專利名稱：多硫酸酯化糖苷類及其鹽的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及糖苷類、其鹽以及含有這些糖苷類作為活性組分的藥物組合物。此外，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療或緩解哺乳動(dòng)物氣道急性和慢性炎癥病癥-包括哮喘和與哮喘相關(guān)的病理情況的癥狀的方法。
相關(guān)領(lǐng)域的概況炎癥是為多級(jí)級(jí)聯(lián)過程，其中的任意部分可都以為可能的治療干預(yù)的對(duì)象。簡(jiǎn)言之，炎癥需要免疫活性細(xì)胞(例如嗜酸性細(xì)胞、肥大細(xì)胞、活化的T-淋巴細(xì)胞)浸潤入損傷部位，其中它們與居留細(xì)胞一起釋放生物活性介體物質(zhì)(例如組胺、蛋白酶、細(xì)胞因子和趨化因子的宿主)，增加鄰近血管的滲透性，吸引和刺激旁觀細(xì)胞。血管滲透性改變導(dǎo)致在損傷部位形成流體滲出物，隨后反應(yīng)性白細(xì)胞及其最終的流出物進(jìn)一步流入受損區(qū)域(就綜述而言，參見，Trowbridge和Emling，InflammationA Review of the ProcessQuintessence Pub.Co.，1997)。居留細(xì)胞(釋放的介體刺激的平滑肌和上皮細(xì)胞或成纖維細(xì)胞)分泌膠原蛋白和粘液并且增殖建立了病理性改變的擴(kuò)散(例如氣道堵塞)并且促使它們發(fā)展。
炎癥與各種肺部疾病相關(guān)，包括例如內(nèi)源性或外源性支氣管哮喘、任何炎性肺病、急性或慢性支氣管炎、慢性支氣管炎繼發(fā)性肺部炎性反應(yīng)、慢性阻塞性肺部疾病、肺纖維化以及白細(xì)胞起作用的任意肺病，包括，但不限于特發(fā)性肺纖維化和任意其它自身免疫性肺病。哮喘為影響肺的大和小氣道的最常見形式的肺部炎癥之一。它對(duì)5％-10％的人群產(chǎn)生影響，據(jù)估計(jì)每年導(dǎo)致2700萬患者就診，6百萬人喪失工作日和9050萬個(gè)活動(dòng)受限日。哮喘的發(fā)病率和死亡率正在全世界范圍內(nèi)增長(Plaut和Zimmerman，″過敏性和超敏反應(yīng)機(jī)制″-Fundamental Immunology，3rdEd.，Paul(ed.)，Raven Press，NewYork，NY，在1399頁(1993))。
已經(jīng)斷定常規(guī)的抗-哮喘治療應(yīng)嚴(yán)格避開所有引發(fā)性變應(yīng)原(這本身是難以實(shí)現(xiàn)的)，并且治療方案應(yīng)基于具有不利副作用和最適度以下的藥代動(dòng)力學(xué)特性的藥物活性劑。用于治療支氣管痙攣的β2-腎上腺素能激動(dòng)劑對(duì)氣道炎癥或支氣管高反應(yīng)性沒有作用(Palmer等，NewEngl.J.Med.3311314(1994))。此外，β2-腎上腺素能激動(dòng)劑的定期或延長應(yīng)用與哮喘難以控制、對(duì)變應(yīng)原的氣道高反應(yīng)性增加和支氣管收縮保護(hù)作用下降相關(guān)(Bhagat等，Chest 1081235(1995))。此外，因減量調(diào)節(jié)β2-腎上腺素能受體而懷疑長期單獨(dú)使用β2-腎上腺素能藥可惡化支氣管高反應(yīng)性。茶堿(抗-哮喘甲基黃嘌呤)的特征在于其吸收度和清除率的顯著可變性。皮質(zhì)類固醇對(duì)兒童具有毒性，而在成年患者中相對(duì)安全，從而導(dǎo)致腎上腺抑制以及骨密度生長下降(Woolock等，am.Respir.Crit.Care Med.1531481(1996))。如果僅在發(fā)作前給予，那么用于預(yù)防哮喘發(fā)作的色甘酸鈉可有效預(yù)防哮喘反應(yīng)(Volcheck等，Postgrad Med.104(3)127(1998))?？菇M胺類可臨時(shí)預(yù)防或抑制哮喘發(fā)作，特別是在兒童中的哮喘發(fā)作，但通常僅為部分有效的，因?yàn)榻M胺類僅為許多炎癥相關(guān)介體之一(Cuss，″抗哮喘藥物的藥理學(xué)″-Asthma as an Inflammatory Disease.O′Byrne，Ed.，Dekker，Inc.，New York，在199頁上(1990))和O′Byrne，″氣道炎癥和哮喘″-Asthma as an Inflammatory Disease，O′Byrne，Ed.，Dekker，Inc.，New York，NY，143(1990))。
因此，目前的藥物形式存在許多缺陷。一般而言，常用的活性劑具有相對(duì)短的作用期限并且在抗原攻擊發(fā)生后給藥時(shí)可能部分或完全無效。此外，由于與使用諸如β2-腎上腺素能激動(dòng)劑和皮質(zhì)類固醇這類活性劑相關(guān)的嚴(yán)重不良作用，使用這類活性劑的治療安全范圍相對(duì)較窄，并且必須謹(jǐn)慎監(jiān)測(cè)使用這類活性劑的患者(例如，參見WO94/06783、WO 99/06025、美國專利US 5,690,910和US 5,980,865)。在吸入皮質(zhì)類固醇近期的臨床研究中，僅在療法的第一年后在5-11歲哮喘兒童的氣道功能中發(fā)生暫時(shí)的改善，在接下來的3年內(nèi)退化至使用安慰劑觀察到的水平(“兒童哮喘控制程序研究組”-N.Engl.J.Med.，3431054(2000))。這種退化可以最好地解釋為發(fā)生在對(duì)皮質(zhì)類固醇呈頑固性的氣道中的重塑改變(哮喘的特性特征)(Davies，Curr.Opin.Allergy Clin.Immunol.，167(2001))。
從相關(guān)文獻(xiàn)中已知某些多硫酸酯化(polysulfated)二糖類的混合物-具有與本發(fā)明化合物極為相近的結(jié)構(gòu)并且通過下列步驟合成對(duì)作為例如肝素或硫酸肝素的這類天然產(chǎn)物進(jìn)行亞硝酸處理，隨后用硼氫化物還原且隨后對(duì)部分純化的樣品進(jìn)行硫酸化(US 5,690,910；US5,980,865和WO 02/083700)-在不同哮喘模型中展示出顯著的抗炎作用。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新糖苷類和制備這類化合物的方法以及含有這類化合物的藥物組合物，這類化合物具有充分定義的化學(xué)結(jié)構(gòu)，具有比已知抗哮喘藥更為有利的藥理特性和更低的有害的副作用。本發(fā)明進(jìn)一步涉及治療需要治療的患者的方法，包括對(duì)所述的患者給予所述新糖苷類和所述糖苷類的組合物。
發(fā)明詳述根據(jù)上述事實(shí)，本發(fā)明涉及通式(I)的新多硫酸酯化糖苷類及其可能的異構(gòu)體及其藥物上可接受的鹽 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6彼此獨(dú)立地表示-H、C1-4烷基、-SO3H、硫酸化或未硫酸化糖基或硫酸化或未硫酸化二糖基-條件是R1-R6中至少一個(gè)為硫酸化或未硫酸化糖基或硫酸化或未硫酸化二糖基。術(shù)語″藥物上可接受的鹽″包括例如堿金屬和堿土金屬鹽以及任意其它結(jié)合在分子個(gè)一個(gè)或多個(gè)硫酸根基團(tuán)上的藥物上可接受的抗衡離子或多種抗衡離子。
當(dāng)所述糖醇的所有4個(gè)仲碳原子代表手性中心時(shí)，通式(I)顯然包括所有可能的立體異構(gòu)體(蒜糖醇、半乳糖醇、艾杜糖醇、甘露糖醇、葡萄糖醇和塔羅糖醇)及其D-和L-對(duì)映體。本文的術(shù)語″異構(gòu)體″包括通式(1)化合物中的所有這類化合物及其變體。
硫酸化糖基的含義可以為具有任選構(gòu)型的任意的吡喃戊糖或吡喃己糖分子，其中的一個(gè)或多個(gè)羥基為O-硫酸酯和并且糖部分通過α-或β-鍵與糖苷配基的異頭碳原子連接。未硫酸化的糖基含有所有的羥基或其被保護(hù)形式。未被保護(hù)的化合物可用作生產(chǎn)本文所述的硫酸化化合物的中間體。
多硫酸酯化二糖基的含義可以為具有任選構(gòu)型的任意的吡喃戊糖或吡喃己糖分子，其中的羥基之一被具有任選構(gòu)型的額外的吡喃戊糖或吡喃己糖分子糖基化，并且由此形成的二糖基單元的所有羥基為0-硫酸酯且糖部分通過α-或β-鍵與糖苷配基的異頭碳連接。
戊糖類結(jié)構(gòu)中包括所有可能的立體異構(gòu)體(阿拉伯糖、來蘇糖、核糖和木糖)及其D-和L-對(duì)映體。類似地，己糖類結(jié)構(gòu)中包括所有可能的立體異構(gòu)體(阿洛糖、阿卓糖、半乳糖、葡糖、古洛糖、艾杜糖、甘露糖和塔羅糖)及其D-和L-對(duì)映體。術(shù)語″異構(gòu)體″包括通式(1)化合物中的所有這類化合物及其變化形式。
C1-4烷基的含義為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基，優(yōu)選甲基。
