專利名稱：一種山豆根總生物堿軟膠囊及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥新藥研發(fā)領(lǐng)域。具體涉及一種山豆根總生物堿軟膠囊制劑及其制備方法，同時本發(fā)明還涉及該制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
山豆根來源于豆科植物越南槐Sophora tonkinesis Gapnep的干燥根及根莖。其味苦、性寒，有毒。歸肺、胃經(jīng)。功能主治可清熱解毒，消腫利咽。用于火毒蘊(yùn)結(jié)，咽喉腫痛，齒齦腫痛。為清利咽喉，消腫止痛之藥。山豆根功效始載于《開寶本草》“主解諸藥毒、止痛、消瘡腫毒，急黃發(fā)熱咳嗽”。
現(xiàn)代藥理研究表明，山豆根具有抗腫瘤、抗實(shí)驗(yàn)性心律失常、抗?jié)?、抗真菌、消炎?zhèn)痛等作用，對腦缺血再灌注損傷有明顯保護(hù)作用。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，山豆根中含有多種生物堿類成分，另外還有黃酮、三萜、多糖、甾醇等。其中，以山豆根藥材提取精制的山豆根總生物堿，具有抑制腫瘤生長的活性，是治療腫瘤的有效部位，(山豆根總生物堿抗腫瘤作用的初步研究，南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，21(4)253-254)。該文獻(xiàn)還報(bào)道了山豆根總生物堿在100mg/kg劑量連續(xù)給藥時出現(xiàn)了毒性反應(yīng)，提示臨床用藥時應(yīng)注意。因此提高有效成分的含量，降低給藥劑量，能夠降低毒副作用。公開號為CN1457778A的中國專利公開了山豆根口服制劑、制備方法及應(yīng)用，主要涉及一種山豆根活性成分提取物制成的保肝護(hù)肝的口服制劑，該專利采用常規(guī)的酸堿調(diào)pH值法制備山豆根提取物，技術(shù)含量低，酸堿的使用量過大，對環(huán)境污染大；并且總生物堿提取率較低(提取率為1.3％)，沒有確切說明山豆根總生物堿的含量，只是說明總生物堿中苦參堿的含量≥70％，使得用該提取物制成的制劑質(zhì)量難以控制。也就增加了制劑使用的危險(xiǎn)性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種山豆根總生物堿軟膠囊劑，其中山豆根總生物堿的含量以苦參堿計(jì)≥85％，苦參堿的含量≥80％。使該制劑質(zhì)量可控，能較好地保證療效和藥物穩(wěn)定性。
本發(fā)明要解決的另一個技術(shù)問題是提供上述山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法，及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的山豆根總生物堿的制備方法可采用本領(lǐng)域公知的方法制備。本發(fā)明在此提供一種可行的方法，包括以下步驟(1)提取山豆根藥材粉碎，用水或10％～40％乙醇提取；(2)濃縮提取后減壓濃縮，蒸去水或乙醇，得相對密度為1.10～1.15的濃縮液；(3)酸化濃縮液用稀酸酸化至pH3～4之間，離心(4000r/min，10min)，得上清液；(4)除雜上清液經(jīng)樹脂柱吸附并用水或10％～50％乙醇淋洗除去雜質(zhì)；(5)堿化用稀堿堿化樹脂柱；(6)洗脫用10％～50％乙醇洗脫吸附于樹脂柱上的山豆根總生物堿；(7)干燥洗脫液經(jīng)減壓濃縮、干燥，得含山豆根總生物堿的粗品；(8)精制上述粗品粉碎，溶解，過硅膠柱，乙酸乙酯洗脫進(jìn)一步精制，得山豆根總生物堿，總堿含量≥85％，苦參堿的含量≥80％，提取率≥30％。
上述山豆根總生物堿中主要含有骨架為兩個喹喏里西啶基核豎向稠和而成的苦參堿類生物堿，其代表成分為苦參堿、氧化苦參堿，槐果堿和槐醇。
苦參堿 氧化苦參堿 槐醇 本發(fā)明所采用的山豆根總生物堿含量較高，成分清楚，質(zhì)量可控，適于工業(yè)化大生產(chǎn)，將其制成適合于臨床需要的藥物制劑，能夠降低給藥劑量，減少毒副作用，提高藥物穩(wěn)定性、生物利用度及療效。
本發(fā)明所述的山豆根總生物堿軟膠囊，由內(nèi)容物和囊殼兩部分構(gòu)成，其特征在于所述內(nèi)容物的組成及其重量比例為山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)∶穩(wěn)定劑＝0.8～1.2∶0.8～3.2∶0～0.2；囊殼的組成及其重量比例為明膠∶甘油∶水∶防腐劑＝0.8～1.2∶0.2～0.5∶0.8～1.2∶0～0.005。
本發(fā)明所述的分散介質(zhì)可選自聚乙二醇、丙二醇、甘油、植物油或礦物油中的一種或幾種。所述的植物油可以是大豆油、花生油或者茶油等。
