專利名稱：治療腫瘤的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療腫瘤的中藥制劑及其制備方法，屬于藥品技術(shù)的領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人類發(fā)現(xiàn)腫瘤已有3000年以上歷史。上皮性的惡性腫瘤稱為癌，約占所有惡性腫瘤的90％以上。癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的一大類疾病，并且患者在不斷上升，20世紀(jì)以來，由于自然科學(xué)的發(fā)展、基礎(chǔ)理論研究與新技術(shù)的應(yīng)用，腫瘤學(xué)研究有了長足的進步。盡管惡性腫瘤已成為人類致死的第1或第2位原因，但腫瘤學(xué)的進展已使腫瘤患者的1/3有根治希望。其中本申請人于2003年1月3日向中國專利局提交了申請?zhí)枮?3117114.1；名稱為治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法的發(fā)明專利。該制劑由斑蝥、人參、黃芪和刺五加組成。經(jīng)過大量的臨床試驗結(jié)果表明，該制劑是目前國內(nèi)治療原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴癌、婦科惡性腫瘤等疾病的較好藥物之一。盡管該制劑療效較佳，但在臨床運用中仍然會產(chǎn)生各種不良反應(yīng)；為此本發(fā)明人進行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)方中斑蝥有效成分的精制提取方法具有不確定性、容易引起不良反應(yīng)；由于斑蝥以蟲體入藥，斑蝥體內(nèi)除含有主要有效成分斑蝥素外，還含有脂肪、蠟質(zhì)、蟻酸和色素等物質(zhì)，其中斑蝥素的提取重現(xiàn)性差，不同時間、不同地點的提取率差別較大，從而導(dǎo)致在斑蝥提取的生產(chǎn)過程中，斑蝥提取物中各物質(zhì)的含量差別較大；本發(fā)明人經(jīng)過實驗發(fā)現(xiàn)如果將處方中的斑蝥換成去甲斑蝥素，將有效減少該產(chǎn)品的不良反應(yīng)。這是因為去甲斑蝥素性能穩(wěn)定，且與斑蝥比較，藥效相當(dāng)，但毒性較小的緣故。但是，本發(fā)明人又發(fā)現(xiàn)當(dāng)去甲斑蝥素的用量較大時，仍然具有較大的毒副作用，所以使用去甲斑蝥素的量需要進行深入的實驗研究；做到科學(xué)、合理；另外本發(fā)明人經(jīng)過大量的實驗、研究發(fā)現(xiàn)如果我們將該制劑制成緩釋制劑后，可以更有效的解決以上問題。因為腫瘤疾病療程長，需要長期大量給藥方能達到較好的治療效果，故而在長期大量給藥的過程中也增加了斑蝥對機體產(chǎn)生的毒性；而將該制劑制成緩釋制劑后，相對減少了患者給藥的次數(shù)，避免了普通制劑頻繁給藥所出現(xiàn)的“蜂谷”現(xiàn)象，提高了藥物的利用率和患者用藥的依從性，從而達到了提高藥物療效、降低藥物不良反應(yīng)的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供治療腫瘤的中藥制劑及其制備方法，這種中藥制劑由人參、黃芪、刺五加和去甲斑蝥素科學(xué)的組合而成，這種中藥制劑包括注射制劑和口服制劑，注射制劑可以是凍干粉針、注射液、大容量注射液，口服制劑可以是口服液體制劑、膠囊、片劑、丸劑等劑型；本發(fā)明公開的制備方法能夠科學(xué)合理的指導(dǎo)生產(chǎn)，解決從藥物到具體制劑劑型中遇到的技術(shù)難題；本發(fā)明還提供了凍干粉針的工藝參數(shù)的控制方法，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和有效性。
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，采用乙醇提取法提取人參，這是因為人參中人參皂甙是主要活性成分，而在常規(guī)的人參提取方法中，乙醇回流提取法提取人參總皂苷的含量最高；另外根據(jù)黃芪、刺五加中有效成分易溶于水的性質(zhì)，采用水煎煮法煎煮；本發(fā)明制劑的精制先用石流法沉淀，再用乙醇沉淀，這樣可除去藥液中鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、極性色素、酸性樹脂、酸性皂甙或大部分糖類等雜質(zhì)，提高藥液有效成分的含量，確保藥物制劑的療效；另外將本發(fā)明制成緩釋制劑，可達到減輕毒副作用、提高藥物療效的目的，特別是選用最終制劑量5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物作為本制劑包括注射制劑的緩釋材料時，其減毒增效的治療效果最佳。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的治療腫瘤的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計算由人參5-525、黃芪6-1050、刺五加9-1575和去甲斑蝥素0.1-50制成。
