專利名稱：靶向氧化治療制劑在治療病毒性疾病中的用途的制作方法
背景本申請(qǐng)要求2004年2月20日提交的，序列號(hào)為60/546,350的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，該申請(qǐng)題為“靶向氧化治療制劑在治療病毒性疾病中的用途”所列發(fā)明人為Robert F.Hofmann，，將其全部內(nèi)容引入本文作為參考。本發(fā)明涉及含有過氧化物或氧化產(chǎn)物的組合物，其制備方法，及其用途。更具體地說，本發(fā)明涉及藥物組合物或制劑，其含有過氧化物或由烯烴化合物在液體狀態(tài)或溶液中被含氧的氧化劑氧化得到的反應(yīng)產(chǎn)物；滲透溶劑；含有金屬螯合劑的染料；和芳香族氧化還原化合物。本發(fā)明還涉及藥物制劑的制備及其在治療病毒性疾病中的用途。臭氧是三原子的氣體分子并且是氧的同素異形體。它可通過放電或強(qiáng)紫外線穿過純氧來獲得。流行的錯(cuò)誤概念即臭氧是嚴(yán)重的污染物，疾病的“自由基”理論，以及抗氧化物添加劑市場都易于對(duì)其作為治療應(yīng)用的醫(yī)學(xué)正統(tǒng)說法產(chǎn)生誤解。然而，臭氧治療是一個(gè)誤稱。臭氧是一種反應(yīng)性極強(qiáng)并且不穩(wěn)定的氣體，其作用機(jī)理與其通過與血漿和細(xì)胞膜中存在的有機(jī)化合物的選擇性的相互作用所產(chǎn)生的副產(chǎn)物直接相關(guān)。臭氧與不飽和烯烴在碳碳雙鍵發(fā)生的選擇性反應(yīng)，生成了臭氧化物。臭氧自身是有毒的，并且其反應(yīng)產(chǎn)物，臭氧化物是不穩(wěn)定的而且它們自身不能單獨(dú)用于治療。在1818年發(fā)現(xiàn)過氧化氫(H2O2)，在自然界中以痕量存在。當(dāng)過氧化氫與生物膜和微粒物質(zhì)直接接觸時(shí)，過氧化氫是不穩(wěn)定的并且劇烈地分解(或起泡)。光，攪拌，熱，和鐵均可以加快過氧化氫在溶液中的分解速率。通過直接接觸過氧化氫在體外殺死了具有低濃度過氧化物破壞酶，例如過氧化氫酶的微生物。然而，當(dāng)將過氧化氫注入被過氧化物敏感的大腸桿菌感染的兔血液中時(shí)無殺菌的效應(yīng)。此外，在體外增加含大腸桿菌的兔或人血液中的過氧化物的濃度也不能產(chǎn)生直接殺菌活性的證據(jù)。高濃度過氧化氫的無效與宿主動(dòng)物血中存在的過氧化物破壞酶過氧化氫酶有直接關(guān)系。為了產(chǎn)生效果，高濃度的過氧化氫必須與細(xì)菌接觸相當(dāng)長的一段時(shí)間。在血液中普遍存在的大量的過氧化氫破壞酶，例如過氧化氫酶，使得過氧化物不可能在血液中存在超過幾秒。因此，通過注射或輸注將過氧化氫引入血流中不能直接作為血液或細(xì)胞外液中的細(xì)胞外殺菌劑。然而，過氧化氫的確在活化巨噬細(xì)胞中參與殺菌過程?；罨奘杉?xì)胞被吸引至感染部位，附著于感染的有機(jī)體，并將其吞噬。有機(jī)體的殺滅在巨噬細(xì)胞內(nèi)通過過氧化氫進(jìn)行的。過氧化氫將細(xì)胞氯化物(cellular chloride)氧化成二氧化氯自由基，這些自由基能使微生物膜不穩(wěn)定，并且如果持續(xù)的話，會(huì)誘發(fā)細(xì)胞凋亡或細(xì)胞自毀。細(xì)胞內(nèi)過氧化作用的關(guān)鍵治療準(zhǔn)則是過氧化載體分子僅對(duì)被認(rèn)為不能提高過氧化氫酶和谷胱甘肽還原酶活性的患病的巨噬細(xì)胞選擇性的遞送、吸收和激活。輸注的過氧化氫是全身性的有毒物質(zhì)而靶向性的細(xì)胞內(nèi)過氧化作用是選擇性的治療工具。巨噬細(xì)胞根據(jù)它們的定位的位置在免疫、骨鈣化、視覺、神經(jīng)絕緣(髓鞘形成)、解毒、泵強(qiáng)度(pump strength)、和清除來自機(jī)體的毒素中起關(guān)鍵性作用。巨噬細(xì)胞所需的能量由稱為線粒體的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)來提供。線粒體在結(jié)構(gòu)上通常與微細(xì)纖維的內(nèi)部細(xì)胞結(jié)構(gòu)有關(guān)。線粒體的褶皺的內(nèi)層產(chǎn)生高能量的ATP分子，而外層含有細(xì)胞色素和產(chǎn)生過氧化物的電子再循環(huán)分子。線粒體的外層對(duì)毒性阻斷劑敏感或可被內(nèi)毒素、真菌毒素、藥物、重金屬和殺蟲劑破壞。當(dāng)線粒體的過氧化反應(yīng)功能被阻斷時(shí)，細(xì)胞的絲狀結(jié)構(gòu)傾向于交聯(lián)，產(chǎn)生錯(cuò)誤信號(hào)，功能不全，不恰當(dāng)?shù)膹?fù)制或過早的細(xì)胞死亡。在許多惡性腫瘤和病毒感染的巨噬細(xì)胞中線粒體細(xì)胞色素氧化酶的酶活性顯著降低。(Allen等人，1977)。特別地，對(duì)猴病毒變異細(xì)胞和非變異細(xì)胞的研究已經(jīng)表明線粒體細(xì)胞色素氧化酶在變異細(xì)胞中的活性僅為非變異細(xì)胞的50％。(white，等人.，1975)。當(dāng)今對(duì)公眾健康具有重大影響的兩種病毒是丙型肝炎病毒(“HCV”)和人免疫缺陷病毒(“HIV-1”)。HCV和HIV-1兩者均為RNA病毒。RNA病毒的結(jié)構(gòu)與其它病毒的的結(jié)構(gòu)基本相同遺傳物質(zhì)核心，通常包含在蛋白質(zhì)保護(hù)衣殼內(nèi)，在很多情況中也包含在脂膜內(nèi)。RNA病毒的生命周期也是相似的附著于宿主細(xì)胞上，滲透，復(fù)制遺傳物質(zhì)，制造保護(hù)衣殼，以及由細(xì)胞中放出。主要的差別來源于這樣的事實(shí)，即如它們的名稱所示，RNA病毒的遺傳信息貯存在RNA中而不是DNA中。RNA病毒簡單，只需少量的遺傳物質(zhì)即可編碼它們存活所需的信息并且無需將另外的酶包裹入它們的核心。