專利名稱：水芹科植物的提取物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種含有大量生理活性成分的來自水芹科植物的提取物、其制備方法、以及含有該提取物的藥物、食品、飲料或飼料。
背景技術：
當歸是水芹科的大型多年生草本植物，已知具有各種各樣的健康促進效果。例如，作為當歸所具有的生理活性，已知有抗菌作用、抗腫瘤作用、抑制胃酸分泌作用、抗癌效果、增強神經(jīng)生長因子產(chǎn)生的效果、增強肝細胞增殖因子產(chǎn)生的作用(例如，參照國際公開第01/76614號小冊子)。可是，至今為止，對于抗糖尿病作用和抗肥胖作用等胰島素作用，仍是未知的。
胰島素是哺乳動物正常的糖類、蛋白質以及脂肪代謝所必需的激素。I型糖尿病患者由于不能產(chǎn)生足夠的作為支持生命的激素的胰島素，為了生存，必須從外部給藥胰島素。II型糖尿病病人，為了控制因胰島素產(chǎn)生量不足、胰島素耐受性等原因引起的不合適的血糖量到恰當?shù)牧?，必須施用胰島素或胰島素分泌促進劑?？墒?，在II型糖尿病患者中，對于以高胰島素血癥或胰島素受體異常、胰島素受體的下游信號的異常等引起的胰島素耐受性為主要原因的糖尿病患者，有時即使施用胰島素或胰島素分泌促進劑也不能顯示出治療效果。
近年，為了解決胰島素的副作用和上述問題，進行了與胰島素具有同樣生理功能的物質(以下有時也稱為胰島素樣物質)的開發(fā)，并明確了合成的苯醌衍生物是胰島素樣物質(例如，國際公開第99/51225號小冊子)，另外，來自紫草根(紫草根)的紫草寧也是胰島素樣物質(例如，Kamei R.等7人，Biochem.Biophys.Res.Commun.，2002年，Vol.292，P642-651)。這些胰島素樣物質不僅對I型糖尿病患者，即使是對于II型糖尿病患者、甚至是胰島素耐受性為主要原因的II型糖尿病患者，也顯示與胰島素同樣的生理活性，可以期待改善癥狀。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種來自天然物，可以安全且簡便地攝取的含有大量生理活性成分的來自水芹科植物的提取物、其制備方法、以及含有該提取物的藥物、食品、飲料或飼料。
以下，概要說明本發(fā)明本發(fā)明的第1項發(fā)明涉及一種提取物，該提取物是用含水醇提取水芹科植物或其處理物而得到的。
本發(fā)明的第2項發(fā)明涉及一種來自水芹科植物或其處理物的提取物的制備方法，包括用含水醇提取水芹科植物或其處理物的工序。
在本發(fā)明的第1以及第2項發(fā)明中，作為水芹科植物，可以優(yōu)選地列舉出當歸。另外，作為含水醇，可以列舉出濃度大于或等于40(v/v)％且小于100(v/v)％的乙醇水溶液。
本發(fā)明的第3項發(fā)明涉及一種伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥的治療藥或預防藥，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物作為有效成分。
本發(fā)明的第4項發(fā)明涉及一種胰島素樣作用劑，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物作為有效成分。
本發(fā)明的第5項發(fā)明涉及一種食品、飲料或飼料，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物。在本發(fā)明的第5項發(fā)明中，食品、飲料或飼料可以列舉用于治療或預防伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病、和/或糖尿病的并發(fā)癥的食品、飲料或飼料。