具體的說按照重量組份計算由人參20-100、黃芪40-200、刺五加50-300和去甲斑蝥素0.2-5與緩釋材料制成。
準(zhǔn)確的說按照重量計算由人參50、黃芪100、刺五加150和去甲斑蝥素1.0及緩釋材料5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物制成注射制劑，包括凍干粉針制劑、粉針制劑、注射液體制劑、大容量注射制劑和口服制劑包括口服液體制劑、膠囊、片劑或丸劑。
所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法取人參切片，用乙醇加熱回流提取，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇后用石硫法沉淀處理，上清液加熱濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材與人參藥渣合并，用水煎煮、濃縮后用石硫法沉淀處理，濾過，上清液與人參提取液合并，加入乙醇醇沉，靜置，濾過，回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取物，取去甲斑蝥素與提取物混合均勻，再加入不同的輔料，用不同的常規(guī)方法制成不同的產(chǎn)品。
具體的制備方法取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用；黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取物，取去甲斑蝥素與提取物混合均勻，再加入不同的輔料，用不同的方法可制成不同的產(chǎn)品，可同時加入5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物，這樣就能夠獲得緩釋制劑。
具體的方法取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用；黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取去甲斑蝥素、7-10％海藻糖或乳糖與提取液混合均勻，用注射用水稀釋至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為3-7，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得成品凍干粉針劑；本發(fā)明中，還可同時加入緩釋材料、助溶劑和增溶劑，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆；助溶劑為7-10％甘露醇-右旋糖苷，所加增溶劑為10-30％的乙醇∶甘油＝4∶6的復(fù)合溶劑，這樣可以制備緩釋制劑；所述凍干工藝為將灌裝好的西林瓶半壓塞后送入凍干機，緩慢冷凍至-15℃以下，抽真空至5-35Pa，控制加熱升溫速度不超過4℃/h進行升華，升華10-30個小時后，設(shè)定擱板溫度為20-40℃進行第二次干燥，當(dāng)制品溫度和擱板溫度接近時，恒定溫度干燥0.5-6小時后全壓塞。
本發(fā)明制成凍干粉針時1、凍干過程是本發(fā)明制成凍干制品的最大難點，凍干工藝直接影響到凍干制品的質(zhì)量。凍干主要分為預(yù)凍結(jié)、升華干燥、解析干燥三部分。
①本發(fā)明預(yù)凍結(jié)時采用慢凍法。因為在實驗中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明采用速凍法，即每分鐘5℃以上時，其升華所需時間較少，但產(chǎn)品開裂嚴(yán)重，成型差；如采用慢凍法，控制降溫速度每分鐘5℃以下時，制品外觀成型良好，所以本發(fā)明預(yù)凍結(jié)時采用慢凍法。
②預(yù)凍結(jié)時應(yīng)冷凍至-15℃以下，因為預(yù)凍結(jié)溫度為-15℃以下時，溶液中的自由水才會全部固化。
③抽真空時的真空度為5-35Pa。如果真空度在5pa以下時，傳熱效果較差，產(chǎn)品不易獲熱量，升華時間則延長，且升華時制品成型情況一般；如果真空度在35pa以上時，制品吸收熱量后不能及時升華除去水分導(dǎo)致產(chǎn)品回溶，制品成型不好；在5-35Pa之間時，產(chǎn)品成型完好，無回溶和萎縮現(xiàn)象產(chǎn)生，且所需時間較短。所以升華時控制真空度在5pa～35pa之間為宜。