本發(fā)明化合物的堿金屬鹽表示Na、K或Li鹽，而堿土金屬鹽優(yōu)選Mg和Ca鹽。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的優(yōu)選組，其中R1的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基且R2-R6的含義為-SO3H。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1、R2、R4、R5和R6的含義為-SO3H且R3的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1、R2、R3、R5和R6的含義為-SO3H且R4的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1和R3的含義為多硫酸酯化糖基且R2、R4、R5和R2的含義為-SO3H。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1和R6的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基且R2、R3、R4和R5的含義為-SO3H。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基，R3和R4的含義為C1-4烷基，而R2、R5和R6的含義為-SO3H。
通式(I)的那些化合物及其堿金屬和堿土金屬鹽代表本發(fā)明化合物的另一優(yōu)選組，其中R1和R6的含義為多硫酸酯化糖基或二糖基，R3和R4的含義為C1-4烷基，而R2和R5的含義為-SO3H。
本發(fā)明通式(I)尤其優(yōu)選的有代表性化合物為，但不限于如下化合物2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇九鉀鹽；1，2，3，4，5-五-O-硫酸酯化-6-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃半乳糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，3-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇十二鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十八鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇七鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，6，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-乳糖基)-D-甘露糖醇十六鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-α-D-吡喃阿拉伯糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-β-D-吡喃木糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-半乳糖醇十二鉀鹽；1，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鈉鹽。
本發(fā)明通式(I)的化合物可以通過使用已知方法將其游離羥基轉(zhuǎn)化成硫酸酯類由通式(II)的化合物合成 其中R7、R8、R9、R10、R11和R12彼此獨(dú)立地表示氫原子、C1-4烷基、糖基或二糖基且R7-R12中至少一個(gè)為糖基或二糖基。
可以將三氧化硫或其與有機(jī)堿(例如三乙胺或吡啶)或與二甲基甲酰胺形成的加合物作用制備O-硫酸酯類的試劑。
例如，可以任選使用堿金屬或堿土金屬乙酸鹽將通過上述方法獲得的單官能酸性酯類轉(zhuǎn)化成鹽。轉(zhuǎn)化后，可以通過冷凍干燥、沉淀或結(jié)晶獲得鹽。
例如，可以通過下列已知方法合成通式(II)的某些化合物，它們用作上述方法中合成本發(fā)明通式(I)化合物的原料例如，可以通過使用作為供體分子的通式(III)或(IV)的化合物和作為受體的通式(V)的化合物合成那些通式(II)的那些化合物，其中R7和R8之一表示糖基，而另一個(gè)表示氫原子，并且R9-R12的含義為氫原子 在通式(III)或(IV)的化合物中，X表示鹵原子、三氯乙酰亞氨酸酯或苯硫基并且R13-R19表示脂族或芳族酯或醚基，通式(V)化合物中， R20和R21表示氫原子，R22-R25表示醚類保護(hù)基，并且在有合適的活化劑存在下進(jìn)行糖基化。然后從由此獲得的通式(V)的化合物(其中R22-R25表示醚類保護(hù)基)上裂解保護(hù)基，而R20和R21之一表示被保護(hù)的糖基，而另一個(gè)為氫原子。
按照另一種方法，通式(V)的化合物用作上述反應(yīng)中的受體，其中R20和R22表示氫原子，而R21、R23、R24和R25表示醚類保護(hù)基，然后從由此獲得的通式(V)的化合物上裂解保護(hù)基-其中R21、R23、R24和R25為醚類保護(hù)基，R20表示被保護(hù)的糖基且R22為氫原子。
例如，可以通過按照方法b)進(jìn)行糖基化，但使用過量的供體分子合成那些通式(II)的化合物，其中R7和R9表示糖基，而R8、R10、R11和R12表示氫原子，并且從由此獲得的一般通式(V)的化合物上裂解保護(hù)基-其中R20和R22表示被保護(hù)的糖基且R21、R23、R24和R25表示醚類保護(hù)基。
例如，可以通過使用作為供體分子的通式(VI)或(VII)的化合物合和作為受體的通式(V)的化合物合成那些通式(II)的那些化合物，其中R7和R8之一表示二糖基，而另一個(gè)表示氫原子，并且R9-R12的表示氫原子
在通式(VI)或(VII)的化合物中，X表示鹵原子、三氯乙酰亞氨酸酯或苯硫基并且R26-R32表示脂族或芳族酯或醚基，通式(V)化合物中R20和R21表示氫原子，R22-R25表示醚類保護(hù)基，并且在有合適的活化劑存在下進(jìn)行糖基化。然后從由此獲得的通式(V)的化合物(其中R22-R25表示醚類保護(hù)基)上裂解保護(hù)基，而R20和R21之一表示被保護(hù)的糖基，而另一個(gè)為氫原子。
例如，可以通過使用通式(V)的化合物合成那些通式(II)的化合物，其中R7表示二糖基，在上述反應(yīng)中作為受體的通式(V)的化合物中，R20和R25為氫原子，R21和R24表示酯類保護(hù)基，而R22和R23為醚類保護(hù)基，然后從由此獲得的通式(V)的化合物上裂解保護(hù)基-其中R21和R24表示酯類保護(hù)基，而R22和R23表示醚類保護(hù)基，R20表示被保護(hù)的二糖基且R25為氫原子。
例如，可以通過使用過量的作為供體分子的通式(VI)或(VII)的化合物和作為受體的通式(V)的化合物合成那些通式(II)的化合物，其中R7和R12表示二糖基，并且R8-R11表示氫原子，在通式(VI)或(VII)的化合物中，X表示鹵原子、三氯乙酰亞氨酸酯或苯硫基，并且R26-R32表示脂族或芳族酯或醚基，在通式(V)的化合物中，R20和R25表示氫原子，R21和R24表示酯類保護(hù)基，而R22和R23為醚類保護(hù)基，并且在有合適的活化劑存在下進(jìn)行糖基化。然后從由此獲得的通式(V)的化合物上裂解保護(hù)基，其中R21和R24表示酯類保護(hù)基，R22和R23表示醚類保護(hù)基，而R20和R25為被保護(hù)的二糖基。
在上述糖基化反應(yīng)中，可以將汞或銀鹽、二乙基醚合三氟化硼、N-碘代琥珀酰亞胺和三氟甲磺酸或后兩者的混合物用作活化劑。
可以通過酸水解或在就醚類和縮醛類而言在有催化劑存在下的還原對(duì)保護(hù)基進(jìn)行裂解，而就酯類的情況而言，可以使用Zemplén法(堿催化的轉(zhuǎn)酯化)或在有堿存在下的水解。
用于描述的縮寫和表述Ac＝乙?；鵅z＝苯甲?；?br> Me＝甲基Ph＝苯基NIS＝N-碘代琥珀酰亞胺TfOH＝三氟甲磺酸作為本說明書中使用的，除非另有清楚地陳述，否則單數(shù)形式″一種(a)″、″一種(an)″和″該(the)″也特別包括該術(shù)語意旨的復(fù)數(shù)形式。例如，所謂″一種調(diào)節(jié)劑″包括多種調(diào)節(jié)劑的混合物。
作為本說明書中使用的，無論是在過渡性的術(shù)語，還是在權(quán)利要求的整體中，術(shù)語″包括(comprise(s))″和″包括(comprising)″應(yīng)解釋為具有開放式的含義。即，該術(shù)語應(yīng)解釋為與術(shù)語″至少具有″或″至少包括″同義。當(dāng)在方法的上下文中使用時(shí)，術(shù)語″包括″意旨至少包括所述的步驟，但可以包括額外的步驟的方法。當(dāng)在化合物或組合物的上下文中使用時(shí)，術(shù)語″包括″意旨化合物或組合物至少包括所述的特征或成分，但也可以包括額外的特征或成分。
本文所用的術(shù)語″約″意旨近似、大約在一定區(qū)間內(nèi)或在其左右。當(dāng)術(shù)語″約″與數(shù)值范圍聯(lián)用時(shí)，它可以通過延伸所述數(shù)值的上下邊界而改變?cè)摲秶?。一般而言，本文所用的術(shù)語″約″可以在高于和低于所述數(shù)值20％變量之間改變。
除非另有陳述，否則，本文所用的措詞″或″以″包含″性的“和/或”含義使用″而不是以″排除″性″任一/或″含義使用。
