專利名稱：纈沙坦的鹽的制作方法
本申請是2001年7月17日提交的發(fā)明名稱為“纈沙坦的鹽”的國際申請PCT/EP01/08253的分案申請，該國際申請于2003年1月20日進入中國國家階段，在中國的申請?zhí)枮?1813039.9。
本發(fā)明涉及下式所示的AT1受體拮抗劑(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2′-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基-甲基]-胺(纈沙坦)的新的鹽 活性成分纈沙坦是游離酸，其具體描述于EP 0443983，尤其是實施例16中；其具有兩個酸性氫原子(i)羧基的氫原子(H原子)，和(ii)四唑環(huán)的氫原子。因此，可用一價或更高價例如二價陽離子替代一個酸性H原子(主要是羧基H原子)或兩個酸性H原子。還可以形成混合鹽。
EP 443983沒有公開纈沙坦的任何具體鹽。而且，其也沒有提及鹽的任何特殊性質(zhì)。同時，活性成分纈沙坦已作為抗高血壓藥以商品名DIOVAN進入了一系列國家。
游離酸形式的纈沙坦的熔點是這樣的，在封閉的坩鍋中為80-95℃，在敞口坩鍋中為105-110℃，并且熔化焓為12kJ/mol。對于在甲醇中的c＝1％的濃度，旋光度為[α]20D＝(-70±2)0。
纈沙坦晶體和鹽水合物的密度是通過氦比重計(Accupyc 1330，Micromeritics，Norcross，GA，USA)測定的。游離酸形式的纈沙坦晶體的密度為1.20±0.02。
X-射線衍射圖案基本上由非常寬的、散開的X-射線反射組成；因此，游離酸在X-射線下的特征幾乎是非晶形的。熔點以及測定的12kJ/mol的熔化焓一起明確地證實了在游離酸形式的纈沙坦顆?；蚪Y(jié)構(gòu)域中存在顯著的殘余排列。
需要更穩(wěn)定的、例如晶體形式的纈沙坦，它們在化學(xué)制備方法的最后步驟之后的干燥或研磨過程中以及在制備藥物制劑的步驟中更易于處理。已經(jīng)作了很多無用的嘗試來通過成鹽發(fā)現(xiàn)改善的形式，理想的形式應(yīng)盡可能為晶體，并且在物理和化學(xué)上是穩(wěn)定的。只有本發(fā)明的鹽、其溶劑化物和多晶形式表現(xiàn)出所需的改善的性質(zhì)。
已證實，形成具有所需有利性質(zhì)的纈沙坦的鹽很困難。在大多數(shù)情況下獲得的是穩(wěn)定性很差的非晶形鹽(例如硬泡沫狀物、臘狀物或油狀物)。大量的研究已表明，與游離酸形式的纈沙坦相比，本發(fā)明的纈沙坦的鹽特別有利。
本發(fā)明的目的是選自下列的纈沙坦的鹽一鈉鹽、一鉀鹽、二鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、雙二乙基銨鹽、雙二丙基銨鹽、雙二丁基銨鹽、一-L-精氨酸鹽、二-L-精氨酸鹽、一-L-賴氨酸鹽和二-L-賴氨酸鹽，以及鹽的混合物，或其各自的非晶形形式、溶劑化物，尤其是水合物，以及多晶形式，其制備和應(yīng)用，以及含有這樣的鹽的藥物制劑。
本發(fā)明的目的是選自下列的纈沙坦的鹽一鈉鹽、一鉀鹽、二鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、雙二乙基銨鹽、雙二丙基銨鹽、雙二丁基銨鹽、一-L-精氨酸鹽、二-L-精氨酸鹽、一-L-賴氨酸鹽和二-L-賴氨酸鹽，或其各自的非晶形形式、溶劑化物，尤其是水合物，以及多晶形式。
鹽的混合物是(i)由選自上述的不同陽離子形成的單鹽形式，或(ii)以例如聚集物形式存在的單鹽形式的混合物。
優(yōu)選的鹽是例如選自下列的那些非晶形形式的一鈉鹽；非晶形形式或晶體形式，尤其是水合物形式的纈沙坦的二鈉鹽。
非晶形形式的纈沙坦的一鉀鹽；非晶形形式或晶體形式，尤其是水合物形式的纈沙坦的二鉀鹽。
晶體形式，尤其是水合物形式，主要是四水合物形式的纈沙坦的鈣鹽；晶體形式，尤其是水合物形式，主要是六水合物形式的纈沙坦的鎂鹽；晶體形式，尤其是水合物形式的纈沙坦的鈣/鎂混合鹽；晶體形式，尤其是水合物形式的纈沙坦的雙二乙基銨鹽；晶體形式，尤其是水合物形式的纈沙坦的雙二丙基銨鹽；晶體形式，尤其是水合物形式，主要是半水合物形式的纈沙坦的雙二丁基銨鹽；非晶形形式的纈沙坦的一-L-精氨酸鹽；非晶形形式的纈沙坦的二-L-精氨酸鹽；非晶形形式的纈沙坦的一-L-賴氨酸鹽；非晶形形式的纈沙坦的二-L-賴氨酸鹽。
本發(fā)明的鹽優(yōu)選以分離且基本上純的形式存在，例如其純度＞95％，優(yōu)選＞98％，首選＞99％。本發(fā)明的鹽的對映體純度＞98％，優(yōu)選＞99％。
與游離酸相比，本發(fā)明的鹽或其非晶形形式、溶劑化物例如鹽水合物、以及相應(yīng)的多晶形式具有出人意料的有利特征。在給定條件下，結(jié)晶鹽和結(jié)晶鹽水合物具有清楚的熔點，該熔點伴有顯著的吸熱熔化焓。本發(fā)明的結(jié)晶鹽是穩(wěn)定的，并且在貯藏和銷售期間也具有比纈沙坦好的質(zhì)量。非晶形或部分非晶形形式的鹽具有有限的穩(wěn)定性，即作為固體，它們具有有限的穩(wěn)定性范圍。為了穩(wěn)定，它們需要一些可通過例如蓋侖制劑實現(xiàn)的措施。
此外，本發(fā)明的結(jié)晶和非晶形的鹽可在水中高度解離，因此能明顯改善水溶性。這些特征是有利的，因為一方面溶解過程更快，另一方面，對于這樣的溶液需要更少量的水。此外，在一些條件下，對于固體劑型，較高的水溶解度還導(dǎo)致鹽或鹽水合物的生物利用度得以提高。改善的性質(zhì)對于患者來說是尤其有益的。另外，經(jīng)證實某些本發(fā)明的鹽具有特別的物理穩(wěn)定性，特別是堿土金屬鹽。對于在室溫和稍高溫度下的不同相對濕度，在寬范圍的濕度下經(jīng)過數(shù)小時(例如4小時)的時間，本發(fā)明的鹽水合物幾乎沒有表現(xiàn)出任何吸水或水分損失。而且，例如，在不同的相對濕度下貯藏將不會改變本發(fā)明鹽的熔點。
當(dāng)作為藥物活性物質(zhì)生產(chǎn)或者當(dāng)生產(chǎn)、貯藏和應(yīng)用蓋侖制劑時，一些鹽或一些鹽水合物的改善的物化性質(zhì)特別重要。這樣，由于一開始就具有改善的物理參數(shù)恒定性，可保證更高的制劑質(zhì)量。鹽或鹽水合物的高穩(wěn)定性還使得能夠通過在后處理期間進行較簡單的操作步驟來獲得經(jīng)濟方面的優(yōu)勢。一些鹽水合物的高結(jié)晶性使得能夠使用選定的分析方法，尤其是各種X-射線法，使用這些分析方法能夠清楚且簡單地分析它們的釋放。對于活性物質(zhì)及其蓋侖形式在生產(chǎn)、貯藏和對患者給藥期間的質(zhì)量，該因素也特別重要。此外，可避免在蓋侖制劑中穩(wěn)定活性組分所用的復(fù)雜條件。
因此，本發(fā)明涉及結(jié)晶、部分結(jié)晶和非晶形形式的纈沙坦的鹽。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明鹽的溶劑化物例如水合物以及多晶形式。
本發(fā)明鹽的溶劑化物和水合物可分別作為半、一、二、三、四、五、六溶劑化物或水合物存在。用于結(jié)晶的溶劑例如醇，尤其是甲醇、乙醇、醛、酮，尤其是丙酮、酯例如乙酸乙酯可包埋在晶格中。所選的溶劑或水在結(jié)晶過程中以及在隨后的加工步驟中形成溶劑化物或水合物或直接導(dǎo)致形成游離酸的程度通常是不可預(yù)知的，并取決于處理條件的組合以及纈沙坦與所選溶劑、尤其是水之間的相互作用。所得鹽、溶劑化物和水合物以及相應(yīng)的鹽溶劑化物或鹽水合物形式的結(jié)晶或非晶形固體的穩(wěn)定性必須通過實驗來確定。因此不能僅僅把注意力集中在所得固體中分子的化學(xué)組成和化學(xué)計量比例上，因為在這些情況下既可能產(chǎn)生不同的結(jié)晶固體，也可能產(chǎn)生不同的非晶形物質(zhì)。
對于相應(yīng)的水合物，鹽水合物是優(yōu)選的，因為晶體結(jié)構(gòu)中的水分子是通過強的分子間力結(jié)合的，因此代表著形成這些晶體結(jié)構(gòu)的必需要素，而這些晶體結(jié)構(gòu)部分地是特別穩(wěn)定的。然而，水分子還存在于通過相當(dāng)弱的分子間力結(jié)合的一些晶格中。這樣的分子或多或少地整合在晶體結(jié)構(gòu)形成中，但是具有較低的能量效應(yīng)。非晶形固體中的水分含量一般可象結(jié)晶水合物一樣能夠清楚地測定，但是強烈地依賴于干燥和周圍的條件。與之相反，對于穩(wěn)定的水合物，在藥物活性物質(zhì)與水之間有清楚的化學(xué)計量比例。在許多情況下，這些比例與化學(xué)計量值不完全相符，由于一些晶體缺損，與理論值相比，其通常接近較低的值。對于較弱的結(jié)合水，有機分子與水分子的比例可在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)改變，例如可為二水合物、三水合物或四水合物。另一方面，在非晶形固體中，水的分子結(jié)構(gòu)分級不是化學(xué)計量的；但該分級偶而也可以是化學(xué)計量的。
在某些情況下，不能將水分子的精確化學(xué)計量分級，因為在例如堿金屬鹽、尤其是鉀鹽中形成了層結(jié)構(gòu)，因此不能以確定的形式測定包埋的水分子。
對于具有相同化學(xué)組成的結(jié)晶固體，不同的所得晶格用術(shù)語多晶現(xiàn)象來概括。
應(yīng)當(dāng)理解，如果適當(dāng)?shù)脑挷⑶覟榉奖闫鹨?，本發(fā)明上下文中提及的本發(fā)明的鹽還包括相應(yīng)的溶劑化物例如水合物，以及多晶變型和非晶形形式。
纈沙坦鈣鹽四水合物和纈沙坦鎂鹽六水合物是特別優(yōu)選的。
這兩種鹽的水合物的粉末X-射線衍射圖案具有多個不連續(xù)的X-射線反射，并且?guī)缀鯖]有任何非結(jié)晶或無定形部分的信號。因此，這些確定的鹽水合物的結(jié)晶度驚人的高。同樣，可從一些鹽的水合物培養(yǎng)出較大的晶體，并且從結(jié)晶學(xué)意義上來說，它們是單晶。這樣的單晶使得可確定固體的結(jié)構(gòu)。這是通過計算機輔助評估用X-射線衍射儀測定的反射強度來完成的。
在正常條件下，例如高物理、化學(xué)和對映體純度的標(biāo)準(zhǔn)晶體，這種測定晶體結(jié)構(gòu)的方法使得能夠在分子或原子水平上進行清楚的結(jié)構(gòu)確定，即單位晶格的對稱性和尺寸、原子位置和溫度因子，并且從所確定的晶胞體積，在分子量基礎(chǔ)上顯示了X-射線照相密度。同時，X-射線照相結(jié)構(gòu)測定提供了其質(zhì)量的詳細(xì)內(nèi)容。
這兩種鹽的水合物的優(yōu)異特性是基于晶體，通過在每個纈沙坦分子中摻入4或6個水分子，它們形成了這些鹽。因此，產(chǎn)生了特別完美的三維晶格。這兩種鹽的水溶解度比游離酸形式的纈沙坦高數(shù)倍，這在高熔點和熔化焓下尤其令人驚奇，其熔點和熔化焓比游離酸高8或5倍。這兩種鹽水合物的獨特晶格是這兩種化合物的化學(xué)和物理穩(wěn)定性的基礎(chǔ)。