④升華干燥時，升溫速度不超過4℃/h，因為如果升華溫度超過4℃/h，則制品會有溶化現(xiàn)象，所以升溫速度應(yīng)不超過4℃/h為宜。
⑤如果升華時間小于10小時，則制品中的結(jié)合水不能除去，達不到干燥的目的。如果升華時間高于30小時，干燥時間過長，制品易溶化。所以升華時間為10-30個小時，即能除去制品中的結(jié)合水，又能保證制品不溶化。
⑥解析干燥溫度為20-40℃、干燥0.5-6小時，方能除去制品中的剩余水分，達到改善產(chǎn)品的貯存穩(wěn)定性，延長其保存期的目的。
治療腫瘤的中藥制劑的制備方法取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取提取液、去甲斑蝥素溶解于注射用水后混合，加入注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為3-77，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，攪拌使混合均勻，灌封、滅菌即得注射液；本發(fā)明中加入緩釋材料、助溶劑和增溶劑，這樣可以制備得到緩釋注射制劑；所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆；助溶劑為7-10％的甘露醇-右旋糖苷，所加增溶劑為10-30％的乙醇∶甘油＝4∶6的復(fù)合溶劑。
取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取提取液、去甲斑蝥素分別溶解于注射用水后，趁熱加入0.20％-0.50％ 767型針用活性炭過濾，濾液加入最終藥液量0.8-2.5％的氯化鈉混合，同時加入注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)PH2-8，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，攪拌使混合均勻，分裝、滅菌即得大容量注射制劑；本發(fā)明中，加入緩釋材料，所加緩釋材為5-30％泊洛沙姆，這樣可以制備得到緩釋制劑。
按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用。將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，加入沸水煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，以石硫法沉淀處理，上清液加入適量乙醇使含醇量達50-90％，靜置5～100小時后，濃縮回收乙醇；將去甲斑蝥素與藥液混合均勻，另取適量蔗糖加入煮沸的水中使溶解均勻，過濾，制成單糖漿，將適量單糖漿加入上述藥物濾液中使最終含糖量5-60％，加純化水至1000ml，灌裝，即得口服液體制劑；本發(fā)明中，加入緩釋材料，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物。
按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用，將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，沸水中煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，加入適量乙醇使含醇量達50-90％，靜置5～100小時后，回收乙醇并濃縮成浸膏，再加入去甲斑蝥素混合均勻，即得膠囊劑，本發(fā)明中，還可加入緩釋材料，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物。
本發(fā)明制劑中，以上組成中每份代表的是重量份.重量是以生藥計算的，若以ml為單位，以上組成可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑指，制成的成品藥物制劑，如制成注射液1000ml，大容量注射制劑1000ml，口服液1000ml等，作為凍干粉針可以制成100-1000支。
以上組成若以ml為單位，可制成50-1000次服用劑量的制劑，可每日1-4次，每次1-25劑，如1-25支、瓶/袋，在使用時根據(jù)病人的情況確定用法用量，以上重量配比的比例是經(jīng)過科學(xué)篩選得到的，對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的量的配比，增加或減少不超過100％，藥效不變。
凍干劑人參總皂甙含量每支應(yīng)不少于2.0mg，允許誤差應(yīng)≤3％；去甲斑蝥素含量每支為0.008～0.030mg，允許誤差應(yīng)≤3％。
