專利名稱：一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備滴鼻劑的方法，尤其是涉及一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法。
背景技術(shù)：
辛夷揮發(fā)油含有多種成分，其中除了含有主要有效成分桉葉素外，還含有α-蒎烯、芳樟醇，香葉醇，α-松油醇、耗牛兒醇，金合歡醇、丁香油酚，香豆素類，木脂素類等成分。辛夷性味辛、溫，具有發(fā)散風(fēng)寒，通鼻竅的功效。辛夷花的提取精油-辛夷揮發(fā)油對(duì)過(guò)敏性鼻炎治療的靶點(diǎn)較多，可以通過(guò)抗組胺，抗過(guò)敏，抗炎和對(duì)肥大細(xì)胞的保護(hù)作用等多個(gè)環(huán)節(jié)而對(duì)過(guò)敏性鼻炎發(fā)生影響，對(duì)過(guò)敏性鼻炎的治療是幾種機(jī)理的協(xié)同作用，從而可以獲得較好的治療效果。
脂質(zhì)體是一個(gè)描述由化學(xué)和物理性質(zhì)變化范圍很寬的一些化合物的不同排列術(shù)語(yǔ)。它與膠束、微乳液、液晶、單分子膜、多分子膜、主客體系等統(tǒng)稱為“分子有序組合體”，脂質(zhì)體實(shí)際上是一種兩親性分子在水中能自發(fā)形成由雙分子膜包裹的球狀小完全封閉的囊的膜材料。它可以將水溶性或者脂溶性藥物都可以制成包封率較高的脂質(zhì)體，藥物包封在這種納米級(jí)微粒具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而達(dá)到減小毒性、緩釋、持續(xù)療效等效果，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。
由于脂質(zhì)體易制備，具有很好的生物適應(yīng)性和低毒性，所以近年來(lái)被廣泛地用作生物模型和藥物載體。脂質(zhì)體包裹藥物為物理過(guò)程，不改變藥物分子結(jié)構(gòu)，當(dāng)藥物被包裹后可降低藥物毒性，減小藥物使用量，具有緩釋和控釋作用，而且各種分子大小的藥物都可被包裹。可制備特殊性能的脂質(zhì)體，如免疫脂質(zhì)體、各種條件敏感性脂質(zhì)體進(jìn)行靶向給藥，提高藥物效果。
脂質(zhì)體的主要原料磷脂是脂質(zhì)體雙分子膜的主要構(gòu)成材料，其中卵磷脂是構(gòu)成人體細(xì)胞膜的主要成份，是保持細(xì)胞正常形態(tài)和功能的生命基礎(chǔ)物質(zhì)之一。脂質(zhì)體與人體的相容性好，在人體內(nèi)被酶分解后產(chǎn)物完全無(wú)毒性。脂質(zhì)體的直徑一般在25-1000nm范圍，根據(jù)脂質(zhì)體形態(tài)結(jié)構(gòu)不同，主要結(jié)構(gòu)有兩種單層脂質(zhì)體和多層脂質(zhì)體。單層脂質(zhì)體組成脂質(zhì)體只有單層分子膜，多層脂質(zhì)體有多層單分子膜組成。單層脂質(zhì)體又分為小單層脂質(zhì)體、中單層脂質(zhì)體和大單層脂質(zhì)體三種。
脂質(zhì)體的在藥物包封材料方面已經(jīng)引起了科學(xué)界很大的興趣。在脂質(zhì)體鼻腔給藥研究中，國(guó)內(nèi)已有人開(kāi)展這方面的研究，董澤民[(董澤民賴氨匹林脂質(zhì)體鼻腔給藥的研究[J]中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志1995，26(5)199-202)]用凍融法制備了重建型賴胺匹林脂質(zhì)體，平均粒徑為1.29μm。家兔20mg/kg連續(xù)鼻腔給藥20天，對(duì)鼻黏膜無(wú)損害。
中華人民共和國(guó)專利公開(kāi)號(hào)為1200668的G格雷戈里埃蒂斯等發(fā)明了一種包含水不溶性或不溶解的顆粒性物質(zhì)的形成直徑0.1μm至50μm具有單層或多層結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)體。
中華人民共和國(guó)專利公開(kāi)號(hào)為1446534介紹了一種中藥生物堿類脂質(zhì)體及其制劑，它能夠提高有效血藥濃度。
中華人民共和國(guó)專利公開(kāi)號(hào)為1080523介紹了一種鼻腔給藥的緩釋劑型，是用中空的海綿狀載體吸附藥物與輔料的混合液，經(jīng)干燥處理后而制成。
目前，國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有關(guān)于辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體的專利報(bào)道。現(xiàn)在的市面上辛夷滴鼻劑都是采用常見(jiàn)的方式，直接作用于鼻粘膜，不同點(diǎn)在于成分和制備方法不同。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方法來(lái)實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明采用常見(jiàn)的逆向蒸發(fā)法和注射法及超聲處理制備納米脂質(zhì)體，使脂質(zhì)體及納米技術(shù)和在中國(guó)傳統(tǒng)治療方式中藥滴鼻劑方面的應(yīng)用開(kāi)創(chuàng)了廣闊的應(yīng)用前景。
