專利名稱：野菊花注射液制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可以供肌肉和靜脈使用的野菊花注射液。
背景技術(shù)：
野菊花為菊科植物野菊的干燥頭狀花序，又稱瘧疾草、苦薏、山菊花等，野菊之名始見(jiàn)于《日華子本草》，《本草匯言》稱其可“破血疏肝，解療散毒。主婦人腹內(nèi)宿血，解天行火毒丹療，洗瘡疥，又能去風(fēng)殺蟲(chóng)”。《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版一部有收載。野菊花呈類球形，黃綠色至棕黃色，氣芳香，味苦。以色黃無(wú)梗、完整、氣香、花未全開(kāi)者為佳，而花完全開(kāi)放、散瓣、有花梗、吸潮、色暗、散氣者，質(zhì)次。具有清熱解毒、疏風(fēng)平肝之功效，在我國(guó)民間藥用歷史悠久，現(xiàn)代藥理證明野菊花具有廣譜抗菌、抗病毒、降壓、增加冠脈血流量、清除氧自由基等作用。野菊花中所含的綠原酸、揮發(fā)油和總黃酮類化合物是其發(fā)揮藥效的主要有效成分。野菊花生物活性多樣、清香宜人、安全可靠，同時(shí)藥源廣泛、價(jià)格低廉，在藥品、食品、保健品和化妝品等多領(lǐng)域具有開(kāi)發(fā)價(jià)值。已上市的野菊花注射液(WS-11041(ZD-1041)-2002)，其主要用于肌肉注射劑，具有清熱解毒功效，用于外感熱病、目赤腫痛、咽喉疼痛、上呼吸道感染、急性扁桃體炎屬熱毒上功者。當(dāng)前所用的野菊花注射液均為肌注液，使用范圍窄，將其改為靜脈和肌注同時(shí)使用的注射液的優(yōu)點(diǎn)是使用范圍廣和起效快等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在原有肌肉注射劑的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，提供了一種質(zhì)量穩(wěn)定、方便使用的能夠供靜脈或肌肉使用的野菊花注射液。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)。
一、制備方法(1)原料藥的處方為野菊花。
(2)取野菊花藥材，加水浸泡2小時(shí)，用水蒸汽蒸餾法，收集初蒸餾液約1000ml，再重蒸餾收集重蒸餾液約為500ml，備用。將提取揮發(fā)油的水液濾過(guò)，藥渣再加水煎煮二次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.24(40～70℃)的浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)到65-70％，冷藏，靜置18小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至溶液∶藥材為1∶1，藥液過(guò)已處理好的大孔吸附樹(shù)脂柱，用5倍量柱體積的水洗脫后，先用5倍量柱體積30％乙醇洗脫后，再用5倍量柱體積40％～50％乙醇水溶液洗脫，最后再用5倍量柱體積65％～80％乙醇水溶液洗脫，合并乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加水稀釋至500ml(含生藥2g/ml)，冷藏18小時(shí)，備用。取野菊花提取液500ml和重蒸餾液500ml混合均勻，濾過(guò)，加入聚乙二醇5g或吐溫805ml，95％乙醇5ml和氯化鈉7g，加熱回流30分鐘，放冷至室溫，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.4～7.6。加注射用水至1000ml，濾過(guò)，灌封，滅菌，即得。
二、含量測(cè)定分析1、野菊花制劑中總黃酮的含量測(cè)定1.1儀器與試藥日本島津UV-3000A紫外分光光度計(jì)；本發(fā)明野菊花注射液(本公司實(shí)驗(yàn)室提供)；蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；甲醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉試劑均為分析純；水為三蒸水(自制)。
1.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取干燥的蘆丁對(duì)照品22mg，置100ml量瓶中，加60％乙醇適量，溶解后用60％乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密吸取上述對(duì)照品溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00ml，分別置25ml量瓶中，各加入60％乙醇至6.0ml，再加入5％亞硝酸鈉溶液各1ml，混勻，放置6min，加入10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加入4％NaOH試液10ml，加水至刻度，搖勻，放置15min后，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為Y＝0.458X+0.0028，r＝0.9993，在0.216～1.301范圍內(nèi)對(duì)照品的量與吸光度有良好的線性關(guān)系。
1.4供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物(本發(fā)明野菊花水提取物)，精密稱定，取約0.25g，置具塞錐形瓶中，精密加入60％乙醇100ml，稱定重量，超聲處理40min，放冷，再稱定重量，用60％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心(12000rpm)10min，取上清液過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。