與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明提供的能治療原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴癌、婦科惡性腫瘤等疾病，本發(fā)明將其制成緩釋制劑，減少了患者給藥的次數(shù)，避免了普通制劑頻繁給藥所出現(xiàn)的“蜂谷”現(xiàn)象，提高了藥物的利用率和患者用藥的依從性，從而達到了提高藥物療效、降低藥物不良反應(yīng)的目的，本發(fā)明提供的制備方法能夠科學(xué)合理的指導(dǎo)生產(chǎn)，解決從藥物到具體制劑劑型中遇到的技術(shù)難題；本發(fā)明還特別提供了凍干粉針的工藝參數(shù)的控制方法，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和有效性，本發(fā)明達到了發(fā)明的目的。
為完成本發(fā)明，我們進行了一系列的實驗、研究實驗1本發(fā)明制成注射制劑時，對助溶劑的選擇在注射制劑配液過程中，我們發(fā)現(xiàn)，所有的中藥提取工藝中，在保證藥液澄明度方面存在一定難度，并有極少量藥物有效成分析出，本發(fā)明也不例外，對此考慮加入助溶劑。本發(fā)明對溶劑的選擇實驗結(jié)果為

由以上實驗可知，選擇甘露醇-右旋糖苷混合使用，澄明度特別容易控制，而且凍干后復(fù)溶性好，我們還發(fā)現(xiàn)，如果把甘露醇-右旋糖苷的用量范圍控制在7-10％，就會起到更好的效果。
實驗2本發(fā)明制成注射制劑時，對加入增溶劑的選擇去甲斑蝥素雖然是藥物的有效成分，但其具有一定脂溶性，在水中溶解性不是很好。為了達到各組分藥物最佳的綜合作用。我們考慮加入增溶劑。就不同輔料以及同一輔料不同用量進行了篩選，結(jié)果如下


根據(jù)以上實驗結(jié)果可知，以甘油為溶劑的人參皂甙含量最高，其次以乙醇-甘油＝4∶6為復(fù)合溶劑的人參皂甙含量為高。另外以乙醇-甘油＝4∶6為復(fù)合溶劑的去甲斑蝥素含量最高。綜合考慮，本發(fā)明選用10-30％(乙醇-甘油＝4∶6)復(fù)合溶劑為增溶劑。
實驗3對凍干制劑骨架劑的選擇由于本發(fā)明中藥液冷凍干燥后，制品的外觀及穩(wěn)定性較差，故在藥液中加入骨架劑，但是并非所有的骨架劑都能改善凍干制品的各項外觀指標(biāo)，如何選擇骨架劑及其用量，這是凍干技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)公知的一大難度。比如甘露醇用量的多少對穩(wěn)定性影響就很大，經(jīng)過大量篩選，我們在實驗中發(fā)現(xiàn)，對絕大多數(shù)骨架劑來說，其用量選擇在7-10％范圍內(nèi)時，凍干效果相對較好，所以本發(fā)明在眾多輔料中只確定了八種骨架劑。隨后的實驗進一步表明，在此范圍內(nèi)，當(dāng)同樣使用的8.5％八種骨架劑時，使用海藻糖或乳糖收到了意想不到的效果。其中乳糖克服該輔料在選用其他用量時就影響穩(wěn)定性的缺陷；而海藻糖則更好地解決了成型問題。所以，在本發(fā)明中，選用7-10％海藻糖或乳糖作為凍干骨架劑。對骨架劑的實驗選擇結(jié)果為


實驗4本發(fā)明制成大容量注射制劑時對滲透壓調(diào)節(jié)劑的篩選實驗結(jié)果為在制備裝量50ml以上的中藥輸液

根據(jù)以上實驗結(jié)果，選用氯化鈉作為滲透壓調(diào)節(jié)劑時，藥液澄明度最好，且PH值比較適中，故本發(fā)明選用氯化鈉作為滲透壓調(diào)節(jié)劑。以下是對氯化鈉用量的選擇。

當(dāng)氯化鈉作為滲透壓調(diào)節(jié)劑時，常規(guī)用量為0.45％-2.7％，本發(fā)明中用量為0.8-2.5％時，藥液質(zhì)量比較穩(wěn)定，故本發(fā)明中選用0.8-2.5％的氯化鈉作為滲透壓調(diào)節(jié)劑。
實驗5本發(fā)明制成大容量注射制劑時后，根據(jù)澄明度好壞進行活性炭的選擇試驗

實驗6本發(fā)明注射液藥效學(xué)實驗研究一、抗腫瘤作用實驗1、實驗材料藥物A按照本發(fā)明所述方法制備；B按照本申請人申請的03117114.1號專利申請、“治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法的發(fā)明專利”所述方法制備。瘤株小鼠肉瘤S180、H22。動物昆明種小鼠，18-24g。
2、方法與結(jié)果對動物移植性腫瘤的抑制作用①對小鼠S180的抑制作用取傳代接種7～10d的瘤源動物，無菌條件下抽取腹水瘤液，每鼠右腋皮下接種1×106瘤細胞，24h后隨機分組并開始給藥，每天腹腔注射1次，連續(xù)9～11d。對照組腹腔注射滅菌生理鹽水。停藥次日處死小鼠，稱體重并剝離皮下瘤塊，稱瘤重，計算抑瘤率。重復(fù)3批實驗，每批實驗采用同種性別動物，結(jié)果見下表?？梢娝幬顰有明顯抑制S180生長作用，并呈良好量效關(guān)系，實驗重復(fù)3批，結(jié)果相似。②對小鼠H22的抑制作用方法同上，每鼠接種1×106H22細胞，重復(fù)3批實驗，結(jié)果見下表。6g/kg藥物A抑瘤率＜30％，9、12g/kg對H22有明顯抑制作用。