本發(fā)明所述的穩(wěn)定劑為蜂蠟。
本發(fā)明所述的防腐劑可選自丁香油、山梨酸、山梨酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸丁酯鈣、苯甲醇、苯甲酸、泥泊金甲酯、泥泊金乙酯或泥泊金丙酯中的一種或幾種。
上述山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法，包括以下步驟(1)取山豆根總生物堿，與分散介質(zhì)混合，加或者不加穩(wěn)定劑，混合均勻，得軟膠囊內(nèi)容物；(2)按比例取明膠、甘油和水混合，加或者不加防腐劑，混合均勻，制備軟膠囊囊殼；(3)取上述內(nèi)容物和囊殼，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制軟膠囊，干燥，即得。
上述山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法(2)中，根據(jù)內(nèi)容物的理化性質(zhì)及特征，還可以加入聚乙二醇增加軟膠囊的穩(wěn)定性。
為了便于理解本發(fā)明所述的山豆根總生物堿軟膠囊在抗腫瘤方面的藥用價(jià)值，本發(fā)明人使用上述方法制備的軟膠囊完成了以下藥效學(xué)試驗(yàn)1.山豆根總生物堿軟膠囊對小鼠H22肝癌實(shí)體瘤的治療作用山豆根總生物堿軟膠囊按照實(shí)施例1的方法制備，山豆根總生物堿的含量以苦參堿計(jì)為85％。苦參堿含量為81％。
為研究山豆根總生物堿軟膠囊的體內(nèi)抗腫瘤活性，取狀態(tài)良好的H22腹腔荷瘤小鼠，無菌抽取腹水(內(nèi)含大量H22腫瘤細(xì)胞)，以生理鹽水稀釋成濃度5×107/ml，接種于正常小鼠前肢皮下，每只接種0.2ml。接種24h后，按體重隨機(jī)分為荷瘤對照組、5-氟尿嘧啶注射液(5-FU)組(30mg/kg)、山豆根總生物堿軟膠囊小(10mg/kg)、中(20mg/kg)、大(40mg/kg)劑量組。每組12只動物，接種后次日起，每天給藥1次，連續(xù)給藥10天。末次給藥后24h，小鼠稱重后脫臼處死，剝瘤稱重，計(jì)算抑瘤率(％)，試驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1 山豆根總生物堿軟膠囊給藥10天對小鼠H22肝癌實(shí)體瘤的影響(x±s)

注與荷瘤對照組比較，明顯降低，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
由表1結(jié)果可知，5-FU組與荷瘤對照組比較，藥后體重明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異具有非常顯著性(P＜0.01)；山豆根總生物堿軟膠囊小、中、大劑量組與荷瘤對照組比較，藥后體重?zé)o明顯變化，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異未見顯著性(P＞0.05)。
5-FU組與荷瘤對照組比較，瘤重明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異具有極顯著性(P＜0.001)；山豆根總生物堿軟膠囊小、中、大劑量組與荷瘤對照組比較，瘤重均明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異具有顯著性(P＜0.05，P＜0.01或P＜0.001)。5-FU組的抑瘤率為66.7％，山豆根總生物堿軟膠囊小、中、大劑量組的抑瘤率分別為32.1％，44.1％，52.2％，具有較好的劑量-效應(yīng)關(guān)系。以上結(jié)果提示山豆根總生物堿軟膠囊可明顯抑制小鼠H22肝癌實(shí)體瘤的增長。
2.山豆根總生物堿軟膠囊對裸鼠移植性胃癌的治療作用山豆根總生物堿軟膠囊按照實(shí)施例2的方法制備，山豆根總生物堿的含量以苦參堿計(jì)為88％，苦參堿的含量為82％。
為研究山豆根總生物堿軟膠囊對裸鼠移植性胃癌人源性腫瘤是否具有治療作用，采用注射濃度為5×106/ml的BGC-823細(xì)胞至裸鼠腋部皮下的方法，接種腫瘤細(xì)胞0.2ml/只，接種后24h，將動物隨機(jī)分為荷瘤對照組(生理鹽水)、陽性對照組(5-FU 30mg/kg)，山豆根總生物堿軟膠囊小(10mg/kg)、中(20mg/kg)和大(40mg/kg)劑量組，另增設(shè)未接種腫瘤細(xì)胞的裸鼠作為空白對照組，除荷瘤對照組與5-FU組為13只動物以外，其余各組動物數(shù)均為11只。在可摸到腫瘤小塊(即接種腫瘤后7天)，各組藥物開始給藥。陽性藥采取腹腔注射途徑，隔2日給藥一次，其余各組均灌胃給藥，每天一次，連續(xù)28天，3天稱量一次體重，并于末次給藥后取瘤稱瘤重。試驗(yàn)結(jié)果見表2，表3。