本發(fā)明的第6項發(fā)明涉及一種促進細胞吸收葡萄糖的促進劑，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物作為有效成分。
本發(fā)明的第7項發(fā)明涉及一種誘導分化成脂肪細胞的藥物，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物作為有效成分。
本發(fā)明的第8項發(fā)明涉及一種醛糖還原酶抑制劑，其特征在于，含有本發(fā)明的第1項發(fā)明的提取物作為有效成分。
具體實施例方式
在本發(fā)明中，所謂水芹科植物，是屬于被子植物類水芹科的植物，可以列舉例如當歸、水芹、鴨兒芹、獨活(シシウド)、胡蘿卜、旱芹(セロリ)、荷蘭芹(パセリ)等。在本發(fā)明中，特別優(yōu)選使用當歸。另外，本發(fā)明使用的水芹科植物，沒有特別限定，可以使用果實、種子、種皮、花、葉、莖、根、根莖和/或以植物整體。
作為本發(fā)明的提取物的原料，除了上述水芹科植物以外，還使用其處理物。在此，作為處理物，沒有特別限定，可以使用例如水芹科植物的粉碎物、切細物、干燥物、榨汁液等。另外，將水芹科植物用已知的方法作成茶葉狀，對其實施本發(fā)明的提取方法而得到的提取物，也可以作為本發(fā)明的提取物使用。另外，作為成為原料的水芹科植物，還可以使用多種水芹科植物或它們的處理物的混合物。此外，在本發(fā)明中，可以將來源植物不同的提取物、來源植物的部位不同的提取物、來源部位相同但使用組成不同的含水醇提取而得到的提取物、或通過它們的組合而得到的提取物分別單獨或混合2種或2種以上作為本發(fā)明的提取物使用。另外，如果含有了本發(fā)明的提取物，即使還含有用與本發(fā)明的提取物制備方法不同的提取法得到的提取物的物質也可以作為本發(fā)明的提取物使用。
水芹科植物的粉碎物可以通過例如使植物干燥并使用粉碎機粉碎、或通過冷凍粉碎而獲得。切細物可以通過將水芹科植物適當切碎而獲得，干燥物可以通過例如冷凍干燥而獲得。榨汁液可以通過使用已知的植物榨汁方法，例如使用螺旋式、齒輪式、刀具式等榨汁機或飲料機來榨汁水芹科植物而得到。
在本發(fā)明中，所謂含水醇，沒有特別限定，是指例如乙醇、甲醇、異丙醇、乙二醇、丁二醇、丙二醇、丙三醇等醇類和水的混合物(醇水溶液)，特別優(yōu)選的可以舉出含水乙醇。作為本發(fā)明使用的含水乙醇，由于可以在得到的提取物中含有更多的生理活性物質，故沒有特別的限定，可以使用例如醇含量以其濃度計，優(yōu)選40(v/v)％或40(v/v)％以上但低于100(v/v)％，更加優(yōu)選45～80(v/v)％，特別優(yōu)選50～70(v/v)％的含水醇。通常，作為含水醇，使用濃度大于或等于40(v/v)％且小于100(v/v)％乙醇水溶液是合適的。另外，這些含水醇，根據(jù)需要可以單獨、或作為適當混合了各種醇的含水醇使用。
在本發(fā)明中，所謂提取物是指使用提取溶劑經(jīng)過進行提取操作的工序而得到的物質。提取可以采用已知的提取方法如下進行。例如，提取可以將作為原料的水芹科植物的特定部位直接、或將該植物粉碎或切碎后，用溶劑間歇式或連續(xù)式地進行。提取溶劑的量雖然可以適當決定，但通常對于原料植物，可以優(yōu)選用使用時的原料植物的形態(tài)原樣(例如如果原料植物為生植物，則為生的植物)重量的0.1～100倍量的提取溶劑。提取溫度也可以根據(jù)目的適當決定，但優(yōu)選0～80℃，更加優(yōu)選0～60℃，進一步優(yōu)選0～50℃，特別優(yōu)選0～40℃的范圍。提取時間也可以考慮提取效率來決定，但通常以優(yōu)選幾秒～幾天，更加優(yōu)選5分鐘～24小時的范圍來設定原料、提取溶劑、提取溫度。提取操作可以邊攪拌邊進行，也可以靜置進行，另外，視需要還可以反復進行多次。通過以上操作，可以得到水芹科植物的提取物(以下有時稱為本發(fā)明的提取物)。視需要，提取物還可以實施過濾、離心分離、濃縮、超濾、分子篩等的處理，也可以進行濃縮。
