專利名稱：一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，屬于生物科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
生物經(jīng)濟(jì)是全球二十一世紀(jì)的新興經(jīng)濟(jì)，以生物技術(shù)為支撐的生物產(chǎn)業(yè)已成為新興的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)，是國民經(jīng)濟(jì)的重要組成部分。細(xì)胞培養(yǎng)是生物技術(shù)中細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)。細(xì)胞的質(zhì)量直接影響科學(xué)研究結(jié)果的準(zhǔn)確性及生物制品的質(zhì)量及安全。細(xì)胞培養(yǎng)中的防控污染問題已成為生物技術(shù)領(lǐng)域中的重大課題。在現(xiàn)有的細(xì)胞培養(yǎng)中，為防控細(xì)胞污染，最常用的方法就是使用抗生素，常用的抗生素有青霉素、鏈霉素、卡那霉素等，其中使用最多的就是青霉素和鏈霉素，即雙抗。雙抗可以作為預(yù)防污染的藥物添加到細(xì)胞培養(yǎng)液中，而其它藥物則要在污染發(fā)生后才能針對(duì)性地使用。但雙抗的抗菌譜較窄，在細(xì)胞培養(yǎng)條件下藥效時(shí)間極短，難以維系長期的細(xì)胞培養(yǎng)。近幾年國外推出一種新的抗菌藥，其名稱為普來斯牟欣(Plasmocin)，該藥可以預(yù)防和清除細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，但該藥價(jià)格極為昂貴，不能室溫儲(chǔ)存，致使許多單位難以承受而放棄使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，用于預(yù)防和消除細(xì)胞培養(yǎng)中的污染。
本發(fā)明通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，其特征在于每升產(chǎn)品含有乙基環(huán)丙沙星1-50克。
所述防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，其特征在于每升產(chǎn)品除含有乙基環(huán)丙沙星1-50克外，還含有KCl 015-0.25克KH2PO40.15-0.25克NaCl 6.00-10.00克Na2HPO40.86-1.43克余量為純水；或者KCl 0.30-0.50克KH2PO40.045-0.075克NaCl 6.00-10.00克NaHCO30.26-0.44克Na2HPO40.036-0.060克余量為純水；或者NaCl6.80-11.25克余量為純水。
上述配方中，乙基環(huán)丙沙星是主藥，其它為輔劑。主藥濃度將隨產(chǎn)品濃度倍比的變化而變化。
本產(chǎn)品可分為預(yù)防型和清除型兩種，清除型產(chǎn)品的主藥濃度是預(yù)防型產(chǎn)品的2-3倍。對(duì)于預(yù)防型產(chǎn)品，主要使用在細(xì)胞培養(yǎng)的污染預(yù)防上，對(duì)于清除型產(chǎn)品，主要使用在細(xì)胞培養(yǎng)的污染清除上。
本產(chǎn)品的pH值在7.0-8.0之間，一般為7.4左右。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點(diǎn)和效果1、本發(fā)明與普來斯牟欣(Plasmocin)相比，首先，從價(jià)格來說，每配制一定體積的防控污染細(xì)胞培養(yǎng)液，所使用本產(chǎn)品的成本只是使用普來斯牟欣(Plasmocin)的1％左右。其次，從存儲(chǔ)方式來說，普來斯牟欣(Plasmocin)必須冷凍儲(chǔ)存，而本產(chǎn)品只需要室溫儲(chǔ)存就行；第三，從保質(zhì)期來說，本產(chǎn)品的保質(zhì)期比普來斯牟欣(Plasmocin)長一倍以上。
2、本發(fā)明與雙抗相比，首先，從抗菌譜來說，雙抗只對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌敏感，而本產(chǎn)品除此之外，還對(duì)支原體敏感；其次，從培養(yǎng)條件下的藥效期來說，雙抗只能維持幾個(gè)小時(shí)，而本產(chǎn)品的藥效卻在1個(gè)月以上；第三，從存儲(chǔ)方式來說，配好的雙抗溶液必須冷凍保存，而本產(chǎn)品在室溫就能儲(chǔ)存。
3、本發(fā)明除了可以用于細(xì)胞培養(yǎng)之外，還可對(duì)其他有機(jī)培養(yǎng)基材料進(jìn)行凈化處理。也可用于對(duì)一些常用器械的簡(jiǎn)單沖洗，對(duì)分離純化材料的應(yīng)急凈化處理等。
以100倍的本產(chǎn)品為例，使用前首先分清細(xì)胞是否污染，沒有污染可使用預(yù)防型產(chǎn)品，有污染可使用清除型產(chǎn)品。
對(duì)于預(yù)防型產(chǎn)品，只需把產(chǎn)品按照1％的體積比例，添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)，用于細(xì)胞培養(yǎng)就行，其他培養(yǎng)操作過程與現(xiàn)有技術(shù)相同。
