專利名稱：一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯b針劑及其制備方法、應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物制劑的給藥方法及制備方法，更具體地說，涉及一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑及其制備方法、應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著銀杏葉研究的發(fā)展，現(xiàn)已證明銀杏葉的活性成分主要是黃酮和內(nèi)酯類化合物。銀杏內(nèi)酯是僅在銀杏葉中發(fā)現(xiàn)的一類具有特殊結(jié)構(gòu)及顯著藥理活性的重要成分，迄今尚未發(fā)現(xiàn)存在于其他任何植物中。更重要的是它們具有獨(dú)特的藥理作用和治療價(jià)值。銀杏內(nèi)酯類化合物有銀杏內(nèi)酯A(BN52020)、銀杏內(nèi)酯B(BN52021)、銀杏內(nèi)酯C(BN52022)、銀杏內(nèi)酯M(BN52023)、銀杏內(nèi)酯J(SN52024)及白果內(nèi)酯，已證明銀杏內(nèi)酯均為強(qiáng)血小板活化因子(plateletacllvatfactor，PAF)受體拮抗劑。隨著對(duì)銀杏葉中有效藥用成分的明確，單一有效成分新藥成為近十年來法國(guó)、英國(guó)、德國(guó)和美國(guó)等國(guó)家競(jìng)相開發(fā)的目標(biāo)。對(duì)銀杏葉中有效成分的深人研究，發(fā)現(xiàn)銀杏內(nèi)酯B具有更高的藥用價(jià)值。
銀杏內(nèi)酯B純品(BN52021)目前國(guó)外已經(jīng)應(yīng)用于II、III期臨床，用于休克、燒傷、中風(fēng)、移植排斥和血液透析等試驗(yàn)，還可能為預(yù)防和治療過敏性哮喘提供一類新的藥物。由于銀杏內(nèi)酯B的理化性質(zhì)特殊，將銀杏內(nèi)酯B制成溶液劑較為困難。因此，尋找出適合國(guó)內(nèi)現(xiàn)有制藥設(shè)備工藝的制備方法，以及充分發(fā)揮銀杏內(nèi)酯B藥效的給藥途徑，成為國(guó)內(nèi)銀杏開發(fā)的重要課題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決上述研究的難點(diǎn)，提供了一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑及其制備方法、應(yīng)用，提供一種銀杏內(nèi)酯B的靜脈給藥途徑，并為實(shí)現(xiàn)此給藥途徑提供了一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑的制備方法。
一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑及其制備方法、應(yīng)用是采取以下方案實(shí)現(xiàn)一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑，是由治療有效量的銀杏內(nèi)酯B加溶劑制成小容量注射劑，其中銀杏內(nèi)酯B與溶劑重量配比為1∶20～500。將銀杏內(nèi)酯B制成針劑(小容量注射液)后，供靜脈注射或靜脈滴注給藥。
所述的溶劑是乙醇、水、丙二醇中的一種或混合物。
一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑的制備方法由以下步驟制備用溶劑將銀杏內(nèi)酯B基本溶解，充分?jǐn)嚢杌蛘叱曁幚碇镣耆芙?，再加入溶劑至銀杏內(nèi)酯B濃度為1mg/ml～50mg/ml，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值3～11后，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得銀杏內(nèi)酯B針劑，其中銀杏內(nèi)酯B與溶劑重量配比為1∶20～500。
其中制備時(shí)所用的溶劑是乙醇、丙二醇、水中的一種或混合物。
其中制備時(shí)所用的溶劑選取用水時(shí)，須加表面活性劑，表面活性劑選用靜脈注射液使用的非離子表面活性劑，采用司盤、吐溫、泊洛沙姆中的一種，銀杏內(nèi)酯B與表面活性劑重量配比為1∶0.1～0.5。。
上述一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑在治療中風(fēng)、冠心病及其它涉及血小板凝聚引起的心腦血管病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明解決了銀杏內(nèi)酯B難以制成合適針劑的問題，所得針劑可靜脈使用。本發(fā)明制成的小容量注射劑可供靜脈注射使用，或者供靜脈滴注使用。能充分發(fā)揮其藥效，制得的樣品性質(zhì)穩(wěn)定，無明顯的降解產(chǎn)物，符合國(guó)家對(duì)靜脈使用針劑的質(zhì)量要求。藥效學(xué)研究表明，制得的樣品對(duì)動(dòng)物模型有明顯的治療作用。本發(fā)明制備的一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑可應(yīng)用于治療中風(fēng)、冠心病、及其它涉及血小板凝聚引起的心腦血管病。


附圖1是TIC染色后各組腦組織的梗死范圍切片圖。
圖中A溶劑對(duì)照組；B銀杏內(nèi)酯B 5mg/kg組；C銀杏內(nèi)酯B 10mg/kg。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例，結(jié)合藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)一步說明本發(fā)明，下述實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而對(duì)本發(fā)明沒有限制。