這樣得到的本發(fā)明的提取物，例如，當原料使用了作為水芹科植物之一的當歸時，是高濃度地含有具有生理活性的查耳酮類化合物的4-羥基德里辛(4-hydroxyderricin)或黃色當歸醇(xanthoangelol)，另外，還高濃度地含有由本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的2種查耳酮類化合物(以下，稱為TB1、TB2)的新型提取物。此外，至今為止，還沒有從水芹科植物中得到以高濃度地含有TB1或TB2為指標的提取物的報道，是由本發(fā)明人首次實施的。TB1和TB2的化學結構分別示于下式(化1)和(化2)中。
(化1) (化2)
在本發(fā)明的提取物中含有的以上4種查耳酮類化合物(4-羥基德里辛、黃色當歸醇、TB1、TB2)，如后述的參考例1和2所記載，是天然的胰島素樣活性成分。另外，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，TB1和TB2還具有醛糖還原酶抑制作用，對于糖尿病的并發(fā)癥，可以期待其效果(國際公開第2004/031165號小冊子)。
另外，在從當歸得到的本發(fā)明的提取物中，含有查耳酮類化合物黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮(isobavachalcone)、補骨脂色滿查耳酮(bavachromanol)，或黃烷酮類化合物munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮(isobavachin)、prostratol F，這些化合物如后述的實施例11、參考例1和2所示，也具有醛糖還原酶抑制作用或胰島素樣作用。
即，由本發(fā)明得到的提取物，作為對健康人具有預防糖尿病的效果、對被稱為“糖尿病預備軍”的初期糖尿病患者具有改善效果、以及對在糖尿病患者中發(fā)現(xiàn)了并發(fā)癥癥狀的人們的糖尿病及其并發(fā)癥具有改善效果的綜合性糖尿病改善或預防用藥物、功能性食品原料是極其有用的。另外，本發(fā)明的提取物所具有的胰島素樣作用是以促進細胞吸收葡萄糖的作用、誘導向脂肪細胞的分化的作用作為指標，在后述的實施例5～7中示出。另外，本發(fā)明提取物的醛糖還原酶抑制作用在后述的實施例8、9中示出。
另外，上述的TB1、TB2除了醛糖還原酶抑制作用以外，由于還具有神經(jīng)細胞保護作用、NO產(chǎn)生抑制作用、白細胞介素產(chǎn)生抑制作用、成骨促進作用等(參照例如國際公開第2004/031165號小冊子)，因此，本發(fā)明的提取物，作為利用了這些生理活性的來自天然的藥物、保健食品原料也是有用的。
此外，在本發(fā)明中，所謂胰島素樣作用，只要是顯示胰島素所具有的生理活性中的至少1種活性即可，沒有特別的限制，可以舉出例如促進細胞中的糖、氨基酸的吸收，糖原、蛋白質的合成以及分解抑制等代謝調節(jié)作用中的至少1種。另外，對于有無胰島素樣作用，可以通過后述的實施例5或6所述的方法簡便地測定。由于本發(fā)明的有效成分具有胰島素樣作用，在治療上或預防上，對于使用胰島素有效的所有疾病都可以發(fā)揮治療效果或預防效果。
另外，通過使用已知的方法分級本發(fā)明的水芹科植物提取物而得到的級分、或通過反復多次分級操作而得到的級分也包含在本發(fā)明的提取物中。作為上述分級方法，可以舉出提取、分別沉淀、柱色譜法、薄層色譜法等。