丙型肝炎病毒(“HCV”)是一起引起大多數(shù)病毒性肝炎的病毒(A，B，C，D，和E)中的一種。其是黃病毒科中一種膜包裹的RNA病毒，具有有限的宿主范圍。人類和黑猩猩是唯一已知的對(duì)其敏感的物種，這兩種物種均會(huì)形成相似的疾病。該病毒的重要特征是其基因組的相對(duì)可突變性，而這又與高度誘發(fā)慢性感染的傾向(80％)有關(guān)。HCV被分成幾個(gè)不同的基因型。HCV主要通過與人類血液的直接接觸傳播。通過沒有進(jìn)行HCV感染檢測的輸血，通過重復(fù)使用沒有充分滅菌的針頭、注射器或其它醫(yī)療設(shè)備，以及通過在吸毒者中共同使用針頭均會(huì)引起轉(zhuǎn)播。雖然很少，但也可能發(fā)生性傳播和圍產(chǎn)期傳播。如果使用沒有充分滅菌的設(shè)備，則由于使用經(jīng)皮方法的文化、社會(huì)和行為實(shí)踐(例如耳朵和身體的穿孔，包皮環(huán)切，紋身)也會(huì)發(fā)生其它的傳播方式。HCV不會(huì)通過噴嚏、擁抱、咳嗽、食物或水、共用餐具、或偶然的接觸傳播。丙型肝炎的早期癥狀難以認(rèn)定，因?yàn)樗鼈儗?shí)質(zhì)上是進(jìn)行性的并且通常很輕。初始感染超過六個(gè)月后，實(shí)際上仍不能檢測該疾病。有時(shí)初始感染十年后開始產(chǎn)生最普通的癥狀疲勞。其它的癥狀包括微熱、肌肉和關(guān)節(jié)痛、惡心、嘔吐、食欲不振、不明的腹痛，以及有時(shí)是腹瀉。許多病例未確診是因?yàn)樵摪Y狀使人們想到的是一種僅僅是來了又去的類似于流感的疾病，或者這些癥狀是如此的輕微以至于患者沒有意識(shí)到任何不尋常的事情。少數(shù)病人注意到深色尿液和淺色糞便，隨后是黃疸，其中皮膚和眼白變黃?？赡艽嬖谄つw搔癢。一些感染的個(gè)體可能會(huì)減輕5至10磅。感染HCV的個(gè)體經(jīng)常被鑒別出來是因?yàn)樵诔Ｒ?guī)的驗(yàn)血中發(fā)現(xiàn)他們具有升高的肝臟酶或因?yàn)樵讷I(xiàn)血的時(shí)候發(fā)現(xiàn)丙型肝炎抗體為陽性。通常，升高的肝臟酶和HCV陽性抗體測試(抗-HCV)表明一個(gè)體患有慢性丙型肝炎。極少比例的患者可能會(huì)從急性的丙型肝炎康復(fù)，但此后他們的抗HCV測試將保持陽性。實(shí)際上，輕度感染中感染的個(gè)體是沒有癥狀的但是具有高度的傳染性，在發(fā)展到嚴(yán)重前，可以持續(xù)幾年，甚至幾十年。然而，超過80％的感染個(gè)體最終都發(fā)展到該疾病的慢性階段，其最終導(dǎo)致了肝硬化(肝臟組織的瘢痕化)和晚期的肝臟疾病。發(fā)展成最終的肝臟硬化階段平均需要大約20年的時(shí)間。在此最終階段前，癥狀與肝衰竭，包括黃疸和腹部腫脹(由于稱為腹水的液體潴留)相匹配，這取決于臟疾病的嚴(yán)重程度和是否已發(fā)展成為肝硬化。某些肝硬化患者隨時(shí)間進(jìn)展情況良好，而其他人十年后和有時(shí)五年后將死去。大約20％的患者可能產(chǎn)生甲狀腺，腸道，眼部，關(guān)節(jié)，血液，脾，腎和皮膚疾病。原發(fā)性的肝癌也可由丙型肝炎，一種晚期風(fēng)險(xiǎn)因子，發(fā)展而來，其在感染后大約30年形成。自從十多年前α干擾素第一個(gè)被批準(zhǔn)用于慢性丙型肝炎治療后該疾病發(fā)展穩(wěn)定?？共《舅幬锢绺蓴_素可以單獨(dú)，或與病毒唑相結(jié)合用于治療患有慢性丙型肝炎的人。單獨(dú)使用干擾素治療在10％至20％的患者中是有效的。與病毒唑相結(jié)合的干擾素在大約30％至50％的患者中是有效的。當(dāng)單獨(dú)使用病毒唑時(shí)并無療效。現(xiàn)有的治療方法在具有基因型2和3的患者中最有效，在美國約25％的患者表現(xiàn)基因型2和3?；蛐?a和1b是最難治療的，感染了大約75％患者。被批準(zhǔn)的最佳給藥方案通常是將聚乙二醇化干擾素α和病毒唑組合治療24-或48-周(Manns，等.，2001)。干擾素和病毒唑治療的副作用包括疲勞，抑郁，頭疼，惡心和嘔吐，皮膚刺激，過敏，和鼻竇炎。因此，所需要的是一種有效的和不產(chǎn)生顯著副作用的治療病毒例如丙型肝炎病毒的方法。HIV-1是一種相當(dāng)復(fù)雜的病毒，認(rèn)為其包含2個(gè)相同的為大約9,500核苷酸長度的正義(即，mRNA)單鏈RNA鏈的拷貝。這些可相互鏈接至形成基因組RNA二聚體。HIV-1通過感染CD4+T細(xì)胞誘發(fā)疾病。這些細(xì)胞通常是調(diào)節(jié)對(duì)感染的免疫反應(yīng)的白細(xì)胞(白血細(xì)胞)的亞型。HIV-1通過使用CD4+T細(xì)胞來復(fù)制其本身，傳播至全身并且同時(shí)使機(jī)體需要用以對(duì)抗病毒的細(xì)胞減少。一旦HIV陽性個(gè)體的CD4+T細(xì)胞數(shù)量減少至一定的閾值，他們易于患有機(jī)體通常能夠控制的大范圍的疾病。據(jù)說處于高危感染的HIV-感染個(gè)體具有獲得性免疫缺陷綜合癥(“AIDS”)。自從1981年以來美國已經(jīng)報(bào)道了超過830,000例的AIDS。950,000名美國人可能感染了HIV-1，其中的四分之一并沒有意識(shí)到他們被感染。這種流行病在少數(shù)群體中增長最快并且是年齡在25至44的非洲裔美國男性的頭號(hào)殺手。根據(jù)美國疾病預(yù)防和控制中心(“CDC”)，感染AIDS的非洲裔美國人為白人的七倍以上，感染AIDS的西班牙后裔為白人的三倍以上。許多人初次感染HIV-1時(shí)沒有任何的癥狀。然而，有些人在接觸該病毒一個(gè)或兩個(gè)月內(nèi)會(huì)患有流感樣疾病。此類疾病可以包括發(fā)熱，頭痛，疲勞，和淋巴結(jié)腫大。這些癥狀通常在一周至一個(gè)月內(nèi)消失并經(jīng)常被錯(cuò)認(rèn)為是另外的病毒感染。在此段時(shí)期，人們很容易被感染。