特別值得注意的鹽水合物是纈沙坦鈣鹽四水合物。在封閉的樣本容器中，對于Tr＝10K·min-1的加熱速度，其熔點為205±1.5℃，熔化焓為98±4kJMol-1。在高溫下，纈沙坦鈣鹽四水合物在水合水和分子結(jié)構(gòu)方面都不穩(wěn)定。所給出的熔點是水合物的熔點，其僅可以在封閉的樣本容器中測定。使用壁厚度為0.2mm的金容器；稱重2-4mg的鹽水合物，通過冷熔接將其密封。這些金容器具有約22微升的內(nèi)部自由體積。必須適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)樣本的量和加壓容器的體積，從而使在熔點測定期間鹽水合物不可能發(fā)生強烈的脫水。水在205℃的分壓為約18巴，這樣在熔點測定期間，在DSC(差示掃描量熱計)中使用開口容器時會轉(zhuǎn)化成脫水物。如果將得自幾個加熱速度的數(shù)據(jù)(Tr＝10、20、40K·min-1)外推至連續(xù)快速的加熱速度，則得到213±2℃的熔點和124±5kJ Mol-1的熔化焓。高的水合物熔點和熔化焓的值是纈沙坦鈣鹽四水合物晶格的顯著穩(wěn)定性的表現(xiàn)。這兩種熱力學(xué)特征表明了與游離酸相比的有利的物理性質(zhì)，游離酸的兩個相應(yīng)數(shù)據(jù)是，在封閉系統(tǒng)中熔點為90℃，熔化焓為12kJ Mol-1。這些熱力學(xué)數(shù)據(jù)與X-射線數(shù)據(jù)一起表明了該晶格的高穩(wěn)定性。它們是纈沙坦鈣鹽四水合物的特殊物理和化學(xué)耐性的基礎(chǔ)。
在溴化鉀壓片中測定的纈沙坦鈣鹽四水合物的紅外吸收光譜表現(xiàn)出以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列明顯譜帶3750-3000(st)；3400-2500(st)；1800-1520(st)；1500-1380(st)；1380-1310(m)；1290-1220(w)；1220-1190(w)；1190-1160(w)；1160-1120(w)；1120-1050(w)；1030-990(m)；989-960(w)，950-920(w)；780-715(m)；710-470(m)。吸收譜帶的強度如下所示(w)＝弱；(m)＝中等；(st)＝強。紅外光譜的測定也是通過使用Perkin-Elmer Corp.，Beaconsfield，Bucks，英國的儀器Spektrum BX通過ATR-IR(衰減全反射-紅外光譜)進行的。
纈沙坦鈣鹽四水合物具有以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列明顯譜帶3594(w)；3306(w)；3054(w)；2953(w)；2870(w)；1621(st)；1578(m)；1458(m)；1441(m)；1417(m)；1364(m)；1336(w)；1319(w)；1274(w)；1241(w)；1211(w)；1180(w)；1149(w)；1137(w)；1106(w)；1099(w)；1012(m)；1002(w)；974(w)；966(w)；955(w)；941(w)；863(w)；855(w)；844(w)；824(w)；791(w)；784(w)；758(m)；738(m)；696(m)；666(m)。吸收譜帶的強度如下所示的(w)＝弱；(m)＝中等；(st)＝強。
ATR-IR光譜的最強吸收譜帶由以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列值表示3306(w)；1621(st)；1578(m)；1458(m)；1441(m)；1417(m)；1364(m)；1319(w)；1274(w)；1211(w)；1180(w)；1137(w)；1012(m)；1002(w)；758(m)；738(m)；696(m)；666(m)。
ATR-IR的所有吸收譜帶的誤差界限為±2cm-1。
纈沙坦鈣鹽四水合物的理論水分含量為13.2％。使用熱標(biāo)度TGS-2(Perkin-Elmer Corp.，Norwalk，CT USA)測定的水分含量為12.9％。由此計算的總分子式為(C24H27N5O3)2-Ca2+·(3.9±0.1)H2O。
在不含水的氮氣氛下，使用熱重量分析法以10K·min-1的加熱速度測定與溫度有關(guān)的該四水合物的水分損失。結(jié)果如表1所示。
表1
在22℃的纈沙坦鈣鹽四水合物在水-乙醇混合物中的溶解度如表2所
實施例9按照實施例1方法，水加入量分別為0.36g、0.90g測定DNS轉(zhuǎn)化率100％時，反應(yīng)時間水用量0.36g(0.2mol)反應(yīng)時間200min0.90g(0.5mol)反應(yīng)時間410min實施例10按照實施例1方法，CO用量分別為168g、280g測定DNS轉(zhuǎn)化率100％時，反應(yīng)時間；CO用量 168g 反應(yīng)時間200min280g 反應(yīng)時間140min實施例11按照實施例1方法，通入含有空氣、水蒸汽的CO，其組成如下空氣10％ 水蒸汽5％ CO85％ DNS轉(zhuǎn)化率100％時，反應(yīng)時間460min。
對于給定的物質(zhì)，檢查通過實驗從X-射線衍射圖案測定的上述晶格間平面間距和強度平均值的優(yōu)選方法是計算從綜合的單晶結(jié)構(gòu)測定獲得的這些間距及其強度。該結(jié)構(gòu)測定產(chǎn)生了晶胞常數(shù)和原子位置，使得能夠通過計算機輔助的計算方法(CaRine Crystallography程序，UniversitédeCompiègne，F(xiàn)rance)計算對應(yīng)于固體的X-射線衍射圖案。這些數(shù)據(jù)，即通過用Guinier照相機測定和通過計算單晶數(shù)據(jù)而獲得的纈沙坦鈣鹽四水合物的晶格間平面間距和最重要線條的強度的比較如表4所示。
表4
本發(fā)明涉及(S)-N-(1-羧基-2-甲基丙-1-基)-N-戊?；?N-[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-胺的鈣鹽的結(jié)晶四水合物，其為一種結(jié)晶固體，可用由單晶X-射線分析和X-射線粉末圖案獲得的數(shù)據(jù)和參數(shù)清楚地表明其特征。關(guān)于單晶X-射線衍射方法的理論和評價晶體數(shù)據(jù)和參數(shù)的定義的詳細(xì)論述可參見Stout & Jensen，X-Ray Structure Determination；A PracticalGuide，Mac Millian Co.，New York，N.Y.(1968)第3章。
纈沙坦鈣鹽四水合物的單晶X-射線結(jié)構(gòu)測定的數(shù)據(jù)和參數(shù)列在表5中。
表5纈沙坦鈣鹽四水合物的晶體數(shù)據(jù)和參數(shù)晶體數(shù)據(jù)總分子式 (C24H27N5O3)2-Ca2+·4H2O分子量 545.65晶體顏色 無色晶體形狀 平的棱晶晶系 單斜空間群 P21單晶尺寸 0.42·0.39·0.17mm3單位晶格的大小和角度 a＝10.127(2)b＝8.596(2)c＝32.214(6)α＝90°β＝95.34(3)°γ＝90°單位晶格的體積 Vc＝2792.1(10)3單位晶格中的分子數(shù)目 4F(000) 1160晶胞參數(shù)測定范圍(Θ) 7.47-16.50°計算的密度 1.298(g·cm-3)線性吸收系數(shù) 0.274mm-1(ω/2Θ)X-射線測定數(shù)據(jù)衍射儀 Enraf Nonius CAD4
X-照射(石墨單色儀) MoKα波長0.71073溫度295K掃描范圍(θ)1.27-31.990掃描方式ω/2Θ收集的反射/唯一的 19384/18562顯著反射的數(shù)目(I＞2σ(I)) 10268強度差異1.7％吸收校正數(shù)字的結(jié)構(gòu)精化方法滿矩陣法，最小二乘方，F(xiàn)2參數(shù)數(shù)目893適合指數(shù)(R) 6.2％加權(quán)適合指數(shù)(Rw)14.4％S因子(擬合優(yōu)度) 1.085所用的反射數(shù)目 18562包括水分子中的氫原子在內(nèi)的分子中所有都是通過差分-傅里葉計的所有氫原子的處理 算建立的，幾乎所有都進行了各向同性精化，一些是理論確定的(riding)消光校正無決定性差分-傅里葉計算中的最大/最小 0.662/-0.495(e·-3)殘留電子密度絕對結(jié)構(gòu)參數(shù)0.00(4)所用的計算機程序SHELXS 86(Sheldrick，Gttingen，1990)
SHELXL 96(Sheldrick，Gttingen，1996)SCHAKAL 86(Keller，F(xiàn)reiburg 1986)PLATON(Spek，Acta Cryst.，1990)用6個參數(shù)限定單位晶格，即光柵常量a、b和c，以及軸角，即a、β和γ。這樣就確定了單位晶格的體積Vc。這些晶體參數(shù)的區(qū)別描述記載于Stout & Jensen(見上文)的第3章中。有關(guān)纈沙坦鈣鹽四水合物在單晶測定，尤其是原子坐標(biāo)、各向同性熱參數(shù)、氫原子坐標(biāo)以及相應(yīng)的各向同性熱參數(shù)方面的詳細(xì)數(shù)據(jù)表明存在單斜晶的單位晶格，其晶胞內(nèi)容物是4個化學(xué)式單元Ca2+纈沙坦2-·4H2O，這是在雙重位置上的兩個結(jié)晶學(xué)獨立的單位。
通過給定的從單晶X-射線結(jié)構(gòu)測定中確定的偏心空間群P21，排除了外消旋體。因此，證實了(S)-N-(1-羧基-2-甲基丙-1-基)-N-戊?；?N-[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鈣鹽四水合物結(jié)晶的S-構(gòu)型的對映體純度。
對于物理-化學(xué)操作例如干燥、過篩、研磨，以及在用藥物賦形劑進行的蓋侖制劑加工，即混合、制粒、噴霧干燥、制片過程中，純凈活性物質(zhì)的質(zhì)量的必需特征是取決于所在環(huán)境的溫度和相對濕度的該活性物質(zhì)的水吸收或水分損失。對于一些制劑，毫無疑問地由賦形劑引入了自由或結(jié)合水和/或出于與各配制過程有關(guān)的原因向加工的物質(zhì)中加入了水分。這樣，藥物活性物質(zhì)便在相當(dāng)長的時間內(nèi)暴露于自由水分，這取決于不同活動的溫度(局部蒸汽壓)。