取本發(fā)明注射劑一支(三批)，冷干，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60％乙醇100ml，稱定重量，超聲處理40min，放冷，再稱定重量，用60％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心(12000rpm)10min，取上清液過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。
1.5總黃酮的測(cè)定分別精密量取供試品溶液5ml置25ml容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線方法進(jìn)行測(cè)定，顯色，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定A值，另精密量取供試品溶液5ml置25ml容量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定A值，取兩次吸收度差值，按回歸方程計(jì)算總黃酮含量。
1.6結(jié)果見(jiàn)表表1制劑中總黃酮(以無(wú)水蘆丁計(jì))含量測(cè)定

2、野菊花制劑中綠原酸的含量測(cè)定2.1色譜條件色譜柱YMC-Pack ODS-A(250mm×4.6mm，5μm)；柱溫室溫；流動(dòng)相甲醇-0.2％醋酸(60∶40)；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)326nm。
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密稱取綠原酸對(duì)照品20mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶液并稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品貯備液0.477mg/ml。再準(zhǔn)確吸取該溶液0.5ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得濃度為0.0239mg/ml的對(duì)照品溶液。準(zhǔn)確吸取該溶液2、4、6、8、10ul，注入色譜儀，得峰面積和樣品量的回歸方程A＝35106X-175.77。結(jié)果表明，綠原酸的量與色譜峰面積的分值在0.0475～0.3815之間有良好的線性關(guān)系。
2.3取三批樣品(本發(fā)明野菊花水提取物)，精密稱定，按上述HPLC法分別測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。
取本發(fā)明注射劑一支(三批)，冷干，精密稱定，按上述HPLC法分別測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。
表2制劑中綠原酸含量測(cè)定

具體實(shí)施方式
實(shí)施例1野菊花 100gNaCl 0.7g聚乙二醇(PEG400) 0.5g注射用水至 100mL按照上述處方量，取野菊花藥材，加水浸泡2小時(shí)，用水蒸氣蒸餾法，收集初蒸餾液約100ml，再重蒸餾收集重蒸餾液約為50ml，備用。將提取揮發(fā)油的水液濾過(guò)，藥渣再加水煎煮二次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.24(40～70℃)的浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)到65％，冷藏，靜置18小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至溶液∶藥材為1∶1，藥液過(guò)已處理好的AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，用5倍量柱體積的水洗脫后，先用5倍量柱體積30％乙醇洗脫后，再用5倍量柱體積45％乙醇水溶液洗脫，最后再用5倍量柱體積70％乙醇水溶液洗脫，合并乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加水稀釋至50ml(含生藥2g/ml)，冷藏18小時(shí)，備用。取野菊花提取液50ml和重蒸餾液50ml混合均勻，濾過(guò)，加入聚乙二醇(PEG400)0.5g，95％乙醇0.5ml和氯化鈉0.7g，加熱回流30分鐘，放冷至室溫，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.4～7.6。加注射用水至100ml，濾過(guò)，灌封，滅菌，分裝成50支。
實(shí)施例2野菊花 1000gNaCl 7g聚乙二醇(PEG1000) 5g注射用水至 1000mL按照上述處方量，取野菊花藥材，加水浸泡2小時(shí)，用水蒸氣蒸餾法，收集初蒸餾液約1000ml，再重蒸餾收集重蒸餾液約為500ml，備用。將提取揮發(fā)油的水液濾過(guò)，藥渣再加水煎煮二次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.24(40～70℃)的浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)到70％，冷藏，靜置18小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至溶液∶藥材為1∶1，藥液過(guò)已處理好的AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，用5倍量柱體積的水洗脫后，先用5倍量柱體積30％乙醇洗脫后，再用5倍量柱體積50％乙醇水溶液洗脫，最后再用5倍量柱體積80％乙醇水溶液洗脫，合并乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加水稀釋至500ml(含生藥2g/ml)，冷藏18小時(shí)，備用。取野菊花提取液500ml和重蒸餾液500ml混合均勻，濾過(guò)，加入聚乙二醇(PEG1000)5g，95％乙醇5ml和氯化鈉7g，加熱回流30分鐘，放冷至室溫，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.4～7.6。加注射用水至1000ml，濾過(guò)，灌封，滅菌，分裝成500支。
