專(zhuān)利名稱(chēng)：一種香菇多糖注射用凍干粉針劑及其含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種香菇多糖制劑，尤其涉及一種香菇多糖注射用凍干粉針劑及其制備方法。
本發(fā)明還涉及所述香菇多糖注射用凍干粉針劑的含量測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
香菇(Lentinus edodes)為擔(dān)子菌綱傘形科真菌，味甘性平，健脾祛邪，調(diào)和陰陽(yáng)，食藥兼用。香菇中含有多種有效藥用組分，尤其是香菇多糖(Lentinan)是一類(lèi)特殊的生理活性物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)人體生理功能，增強(qiáng)人體免疫機(jī)能，預(yù)防和治療多種慢性疾病的作用。尤其是，它具有顯著的、獨(dú)特的抗腫瘤活性，并能減輕放療和化療的毒性反應(yīng)。臨床醫(yī)學(xué)證明香菇多糖安全無(wú)毒副作用，其抗腫瘤的藥理作用并非直接殺死致病原，而是表現(xiàn)在增強(qiáng)人體免疫調(diào)節(jié)作用。它通過(guò)刺激免疫細(xì)胞成熟、分化和增殖，改善人體機(jī)體平衡，達(dá)到恢復(fù)和提高人體細(xì)胞對(duì)淋巴因子、激素及其他生理活性因子的反應(yīng)。
作為藥物的香菇多糖研究始于上世紀(jì)50年代，成為免疫促進(jìn)劑而引起人們興趣則在60年代以后。1968年日本人千原吳郎首先利用熱水從香菇子實(shí)體中浸提出6種胞外香菇多糖，其中二種有明顯抗腫瘤作用，測(cè)試表明其平均分子量為100萬(wàn)，是一種帶分支側(cè)鏈的β-葡聚糖結(jié)構(gòu)，并定商品名為L(zhǎng)entinan。70年代初，Shida等用三氯醋酸浸提，甲醇等沉淀又從香菇中提取得到三種水溶性多糖，首次報(bào)道香菇中除β-葡聚糖以外的另一種抗腫瘤物質(zhì)，認(rèn)為除分子量100萬(wàn)的香菇多糖外，另一種分子量在16000的香菇多糖也具有抗腫瘤活性。80年代以來(lái)，香菇多糖的研究更為深入，更為多元化，提取香菇多糖已由子實(shí)體發(fā)展到從深層發(fā)酵香菇菌絲體中提煉，對(duì)香菇多糖的研究大量轉(zhuǎn)向藥理和臨床試驗(yàn)。研究充分表明香菇多糖具有抗腫瘤作用，尤其對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病、胃癌、鼻咽癌、直腸癌和乳腺癌等有抑制和防止手術(shù)后微轉(zhuǎn)移的效果，此作用是通過(guò)增強(qiáng)肌體免疫力而對(duì)癌細(xì)胞表現(xiàn)出間接毒性，尤其適用于病后肌體康復(fù)。與其他抗腫瘤藥物相比，香菇多糖幾乎無(wú)任何副作用，是目前已知最強(qiáng)的免疫增強(qiáng)劑之一。除此之外，香菇多糖還是治療各種肝炎，特別是慢性遷移性肝炎的良好藥物。香菇多糖是迄今為止國(guó)內(nèi)唯一一個(gè)可以供靜脈注射的大分子多糖凍干粉針劑。
香菇多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)曾經(jīng)利用甲基化分析和Smith降解等方法測(cè)定來(lái)源于香菇中的β-葡聚糖物質(zhì)，顯示該多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)具有β-D(1→3)連接的吡喃葡聚糖主鏈，在主鏈中葡萄糖的C6位上含有支點(diǎn)(每5個(gè)D-葡萄糖有2個(gè)支點(diǎn))，其側(cè)鏈?zhǔn)怯搔?D-(1→6)和β-D-(1→3)鍵相連的D-葡萄糖聚合體組成，在側(cè)鏈上也含有少數(shù)內(nèi)部β-D-(1→6)鏈?，F(xiàn)已知道水溶性β-葡聚糖為線(xiàn)性結(jié)構(gòu)，無(wú)長(zhǎng)分支，以β-D-(1→3)鏈為主結(jié)構(gòu)的葡聚糖，其生理活性高于β-D-(1→6)為主的多糖，而β(1→3)和β(1→6)結(jié)合的側(cè)鏈共存是抗腫瘤作用所必不可少的。
藥理毒理研究情況香菇多糖的抗腫瘤、抗疾病作用是通過(guò)提高機(jī)體的免疫功能來(lái)實(shí)現(xiàn)的。香菇多糖對(duì)正常機(jī)體并無(wú)免疫促進(jìn)作用，但對(duì)機(jī)體免疫功能下降或感染疾病，患上癌癥后，造成人體免疫系統(tǒng)紊亂患者，能有效調(diào)節(jié)免疫作用特點(diǎn)在于識(shí)別脾及肝臟中抗原的巨噬細(xì)胞，促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化因子的產(chǎn)生，釋放各種輔助性T細(xì)胞因子，誘導(dǎo)或增強(qiáng)宿主腹腔巨噬細(xì)胞吞噬作用，恢復(fù)或刺激輔助性T細(xì)胞的功能，同時(shí)促進(jìn)免疫球蛋白形成的核酸蛋白合成的作用，提高機(jī)體的免疫功能。許多學(xué)者研究了香菇多糖對(duì)臨床癌癥患者免疫狀態(tài)的影響，證實(shí)香菇多糖與化療合用可提高化療療效，增加淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、NT細(xì)胞活性和T4/T8細(xì)胞比值。
