5%加入氧化鎂，80°C保溫處理4小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。采用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50%以上。實施例7一原料釆用去除雜質(zhì)的苦瓜，經(jīng)干燥、粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次用量為生藥材重量的8、6倍，提取時間為2、2小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，濃縮得浸膏，將浸膏加水稀釋至原藥材的15倍體積，上樹脂柱吸附，原藥材與樹脂的重量比是l:7，用水洗滌、90%乙醇溶液洗脫20個樹脂柱體積，收集乙醇洗脫液，按洗脫液體積的10%加入氧化鎂，80'C保溫處理4小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。釆用本法苦瓜降血糖有效部位中苦瓜甾苷含量可達50%以上。二、精制后的苦瓜甾苷的降血糖效果實例例8(一)對葡萄糖性小鼠、鏈脲霉素及四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖的降血糖作用1試驗材料1.r儀器7230分光光度計(上海分析儀器廠)、80-2離心沉淀器(上海手術器械廠)、DK-98-I電子恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)、可調(diào)微量移液管(10-50ul)，(上海亞榮生化儀器廠)、可調(diào)定量加液器(上海求精玻璃儀器廠)、GT-1640超級血糖測試儀(日本京都)。1.2藥材與試劑苦瓜藥材干品購于廣州，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學植物教研室王冰教授鑒定為葫蘆科苦瓜屬植物苦瓜(MomordicaCharantiaL.)的干燥果實；苦瓜甾苷由上述苦瓜藥材經(jīng)本課題組提取純化制得(總甾苷含量大于50%)。鏈脲霉素(Sigma公司，北京分裝，規(guī)格100mg);四氧嘧P定(Fluka公司生產(chǎn))葡萄糖試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號050508);降糖靈(天津太平洋制藥有限公司，批號030809);葡萄糖(沈陽化學試劑廠，批號20010306);血糖試紙(日本產(chǎn))上海易維經(jīng)貿(mào)發(fā)展有限公司總經(jīng)銷；柱層析硅膠、薄層層析硅膠G為青島海洋化工廠產(chǎn)品，其他試劑均為分析純。1.3動物健康昆明種小白鼠，體重23±lg,由遼寧中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供，許可證SCX(遼)2004-0018。各組動物均在同樣環(huán)境下飲水、攝食、保持自然光照。溫度25'C,濕度60-70%。顆粒飼料由沈陽巿于洪區(qū)動物實驗銅料廠提供。2方法2.1"苦瓜甾苷的制備取苦瓜藥材，用70%乙醇回流提取3次。合并濾液，通過D-101大孔吸附樹脂柱，用水洗至無色，然后用70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，脫色，過濾，濾液減壓濃縮，得苦瓜甾苷。經(jīng)比色測定，苦瓜甾苷的含量為55.2%。2.2苦瓜甾苷對葡萄糖性小鼠高血糖的影響取健康小鼠50只，雌雄各半，飼養(yǎng)3d后，隨機分為5組(對照組、模型組、大劑量組、小劑量組、降糖靈組)，每組10只。于實驗前禁食不禁水，12h后，灌胃給藥。大、小劑量組分別給予苦瓜甾苷200、100mg/kg，降糖靈組給予降糖靈100mg/kg,對照與模型組給予同體積蒸餾水。30min后各組分別灌胃給予葡萄糖溶液4.0g/kg，對照組給予同體積的蒸餾水。