本文所用的術(shù)語″治療(treating)″或″治療(treatment)″用于表示減少、緩解、預(yù)防、抑制疾病癥狀的發(fā)生和/或逆轉(zhuǎn)疾病癥狀。本發(fā)明方法和組合物治療的疾病包括任意特征在于或包括氣道急性和慢性炎性病癥。因此，術(shù)語″炎性病癥″或″氣道炎性病癥″包括任意炎性肺病，包括哮喘、內(nèi)源性或外源性支氣管哮喘、急慢性支氣管炎、過敏性鼻炎、慢性支氣管炎繼發(fā)性肺部炎癥結(jié)構(gòu)反應(yīng)、慢性阻塞性肺部疾病、肺纖維化。本發(fā)明還用于肺部疾病，其中白細(xì)胞和氣道再塑可能起作用，包括，但不限于特發(fā)性肺纖維化和任意其它自身免疫性肺病。
所謂″哮喘″意旨過敏性來源的疾病，其癥狀包括伴隨喘鳴的連續(xù)性或陣發(fā)性用力呼吸、胸內(nèi)壓迫感和經(jīng)常性的咳嗽或喘發(fā)作。所謂″哮喘-相關(guān)病理情況″意旨癥狀實(shí)際上主要為與支氣管痙攣相關(guān)的炎癥的疾病。因此，哮喘和哮喘-相關(guān)病理情況的特征在于如下癥狀，包括因平滑肌不同程度收縮(痙攣)導(dǎo)致的氣道狹窄，粘膜水腫，包括上氣道粘膜水腫和支氣管和和細(xì)支氣管腔內(nèi)的粘液。″哮喘-相關(guān)病理情況″的非限制性的有代表性的實(shí)例包括特征在于氣道高反應(yīng)性的非-哮喘性疾病(例如慢性支氣管炎、肺氣腫、囊性纖維化和呼吸性窘迫)。
本文教導(dǎo)的組合物和方法針對(duì)哮喘舉例說明。然而，本發(fā)明不應(yīng)限于這種特定的肺病。哮喘提供了已經(jīng)廣泛研究的優(yōu)點(diǎn)并且提供了用于評(píng)價(jià)本發(fā)明的幾種可接受的模型。已知致敏和變應(yīng)原攻擊產(chǎn)生對(duì)各種激動(dòng)劑的氣道高反應(yīng)性。因此，稱作致痙劑的乙酰膽堿能夠在變應(yīng)原攻擊后誘導(dǎo)獲自處死動(dòng)物氣管的組織中肌細(xì)胞比獲自對(duì)照組動(dòng)物更顯著地收縮(已經(jīng)致敏以便引起氣道高反應(yīng)性)(例如，參見Tokuoka等，Br.J.Pharmacol 1341580(2001)；Nakata等，Int.Immunol.13329(2001)；Emala和Hirshman，Monogr.Allergy 3335(1996))。
哮喘最突出的特征在于支氣管痙攣或氣道狹窄。哮喘患者具有突出的大和小氣道平滑肌收縮、粘液產(chǎn)生增加和炎癥增加(Plaut和Zimmerman，文獻(xiàn)同上)。哮喘中炎癥反應(yīng)以被粘膜覆蓋的組織為典型并且特征在于血管舒張、血漿滲出、諸如中性白細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞這類炎癥細(xì)胞募集至炎癥部位和居留組織細(xì)胞(例如肥大細(xì)胞或氣道上皮細(xì)胞)或遷移炎癥細(xì)胞釋放炎癥介體(Hogg，″哮喘的病理學(xué)″-Asthma as an Inflammatory Disease.O′Byrne(ed.)，Marcel Dekker，Inc.，New York，NY，在1頁上，(1990))。哮喘可以由各種原因引起，諸如過敏反應(yīng)、感染繼發(fā)性反應(yīng)、工業(yè)或職業(yè)性暴露、某些化學(xué)品或藥物攝取、鍛煉(Hargreave等，J.Allergy Clin.Immunol.831013(1986))。
還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明通式(I)的化合物可有效減少支氣管上皮細(xì)胞的粘液產(chǎn)生并且抑制生長因子介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增殖。
氣道抗原和非抗原性刺激物可以誘導(dǎo)支氣管高反應(yīng)性增加(AHR)，即更嚴(yán)重型哮喘的標(biāo)志。變應(yīng)原誘導(dǎo)的哮喘中的晚期反應(yīng)和持續(xù)高反應(yīng)性與白細(xì)胞，且特別是嗜酸性細(xì)胞募集至發(fā)炎的肺組織相關(guān)(Abraham等，Am.Rev.Respir.Dis.1381565(1988))。嗜酸性細(xì)胞釋放幾種炎癥介體，包括15-HETE、白細(xì)胞三烯C4、PAF、陽離子蛋白、嗜酸性細(xì)胞過氧化物酶。
術(shù)語″抗原″和″變應(yīng)原″可以互換使用，以便描述諸如可以誘導(dǎo)過敏反應(yīng)和/或誘導(dǎo)患有哮喘的個(gè)體的哮喘癥狀的粉塵或花粉這類分子。因此，使變應(yīng)原或抗原″攻擊的″哮喘個(gè)體接觸足量的變應(yīng)原或抗原，以便誘導(dǎo)哮喘反應(yīng)。發(fā)現(xiàn)本發(fā)明通式(I)的化合物可有效治療卵清蛋白致敏和抗原攻擊后的AHR。
本發(fā)明通式(I)化合物在不同生物模型中的生物活性證實(shí)如下模型1對(duì)離體氣道高反應(yīng)性局部給予多硫酸酯化糖苷類的作用檢驗(yàn)氣道炎癥可以導(dǎo)致支氣管高反應(yīng)性，其為哮喘的特性特征。
通過在第1天時(shí)皮下注射0.5ml OA/Al(OH)3凝膠混合物(2mg OA+10g Al(OH)3/100ml鹽水)，隨后在第14和21天時(shí)給予皮下注射(10mg OA+10g Al(OH)3/100ml鹽水)主動(dòng)使棕色挪威(BN)大鼠對(duì)卵清蛋白(OA)致敏。在第28天時(shí)，在抗原攻擊前2小時(shí)動(dòng)物經(jīng)氣管內(nèi)接受實(shí)施例4中所述的化合物(0.01；0.1或1.0mg/kg劑量)。通過吸入霧化卵清蛋白進(jìn)行抗原攻擊(給予在TSE吸入系統(tǒng)中的1％抗原溶液1小時(shí))?？乖艉?8小時(shí)處死動(dòng)物，其中將氣管移至器官浴槽。使剖離的氣管平衡30分鐘，之后確定對(duì)乙酰膽堿(Ach)的氣管致痙響應(yīng)曲線。
正如表1中所示，當(dāng)在抗原攻擊后48小時(shí)測(cè)定對(duì)致痙劑的反應(yīng)時(shí)，對(duì)該模型中致敏動(dòng)物的卵清蛋白攻擊產(chǎn)生對(duì)乙酰膽堿的顯著氣管高反應(yīng)性。0.01mg/kg劑量的實(shí)施例4中所述的化合物使這種升高幾乎返回至對(duì)照組水平。
表1抗原攻擊和用實(shí)施例4化合物的氣管內(nèi)預(yù)治療對(duì)乙酰膽堿在BN-大鼠中產(chǎn)生的氣管收縮的作用
*-logM乙酰膽堿(Ach)，與對(duì)照組相比產(chǎn)生50％收縮(平均值±SEM)**在最大Ach濃度下與對(duì)照組相比的收縮(平均值+SEM)模型2多硫酸酯化糖苷類對(duì)變應(yīng)原刺激的氣道上皮細(xì)胞粘液產(chǎn)生的作用檢驗(yàn)在致敏的動(dòng)物中，抗原攻擊導(dǎo)致氣道上皮細(xì)胞產(chǎn)生粘液，其為過敏性哮喘的特性特征。
在抗原攻擊前2小時(shí)，使用模型1中所述類似的方案經(jīng)氣管內(nèi)用不同(0.01-1.0mg/kg)劑量的實(shí)施例4中所述的化合物處理致敏的BN大鼠。在攻擊后48小時(shí)收集肺并且固定在8％磷酸鹽緩沖的甲醛中。然后處理樣品以便進(jìn)行常規(guī)的組織化學(xué)檢查。用過碘酸-希夫(PAS)試劑染色5μm厚度的切片并且使用蘇木精-曙紅進(jìn)行復(fù)染。在整個(gè)制備過程中以400x的放大倍數(shù)對(duì)切片上氣道的上皮細(xì)胞各自進(jìn)行計(jì)數(shù)。將PAS(+)[產(chǎn)生粘液]上皮細(xì)胞的數(shù)量表示為占總上皮細(xì)胞數(shù)量的比例。
正如表2中所示，變應(yīng)原攻擊刺激了氣道上皮細(xì)胞粘液產(chǎn)生(對(duì)照組與攻擊組)。所述化合物顯著減少了PAS(+)，即在施加較高劑量時(shí)產(chǎn)生粘液的細(xì)胞的數(shù)量。
表2抗原攻擊和用實(shí)施例4化合物的氣管內(nèi)治療對(duì)變應(yīng)原誘導(dǎo)的BN大鼠氣道上皮細(xì)胞粘液產(chǎn)生的作用
*-占總細(xì)胞數(shù)量百分比的PAS(+)細(xì)胞數(shù)量(平均值±SEM)模型3.
多硫酸酯化糖苷類對(duì)哮喘性肺組織中發(fā)生的血管周圍水腫的作用的檢驗(yàn)。
在致敏動(dòng)物中，作為發(fā)生炎癥過程的結(jié)果，抗原攻擊增加了血管滲透性，導(dǎo)致脈管系統(tǒng)周圍血漿滲出(excudation)。
在抗原攻擊前2小時(shí)，使用模型1中所述類似的方案經(jīng)氣管內(nèi)用不同(0.01-1.0mg/kg)劑量的實(shí)施例4中所述的化合物處理致敏的BN大鼠。在攻擊后48小時(shí)收集肺并且固定在8％磷酸鹽緩沖的甲醛中。然后處理樣品以便進(jìn)行常規(guī)的組織化學(xué)檢查。用過碘酸-希夫(PAS)試劑染色5μm厚度的切片并且使用蘇木精-曙紅進(jìn)行復(fù)染。在5μm切片上，測(cè)定脈管系統(tǒng)(vasculare)周圍結(jié)締組織的面積并且表示為占相應(yīng)血管自身面積的比例。
正如表3中所示，變應(yīng)原攻擊導(dǎo)致脈管系統(tǒng)周圍水腫，其程度甚至在最小劑量的檢驗(yàn)化合物下也得到顯著下降。
表3抗原攻擊和用實(shí)施例4化合物的氣管內(nèi)治療對(duì)BN大鼠發(fā)生水腫程度的作用
*-相對(duì)于脈管系統(tǒng)面積的水腫面積(平均值±SEM)模型4.