對小鼠S180的抑制作用


與生理鹽水組比較**P＜0.01；***P＜0.001對小鼠H22的抑制作用

與生理鹽水組比較*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.0013、結(jié)論根據(jù)以上實驗結(jié)果，可見藥物A與藥物B比較，藥物A對S180和H22的抑制生長作用比藥物B強。
二、本發(fā)明注射液對淋巴細胞亞群的影響。
1、實驗材料藥物A按照本發(fā)明所述方法制備；B按照本申請人申請的03117114.1號專利申請、“治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法的發(fā)明專利”所述方法制備。瘤株大腸癌細胞(L0V0株)。動物4～5周齡SD大鼠40只，體重112.7±15.7g，雌雄兼用。
2方法與結(jié)果SD大鼠腹腔常規(guī)接種大腸癌L0V0細胞懸液0.2ml約1×106瘤細胞，一周后隨機分為4組，每組10只，靜脈給藥，每天一次，連續(xù)一周。停藥后次日采外周血并處死大鼠，取10ul腹水加生理鹽水1.99ml稀釋，計數(shù)并計算每升腹水中所含腫瘤細胞數(shù)及每高倍視野核分裂數(shù)，并求出腫瘤細胞生長抑制率及每高倍視野核分裂抑制率，用流式細胞儀測定外周血中CD3+、CD4+、CD8+，計算CD4+/CD8+比值。結(jié)果T淋巴細胞亞群測定結(jié)果由下表可見，藥物A高、中、低劑量組T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于生理鹽水組，CD8+均低于生理鹽水組，兩者比較差異有極顯著性P＜0.01。
細胞生長抑制率％＝(1-實驗組平均瘤細胞數(shù)/對照組品均瘤細胞數(shù))×100％核分裂抑制率％＝(1-實驗組平均核分裂數(shù)/對照組平均核分裂數(shù))×100％對T淋巴細胞亞群的影響x±s

注各劑量組與生理鹽水組比較，P＜0.05或P＜0.013、結(jié)論T淋巴細胞浸潤程度直接反映機體抗腫瘤的狀態(tài)。根據(jù)以上實驗結(jié)果顯示，藥物A增強機體免疫功能的作用比藥物B強。
實驗7本發(fā)明注射液毒理實驗研究1、實驗材料藥物A按照本發(fā)明所述方法制備；B按照本申請人申請的03117114.1號專利申請、“治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法的發(fā)明專利”所述方法制備。昆明種小鼠。
2、方法肝臟注射對小鼠的急性毒性昆明小鼠60只，體重20±2g，隨機分為3組，每組20只，♀♂各半。以60mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，按無菌操作打開小鼠腹腔，暴露肝葉，2組小鼠分別肝內(nèi)注射藥物A、藥物B、生理鹽水溶液0.10ml/只，縫合。術(shù)后觀察動物的一般行為活動，食量、糞便及中毒死亡情況，觀察期為14d。死亡小鼠及時尸解并對部分臟器進行病理切片。
3、結(jié)果生理鹽水組手術(shù)后大部分動物逐漸蘇醒并緩慢恢復(fù)正常，少部分小鼠皮毛蓬亂，出現(xiàn)萎靡少動等毒性反應(yīng)，20只小鼠7d內(nèi)死亡4只。藥物B組給藥后7d內(nèi)多數(shù)小鼠皮毛蓬亂，出現(xiàn)萎靡少動等毒性反應(yīng)，20只小鼠7d內(nèi)死亡12只；藥物A組少部分小鼠皮毛蓬亂，出現(xiàn)萎靡少動等毒性反應(yīng)，20只小鼠7d內(nèi)死亡8只，藥物B小鼠死亡率高于藥物A組。兩組間死亡率的差異有顯著意義(P＜0.05)。3組中存活動物逐漸恢復(fù)正常，被毛濃度而有光澤，一般行為活動、食量和糞便等均正常，一般體征良好，在第2周內(nèi)均未再發(fā)生死亡。
4、討論根據(jù)本實驗結(jié)果可知，藥物A緩釋制劑毒性較藥物B輕。
