專利名稱：知母皂苷bⅱ在制備用于防治腦卒中藥物或產(chǎn)品中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及知母皂苷BII的用途，具體涉及知母皂苷BII在制備防治腦卒中(腦中風(fēng))藥物或產(chǎn)品中的用途。
背景技術(shù)：
腦中風(fēng)是由于顱內(nèi)外血管阻塞或破裂而造成的急性腦功能損傷，嚴(yán)重危害中老年人的生命健康，也是造成中老年人致死、致殘的主要原因之一。腦卒中患者約有1/3在發(fā)病不久后死亡，幸存者由于偏癱、失語(yǔ)等后遺癥致殘喪失工作甚至生活自理能力。目前通常治療腦中風(fēng)有兩種方法一種是通過(guò)增加血流量改善動(dòng)脈中氧和葡萄糖不足；另一種是保護(hù)神經(jīng)元，減少腦組織缺血可能性，降低神經(jīng)元的興奮毒性死亡。用于臨床治療的神經(jīng)元保護(hù)劑有鈣離子通道阻斷劑，谷氨酸受體拮抗劑，NMDA拮抗劑等。與腦卒中的高發(fā)病率、高致死率及高致殘率相比，目前用于預(yù)防治療腦卒中的藥物品種較少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要。
中藥知母為百合科(Liliaceae)知母屬多年生草本植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的根莖，主產(chǎn)于河北、內(nèi)蒙古、山西及東北等地，中醫(yī)用作苦寒清熱藥，有清熱瀉火，滋陰潤(rùn)燥的功效，主要治療外感熱病、高熱煩渴、肺熱燥咳、骨蒸潮熱、內(nèi)熱消渴和腸燥便秘等。知母的主要成分是甾體皂苷(steroidal saponins)，到目前為止，文獻(xiàn)報(bào)道從知母中分離得到32種甾體皂苷及皂苷元；其次還有黃酮、寡糖、多糖及脂肪酸等。1963年川崎敏男等首次分出知母皂苷BII，但并未闡明其結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)。1991年南云清二等首次闡明了知母皂苷BII的化學(xué)結(jié)構(gòu)(Seiji NAGUMO et al，藥學(xué)雜志(日)，1991；111(1)306-310)。以后Noboru Nakashima (NOBORU NAKASHIMA et al，Journal ofNatural Products，1993；56(3)345-350)、馬百平(馬百平等，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1996；31(4)271-277)、Masayasu Kimula(Masayasu KIMURAet al，Biol.Pharm.Bull，1996；19(7)926-931)和 Jianying Zhang(Jianying ZHANG et al，Clinica Chimica Acta，1999；28979-88)等先后報(bào)道了知母皂苷BII的分離及活性。
知母皂苷BII(Timosaponin BII)，又名原知母皂苷AIII(Prototimosaponin AIII)等，是中藥知母中的主要成分，結(jié)構(gòu)為(25S)-26-O-β-D-葡萄吡喃糖基-22-羥基-5β-呋甾-3β、26-二醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)-β-D-半乳吡喃糖苷[(25S)-26-0-β-D-glucopyranosyl-22-hydroxy-5β-furostane-3β，26-diol-3-0-β-D-glncopyranosyl(1→2)-β-D-galactopyranoside]。結(jié)構(gòu)如下 已報(bào)道的知母皂苷BII的藥理活性主要有1.降血糖作用。知母皂苷BII可以降低鏈尿霉素糖尿病小鼠的血糖水平，但并不促進(jìn)葡萄糖的吸收和胰島素的釋放，推測(cè)降血糖機(jī)制是抑制肝糖元的分解。(NOBORU NAKASHIMA et al，Journal of NaturalProducts，1993；56(3)345-350)2.抑制血小板聚集。知母皂苷BII具有顯著的抗人血小板聚集及延長(zhǎng)凝血時(shí)間的活性。