在給藥后60、120min時，分別從小鼠眶靜脈竇取血，血樣離心(3000rpm/10min)，分離血清，按葡萄糖試劑盒說明書操作測定血糖含量。實驗結果經(jīng)統(tǒng)計學分析選用t檢驗法，比較各給藥組與模型組之間的差異。2.3苦瓜甾苷對鏈脲霉素所致糖尿病小鼠高血糖的影響選合格小鼠92只(雄性)，飼養(yǎng)3d后，取12只為對照組，腹腔注射生理鹽水，其余80只腹腔注射鏈脲霉素150mg/kg,72h后測試小鼠空腹血糖含量，取血糖值在16-24mmol/L之間小鼠，按血糖含量高低分為4組(模型組、大劑量組、小劑量組、降糖靈組)每組12只。大、小劑量組分別灌胃給予苦瓜齒苷20(L100mg/kg,降糖靈組給予降糖靈100mg/kg,對照組及模型組給予同體積的蒸餾水。每曰灌胃一次，連續(xù)給藥14d。在給藥后3、7、14d時分別測試小鼠血糖含量，小鼠測血糖前禁食12h,測試時把小鼠放入玻璃鐘罩內(nèi)，露出尾部，從尾尖部取微量血，用超級血糖測試儀測定血糖含量記錄血糖值。并統(tǒng)計分析用t檢驗法比較對照組與模型組之間、各給藥組與模型組之間的差異。2.4，—苦瓜甾苷對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖的影響選合格小鼠92只(雄性)，飼養(yǎng)3d后，取12只為對照組，腹腔注射生理鹽水，其余80只腹腔注射四氧嘧啶220mg/kg,72h后測試小鼠空腹血糖含量，取血糖值在16-24mmol/L之間小鼠，按血糖含量高低分為4組(模型組、大劑量組、小劑量組、降糖靈組)每組12只。大、小劑量組分別灌胃給予苦瓜甾苷200、100mg/kg,降糖靈組給予降糖靈100mg/kg,對照組及模型組給予同體積的蒸餾水。每日灌胃一次，連續(xù)給藥14d。在給藥后3、7、14d時分別測試小鼠血糖含量，小鼠測血糖前禁食12h,測試時把小鼠放入玻璃鐘罩內(nèi)，露出尾部，從尾尖部取微量血，用超級血糖測試儀測定血糖含量記錄血糖值。并統(tǒng)計分析用t檢驗法比較對照組與模型組之間、各給藥組與模型組之間的差異。3結果3.1一口苦瓜甾苷對葡萄糖性小鼠高血糖的影響小鼠灌胃給予葡萄糖30min后，模型組血糖含量明顯升高，灌胃給予苦瓜甾苷大、小劑量組及降糖靈組血糖含量明顯低于模型組，在藥后60min,降糖率分別為30.2%、28.3%、39.6%，結果見下表。表l-l苦瓜甾苷對葡萄糖性小鼠高血糖的影響(X±s,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>與模型組比較，*p<0.05,**p<0.013.2苦瓜甾苷對鏈脲霉素所致糖尿病小鼠高血糖的影響小鼠腹腔注射鏈脲霉素72h后，其血糖濃度明顯高于對照組。給予苦瓜甾苷200、100mg/kg、連續(xù)灌胃14d。在給藥3d時測試血糖含量稍有下降，大、小劑量組及降糖靈組的降糖率分別為18.7%、12.5%、25.4%。給藥7d時降糖率分別為27.2%、29.8%、28.5%，給藥14d時降糖作用顯著，降糖率分別為46.5%、41.4%、44.1%。結果表明苦瓜甾苷對鏈脲霉素所致糖尿病小鼠也具有較好的降血糖作用，結果見下表。表l-2苦瓜甾苷對鏈脲霉素所致糖尿病小f^高血糖的影響(X士s,n=12)_<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與對照組比較，AAp復01;與模型組比較，*p<0.05,**p<0.01。3.3苦瓜甾苷對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖的影響小鼠腹腔注射四氧嘧啶72h后，其血糖濃度明顯高于對照組。給予苦瓜甾苷200、100mg/kg、連續(xù)灌胃14d。在給藥3d時測試血糖含量稍有下降，給藥7d時降糖率分別為53.5%、33.9%、56.7%,給藥14d時降糖作用更為明顯，降糖率分別為59.4%、49.3%、60.2%。