具體實施例方式本發(fā)明的實施例1稱取人參525g、黃芪1050g、刺五加1575g、去甲斑蝥素50g 甘露醇-右旋糖苷100g、乙醇120g、甘油180g、海藻糖100g制備工藝為取人參切片，用15750ml 90％乙醇加熱回流提取5小時，濾過，藥渣備用，提取液回收乙醇，加水至500ml，用石硫法沉淀處理二次，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入78750ml水煎煮5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理二次，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉二次，第一次含醇量為50％，第二次含醇量為85％，靜置冷藏100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，將乙醇與甘油混合均勻，并與去甲斑蝥素、甘露醇-右旋糖苷、海藻糖及上述藥液混合均勻，用注射用水稀釋至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為6-7，用0.45μm的微孔濾膜過濾，分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得成品。凍干工藝為將灌裝好的西林瓶半壓塞后送入凍干機，緩慢冷凍至-15℃以下，抽真空至30-35Pa，控制加熱升溫速度不超過4℃/h進行升華，升華30個小時后，設(shè)定擱板溫度為40℃進行第二次干燥，當(dāng)制品溫度和擱板溫度接近時，恒定溫度干燥6小時后全壓塞。
本發(fā)明的實施例2稱取人參5g、黃芪6g、刺五加9g、去甲斑蝥素0.1g、泊洛沙姆50g、甘露醇-右旋糖苷70g制備工藝為取人參切片，用15ml 50％乙醇加熱回流提取5次，每次1小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入45ml水煎煮5次，每次1小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉，含醇量為90％，靜置冷藏5小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液。取提取液、去甲斑蝥素、泊洛沙姆、甘露醇-右旋糖苷分別溶解于注射用水后混合，加入注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為5-6，用0.45μm的微孔濾膜過濾，攪拌20分鐘使混合均勻，灌封、滅菌即得注射制劑。
本發(fā)明實施例3稱取人參100g、黃芪200g、刺五加300g、去甲斑蝥素5g、羥丙基-殼聚糖600g制備工藝為按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用，將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，沸水中煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，加入適量乙醇使含醇量達75％，靜置24小時后，回收乙醇并濃縮成浸膏，再加入去甲斑蝥素、羥丙基-殼聚糖混合均勻，即得膠囊劑。
本發(fā)明的實施例4 稱取人參20g、黃芪40g、刺五加50g、去甲斑蝥素0.2g、殼聚糖100g、蔗糖600g。
制備工藝為按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用。將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，加入沸水煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，以石硫法沉淀處理，上清液加入適量乙醇使含醇量達65％，靜置24小時后，濃縮回收乙醇；將去甲斑蝥素、殼聚糖與藥液混合均勻，另取適量蔗糖加入煮沸的水中使溶解均勻，過濾，制成單糖漿，將適量單糖漿加入上述藥物濾液中，加純化水至1000ml，灌裝，即得口服液體制劑。
本發(fā)明的實施例5稱取人參50g、黃芪100g、刺五加150g、去甲斑蝥素1.0g、泊洛沙姆150g、甘露醇-右旋糖苷70g、乙醇40g、甘油60g、乳糖70g。
制備工藝為取人參切片，用400ml 75％乙醇加熱回流提取3次，每次2小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入2500ml水煎煮3次，每次2小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次，含醇量為80％，靜置冷藏24-48小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，將乙醇與甘油混合均勻，并與甘露醇-右旋糖苷、去甲斑蝥素、乳糖及上述藥液混合均勻，用注射用水稀釋至1000ml，分裝，凍干，即得凍干制劑；凍干工藝為將灌裝好的西林瓶半壓塞后送入凍干機，緩慢冷凍至-15℃以下，抽真空至5-10Pa，控制加熱升溫速度不超過4℃/h進行升華，升華10個小時后，設(shè)定擱板溫度為20℃進行第二次干燥，當(dāng)制品溫度和擱板溫度接近時，恒定溫度干燥0.5-1小時后全壓塞。