(Jianying ZHANG et al，Clinica Chimica Acta，1999；28979-88)3.清除自由基活性。利用順磁方法，觀察到知母皂苷BII(5mg/ml)對(duì)Fenton反應(yīng)體系產(chǎn)生的羥自由基的清除率為57％。(馬百平等，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1996；31(4)271-277)4.抗癡呆活性。馬百平等報(bào)道了知母皂苷BII具有一定的防治老年性癡呆的作用。(發(fā)明專利申請(qǐng)公開(kāi)書(shū)，公開(kāi)號(hào)CN1212966，申請(qǐng)?zhí)?7119680.X)。
陳萬(wàn)生等報(bào)道了知母總皂苷用于制備防治腦卒中藥物的用途(發(fā)明專利申請(qǐng)公開(kāi)書(shū)，公開(kāi)號(hào)CN1451384A，申請(qǐng)?zhí)?3116824.8)。該申請(qǐng)中公開(kāi)的知母總皂苷的特征為知母皂苷BII、E、B、AIII的含量之和≥50％。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明人通過(guò)多年潛心研究，首次發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了單體化合物知母皂苷BII防治腦卒中的活性，其特征為知母皂苷BII可明顯改善局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)癥狀，縮小腦梗塞范圍，減輕腦水腫程度；明顯改善模型動(dòng)物的血液流變性、減輕腦缺血所致炎性損傷等。
因此，本發(fā)明涉及知母皂苷BII在制備用于預(yù)防或治療腦卒中藥物或產(chǎn)品中的用途。
本發(fā)明還涉及用于預(yù)防或治療腦卒中的藥物組合物或產(chǎn)品，其包括作為活性成分的知母皂苷BII和藥用載體或賦形劑。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的知母皂苷BII是以基本純的形式使用，如知母皂苷BII的純度≥90％。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明含知母皂苷BII的藥物組合物或產(chǎn)品可以各種途徑使用，并配制成各種劑型，如口服制劑，如片劑，膠囊，溶液，懸浮液，非腸道給予劑型，如注射劑，軟膏，貼劑等。
根據(jù)本發(fā)明，知母皂苷BII(20mg/kg、40mg/kg)各組連續(xù)給藥7天后，能顯著降低大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠的神經(jīng)癥狀評(píng)分；可以明顯縮小模型大鼠的腦梗塞范圍；40mg/kg組能明顯降低腦含水量，與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。
根據(jù)本發(fā)明，皮下注射腎上腺素加冰水浸泡法可致急性血瘀大鼠模型，知母皂苷BII(10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg)可明顯降低模型大鼠高、中、低切變率下的全血粘度以及血漿粘度，與模型組相比有明顯差異(P＜0.05，P＜0.01)；知母皂苷BII 40mg/kg組可明顯提高模型大鼠的紅細(xì)胞變形能力，降低紅細(xì)胞聚集指數(shù)，與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。
以插線法制備腦缺血再灌注模型，通過(guò)ELISA法測(cè)定各組大鼠的IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β含量，結(jié)果表明知母皂苷BII對(duì)腦缺血再灌大鼠的炎癥反應(yīng)具有明顯的保護(hù)作用。
綜上所述，知母皂苷BII具有防治腦卒中的作用。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但其不意味著對(duì)本發(fā)明的任何限制。
實(shí)施例1.