在HIV-1初次進(jìn)入成人體內(nèi)后10年或更長時(shí)間，或出生時(shí)感染HIV-1的兒童在兩年內(nèi)都可能不會(huì)出現(xiàn)更持久或嚴(yán)重的癥狀。這段“無癥狀”的感染時(shí)期是高危性個(gè)體。有些人可能在幾個(gè)月之內(nèi)開始有癥狀，而其他人的可能超過10年也無癥狀。隨著免疫系統(tǒng)的惡化，多種并發(fā)癥開始產(chǎn)生。對(duì)于許多人而言，感染的第一個(gè)征兆是淋巴結(jié)腫大或超過三個(gè)月的“扁桃體(swollenglands)”增大。在AIDS發(fā)作前經(jīng)歷數(shù)月至數(shù)年的其它癥狀包括能量缺乏、體重減輕、經(jīng)常發(fā)熱和出汗、持續(xù)或經(jīng)常的醇母菌感染(口腔或陰道)、持續(xù)的皮疹或掉皮、婦女盆腔炎、和短期的記憶喪失。有些人會(huì)受到經(jīng)常并且嚴(yán)重的皰疹感染，其會(huì)引起嘴、生殖器、或直腸潰瘍或神經(jīng)疼痛性疾病，稱為帶狀皰疹?，F(xiàn)在給予HIV-陽性患者提供了在其生命周期的不同階段攻擊HIV-1的藥物的復(fù)雜給藥方案。這些藥物稱為抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物并包括蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、和通道抑制劑。建立HIV-1的治療過程涉及到許多問題。每種有效藥物具有副作用，經(jīng)常是嚴(yán)重的并且有時(shí)會(huì)危及他們的生命。通常的副作用包括極度惡心和腹瀉、肝臟損傷和衰竭、以及黃疸。任何的治療要求常規(guī)驗(yàn)血以確定持續(xù)的效力(根據(jù)T-細(xì)胞計(jì)數(shù)和病毒負(fù)荷)和肝功。因此，所需的是一種有效和不產(chǎn)生顯著副作用的治療病毒例如HIV-1的方法。屬于De Villez的美國專利第4,451,480號(hào)教導(dǎo)了治療痤瘡的組合物和方法。該方法包括使用一種來自各種不揮發(fā)油和不飽和酯、醇、醚和脂肪酸臭氧化的臭氧化物質(zhì)局部治療被感染的部位。屬于De Villez的美國專利第4,591,602號(hào)介紹了一種用于控制微生物感染的加州希蒙得木的臭氧化物。屬于Herman的美國專利第4,983,637號(hào)公開了一種通過腸胃外施用在藥學(xué)上可接受的載體中的萜烯臭氧化物治療局部和全身病毒感染的方法。屬于Herman的美國專利第5,086,076號(hào)公開了一種包含載體和萜烯臭氧化物的抗病毒組合物。該組合物適于全身施用或局部施用。屬于Herman的美國專利第5,126,376號(hào)描述了一種使用在載體中的萜烯臭氧化物局部治療哺乳動(dòng)物病毒感染的方法。屬于Herman的美國專利第5,190,977教導(dǎo)了一種包含非-水載體和萜烯臭氧化物的適于全身注射的抗病毒組合物。屬于Herman的美國專利第5,190,979號(hào)描述了一種使用在載體中的萜烯臭氧化物腸胃外治療哺乳動(dòng)物醫(yī)學(xué)病癥的方法。屬于Herman的美國專利第5,260,342號(hào)教導(dǎo)了一種使用在載體中的萜烯臭氧化物腸胃外治療哺乳動(dòng)物病毒感染的方法。屬于Herman的美國專利第5,270,344公開了一種通過將三噁烷或不飽和烴的雙過氧化物衍生物應(yīng)用哺乳動(dòng)物的小腸來治療哺乳動(dòng)物全身性疾病的方法，該衍生物通過將溶于非極性溶劑中的不飽和烴進(jìn)行臭氧化來制備。屬于Herman的美國專利第5,364,879號(hào)描述了一種用于治療哺乳動(dòng)物醫(yī)學(xué)病癥的組合物，該組合物包含非萜烯不飽和烴雙過氧化物或三噁烷衍生物，該衍生物通過在35℃下將載體中的不飽和烴進(jìn)行臭氧化來制備。盡管報(bào)告了萜烯臭氧化物能夠應(yīng)用于不同的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥，萜烯臭氧化物仍顯示出許多缺陷。例如，單萜烯，例如月桂烯和檸檬烯的臭氧化物會(huì)在實(shí)驗(yàn)室中燃燒。因此，它們?cè)谂渲苹蛸A存中都是十分危險(xiǎn)的。此外，香葉醇，一種直鏈單萜醇的臭氧化物，在水中或二甲基亞砜(“DMSO”)中的對(duì)三例病毒性水痘帶狀皰疹(帶狀皰疹)和兩例單純皰疹病毒性皮炎沒有顯示出任何臨床療效。因此，需要一種使用烯烴化合物的氧化反應(yīng)產(chǎn)物的安全和有效的藥物制劑或組合物。還需要一種用于刺激線粒體防御自由基形成和有效治療感染病毒例如丙型肝炎病毒和HIV-1的個(gè)體的方法。
概述本發(fā)明涉及藥物制劑，包括由不飽和有機(jī)化合物在液體狀態(tài)下或在溶液中被一種含氧的氧化劑氧化得到的過氧化物或其反應(yīng)產(chǎn)物；一種滲透溶劑；一種螯合染料；以及一種芳香族氧化還原化合物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，必需的組分包括由一種不飽和醇臭氧解形成的過氧化產(chǎn)物、一種穩(wěn)定溶劑、金屬卟啉及醌。本發(fā)明還涉及該藥物制劑治療病毒的用途。優(yōu)選地過氧化物或反應(yīng)產(chǎn)物通過烯烴和臭氧的反應(yīng)形成。一般公認(rèn)烯烴與臭氧之間的反應(yīng)是通過Criegee機(jī)理進(jìn)行的。按照這種機(jī)理，如以下

圖1所示，最初反應(yīng)步驟是臭氧向烯烴的1，3-偶極環(huán)加成，得到伯臭氧化物(1，2，3-三噁烷)。伯臭氧化物是不穩(wěn)定的，經(jīng)過1，3-裂環(huán)得到羰基化合物和羰基氧化物。在不存在其它試劑或親核溶劑的情況下，新的1，3-偶極進(jìn)入第二次的1，3-偶極環(huán)加成得到“正常的”臭氧化物，1，2，4-三噁烷。