脂質(zhì)體的制備方法有很多，常見(jiàn)的逆向蒸發(fā)法、注射法、壓縮法等，本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液采用逆向蒸發(fā)和超聲相結(jié)合的方法制備，在保證藥物包封率的同時(shí)，可以方便的對(duì)脂質(zhì)體的粒徑進(jìn)行控制。
鼻腔給藥是藉由鼻腔血管將藥物傳入體內(nèi)。鼻腔給藥系統(tǒng)可避免肝臟的首過(guò)效應(yīng)和藥物在胃腸道的降解，起效快，鼻黏膜是一種類脂膜，血管豐富，黏膜上皮毛細(xì)血管及腺體周圍毛細(xì)血管的內(nèi)膜，具有窗格樣空隙，使血管與組織之間容易進(jìn)行物質(zhì)交換，藥物吸收后可迅速進(jìn)入血液循環(huán)。
本發(fā)明一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法包括以下步驟a辛夷揮發(fā)油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑混合，溶于溶解溶劑中；b將步驟a得到的混合溶劑恒溫減壓蒸發(fā)；c將步驟b得到的類脂膜加入緩沖液中震蕩溶解，調(diào)節(jié)PH值，加入輔料；d將步驟c得到的脂質(zhì)體分散液，冰水浴超聲處理，經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾；e將步驟d得到的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入穩(wěn)定劑制備成鼻腔給藥制劑；其中所述的溶解溶劑選自氯化物烷烴類、醇類溶劑及醚類中的一種或幾種溶劑，其中所述的輔料選自控緩釋制劑、防腐劑一種或幾種。
在步驟a中辛夷揮發(fā)油、磷脂、膽固醇比例為15-8∶6-1∶2-1。
磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂中的一種或幾種。
在步驟a中抗氧化劑選自膠原蛋白、維生素A醋酸酯、維生素E中的一種或幾種，抗氧化劑加入量占磷脂重量的0.5-5％。
在步驟a中脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑選自膽酸鈉、去氧膽酸鈉、Triton-100，脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑加入量占磷脂重量的0.001-2.5％。
在步驟b中蒸發(fā)的溫度為28-65℃。
在步驟c中調(diào)節(jié)PH值為5.5-7.5。
在步驟c中控緩釋劑選自硬脂酸胺、二乙酰磷酸中的一種或幾種，控緩釋劑加入量占磷脂重量的3-25％。
在步驟c中防腐劑選自聚山梨酯80、甲基羥苯甲酯、苯基羥苯甲酯中的一種或幾種，防腐劑加入量占磷脂重量比小于0.025％。
在步驟d中超聲的溫度在0-10℃，超聲頻率在200-1000Hz，超聲的有效時(shí)間0.5-20min。
在步驟e中穩(wěn)定劑選自磷脂酰甘油、磷脂酸、硬脂胺中的一種或幾種，穩(wěn)定劑加入量占磷脂重量的0.9-4.25％。
本發(fā)明所公開(kāi)一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法，其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)在(1)本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。
(2)本發(fā)明方法制備的脂質(zhì)體采用滴鼻劑的形式，比常規(guī)滴鼻劑有更大的比表面積，增大了它與鼻腔粘膜的接觸面積，相對(duì)延長(zhǎng)了它與鼻腔粘膜的接觸時(shí)間和黏膜吸收速度，而且使用方便，同時(shí)可以避免由于使用的過(guò)程中造成的藥物損失，提高有效利用率。
(3)用本發(fā)明方法制備的脂質(zhì)體具有一定的柔性和變形性，比相同粒徑的普通脂質(zhì)體更容易通過(guò)黏膜吸收，因而具有更好的通透性。脂質(zhì)體的粒徑在一定的范圍內(nèi)可以方便通過(guò)改變一兩個(gè)條件進(jìn)行調(diào)節(jié)。
(4)用本發(fā)明的方法制備的脂質(zhì)體混懸液，比常規(guī)脂質(zhì)體混懸液具有更好的物理化學(xué)穩(wěn)定性和藥物不易泄露的特點(diǎn)。


圖1顯示TEM觀察下包覆辛夷揮發(fā)油的脂質(zhì)體形貌圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