多硫酸酯化糖苷類的IP-3受體的拮抗作用依賴于化學(xué)結(jié)構(gòu)的本發(fā)明糖苷類在微粒體膜制備物中抑制肌醇-1，4，5-三磷酸(IP3)與其受體結(jié)合。當(dāng)IP3為在活化不同細(xì)胞中起顯著作用的信使分子時(shí)，干擾這種功能可以解釋這些多硫酸酯化糖苷類的抗-哮喘作用。
使用大鼠小腦膜制品，按照Worley等(JBC 262，12132，1987)所述測(cè)定多硫酸酯化糖苷類的IP3拮抗劑作用。正如表4中所示，實(shí)施例1-16中所述的所有化合物均具有不同的IP3拮抗劑活性。
表4多硫酸酯化糖苷類的IP-3受體拮抗作用
預(yù)計(jì)本發(fā)明的藥物組合物可用于可以得益于本發(fā)明方法的任意的哺乳動(dòng)物。在這類哺乳動(dòng)物中位于最前列的是人，不過，本發(fā)明并不限于此，并且可應(yīng)用于獸醫(yī)應(yīng)用。因此，本發(fā)明″哺乳動(dòng)物″或″需要的哺乳動(dòng)物″包括人和非人類的哺乳動(dòng)物，特別是家養(yǎng)動(dòng)物，包括，但不限于貓、狗和馬。
術(shù)語″治療有效量″用于表示以有效實(shí)現(xiàn)所尋求的治療效果的劑量治療。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員理解可以通過細(xì)調(diào)和/或通過給予一種以上本發(fā)明的化合物或通過給予本發(fā)明的化合物與另一種抗哮喘化合物(例如皮質(zhì)類固醇)來降低或增加本發(fā)明化合物的治療有效量。本發(fā)明由此提供了使給藥/治療適合于對(duì)指定哺乳動(dòng)物而言具有特異性的特定緊急策略的方法。正如下文實(shí)施例中解釋的，例如，可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，通過以相對(duì)低量開始并且在評(píng)價(jià)有益作用的同時(shí)逐步增加易于測(cè)定治療有效量。與評(píng)價(jià)本發(fā)明治療方法的治療作用的臨床改變包括特征癥狀和哮喘以及相關(guān)病理情況(例如呼吸困難、喘鳴、咳嗽、支氣管超敏反應(yīng)氣道重塑)的減少和肺功能測(cè)試的改善。這些基于患者的癥狀和臨床醫(yī)師的觀察結(jié)果。
本文所用的可變數(shù)值范圍的描述意旨可以使用等于該范圍內(nèi)的任意值的變量實(shí)施本發(fā)明。因此，就內(nèi)在分散的變量而言，該變量可以等于所述數(shù)值范圍內(nèi)的任意整數(shù)值，包括該范圍的端點(diǎn)。類似地，就內(nèi)在連續(xù)的變量而言，該變量可以等于所述數(shù)值范圍的任意實(shí)際值，包括該范圍的端點(diǎn)。作為實(shí)例，就內(nèi)在分散的變量而言，描述為具有0-2之間的值的變量可以為0、1或2，并且就內(nèi)在連續(xù)的變量而言，可以為0.0、0.1、0.01、0.001或任意其它實(shí)際值。
例如，就通過吸入的局部給藥而言，當(dāng)進(jìn)行全身給藥(例如口服給藥)時(shí)，考慮的治療有效量約為0.1μg/kg/天-約1000μg/kg/天。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)進(jìn)行全身給藥時(shí)，治療有效量約為0.5μg/kg/天-約200μg/kg/天。
其劑型和給藥頻率取決于本領(lǐng)域技術(shù)人員為獲得在指定哺乳動(dòng)物中的如上所述的治療有效量所通常考慮的常規(guī)因素。因此，執(zhí)業(yè)醫(yī)生會(huì)考慮所治療的疾病、所給予的本發(fā)明的特定化合物、給藥途徑和其它臨床因素，諸如年齡、體重和哺乳動(dòng)物病情以及便利性和患者的依從性。
本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本發(fā)明化合物的給藥次數(shù)將會(huì)根據(jù)患者與患者的不同，基于在任意指定時(shí)間時(shí)該患者的特定醫(yī)學(xué)情況的不同而改變。
當(dāng)施用(諸如用于治療例如哮喘)時(shí)，可以在哺乳動(dòng)物接觸抗原前，同時(shí)或之后給予本發(fā)明該方面的化合物。此外，與接觸抗原相關(guān)的本發(fā)明化合物的定時(shí)給藥根據(jù)哺乳動(dòng)物與哺乳動(dòng)物的不同而改變，這取決于特定情況。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)通過謹(jǐn)慎監(jiān)測(cè)患者，同時(shí)改變本發(fā)明化合物的定時(shí)給藥和/或給藥次序使給藥最優(yōu)化。因此，可以理解哺乳動(dòng)物并不是需患有肺部炎癥才能得益于本發(fā)明?？梢詫?duì)易于發(fā)生哮喘和/或哮喘-相關(guān)病理情況的個(gè)體預(yù)防性給予本發(fā)明的化合物。例如，可以基于每天和/或在準(zhǔn)備去花粉豐富的地區(qū)(例如花園)前對(duì)花粉過敏個(gè)體給予本發(fā)明化合物(例如通過口服給藥)。同樣，可以對(duì)僅具有哮喘發(fā)作家族史的個(gè)體預(yù)防性給予本發(fā)明的化合物，以便預(yù)防或抑制這類哮喘發(fā)作的可能發(fā)生。
基于上述事實(shí)，本發(fā)明還提供了治療哺乳動(dòng)物氣道急性和慢性炎性病癥，包括哮喘和哮喘-相關(guān)病理情況的方法。該方法包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的通式(I)的化合物。
可以使用任意眾所周知的藥物上可接受的載體，包括稀釋劑和賦形劑最優(yōu)化配制本發(fā)明的化合物(參見Remington′s PharmaceuticalSciences，18thEd.，Gennaro，Mack Publishing Co.，Easton，PA 1990和RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，Lippincott，Williams&Wilkins，1995)。盡管用于生產(chǎn)本發(fā)明組合物的藥物上可接受載體/媒介物的類型根據(jù)組合物對(duì)哺乳動(dòng)物的給藥方式的不同而改變，但是藥物上可接受的載體一般為生理惰性的并且是無毒性的。本發(fā)明的組合物制劑可以含有一種以上類型的本發(fā)明化合物以及任意其它用于治療所治療的特定肺部炎癥的藥物活性組分。這類化合物可以包括，但不限于β-腎上腺素受體(andrenoceptor)拮抗劑沙丁胺醇、間羥異丙腎上腺素(metaproteranol)、左沙丁胺醇、吡布特羅、沙美特羅、比托特羅；糖皮質(zhì)類固醇倍氯米松、曲安西龍、氟尼縮松、布地奈德、氟替卡松；白細(xì)胞三烯-受體拮抗劑；和白細(xì)胞三烯合成抑制劑扎魯司特、孟魯司特、齊留通(zileutin)；其它抗-哮喘藥色甘酸鈉、奈多羅米、茶堿；抗膽堿能藥ipatropium、氧托胺(oxitropium)、噻托胺(tiotropium)；H1受體拮抗劑抗組胺藥苯海拉明(diphenydramine)、美吡拉敏、異丙嗪、氯雷他定(loratidine)、氯環(huán)嗪、氯苯脒(chlorophemiramine)、非索非那定和腎上腺皮質(zhì)類固醇。
可以通過標(biāo)準(zhǔn)途徑(例如口服、吸入、直腸、局部，包括口含和舌下，或非腸道，包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、真皮內(nèi)、透皮和氣管內(nèi))給予本發(fā)明的組合物。此外，可以按照本領(lǐng)域中標(biāo)準(zhǔn)的方法加入聚合物以便緩釋指定化合物。
適合于通過吸入給藥的制劑包括可以通過本領(lǐng)域中公知的吸入裝置配藥的制劑。這類制劑可以包括載體，諸如粉末和氣溶膠。本發(fā)明包括適合于噴霧和支氣管內(nèi)使用的液體和粉末組合物或通過調(diào)配計(jì)量劑量的氣溶膠裝置(″MDI″)給藥的氣溶膠組合物。所關(guān)注的特別優(yōu)選的裝置描述在美國專利US 5,447,150中。
可以在含水藥物上可接受的吸入劑媒介物，諸如，例如等滲鹽水或制菌水和其它類型的本領(lǐng)域眾所周知的媒介物中配制活性組分?？梢酝ㄟ^泵或擠壓驅(qū)動(dòng)的噴霧配藥器或通過任意其它常用裝置給予溶液，所述的任意其它常用裝置用于產(chǎn)生所需劑量的吸入患者肺部的液體組合物或使其成為可能。
作為解釋，含有本發(fā)明抗炎化合物的粉末組合物包括將活性組分與乳糖或支氣管內(nèi)給藥可接受的其它惰性粉末充分混合的藥物上可接受的粉末制劑?？梢酝ㄟ^配藥器，包括，但不限于氣溶膠配藥器給予粉末組合物或?qū)⑵浒b在可破裂膠囊中，患者可以將其插入刺破膠囊并且以穩(wěn)態(tài)流吹出的裝置。
用于本發(fā)明主題的方法的氣溶膠制劑包括拋射劑、表面活性劑和共溶劑并且可以將這些制劑填充入通過合適的計(jì)量閥封閉的常用氣溶膠容器。
為了口服給藥，可以將本發(fā)明的抗炎組合物制成分散單位，諸如各自含有作為粉末或顆粒的預(yù)定量活性組分膠囊、膠囊形片劑、軟膠囊、扁囊劑、丸劑或片劑；在含水液體或非水液體中的溶液或混懸液；或水包油型液體乳劑或油包水型乳劑；和大丸劑等?；蛘撸梢酝ㄟ^液體溶液、混懸液或酏劑、粉末、錠劑、微粉化顆粒和滲透遞藥系統(tǒng)給予本發(fā)明所有方面的組合物。
適用于鼻部給藥的本發(fā)明組合物制劑(其中載體為固體)包括具有例如在20-500微米范圍的顆粒大小的粗粉，可以將該制劑以給予鼻吸藥的方式給藥，即通過從保持接近鼻部的粉末容器經(jīng)鼻道快速吸入的方式給藥。例如通過鼻腔噴霧劑、氣溶膠或作為滴鼻劑給藥的載體為液體的合適的制劑包括本發(fā)明化合物的水或油溶液。半液體制劑，諸如鼻凝膠劑也是合適的。
適合于非腸道給藥的組合物制劑包括含水和非水無菌注射溶液，它們可以含有抗氧化劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、制菌劑和使得制劑與指定接受者血液等滲的溶質(zhì)；和可以包括懸浮劑和增稠劑的含水和非水無菌混懸液。
通過下列實(shí)施例來解釋用于合成一般通式(IA)、(IB)和(IC)化合物的方法，它們是本發(fā)明一般通式(I)化合物的具有確定立體化學(xué)的代表。
用作實(shí)施例中原料化合物的通式VIII、IX、XIV、XVIII、XIX、XX、XXI、XXIV、XXIX、XXXIII、XXXVII、XLIII、XLV、XLVII、IL、LIII、LVII和LXI的化合物為通式(II)的立體化學(xué)具體定義的異構(gòu)體純的代表。其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下所示





用于合成通式(II)的新原料的通式XI、XII、XIII、XV、XVI、XVII、XXII、XXIII、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII、XXXI、XXXII、XXXIV、XXXV、XXXVI、XXXVIII、XLI、XLII、XLIV、XLVI、XLVIII、LI、LII、LV、LVI、LVIII、LIX和LX的化合物為通式(V)的立體化學(xué)具體定義的異構(gòu)體純的代表。其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下所示







用于糖基化反應(yīng)的供體分子為商購的，例如通式(X)的化合物 或可以通過公知方法合成(參見實(shí)驗(yàn)部分)，例如，通式(XXX)、(L)和(LIV)的化合物 通過薄層色譜法，使用硅膠(DC-Alufolien Kieselgel 60 F254，Merck，Darmstadt)和下列溶劑混合物測(cè)定指定實(shí)施例中的Rf值
(A)乙酸乙酯-己烷1∶1(B)乙酸乙酯-己烷1∶2(C)乙酸乙酯-己烷2∶1(D)乙酸乙酯-己烷3∶1(E)乙酸乙酯-甲醇1∶1(F)乙酸乙酯-甲醇3∶1(G)乙酸乙酯-甲醇5∶1用UV光或通過用0.1M KMnO4-1M H2SO4的1∶1混合物噴板，隨后加熱至200℃檢測(cè)斑點(diǎn)。用Kieselgel 60進(jìn)行柱色譜法。在20℃下測(cè)定旋光度。使用Bruker Avance 500MHz分光計(jì)，應(yīng)用Me4Si作為內(nèi)標(biāo)記錄NMR光譜。質(zhì)子的歸屬基于COSY、2D和選擇性1D TOCSY以及選擇性1D NOESY實(shí)驗(yàn)。13C光譜的多重性獲自DEPT實(shí)驗(yàn)。通過HMQC和HMBC實(shí)驗(yàn)觀察鑒定的質(zhì)子與質(zhì)子化碳之間的連接性。
就在有吡啶存在下進(jìn)行的酰化反應(yīng)而言，″常用的操作″意旨如果在將反應(yīng)混合物傾入冰-水后產(chǎn)物不結(jié)晶，那么用有機(jī)溶劑萃取它，用水、1M冰-冷硫酸水溶液洗滌有機(jī)層至持久呈酸性，用水、5％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥，過濾并且在真空中蒸發(fā)溶劑。
例如，通過下列方法合成通式(XIV)化合物的原料步驟a)2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XI)在室溫下向攪拌的27g(0.1mol)2，4-O-亞芐基-D-葡萄糖醇(L.Vargha，Ber.68(1935)18-24)在150ml二甲基甲酰胺中的混懸液中加入20ml(0.26mol)2，2-二甲氧基丙烷和100mg對(duì)-甲苯磺酸。在攪拌10分鐘后，獲得澄清溶液并且在1小時(shí)后加入1ml三乙胺。濃縮該反應(yīng)混合物，將殘余物溶于氯仿，過濾出不溶性原料，濃縮濾液并且使殘余物從200ml苯中重結(jié)晶而得到14g(45％)標(biāo)題化合物。Mp.178℃，Rf0.4(溶劑C)。
步驟b)1-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XII)向上述步驟中獲得的3.1g(10mmol)通式(XI)的產(chǎn)物在50ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入4.5g(11mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和3g(12mmol)Hg(CN)2并且將混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用100ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)而得到2.7g(42％)標(biāo)題化合物，Rf0.7，[α]D+5°(c1，氯仿)。
步驟c)1-O-(β-D-吡喃葡糖基)-2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XIII)在室溫下向上述步驟中獲得的4.1g通式(XII)的產(chǎn)物在40ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑G)而得到2.2g(73％)標(biāo)題化合物，Rf0.6，[α]D-8°(c1，氯仿)。