經(jīng)用香菇多糖給小鼠靜脈注射時(shí)，LD50為1500mg/Kg，小鼠肌肉注射增至最大劑量2250mg/Kg，無(wú)法測(cè)出LD50，用香菇多糖對(duì)狗和Wister大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，以香菇多糖注射液人用劑量的50倍和100倍分別給予狗和大鼠肌肉注射，每天1次，連續(xù)6個(gè)月，檢查動(dòng)物外觀(guān)、體重、肝、腎功能、血常規(guī)、病理檢查、電鏡觀(guān)察等均無(wú)明顯影響。甚至狗和大鼠用藥分別增至人用劑量的400倍時(shí)也無(wú)明顯影響，試驗(yàn)表明香菇多糖長(zhǎng)期應(yīng)用是相當(dāng)安全的。
中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)00112407.2公開(kāi)了抗腫瘤藥物香菇多糖凍干粉針劑的配方及其可工業(yè)化的制備方法，配方中省去了使患者可能產(chǎn)生過(guò)敏的右旋糖酐，而采用甘露醇作為凍干賦形劑。
由于香菇多糖的化學(xué)本質(zhì)為葡聚糖，因此該藥品的含量測(cè)定采用經(jīng)典的硫酸蒽酮法(國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-032)-2004Z)和還原糖測(cè)定法(國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-152)-2004Z)，但是目前上市的凍干粉針劑一般采用右旋糖酐或甘露醇(中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)00112407.2)作為凍干賦形劑，而上述輔料對(duì)多糖測(cè)定含量有明顯的干擾，因此國(guó)家藥品含量測(cè)定方法中均采用對(duì)照品法。由于香菇多糖價(jià)格昂貴，對(duì)照品要求純度較高，目前還沒(méi)有對(duì)照品上市；并且制劑含量測(cè)定是需要在對(duì)照品中加入一定量的輔料來(lái)排除輔料的干擾，造成測(cè)定方法操作繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題，本發(fā)明采用氨基酸和鹽類(lèi)作為凍干賦形劑，其對(duì)多糖含量測(cè)定無(wú)影響，便于藥品的質(zhì)量檢查和控制；并且不需要使用昂貴的對(duì)照品，降低了生產(chǎn)成本。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種香菇多糖注射用凍干粉針劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種香菇多糖注射用凍干粉針劑的制備方法。
本發(fā)明的還一個(gè)目的在于提供所述香菇多糖注射用凍干粉針劑的含量測(cè)定方法。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，本發(fā)明提供了一種香菇多糖注射用凍干粉針劑，其包含作為活性成分的香菇多糖和凍干賦形劑，所述凍干賦形劑為選自鹽類(lèi)和氨基酸中的一種或多種，所述香菇多糖和凍干賦形劑的重量比為0.1～80∶20～99.9。
優(yōu)選的，所述香菇多糖和凍干賦形劑的重量比為1～10∶50～99。
所述香菇多糖在注射用凍干粉針劑中的含量范圍一般為0.1～10mg，優(yōu)選0.5～5mg；所述凍干賦形劑在注射用凍干粉針劑中的含量范圍一般為10～100mg。
所述鹽類(lèi)應(yīng)為在注射用溶媒中可溶的鹽類(lèi)。優(yōu)選的，所述鹽類(lèi)可為氯化鈉、磷酸鹽或檸檬酸鹽等。
優(yōu)選的，所述凍干賦形劑為氨基酸，如精氨酸、賴(lài)氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天門(mén)冬酰胺、谷氨酰胺、天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、組氨酸等。