在本發(fā)明中，本發(fā)明的提取物的形狀沒有特別的限定，可以是粉狀、固體狀、液體狀的任何一種。為粉狀時，沒有特別的限定，可以將以含水醇作為溶劑從原料中提取的本發(fā)明的提取物濃縮，再添加賦形劑等，通過干燥、粉碎來得到粉狀的本發(fā)明的提取物。另外，還可以將用已知的方法造粒該提取物而得到的粒狀固體物質作為本發(fā)明的提取物使用。作為造粒方法，可以舉出旋轉造粒、攪拌造粒、流化床造粒、氣流造粒、擠出造粒、壓縮成型造粒、粉碎造粒、噴射造?；驀婌F造粒等。另外，作為液體狀的提取物，除了含水乙醇提取物本身、其濃縮物或稀釋物以外，還可以舉出將上述的粉狀提取物溶解在液體，例如水或醇等中而成為液體狀的物質。
另外，本發(fā)明提供高濃度或高純度地含有本發(fā)明的提取物的食品、飲料或飼料，這些與以前的食品、飲料或飼料相比，意味著在本發(fā)明的食品、飲料或飼料中高濃度和/或高純度地含有上述查耳酮類化合物或黃烷酮類化合物。
此外，在本發(fā)明中，有時將本發(fā)明的提取物稱為本發(fā)明的有效成分，將含有本發(fā)明的有效成分的治療或預防伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病、和/或糖尿病的并發(fā)癥的藥物稱為本發(fā)明的治療藥或預防藥。另外，有時將該治療藥、預防藥以及胰島素樣作用劑稱為本發(fā)明的藥物。
在本發(fā)明的有效成分中，如后述沒有發(fā)現(xiàn)特別的毒性。此外，也不用擔心發(fā)生副作用。由此，可以安全并且恰當?shù)剡M行疾病的治療或預防。因此，含有該有效成分的本發(fā)明的治療藥、預防藥、食品、飲料或飼料對于伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病、和/或糖尿病的并發(fā)癥的治療或預防是有效的。
在本發(fā)明中，作為伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病，可以列舉以選自血中胰島素水平的變化、胰島素或胰島素受體活性水平的變化、胰島素受體的下游信號異常以及它們的組合的原因為特征的疾病，例如，糖尿病、肥胖、高血壓、動脈硬化、可卡因戒斷癥狀、充血性心力衰竭、健忘癥、心臟血管痙攣、大腦血管痙攣、嗜鉻細胞瘤、神經(jīng)節(jié)成神經(jīng)細胞瘤(神経節(jié)神経芽腫)、亨庭頓氏病、高血脂癥。作為糖尿病，可以舉出I型糖尿病、II型糖尿病的任意一種。另外，作為II型糖尿病，還包含即使給藥胰島素或胰島素分泌促進劑也不見治療效果的胰島素耐受性為主要原因的疾病。
伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病，在其發(fā)病階段，大多是由于胰島素產(chǎn)生量不足、或胰島素耐受性而導致胰島素作用不充分。本發(fā)明的有效成分由于顯示胰島素樣作用，可以抑制伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病發(fā)病，因此，還可以期待該疾病的預防效果，進而還可以期待糖尿病并發(fā)癥的預防效果。
在胰島素耐受性的狀態(tài)中，來自胰島素產(chǎn)生導致的胰島素受體的信號被阻斷，不能發(fā)揮胰島素所具有的各種功能，從而產(chǎn)生各種代謝異常。本發(fā)明使用的有效成分即使是對于胰島素耐受性的癥狀，也可以發(fā)揮胰島素樣的效果。即，通過使用本發(fā)明的預防藥或治療藥，對于以胰島素耐受性為原因的疾病，例如即使給藥胰島素或胰島素分泌促進劑也不見治療效果的II型糖尿病，也可以發(fā)揮治療或預防效果。另外，本發(fā)明的有效成分還可以發(fā)揮降低血中胰島素量的效果。即，在治療或預防時，可以將本發(fā)明的藥物作為需要降低胰島素量的疾病的治療或預防藥使用。作為該疾病，沒有特別的限定，可以列舉出高胰島素血癥和阿耳茨海默病等。另外，由于還報道了通過胰島素受體的刺激和延長壽命效果之間存在密切的關系(Science，Vol.299，P572～574(2003年)；Nature，Vol.424，P277～284(2003年))，因此，還可以將本發(fā)明的藥物作為抗衰老藥使用。