該性質(zhì)的清楚特征確定是通過利用動態(tài)蒸汽吸附(DVS-1，得自Surface Measurement Systems LTD，Marlow，Buckinghamshire，UK)在預(yù)定時間間隔和預(yù)定相對濕度下測定等溫線來完成的。表6給出了質(zhì)量變化，即對于9.5mg纈沙坦鈣鹽四水合物樣本，在4小時內(nèi)，在25℃下，與相對濕度有關(guān)的水分吸收或損失。相對濕度改變循環(huán)如下所示40-90；90-0；0-90；90-0％相對濕度
表6
該基于熱重量分析法的吸附法的測量誤差是約0.1％。因此，在所采用的條件下(從藥學(xué)-蓋侖制劑學(xué)的角度來看是切合實際的)，纈沙坦鈣鹽四水合物沒有表現(xiàn)出明顯的水分吸收或損失。這非常令人驚奇，因為已在晶體結(jié)構(gòu)中包含了約13％結(jié)合水的四水合物對水分完全是惰性的，即使在極端的相對濕度值也是如此。該性質(zhì)在化學(xué)生產(chǎn)的最后階段以及在不同劑型的所有蓋侖制劑加工階段有決定性的價值。這種特別的穩(wěn)定性可以通過恒定地獲取活性成分而有益于患者。
纈沙坦鈣鹽在pH1、pH4.5和pH6.8的固有溶解速率表現(xiàn)出比纈沙坦改善的值。
在穩(wěn)定性測試中，也顯示了纈沙坦鈣鹽、尤其是其四水合物對水分的獨特穩(wěn)定性。在這些測試中，在敞口容器和密封安瓿中于40℃和75％相對濕度下保持4周后，纈沙坦鈣鹽四水合物的水分含量均保持恒定。
由于鈣鹽、尤其是其四水合物的有利的結(jié)晶度，該鹽特別適于直接壓制成相應(yīng)的片劑。
此外，可保證在片劑中的改善的溶解性。在溶解性實驗中證實了鈣鹽、尤其是其四水合物在15分鐘內(nèi)從膜包衣片中釋放了100％。
在這組新型結(jié)晶固體中，纈沙坦鎂鹽水合物是優(yōu)選的，特別是六水合物。該鹽水合物在熔點區(qū)域的熱特性表現(xiàn)出一定的化學(xué)和物理不穩(wěn)定性。因此熱數(shù)據(jù)取決于測定條件。在內(nèi)部自由體積為約22微升的密封金制樣本容器中，放置2-4mg樣本，采用Tr＝10K·min-1的加熱速度，纈沙坦鎂鹽六水合物的熔點為132±1.5℃，熔化焓為56±3kJ·Mol-1。此熔化焓比纈沙坦游離酸高約5倍，并且纈沙坦鎂鹽六水合物的熔點要高得多，這一起表明了該新型晶格在室溫的穩(wěn)定性。
纈沙坦鎂鹽六水合物的1％溶液在20℃的旋光度為[α]20D＝-14°。
在溴化鉀壓片中測定的纈沙坦鎂鹽六水合物的紅外吸收光譜表現(xiàn)出以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列明顯譜帶3800-3000(st)；3000-2500(st)；1800-1500(st)；1500-1440(m)；1440-1300(m)；1280-1240(w)；1240-1190(w)；1190-1150(w)；1120-1070(w)；1050-990(w)；990-960(w)；960-920(w)；920-700(m)；700-590(w)；590-550(w)。
吸收譜帶的強度如下所示(w)＝弱；(m)＝中等；(st)＝強。
紅外光譜的測定也是通過使用Perkin-Elmer Corp.，Beaconsfield，Bucks，英國的儀器Spektrum BX通過ATR-IR(衰減全反射-紅外光譜)進行的。
纈沙坦鎂鹽六水合物具有以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列明顯譜帶3378(m)；3274(m)；2956(m)；2871(w)；2357(w)；1684(w)；1619(st)；1557(m)；1464(m)；1419(m)；1394(st)；1374(m)；1339(w)；1319(w)；1300(w)；1288(w)；1271(w)1255(w)；1223(w)；1210(w)；1175(m)；1140(w)；1106(w)；1047(w)；1024(w)；1015(w)；1005(w)；989(w)；975(w)；955(w)；941(w)；888(w)；856(w)；836(m)；820(w)；766(st)；751(m)；741(st)；732(st).
吸收譜帶的強度如下所示(w)＝弱；(m)＝中等；(st)＝強。
ATR-IR光譜的最強吸收譜帶由以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列值表示3378(m)；3274(m)；2956(m)；1619(st)；1557(m)；1464(m)；1419(m)；1394(st)；1271(w)；1175(m)；1015(w)；975(w)；836(m)；766(st)；751(m)；741(st)；732(st)。
TATR-IR的所有吸收譜帶的誤差界限為±2cm-1。
纈沙坦鎂鹽六水合物的理論水分含量為19.1％。使用基于熱重量分析法-傅里葉轉(zhuǎn)化-紅外光譜的偶聯(lián)裝置(TG-FTIR，IFS 28，得自NetzschGertebau GmbH，Selb，Bayern and Bruker Optik GmbH，Karlsruhe)，同時測定重量損失并用紅外光譜鑒定釋放的組分(釋放水)，測定的水分含量為18.5％，這與理論值符合地很好。對于六水合物，這相當(dāng)于5.8±0.2molH2O/mol鎂鹽的摩爾比。
在不含水的氮氣氛下，使用熱重量分析法以10K·min-1的加熱速度測定與溫度有關(guān)的纈沙坦鎂鹽六水合物的水分損失，結(jié)果如表7所示。通過TG-FTIR測定，僅通過水分釋放就確定了重量損失的相互關(guān)系。
表7
纈沙坦鎂鹽六水合物在蒸餾水中于22℃的溶解度為59g/升溶液(pH值9.3)。
纈沙坦鎂鹽六水合物的晶形的特征是通過從X-射線粉末圖案中的線條計算的晶格間平面間距表述的。所用的測定和分析方法與用于纈沙坦鈣鹽四水合物的方法相同。
纈沙坦鎂鹽六水合物的優(yōu)選特征是由晶格間平面間距d獲得的，由此，在下列數(shù)據(jù)中，平均值是用合適的誤差限度表示的d[]19.7±0.3，10.1±0.2，9.8±0.2，7.28±0.1，6.48±0.1，6.00±0.1，5.81±0.1，5.68±0.1，5.40±0.05，5.22±0.05，5.12±0.05，5.03±0.05，4.88±0.05，4.33±0.05，4.22±0.05，4.18±0.05，4.08±0.05，3.95±0.05，3.46±0.05，3.42±0.05。
在X-射線衍射圖案中，最強的反射表現(xiàn)出下列晶格間平面間距d[]19.7±0.3，10.11±0.2，9.8±0.2，7.28±0.1，5.81±0.05，5.68±0.05，5.03±0.05，4.88±0.05，4.18±0.05，4.08±0.05，3.46±0.05。
對于給定的物質(zhì)，檢查通過實驗從X-射線衍射圖案測定的上述晶格間平面間距和強度平均值的優(yōu)選方法是計算從綜合的單晶結(jié)構(gòu)測定獲得的這些間距及其強度。該結(jié)構(gòu)測定產(chǎn)生了晶胞常數(shù)和原子位置，使得能夠通過計算機輔助的計算方法(程序CaRine Crystallography，UniversitédeCompiègne，F(xiàn)rance)計算對應(yīng)于固體的X-射線衍射圖案。這些數(shù)據(jù)，即通過用Guinier照相機測定和通過計算單晶數(shù)據(jù)而獲得的纈沙坦鎂鹽六水合物晶格間平面間距和最重要線條的強度的比較如表8所示。
表8
本發(fā)明涉及(S)-N-(1-羧基-2-甲基丙-1-基)-N-戊?；?N-[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-胺的鎂鹽的結(jié)晶六水合物，其為一種結(jié)晶固體，可用由單晶X-射線分析獲得的數(shù)據(jù)和參數(shù)清楚地表明其特征。關(guān)于單晶X-射線衍射方法的理論和評價晶體數(shù)據(jù)和參數(shù)的定義的詳細(xì)論述可參見Stout& Jensen，X-Ray Structure Determination；A Practical Guide，Mac MillianCo.，New York，N.Y.(1968)第3章。
纈沙坦鎂鹽六水合物的單晶X-射線分析的數(shù)據(jù)和參數(shù)列在表9中。
表9纈沙坦鎂鹽六水合物的晶體數(shù)據(jù)和參數(shù)晶體數(shù)據(jù)總分子式(C24H27N5O3)2-Mg2+·6H2O分子量 565.91晶體顏色無色晶體形狀平的棱晶晶系單斜空間群 C2單晶尺寸0.013·0.50·0.108mm3單位晶格的大小和角度a＝40.075(8)b＝7.400(1)c＝10.275(2)α＝90°β＝100.85(3)°γ＝90°單位晶格的體積 Vc＝2992.6(9)3單位晶格中的分子數(shù)目4F(000) 1208晶胞參數(shù)測定范圍(Θ)2.82-11.15°計算的密度 1.256(g·cm-3)線性吸收系數(shù)0.114mm-1
X-射線測定數(shù)據(jù)衍射儀 Enraf Nonius CAD4X-照射(石墨單色儀) MoKα波長 0.71073溫度 295K掃描范圍(θ) 1.03-26.000掃描方式 ω/2Θ收集的反射/唯一的 5954/5868顯著反射的數(shù)目(I＞2σ(I)) 1341強度差異 ＜1％吸收校正 數(shù)字的結(jié)構(gòu)精化方法 滿矩陣法，最小二乘方，F(xiàn)2參數(shù)數(shù)目 243適合指數(shù)(R)10.7％加權(quán)適合指數(shù)(Rw) 13.8％S因子(擬合優(yōu)度)1.001所用的反射數(shù)目 5868測定氫原子 主要依據(jù)″riding″模型，通過差分-傅里葉計算進行了各向同性精化的水分子的9個H-原子消光校正 0.00098(10)最終的差分-傅里葉計算中的最大/最小 0.473/-0.614(e·-3)殘留電子密度絕對結(jié)構(gòu)參數(shù) 0.0(10)
所用的計算機程序SHELXS 86(Sheldrick，Gttingen，1990)SHELXL 96(Sheldrick，Gttingen，1996)SCHAKAL 86(Keller，F(xiàn)reiburg 1986)PLATON(Spek，Acta Cryst.，1990)用6個參數(shù)限定單位晶格，即光柵常量a、b和c，以及軸角，即a、β和γ。這樣就確定了單位晶格的體積Vc。這些晶體參數(shù)的區(qū)別描述記載于Stout & Jensen(見上文)的第3章中。