更優(yōu)選的，所述氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和/或賴(lài)氨酸等。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種香菇多糖注射用凍干粉針劑的制備方法，其包括下述步驟1)稱(chēng)取0.1～80重量份的香菇多糖并用注射用水溶解定容到一定體積，用0.45μm濾膜過(guò)濾，用活性炭吸附，用0.22μm濾膜過(guò)濾，得a溶液；2)用注射用水溶解20～99.9重量份的凍干賦形劑，得b溶液，所述凍干賦形劑為選自鹽類(lèi)和氨基酸中的一種或多種；3)將a溶液和b溶液混合均勻，用滅菌注射用水定容到一定體積，分裝入瓶，進(jìn)行冷凍干燥，封口，制備得到凍干針劑。
優(yōu)選的，所述凍干賦形劑為氨基酸。
更優(yōu)選的，所述氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和/或賴(lài)氨酸。
優(yōu)選的，所述香菇多糖為1～10重量份，所述凍干賦形劑為50～99重量份。
根據(jù)本發(fā)明的還一方面，本發(fā)明還提供了所述香菇多糖凍干粉針劑的含量測(cè)定方法，所述方法包括下述步驟1)對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品20mg，精密稱(chēng)定，置于500ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；2)供試品溶液的制備取本品約12mg，精密稱(chēng)定，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液10ml，研磨，使溶解，加水分次轉(zhuǎn)移至500ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻；3)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取對(duì)照品溶液0.0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分別置于具塞試管中，各加水至3.0ml，再分別沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml，以上操作均在冰浴中進(jìn)行；劇烈振搖混勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確反應(yīng)6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放至室溫；自振搖起，在20分鐘～40分鐘內(nèi)，以0號(hào)管為空白，按照分光光度法，分別在625nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以對(duì)照品溶液濃度與相應(yīng)的吸收度計(jì)算回歸方程；4)測(cè)定法精密量取供試品溶液3ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備項(xiàng)下的方法，自“沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml”起，依法測(cè)定，從回歸方程計(jì)算多糖的含量。
本發(fā)明提供的香菇多糖制劑方法及含量測(cè)定方法有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明的香菇多糖制劑中輔料對(duì)含量測(cè)定無(wú)干擾；2、含量測(cè)定不需要香菇多糖對(duì)照品；3、含量測(cè)定以葡萄糖為對(duì)照品，對(duì)照品容易得到；4、含量測(cè)定方法為經(jīng)典方法，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，并且該法易于為檢驗(yàn)人員掌握；5、含量測(cè)定操作相對(duì)簡(jiǎn)單；6、含量測(cè)定時(shí)，不需要提供輔料來(lái)消除干擾。
為了更好地理解本發(fā)明的本質(zhì)，下面通過(guò)對(duì)本發(fā)明較佳實(shí)施方式的描述，詳細(xì)說(shuō)明但不限制本發(fā)明。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明所用試驗(yàn)材料，如無(wú)特別說(shuō)明，均為市售購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品。
本發(fā)明所用香菇多糖可按照文獻(xiàn)工藝(cancer research，No.30，2776～2781，November 1970)制備、提純得到。
香菇多糖注射用凍干粉針劑的制備實(shí)施例1制備本發(fā)明香菇多糖注射用凍干粉針劑的具體配方和工藝如下1、配方