已知胰島素可促進前體脂肪細胞向脂肪細胞的分化誘導，另外還已知在成熟脂肪細胞中吸收葡萄糖、在細胞內蓄積甘油三酯(J.Biol.Chem.，Vol.253，No.20，P7570～7578(1978年))。即，利用這些發(fā)現(xiàn)，給藥受檢物質代替胰島素，通過測定向脂肪細胞的分化和細胞中的甘油三酯量，可以測定受檢物質的胰島素樣作用。
另外，已知胰島素有促進細胞吸收葡萄糖的作用，并已知在成熟的脂肪細胞中，通過胰島素的作用可以促進細胞葡萄糖(J.Biol.Chem.，Vol.253，No.20，P7579～7583(1978年))。即，利用這些發(fā)現(xiàn)，給藥受檢物質代替胰島素，通過測定成熟脂肪細胞中的葡萄糖吸入量，可以測定受檢物質的胰島素樣作用。
在本發(fā)明中，作為糖尿病的并發(fā)癥，可以列舉出例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性末梢神經(jīng)病、白內障、聽力減退、感覺異常、肌肉萎縮等糖尿病性精神癥、腎機能不全等糖尿病性腎病、動脈硬化或腦梗塞等糖尿病性血管疾病、白血球的吞噬作用降低導致的傳染病、糖尿病性昏睡等。
作為本發(fā)明的治療藥或預防藥，可以舉出將本發(fā)明的上述有效成分與已知的藥用載體組合并制成制劑的藥物。另外，作為本發(fā)明的治療藥或預防藥，還可以將上述有效成分和可以與該有效成分使用于相同用途的其他成分，例如，已知的胰島素制劑、胰島素分泌促進劑、胰島素耐受性改善劑、食后高血糖改善劑、胰島素樣作用劑、醛糖還原酶抑制劑等配合。
本發(fā)明的治療藥或預防藥的制備，通常可以通過將上述有效成分與可藥用的液體或固體載體配合來進行，根據(jù)需要，還可以加入溶劑、分散劑、乳化劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等，制成片劑、顆粒劑、散劑、粉劑、膠囊劑等固體制劑、常規(guī)液體劑、懸浮劑、乳劑等液體制劑。另外，還可以制成能在使用前通過添加適當?shù)妮d體制成液體的干燥品或其他的外用藥。
藥用載體可以根據(jù)治療藥或預防藥的給藥方式以及劑型來選擇。制成含有固體組合物的口服制劑時，可以作成片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、細粒劑、顆粒劑等。例如，可以利用淀粉、乳糖、白糖、甘露醇、羧甲基纖維素、玉米淀粉、無機鹽等。另外，在制備口服制劑時，還可以配合粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤滑劑、助流動劑、矯味劑、著色劑、香料等。例如，制成片劑或丸劑時，根據(jù)需要，還可以用蔗糖、明膠、羥丙基纖維素等糖衣或胃溶性或腸溶性物質的膜包衣。制成由液體組合物構成的口服制劑時，可以制成藥理學容許的乳濁劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑等，例如，可以利用精制水、乙醇等作為載體。此外，根據(jù)需要，還可以添加潤濕劑、懸浮劑等助劑、甜味劑、風味劑、防腐劑等。
另一方面，制成非口服制劑時，可以按照通常的方法，通過使本發(fā)明的上述有效成分溶解或懸浮在作為稀釋劑的注射用蒸餾水、生理鹽水、葡萄糖水溶液、注射用植物油、芝麻油、花生油、大豆油、谷物油、丙二醇、聚乙二醇等中，根據(jù)需要再加入殺菌劑、穩(wěn)定劑、等滲化劑、無痛化劑等來進行制備。另外，還可以制備固體組合物，并在使用前溶解在無菌水或無菌的注射用溶劑中使用。