方案1在副反應(yīng)中，羰基氧化物能夠參加二聚化，得到過氧化二聚物，1，2，4，5-四噁烷，以下圖2所示。
方案2羰基氧化物是強(qiáng)的親電子物質(zhì)，并在親核物質(zhì)存在下(例如，醇或水)，其容易經(jīng)歷親核加成得到1-烷氧基過氧化氫，以下圖3所示。在某些的條件下，1-烷氧基過氧化氫能夠經(jīng)歷進(jìn)一步反應(yīng)得到羧酸衍生物。
方案3仍然不希望被理論所束縛，據(jù)信在本發(fā)明的包含醇的烯烴的臭氧解過程中，合理的是預(yù)期將存在三種主要類型的過氧化產(chǎn)物正常的臭氧化物，羰基四噁烷二聚物，和1-烷氧基過氧化氫。在水存在的情況下，一些過氧化產(chǎn)物還可能導(dǎo)致在促產(chǎn)物的混合物中存在有機(jī)過酸。本發(fā)明還包括滲透溶劑例如二甲基亞砜(“DMSO”)來“穩(wěn)定”臭氧分解的初始產(chǎn)物的應(yīng)用。相似地，不希望被任何理論所束縛，據(jù)信該穩(wěn)定作用很可能是簡單的溶劑化現(xiàn)象。然而，已知DMSO本身是一種親核試劑。它作為親核配偶體參與穩(wěn)定反應(yīng)物也是可能的(例如，作為二甲基硫代氧鎓鹽(dimethylsulfoxonium))。當(dāng)前的藥物制劑的穩(wěn)定的過氧化分子和滲透溶劑是由通常認(rèn)為是安全的組分制備而成(“GRAS”)。藥物制劑的另一個(gè)組分是螯合染料，例如卟啉。金屬卟啉在光化學(xué)激發(fā)下使氧敏感的傾向有大量文獻(xiàn)為證，這也是亞鐵卟啉和銅卟啉鍵合含氧系統(tǒng)的傾向。藥物制劑的另一個(gè)組分是芳香族氧化還原化合物，例如醌。雖然不希望被任何的理論所束縛，仍假定優(yōu)選的藥物制劑是在感染或發(fā)育異常的巨噬細(xì)胞中誘發(fā)循環(huán)自催化氧化的生化藥物的組合。該藥物制劑通過無反對(duì)的過氧化作用促進(jìn)靶向的細(xì)胞凋亡(細(xì)胞自殺)。因此，該藥物制劑在很多表面上不同的基于線粒體的巨噬細(xì)胞疾病中發(fā)揮了治療作用。特別地，已經(jīng)證明該藥物制劑在感染丙型肝炎病毒(“HCV”)的個(gè)體中是有效的，可減少病毒RNA的濃度，恢復(fù)正常的肝臟酶濃度，并改善全部癥狀。該藥物制劑在體外減少病毒復(fù)制速率也是有效的。這些結(jié)果表明其治療病毒的有效性。
附圖簡述圖1表示在取自感染鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒的培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的上清液中存在的感染單位。顯示了使用兩種濃度的兩種藥物制劑樣品治療細(xì)胞產(chǎn)生的結(jié)果，與未經(jīng)治療的，感染的對(duì)照細(xì)胞的結(jié)果。圖2表示使用兩種濃度的兩種藥物制劑樣品治療培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的存活細(xì)胞計(jì)數(shù)，與未經(jīng)治療的，未感染的對(duì)照細(xì)胞的存活細(xì)胞計(jì)數(shù)。圖3表示使用兩種濃度的兩種藥物制劑樣品治療后，感染鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒的培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的存活細(xì)胞計(jì)數(shù)。還顯示了未經(jīng)治療的，感染的對(duì)照細(xì)胞的結(jié)果。
優(yōu)選實(shí)施方案詳述本發(fā)明涉及藥物制劑，包括由不飽和有機(jī)化合物在液體狀態(tài)下或溶液中被一種含氧的氧化劑氧化得到的過氧化物或其反應(yīng)產(chǎn)物；一種滲透溶劑；一種螯合染料；以及一種芳香族氧化還原化合物。該藥物制劑可以用于抗病毒目的，例如治療丙型肝炎病毒(“HCV”)和HIV-1。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物制劑必需的組分包括由一種不飽和醇臭氧解形成的過氧化產(chǎn)物、一種穩(wěn)定溶劑、金屬卟啉及醌。藥物制劑中的不飽和有機(jī)化合物，也可以是不飽和的烯烴可為沒有羥基的烯烴或含有羥基的烯烴。優(yōu)選地，烯烴具有少于大約35個(gè)的碳原子。沒有羥基的烯烴可以是開鏈的不飽和烴、單環(huán)的不飽和烴、或雙環(huán)的不飽和烴。含羥基的烯烴可以是開鏈的不飽和醇、單環(huán)的不飽和醇、或雙環(huán)的不飽和醇。烯烴還可以在非揮發(fā)油、酯、脂肪酸或醚中含有?？捎玫牟伙柡拖N可以是未取代的、取代的、環(huán)狀的或復(fù)合的烯烴、肼、類異戊二烯、甾族化合物、喹啉、類胡蘿卜素、生育酚、聚異戊二烯化蛋白或不飽和脂肪。對(duì)于本發(fā)明優(yōu)選的不飽和烴是烯烴和類異戊二烯。類異戊二烯主要見于植物，為精油的成分。盡管很多類異戊二烯是烴類，不過也存在含氧的類異戊二烯，例如醇、醛和酮。在正式意義上，類異戊二烯烴的構(gòu)件可以被想象為異戊二烯烴，CH2＝C(CH3)-CH＝CH2，雖然已知異戊二烯本身是類異戊二烯生物合成的終產(chǎn)物，不是中間體。類異戊二烯烴是根據(jù)它們所含有的異戊二烯(C5H8)單元數(shù)而分類的。因而分別地，單萜具有2個(gè)、倍半萜具有3個(gè)、二萜具有4個(gè)、二倍半萜具有5個(gè)、三萜具有6個(gè)、四萜具有8個(gè)異戊二烯單元。四萜更普遍地稱為類胡蘿卜素。檸檬烯和蒎烯是單萜的實(shí)例。法呢醇和橙花叔醇是倍半萜醇的實(shí)例。維生素A1和植醇是二萜醇的實(shí)例，角鯊烯是三萜的實(shí)例。維生素原A1、即已知的胡蘿卜素，是四萜的實(shí)例。香葉醇是一種單萜醇，在氧鍵合與正常狀態(tài)下都是液體，對(duì)活細(xì)胞是安全的。