結果表明苦瓜甾苷對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠也具有較好的降血糖作用，結果見下表。表1-3苦瓜甾苷對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高-血糖的影響(X士s，n=12)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與對照組比較，AAp<0.01;與模型組比較，**p<0.01。斗結論:小鼠灌服葡萄糖及注射鏈脲霉素或四氧嘧啶造型后，血糖濃度明顯上升，與對照組比較上升率提高了4倍，給藥后各給藥組與模型組比較，均有不同程度的血糖下降。在小鼠灌服葡萄糖30min時血糖含量明顯降低，于模型組比較，大、小劑量及降糖靈組的降糖率分別為30.2%、28.3%、39.6%。在小鼠連續(xù)灌胃給藥14d后，對鏈脲霉素所致糖尿病小鼠的降糖作用尤為明顯，大、小劑量組及降糖靈組的降糖率分別為46.5%、41.4%、44.1%。對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降糖作用尤為明顯，大、小劑量組及降糖靈組的降糖率分別為59.4%、49.3%、60.2%。從苦瓜甾苷對小鼠降血糖作用的結果表明苦瓜甾苷具有較好的降血糖作用。(二)對正常小鼠和腎上腺素性高血糖小鼠的血糖含量、對四氧嘧嚏性糖尿病家兔血糖含量及胰島素含量的影響1儀器與材料1.1.儀器7230分光光度計(上海分析儀器廠)、80-2離心沉淀器(上海手術器械廠)、可調(diào)微量移液管U0-50ul),(上海亞榮生化儀器廠)、可調(diào)定量加液器(上海求精玻璃儀器廠)、電熱恒溫水浴鍋(河北黃驊巿齊務五金電器廠)。1.2藥物苦瓜提取物，每克相當于71.9克生藥，由遼寧省中藥現(xiàn)代化工程技術中心，批號20030506。用蒸餾水配成所需濃度供試驗用；糖尿靈片，江西天施康中藥股份有限公司生產(chǎn)，批號20040212;優(yōu)降糖，北京太洋藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號20030806。降糖靈，山東博山制藥有限公司生產(chǎn)，批號20030815。1.3試劑四氧嘧啶，英國Fluka公司生產(chǎn)；腎上腺素，天津氨基酸公司生產(chǎn)；胰島素放射免疫分析藥盒，北京北方生物技術研究所生產(chǎn)。1.4—動物小白鼠，昆明種，22-24g，雌雄兼用，由沈陽藥科大學實驗動物中心提供，合格證號SCXK(遼)2003-008。日本大耳白家兔，2.7-3.8kg,雄性，由中國醫(yī)科大學第二臨床學院醫(yī)學實驗動物中心提供，合格證號SCXK(遼)2003-0013。顆粒飼料購于東北第六制藥廠飼料分廠。2方法與結果.2.1苦瓜甾4的制備取苦瓜藥材，用70%乙醇回流提取3次。合并濾液，通過D-101大孔吸附樹脂柱，用水洗至無色，然后用90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，脫色，過濾，濾液減壓濃縮，得苦瓜甾苷。經(jīng)比色法測定，苦瓜齒苷的含量為65.2%。2.2對正常小鼠血糖含量的影響取昆明種小鼠60只，雌雄各半，按體重性別隨機分為5組，每組12只空白對照組，等容量水；優(yōu)降糖組50mg/kg;苦瓜甾苷大劑量組300mg/kg;中劑量組150mg/kg;小劑量組75mg/kg。動物禁食8小時后，自眼眶后靜脈叢取血，用葡萄糖氧化酶法測定給藥前正常血糖值。取血后即灌胃給藥，體積為0.25ml/10g。在給藥后3、6和9小時取血，測定血糖含量。結果見下表。表2-l對正常小鼠血糖含量的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.04±4.88±4.75±4.64±0.640.610.520.534.99±5.06±5.04±5.08±0.510.590.560.54與空白對照組比較*P<T^結果表明，苦瓜甾苷對正常小鼠未見明顯降低血糖作用，優(yōu)降糖組在藥后3、6小時均有降糖作用，與對照組比較p〈0.05。