步驟d)1-O-(β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇(XIV)向攪拌的上述步驟中獲得的3g通式(XIII)的產(chǎn)物在80ml甲醇中的溶液中加入3ml水、1ml乙酸和2g 10％Pd/C催化劑并且在大氣壓下氫化該混合物。當(dāng)按照TLC檢測(cè)反應(yīng)完全(～4小時(shí))時(shí)，過濾出催化劑，將殘余物溶于20ml 0.05M硫酸并且在60℃下攪拌90分鐘。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾，濃縮至15ml體積并且冷凍干燥而得到1.9g(86％)標(biāo)題化合物，Rf0.1(溶劑E)，[α]D-105°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XVIII)的原料步驟a)2，4-O-亞芐基-1-O-苯甲?；?5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XV)在-20℃下，向攪拌的3.1g(10mmol)2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(L.Vargha，Ber.68(1935)18-24和1377-1384)在10ml吡啶中的溶液中滴加1.3ml(11mmol)苯甲酰氯。將該反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌15分鐘并且在室溫下攪拌30分鐘，然后按照常規(guī)操作步驟進(jìn)行后處理。通過柱色譜法純化在濃縮有機(jī)相后獲得的殘余物(溶劑B)而得到2.5g(60％)標(biāo)題化合物，為無色糖漿狀物。Rf0.6，[α]D-24°(c1，氯仿)。
步驟b)3-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，4-O-亞芐基-1-O-苯甲酰基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XVI)向攪拌的上述步驟中獲得的2.5g(6mmol)通式(XV)的產(chǎn)物在20ml乙腈中的溶液中加入5g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入2.5g(6mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和1.6g(6.5mmol)Hg(CN)2并且將混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用40ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑A)而得到2.45g(55％)標(biāo)題化合物，Rf0.5，[α]D-4°(c1，氯仿)。
步驟c)3-O-(β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇(XVIII)在室溫下，向上述步驟中獲得的4.46g(6mmol)式(XVI)的產(chǎn)物在20ml甲醇中的溶液中加入0.2ml 2M在甲醇中的甲醇鈉。1小時(shí)后，當(dāng)按照TLC檢測(cè)脫?；磻?yīng)完全時(shí)，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將含有脫?；a(chǎn)物(XVII)和苯甲酸甲酯的殘余物溶于50ml甲醇，加入3ml水、1ml乙酸和2g10％Pd/C催化劑并且在大氣壓下氫化該混合物。當(dāng)按照TLC檢測(cè)反應(yīng)完全(～15小時(shí))時(shí)，過濾出催化劑，濃縮濾液，將殘余物溶于氯仿和水的混合物并且分離。向水相中加入1.5ml硫酸并且在60℃下攪拌1小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾，濃縮至15ml體積并且冷凍干燥而得到2g(97％)標(biāo)題化合物，為吸濕性粉末，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。[α]D-14°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XXIV)的原料步驟a)1，3-雙-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XXII)向6.2g(20mmol)2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XI)在200ml乙腈中的溶液中加入24g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入18g(44mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和12g(48mmol)Hg(CN)2并且將混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用400ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。使殘余物從150ml甲醇中重結(jié)晶而得到1.8g(9.3％)標(biāo)題化合物，Mp.168-170℃，Rf0.7(溶劑C)，[α]D-5°(c1，氯仿)。
步驟b)1，3-雙-O-(β-D-吡喃葡糖基)-2，4-O-亞芐基-5，6-O-亞異丙基-D-葡萄糖醇(XXIII)在室溫下，向上述步驟中獲得的2.65g通式(XXII)的產(chǎn)物在30ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M在甲醇中的甲醇鈉。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液而得到1.7g(97％)標(biāo)題化合物，Rf0.3(溶劑F)。[α]D-8°(c1，水)。
步驟c)1，3-雙-O-(β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇(XXIV)向攪拌的上述步驟中獲得的1.7g通式(XXIII)的產(chǎn)物在50ml甲醇中的溶液中加入加入3ml水、1ml乙酸和1g 10％Pd/C催化劑并且在大氣壓下氫化該混合物。當(dāng)按照TLC檢測(cè)反應(yīng)完全(～4小時(shí))時(shí)，過濾出催化劑，濃縮濾液，將殘余物溶于20ml 0.05M硫酸并且在60℃下攪拌90分鐘。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾，濃縮至15ml體積并且冷凍干燥而得到1.25g(92％)標(biāo)題化合物。Rf0.1(溶劑E)，[α]D-20°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XXIX)的原料
步驟a)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-O-亞異丙基-1，6-二-O-三苯甲基-D-甘露糖醇(XXV)在室溫下向攪拌的11.1g(50mmol)3，4-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(T.Horváth和L.Vargha，Carbohydr.Res.，16(1971)253-259)在50ml吡啶中的溶液中加入33.4g(120mmol)三苯甲基氯。2天后，向低于20℃的反應(yīng)混合物中滴加14ml苯甲酰氯。2小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物傾入冰-水，從沉淀的糖漿狀物中潷析水并且使殘余物從400ml乙醇結(jié)晶。過濾出結(jié)晶物質(zhì)，用乙醇洗滌并且干燥。使由此獲得的產(chǎn)物從2.5-倍乙酸乙酯中重結(jié)晶而得到36.1g(79％)標(biāo)題化合物。Mp.165-167℃，[α]D+7°(c1，氯仿)。
步驟b)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXVI)向上述步驟中獲得的30g(33mmol)通式(XXV)的產(chǎn)物在300ml二噁烷中的溶液中加入50ml 0.1M硫酸并且將該溶液在90℃下攪拌6小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑A)并且使獲得的粗產(chǎn)物從乙醚-己烷中重結(jié)晶而得到3.3g(23.6％)標(biāo)題化合物。Mp.97-99℃，Rf0.45，[α]D-20°(c1氯仿)。
步驟c)1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，5-二-O-苯甲?；?3，4-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXVII)向3g(7mmol)通式(XXVI)的產(chǎn)物在65ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入6.5g(16mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和4.4g(18mmol)Hg(CN)2并且將混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用130ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)并且將獲得的粗產(chǎn)物從乙醇中重結(jié)晶而得到2.75g(36％)標(biāo)題化合物。Mp.193-195℃，Rf0.4，[α]D-28°(c1，氯仿)。
步驟d)1，6-雙-O-(β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇(XXIX)在室溫下向攪拌的上述步驟中獲得的2.6g(2.4mmol)通式(XXVII)的產(chǎn)物在40ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。1小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將含有通式(XXVIII)化合物的水溶液濃縮至15ml體積并且加入1.5ml 1M硫酸。將該溶液在60℃下攪拌90分鐘，然后冷卻并且通過離子交換樹脂中和。將過濾的溶液冷凍干燥而得到1.15g(95％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D-23.4°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XXXIII)的原料步驟a)1，6-雙-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-乙?；?β-吡喃龍膽二糖基)-2，5-二-O-苯甲?；?4，5-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXI)向攪拌的1.72g(4mmol)2，5-二苯甲?；?3，4-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXVI，上述)在60ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入6g(8.6mmol)溴乙酰龍膽二糖(XXX)(K.Takiura，S.Honda，T.Endo，K.Kakehi.Chem.Pharm.Bull.20(1972)438-442)和4.4g(18mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用120ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液，10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑D)并且將獲得的粗產(chǎn)物從乙醇中重結(jié)晶而得到1.3g(22％)標(biāo)題化合物。Mp.＞220℃，Rf0.5，[α]D-16°(c1，氯仿)。
步驟b)1，6-雙-O-(β-D-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇(XXXIII)將1.3g(0.78mmol)上述步驟中獲得的式(XXXI)的產(chǎn)物在25ml甲醇中的溶液中加入0.25ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液并且將該反應(yīng)混合物在45℃下攪拌2小時(shí)。在冷卻后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將含有通式(XXXII)化合物的水溶液濃縮至15ml體積并且加入1.5ml 1M硫酸。將該溶液在60℃下攪拌90分鐘，然后冷卻并且通過離子交換樹脂中和。將過濾的溶液冷凍干燥而得到0.65g(～100％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D-3.5°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XXXVII)的原料步驟a)1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-乙?；?β-吡喃龍膽二糖基)-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXV)向攪拌的2.4g(9.2mmol)1，23，4-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXIV)(L.F.Wiggins，J.Chem.Soc(1946)13-14)在60ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入6.3g(9mmol)溴乙酰龍膽二糖(XXX)(K.Takiura，S.Honda，T.Endo，K.Kakehi.Chem.Pharm.Bull.20(1972)438-442)和2.5g(10mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用120ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液，10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)而得到4.1g(52％)標(biāo)題化合物。Rf0.4，[α]D+2°(c1，氯仿)。
步驟b)1-O-β-吡喃龍膽二糖基-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXVI)在室溫下向上述步驟中獲得的3.9g(4.4mmol)通式(XXXV)的產(chǎn)物在50ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M在甲醇中的甲醇鈉。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑F)而得到1.6g(62％)標(biāo)題化合物。Rf0.4。[α]D-5.5°(c1，水)。