本發(fā)明的實施例6稱取人參100g、黃芪200g、刺五加300g、去甲斑蝥素5g、泊洛沙姆300g、氯化鈉15g制備工藝為取人參切片，用1500ml 80％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入7500ml水煎煮3次，每次1小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉二次，含醇量均為70％，靜置冷藏48小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取提取液、去甲斑蝥素、泊洛沙姆分別溶解于新鮮注射用水后，趁熱加入767型針用活性炭5g過濾，補足注射用水，使其稀釋至1000ml，同時加入氯化鈉混合，加入注射用水，調(diào)節(jié)PH6，用0.22μm的微孔濾膜過濾，攪拌20分鐘使混合均勻，分裝、滅菌，即得大容量注射液。
權(quán)利要求
1.一種治療腫瘤的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計算由人參5-525、黃芪6-1050、刺五加9-1575和去甲斑蝥素0.1-50制成。
2.按照權(quán)利要求1所述的治療腫瘤的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計算由人參20-100、黃芪40-200、刺五加50-300和去甲斑蝥素0.2-5與緩釋材料制成。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的治療腫瘤的中藥制劑，其特征在于按照重量計算由人參50、黃芪100、刺五加150和去甲斑蝥素1.0及緩釋材料5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物制成；注射制劑，包括凍干粉針制劑、粉針制劑、注射液體制劑、大容量注射制劑和口服制劑包括口服液體制劑、膠囊、片劑或丸劑。
4.如權(quán)利要求1-3中任意一項所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用乙醇加熱回流提取，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇后用石硫法沉淀處理，上清液加熱濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材與人參藥渣合并，用水煎煮、濃縮后用石硫法沉淀處理，濾過，上清液與人參提取液合并，加入乙醇醇沉，靜置，濾過，回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取物，取去甲斑蝥素與提取物混合均勻，再加入不同的輔料，用不同的常規(guī)方法制成不同的產(chǎn)品。
5.按照權(quán)利要求4所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用；黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取物，取去甲斑蝥素與提取物混合均勻，再加入不同的輔料，用不同的方法可制成不同的產(chǎn)品，這時，可加入5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物。
6.按照權(quán)利要求4或5所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用；黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取去甲斑蝥素、7-10％海藻糖或乳糖與提取液混合均勻，用注射用水稀釋至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為3-7，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得成品凍干粉針劑；本發(fā)明中，還可加入緩釋材料、助溶劑和增溶劑，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆；助溶劑為7-10％甘露醇-右旋糖苷，所加增溶劑為10-30％的乙醇∶甘油＝4∶6的復(fù)合溶劑。
7.按照權(quán)利要求6所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述凍干工藝為將灌裝好的西林瓶半壓塞后送入凍干機，緩慢冷凍至-15℃以下，抽真空至5-35Pa，控制加熱升溫速度不超過4℃/h進行升華，升華10-30個小時后，設(shè)定擱板溫度為20-40℃進行第二次干燥，當(dāng)制品溫度和擱板溫度接近時，恒定溫度干燥0.5-6小時后全壓塞。