表2 山豆根總生物堿軟膠囊給藥28天后對裸鼠移植性胃癌實(shí)體瘤瘤重的影響(x±s)


注與荷瘤對照組比較，明顯降低，*P＜0.05，**P＜0.01表3 山豆根總生物堿軟膠囊對裸鼠體重的影響(x±s)

山豆根總生物堿軟膠囊小、中、大劑量組與荷瘤對照組比較，瘤重均明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，且中、大劑量組的抑瘤率大于30％，山豆根總生物堿軟膠囊各劑量組對裸鼠體重?zé)o明顯影響(P＞0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，山豆根總生物堿軟膠囊對裸鼠移植性胃癌實(shí)體瘤具有明顯的治療作用。
具體實(shí)施例以下通過實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)施，但不應(yīng)以此限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。
實(shí)施例1山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(大豆油)∶蜂蠟＝1∶0.8∶0.125囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶水∶泥泊金乙酯＝0.8∶0.5∶1∶0.002取蜂蠟置大豆油中，加熱至溶解，加入山豆根總生物堿，混合均勻，放冷至室溫后，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、水混合均勻，過濾，濾液加入泥泊金乙酯，混勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制5號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
實(shí)施例2山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(甘油∶聚乙二醇＝1∶1.5)＝0.8∶2.5囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶聚乙二醇∶水＝1∶0.35∶0.12∶1.2取山豆根總生物堿，于水浴65℃條件下，先與甘油混合，分散均勻，再加入聚乙二醇進(jìn)行攪拌，使混合均勻，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、水、聚乙二醇混合均勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制6號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
實(shí)施例3山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(甘油∶丙二醇＝1∶2)＝1.2∶3囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶水∶山梨酸甲酯＝1.2∶0.2∶1∶0.005取山豆根總生物堿，于水浴65℃條件下，先與甘油混合，分散均勻，再加入丙二醇進(jìn)行攪拌，使混合均勻，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、水混合均勻，過濾，濾液加入山梨酸甲酯，混勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制6號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
實(shí)施例4山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(花生油)∶蜂蠟＝1.1∶1.8∶0.2囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶水＝1.1∶0.4∶0.8取蜂蠟置花生油中，加入至溶解，加入山豆根總生物堿，混合均勻，放冷至室溫后，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、水混合均勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制8號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