作為外用劑，包含經(jīng)皮給藥用或經(jīng)粘膜(口腔內、鼻腔內)給藥用的固體、半固體狀或液體狀的制劑。此外，還包含栓劑。例如，可以作成乳劑、洗劑等乳濁劑、外用酊劑、經(jīng)粘膜給藥用液體制劑等液體制劑、油性軟膏、親水性軟膏等軟膏劑、膜劑、貼劑、泥敷劑等經(jīng)皮給藥用或經(jīng)粘膜給藥用的貼等。
以上的各種制劑，可以分別利用已知的藥用載體等，通過適當、通常的方法來制備。另外，在上述制劑中的有效成分的含量，考慮其給藥形態(tài)、給藥方法等，優(yōu)選只要是可以在后述的給藥量范圍內給藥該有效成分的量，則沒有特別的限制。作為本發(fā)明的治療藥或預防藥中的有效成分的含量，通常為0.1～100重量％左右。
本發(fā)明的治療藥或預防藥，可以根據(jù)制劑的形態(tài)以適當?shù)慕o藥途徑給藥。給藥方法沒有特別限定，可以通過內用、外用以及注射進行。注射藥可以通過例如靜脈內、肌肉內、皮下、皮內等給藥，外用藥，例如可以將栓劑通過合適的給藥方法來給藥。
作為本發(fā)明的治療藥或預防藥的給藥量，可以根據(jù)其制劑形態(tài)、給藥方法、使用目的以及作為該治療藥或預防藥的給藥對象的患者的年齡、體重、癥狀適當決定，并不是一定的。一般地，制劑中含有的上述有效成分的給藥量，以干燥重量計，成人每天優(yōu)選0.001mg～10g/kg體重，更加優(yōu)選0.1mg～1g/kg體重。當然，由于給藥量可根據(jù)各種條件變動，因此，既有用比上述給藥量少的量就足夠的情況，也有必須超過該范圍的情況。給藥可以在期望的給藥量范圍內，每天一次，或分為多次進行。給藥期間也是任意的。另外，本發(fā)明的治療藥或預防藥除了直接口服給藥外，還可以添加到任意的飲食物中，在日常中攝取。
另外，本發(fā)明可以提供含有上述有效成分的胰島素樣作用劑。作為該胰島素樣作用劑，可以是上述有效成分本身，還可以使含有上述有效成分的組合物。該胰島素樣作用劑還可以將上述有效成分和可以與該有效成分用于相同用途的其他成分，例如，已知的胰島素制劑、胰島素分泌促進劑、胰島素耐受性改善劑、食后高血糖改善劑、胰島素樣作用劑等配合，按照上述治療藥或預防藥的制備方法制備成通常使用的藥物形態(tài)。在該胰島素樣作用劑中的上述有效成分的含量，考慮該胰島素樣作用劑的給藥方法、使用目的等，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，則沒有特別的限定。作為典型的胰島素樣作用劑中的有效成分的含量為0.1～100重量％左右。另外，該胰島素樣作用劑的用量，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，也沒有特別的限定。特別是，在對生物體給藥而使用時，可以優(yōu)選使用能夠在上述治療藥或預防藥中有效成分的給藥量的范圍內給藥有效成分的量。胰島素樣作用劑對伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病是有用的。另外，該胰島素樣作用劑對伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病的藥物篩選也是有用的。此外，該胰島素樣作用劑對胰島素對于細胞的作用機理、或關于該細胞的物理變化的功能研究也是有用的。另外，該胰島素樣作用劑可以代替血清或胰島素制劑使用，或者與它們一起添加到細胞·組織·器官培養(yǎng)用培養(yǎng)基中使用。該培養(yǎng)基作為降低或不含有血清或胰島素制劑的細胞·組織·器官培養(yǎng)用培養(yǎng)基使用，是非常有用的。
另外，通過將本發(fā)明的胰島素樣作用劑給藥于人，可以期待血中胰島素量的降低。即，在治療或預防時，可以將本發(fā)明的胰島素樣作用劑作為需要降低胰島素量的疾病的治療或預防藥使用。作為該疾病，沒有特別的限定，可以列舉出高胰島素血癥和阿耳茨海默病等。另外，由于還報道了通過胰島素受體的刺激和延長壽命效果之間存在密切的關系(Science，Vol.299，P572～574(2003年)；Nature，Vol.424，P277～284(2003年))，因此，還可以將本發(fā)明的藥物作為抗衰老藥使用。