實(shí)施例1包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的制備方法(一)200mg大豆卵磷脂、750mg辛夷揮發(fā)油、100mg膽固醇、0.2mg膽酸鈉、1mg膠原蛋白，溶于20ml的2∶1甲醇/氯仿的混合溶劑。38℃恒溫、減壓蒸發(fā)形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩沖液震蕩溶解，調(diào)節(jié)PH值為5.5，加入10mg硬脂酸胺、0.05mg聚山梨酯80，得到大多室脂質(zhì)體分散液。在超聲溫度10℃，超聲頻率200Hz條件下冰水浴超聲處理20分鐘，經(jīng)過(guò)0.15μm微孔濾膜過(guò)濾形成均勻的單層的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入8.5mg磷脂酰甘油制備成鼻腔給藥制劑。測(cè)定混懸液中包封藥物載體脂質(zhì)體平均粒徑為56nm，包封率為94.8％，常溫下保存60天，溶液物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩(wěn)定無(wú)分層和變質(zhì)現(xiàn)象。
實(shí)施例2包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的制備方法(二)200mg蛋黃卵磷脂、330mg辛夷揮發(fā)油、66mg膽固醇、0.01mg去氧膽酸鈉、10mg維生素A醋酸酯，溶于30ml甲醇的混合溶劑。28℃恒溫、減壓蒸發(fā)形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩沖液震蕩溶解，調(diào)節(jié)PH值為7.0，加入100mg二乙酰磷酸、0.1mg甲基羥苯甲酯，得到大多室脂質(zhì)體分散液。在超聲溫度1℃，超聲頻率600Hz條件下冰水浴超聲處理10分鐘，經(jīng)過(guò)0.15μm微孔濾膜過(guò)濾形成均勻的單層的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入4mg磷脂酸制備成鼻腔給藥制劑。測(cè)定混懸液中包封藥物載體脂質(zhì)體平均粒徑為73nm，包封率為93.6％，常溫下保存60天，溶液物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩(wěn)定無(wú)分層和變質(zhì)現(xiàn)象。
實(shí)施例3包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的制備方法(三)200mg大豆卵磷脂、1600mg辛夷揮發(fā)油、200mg膽固醇、5mgTriton-100、5mg維生素E溶于40ml氯仿混合溶劑，65℃減壓蒸發(fā)形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩沖液震蕩溶解，調(diào)節(jié)PH值為7.5，加入20mg硬脂酸胺、50mg二乙酰磷酸、0.1mg苯基羥苯甲酯，得到大多室脂質(zhì)體分散液，在超聲溫度5℃，超聲頻率1000Hz條件下冰水浴超聲處理1分鐘，經(jīng)過(guò)0.15μm微孔濾膜過(guò)濾形成均勻的單層的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入2mg硬脂胺制備成鼻腔給藥制劑。測(cè)定混懸液中包封藥物載體脂質(zhì)體平均粒徑為66nm，包封率為95.8％，常溫下保存60天，溶液物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩(wěn)定無(wú)分層和變質(zhì)現(xiàn)象。
實(shí)施例4對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠的影響豚鼠過(guò)敏性鼻炎模型制備 取300～350g豚鼠40只，雌雄各半，均分5組，每組8只，除留一組作正常對(duì)照外，其余四組，以24二異氰酸甲苯酯(TDL)滴鼻致敏。即將10％TDL橄欖油溶液10μl，用加樣器滴入豚鼠雙側(cè)鼻孔(每側(cè)5μl)，每日一次，連續(xù)7d，模型判定成功后，改為隔日維持1次，直至觀察藥物結(jié)束；對(duì)照組滴橄欖油的方法、劑量同模型組。
模型判定 以出現(xiàn)鼻癢抓撓、噴嚏、流涕為判定指標(biāo)，首次給致敏物TDL始，30min內(nèi)可見(jiàn)不同程度鼻癢抓撓、噴嚏，3d后見(jiàn)流涕，隨致敏時(shí)間延長(zhǎng)，癥狀漸加重，始發(fā)時(shí)間縮短，呈現(xiàn)典型以上癥狀。治療藥作用效果以鼻癢抓撓次數(shù)，噴嚏次數(shù)、流涕程度(流至鼻前孔為1分，超過(guò)鼻前孔為2分，流涕滿為3分)作為觀察指標(biāo)，觀察時(shí)間為末次給TDI后30min內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果 模型建立后，于第8天分組給藥，每日二次，用加樣器于豚鼠雙側(cè)鼻孔給藥，對(duì)照組給予蒸餾水，連續(xù)7d，末次給藥后30min，給予TDL，觀察30min內(nèi)各組豚鼠鼻癢抓撓及噴嚏次數(shù)、流涕程度，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體鼻腔給藥對(duì)豚鼠過(guò)敏性鼻炎癥狀的作用(x±s；n＝8)