優(yōu)選的藥物制劑的不飽和烴包括類異戊二烯烯烴，例如myricene、citrillene、檸檬醛、蒎烯或檸檬烯。優(yōu)選的不飽和烴還包括在直鏈上具有兩個(gè)至四個(gè)重復(fù)的異戊二烯基團(tuán)的直鏈類異戊二烯醇，例如α-松油醇，香茅醇，橙花醇，植醇，薄荷醇，香葉醇，香葉基香葉醇，沉香醇，或法呢醇。不飽和有機(jī)化合物可以是直鏈的、支鏈的、環(huán)狀的、螺旋的或與其他分子配合的，具有一定的構(gòu)型。在與氧化劑結(jié)合之前，不飽和有機(jī)化合物可以天然地以氣態(tài)、液體或固體形式存在。開鏈的不飽和烴可以是CnH2n，一個(gè)雙鍵，n＝2-20；CnH2n-2，兩個(gè)雙鍵，n＝4-20；CnH2n-4，三個(gè)雙鍵，n＝6-20；CnH2n-6，四個(gè)雙鍵，n＝8-20；C25H40，二倍半萜烯烴；或C30H48，三萜烯烴。單環(huán)的不飽和烴可以是CnH2n-2，一個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝3-20；CnH2n-4，兩個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝5-20，CnH2n-6，三個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝7-20，C25H40，二倍半萜烯烴；或C30H48，三萜烯烴。二環(huán)的不飽和烴可以是CnH2n-4，一個(gè)雙鍵和兩個(gè)環(huán)，n＝4-20；CnH2n-6，兩個(gè)雙鍵和兩個(gè)環(huán)，n＝6-20；C25H40，二倍半萜烯烴；或C30H48，三萜烯烴。開鏈的不飽和醇可以是CnH2nOm，一個(gè)雙鍵，n＝3-20，m＝1-4；CnH2n-2Om，兩個(gè)雙鍵，n＝5-20，m＝1-4；CnH2n-4Om，三個(gè)雙鍵，n＝7-20，m＝1-4；CnH2n-6Om，四個(gè)雙鍵，n＝9-20，m＝1-4；C25H40Om，m＝1-4，二倍半萜烯醇；或C30H48Om，m＝1-4，三萜烯醇。單環(huán)的不飽和醇可以是CnH2n-2Om，一個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝3-20，m＝1-4；CnH2n-4Om，兩個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝5-20，m＝1-4；CnH2n-6Om，三個(gè)雙鍵和一個(gè)環(huán)，n＝7-20，m＝1-4；C25H40Om，m＝1-4，二倍半萜烯醇；或C30H48Om，m＝1-4，三萜烯醇。二環(huán)的不飽和醇可以是CnH2n-4Om，一個(gè)雙鍵和兩個(gè)環(huán)，n＝5-20，m＝1-4；CnH2n-6Om，兩個(gè)雙鍵和兩個(gè)環(huán)，n＝7-20，m＝1-4；C25H40Om，m＝1-4，二倍半萜烯醇；或C30H48Om，m＝1-4，三萜烯醇。基于藥物制劑的總重量，烯烴可以在大約0.001％至大約30％，優(yōu)選地在大約0.1％至大約5.0％，和更優(yōu)選地在大約0.5％至大約3.0％之間變動(dòng)。藥物制劑中氧化不飽和烴的含氧氧化劑，可以是單線態(tài)氧，三線態(tài)氧，超氧化物陰離子，臭氧，高碘酸鹽，羥基，過氧化氫，烷基過氧化物，過氧化氨甲酰，過氧化苯甲酰，或與過渡元素例如鉬結(jié)合的氧(如MoO5)。“活化氧”與完整的類異戊二烯醇例如香葉醇結(jié)合的優(yōu)選方法，是在0-20℃之間的溫度下，在黑暗中，在沒有水或極性溶劑的存在下進(jìn)行臭氧化。然后在黑暗中、在100％二甲基亞砜(DMSO)中溶解和穩(wěn)定化香葉醇“臭氧化物”，以防止產(chǎn)物的過早分解。雖然不希望受任何理論所限，不過據(jù)信在超氧化物陰離子存在的情況下，在細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生香葉醇臭氧化的四噁烷過氧化二聚體副產(chǎn)物的催化分解，它不是臭氧化物。所釋放的最終反應(yīng)性治療劑是過氧化氫和乙酸。該藥物制劑還使用了滲透溶劑。穩(wěn)定氧健合不飽和烴的滲透溶劑，可以是軟化劑，液體，膠束膜，或蒸汽?？墒褂玫臐B透溶劑包括水溶液，脂肪，甾醇，卵磷脂，磷脂，乙醇，丙二醇，甲磺酰甲烷，聚乙烯吡咯烷酮，pH-緩沖鹽水，和二甲基亞砜(“DMSO”)。優(yōu)選的滲透劑包括DMSO、聚乙烯吡咯烷酮、和pH-緩沖鹽水。最優(yōu)選的滲透劑是DMSO?；谒幬镏苿┑目傊亓浚瑵B透溶劑可以在約50％至約99％，優(yōu)選約90％至約98％，更優(yōu)選約95％至約98％之間變動(dòng)?！胺€(wěn)定的”過氧化分子及其滲透溶劑已經(jīng)從目前用于生產(chǎn)的組分制成，它們已獲得食品與藥品管理局(FDA)的許可。這些成分是Drug Master Files，Drug Monographs的主體，見于USP/NF，或者是被公認(rèn)為安全的(GRAs)。藥物制劑的另一個(gè)組分是螯合染料。此染料優(yōu)選包含二價(jià)或三價(jià)金屬，例如鐵，銅，錳，錫，鎂或鍶的螯合物。優(yōu)選的螯合的金屬是鐵。螯合染料例如金屬卟啉在光化學(xué)激活條件下活化氧的傾向，如同亞鐵卟啉和銅卟啉結(jié)合含氧體系的傾向一樣，已充分報(bào)道?？捎玫娜玖习ㄌ烊换蚝铣傻娜玖?。這些染料的實(shí)例包括卟啉，玫瑰紅，葉綠酸，氯高鐵紅素，卟吩，咕啉，texaphrins，亞甲基藍(lán)，血卟啉，曙紅，赤蘚紅，flavinoids，核黃素，蒽染料，金絲桃蒽酮，甲基膽蒽，中性紅和熒光素。優(yōu)選的染料可以是任何天然或合成的卟啉，血卟啉，葉綠酸，玫瑰紅，它們各自的同種物，或其混合物。最優(yōu)選的染料是血卟啉和玫瑰紅的混合物，以及血卟啉和葉綠酸的混合物。染料可以敏感于光子，激光，電離輻射，聲子，心電穿孔，磁脈沖，或連續(xù)的流動(dòng)激發(fā)?