實(shí)施例3野菊花 100gNaCl 0.7g聚乙二醇(PEG4000) 0.5g
注射用水至 100mL按照上述處方量，取野菊花藥材，加水浸泡2小時(shí)，用水蒸氣蒸餾法，收集初蒸餾液約100ml，再重蒸餾收集重蒸餾液約為50ml，備用。將提取揮發(fā)油的水液濾過(guò)，藥渣再加水煎煮二次，每次一小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.24(40～70℃)的浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)到65％，冷藏，靜置18小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至溶液∶藥材為1∶1，藥液過(guò)已處理好的AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，用5倍量柱體積的水洗脫后，先用5倍量柱體積30％乙醇洗脫后，再用5倍量柱體積45％乙醇水溶液洗脫，最后再用5倍量柱體積70％乙醇水溶液洗脫，合并乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加水稀釋至50ml(含生藥2g/ml)，冷藏18小時(shí)，備用。取野菊花提取液50ml和重蒸餾液50ml混合均勻，濾過(guò)，加入聚乙二醇(PEG4000)0.5g，95％乙醇0.5ml和氯化鈉0.7g，加熱回流30分鐘，放冷至室溫，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.4～7.6。加注射用水至100ml，濾過(guò)，灌封，滅菌，分裝成50支。
實(shí)施例4野菊花 100gNaCl 0.7g吐溫 800.5ml注射用水至 100mL按照上述處方量，取野菊花藥材，加水浸泡2小時(shí)，用水蒸氣蒸餾法，收集初蒸餾液約100ml，再重蒸餾收集重蒸餾液約為50ml，備用。將提取揮發(fā)油的水液濾過(guò)，藥渣再加水煎煮二次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.24(40～70℃)的浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)到70％，冷藏，靜置18小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋至溶液∶藥材為1∶1，藥液過(guò)已處理好的AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，用5倍量柱體積的水洗脫后，先用5倍量柱體積30％乙醇洗脫后，再用5倍量柱體積50％乙醇水溶液洗脫，最后再用5倍量柱體積75％乙醇水溶液洗脫，合并乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加水稀釋至50ml(含生藥2g/ml)，冷藏18小時(shí)，備用。取野菊花提取液50ml和重蒸餾液50ml混合均勻，濾過(guò)，加入吐溫80 0.5ml，95％乙醇0.5ml和氯化鈉0.7g，加熱回流30分鐘，放冷至室溫，用20％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.4～7.6。加注射用水至100ml，濾過(guò)，灌封，滅菌，分裝成50支。
權(quán)利要求
1.一種野菊花注射液制劑及其制備方法，其特征在于，其中含有野菊花揮發(fā)油提取物、水提取物、助溶劑和注射用水，也可以根據(jù)需要添加等滲調(diào)節(jié)劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野菊花注射液制劑，其特征在于，本注射液可以供人體肌肉和靜脈注射給藥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野菊花注射液制劑，其特征在于，野菊花水提取物中綠原酸為主要成分之一，含量大于或等于0.65％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野菊花注射液制劑，其特征在于，野菊花水提取物中總黃酮類為主要成分之一，總黃酮的含量大于或等于55％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野菊花注射液制劑，其特征在于，靜脈注射液的助熔劑為聚乙二醇PEG 400、聚乙二醇PEG 1000、聚乙二醇PEG4000，吐溫80和泊洛沙姆。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野菊花注射液制劑，其特征在于，等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉或葡萄糖。
全文摘要
本發(fā)明提供一種野菊花注射液制劑及其制備方法，其中含有野菊花揮發(fā)油提取物、水提取物、助溶劑和注射用水，也可以根據(jù)需要添加等滲調(diào)節(jié)劑。
文檔編號(hào)A61P31/04GK1839906SQ20061000282
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2006年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月6日
發(fā)明者張晶月 申請(qǐng)人:張晶月