知母皂苷BII對(duì)三氯化鐵誘導(dǎo)大腦中動(dòng)脈血栓形成(MCAT)大鼠缺血性腦損傷的影響一、方法1.知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠神經(jīng)癥狀及腦梗塞范圍的影響1.1.分組及給藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為6組，即MCAT模型組、假手術(shù)組、喜得鎮(zhèn)0.6mg/kg組、知母皂苷BII 10mg/kg組、20mg/kg組、40mg/kg組，動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥七天，每日給藥容積為5mL/kg。第七天給藥60分鐘后施行手術(shù)。假手術(shù)組和MCAT模型組灌服等容積的0.5％CMC溶液。
1.2.大腦中動(dòng)脈血栓栓塞性大鼠缺血性腦損傷模型的制備按Tamura及劉氏[7-8]等的方法，稍加改進(jìn)。大鼠腹腔注射10％水合氯醛溶液(0.35g/kg)麻醉，右側(cè)臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點(diǎn)作一弧形切口，長(zhǎng)約1.5cm，夾斷顳肌并切除，暴露顳骨，于實(shí)體顯微鏡下，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處靠近口側(cè)1mm處作一直徑2.5mm的骨窗，清理殘?jiān)┞洞竽X中動(dòng)脈(位于嗅束及大腦下靜脈之間)。置一小片塑料薄膜保護(hù)血管周圍組織。將吸有50％氯化鐵溶液10μL的小片定量濾紙敷在此段大腦中動(dòng)脈上，30min后取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合，回籠飼養(yǎng)。室溫控制在24℃。假手術(shù)組除不滴加氯化鐵溶液外，其余手術(shù)步驟同模型組。
1.3.神經(jīng)癥狀評(píng)分方法對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物在術(shù)后6h和24h，按Bederson[9]等的方法稍加改進(jìn)，進(jìn)行行為檢測(cè)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)①提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對(duì)稱前伸，記為0分；如手術(shù)對(duì)側(cè)前肢出現(xiàn)肩屈曲、肘屈曲、肩內(nèi)旋或兼具，記為1分。②將動(dòng)物置于平面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動(dòng)，檢查阻力。如雙側(cè)阻力對(duì)等且有力記為0分；如手術(shù)對(duì)側(cè)阻力下降，記為1分。③將動(dòng)物兩前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察肌張力。雙側(cè)肌張力對(duì)等且有力為0分；手術(shù)對(duì)側(cè)前肢肌張力下降記為1分。④提鼠尾，動(dòng)物有不停地向手術(shù)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)者，記為1分。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，滿分為4分，分?jǐn)?shù)越高，動(dòng)物的行為障礙越嚴(yán)重。
1.4.腦梗塞范圍的評(píng)定方法動(dòng)物經(jīng)行為評(píng)分后，斷頭取腦。去掉嗅球、小腦和低位腦干，剩余部分在4℃以下冠狀切成5片。迅速將腦片置于TTC染液中(每5ml染液中含4％TTC 1.5ml，1M K2HPO40.1ml，其余加水至刻度)，37℃避光溫孵30分鐘，取出后置于10％甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗塞區(qū)為白色。將白色組織仔細(xì)挖下稱重，以梗塞組織重量占全腦重量及患側(cè)腦重量的百分比作為腦梗塞范圍(％)。
2.知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠腦組織含水量的影響
2.1.分組、給藥及造模方法。同1。
2.2.腦組織含水量的測(cè)定方法術(shù)后24h斷頭取腦，左右半腦分開(kāi)，用濾紙吸干表面水分，分別稱量左右腦濕重，105℃烘烤48h至恒重，精確稱量干重，依據(jù)下式計(jì)算腦水含量。
腦水含量＝(濕重-干重)/濕重×100％3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)值以x±s表示，結(jié)果用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)，組間比較，進(jìn)行t檢驗(yàn)。