；谒幬镏苿┗蚪M合物的總重量，染料可以在約0.1％至約30％，優(yōu)選約0.5％至約5％，更優(yōu)選約0.8％至約15％之間變化。藥物制劑中的另一個(gè)組分是芳香族氧化還原化合物，例如醌。芳香族氧化還原化合物可以是任何取代或未取代的苯醌，萘醌或蒽醌。優(yōu)選的芳香族氧化還原化合物包括苯醌，甲基苯醌，萘醌，和甲基萘醌。最優(yōu)選的芳香族氧化還原化合物是甲基萘醌?；谒幬镏苿┑目傊亓?，芳族氧化還原化合物可以在約0.01％至約20.0％，優(yōu)選約0.1％至約10％，更優(yōu)選約0.1％至約0.5％之間變化。藥物制劑還優(yōu)選地通過能源或電子供體活化?？墒褂玫碾娮庸w包括電流、抗壞血酸鹽或抗壞血酸，NADH或NADPH，和倍半氧化鍺。優(yōu)選的電子供體包括抗壞血酸鹽和NADH。最優(yōu)選的電子供體是任意鹽形式的抗壞血酸。基于藥物制劑的總重量，電子供體可以在約0.01％至約20％，優(yōu)選約1％至約10％，更優(yōu)選約1％至約5％之間變化。為了獲得體內(nèi)生物學(xué)效果，優(yōu)選地將不飽和烴臭氧分解所得過氧化產(chǎn)物，而不是臭氧化物，與超氧化物生成性螯合染料和芳族醌以藥物制劑的形式輸注。不飽和烴產(chǎn)物，或過氧化二聚體分子在不含水的穩(wěn)定溶劑中應(yīng)該穩(wěn)定并且應(yīng)該能夠穿透類脂膜?；钚詮?qiáng)地活性染料治療的研究人員早已知道超氧化物生成性染料和芳香族氧化還原化合物優(yōu)先被吸收至感染和發(fā)育異常的細(xì)胞中，該細(xì)胞還典型地是過氧化氫酶不足。不希望被理論所束縛，過氧化氫酶誘發(fā)的過氧化物破壞作用應(yīng)該在靶細(xì)胞中被天然控制或通過藥物制劑被控制。過氧化物二聚體也應(yīng)該通過超氧化物生成性染料被活化，引發(fā)給二聚體提供電子并引起過氧化氫和乙酸細(xì)胞內(nèi)釋放。染料的電子活化不一定需要光，而是可以通過小的電脈沖，例如由心臟脈搏所提供的電脈沖來引發(fā)。然后感染的巨噬細(xì)胞內(nèi)的過氧化反應(yīng)往往會(huì)破壞細(xì)胞內(nèi)微管的異戊烯化的蛋白質(zhì)鍵合，以破壞感染毒素，或誘發(fā)巨噬宿主細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。藥物制劑是穩(wěn)定成分的組合。這些成分可以優(yōu)選地以干燥固體成分和液體成分的形式貯存于分離容器中，然后在使用部位混合。干燥的固體成分優(yōu)選地包括螯合染料和芳香族氧化還原化合物。液體成分優(yōu)選地包括過氧化物或由含氧活化劑氧化不飽和烴得到的反應(yīng)產(chǎn)物，以及滲透溶劑。優(yōu)選地通過靜脈內(nèi)施用。重建的產(chǎn)物可以優(yōu)選地以在生理鹽水中稀釋的濃縮物的形式通過靜脈內(nèi)施用。牙髓和鞘膜內(nèi)遞送也是可能的施用途徑。肌肉注射是不優(yōu)選的，因?yàn)槠渚哂挟a(chǎn)生局部刺激的傾向。藥物制劑體內(nèi)施用對(duì)于治療感染患者的病毒和病毒癥狀是有效的。特別地，藥物制劑減少了病毒RNA的濃度，恢復(fù)了正常的肝臟酶濃度，并改善了感染丙型肝炎病毒(“HCV”)患者的全部癥狀。藥物制劑還減少了病毒復(fù)制的速率，包括在體外減少鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒MoMuLV的復(fù)制速率。藥物制劑還可抑制HIV-1在人CD4+細(xì)胞中的感染和復(fù)制。藥物制劑對(duì)于細(xì)胞還是無毒的。
實(shí)施例1.不飽和烴的臭氧分解烯烴的臭氧分解既可以在溶劑中進(jìn)行，也可以按凈態(tài)進(jìn)行。在兩者情況下，反應(yīng)混合物的冷卻是關(guān)鍵的，以避免反應(yīng)的過氧化產(chǎn)物的暴發(fā)性分解。下列一般工藝是液體烯烴臭氧分解的典型代表。向配有磁攪拌器的1升燒瓶裝入烯烴(2摩爾)，將儀器稱重。用冷卻浴(冰水或冰鹽)包圍燒瓶。一旦內(nèi)容物冷卻至低于5℃，即開始攪拌，使含臭氧的干燥氧流(通常含3％臭氧)穿過混合物。有利的是分散臭氧化的氧在玻璃料中，但是對(duì)攪拌的溶液而言這不是必要的。定期中止氣流，將反應(yīng)燒瓶稱重或者對(duì)反應(yīng)混合物取樣。然后恢復(fù)氣流。一旦反應(yīng)燒瓶的質(zhì)量顯示明顯增重，或者一旦反應(yīng)混合物的質(zhì)子磁共振(H1NMR)光譜顯示烯屬質(zhì)子共振強(qiáng)度減少了所需程度(通常約50％)，即終止氣流。如上可以進(jìn)行臭氧分解，代之以烯烴在溶劑中的溶液，溶劑對(duì)臭氧無反應(yīng)性，例如飽和烴或氯代烴。如上可以進(jìn)行臭氧分解，有無溶劑均可，用烯醇代替烯烴，但決不影響反應(yīng)。然后將反應(yīng)混合物緩慢地傾入冷卻的滲透溶劑中。
實(shí)施例2.藥物制劑的制備如下制備本發(fā)明優(yōu)選的藥物制劑(1)向鏈二烯醇，3，7-二甲基-2，6-辛二烯-1-醇(香葉醇)噴射120mg/L臭氧/純氧氣體混合物，每小時(shí)1升氣體；(2)保持反應(yīng)溫度在5℃左右；(3)每小時(shí)取少量反應(yīng)產(chǎn)物，用H1NMR測量過氧化物或反應(yīng)產(chǎn)物的生成；(4)當(dāng)超過約50％的可用不飽和鍵已被反應(yīng)時(shí)，終止反應(yīng)；(5)將產(chǎn)物混合物用二甲基亞砜稀釋(1∶10)，得到溶液或分散體；(6)在用于靶生物系統(tǒng)之前，向溶液或分散體加入足量血卟啉、玫瑰紅與甲基萘醌干粉混合物，以便在通過鹽水靜脈內(nèi)輸注方式傳遞至靶生物系統(tǒng)時(shí)，分散其中的每種組分的濃度為20微摩爾?？蛇x地，在使用前可以向制劑加入抗壞血酸鹽。
實(shí)施例3.藥物制劑實(shí)例兩種優(yōu)選的制劑如下
A.重量％ 組分
*通過質(zhì)譜檢測B.