2、制備工藝(1)配液準(zhǔn)備各種配液用品齊全；稱(chēng)量稱(chēng)取處方量的香菇多糖(按成品計(jì)算)，二人復(fù)核；溶藥稱(chēng)取處方量的香菇多糖并用適量滅菌的注射用水(從滅菌到使用時(shí)間間隔不得超過(guò)24小時(shí))，置水浴(80℃)中至全部溶解，然后定容到500ml，用0.45μm濾膜過(guò)濾，用活性炭吸附，用0.22μm濾膜過(guò)濾，得a溶液；用注射用水溶解處方量的凍干賦形劑，得b溶液；將a溶液和b溶液混合均勻，用滅菌注射用水定容到1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.0左右。
除菌過(guò)濾在百級(jí)潔凈區(qū)，過(guò)0.22μm濾膜；起泡點(diǎn)試驗(yàn)起泡點(diǎn)壓力＞0.35Mpa。
(2)灌裝試車(chē)裝好機(jī)器、接通電源，檢查各部運(yùn)轉(zhuǎn)情況，由低速到高速運(yùn)行完好后，方可使用；準(zhǔn)備裝瓶上塞，將西林瓶送入理瓶盤(pán)，將膠塞裝入理塞器內(nèi)；調(diào)裝量按半成品含量測(cè)定結(jié)果確定裝量，旋轉(zhuǎn)調(diào)量螺母，調(diào)到確定的裝量，理想裝量1±0.02ml。
灌裝理盤(pán)作順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，將瓶子送入理瓶軌道，進(jìn)入分度齒盤(pán)，分度齒盤(pán)以每分鐘10～50次間歇速度旋轉(zhuǎn)，將瓶子撥到灌裝位置，灌裝機(jī)構(gòu)以同步間歇的上下往返運(yùn)動(dòng)進(jìn)行灌裝，灌裝后的西林瓶轉(zhuǎn)至按塞位，進(jìn)行按塞。
膠塞由理塞器輸塞軌道將其送到按塞輪處，膠塞在真空吸力下牢靠的跟隨按塞輪作間歇轉(zhuǎn)位，使塞對(duì)準(zhǔn)瓶口，按塞推桿將瓶上推，瓶塞按入瓶口內(nèi)，此時(shí)真空自動(dòng)關(guān)閉，塞脫開(kāi)按塞輪，隨瓶進(jìn)入輸瓶軌道。
將灌裝半壓塞的藥瓶裝盤(pán)，送入凍干機(jī)，清場(chǎng)。
從過(guò)濾結(jié)束到灌裝結(jié)束時(shí)間間隔應(yīng)不超過(guò)7小時(shí)。
(3)冷凍干燥a.預(yù)凍擱板溫度控制在-35℃至-40℃，制品溫度達(dá)-35℃以下，從視窗可見(jiàn)凍結(jié)成冰；b.升華前期緩慢升溫至制品全白(-25℃左右)，同時(shí)將系統(tǒng)真空度保持在6～8Pa，然后，升溫速度可稍快至板溫與制品接近；c.二次干燥制品35～30℃，保持4～6小時(shí)；d.壓蓋。
香菇多糖凍干粉針劑的兩種硫酸-蒽酮測(cè)定法比較實(shí)施例2本發(fā)明采用的含量測(cè)定方法1、對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品20mg，精密稱(chēng)定，置于500ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。
2、供試品溶液的制備取本品約12mg，精密稱(chēng)定，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液10ml，研磨，使溶解，加水分次轉(zhuǎn)移至500ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取對(duì)照品溶液0.0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分別置于具塞試管中，各加水至3.0ml，再分別沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml(以上操作均在冰浴中進(jìn)行)，劇烈振搖混勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確反應(yīng)6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放至室溫。自振搖起，在20分鐘～40分鐘內(nèi)，以0號(hào)管為空白，按照分光光度法(中國(guó)藥典2000年版二部附錄IVB)，分別在625nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。以對(duì)照品溶液濃度與相應(yīng)的吸收度計(jì)算回歸方程。
4、測(cè)定法精密量取供試品溶液3ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備項(xiàng)下的方法，自“沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml”起，依法測(cè)定，從回歸方程計(jì)算多糖的含量。