實(shí)施例1處方銀杏內(nèi)酯B2g乙醇 1000g制法稱取處方量的銀杏內(nèi)酯B精制品，加乙醇1000g溶解，超聲處理至完全溶解，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值3，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。
實(shí)施例2處方銀杏內(nèi)酯B2g乙醇 500g注射用水 500g制法稱取處方量的銀杏內(nèi)酯B，加乙醇500g溶解，超聲處理至完全溶解，加入注射用水500g，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值4.7，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。
實(shí)施例3處方銀杏內(nèi)酯B10g吐溫-80 5g乙醇 495g注射用水 500g制法稱取處方量的銀杏內(nèi)酯B，加乙醇500g溶解，加入吐溫-80約5g，加入注射用水500g，超聲處理至完全溶解，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值4.9，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。
實(shí)施例4處方銀杏內(nèi)酯B10g吐溫-80 1g
乙醇99g注射用水100g制法稱取處方量的銀杏內(nèi)酯B，加乙醇100g溶解，加入吐溫-80約1g，加入注射用水100g，超聲處理至完全溶解，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH值11，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。
實(shí)施例5處方銀杏內(nèi)酯B 10g乙醇 100g丙二醇 900g制法稱取處方量的銀杏內(nèi)酯B，加乙醇100g溶解，加入吐溫-80約5g，超聲處理至完全溶解，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)溶液pH 4.6，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢、包裝，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。
銀杏內(nèi)酯B注射液抗大鼠大腦中動(dòng)脈阻斷致局灶性缺血再灌注損傷作用地點(diǎn)東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理教研室試驗(yàn)?zāi)康淖C實(shí)雙萜類化合物銀杏內(nèi)酯B的抗大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷作用。
實(shí)驗(yàn)材料1、受試藥品與給藥銀杏內(nèi)酯B注射液，提供單位江蘇鵬鷂藥業(yè)有限公司；給藥體積1mlkg(用生理鹽水配制)。阻塞前20min給藥，速度0.2g/min。
2、試劑與實(shí)驗(yàn)儀器丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒，超氧化物(SOD)測(cè)定試劑盒，蛋白定量試劑盒(均為南京建成生物工程研究所提供)，2，3，5，-三苯基氯化四氮唑(TTC，上?；瘜W(xué)試劑公司，用1％磷酸鹽PBS溶液配制成2％工作液)，752型紫外分光光度計(jì)(上海醫(yī)用分析儀器廠)。
3、試驗(yàn)動(dòng)物健康雄性SD大鼠80只，體重250～300g，10周齡，SPF級(jí)，南京軍區(qū)總院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供。在室溫18～22℃、12h明/暗交替條件下飼養(yǎng)3d，自由取食，飲清潔水。所有對(duì)大鼠的實(shí)驗(yàn)程序已經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷模型制備將直徑2.8mm的尼龍線一端仔細(xì)打磨光滑，在距此端18mm、20mm、22mm處做標(biāo)志。采用改良Koizumi法(4)制作大腦中動(dòng)脈阻斷(MACO)模型，手術(shù)過程中監(jiān)測(cè)肛溫，使之保持在37±0.5℃。大鼠用水合氯醛麻醉(300mg/kg，ip)，頸部腹側(cè)正中切口，暴露氣管和右側(cè)頸總動(dòng)脈，在頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈分支點(diǎn)，從近心端結(jié)扎頸總動(dòng)脈，從分支處分離結(jié)扎頸外動(dòng)脈，距分支處2mm在頸總動(dòng)脈上剪一小切口，由切口處向頸內(nèi)動(dòng)脈放入栓塞線約20mm或遇到阻力后。縫合頸部皮膚切口。約10mm栓塞線留置在頸部切口外。缺血2h后拔出栓塞線約10mm，使血流再通。再灌注22h，剔除死亡或無神經(jīng)功能缺失行為的大鼠。偽手術(shù)組大鼠除頸動(dòng)脈不插栓線外，其它同缺血再灌注模型組。
神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分按照Longa的5分法進(jìn)行神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分，0分無神經(jīng)缺損癥狀；1分右前肢不能完全伸直；2分向右旋轉(zhuǎn)；3分向右側(cè)傾倒；4分不能行走或昏迷。