有關(guān)纈沙坦鎂鹽六水合物在單晶測定，尤其是原子坐標(biāo)、各向同性熱參數(shù)、氫原子坐標(biāo)以及相應(yīng)的各向同性熱參數(shù)方面的詳細(xì)數(shù)據(jù)表明存在單斜晶的單位晶格，其晶胞內(nèi)容物是4個化學(xué)式單元Mg2+纈沙坦·6H2O。
通過給定的從單晶X-射線結(jié)構(gòu)測定中確定的偏心空間群C2，排除了外消旋體。因此，證實了纈沙坦鎂鹽六水合物結(jié)晶的S-構(gòu)型的對映體純度。
表10給出了質(zhì)量變化，即對于9.5mg纈沙坦鎂鹽六水合物樣本，在4小時內(nèi)，在25℃下，與相對濕度有關(guān)的水分吸收或損失。相對濕度改變循環(huán)如下所示40-90；90-0；0-90；90-0％相對濕度表10
該基于熱重量分析法的吸附法的測量誤差是約0.1％。因此，在所采用的條件下(從藥學(xué)-蓋侖制劑學(xué)的角度來看是切合實際的)，纈沙坦鎂鹽六水合物在20-80％的相對濕度下表現(xiàn)出弱的、可重現(xiàn)的水分吸收或水分損失。這非常令人驚奇，因為已在晶體結(jié)構(gòu)中包含了約19％結(jié)合水的該六水合物能夠可逆地吸收或釋放水分，即使在極端的相對濕度值也是如此，并且在相對濕度的平均范圍內(nèi)比較不敏感。該特征使得能夠開發(fā)不復(fù)雜的物理-化學(xué)加工方法，并且能夠為患者選擇最佳劑型。
在穩(wěn)定性測試中，也顯示了纈沙坦鎂鹽、尤其是其六水合物對水分的獨特穩(wěn)定性。在這些測試中，在敞口容器和密封安瓿中于40℃和75％相對濕度下保持4周后，纈沙坦鎂鹽六水合物的水分含量均保持恒定。
由于鎂鹽、尤其是其六水合物的有利的結(jié)晶度，該鹽特別適于直接壓制成相應(yīng)的片劑。
此外，可保證在片劑中的改善的溶解性。在溶解性實驗中證實了鎂鹽、尤其是其六水合物在15分鐘內(nèi)從膜包衣片中釋放了100％。
此外，纈沙坦鎂鹽、尤其是其六水合物表現(xiàn)出有利的壓縮硬度特性。
纈沙坦的鈣/鎂混合鹽也具有有利的性質(zhì)，例如可制得均勻的晶體聚集物。它們可很好地用于蓋侖制劑。
纈沙坦二鉀鹽在pH1、pH4.5和pH6.8的固有溶解速度表現(xiàn)出比纈沙坦改善的值。
本發(fā)明的另一目的是本發(fā)明鹽的制備。
本發(fā)明的鹽，包括其非晶形或晶體形式可如下所述制得為了形成鹽，在溶劑系統(tǒng)中進行該方法，其中在所述溶劑系統(tǒng)中，兩種反應(yīng)物，即纈沙坦游離酸和相應(yīng)的堿可以充分溶解。為方便起見，使用其中所形成的鹽僅略微溶解或完全不溶解的溶劑或溶劑混合物，以實現(xiàn)結(jié)晶或沉淀。對于本發(fā)明的鹽，一種不同的方法是，使用該鹽在其中的溶解性非常強的溶劑，然后向該溶液中加入所得鹽僅略微溶解的不良溶劑。另一種鹽結(jié)晶方法是將鹽溶液濃縮，例如通過加熱、如果需要的話在減壓條件下加熱，或通過在例如室溫下將溶劑緩慢地蒸發(fā)進行濃縮，或通過加入晶種，或通過設(shè)定形成水合物所需的水活度來進行。
可使用的溶劑是例如C1-C5-鏈烷醇，優(yōu)選乙醇和異丙醇，以及C1-C5-二烷基酮，優(yōu)選丙酮及其與水的混合物。
用于鹽結(jié)晶的不良溶劑可以是例如C3-C7-烷基腈，尤其是乙腈，酯，尤其是C2-C7-鏈烷羧酸-C1-C5-烷基酯，例如乙酸乙酯或乙酸異丙酯，二-(C1-C5-烷基)-醚，例如叔丁基甲基醚，以及四氫呋喃和C5-C8-烷烴，尤其是戊烷、己烷或庚烷。
為了制備水合物，可采用溶解和結(jié)晶法，特別是水平衡結(jié)晶法。
溶解和結(jié)晶法的特征在于(i)纈沙坦與合適的堿在優(yōu)選含有水的有機溶劑中進行反應(yīng)，(ii)溶劑系統(tǒng)濃縮，例如通過加熱、如果需要的話在減壓下加熱來濃縮并加入晶種，或者通過在例如室溫緩慢地蒸發(fā)來濃縮，然后引發(fā)結(jié)晶或沉淀，和(iii)離出所獲得的鹽。
在溶解和結(jié)晶法中，所用的含水有機溶劑系統(tǒng)優(yōu)選為醇例如乙醇與水的混合物，或烷基腈、尤其是乙腈與水的混合物。
制備水合物的平衡結(jié)晶法的特征在于(i)將纈沙坦與合適的堿加到含水有機溶劑中，(ii)將溶劑濃縮，例如通過加熱、如果需要的話在減壓下加熱，或通過在例如室溫下緩慢地蒸發(fā)來濃縮，(iii)通過下述方式使蒸發(fā)殘余物與所需量的水平衡(a)將最好是仍然溫?zé)岵⑶胰匀缓幸恍┧恼舭l(fā)殘余物懸浮在合適的溶劑中，或(b)平衡溶劑中過量的水分；這樣在a)和b)中，存在或加入的水以可溶解在有機溶劑中并且不形成另外的相的量存在；和(iv)離出所獲得的鹽。
用作含水有機溶劑的溶劑系統(tǒng)優(yōu)選包含合適的醇例如C1-C7-鏈烷醇、尤其是乙醇與水的混合物。
適用于平衡的溶劑是例如酯例如C1-C7-鏈烷羧酸-C1-C7-烷基酯、尤其是乙酸乙酯，或酮例如二-C1-C5-烷基酮，尤其是丙酮。
平衡法的優(yōu)點是例如其高產(chǎn)率和突出的重現(xiàn)性。
當(dāng)生產(chǎn)本發(fā)明的一堿金屬鹽時，主要獲得非晶形形式。另一方面，本發(fā)明的二堿金屬鹽和堿土金屬鹽也可以以結(jié)晶形式從常用于制備方法的適當(dāng)溶劑中獲得，并且始終呈水合物形式，所述溶劑有例如酯，如C1-C7-鏈烷羧酸-C1-C7-烷基酯，尤其是乙酸乙酯，酮，例如二-C1-C5-烷基酮，尤其是丙酮，C3-C7-烷基腈，尤其是乙腈，或醚，例如二-(C1-C5-烷基)醚，例如叔丁基甲基醚以及四氫呋喃，或溶劑的混合物。通過使用溶解和結(jié)晶法或水平衡結(jié)晶法，可重現(xiàn)性地獲得以結(jié)晶和多晶形式存在的所定義的水合物。
不含水合物的本發(fā)明的雙二烷基銨鹽的制備可通過使用任選與不良溶劑混合的適當(dāng)溶劑在一個步驟中完成。這樣獲得了結(jié)晶鹽。
本發(fā)明的氨基酸鹽通常以非晶形形式獲得。
成鹽方法同樣是本發(fā)明的目的。
這些本發(fā)明的鹽或鹽水合物是通過例如用與各自的陽離子相對應(yīng)的堿中和纈沙坦游離酸而獲得的。該中和是在含水介質(zhì)，例如水或水與纈沙坦在其中的溶解度大于在水中的溶解度的溶劑的混合物中適當(dāng)?shù)剡M行的。通過用強堿處理，或通過用酸處理然后用其它堿中和，可將與弱堿形成的鹽轉(zhuǎn)化成其它鹽。
結(jié)晶，尤其是堿土金屬鹽水合物的結(jié)晶是在水或含水介質(zhì)中進行的，所述含水介質(zhì)由水與至少一種溶劑組成，所述的溶劑可與水混溶或部分混溶，即不是過于非極性的，例如鏈烷醇如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、DMF、DMSO。鏈烷醇所占的比例為約10-90，或20-70，優(yōu)選30-50％體積。對于高級鏈烷醇，該低極性溶劑還可以以更低的濃度存在。由于纈沙坦的水溶解度有限，該方法通常在懸浮液中進行，或者如果纈沙坦可在其它溶劑組分中溶解，該方法在溶液中進行。
在一個實施方案中，例如為了制備纈沙坦鈣鹽，在室溫用氫氧化鈣溶液中和纈沙坦水溶液，然后將該溶液放置結(jié)晶。在優(yōu)選的方法中，結(jié)晶是在水/乙醇的溶劑混合物中進行的，其中乙醇所占的比例為約30-50％體積。在特別優(yōu)選的形式中，結(jié)晶是在封閉的系統(tǒng)內(nèi)通過在30％體積的乙醇中經(jīng)由低的溫度陡度(尤其是從40℃降至1-2℃)進行的。
在優(yōu)選的方法中，可將結(jié)晶過程優(yōu)化，例如通過加入至少一粒晶種來促進結(jié)晶。
本發(fā)明的鹽可以以例如藥物制劑的形式使用，所述藥物制劑含有活性物質(zhì)，例如治療有效量的活性物質(zhì)，并且任選地還含有可藥用載體，例如無機或有機固體或任選還是液體的適于經(jīng)腸例如口服或非胃腸道給藥的可藥用載體。
本發(fā)明特別涉及含或不含可藥用載體的藥物組合物，尤其是固體劑量單位，優(yōu)選口服劑量單位。
這類藥物制劑可用于例如預(yù)防和治療可通過阻斷AT1受體得到抑制的疾病或病癥，例如選自下列的疾病或病癥(a)高血壓、充血性心力衰竭、腎衰竭、尤其是慢性腎衰竭、經(jīng)皮經(jīng)腔血管成形術(shù)后的再狹窄和冠狀動脈旁路手術(shù)后的再狹窄；(b)動脈粥樣硬化、胰島素抗性和X綜合征、2型糖尿病、肥胖、腎病、腎衰竭例如慢性腎衰竭、甲狀腺功能減退、心肌梗塞(MI)后存活、冠心病、老年高血壓、家族性異常血脂癥性高血壓、膠原形成增加、纖維變性和高血壓后的重構(gòu)(聯(lián)合形式的抗增殖作用)、與高血壓有關(guān)或無關(guān)的所有這些疾病或病癥；(c)伴有或不伴有高血壓的內(nèi)皮機能障礙；(d)高脂血癥、高脂蛋白血癥、動脈粥樣硬化和高膽固醇血癥，和(e)青光眼。
主要應(yīng)用是治療高血壓和充血性心力衰竭以及心肌梗塞后病癥。
本領(lǐng)域技術(shù)人員完全能夠選擇相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)動物實驗?zāi)Ｐ蛠碜C明上下文所指出的治療適應(yīng)征和有益效果。
通過施用本發(fā)明代表性的鹽或依據(jù)本發(fā)明使用的活性劑的聯(lián)合形式所達(dá)到的藥物活性可通過例如使用相應(yīng)的本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的藥理學(xué)模型來證實。本領(lǐng)域技術(shù)人員完全能夠選擇適宜的標(biāo)準(zhǔn)動物實驗?zāi)Ｐ蛠碜C明上下文所指出的治療適應(yīng)征和有益效果。
這些有益效果可例如在如G.Jeremic等人在J.Cardovasc.Pharmacol.27347-354，1996中公開的實驗?zāi)Ｐ椭凶C實。
例如，可用下述實驗?zāi)Ｐ蛠碜C實本發(fā)明的鹽或聯(lián)合形式在預(yù)防和治療心肌梗塞中的有價值的潛力。
實驗設(shè)計在欲進行的實驗中，使用在大鼠中的持久性冠狀動脈閉塞(CAO)作為極性心肌梗塞模型。實驗是用5個治療組進行的，其特征如下·偽手術(shù)作動物·CAO+載體·CAO+本發(fā)明的鹽任選地·CAO+本發(fā)明的鹽+聯(lián)合組分在實驗期間測定下列變量·梗塞尺寸·LV室體積·備用LV心肌中的間隙和血管周圍膠原密度·通過Western印跡法測定的備用LV心肌中的COL-I和COL-III蛋白含量·LV心肌切片中的心肌細(xì)胞橫截面積和長度·腎素和醛固酮的血漿濃度·鈉、鉀和醛固酮的尿濃度·清醒動物中的血壓·麻醉動物中的LV和頸動脈血壓方法學(xué)梗塞尺寸用氮藍(lán)四唑?qū)?μm厚的左心室橫向組織切片染色，并通過B/W XC-77CE CCD攝像機(Sony)拍攝。使用專門開發(fā)的軟件(Porzio等人，1995)在KS 300圖像分析系統(tǒng)(Carl Zeiss Vision)上處理所得圖像。由對于治療相互不知道的一個技術(shù)人員確定室間隔膜的邊界，并以半自動方式用未染色的心室組織面積確定每一切片上的梗塞面積。該軟件自動計算確定為室、隔膜、梗塞區(qū)域、梗塞的LV壁以及有活力的LV壁的心室切片各組成部分的一組幾何參數(shù)(Porzio等人，1995)。