注與正常對(duì)照組比較△P＜0.01，與模型組比較*P＜005，**P＜001上述實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明辛夷揮發(fā)油納米滴鼻液能有效對(duì)抗豚鼠過(guò)敏性鼻炎所產(chǎn)生的鼻癢、噴嚏、流涕的癥狀。治療效果優(yōu)于常規(guī)辛夷揮發(fā)油藥物。
權(quán)利要求
1.一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法，其特征在于該方法包括以下步驟a、辛夷揮發(fā)油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑混合，溶于溶解溶劑中；b、將步驟a得到的混合溶劑恒溫減壓蒸發(fā)；c、將步驟b得到的類脂膜加入緩沖液中震蕩溶解，調(diào)節(jié)PH值，加入輔料；d、將步驟c得到的脂質(zhì)體分散液，冰水浴超聲處理，經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾；e、將步驟d得到的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入穩(wěn)定劑制備成鼻腔給藥制劑；其中所述的溶解溶劑選自氯化物烷烴類、醇類溶劑及醚類中的一種或幾種溶劑。其中所述的輔料選自控緩釋制劑、防腐劑一種或幾種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟a中辛夷揮發(fā)油、磷脂、膽固醇比例為15-8∶6-1∶2-1。
3.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟a中抗氧化劑選自膠原蛋白、維生素A醋酸酯、維生素E中的一種或幾種，抗氧化劑加入量占磷脂重量的0.5-5％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟a中脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑選自膽酸鈉、去氧膽酸鈉、Triton-100，脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑加入量占磷脂重量的0.001-2.5％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟b中蒸發(fā)的溫度為28-65℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟c中調(diào)節(jié)PH值為5.5-7.5。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟c中控緩釋劑選自硬脂酸胺、二乙酰磷酸中的一種或幾種，控緩釋劑加入量占磷脂重量的3-25％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟c中防腐劑選自聚山梨酯80、甲基羥苯甲酯、苯基羥苯甲酯中的一種或幾種，防腐劑加入量占磷脂重量比小于0.025％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟d中超聲的溫度在0-10℃，超聲頻率在200-1000Hz，超聲的有效時(shí)間0.5-20min。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于在步驟e中穩(wěn)定劑選自磷脂酰甘油、磷脂酸、硬脂胺中的一種或幾種，穩(wěn)定劑加入量占磷脂重量的0.9-4.25％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備包覆辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑的方法，其特征在于該方法包括以下步驟a辛夷揮發(fā)油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質(zhì)體膜調(diào)節(jié)劑混合，溶于溶解溶劑中；b將步驟a得到的混合溶劑恒溫減壓蒸發(fā)；c將步驟b得到的類脂膜加入緩沖液中震蕩溶解，調(diào)節(jié)pH值，加入輔料；d將步驟c得到的脂質(zhì)體分散液，冰水浴超聲處理，經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾；e將步驟d得到的脂質(zhì)體混懸液，在濾液中加入穩(wěn)定劑制備成鼻腔給藥制劑。本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。用該方法制備的脂質(zhì)體具有很高的穩(wěn)定性和一定的柔性和變形性，比相同粒徑的普通脂質(zhì)體更容易通過(guò)黏膜吸收，因而具有更好的通透性。
文檔編號(hào)A61K9/127GK1813904SQ20051011134
公開(kāi)日2006年8月9日 申請(qǐng)日期2005年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月9日
發(fā)明者吳敏, 王雪梅, 張 雄 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院