實(shí)施例3國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)注射用香菇多糖(WS1-(X-152)-2004Z)含量測(cè)定方法1、對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取干燥至恒重的香菇多糖對(duì)照品10mg，置研缽中，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液1ml研磨溶解，用水分次轉(zhuǎn)移至20ml量瓶中，加甘露醇1.0g，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取該溶液3ml至25ml量瓶中，加6mol/L硫酸溶液2.5ml，搖勻，密塞，置水浴中，準(zhǔn)確反應(yīng)40分鐘，取出，放冷，加酚酞指示液1滴，用30％氫氧化鈉溶液調(diào)至微紅色，放冷至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻。
2、供試品溶液的制備取本品3mg，分別精密加水2.0ml使溶解，合并混勻，精密量取3ml至25ml量瓶中，照對(duì)照品溶液的制備方法，自“加6mol/L硫酸溶液2.5ml”起，依法制備。
3、測(cè)定法精密量取對(duì)照品溶液及供試品溶液各10ml，分別置碘量瓶中，精密加入堿性硫酸銅溶液[取無(wú)水碳酸鈉與酒石酸鉀鈉各25g，加水約800ml使溶解，在不斷攪拌下，通過(guò)長(zhǎng)徑漏斗加入10％硫酸銅溶液75ml至容器底部，再加碳酸氫鈉20g，碘化鉀5g，攪拌使溶解，移至1000ml量瓶中，加碘酸鉀溶液(稱(chēng)取碘酸鉀35.7g，加水溶解使成1000ml，搖勻)25ml，用水稀釋至刻度，搖勻。放置過(guò)夜，備用]5ml，搖勻，將碘瓶置水浴中，準(zhǔn)確計(jì)時(shí)15分鐘，迅速移出碘瓶，立即在流動(dòng)水中冷卻，沿瓶壁加碘化鉀-草酸鉀溶液(取碘化鉀、草酸鉀各2.5g，加水溶解使成100ml，臨用前新制)2ml(以上操作切勿振搖)，加1mol/L硫酸溶液3ml，加塞，置冷水浴中充分振搖至氧化亞銅沉淀全部溶解，用硫代硫酸鈉滴定液(0.005mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示劑5滴，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。另取水10ml，照上述方法測(cè)定，作為空白。按下式計(jì)算含量 V0為空白消耗硫代硫酸鈉滴定液毫升數(shù)；
VT為供試品消耗硫代硫酸鈉滴定液毫升數(shù)；V0為對(duì)照品消耗硫代硫酸鈉滴定液毫升數(shù)；S為10ml對(duì)照品溶液中含對(duì)照品量(mg)；0.6為10ml供試品溶液的供試品表示量(mg)。
比較上述二種測(cè)定方法，前一種方法需要香菇多糖對(duì)照品。本發(fā)明提供的制劑方法，所采用的藥用輔料對(duì)多糖含量測(cè)定無(wú)干擾，采用經(jīng)典的硫酸蒽酮法，以葡萄糖為對(duì)照品，測(cè)定方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確。
凍干賦形劑不同的香菇多糖凍干粉針劑的硫酸-蒽酮法測(cè)定比較實(shí)施例4采用實(shí)施例2的含量測(cè)定法，測(cè)定四種香菇多糖凍干粉針劑的香菇多糖含量，這四種凍干粉針劑所用凍干賦形劑分別為右旋糖酐40、甘露醇、甘氨酸、氯化鈉。結(jié)果見(jiàn)表1。由結(jié)果可知，采用甘氨酸或氯化鈉作為凍干賦形劑時(shí)，實(shí)測(cè)含量與理論含量相符，表明輔料不干擾香菇多糖的含量測(cè)定；而采用右旋糖酐40或甘露醇作為凍干賦形劑時(shí)，實(shí)測(cè)含量與理論含量偏差很大，表明輔料明顯干擾香菇多糖的含量測(cè)定。
表1硫酸-蒽酮法測(cè)定四種香菇多糖制劑的結(jié)果(n＝6)

以上對(duì)本發(fā)明較佳實(shí)施方式的描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。
權(quán)利要求
1.一種香菇多糖注射用凍干粉針劑，包含香菇多糖和凍干賦形劑，其特征在于，所述凍干賦形劑為選自鹽類(lèi)和氨基酸中的一種或多種；所述香菇多糖和凍干賦形劑的重量比為0.1～80∶20～99.9。
2.權(quán)利要求1所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述香菇多糖和凍干賦形劑的重量比為1～10∶50～99。
3.權(quán)利要求1所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述香菇多糖為0.1～10mg。
4.權(quán)利要求3所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述香菇多糖為0.5～5mg。