組織學(xué)通過靜脈內(nèi)注射0.5M KCl停止心跳后，通過用緩沖的4％甲醛逆行灌注來將心臟原位固定。固定后，單獨稱重左心室(LV)和右心室的游離壁；用測徑規(guī)測定LV較長方向上的直徑。用LV蘇木精&曙紅將組織切片染色以通過半自動圖像分析途徑定性和定量測定心肌細(xì)胞橫截面積。用半自動圖像分析系統(tǒng)在Sirius紅染色的切片上評價LV中的間隙膠原沉積(Masson等人，1998)。
LV備用心肌中的膠原含量將備用心肌中的LV組織勻漿化，進行PAGE-SDS電泳，并電印跡到硝酸纖維素膜上。將印跡暴露于初級抗體，即兔抗大鼠膠原I型或III型抗血清(Chemicon)。通過綴合到堿性磷酸酶(對于I型膠原)或過氧化物酶(對于III型膠原)上的次級抗體識別初級抗體。
左心室室體積在等于測定的LV終端舒張壓的流體靜力壓下，在心跳停止于舒張期(KCl)且在福爾馬林中固定的心臟中測定LV室體積。將測量棒插到LV中以測定LV內(nèi)長度。在接近心室底部和頂部的兩個1mm的厚橫向切片中測定LV室的橫向直徑(Jeremic等人，1996)。由積分橫向直徑和內(nèi)長度的方程計算室體積。
全身和左心室血流動力學(xué)將連接在記錄器(Windograf，GouldElectronics)上的微尖壓力傳感器(Millar SPC-320)插到右頸動脈中以記錄收縮和舒張血壓。將壓力傳感器伸到LV中以測定LV收縮壓(LVSP)和舒張末壓(LVEDP)，LV壓力隨時間的一階導(dǎo)數(shù)(+dP/dt)和心率。
非侵害性血壓在清醒的大鼠中通過尾套法(Letica LE 5002)測定收縮血壓和心率。
尿電解質(zhì)、激素將大鼠在代謝籠子中單獨飼養(yǎng)，并在1ml HCl 6N中收集24小時的尿。測定水?dāng)z取量。將尿兒茶酚胺提取到Bondelut C18柱(Varian)上，通過HPLC(Apex-II C18，3μm，50×4.5mm分析柱，JonesChromatography)分離，并用電化學(xué)檢測器(Coulochem II，ESA)(Goldstein等人，1981)定量測定。用特異性放射免疫分析法(Aldoctk-2，DiaSorin和Angiotensin II，Nichols Diagnostics)測定血漿和尿中的醛固酮以及血漿中的血管緊張素II。通過火焰光度法測定尿中的鈉和鉀。
樣本大小在每一治療組中有10只可供分析的動物便足以檢測出生物學(xué)顯著性差異。只有梗塞面積至少為LV切片面積的％的大鼠才包括在最后的分析中。
內(nèi)皮機能障礙是公認(rèn)的血管疾病中的關(guān)鍵因素。內(nèi)皮作為各種激素或具有相反作用的副產(chǎn)物的來源起著雙重作用血管舒張和血管收縮，抑制或促進生長，纖維蛋白溶解或血栓形成，產(chǎn)生抗氧化劑或氧化劑。伴有內(nèi)皮機能障礙的遺傳傾向性高血壓動物構(gòu)成了評價心血管治療效果的有效模型。
內(nèi)皮機能障礙的特征是例如引起一氧化氮下降的氧化應(yīng)激增加，涉及凝血或纖維蛋白溶解的因子例如血纖維蛋白溶酶原激活抑制劑-1(PAI-1)、組織因子(TF)、組織型纖維蛋白溶酶原激活物(tPA)增加，粘附分子例如ICAM和VCAM增加，生長因子例如bFGF、TGFb、PDGF、VEGF，引起細(xì)胞生長炎癥和纖維化的所有因子增加。
可在下述藥理實驗中證實對例如內(nèi)皮機能障礙的治療效果材料和方法將購自RCC Ldt(Füllingsdorf，Switzerland)的20-24周齡的SHR放在溫度和光控制室中，讓它們能自由攝取大鼠食物(Nafag 9331，Gossau，Switzerland)和自來水。該實驗是依據(jù)NIH指南進行的，并得到了CantonVeterinary Office(Bew 161，Kantonales Veterinramt，Liestal，Switzerland)的批準(zhǔn)。用NO合成抑制劑L-NAME(Sigma Chemicals)治療所有大鼠，該抑制劑是在飲用水(50mg/l)中給藥12周。根據(jù)消耗的水量計算出的L-NAME的平均日劑量為2.5mg/kg/天(范圍是2.1-2.7)。
將大鼠分成2或3組組1，對照(n＝例如40)；組2，本發(fā)明的鹽(n＝例如40)；測試聯(lián)合形式的組3，聯(lián)合組分(n＝例如30)。將藥物在飲用液中給藥。用本發(fā)明的鹽治療后，可減小在對照組正常血壓大鼠中1mg/kgAng II對血壓影響(Gervais等人.1999)。
每周測定一次體重。在開始實驗之前3周和前2周以及給藥后2周通過尾套體積描記法測定收縮血壓。在開始治療前的1周和第4與12周，從放在每個(代謝)籠子中的大鼠收集24小時尿以測定尿量，并使用標(biāo)準(zhǔn)實驗室方法測定蛋白、肌酐、鈉和鉀。在相同時間點，從眼眶后血管叢采集血樣(最多1ml)以測定肌酐、Na+和K+。
在第4周從每組中取出10只大鼠處死，采集腎和心臟以進行形態(tài)學(xué)分析。在第12周將余下的大鼠處死。記錄心臟和腎的重量。在第4(形態(tài)學(xué)研究)周和第12周(研究結(jié)束)在5％EDTA中進行最后的血樣分析，用DPCcoat-a-計算醛固酮-RIA試劑盒(Buhlmann，Switzerland)通過放射免疫測定法測定醛固酮。
統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)都用平均值±SEM表示。統(tǒng)計學(xué)分析是這樣進行的使用單向ANOVA，然后使用Duncan’多范圍檢驗和Newman-Keuls檢驗，以進行不同組比較。概率值小于0.05的結(jié)果認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。
沒有影響血清脂質(zhì)水平的動脈粥樣硬化消退的改善可例如通過使用如H.Kano等人在Biochemical and Biophysical Research Communications259，414-419(1999)中公開的動物模型來證實。本發(fā)明的鹽或聯(lián)合形式可用于消退膽固醇飲食誘導(dǎo)的動脈粥樣硬化這一事實可通過使用例如C.Jiang等人在Br.J.Pharmacol.(1991)，104，1033-1037中描述的試驗?zāi)Ｐ蛠碜C實。
本發(fā)明的鹽或聯(lián)合形式可用于治療腎衰竭、尤其是慢性腎衰竭，這一事實可使用例如D.Cohen等人在Journal of Cardiovascular Pharmacology，3287-95(1998)中描述的試驗?zāi)Ｐ蛠碜C實。
如果需要的話還可以含有其它藥物活性物質(zhì)的本發(fā)明藥物制劑可通過已知的方式例如通過常規(guī)混合、制粒、包衣、溶解或冷凍干燥法制得，并含有約0.1％-100％、尤其是約1％-約50％活性物質(zhì)，冷凍干燥制劑可含有最高達(dá)100％的活性物質(zhì)。
本發(fā)明還涉及含有本發(fā)明鹽的組合物。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽在制備藥物制劑，尤其是用于預(yù)防和治療可通過阻斷AT1受體來抑制的疾病或病癥的藥物制劑中的應(yīng)用。主要應(yīng)用是治療高血壓和充血性心力衰竭，以及心肌梗塞后治療。
本發(fā)明還涉及預(yù)防和治療可通過阻斷AT1受體來抑制的疾病或病癥的應(yīng)用，其特征在于，給需要這樣的治療患者，的包括人患者，施用治療有效量的本發(fā)明的鹽，任選聯(lián)合施用至少一種用于治療心血管疾病以及上下文所列出的相關(guān)病癥和疾病的組分。
本發(fā)明還涉及聯(lián)合形式，例如藥物聯(lián)合形式，其中包含本發(fā)明的鹽或其可藥用鹽和至少一種用于治療心血管疾病以及上下文所列出的相關(guān)病癥和疾病的組分或其可藥用鹽。與用于治療心血管疾病以及上下文所列出的相關(guān)病癥和疾病的其它組分或其可藥用鹽聯(lián)合，也是本發(fā)明的目的。
本發(fā)明的聯(lián)合形式可用例如選自下列的組分制得(i)HMG-Co-A還原酶抑制劑或其可藥用鹽，(ii)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑或其可藥用鹽，(iii)通道阻斷劑或其可藥用鹽，(iv)固酮合酶抑制劑或其可藥用鹽，(v)醛固酮拮抗劑或其可藥用鹽，(vi)重血管緊張素轉(zhuǎn)化酶/中性內(nèi)肽酶(ACE/NEP)抑制劑或其可藥用鹽，(vii)皮肽拮抗劑或其可藥用鹽，(viii)腎素抑制劑或其可藥用鹽，和(ix)尿劑或其可藥用鹽。
HMG-Co-A還原酶抑制劑(也稱為β-羥基-β-甲基戊二酸單酰-輔酶-A還原酶抑制劑)被認(rèn)為是可用于降低脂質(zhì)水平，包括降低血液膽固醇水平的活性劑。
HMG-Co-A還原酶抑制劑包括具有不同結(jié)構(gòu)特征的化合物。例如，可提及的是選自下列的化合物阿托伐他汀、西立伐他汀(cerivastatin)、compactin、達(dá)伐他汀、dihydrocompactin、fluindostatin、氟伐他汀、洛伐他汀、匹伐他汀(pitavastatin)、美伐他汀、帕伐他汀、rivastatin、辛伐他汀、和velostatin，或其可藥用鹽。
優(yōu)選的HMG-Co-A還原酶抑制劑是已經(jīng)市售的那些，最優(yōu)選氟伐他汀和匹伐他汀，或其可藥用鹽。
用ACE-抑制劑(也稱為血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑)阻斷血管緊張素I向血管緊張素II的酶降解轉(zhuǎn)化是調(diào)節(jié)血壓的成功方法，因此也使治療充血性心力衰竭的治療方法成為可能。
ACE抑制劑包括具有不同結(jié)構(gòu)特征的化合物。例如，可提及的實例是選自下列的化合物阿拉普利、貝那普利、貝那普利拉、卡托普利、西洛普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉(enaprilat)、福辛普利、咪噠普利、賴諾普利、莫替普利、哌道普利、喹那普利、雷米普利、斯哌普利、替莫普利、和群多普利，或其可藥用鹽。
優(yōu)選的ACE抑制劑是已經(jīng)市售的那些，最優(yōu)選貝那普利和依那普利。
CCBs主要包括二氫吡啶類(DHPs)和非-DHPs例如地爾硫卓型和維拉帕米型CCBs。