步驟c)1-O-β-吡喃龍膽二糖基-D-甘露糖醇(XXXVII)將上述步驟中獲得的1.4g(2.4mmol)式(XXXVI)的產(chǎn)物在20ml0.01M硫酸中的溶液在60℃下攪拌1.5小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾并且冷凍干燥而得到1.15g(95％)標(biāo)題化合物。[α]D-17°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式通式(XLIII)的原料步驟a)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-1，6-二-O-三苯甲基-D-甘露糖醇(XL)向攪拌的6.3g(20mmol)3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI)(J.Kuszmann，Carbohydr.Res.，71(1979)123-134)在60ml吡啶中的溶液中加入20.1g(72mmol)三苯甲基氯。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2天，然后向攪拌和冷卻的溶液中滴加8.4ml苯甲酰氯。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后傾入冰-水，用二氯甲烷萃取并且使用常規(guī)方式處理有機(jī)層。將濃縮后獲得的殘余物溶于150ml熱乙醇，冷卻，過濾沉淀的產(chǎn)物并且用乙醇洗滌。將由此獲得的粗產(chǎn)物溶于40ml乙酸乙酯并且加入120ml乙醇。過濾出沉淀的產(chǎn)物并且用乙醇洗滌而得到20.25g(75％)標(biāo)題化合物。Mp.128-130℃，[α]D+45°(c1，氯仿)。
步驟b)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI)向攪拌的上述步驟中獲得的20g式(XL)的產(chǎn)物300ml熱乙酸中的溶液中分小批加入100ml水并且將該混合物在80-90℃下攪拌30分鐘。在冷卻后，過濾出沉淀的三苯甲醇并且用氯仿萃取濾液。用水、5％碳酸氫鈉水溶液、水洗滌有機(jī)層，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑E)而得到7.0g(75.5％)標(biāo)題化合物，為糖漿狀物。Rf0.2，[α]D+33°(c1，氯仿)。
步驟c)
1-O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基)-2，5，6-三-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLII)向攪拌的上述步驟中獲得的6.3g(15mmol)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI)在65ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入6.2g(15mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和4.2g(16mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用130ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。將殘余物溶于50ml吡啶并且在室溫下向攪拌的溶液中滴加4ml苯甲酰氯。2小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物傾入冰-水，用二氯甲烷萃取并且使用常規(guī)方式處理。通過柱色譜法純化濃縮時(shí)獲得的殘余物(溶劑A)而得到3.5g(27％)標(biāo)題化合物，為糖漿狀物。Rf0.6，[α]D0°(c1，氯仿)。
步驟d)1-O-(β-D-吡喃葡糖基)-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLIII)向攪拌的上述步驟中獲得的3.3g(2.87mmol)通式(XLII)的產(chǎn)物在40ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液并且將該反應(yīng)混合物回流2小時(shí)。在冷卻后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將該水溶液濃縮至20ml體積并且冷凍干燥而得到1.4g(97％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D+10°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XLV)的原料步驟a)1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLIV)向攪拌的3.34g(8mmol)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI，如上所述)在65ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入8.2g(20mmol)溴乙酰-D-葡萄糖(X)和5.5g(22mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用130ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)并從乙醇重結(jié)晶所獲得的粗產(chǎn)物，得到3.4g(39％)標(biāo)題化合物。Mp.138-140℃，Rf0.35，[α]D+38°(c1，氯仿)。
步驟b)1，6雙-O-β-D-吡喃葡糖基-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLV)在室溫下向攪拌的上述步驟中獲得的3.1g(2.87mmol)式(XLIV)的產(chǎn)物在40ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將該水溶液濃縮至15ml體積并且冷凍干燥而得到1.56g(～100％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D-4°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(XLVII)的原料步驟a)1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-乙?；?β-吡喃龍膽二糖基)-2，5，6-三-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLVI)向攪拌的5.0g(12mmol)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI，如上所述)在70ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入8.4g(12mmol)溴乙酰龍膽二糖(XXX)(K.Takiura，S.Honda，T.Endo，K.Kakehi.Chem.Pharm.Bull.20(1972)438-442)和3.3g(12mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用140ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。將殘余物溶于50ml吡啶并且在室溫下向該攪拌的溶液中滴加4ml苯甲酰氯。2小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物傾入冰-水，用二氯甲烷萃取并以常規(guī)方式處理。通過柱色譜法純化濃縮時(shí)獲得的殘余物(溶劑A)而得到5.2g(38％)粗產(chǎn)物，將其中10倍甲醇重結(jié)晶得到純的標(biāo)題化合物。Mp.166-168℃，Rf0.6，[α]D+8°(c1，氯仿)。
步驟b)1-O-β-吡喃龍膽二糖基-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLVII)向攪拌的上述步驟中獲得的2.3g(2.03mmol)式(XLVI)的產(chǎn)物在40ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液并且將該反應(yīng)混合物回流2小時(shí)。在冷卻后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將該水溶液濃縮至20ml體積并且冷凍干燥而得到1.05g(97％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D-11°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(IL)的原料步驟a)1，6-雙-O-(2，3，6，2′，3′，4′，6′-七-O-乙?；?β-乳糖基)-2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLVIII)向攪拌的3.15g(7.5mmol)2，5-二-O-苯甲?；?3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLI，如上述)在100ml乙腈中的溶液中加入14g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入12g(17.25mmol)溴乙酰乳糖(C.S.Hudson，J.M.Johnson，J.Am.Chem.Soc.37(1915)1270-1275)和5g(20mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用200ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)而得到4.2g(34％)標(biāo)題化合物。Rf0.2，[α]D-1.5°(c1，氯仿)。
步驟b)1，6-雙-O-β-乳糖基-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(IL)向攪拌的上述步驟中獲得的4.2g(2.4mmol)式(XLVIII)的產(chǎn)物在50ml甲醇中的溶液中加入1.0ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液并且將該反應(yīng)混合物回流2小時(shí)。在冷卻后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物溶于水并且用氯仿萃取以便除去苯甲酸甲酯。將該水溶液濃縮至15ml體積并且冷凍干燥而得到1.9g(92％)標(biāo)題化合物，為無定形粉末。[α]D+28°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(LIII)的原料步驟a)1-O-(2，3，4-三-O-乙酰基-α-D-吡喃阿拉伯糖基)-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(LI)向攪拌的3.9g(15mmo1)1，23，4-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXIV)(L.F.wiggins，J.Chem.Soc(1946)13-14)在60ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入5g溴乙酰-D-阿拉伯糖(L)(M.Bárczai-Martos和F.K r_sy，Nature.165(1950)369)和4g(16mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用120ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)而得到3.1g(40％)標(biāo)題化合物。Rf0.5，[α]D-2°(c1，氯仿)步驟b)1-O-α-D-吡喃阿拉伯糖基-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(LII)在室溫下向攪拌的上述步驟中獲得的2.9g(5.6mmol)式(LI)的產(chǎn)物在30ml甲醇中的溶液中加入0.3ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑G)而得到1.3g(59％)標(biāo)題化合物。Rf0.5，[α]D+8°(c1，水)。
步驟c)1-O-α-D-吡喃阿拉伯糖基-D-甘露糖醇(LIII)將上述步驟中獲得的1.15g(2.92mmol)式(LII)的產(chǎn)物在20ml0.05M硫酸中的溶液在60℃下攪拌1.5小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾并且冷凍干燥而得到0.9g(98％)標(biāo)題化合物。[α]D-8°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(LVII)的原料步驟a)1-O-(2，3，4-三-O-乙?；?β-D-吡喃木糖基)-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(LV)向攪拌的4.2g(16mmol)1，23，4-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(XXXIV)(L.F.wiggins，J.Chem.Soc(1946)13-14)在65ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入6.5g(19mmol)溴乙酰-D-木糖(LIV)(M.Bárczai-Martos和F.K r_sy，Nature.165(1950)369)和5.5g(22mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用130ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑C)而得到4.8g(56％)標(biāo)題化合物。Rf0.6，[α]D-22°(c1，氯仿)。
步驟b)1-O-β-D-吡喃木糖基-3，45，6-二-O-亞異丙基-D-甘露糖醇(LVI)在室溫下向攪拌的上述步驟中獲得的4.6g(8.84mmol)式(LV)的產(chǎn)物在50ml甲醇中的溶液中加入0.3ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。通過柱色譜法純化殘余物(溶劑F)而得到2.2g(63％)標(biāo)題化合物。Rf0.6，[α]D+1.5°(c1，水)。
步驟c)1-O-β-D-吡喃木糖基-D-甘露糖醇(LVII)將上述步驟中獲得的2.0g(5.08mmol)式(LVI)的產(chǎn)物在20ml0.05M硫酸中的溶液在60℃下攪拌1.5小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾并且冷凍干燥而得到1.35g(85％)標(biāo)題化合物。[α]D-21.5°(c1，水)。
例如，可以通過下列方法合成通式(LXI)的原料