5.權(quán)利要求1所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述凍干賦形劑為氨基酸。
6.權(quán)利要求6所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和/或賴(lài)氨酸。
7.權(quán)利要求1所述的注射用凍干粉針劑，其特征在于，所述鹽類(lèi)為氯化鈉、磷酸鹽和/或檸檬酸鹽。
8.一種香菇多糖注射用凍干粉針劑的制備方法，包括下述步驟1)稱(chēng)取0.1～80重量份的香菇多糖并用注射用水溶解定容到一定體積，用0.45μm濾膜過(guò)濾，用活性炭吸附，用0.22μm濾膜過(guò)濾，得a溶液；2)用注射用水溶解20～99.9重量份的凍干賦形劑，得b溶液，所述凍干賦形劑為選自鹽類(lèi)和氨基酸中的一種或多種；3)將a溶液和b溶液混合均勻，用滅菌注射用水定容到一定體積，分裝入瓶，進(jìn)行冷凍干燥，制備得到凍干針劑。
9.權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述凍干賦形劑為氨基酸。
10.權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和/或賴(lài)氨酸。
11.權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述香菇多糖為1～10重量份，所述凍干賦形劑為50～99重量份。
12.一種權(quán)利要求1所述香菇多糖注射用凍干粉針劑的含量測(cè)定方法，包括下述步驟1)對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品20mg，精密稱(chēng)定，置于500ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；2)供試品溶液的制備取本品約12mg，精密稱(chēng)定，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液10ml，研磨，使溶解，加水分次轉(zhuǎn)移至500ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻；3)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密量取對(duì)照品溶液0.0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分別置于具塞試管中，各加水至3.0ml，再分別沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml，以上操作均在冰浴中進(jìn)行；劇烈振搖混勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確反應(yīng)6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放至室溫；自振搖起，在20分鐘～40分鐘內(nèi)，以0號(hào)管為空白，按照分光光度法，分別在625nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以對(duì)照品溶液濃度與相應(yīng)的吸收度計(jì)算回歸方程；4)測(cè)定法精密量取供試品溶液3ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備項(xiàng)下的方法，自“沿管壁緩緩加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml”起，依法測(cè)定，從回歸方程計(jì)算多糖的含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種香菇多糖注射用凍干粉針劑，其包含作為活性成分的香菇多糖和凍干賦形劑，所述凍干賦形劑為選自鹽類(lèi)和氨基酸中的一種或多種，所述香菇多糖和凍干賦形劑的重量比為0.1～80∶20～99.9。本發(fā)明還涉及制備這種注射用香菇多糖凍干粉針劑的方法。本發(fā)明采用氨基酸和鹽類(lèi)作為凍干賦形劑，其對(duì)多糖含量測(cè)定無(wú)影響，便于藥品的質(zhì)量檢查和控制；并且不需要使用昂貴的對(duì)照品，降低了生產(chǎn)成本。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1939334SQ200510086530
公開(kāi)日2007年4月4日 申請(qǐng)日期2005年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月28日
發(fā)明者馬骉, 王天燕 申請(qǐng)人:北京賽生藥業(yè)有限公司