用于所述聯(lián)合形式的CCB優(yōu)選是選自下列的DHP類代表性藥物氨氮地平、非洛地平、ryosidine、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼魯?shù)仄?、尼莫地平、尼索地平、尼群地平、和尼伐地平，以及?yōu)選選自下列的非-DHP類代表性藥物氟桂利嗪、普尼拉明、地爾硫卓、芬地林、加羅帕米、mibefradil、阿尼帕米、噻烷丙胺和維拉帕米，及其可藥用鹽。所有這些CCBs都治療性地用作例如抗高血壓、抗心絞痛或抗心律失常藥物。
優(yōu)選的CCBs包括氨氮地平、地爾硫卓、伊拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平或維拉帕米，或其可藥用鹽(這取決于具體的CCB)。特別優(yōu)選的DHP是氨氮地平或其可藥用鹽，尤其是其besylate。特別優(yōu)選的代表性非-DHPs是維拉帕米或其可藥用鹽、尤其是其鹽酸鹽。
醛固酮合酶是通過將皮質(zhì)酮羥基化以形成18-OH-皮質(zhì)酮，并將18-OH-皮質(zhì)脂酮轉(zhuǎn)化成醛固酮來將皮質(zhì)酮轉(zhuǎn)化成醛固酮的酶。已知這類醛固酮合酶抑制劑可用于治療高血壓和原發(fā)性醛固酮增多癥，其包括甾類和非甾類醛固酮合酶抑制劑，后者是最優(yōu)選的。
市售醛固酮合酶抑制劑或已經(jīng)得到衛(wèi)生部門批準(zhǔn)的醛固酮合酶抑制劑是優(yōu)選的。
醛固酮合酶抑制劑包括具有不同結(jié)構(gòu)特征的化合物。例如，可提及的實例是選自下列的化合物非甾類芳香酶抑制劑阿那曲唑(anastrozole)、法倔唑(包括其(+)-對映體)，以及甾類芳香酶抑制劑依西美坦，或者如果適用的話，其可藥用鹽。
最優(yōu)選的非甾類醛固酮合酶抑制劑是下式所示的鹽酸法倔唑的(+)-對映體(US專利4617307和4889861) 優(yōu)選的甾類醛固酮拮抗劑是下式所示的依普利酮(eplerenone) 或螺內(nèi)酯。
優(yōu)選的雙重血管緊張素轉(zhuǎn)化酶/中性內(nèi)肽酶(ACE/NEP)抑制劑是例如奧美曲羥(omapatrilate)(參見EP 629627)、fasidotril或fasidotrilate，或如果適當(dāng)?shù)脑?，其可藥用鹽。
優(yōu)選的內(nèi)皮肽拮抗劑是例如波生坦(參見EP 526708 A)，以及tezosentan(參見WO 96/19459)，或它們的可藥用鹽。
腎素抑制劑是例如非肽類腎素抑制劑，例如下式所示化合物 其化學(xué)名稱是2(S)，4(S)，5(S)，7(S)-N-(3-氨基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)-2，7-二(1-甲基乙基)-4-羥基-5-氨基-8-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基-丙氧基)苯基]-辛酰胺。該代表性化合物具體描述在EP 678503 A中。其半富馬酸鹽是特別優(yōu)選的。
利尿劑是例如選自下列的噻嗪衍生物氯噻嗪、氫氯噻嗪、甲基氯噻嗪(methylclothiazide)和chlorothalidon。氫氯噻嗪是最優(yōu)選的。
優(yōu)選地，聯(lián)合治療有效量的本發(fā)明聯(lián)合形式的活性劑可獨立地同時給藥或者以任何順序依次給藥，或者以固定的聯(lián)合形式給藥。
通過通用俗名或商品名限定的活性劑的結(jié)構(gòu)可參見最新版本的標(biāo)準(zhǔn)概述性出版物“The Merck Index”或數(shù)據(jù)庫例如Patents International(例如IMS World Publications)。其相應(yīng)的內(nèi)容引入本發(fā)明以作參考。本領(lǐng)域技術(shù)人員完全能夠識別這些活性劑，并且根據(jù)這些文獻(xiàn)，也能夠制備并在標(biāo)準(zhǔn)體外和體內(nèi)試驗?zāi)Ｐ椭袦y試其藥物適應(yīng)癥和性質(zhì)。
相應(yīng)的活性成分或其可藥用鹽也可以以溶劑化物形式，例如水化物或包含用于結(jié)晶的其它溶劑的溶劑化物的形式使用。
聯(lián)合使用的化合物可以作為可藥用鹽存在。如果這些化合物具有例如至少一個堿性中心，它們可形成酸加成鹽。也可以形成存在另外的堿性中心(如果需要的話)的相應(yīng)的酸加成鹽。具有酸性基團(例如COOH)的化合物也可以與堿形成鹽。
在其一種改變形式中，本發(fā)明還涉及“成套的藥盒”，它的意思是指例如，依據(jù)本發(fā)明聯(lián)合使用的各組分可獨立地給藥，或者通過使用具有不同量的組分的不同固定聯(lián)合形式來給藥，即同時或在不同的時間點給藥。成套藥盒的各部分可例如同時施用或按時間順序交錯施用，也就是說在不同時間點以相同或不同的時間間隔施用成套藥盒的任何部分。優(yōu)選對時間間隔進行選擇，使得通過聯(lián)合使用各部分所獲得的治療疾病或病癥的效果好于通過僅使用任何一種組分所獲得的效果。
本發(fā)明還涉及商業(yè)包裝，其中包含本發(fā)明的聯(lián)合形式，以及指導(dǎo)同時、單獨或順序使用的說明書。
給藥劑量取決于多種因素，例如施用方式、物種、年齡和/或個體狀況。對于口服給藥，日給藥劑量為約0.25-10mg/kg，對于體重為約70kg的恒溫動物，日給藥劑量優(yōu)選為約20mg-500mg，尤其是40mg、80mg、160mg和320mg，所述量是按照游離酸計的。
通過下述實施例具體說明本發(fā)明，并且本發(fā)明還涉及在實施例中指定的新化合物及其應(yīng)用和制備方法。
下述實施例是為了舉例說明本發(fā)明，并不以任何方式限制本發(fā)明。
例如，形成了纈沙坦二鉀鹽，尤其是其水合物。二鉀鹽的特別之處在于其顯著的水溶性?？商貏e提及熔點為135.0℃的纈沙坦二鉀鹽四水合物結(jié)晶。依據(jù)元素分析，該水合物樣本的水分含量為3.72摩爾水/摩爾二鉀鹽。對于室溫下的高相對濕度，形成的是四水合物，對于低的相對濕度值，形成的是二鉀鹽的非水合物。
也制備了纈沙坦的鎂鹽，在該情況下其是具有3.4％H2O的非晶固體。作為0.85J·[g·℃]-1比熱階段的平均值的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為167℃。未觀察到熔點。玻璃化轉(zhuǎn)變和沒有熔點這兩個事實與測定的比熱變化值一起證實了纈沙坦鎂鹽幾乎100％是非晶形形式的。依據(jù)立體特異性色譜法，所測定的該非晶形鎂鹽的對映體純度為83％。
實施例1原位制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺的鈣鹽四水合物在室溫下將21.775g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺溶解在300ml乙醇中。通過小心地加入300ml水，將乙醇濃度降至50％體積。使用磁力攪拌器，將3.89gCa(OH)2分成小份緩慢地加到該澄清的弱酸性(pH4)溶液中，從而使pH值不會臨時超過約8。因為其從空氣中吸收了CO2，所用的Ca(OH)2含有微量CaCO3；所以其加入量過量5％。加入化學(xué)計算量的Ca(OH)2后，pH值約為6，加入過量后，其達(dá)到了7。由于少量細(xì)分散的CaCO3，該溶液變渾濁，經(jīng)由折紙漏斗將其除去。通過在室溫靜置使乙醇含量減少，從而使溶液中所含的產(chǎn)物連續(xù)地結(jié)晶?？赏ㄟ^在40℃的循環(huán)空氣干燥器中使用平皿來促進結(jié)晶過程。濃縮至約一半后，溶液中乙醇的含量降至約10％體積，并且結(jié)晶出了大部分產(chǎn)物。將其過濾，用10％體積的乙醇短時間洗滌，在40℃干燥直至達(dá)到恒重。獲得了(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鈣鹽四水合物。
在具有小的內(nèi)部體積的封閉樣本容器中，以10K·min-1的加熱速度，測得依據(jù)實施例1制得的纈沙坦鈣鹽四水合物的熔點為205℃，熔化焓為92kJ·Mol-1。通過氦比重瓶測定的依據(jù)實施例1制得的纈沙坦鈣鹽四水合物結(jié)晶的密度為1.297g·cm-3。該值與由單晶結(jié)構(gòu)計算的1.298g·cm-3的理論計算值相一致。以1％的溶液在甲醇中測定的實施例1的纈沙坦鈣鹽四水合物的旋光度為[a]20D＝+1°。通過立體特異性HPLC法測定依據(jù)實施例1制得的鹽水合物的對映體純度。立體特異性分離是通過手性柱(ChiralAGP)進行的。測定的對映體純度為ee＝100％。
該批纈沙坦鈣鹽四水合物，對于最重要的線，從用Guinier照相機拍攝的X-射線粉末圖案計算的晶格間平面間距如下d，[]16.27，9.90，9.39，8.04，7.71，7.05，6.49，6.34，6.2，5.87，5.75，5.66，5.20，5.05，4.95，4.73，4.55，4.33，4.15，4.12，3.95，3.91，3.87，3.35。
元素分析給出了存在于纈沙坦鈣鹽四水合物中的元素和水的下列測定值。在脫水后于130℃進行水分評估。在誤差限度內(nèi)的元素分析結(jié)果與總分子式(C24H27N5O3)2-Ca2+·4H2O相一致。
實施例2原位制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鎂鹽六水合物在室溫將43.55g纈沙坦[(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺]溶解在600ml 50％體積的乙醇(由無水乙醇-參見Merck和石英-雙蒸水制得)中。再加入50ml 50％乙醇后該輕度渾濁的溶液變澄清。使用磁力攪拌器，將4.03g或0.1M MgO(Merck p.a.)分成小份緩慢地加到pH值為4的該弱酸性溶液中。由此pH值升至約6。用過量10％的MgO進行該過程，即再加入0.40g MgO。過量的MgO沒有完全溶解，并且pH值升至約7.5。經(jīng)由折紙漏斗過濾出少量殘余物，并用50ml 50％乙醇洗滌。
在磁力攪拌器攪拌下，在大的結(jié)晶皿中將合并的澄清溶液于40℃小心地濃縮。在該操作結(jié)束時，該溶液趨于硬化成玻璃狀凝膠。用玻璃棒刮擦以在該相中誘導(dǎo)原位結(jié)晶，可通過形成了白色結(jié)晶狀固體來判斷。將該產(chǎn)物在循環(huán)空氣干燥器中于50℃干燥直至達(dá)到恒重。獲得了53.7g纈沙坦鎂鹽六水合物，按所用的纈沙坦游離酸計，其產(chǎn)率為95％。
在具有小的內(nèi)部體積的封閉樣本容器中，以10K·min-1的加熱速度，測得2.24mg依據(jù)實施例2制得的鹽水合物、即纈沙坦鎂鹽六水合物的熔點為132℃，熔化焓為64kJ·Mol-1。