重量％ 組分
*通過質(zhì)譜檢測實(shí)施例4.HCV實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行以下試驗(yàn)以測定藥物制劑對(duì)于治療丙型肝炎病毒(“HCV”)是否有效。五名感染HCV的成年患者同意參加此項(xiàng)研究。每位患者均具有使用干擾素和病毒唑治療無效的歷史。出于道德考慮沒有使用安慰劑-對(duì)照，“盲法”群體。每位患者經(jīng)靜脈(“IV”)施用藥物制劑12次進(jìn)行治療。對(duì)于每次治療，將帶有滴注室的非過濾IV管與100cc袋裝無菌0.9％鹽水連接。然后，將1ml上述實(shí)施例3的制劑A加至鹽水溶液中并振搖袋裝混合物。插入20或22-規(guī)格的IV蝶形導(dǎo)管并在20至30分鐘內(nèi)輸注溶液。在十二周的期間內(nèi)每隔一周連續(xù)兩天施用該治療。在12-周的治療過程中沒有其它的治療或治療措施。
實(shí)施例5.病毒載量計(jì)數(shù)聚合酶的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(“PCR”)可以檢測感染患者的血清中的HCV RNA。PCR測試非常靈敏并且已被具體地設(shè)計(jì)用于檢測血清樣品中的HCV基因序列。然而，PCR僅測定HCV的RNA鏈的特定部分，不能確定HCV的RNA鏈?zhǔn)欠袢匀煌暾⑶夷芊駥?shí)際上進(jìn)行復(fù)制。然而，PCR是確定HCV感染嚴(yán)重程度的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。在開始進(jìn)行實(shí)施例4描述的治療過程之前，先測定每位患者治療前的PCR值。在完成12-周的治療過程后測定治療后的PCR值。每位患者的病毒載量計(jì)數(shù)如下表5-1所示。
表5-1.HCV病毒載量計(jì)數(shù) 在五名患者中，12周的治療過程后HCV病毒載量平均降低為62％?；颊?和5，屬于基因1a型，其是最難治療的HCV形式，所顯示的病毒載量減少量為38％和52％。另外，所有的五名患者都證明和描述了與疲勞，血糖控制，體重控制，循環(huán)問題，和關(guān)節(jié)疼痛有關(guān)的癥狀的減少，并且報(bào)告他們的生活方式和生活質(zhì)量總體上得到了改善。
實(shí)施例6.肝臟酶的功能升高濃度的肝臟丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(“ALT”)和天冬酰胺轉(zhuǎn)氨酶(“AST”)在HCV-感染患者中是常見的，并且隨著急性感染進(jìn)入慢性期其可以持續(xù)好幾年。當(dāng)肝細(xì)胞受損或死亡時(shí)釋放ALT和AST。健康個(gè)體中正常的ALT范圍是5IU/L至60IU/L。健康個(gè)體中正常的AST范圍是5IU/L至43IU/L。然而，需要注意的是這些值在HCV感染的過程中會(huì)發(fā)生變化，并且不可能對(duì)疾病的進(jìn)程進(jìn)行精確的預(yù)測。在實(shí)施例4所描述的12-周治療過程之前和之后測定患者2-5的肝臟酶。結(jié)果如下表6-1所示。
表6-1.肝臟酶濃度 所有的患者表現(xiàn)出酶濃度降低或傾向于正?；；颊?-5保持正常的肝臟酶濃度。
實(shí)施例7.鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒的體外抑制以下試驗(yàn)分析了藥物制劑是否能夠有效抑制鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒(MoMuLV)的復(fù)制是否有效。逆轉(zhuǎn)錄病毒MoMuLV引起胸腺萎縮，神經(jīng)變性，惡病質(zhì)，癌癥和免疫缺陷。使用培養(yǎng)的星形膠質(zhì)Cl細(xì)胞進(jìn)行體外研究。使用10％的FBSDMEM培養(yǎng)基將Cl細(xì)胞以2.4×104個(gè)細(xì)胞/ml接種于培養(yǎng)板上。培養(yǎng)過夜后，培養(yǎng)板上的一半細(xì)胞被病毒重復(fù)感染4次(“MOI”)，或每個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞中有4個(gè)感染粒子。然后，從培養(yǎng)板吸取病毒溶液并用實(shí)施例3的兩種藥物制劑(制劑A和B)之一以0.01％和0.025％的濃度替換。對(duì)照包括不合無藥物制劑的未感染的培養(yǎng)板和感染的培養(yǎng)板。感染24小時(shí)后，從培養(yǎng)板中取出1ml上清液并計(jì)算病毒滴度，或每ml感染單位。使用來自于非轉(zhuǎn)化，不產(chǎn)病毒性(non-producer)的鼠肉瘤陽性的，白血病陰性細(xì)胞株的15F細(xì)胞的通過常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室方法計(jì)算病毒滴度。用由Cl細(xì)胞收集的上清液感染15F細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng)。4-5天后計(jì)算病灶區(qū)數(shù)量。病毒滴度結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明僅使用一次劑量，藥物制劑也能引起逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制的快速終止。0.025％的濃度似乎比0.01％的濃度稍微更有效。
實(shí)施例8.藥物制劑的細(xì)胞毒性實(shí)施例7的體外試驗(yàn)也可用于檢測藥物制劑對(duì)未感染和感染MoMuLV的Cl細(xì)胞的細(xì)胞毒性。如上所述進(jìn)行感染過程，未感染的培養(yǎng)板也用實(shí)施例3的兩種藥物制劑(制劑A和B)之一以0.01％和0.025％的濃度進(jìn)行處理。在感染后48，72，和96小時(shí)后(h.p.i.)，對(duì)培養(yǎng)平板上的Cl細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并與對(duì)照進(jìn)行比較。未感染的Cl細(xì)胞的結(jié)果如圖2所示。在與感染細(xì)胞相同的時(shí)間對(duì)未感染細(xì)胞的進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此也以感染后的小時(shí)數(shù)(h.p.i.)表示。感染的Cl細(xì)胞結(jié)果如圖3所示。結(jié)果表明沒有一種藥物制劑對(duì)未感染的Cl細(xì)胞或MoMuLV病毒感染的Cl細(xì)胞具有毒性。