實(shí)施例5山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(甘油∶聚乙二醇＝1.2∶2)＝0.9∶3.2囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶聚乙二醇∶水＝0.9∶0.5∶0.05∶1.2
取山豆根總生物堿，于水浴65℃條件下，先與甘油混合，分散均勻，再加入聚乙二醇進(jìn)行攪拌，使混合均勻，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、聚乙二醇、水混合均勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制6號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
實(shí)施例6山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法內(nèi)容物組成及重量配比山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)(茶油)∶蜂蠟＝1∶1.4∶0.15囊殼組成及重量配比明膠∶甘油∶聚乙二醇∶水＝0.9∶0.5∶0.15∶1.2取蜂蠟置茶油中，加入至溶解，加入山豆根總生物堿，混合均勻，放冷至室溫后，得軟膠囊內(nèi)容物；取上述比例的明膠、甘油、聚乙二醇、水混合均勻，制備軟膠囊囊材；采用壓制法，壓制6號軟膠囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根總生物堿軟膠囊。
權(quán)利要求
1.一種山豆根總生物堿軟膠囊，由內(nèi)容物和囊殼兩部分構(gòu)成，其特征在于所述的內(nèi)容物的組成及其重量比例為山豆根總生物堿∶分散介質(zhì)∶穩(wěn)定劑＝0.8～1.2∶0.8～3.2∶0～0.2；囊殼的組成及其重量比例為明膠∶甘油∶水∶防腐劑＝0.8～1.2∶0.2～0.5∶0.8～1.2∶0～0.005。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山豆根總生物堿軟膠囊，其特征在于所述的山豆根總生物堿的含量以苦參堿計(jì)≥85％，苦參堿的含量≥80％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山豆根總生物堿軟膠囊，其特征在于所述的分散介質(zhì)可選自聚乙二醇、丙二醇、甘油、植物油或礦物油中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山豆根總生物堿軟膠囊，其特征在于所述的穩(wěn)定劑為蜂蠟。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山豆根總生物堿軟膠囊，其特征在于所述的防腐劑可選自丁香油、山梨酸、山梨酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸丁酯鈣、苯甲醇、苯甲酸、泥泊金甲酯、泥泊金乙酯或泥泊金丙酯中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法，包括以下步驟(1)取山豆根總生物堿，與分散介質(zhì)混合，加或者不加穩(wěn)定劑，混合均勻，得軟膠囊內(nèi)容物；(2)按比例取明膠、甘油和水混合，加或者不加防腐劑，混合均勻，制備軟膠囊囊殼；(3)取上述內(nèi)容物和囊殼，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制軟膠囊，干燥，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的山豆根總生物堿軟膠囊的制備方法，其特征在于制備方法(2)中還可以加入聚乙二醇。
8.權(quán)利要求1～7任一權(quán)利要求所述的山豆根總生物堿軟膠囊在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種山豆根總生物堿軟膠囊制劑，該軟膠囊劑由內(nèi)容物和囊殼兩部分構(gòu)成，其中內(nèi)容物是由山豆根總生物堿、分散介質(zhì)、穩(wěn)定劑組成；囊殼是由明膠、甘油、水、防腐劑組成。本發(fā)明還公開了該軟膠囊的制備方法。本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單，生產(chǎn)的山豆根總生物堿軟膠囊質(zhì)量可控，穩(wěn)定性好，服用方便，在抗腫瘤方面有很好的藥用價(jià)值。
文檔編號A61K9/48GK101077349SQ20061008113
公開日2007年11月28日 申請日期2006年5月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月22日
發(fā)明者周亞偉 申請人:周亞偉