對(duì)于清除型產(chǎn)品，只需把產(chǎn)品按照1％的體積比例，添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)，在細(xì)胞還沒有死亡之前，移出受污染的培養(yǎng)液，用剛才配好的清除型培養(yǎng)液輕輕洗涮3次以上，讓污染物被大量稀釋，然后換上本清除型培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，該傳代的時(shí)候照樣傳代。細(xì)菌污染的話，1天左右換1次液，支原體污染的話，2-3天換1次液。細(xì)胞恢復(fù)健康后，就可改用預(yù)防型的培養(yǎng)液來進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明在對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)研究的基礎(chǔ)上，延續(xù)高新技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)，推出細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)過程中防控污染微生物的實(shí)用產(chǎn)品，旨在生物產(chǎn)業(yè)中提高產(chǎn)品的質(zhì)量和降低污染造成的經(jīng)濟(jì)損失，并打破國外在本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)和產(chǎn)品的壟斷地位。
使用本產(chǎn)品的效果見表1、表2。
表1、本發(fā)明對(duì)BHK-21細(xì)胞被大腸桿菌污染的清除結(jié)果

表2、本發(fā)明對(duì)BHK-21細(xì)胞被豬鼻支原體污染的清除結(jié)果

“+”表示污染依然存在，“-”表示污染已不能被檢出。
通過表1、表2可以看出，本發(fā)明對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)里細(xì)菌和支原體(本例用的是大腸桿菌和豬鼻支原體)的污染均可清除，更不用說是預(yù)防了。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品KCl 0.15克KH2PO40.15克NaCl 6.00克Na2HPO40.86克乙基環(huán)丙沙星 1.0克。
實(shí)施例2把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品
KCl0.20克KH2PO40.20克NaCl 8.00克Na2HPO41.14克乙基環(huán)丙沙星 5.0克。
實(shí)施例3把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品KCl0.25克KH2PO40.25克NaCl 10.00克Na2HPO41.43克乙基環(huán)丙沙星 50.0克。
實(shí)施例4把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品KCl 0.30克KH2PO40.045克NaCl6.00克NaHCO30.26克Na2HPO40.036克乙基環(huán)丙沙星1.0克。
實(shí)施例5把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品KCl 0.40克KH2PO40.06克NaCl8.00克
NaHCO30.35克Na2HPO40.048克乙基環(huán)丙沙星5.0克。
實(shí)施例6把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品KCl 0.50克KH2PO40.075克NaCl10.00克NaHCO30.44克Na2HPO40.060克乙基環(huán)丙沙星50.0克。
實(shí)施例7把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品NaCl6.8克乙基環(huán)丙沙星1.0克。
實(shí)施例8把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品NaCl9.0克乙基環(huán)丙沙星5.0克。
實(shí)施例9把下列組分混合溶解成1升水溶液，充分混勻后調(diào)整pH值到7.4，然后抽濾除菌，封裝后即得本產(chǎn)品NaCl11.25克乙基環(huán)丙沙星50.0克。
權(quán)利要求
1.一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，其特征在于每升產(chǎn)品含有乙基環(huán)丙沙星1-50克。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)品，其特征在于每升產(chǎn)品除含有乙基環(huán)丙沙星1-50克外，還含有KCl 0.15-0.25克KH2PO40.15-0.25克NaCl 6.00-10.00克Na2HPO40.86-1.43克或者KCl 0.30-0.50克KH2PO40.045-0.075克NaCl 6.00-10.00克NaHCO30.26-0.44克Na2HPO40.036-0.060克或者NaCl 6.8-11.25克。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的產(chǎn)品，其特征在于產(chǎn)品的pH值為7.0～8.0。
全文摘要
本發(fā)明提供一種防控細(xì)胞培養(yǎng)污染的產(chǎn)品，其特征在于每升產(chǎn)品含有乙基環(huán)丙沙星1－50克。本發(fā)明按照預(yù)防和清除污染所需的藥物濃度，添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)，可預(yù)防或清除細(xì)胞培養(yǎng)中常見的細(xì)菌、支原體污染，有效克服了常規(guī)藥物藥效持續(xù)時(shí)間短，保質(zhì)期不長，價(jià)格高，不能常溫保存等缺點(diǎn)。本發(fā)明除了可以用于細(xì)胞培養(yǎng)之外，還可對(duì)其他有機(jī)培養(yǎng)基材料進(jìn)行凈化處理。也可用于對(duì)一些常用器械的簡(jiǎn)單沖洗，對(duì)分離純化材料的應(yīng)急凈化處理等。
文檔編號(hào)A61L2/16GK1952104SQ20061004880
公開日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2006年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月8日
發(fā)明者張念祖, 李志華, 高林 申請(qǐng)人:高林