二、結(jié)果1.知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠神經(jīng)癥狀和腦梗塞范圍的影響結(jié)果見(jiàn)表4-1。
表4-1知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓栓塞性大鼠神經(jīng)癥狀及腦梗塞范圍的影響(x±s)

注與空白組相比，ΔΔP＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果表明，除假手術(shù)組外，MCAT模型組及各給藥組動(dòng)物均有不同程度的梗塞灶及偏癱樣癥狀。知母皂苷BII 20mg/kg、40mg/kg組能顯著縮小模型動(dòng)物的腦梗塞范圍，改善神經(jīng)癥狀(P＜0.05，P＜0.01)。
2.知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠腦組織含水量的影響結(jié)果見(jiàn)表4-2。
表4-2知母皂苷BII對(duì)大腦中動(dòng)脈血栓形成大鼠腦組織含水量的影響(x±s)

注與空白組相比，ΔΔP＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05從上表可以看出，知母皂苷BII 40mg/kg可以明顯降低模型大鼠患側(cè)腦水含量，改善腦水腫(P＜0.05)。
討論與小結(jié)大腦中動(dòng)脈血栓模型是局灶性腦缺血的常用動(dòng)物模型，它可以比較客觀地模擬臨床腦梗塞多發(fā)于大腦中動(dòng)脈這一事實(shí)，易控制局部條件，復(fù)制成功率高，且與臨床腦卒中發(fā)病過(guò)程類似，血栓部位固定。結(jié)果顯示，術(shù)后6h、24h動(dòng)物出現(xiàn)偏癱樣癥狀，腦血栓形成側(cè)腦含水量明顯增加，TTC染色可見(jiàn)明顯的腦梗塞灶。知母皂苷BII 20mg/kg、40mg/kg組可以明顯改善大鼠神經(jīng)癥狀，縮小腦梗塞范圍，與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)；知母皂苷BII 40mg/kg組可以明顯減輕腦水腫程度，與模型組相比有顯著差異(P＜0.05)。這一結(jié)果提示該藥物具有保護(hù)缺血性腦損傷的作用。
實(shí)施例2.
知母皂苷BII對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響一、方法1.分組及給藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按體重隨機(jī)分為6組，即模型對(duì)照組、正常對(duì)照組、尼莫地平12mg/kg組、知母皂苷BII 10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg組。動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥五天，每日給藥容積為5ml/kg。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服等容積的0.5％CMC溶液。
2.造模方法根據(jù)毛騰敏[14]的方法，稍加改進(jìn)。第五日給藥后1小時(shí)，予以大鼠皮下注射腎上腺素0.8mg/kg兩次，間隔4小時(shí)。并于首次注射腎上腺素后2小時(shí)，將大鼠浸泡于4℃冰水中5分鐘后，取出。
3.全血粘度及血漿粘度測(cè)定末次給藥后1小時(shí)，大鼠腹腔注射10％水合氯醛(0.35g/kg)麻醉，頸總動(dòng)脈采血，以1％肝素抗凝。取肝素抗凝血0.8ml用血液粘度儀進(jìn)行檢測(cè)，以高切(200S-1)、中切(30S-1)、低切(5S-1)及低切(1S-1)狀態(tài)時(shí)測(cè)定的血液粘度表示全血粘度；另取抗凝血以3000rpm離心8分鐘，其上清液為血漿，取0.8ml血漿用血液粘度儀測(cè)試100S-1時(shí)的血漿粘度。
4.紅細(xì)胞聚集性和變形性測(cè)定取肝素抗凝血40μl加紅細(xì)胞變形液1ml混勻，取樣0.8ml，用紅細(xì)胞變形/聚集測(cè)試儀測(cè)試，以紅細(xì)胞最大變形指數(shù)(MAXDI)和曲線下面積(SSS)表示紅細(xì)胞變形性；另取抗凝血0.8ml，用紅細(xì)胞變形/聚集測(cè)試儀測(cè)試，以紅細(xì)胞最大聚集指數(shù)(MAXD)和曲線下面積(SS)表示紅細(xì)胞聚集性。
5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)值以x±s表示，結(jié)果用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)，組間比較，進(jìn)行t檢驗(yàn)。
二、結(jié)果1.知母皂苷BII對(duì)急性血瘀模型大鼠全血粘度、血漿粘度的影響結(jié)果見(jiàn)表10-1。
表10-1知母皂苷BII對(duì)急性血瘀模型大鼠全血粘度及血漿粘度的影響(x±s)