2.3對腎上腺素性高血糖小鼠血糖含量的影響取小鼠84只，20-22g,雌雄各半，按體重性別隨機分為7組，每組12只空白對照組；模型組；降糖靈組100mg/kg;糖尿靈片組1600mg/kg;苦瓜齒苷大劑量組300mg/kg;中劑量組150mg/kg;小劑量組75mg/kg。動物禁食8小時后取血測血糖值，然后灌胃給藥，每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。末次藥前動物禁食12小時,末藥后l小時，腹腔注射腎上腺素240mg/kg(空白對照組除外)，30分鐘后取血，測血糖值。結果見下表。表2-2對腎上腺素性高血糖小鼠血糖含量的影響(X士SD)組別(齊i7k血糖值(畫i/L)降！率苦瓜中苦瓜15075與空白對照組比較"p<0.01;與模型組比較**p<0.01結果表明，苦瓜齒苷對腎上腺素性高血糖小鼠具有明顯的降糖作用，其作用強于糖尿靈片。2.4對四氧嘧啶引起家兔糖尿病模型的血糖含量和胰島素水平的影響取健康雄性家兔80只，體重2.5-3.Okg，禁食32小時后耳緣靜脈注射10%四氧嘧啶生理鹽水溶液150mg/kg，72小時后耳緣靜脈取血測定血糖及胰島素含量，選造模成功的高血糖家兔60只(14.9-28.8mmol/L),隨機分為6組，每組10只，另設空白對照組即空白對照組；模型組；降糖靈組80mg/kg;糖尿靈組640mg/kg;苦瓜齒苷大劑量組120mg/kg;中劑量組60rag/kg;小劑量組30mg/kg。每天灌胃給藥l次，連續(xù)給藥7天，于末次藥后24小時，動物禁食取血測定血糖及胰島素含量。結果見下表。一125.34±0.66—1218.6±1.28"—100128.61±0.82**53.716001212.1±1.10**34.93001210.8±1.39**41.91501211.7±1.50**37.1751217.4±2.426.45對l靈靈大中小白照g糖尿片瓜瓜瓜空#降糖苦苦苦表2-3對四氧嘧啶家兔血糖含量和胰島素水平的影響(X±SD)劑量動物血糖(1M10l/L)胰島素(u/ml)組別mg/kg數(shù)(只)給藥前給藥后給藥前給藥后空白105.46±5.53±67.8±70.1±1.151.038.639.65模型1022.9±22.2±45.9±42.5±3.71"3.57"7.45"8.29"降糖靈801022.5±3.5410.1±3，13**46.2±6.0360.9±7.19糖尿靈6401023.1±2.8413.2±3.18**54.9±8.1249.0±8.29苦瓜大1201023.0±3.5610.9±3.12**52.2±6.2845.1±6.92苦瓜中601023.1±3.0713.9±3.08**44.9±6.0546.1±5.59苦瓜小301022.0±3.4918.5±3.16*45.2±6.5343.1±8.17與空白對照組比較"P<0.01;與模型組比較*p〈0.05**p<0.01結果表明，模型組與空白對照組比較差異顯著P<0.01,說明造模成功?？喙乡捃湛擅黠@降低四氧嘧啶性高血糖家兔的血糖值(P〈0.05，0.01),具有明顯的降糖作用，其作用優(yōu)于糖尿靈片，但對胰島素值無明顯影響。3射侖一小鼠注射腎上腺素及家兔注射四氧嘧啶造型后，血糖濃度明顯上升，與對照組比較有顯著性差異，給藥后各給藥組與模型組比較，均有不同程度的血糖下降。在小鼠連續(xù)給藥7天后對腎上腺素性糖尿病小鼠血糖明顯降低，苦瓜甾苷大、中劑量組降糖率分別為41.6%、37.1%,糖尿靈組為34.9%，其降糖作用優(yōu)于糖尿靈組。對四氧嘧啶所致糖尿病家兔的降糖作用尤為明顯，苦瓜甾苷大、中劑量組降糖率為50.9%、37.4%,降糖作用與降糖靈(54.5%)比較無顯著性差異，強于糖尿靈組(40.5%)。