梗死區(qū)范圍測(cè)定再灌注末將大鼠斷頭處死，迅速取出大腦，置于-20℃環(huán)境下保留10min后，取出腦，從前端開始冠狀面連續(xù)切腦片厚度約2mm，每腦切5片，切下腦片立即放入2％TTC溶液，溶液置于37℃密閉不透光環(huán)境下15min后，用10％甲醛溶液固定24h，梗死區(qū)為白色，正常區(qū)為紅色(6)(見圖1)。將梗死區(qū)和正常區(qū)分離，分別稱重，用梗死區(qū)所占全腦重量的百分比表示梗死區(qū)范圍。
結(jié)果顯示銀杏內(nèi)酯B 1mg預(yù)處理對(duì)大鼠MACO后，神經(jīng)功能缺失所致的行為學(xué)改變，與溶劑對(duì)照組比較差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，銀杏內(nèi)酯B的5mg和0mg組行為學(xué)分值有意義低于溶劑對(duì)照組對(duì)應(yīng)值(P＜0.05，下表)。
銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷神經(jīng)功能缺失評(píng)分的影響。X±s。

注1)為與溶劑對(duì)照組比較P＜0.05
大鼠局灶性腦缺血2h再灌注22h后的腦梗死體積，其中5mg/kg和10m/kg組值與溶劑對(duì)照組值比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，銀杏內(nèi)酯B 5mg似有減小腦梗死體積的作用，但與溶劑對(duì)照組比較差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見附圖1和下表)。
銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷后腦梗死體積的影響。X±s。

注1)為與溶劑對(duì)照組比較P＜0.05討論大腦中動(dòng)脈阻斷模型一種很好的研究腦缺血再灌注損傷以及其相關(guān)藥物的動(dòng)物模型，因?yàn)榇竽X中動(dòng)脈是臨床栓塞最常見的部位，且模仿人腦卒中的病理損傷。本實(shí)驗(yàn)利用該模型證實(shí)銀杏內(nèi)酯B 1～10mg/kg劑量依賴地減少腦梗死的體積，但行為學(xué)指標(biāo)的改善僅10mg/kg組。
權(quán)利要求
1.一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑，其特征在于由治療有效量的銀杏內(nèi)酯B加溶劑制成小容量注射劑，其中銀杏內(nèi)酯B與溶劑重量配比為1∶20～500。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑，其特征在于溶劑是乙醇、水、丙二醇中的一種或混合物。
3.一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑的制備方法，其特征在于由以下步驟制備用溶劑將銀杏內(nèi)酯B基本溶解，充分?jǐn)嚢杌蛘叱曁幚碇镣耆芙猓偌尤肴軇┲零y杏內(nèi)酯B濃度為1mg/ml～50mg/ml，調(diào)節(jié)溶液pH值3～11后，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑，其中銀杏內(nèi)酯B與溶劑重量配比為1∶20～500。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑的制備方法，其特征在于其中制備時(shí)所用的溶劑是乙醇、丙二醇、水中的一種或混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑的制備方法，其特征在于其中制備時(shí)所用的溶劑選用水時(shí)，需加表面活性劑，表面活性劑選用靜脈注射液使用的非離子表面活性劑，表面活性劑采用司盤、吐溫、泊洛沙姆中的一種，銀杏內(nèi)酯B與表面活性劑重量配比為1∶0.1～0.5。
6.權(quán)利要求1或3所述的一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑在治療中風(fēng)、冠心病、及其它涉及血小板凝聚引起的心腦血管病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物制劑的給藥方法及制備方法，更具體地說，涉及一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑及其制備方法、應(yīng)用。一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑，其特征在于由治療有效量的銀杏內(nèi)酯B加溶劑制成小容量注射劑，其中銀杏內(nèi)酯B與溶劑重量配比為1∶20～50。溶劑是乙醇、水、丙二醇中的一種或混合物。由以下步驟制備用乙醇將銀杏內(nèi)酯B基本溶解，充分?jǐn)嚢杌蛘叱曁幚碇镣耆芙?，再加入溶劑至銀杏內(nèi)酯B濃度為1mg/g～50mg/g，調(diào)節(jié)溶液pH值3～11后，經(jīng)中間體檢測(cè)、過濾、灌封、滅菌、燈檢，即得一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑。一種靜脈給藥的銀杏內(nèi)酯B針劑在治療中風(fēng)、冠心病、及其它涉及血小板凝聚引起的心腦血管病藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1827099SQ20061003961
公開日2006年9月6日 申請(qǐng)日期2006年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月18日
發(fā)明者張國(guó)清 申請(qǐng)人:張國(guó)清