注與空白組相比，ΔΔP＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果顯示，造模后24h，血瘀模型大鼠的全血粘度、血漿粘度明顯升高，與正常對(duì)照組相比有明顯差異(P＜0.01)；知母皂苷BII 10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg組均可以明顯降低模型大鼠高、中、低切變率下的全血粘度及血漿粘度(P＜0.05，P＜0.01)。
2.知母皂苷BII對(duì)急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集性和變形性的影響結(jié)果見(jiàn)表10-2。
表10-2知母皂苷BII對(duì)急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集性和變形性的影響(x±s)

注與空白組相比，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果顯示，造模后24h，與空白組相比，血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集指數(shù)明顯增加，變形指數(shù)明顯降低(P＜0.05，P＜0.01)；與模型大鼠相比，知母皂苷BII 40mg/kg組能明顯升高模型大鼠的紅細(xì)胞變形指數(shù)，降低紅細(xì)胞聚集指數(shù)(P＜0.05，P＜0.01)。
三、討論與小結(jié)血液流變學(xué)是研究血液的流動(dòng)性、聚集性、凝固性和血細(xì)胞變形性的一門科學(xué)。缺血性腦血管病患者存在全血比粘度、血漿比粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)及纖維蛋白原等多項(xiàng)血液流變學(xué)指標(biāo)的改變。因而改善血液流變學(xué)，降低血液粘度、降低紅細(xì)胞聚集性、提高紅細(xì)胞變形性等對(duì)缺血性腦血管病的防治具有非常重要的作用。研究中采用大鼠皮下注射大劑量腎上腺素，模擬暴怒時(shí)機(jī)體狀態(tài)，以冰水浸泡模擬寒邪侵襲，迅速?gòu)?fù)制出血液呈粘、濃、凝、聚狀態(tài)的急性血瘀模型。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，知母皂苷BII能明顯抑制急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集性、提高紅細(xì)胞變形性，明顯降低急性血瘀大鼠高、中、低切變率下的全血粘度和血漿粘度，說(shuō)明藥物具有明顯的改善血液流變學(xué)作用。
實(shí)施例3.
知母皂苷BII對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織炎癥因子的影響以插線法制備腦缺血再灌注模型，通過(guò)ELISA法測(cè)定各組大鼠的IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β含量，從而研究知母皂苷BII對(duì)腦缺血再灌模型大鼠炎癥因子的保護(hù)作用。
一、方法1.分組及給藥將大鼠按體重隨機(jī)分為六組，即假手術(shù)組、模型組、尼莫地平組(12mg/kg)、知母皂苷BII.10mg/kg、40mg/kg組，藥物均用0.5％CMC配制。各組動(dòng)物在觀察飼養(yǎng)兩日后用于實(shí)驗(yàn)。先連續(xù)給藥五天，每日給藥容積為10ml/kg，其中假手術(shù)組和模型組灌服等量0.5％CMC，每日給藥一次，于第五日晨給藥一小時(shí)后進(jìn)行手術(shù)造模。
2.造模方法根據(jù)Koizum and Nagasawa的方法制備大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型。將大鼠以10％水合氯醛按0.35g/kg腹腔注射麻醉，仰臥位固定，局部皮毛消毒后手術(shù)。分離右頸總動(dòng)脈(CCA)、右頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)及頸外動(dòng)脈(ECA)并埋線備用，結(jié)扎ECA與CCA，用動(dòng)脈夾夾閉ICA遠(yuǎn)心端后，迅速于ECA與ICA分叉處作一切口，從切口處插入一端加熱成光滑球形尼龍線(直徑為0.25mm，距球端2cm處作標(biāo)記，栓線前端經(jīng)石蠟處理后備用)。線插入ICA后，于入口處稍稍結(jié)扎尼龍線與入口處ICA段，然后松開(kāi)夾閉ICA的動(dòng)脈夾，繼續(xù)插入尼龍線至稍有阻力后略回撤，至線插入深度為18.5±0.5mm左右，實(shí)現(xiàn)大腦中動(dòng)脈阻塞而致腦缺血。再次結(jié)扎入口處，尼龍線外留約1cm，縫合肌肉皮膚，腹腔注射硫酸慶大霉素0.4ml/只。3h后輕輕提拉所留線頭至有阻力，實(shí)現(xiàn)大腦中動(dòng)脈再灌，則造模型完成。假手術(shù)組僅結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈，不作切口，不插線。動(dòng)物入選的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物于缺血3h后出現(xiàn)對(duì)側(cè)前肢倦曲或行走轉(zhuǎn)圈或行走向?qū)?cè)傾倒體征則納入，動(dòng)物無(wú)此體征或于3h后仍不清醒者剔除。