通過氦比重瓶測定的依據(jù)實施例2制得的纈沙坦鎂鹽六水合物結(jié)晶的密度為1.273g·cm-3。該值與由單晶結(jié)構(gòu)計算的1.256g·cm-3的理論計算值相一致。以1％的溶液在甲醇中測定的依據(jù)實施例2制得的纈沙坦鎂鹽六水合物的旋光度為[a]20D＝-14°。通過立體特異性HPLC法測定依據(jù)實施例2制得的鹽水合物的對映體純度。立體特異性分離是通過手性柱(ChiralAGP)進行的。測定的對映體純度為ee＝99.6％。
該批纈沙坦鎂鹽六水合物，對于大部分重要線，從用Guinier照相機獲得的X-射線粉末圖案計算的晶格間平面間距如下d[]19.78，10.13，9.84，7.28，6.00，5.81，5.67，5.21，5.04，4.88，4.21，4.18，4.08，3.95，3.46，3.42。
元素分析給出了存在于纈沙坦鎂鹽六水合物中的元素和水的下列測定值。在脫水后于130℃進行水分評估。在誤差限度內(nèi)的元素分析結(jié)果與總分子式(C24H27N5O3)2-Mg2+·6H2O一致。
實施例3
制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鉀鹽的水合物(3.5±1.0摩爾H2O)在溫和加熱下將5g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊酰基-N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺溶解在11.5ml 2當(dāng)量濃度的氫氧化鉀溶液中，并與320ml乙腈混合。將該混合物加熱至回流5分鐘(渾濁溶液)，不用攪拌在室溫放置3天(加入晶種)，然后在0℃放置24小時。傾出母液。用乙腈將結(jié)晶洗滌2次，然后在空氣中干燥36小時直至達(dá)到恒重。獲得了(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鉀鹽水合物(3.7摩爾水/摩爾二鉀鹽)。在封閉的樣本容器中的熔點為135℃。
元素分析C24H27N5O3K2，3.72H2O，摩爾質(zhì)量578.72
X-射線衍射圖案是用衍射儀Scintag Inc.，Cupertino，CA 95014，US測定的，使用CuKα照射。
纈沙坦二鉀鹽水合物的反射線和最重要線的強度，其值以2θ(°)給出2θ(°) 強度4.6 強8.8 中等9.2 強11.1 弱
12.5 弱14.8 強15.3 弱16.4 中等17.8 強18.2 中等18.4 中等18.9 中等20.4 中等21.1 弱21.3 中等22.3 弱22.5 強23.1 中等23.9 強25.6 弱26.6 強26.9 中等28.1 中等包含中等和強峰的水合物是優(yōu)選的。
表11纈沙坦二鉀鹽水合物的晶體數(shù)據(jù)和參數(shù)晶體數(shù)據(jù)總分子式(C24H27N5O3)2-2K+.xH2O(x＝3.5±1.0)分子量 574.78
晶系 正交空間群P21212a() 38.555(2)b() 7.577(1)c() 10.064(1)V(3) 2940.0(5)Z 4F(000)1212D計算(g.cm-3)1.286晶胞參數(shù)的反射數(shù)目25細(xì)胞參數(shù)的θ范圍(°) 30-38μ(mm-1) 3.24溫度(℃) 23晶體形狀 棱晶晶體尺寸(mm) 0.63×0.20×0.14晶體顏色 無色數(shù)據(jù)收集衍射儀Enraf Nonius CAD4照射(石墨單色儀) CuKα波長() 1.54178掃描方式 ω/2θ掃描范圍(θ) 3-74吸收校正 無測定的反射數(shù)目3450觀察的反射數(shù)目(I＞2σ(I)) 2867h范圍 -48→0k范圍 -9→0
1范圍 -12→0標(biāo)準(zhǔn)反射數(shù)目 3/120分鐘強度差異 ±5％結(jié)構(gòu)精化精化方法 在F2上精化，滿矩陣法參數(shù)數(shù)目 341R 0.069Rw0.182S 1.57所用的參數(shù)數(shù)目2867H-原子的處理 “riding”，除了那些被忽略的水分子Δ/σmax0.24消光校正 0.0010(5)決定性差分-傅里葉計算中的最大/最小殘留電子密度 0.815/-0.676(e-3)絕對的結(jié)構(gòu)參數(shù)-0.02(4)所用的程序SHELXS86(Sheldrick，Gttingen)，XHELXL93(Sheldrick，Gttingen)，SCHAKAL92(Keller，F(xiàn)reiburg)實施例4制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鉀鹽將25g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺溶解在200ml乙醇中。加入50ml水，將該溶液冷卻至0°，然后與57.4ml 2當(dāng)量濃度的氫氧化鉀溶液混合。通過在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸發(fā)將該混合物濃縮，再分別與甲苯和乙腈一起蒸發(fā)，并在高度真空中于50℃干燥15分鐘。將產(chǎn)物溶解在290ml熱的乙腈/水(95∶5)混合物中，與另外的110ml乙腈混合，冷卻，并在約30℃加入晶種。將該混合物在室溫靜置4天然后抽濾。將殘余物用乙腈/水(95∶5)洗滌，然后在高度真空中于80℃干燥。獲得了(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鉀鹽，為白色粉末。熔點＞300℃。
元素分析所得到的物質(zhì)是吸濕性的，并且可在空氣中達(dá)到平衡(C24H27N5O3K2，3.96摩爾H2O)。
實施例5制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鈉鹽將1g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺溶解在50ml乙醇中，與2.3ml 2當(dāng)量濃度的氫氧化鈉溶液混合并通過蒸發(fā)濃縮，將殘余物分別與乙醇和乙酸乙酯一起蒸發(fā)。將白色殘余物在熱的乙腈中攪拌，然后在室溫下抽濾。在高度真空中于80℃干燥過夜得到(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊酰基-N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺二鈉鹽，為白色粉末。熔點從260℃開始，在295℃變?yōu)樽厣?br> 元素分析所得到的物質(zhì)(吸濕性的)可在空氣中達(dá)到平衡(C24H27N5O3Na2，5.36摩爾H2O，摩爾質(zhì)量576.05)
實施例6制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鎂鹽將5g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺加到0.666g氫氧化鎂在20ml水中的懸浮液中。加入40ml甲醇，然后將該混合物在室溫攪拌2小時并濃縮。將殘余物溶解在甲醇中，經(jīng)由硬的過濾器過濾，濃縮并與乙腈一起蒸發(fā)。將產(chǎn)物與熱的乙腈一起攪拌，在室溫下抽濾，并在高度真空中于90℃干燥過夜。獲得了(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鎂鹽，為白色粉末。熔點樣本在加熱時變?yōu)樽厣⒃诮咏?00℃時發(fā)生玻璃化。
元素分析C24H27N5O3Mg，0.89摩爾H2O，摩爾質(zhì)量473.85
實施例7制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊酰基-N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺鈣鹽將5g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺加到0.851g氫氧化鈣在20ml水中的懸浮液中，然后與200ml乙醇混合。將該混合物在室溫攪拌1小時，通過蒸發(fā)至干進行濃縮(和乙腈一起再次蒸發(fā))，在熱的乙腈中(含有微量乙醇和水)攪拌，并在室溫抽濾。
將0.95g鹽在20ml乙腈/水(1∶1)中加熱至回流，由此該混合物幾乎完全溶解。然后將該混合物冷卻至室溫，與20ml乙腈混合，抽濾，用乙腈/水(1∶1)洗滌兩次，并在高度真空中于80℃干燥過夜。熔點從300℃開始(分解)。
元素分析C24H27N5O3Ca，1.71摩爾H2O，摩爾質(zhì)量504.39(于150℃脫水后進行水分評估)。
實施例8制備(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺一鉀鹽將2g(S)-N-(1-羧基-2-甲基-丙-1-基)-N-戊?；?N-[2’-(1H-四唑-5-基)-聯(lián)苯-4-基甲基]-胺懸浮在20ml水中，并與2.296ml 2當(dāng)量濃度的氫氧化鉀溶液混合。將該混合物攪拌30分鐘并與50ml乙醇混合，由此獲得了無色溶液。通過蒸發(fā)將該混合物濃縮，再與乙腈一起蒸發(fā)一次，然后從叔丁醇(含有微量的水)中冷凍干燥。
元素分析(在空氣中平衡后)。C24H27N5O3Ca，1.69摩爾H2O，摩爾質(zhì)量504.06(在150℃脫水后進行水分評估)。
實施例9通過水平衡法制備纈沙坦鎂鹽六水合物將1600g纈沙坦與6820g異丙醇在混合容器中于室溫攪拌以形成懸浮液，然后加到帶有攪拌器的80升玻璃容器中。用3919g異丙醇分批沖洗該混合容器，并將該洗滌溶液加到主混合物中。加入3800g去離子水，然后通過攪拌將該混合物轉(zhuǎn)化成均勻溶液。然后加入懸浮在1520g去離子水中的156.3g氧化鎂，并給該懸浮液補充1000g去離子水。通過在室溫緩慢地攪拌讓氧化鎂溶解在溶液中。所得溶液的pH值為約7.2。通過以少量多次的方式補加2.5g氧化鎂，將pH值升至8.3。由于氧化鎂中未知類型的不溶顆粒，所得混合物是渾濁的。
經(jīng)由燭式濾器將該混合物轉(zhuǎn)移到35升搪瓷煮沸器中，并用885g異丙醇和1122g去離子水沖洗玻璃容器和轉(zhuǎn)移管。為了溫和地濃縮，在煮沸器中產(chǎn)生初始理論值為89-100毫巴的真空。以45-50℃的加熱介質(zhì)溫度和37-40℃的混合物沸騰溫度蒸餾出總共13.66kg含水異丙醇。通過將蒸餾壓力降至10毫巴的終值，同時將加熱介質(zhì)溫度升至65℃，使餾出液的量增至總共17.12kg。在攪拌下向煮沸器內(nèi)容物中加入9300g乙酸乙酯，然后加入14.9g纈沙坦鎂鹽六水合物作為晶種。最后再加入6680g乙酸乙酯，并在攪拌下冷卻至室溫。攪拌操作持續(xù)至少24小時。然后經(jīng)由布氏漏斗過濾該懸浮液。由此獲得了潮濕的濾餅。用1171g乙酸乙酯沖洗煮沸器，并用該洗滌混合物洗滌濾餅。將其中一部分在金屬薄片上在50毫巴壓力的真空干燥室中于40℃的烘箱溫度下干燥6.5小時直至達(dá)到恒重，獲得了干燥的物質(zhì)。