步驟a)1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-2，34，5-二-O-亞異丙基-半乳糖醇(LIX)向攪拌的2.62g(10mmol)2，34，5-二-O-亞異丙基-半乳糖醇(LVIII)(R.M.Honn，W.D.Maclay，CS.Hudson J.Am.Chem.Soc61(1939)2438)在60ml乙腈中的溶液中加入7g分子篩(4_)并且將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后加入8.5g(21mmol)溴乙酰-D-葡萄藤(X)和5.0g(20mmol)Hg(CN)2并且將該混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后過濾該反應(yīng)混合物并且用120ml氯仿稀釋濾液，用5％碳酸氫鈉水溶液、10％溴化鉀水溶液和水洗滌，干燥并且濃縮。使殘余物從5-倍乙醇中重結(jié)晶而得到而得到4.9g(53％)標(biāo)題化合物。Mp.164-166℃，[α]D-25°(c1，氯仿)步驟b)1，6-雙-O-(β-D-吡喃糖基)-半乳糖醇(LXI)在室溫下向攪拌的上述步驟中獲得的4.65g(5.04mmol)式(LIX)的產(chǎn)物在50ml甲醇中的溶液中加入0.5ml 2M甲醇鈉在甲醇中的溶液。2小時(shí)后，通過添加陽離子交換樹脂除去鈉離子，過濾該混合物并且濃縮濾液。將殘余物(LX)溶于40ml 0.05M硫酸并且將該溶液在60℃下攪拌1.5小時(shí)。通過添加離子交換樹脂中和冷卻的溶液，過濾并且冷凍干燥而得到2.5g(98％)標(biāo)題化合物。[α]D-29°(c1，水)。
實(shí)施例實(shí)施例12，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇九鉀鹽(LXII)(IA，R1＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝R6＝SO3K)，
將5.1g(48％，30mmol)三氧化硫-二甲基甲酰胺復(fù)合物懸浮于5ml無水二甲基甲酰胺中，同時(shí)攪拌，將該混合物冷卻至-20℃并且逐步加入在5ml二甲基甲酰胺中的0.69g(2mmol)1-O-β-D-吡喃葡糖基-D-甘露糖醇(VIII，Lindberg，Acta Chim，Scand.7(1953)1218)，添加的速率使得保持溫度低于-15℃。15分鐘后，使該混合物的溫度升至-5℃并且保持45分鐘。此后再次將該反應(yīng)混合物冷卻至-20℃并且逐步加入1ml乙醇，添加的速率使得保持溫度低于-15℃。然后將該反應(yīng)混合物傾入攪拌和冷卻(-5℃)的5g碳酸鉀和40ml甲醇的溶液。過濾出沉淀并且用3×40ml甲醇洗滌。將固體殘余物溶于40ml水并且用M氫氧化鉀溶液將該溶液的pH調(diào)節(jié)至8，然后濃縮至20ml體積并且冷卻至+4℃。過濾出晶體并且用冷水洗滌而得到2.3g(78％)標(biāo)題化合物。Mp.＞220℃；[α]D+10°(c1，水)。C12H15O38S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 9.95；H 1.27；S 20.27；K 23.92。
實(shí)施例21，2，3，4，5-五-O-硫酸酯化-6-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXIII)(IB，R6＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R3＝R4＝R5＝SO3K)
按照實(shí)施例1中所述的方法，使用6-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(IX，M.L.Wolfrom和T.G.Gardner，J.Am Chem.Soc 65(1943)750-752)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXIII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率76％，[α]D-6°(c1，水)。C12H15O38S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 10.17；H 1.27；S 20.37；K 24.70。
實(shí)施例32，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXIV)(IB，R1＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XIV)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXIV)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率90％，[α]D-3.5°(c1，水)。C12H15O38S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 10.09；H 1.35；S 20.20；K 29.70。
實(shí)施例41，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXV)(IB，R3＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用3-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XVIII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXV)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率87％，[α]D+5°(c1，水)。C12H15O39S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 10.10；H 1.45；S 20.31；K 24.67。
實(shí)施例51，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXVI)(IB，R4＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R3＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用4-O-α-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XIX，M.L.Wolfrom等.，J.Am.Chem.Soc.62(1940)2553；E.Dryselius等.Acta Chem.Scand.11(1957)663-667)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXVI)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率73％，[α]D+40°(c1，水)。C12H15O39S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C9.84；H 1.40；S 19.98；K 23.99。
實(shí)施例61，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXVII)(IB，R4＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R3＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用4-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XX，M.L.Wolfrom等，J.Am.Chem.Soc.74(1952)1105)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXVII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率41％，[α]D+5°(c1，水)。C12H15O39S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 9.89；H 1.42；S 19.99；K 23.87。
實(shí)施例71，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃半乳糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽(LXVIII)(IB，R4＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃半乳糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R3＝R5＝R6＝SO3K)
按照實(shí)施例1中所述的方法，使用4-O-β-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖醇(XXI，W.J.Whelan和K.Morgan，Chem.和Ind.(1955)1449-1450)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXVIII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率40％，[α]D0°(c1，水)。C12H15O39S9K9計(jì)算值C 10.22；H 1.06；S 20.45；K 24.30。測(cè)定值C 9.99；H 1.29；S 19.88；K 23.87。
實(shí)施例82，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，3-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇十二鉀鹽(LXIX)(IB，R1＝R3＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R2＝R4＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，3-雙-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XXIV)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXIX)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率82％，[α]D-6.5°(c1，水)。C18H22O52S12K12計(jì)算值C 11.24；H 1.15；S 19.99；K 24.38。測(cè)定值C 11.01；H 1.32；S 19.07；K 23.99。
實(shí)施例92，3，4，5-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽(LXX)(IA，R1＝R6＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，6-雙-O-β-D-吡喃葡糖基-D-甘露糖醇(XXIX)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXX)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率83％，[α]D+1.5°(c1，水)。C18H22O52S12K12計(jì)算值C 11.24；H 1.14；S 19.98；K 24.35。測(cè)定值C 10.93；H 1.55；S 19.26；K 23.99。
實(shí)施例102，3，4，5-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十八鉀鹽(LXXI)(IA，R1＝R6＝2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-β-吡喃龍膽二糖基七鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝SO3K)
按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，6-雙-O-β-吡喃龍膽二糖基-D-甘露糖醇(XXXIII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXI)，區(qū)別在于向濃縮至20ml的極為觸變的水溶液中加入20ml乙醇。然后將混合物冷卻至+4℃。過濾沉淀出的產(chǎn)物并用乙醇洗滌。Mp.＞220℃，產(chǎn)率99％，[α]D+0°(c1，水)。C30H36O80S18K18計(jì)算值C 12.18；H 1.33；S 19.51；K 23.80。測(cè)定值C 11.88；H 1.65；S 19.92；K 24.16。
實(shí)施例112，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽(LXXII)(IA，R1＝2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基七鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-β-吡喃龍膽二糖基-D-甘露糖醇(XXXVII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率79％，[α]D+6°(c1，水)。C18H22O52S12K12計(jì)算值C 11.24；H 1.14；S 19.98；K 24.38。測(cè)定值C 10.98；H 1.51；S 19.37；K 24.02。
實(shí)施例12
3，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇七鉀鹽(LXXIII)(IA，R1＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R3＝R4＝Me，R2＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-β-D-吡喃葡糖基-D-甘露糖醇(XLVI)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXIII)，區(qū)別在于使用甲醇沉淀粗產(chǎn)物并且過濾，將其溶于水并且用1N氫氧化鉀溶液將由此獲得的溶液的pH調(diào)節(jié)至8。隨后向該溶液中加入3ml 1N的乙酸鍶水溶液，直到不再形成沉淀(SrSO4)。過濾出沉淀并且使濾液經(jīng)過加載了CHELX 100樹脂(鉀形式)(10mL)的柱，以便除去鍶離子。用蒸餾洗脫該柱，濃縮洗脫液。用乙醇處理殘余物，過濾并用乙醇洗滌。Mp.＞220℃，產(chǎn)率94％，[α]D0°(c1，水)。C14H21O32S7K7計(jì)算值C 14.02；H 1.76；S 18.71；K 22.82。測(cè)定值C 14.06；H 2.02；S 18.31；K 22.67。
實(shí)施例133，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽(LXXIV)(IA，R1＝R6＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R3＝R4＝Me，R2＝R5＝SO3K)
按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，6-雙-O-β-D-吡喃葡糖基-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLVIII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXIV)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率85％，[α]D-6.5°(c1，水)。C20H28O46S10K10計(jì)算值C 14.00；H 1.63；S 18.68；K 22.78。測(cè)定值C 13.85；H1.99；S 18.06；K 21.97。