3.組織勻漿的制備動(dòng)物于缺血3h再灌21h后斷頭取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干，然后將剩余的右側(cè)大腦半球在4℃下以生理鹽水制成10％組織勻漿。
4.IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β定量ELISA測(cè)定(1)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔，每孔中各加入樣品稀釋液100ul，第一孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul，混勻后用加樣器吸出100ul，移至第二孔。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋至第七孔，最后，從第七孔中吸出100ul棄去，使之體積均為100ul。第八孔為空白對(duì)照。
(2)加樣待測(cè)品孔每孔各加入待測(cè)樣品150ul。
(3)將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
(4)洗板用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。
(5)每孔中加入第一抗體工作液50ul，置37℃60分鐘。
(6)洗板同前。
(7)每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul，將反應(yīng)板置37℃60分鐘。
(8)洗板同前。
(9)每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)5-10分鐘。
(10)每孔加入1滴終止液混勻。
(11)在492nm處測(cè)吸光值。
5.結(jié)果計(jì)算將所有OD值都減除空白值后再行計(jì)算，以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62、31、16、0PG/ml之OD值在半對(duì)數(shù)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)炎癥因子的含量。
6.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)值以x±s表示，結(jié)果用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)，組間比較，進(jìn)行t檢驗(yàn)。
二、結(jié)果知母皂苷BII對(duì)腦缺血再灌注大鼠炎癥因子的影響表 知母皂苷BII對(duì)缺血再灌大鼠IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β含量的影響(x±s)

注與假手術(shù)組相比，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與假手術(shù)組相比，腦缺血再灌模型組大鼠腦組織中前炎癥因子IL-1β、TNF-α的含量明顯增高，保護(hù)性炎癥因子IL-10、TGF-β的含量亦明顯增高，且差別具有顯著性意義；陽(yáng)性藥尼莫地平及知母皂苷BII 40mg/kg組均能明顯降低諸炎癥因子的含量，對(duì)腦缺血再灌大鼠的炎癥反應(yīng)具有明顯的保護(hù)作用。
權(quán)利要求
1.知母皂苷BII在制備用于預(yù)防或治療腦卒中(腦中風(fēng))的藥物或產(chǎn)品中的用途。
2.權(quán)利要求1所述的知母皂苷BII的用途，其特征在于所述知母皂苷BII的純度為≥90％。
全文摘要
本發(fā)明涉及知母皂苷BII在制備用于防治腦卒中(腦中風(fēng))藥物或產(chǎn)品中的用途。實(shí)驗(yàn)證明，知母皂苷BII可明顯改善局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)癥狀，縮小腦梗塞范圍，減輕腦水腫程度；明顯改善模型動(dòng)物的血液流變性、減輕腦缺血所致炎性損傷等。
文檔編號(hào)A61K31/704GK1692908SQ20051005946
公開(kāi)日2005年11月9日 申請(qǐng)日期2005年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月29日
發(fā)明者馬百平, 徐秋萍, 趙陽(yáng), 熊呈琦, 譚大維 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所