實(shí)施例9.HIV-1(IIIB)復(fù)制的抑制進(jìn)行以下試驗(yàn)以檢測藥物制劑降低培養(yǎng)細(xì)胞中HIV-1濃度的效力。作為典型的T-細(xì)胞向性(tropic)HIV-1分離株，已經(jīng)對(duì)原型HIV-1分離株IIIB進(jìn)行了多年的研究。IIIB分離株感染人類CD4+細(xì)胞并形成合胞(syncitia)，或多核巨細(xì)胞，其導(dǎo)致人類細(xì)胞的最終死亡。在上述實(shí)施例3的藥物制劑A存在的情況下用IIIB分離株以0.01的多重性感染(“MOI”)來感染MT 2細(xì)胞(一種人類CD4+細(xì)胞株)。用于治療細(xì)胞的藥物制劑具有0.02％的濃度。以同樣的方法使用IIIB分離株感染未治療的細(xì)胞，但是沒有用藥物制劑進(jìn)行治療。對(duì)照細(xì)胞是“模擬感染”，同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。使用p24試驗(yàn)定期監(jiān)測在培養(yǎng)的上清液中HIV-1 p24抗原的存在，在感染數(shù)天后(“dpi”)進(jìn)行測定。高濃度的p24抗原表明高度的感染。還可使用顯微鏡檢查和臺(tái)盼藍(lán)排除法定期監(jiān)測合胞的形成和細(xì)胞死亡。以下表9-1表示p24試驗(yàn)的結(jié)果。
表9-1.HIV-1(IIIB)感染(p24 ng/ml) 使用藥物制劑治療感染細(xì)胞，即使只有一個(gè)劑量，也具有低得多的病毒感染和復(fù)制程度。然而，即使較低的感染程度，在未治療和治療的細(xì)胞中在2至3dpi仍誘發(fā)合胞，因此細(xì)胞死亡的程度具有可比性。結(jié)果表明藥物制劑抑制了HIV-1在人類CD4+細(xì)胞中的感染和復(fù)制。
引用的參考文獻(xiàn)本文引入以下美國專利文獻(xiàn)和出版物作為參考。
美國專利U.S.Patent No.4,451,480，屬于DeVillezU.S.Patent No.4,591,602，屬于DeVillezU.S.Patent No.4,983,637，屬于HermanU.S.Patent No.5,086,076，屬于HermanU.S.Patent No.5,126,376，屬于HermanU.S.Patent No.5,190,977，屬于Herman
U.S.Patent No.5,190,979，屬于HermanU.S.Patent No.5,260,342，屬于HermanU.S.Patent No.5,270,344，屬于HermanU.S.Patent No.5,364,879，屬于Herman其它出版物Allen，N.，Clendenon，N.R.，et al.Acid hydrolase andcytochrome oxidase activities in nitrosourea induced tumors ofthe nervous system.Acta Neuropathol(Berl)，vol.39(1)，pp.13-23，1977.
Manns，M.P.，McHutchison，J.G.，Gordon，S.C.，Rustgi，V.K.，Shiffinan，M.，Reindollar，R.，Goodman，Z.D.，Koury，K.，Ling，M.，and Albrecht，J.K.Peginterferon alfa-2b plusribavirin compared with interferon alfa-2b plus ribavirin forinitial treatment of chronic Hepatitis Ca randomized trial.Lancet，vol.358，pp.958-65，2001.
White，M.T.，Arya，D.V.，et al.Biochemical propertiesof simian virus 40-transformed 3T3 cell mitochondria.JNatlCancer Inst，Vol.54(1)，pp.245-46，1975.
權(quán)利要求
1.一種治療病毒感染的患者的方法，包括給患者使用有效量的藥物制劑，包括由含氧氧化劑氧化烯烴得到的過氧化物或其反應(yīng)產(chǎn)物，其中烯烴包括α-松油醇，香茅醇，橙花醇，沉香醇，植醇，香葉醇，紫蘇子醇(perillyl alcohol)，薄荷醇，香葉基香葉醇，或法呢醇，并且含有羥基的烯烴為藥物制劑的約0.001％至約30％重量；一種滲透溶劑，其中滲透溶劑包括二甲基亞砜，甾醇，卵磷脂，丙二醇，甲磺酰甲烷，其中滲透溶劑為藥物制劑的約50％至約99％重量；一種含有二價(jià)或三價(jià)螯合金屬的染料，其中染料包括卟啉，玫瑰紅，葉綠酸，氯高鐵血紅素，咕啉，texaphrin，亞甲基藍(lán)，血卟啉，曙紅，赤蘚紅，核黃素，蒽染料，金絲桃蒽酮，甲基膽蒽，中性紅或熒光素，并且其中染料為藥物制劑的約0.1％至約30％重量；一種芳香族氧化還原化合物，其中氧化還原化合物包括取代或未取代的苯醌，萘醌或蒽醌，并且其中芳香族氧化還原化合物為藥物制劑的約0.01％至約20％重量。
2.權(quán)利要求1的方法，其中烯烴為液體形式，在溶液中或分散體中。
3.權(quán)利要求1的方法，其中在非揮發(fā)油，酯，脂肪酸或醚中含有烯烴。
4.權(quán)利要求1的方法，其中含氧氧化劑包括單線態(tài)氧，三線態(tài)氧，超氧化物陰離子，高碘酸鹽，羥基，過氧化氫，烷基過氧化物，過氧化氨甲酰，過氧化苯甲酰，或與過渡元素結(jié)合的氧。
5.權(quán)利要求1的方法，其中含氧氧化劑包括臭氧。
6.權(quán)利要求1的方法，其中滲透溶劑是液體，膠束膜，軟化劑，或蒸汽。
7.權(quán)利要求1的方法，其中滲透溶劑是二甲基亞砜(“DMSO”)。
8.權(quán)利要求1的方法，其中染料包括卟啉，玫瑰紅，葉綠酸或其混合物。
9.權(quán)利要求1的方法，其中金屬包括鐵。
10.權(quán)利要求1的方法，其中金屬包括銅，錳，錫，鎂或鍶。
11.權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步包括電子供體。
12.權(quán)利要求11的方法，其中電子供體包括抗壞血酸或其藥用鹽。
13.權(quán)利要求1的方法，其中病毒是丙型肝炎病毒或HIV-1。
14.一種治療病毒感染的患者的方法，包括給患者使用有效量的藥物制劑，包括由臭氧和氧的混合物氧化香葉醇得到的過氧化物或其反應(yīng)產(chǎn)物；二甲基亞砜(“DMSO”)；一種含有二價(jià)或三價(jià)螯合的金屬的染料，其中染料包括血卟啉和玫瑰紅的混合物，或血卟啉和葉綠酸的混合物；和甲基萘醌。
15.權(quán)利要求14的方法，其中病毒是丙型肝炎病毒或HIV-1。
全文摘要
一種藥物制劑及其用途。該藥物制劑含有由含氧氧化劑例如臭氧氧化烯烴例如香葉醇得到的過氧化物或反應(yīng)產(chǎn)物；一種滲透溶劑例如二甲基亞砜(“DMSO”)；一種含有螯合的金屬的染料，例如血卟啉；以及一種芳香族氧化還原化合物，例如苯醌。該藥物制劑可用于有效治療感染病毒例如丙型肝炎病毒和HIV－1的患者。
文檔編號(hào)A61K31/122GK1946385SQ200580012320
公開日2007年4月11日 申請(qǐng)日期2005年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月20日
發(fā)明者羅伯特·F·霍夫曼 申請(qǐng)人:羅伯特·F·霍夫曼