實(shí)施例143，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽(LXXV)(IA，R1＝2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基七鉀鹽，R3＝R4＝Me，R2＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-β-吡喃龍膽二糖基-3，4-二-O-甲基-D-甘露糖醇(XLVII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXV)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率99％，[α]D-5°(c1，水)。C20H28O46S10K10計(jì)算值C 14.00；H 1.64；S 18.68；K 22.78。測(cè)定值C 13.87；H 1.99；S 19.24；K22.43。
實(shí)施例153，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，6，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-乳糖基-D-甘露糖醇十六鉀鹽(LXXVI)(IA，R1＝R6＝2，3，6，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-乳糖基七鉀鹽，R3＝R4＝Me，R2＝R5＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，6-雙-吡喃乳糖基-3，4-二甲基-D-甘露糖醇(LII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXVI)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率44％，[α]D+2°(c1，水)。C32H42O44S16K16計(jì)算值C 13.98；H1.53；S 18.65；K 22.75。測(cè)定值C 13.51；H 1.73；S 17.98；K 21.15。
實(shí)施例162，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-α-D-吡喃阿拉伯糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽(LXXVII)(IA，R1＝2，3，4-三-O-硫酸酯化-β-D-吡喃阿拉伯糖基三鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝R6＝SO3K)
按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-α-D-吡喃阿拉伯糖基-D-甘露糖醇(LV)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXVII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率99％，[α]D+19°(c1，水)。C11H14O34S8K8計(jì)算值C 10.49；H 1.12；S 20.36；K 24.83。測(cè)定值C 10.06；H 1.40；S 19.56；K 24.04。
實(shí)施例172，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-β-D-吡喃木糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽(LXXVIII)(IA，R1＝2，3，4-三-O-硫酸酯化-β-D-吡喃木糖基三鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝R6＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1-O-β-D-吡喃木糖基-D-甘露糖醇(LVII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXVIII)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率85％，[α]D-6°(c1，水)。C11H14O32S8K8計(jì)算值C 10.49；H 1.12；S 20.36；K 24.83。測(cè)定值C 10.05；H 1.29；S 19.98；K 14.52。
實(shí)施例182，3，4，5-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-半乳糖醇十二鉀鹽(LXXIX)(IC，R1＝R6＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R2＝R3＝R4＝R5＝SO3K) 按照實(shí)施例1中所述的方法，使用1，6-雙-吡喃葡糖基-半乳糖醇(LXII)作為原料制備標(biāo)題化合物(LXXIX)。Mp.＞220℃，產(chǎn)率83％，[α]D-10°(c1，水)。C18H22O52S12K12計(jì)算值C 11.24；H 1.15；S 19.99；K 24.38。測(cè)定值C 10.98；H 1.35；S 19.28；K 24.07。
實(shí)施例191，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃糖基)-D-葡萄糖醇九鈉鹽(LXXX)(IB，R3＝2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基四鉀鹽，R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝SO3Na) 將5.1g(48％，30mmol)三氧化硫-二甲基甲酰胺復(fù)合物懸浮于5ml無水二甲基甲酰胺中，同時(shí)攪拌，將該混合物冷卻至-20℃并且逐步加入在5ml二甲基甲酰胺中的0.52g(1.5mmol)3-O-β-D-吡喃葡糖基-D-葡萄糖醇(XVII)，添加的速率使得保持溫度低于-15℃。將該混合物在5℃下攪拌1小時(shí)。此后將該混合物再次冷卻至-15℃并且逐步加入1.5ml乙醇，添加的速率使得保持溫度低于-10℃。然后將該反應(yīng)混合物傾入攪拌和冷卻(0℃)的5g乙酸鈉和40ml甲醇的溶液。過濾出沉淀并且用3×40ml甲醇洗滌。將固體殘余物溶于30ml水并且用1M氫氧化鈉溶液將該溶液的pH調(diào)節(jié)至8，然后將3ml 1M乙酸鍶溶液加入到該溶液中。30分鐘后，過濾出沉淀并且用冷水洗滌。使濾液經(jīng)過加載了CHELX 100樹脂(鈉形式)(15mL)的柱，以便除去鍶離子。用蒸餾水洗脫柱并且濃縮洗脫液。用乙醇處理殘余物，過濾并且用乙醇洗滌而得到1.9g(99％)標(biāo)題化合物。Mp.＞220℃；[α]D+1.5°(c1，水)。C12H15O38S9Na9計(jì)算值C 11.41；H 1.20；S 22.85；Na 24.39。測(cè)定值C 11.74；H 1.57；S 22.25；Na 16.09。
等同技術(shù)方案盡管已經(jīng)詳細(xì)并且參照具體實(shí)施方案描述了所要求保護(hù)的本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員理解可以在不脫離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的情況下對(duì)所要求保護(hù)的本發(fā)明進(jìn)行公知改變和變型。因此，例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到或能夠只是使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定與本文所述的具體物質(zhì)和操作步驟等同的大量技術(shù)方案。認(rèn)為這類等同技術(shù)方案屬于本發(fā)明的范圍并且由包括在所附的權(quán)利要求書中。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6彼此獨(dú)立地表示C1-4烷基、-SO3H、多硫酸酯化糖基或多硫酸酯化二糖基-條件是R1-R6中至少一個(gè)的含義為多硫酸酯化糖基或多硫酸酯化二糖基。
2.權(quán)利要求(1)所述的化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1表示多硫酸酯化糖基或二糖基，R2-R6表示-SO3H。
3.權(quán)利要求(1)所述的化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1、R2、R4、R5和R6表示-SO3H，R3表示多硫酸酯化糖基或二糖基。
4.權(quán)利要求(1)所述的化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1、R2、R3、R5和R6表示-SO3H，R4表示多硫酸酯化糖基或二糖基。
5.權(quán)利要求(1)所述的化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1和R3表示多硫酸酯化糖基，R2、R4、R5和R6表示-SO3H。
6.權(quán)利要求(1)所述的化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1和R6表示多硫酸酯化糖基或二糖基，R2、R3、R4和R5表示-SO3H。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1表示多硫酸酯化糖基或二糖基，R3和R4表示C1-4烷基且R2、R5和R6為-SO3H。
8.式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽或異構(gòu)體，其中R1和R6表示多硫酸酯化糖基或二糖基，R3和R4表示C1-4烷基且R2和R5為-SO3H。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)的化合物，選自下列化合物組成的組2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇九鉀鹽；1，2，3，4，5-五-O-硫酸酯化-6-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-α-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；1，2，3，5，6-五-O-硫酸酯化-4-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃半乳糖基)-D-葡萄糖醇九鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，3-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇十二鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十八鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十二鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇七鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5，6-三-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-吡喃龍膽二糖基)-D-甘露糖醇十鉀鹽；3，4-二-O-甲基-2，5-二-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，6，2′，3′，4′，6′-七-O-硫酸酯化-β-乳糖基)-D-甘露糖醇十六鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-α-D-吡喃阿拉伯糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽；2，3，4，5，6-五-O-硫酸酯化-1-O-(2，3，4-三-O-硫酸酯化-β-D-吡喃木糖基)-D-甘露糖醇八鉀鹽；2，4，5，6-四-O-硫酸酯化-1，6-雙-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-半乳糖醇十二鉀鹽；1，2，4，5，6-五-O-硫酸酯化-3-O-(2，3，4，6-四-O-硫酸酯化-β-D-吡喃葡糖基)-D-葡萄糖醇九鈉鹽。
10.藥物組合物，包括如權(quán)利要求1所述的化合物及其藥物上可接受的載體。
11.權(quán)利要求1的化合物在制備適合于治療哺乳動(dòng)物氣道炎性病癥的藥物中的應(yīng)用。
12.權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，用于制備適合于治療氣道過敏性炎性病癥的藥物。
13.權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其中所述的氣道過敏性炎性病癥選自哮喘、過敏性鼻炎、內(nèi)源性或外源性支氣管哮喘、急性或慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺部疾病和肺纖維化。
14.一種用于治療哺乳動(dòng)物急性或慢性氣道炎性病癥的方法，該方法包括對(duì)有此需要的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
15.權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的氣道炎性病癥為過敏性炎性病癥。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述的氣道過敏性炎性病癥選自哮喘、過敏性鼻炎、內(nèi)源性或外源性支氣管哮喘、急性或慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺部疾病和肺纖維。
17.權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的氣道過敏性炎性病癥選自特發(fā)性肺纖維化和自身免疫性肺病。
18.權(quán)利要求14所述的方法，包括給予作為單劑量或多劑量的所述化合物。
19.通式(II)的化合物 其中R7、R8、R9、R10、R11和R12彼此獨(dú)立地表示氫原子、C1-4烷基、糖基或二糖基，R7-R12中至少一個(gè)為糖基或二糖基。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)的多硫酸酯化糖苷類、其藥物上可接受的鹽以及含有這些化合物作為活性組分的藥物組合物。此外，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療或緩解哺乳動(dòng)物氣道急性和慢性炎性病癥－包括哮喘和與哮喘相關(guān)的病理情況的癥狀的方法。
文檔編號(hào)A61K31/045GK101014607SQ200580029844
公開日2007年8月8日 申請(qǐng)日期2005年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月5日
發(fā)明者J·庫斯曼, I·庫魯茨, G·麥德伊斯, N·博朵爾 申請(qǐng)人:伊瓦克斯藥品研究院有限公司