物理數(shù)據(jù)、尤其是X-射線粉末圖案與實施例2的鎂鹽六水合物一致。
實施例10制備纈沙坦鈣鹽四水合物將1600g纈沙坦和7000g乙醇在混合容器中于室溫攪拌以形成懸浮液，然后加到帶有攪拌器的35升搪瓷煮沸器中。用2000g乙醇分批沖洗該混合容器，并將該洗滌溶液加到主混合物中。加入9000g去離子水，然后通過攪拌將該混合物轉(zhuǎn)化成均勻溶液。然后加入懸浮在1500g去離子水中的272g氫氧化鈣，并給該懸浮液補充1300g去離子水。通過在室溫緩慢地攪拌讓氫氧化鈣溶解在溶液中。所得溶液的pH值為約6.9。通過補加9.6g氫氧化鈣，將pH值升至約10.6。由于氫氧化鈣中的不溶顆粒(碳酸鈣)，所得混合物是渾濁的。經(jīng)由燭式濾器將該混合物轉(zhuǎn)移到35升搪瓷煮沸器中，并用1048g乙醇和1000g去離子水的溶液沖洗玻璃容器和轉(zhuǎn)移管。為了溫和地濃縮，在煮沸器中產(chǎn)生理論值為100-120毫巴的真空。以約50℃的加熱介質(zhì)溫度和最高44℃的混合物煮沸溫度蒸餾出總共11.32kg含水乙醇。在蒸餾過程中，溶解的鹽自發(fā)結(jié)晶。在攪拌下將蒸餾結(jié)束時的懸浮液冷卻至約5℃，并在5℃攪拌約16小時。然后經(jīng)由布氏漏斗過濾該懸浮液。用3600ml去離子水與400ml乙醇的混合物沖洗煮沸器，將該混合物冷卻至5℃，然后用該洗滌混合物洗滌濾餅。由此獲得了潮濕的濾餅。將其中一部分在金屬薄片上在50毫巴壓力的真空干燥室中于40℃的烘箱溫度下干燥24小時直至達(dá)到恒重，獲得了干燥的物質(zhì)。
物理數(shù)據(jù)、尤其是X-射線粉末圖案與實施例1的鈣鹽四水合物一致。
實施例11纈沙坦二鈉鹽水合物(2.4±1.0摩爾H2O)在約25℃將50ml 2N氫氧化鈉溶液滴加到21.5g纈沙坦在200ml異丙醇中的溶液中。將該澄清溶液(pH約7.2)在約40℃真空濃縮。將非晶形二鈉鹽殘余物懸浮在100ml異丙醇中，通過在約40℃真空濃縮和脫氣除去水。在約40℃將非晶形殘余物懸浮在75ml丙酮和2ml水中。在約25-30℃，加入200ml叔丁基甲基醚，從而使開始時油膩的組分逐漸轉(zhuǎn)化成結(jié)晶懸浮液。在約25℃攪拌過夜后，將該懸浮液冷卻至10℃并在約1小時后進行抽濾，同時排出空氣中的水分。然后用20ml叔丁基甲基醚洗滌。將潮濕的濾餅在約30毫巴和30℃下干燥過夜。獲得了無色、輕度吸濕性的結(jié)晶粉末。
元素分析C24H27N5O3Na2，2.44摩爾H2O
該纈沙坦二鈉鹽水合物結(jié)晶的X-射線衍射圖案(反射線和最重要線的強度)是用衍射儀Scintag Inc.Cupertino，CA 95014，US測定的，其中使用CuKα照射
實施例12纈沙坦二鉀鹽水合物(3.4±1.0摩爾H2O)在約25℃將6.9g碳酸鉀加到21.7g纈沙坦在150ml丙酮和20ml水中的溶液中。在約25℃攪拌2小時后，獲得了幾乎澄清的溶液，將其在約50℃浴溫下真空濃縮。將55ml丙酮加到含有殘余水的殘余物(29.3g)中，在約35℃用約2小時的時間加入總共250ml叔丁基甲基醚。在約25℃攪拌后，將該易于攪拌的結(jié)晶懸浮液冷卻至10℃，攪拌至少1小時，抽濾并用20ml叔丁基甲基醚洗滌。將潮濕的濾餅在約30毫巴和30℃下干燥過夜。獲得了無色、輕度吸濕性的結(jié)晶粉末。
元素分析C24H27N5O3K2，3.42摩爾H2O
X-射線衍射圖案是用衍射儀Scintag Inc.Cupertino，CA 95014，US測定的，其中使用CuKα照射。
該纈沙坦二鉀鹽水合物的反射線和最重要線的強度，值以2θ(°)給出2θ(°) 強度4.9 強9.4 強11.4弱12.8弱14.0弱15.0弱15.6弱16.6中等18.0弱18.5弱18.9弱
20.7 弱21.5 弱22.0 弱22.7 中等23.3 弱24.1 中等25.6 弱25.8 弱27.1 中等29.4 弱包含中等和強峰的水合物是優(yōu)選的。
實施例13纈沙坦鈣/鎂混合鹽將在200ml異丙醇和100ml水中的21.5g纈沙坦與1.5g氫氧化鎂和1.9g氫氧化鈣一起在約25℃攪拌約3小時。將該幾乎澄清的溶液在約50℃真空濃縮。在攪拌下向含有殘余水的仍然溫?zé)岬陌牍腆w殘余物中加入總共240ml乙酸乙酯。在約25℃攪拌過夜后，開始時為粘性的組分轉(zhuǎn)化成均勻懸浮液。將該懸浮液抽濾，用20ml乙酸乙酯洗滌。將潮濕的濾餅在30-40℃下真空干燥。獲得了無色結(jié)晶粉末。
X-射線衍射圖案與實施例1和2的鈣鹽四水合物和鎂鹽六水合物的聚集物一致。
實施例14纈沙坦雙二乙基銨鹽在約25℃將1.5g二乙胺滴加到4.35g纈沙坦在60ml丙酮中的溶液中。短時間后，開始緩慢地結(jié)晶。攪拌過夜后，在約20℃抽濾出結(jié)晶，用冷的丙酮洗滌，并在約50℃真空干燥。獲得了無色結(jié)晶粉末。
元素分析C32H51N7O3，0.1摩爾H2O
該雙二乙基銨鹽的X-射線衍射圖案(反射線和最重要線的強度)
實施例15纈沙坦雙二丙基銨鹽在25℃將2.1g二丙基胺滴加到4.35g纈沙坦在60ml丙酮中的溶液中。當(dāng)開始結(jié)晶時，將溫度短時間地升至40℃，然后用約2小時降至室溫。攪拌過夜后，抽濾出結(jié)晶，用15ml丙酮洗滌2次，并在約40℃真空干燥。獲得了粒狀結(jié)晶。
元素分析C36H69N7O3，0.05摩爾H2O
該雙二丙基銨鹽的X-射線衍射圖案(反射線和最重要線的強度)
實施例16纈沙坦雙二丁基銨鹽
將2.15g纈沙坦在30ml丙酮中的溶液與1.4g二丁基胺于約25℃混合。短時間后開始結(jié)晶，在約1小時時間內(nèi)，用20ml乙酸異丙酯將該稠的懸浮液逐漸稀釋。在約25℃攪拌4小時后，通過抽濾收集結(jié)晶，用10ml乙酸異丙酯洗滌2次，然后在50℃真空干燥。獲得了無色、輕度吸濕性的結(jié)晶粉末。
元素分析C40H67N7O3，0.5摩爾H2O
該雙二丁基銨鹽的X-射線衍射圖案(反射線和最重要線的強度)
制劑實施例1直接壓縮的片劑
將組分1經(jīng)由0.5mm篩網(wǎng)過篩，然后將組分1-6在Turbula中混合15分鐘。使用具有直徑8mm沖頭的單沖壓片機將其壓制成片。
制劑實施例2通過輥壓制得的片劑
將組分1-5混合50分鐘，并在Freund錕壓機上壓縮。將所得帶狀物磨碎，與組分6混合后，用具有直徑8mm沖頭的單沖壓片機將其壓制成片。
權(quán)利要求
1.水合物形式的選自下列的纈沙坦鹽一鈉鹽、一鉀鹽、二鈉鹽、二鉀鹽、鎂鹽、雙二乙基銨鹽、雙二丙基銨鹽、雙二丁基銨鹽、一-L-精氨酸鹽、二-L-精氨酸鹽、一-L-賴氨酸鹽和二-L-賴氨酸鹽，以及鹽的混合物。
2.權(quán)利要求1所述的水合物形式的纈沙坦鹽，為結(jié)晶、部分結(jié)晶或非晶形形式。
3.權(quán)利要求1所述的水合物形式的纈沙坦鹽，為鎂鹽。
4.權(quán)利要求1所述的水合物形式的纈沙坦鎂鹽，為六水合物。
5.權(quán)利要求4所述的六水合物形式的纈沙坦鎂鹽，其特征在于(i)用Guinier照相機拍攝的包含下列晶格間平面間距的X-射線粉末圖案d[]19.7±0.3，10.11±0.2，9.8±0.2，7.28±0.1，5.81±0.05，5.68±0.05，5.03±0.05，4.88±0.05，4.18±0.05，4.08±0.05，3.46±0.05；或(ii)具有以倒數(shù)波數(shù)(cm-1)表示的下列吸收譜帶的ATR-IR光譜3378(m)；3274(m)；2956(m)；1619(st)；1557(m)；1464(m)；1419(m)；1394(st)；1374(m)；1175(m)；836(m)；820(s)；766(st)；751(m)；741(st)；732(st)。
6.呈選自下列的形式的權(quán)利要求1-5中任一項所述的水合物形式的鹽(i)結(jié)晶形式；(ii)部分結(jié)晶形式；(iii)非晶形形式；和(iv)多晶形式。
7.藥物制劑，該藥物制劑含有權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物和可藥用賦形劑或添加劑。
8.權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其中還含有至少一種選自下列的組分(i)HMG-Co-A還原酶抑制劑或其可藥用鹽，(ii)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑或其可藥用鹽，(iii)鈣通道阻斷劑或其可藥用鹽，(iv)醛固酮合酶抑制劑或其可藥用鹽，(v)醛固酮拮抗劑或其可藥用鹽，(vi)雙重血管緊張素轉(zhuǎn)化酶/中性內(nèi)肽酶(ACE/NEP)抑制劑或其可藥用鹽，(vii)內(nèi)皮肽拮抗劑或其可藥用鹽，(viii)腎素抑制劑或其可藥用鹽，和(ix)利尿劑或其可藥用鹽。
9.權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物在制備用于預(yù)防或治療可通過阻斷AT1受體來抑制的疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用。
10.制備權(quán)利要求1所述的水合物形式的鹽的方法，其特征在于(i)將纈沙坦與合適的堿加到含水有機溶劑中，(ii)將溶劑濃縮，如果需要的話在減壓下加熱，或通過在緩慢地蒸發(fā)來濃縮，(iii)通過下述方式使蒸發(fā)殘余物與所需量的水平衡(a)將最好是仍然溫?zé)岵⑶胰匀缓幸恍┧恼舭l(fā)殘余物懸浮在合適的溶劑中，或(b)平衡溶劑中過量的水分；這樣在a)和b)中，存在或加入的水以可溶解在有機溶劑中并且不形成另外的相的量存在；和(iv)分離出所獲得的水合物形式的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的纈沙坦鹽或結(jié)晶、部分結(jié)晶和非晶形形式的纈沙坦鹽，其制備和應(yīng)用，以及含有這樣的鹽的藥物制劑。
文檔編號A61P9/08GK1680341SQ20051000770
公開日2005年10月12日 申請日期2001年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月19日
發(fā)明者E·馬蒂, H·R·奧斯瓦爾德, P·比爾邁爾, W·馬爾特雷爾 申請人:諾瓦提斯公司