以上結果i明苦瓜甾苷對腎上腺素性高血糖小鼠血糖值有明顯降低作用；對四氧嘧啶性糖尿病家兔糖值也有明顯降低作用，但對其胰島素值無明顯影響；對正常小鼠血糖值未見明顯影響。(三)綜上所述，苦瓜甾苷對不同原因所致的不同動物模型的高血糖均有一定程度的降糖作用，并且其降糖作用有的與陽性對照藥物相當甚至更強。以上的試驗證明通過最佳工藝制備的苦瓜總甾苷具有降血糖效果，并且降糖喊果比較明顯，是苦瓜降糖的有效部位之一。權利要求1、一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于包括下述步驟(1)制備脫色精制前的苦瓜藥液將苦瓜飲片干燥、粉碎，用10-95％乙醇回流提取，回收乙醇，濃縮得浸膏；將浸膏加水稀釋至一定濃度，上大孔吸附樹脂柱吸附，用pH2-8的水洗滌，棄去水洗脫液，再用5％-95％乙醇溶液洗脫，洗脫5-20倍樹脂柱體積，得到脫色精制前的苦瓜藥液。(2)精制過程收集樹脂柱的乙醇洗脫液，按洗脫液體積0.1-50％加入脫色劑，加熱回流0.1-10小時，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。2、根據(jù)權利要求l所述的一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于苦瓜降血糖有效部位脫色精制用的溶液載體為20%-90%的乙醇溶液。3、根據(jù)權利要求1所述的一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于脫色精制前藥液的濃度相當于lg原藥材/40-80mL90y。的乙醇溶液。4、根據(jù)權利要求1所述的一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于所述脫色劑的種類為氧化鎂,脫色劑的用量為脫色精制前藥液體積的0.1-50°/。。5、根據(jù)權利要求1所述的一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于所述脫色劑的使用方法為加熱回流法。6、根據(jù)權利要求1所述的一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，其特征在于精制后的苦瓜降血糖有效部位為甾苷類成分。7、根據(jù)權利要求6所述的精制后的苦瓜降血糖有效部位，其特征在于所述的甾苷類成分可與藥學上可接受的載體混合制成臨床上接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、丸劑、混懸劑、滴丸劑、微丸劑、口含片、膠丸、軟膠囊、噴霧劑、氣霧劑、巴布劑、貼劑。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
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，公開了一種苦瓜降血糖有效部位的精制方法，(1)制備脫色精制前的苦瓜藥液將苦瓜飲片干燥、粉碎，用乙醇回流提取，濃縮得浸膏；將浸膏稀釋，上大孔吸附樹脂柱吸附，洗滌，再用乙醇溶液洗脫，得到脫色精制前的苦瓜藥液。(2)精制過程收集樹脂柱的乙醇洗脫液，加入脫色劑，加熱回流，濾過，減壓濃縮，真空干燥，即得苦瓜甾苷。本發(fā)明提取的苦瓜甾苷可以直接制成各種制劑，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、丸劑、混懸劑、滴丸劑、巴布劑、貼劑等。本發(fā)明與傳統(tǒng)工藝相比，具有體積小、不吸潮、有效成分含量高的特點。與溶劑萃取法相比，工藝流程中不使用毒性易揮發(fā)的有機溶劑、安全可靠，生產(chǎn)成本低，對環(huán)境無污染。文檔編號A61K36/185GK101181336SQ20071015849公開日2008年5月21日申請日期2007年11月26日優(yōu)先權日2007年11月26日發(fā)明者健關,趙余慶申請人:沈陽藥科大學