8.按照權(quán)利要求4或5所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取提取液、去甲斑蝥素溶解于注射用水后混合，加入注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為3-77，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，攪拌使混合均勻，灌封、滅菌即得注射液；本發(fā)明中，還可加入緩釋材料、助溶劑和增溶劑，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆；助溶劑為7-10％的甘露醇-右旋糖苷，所加增溶劑為10-30％的乙醇∶甘油＝4∶6的復(fù)合溶劑。
9.按照權(quán)利要求4或5所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用3-30倍量50-90％乙醇加熱回流提取1-5次，每次1-5小時，濾過，藥渣備用，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮液加水至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，濾過，上清液濃縮，濾過，備用。黃芪、刺五加與人參藥渣合并，加入3-30倍量水煎煮1-5次，每次1-5小時，合并煎液，濾過，濃縮至適量，用石硫法沉淀處理一次及一次以上，上清液濃縮，與人參提取液合并，用乙醇醇沉一次及一次以上，含醇量為50-90％，靜置冷藏5～100小時，濾液回收乙醇，加水適量，超濾后即得提取液，取提取液、去甲斑蝥素分別溶解于注射用水后，趁熱加入0.20％-0.50％767型針用活性炭過濾，濾液加入最終藥液量0.8-2.5％的氯化鈉混合，同時加入注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)PH2-8，用0.45μm及0.45μm以下的微孔濾膜過濾，攪拌使混合均勻，分裝、滅菌即得大容量注射制劑；本發(fā)明中，還可加入緩釋材料，所加緩釋材為5-30％泊洛沙姆。
10.按照權(quán)利要求4或5所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用，將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，加入沸水煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，以石硫法沉淀處理，上清液加入適量乙醇使含醇量達50-90％，靜置5～100小時后，濃縮回收乙醇；將去甲斑蝥素與藥液混合均勻，另取適量蔗糖加入煮沸的水中使溶解均勻，過濾，制成單糖漿，將適量單糖漿加入上述藥物濾液中使最終含糖量5-60％，加純化水至1000ml，灌裝，即得口服液體制劑；本發(fā)明中，可加入緩釋材料，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物。
11.按照權(quán)利要求4或5所述的治療腫瘤的中藥制劑的制備方法，其特征在于按量稱取人參，加入純化水煎煮，煎液過濾，濾液備用，將黃芪和刺五加投入剩余的人參藥渣中，沸水中煎煮，煎液過濾，濃縮，合并二次煎出的藥液，加入適量乙醇使含醇量達50-90％，靜置5～100小時后，回收乙醇并濃縮成浸膏，再加入去甲斑蝥素混合均勻，即得膠囊劑，本發(fā)明中，還可加入緩釋材料，所加緩釋材料為5-30％泊洛沙姆或10-60％殼聚糖及其衍生物。
全文摘要
本發(fā)明是一種治療腫瘤的中藥制劑及其制備方法，由人參、黃芪、刺五加和去甲斑蝥素制備而成；能治療原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴癌、婦科惡性腫瘤等疾病，本發(fā)明將其制成緩釋制劑，減少了患者給藥的次數(shù)，避免了普通制劑頻繁給藥所出現(xiàn)的“蜂谷”現(xiàn)象，提高了藥物的利用率和患者用藥的依從性，從而達到了提高藥物療效、降低藥物不良反應(yīng)的目的，本發(fā)明提供的制備方法能夠科學(xué)合理的指導(dǎo)生產(chǎn)，解決從藥物到具體制劑劑型中遇到的技術(shù)難題；本發(fā)明還特別提供了凍干粉針的工藝參數(shù)的控制方法，保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和有效性。
文檔編號A61P35/00GK1839919SQ20051000303
公開日2006年10月4日 申請日期2005年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月28日
發(fā)明者葉湘武, 江帆, 安崇惠, 唐修靜 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司