在本發(fā)明的有效成分中，如后所述沒有發(fā)現(xiàn)特別的毒性。此外，也不用擔心發(fā)生副作用。由此，可以安全并且恰當?shù)卦跈C體內產(chǎn)生胰島素作用和/或醛糖還原酶抑制作用。因此，含有該有效成分的本發(fā)明的藥物、食品、飲料或飼料對于伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病、和/或糖尿病的并發(fā)癥的治療或預防是有效的。
另外，本發(fā)明還提供含有本發(fā)明的提取物的食品、飲料或飼料。本發(fā)明的食品、飲料或飼料，由于其胰島素樣作用、醛糖還原酶抑制作用，對于伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病、糖尿病并發(fā)癥的癥狀改善或預防是極其有用的。另外，本發(fā)明的食品或飲料是具有降低血糖值的作用的用于降低血糖值的食品或飲料，對于擔心血糖值者或擔心身體脂肪者，作為功能性食品或飲料是有用的。
本發(fā)明的食品、飲料或飼料中，也可以配合已知的具有抗糖尿病作用的其他物質，例如，已知的胰島素樣作用物質、具有胰島素分泌促進作用的物質、具有胰島素耐受性改善作用的物質、具有食后過血糖改善作用的物質、醛糖還原酶抑制物質等。例如，還可以與難消化性糊精等配合。
另外，在本發(fā)明的食品、飲料或飼料中，所謂“含有”是指含有、添加和/或稀釋的意思。在此，所謂“含有”是在本發(fā)明的食品、飲料或飼料中含有本發(fā)明的提取物的狀態(tài)，所謂“添加”是在本發(fā)明的食品、飲料或飼料中添加本發(fā)明的提取物的狀態(tài)，所謂“稀釋”是在本發(fā)明的提取物中添加食品、飲料或飼料的原料的狀態(tài)。
對本發(fā)明的食品、飲料或飼料的制備方法，沒有特別的限定。例如，配合、調和、加工可以按照一般食品、飲料或飼料的方法，可以按照它們的制備方法來制備，只要得到的食品、飲料或飼料含有本發(fā)明的提取物即可。
作為本發(fā)明的食品或飲料，沒有特別的限定，可以舉出例如含有本發(fā)明的提取物的谷物加工品(小麥粉加工品、淀粉類加工品、預混和加工品(プレミツクス加工品)、面類、通心粉類、面包類、豆餡類、蕎麥類、麩子、粉條(ビ一フン)、粉絲、包裝糕點等)、油脂加工品(增塑性油脂、油炸油、色拉油、蛋黃醬類、調味料類等)、大豆加工品(豆腐類、醬、納豆等)、肉類加工類(火腿、臘肉、壓制的火腿、香腸等)、水產(chǎn)制品(冷凍的磨碎的魚肉、魚糕、圓筒狀魚糕、魚肉山芋丸子、炸胡蘿卜魚肉餅、汆魚丸子、劣質魚糕、魚肉火腿、香腸、松魚節(jié)、魚卵加工品、水產(chǎn)罐頭、甜烹海味等)、乳制品(原味乳、奶油、酸奶、黃油、乳酪、煉乳、奶粉、冰淇淋等)、蔬菜·果實加工品(糊狀食品、果醬、醬菜類、果實飲料、蔬菜飲料、混合飲料等)、點心類(巧克力、餅干類、果子面包類、點心、糕餅、米果類)、酒精飲料(日本酒、中國酒、葡萄酒、威士忌、燒酒、伏特加、白蘭地、杜松子酒、糖酒、啤酒、清涼酒精飲料、果實酒、利久酒等)、嗜好飲料(青汁、綠茶、紅茶、烏龍茶、咖啡、清涼飲料、乳酸飲料等)、調味品(醬油、調味汁、醋、甜料酒等)、罐頭·瓶罐頭·袋裝食品(牛肉飯、小鍋什錦份兒飯、紅小豆糯米飯、咖哩飯、其他的各種烹調好的食品)、半干燥或濃縮食品(肝泥、其他的涂抹果醬、黃油等的食品、蕎麥面·面條的汁、濃縮湯類)、干燥食品(速食面、速食咖哩飯、速溶咖啡、粉末果汁、粉末湯、速食醬湯、烹調好的食品、烹調好的飲料、烹調好的湯等)、冷凍食品(雞素燒、蒸雞蛋羹、烤鱔魚片、漢堡牛肉餅、燒麥、餃子、各種冰棍、果汁雞尾酒等)、固體食品、液體食品(湯等)、香辣調味料類等農(nóng)產(chǎn)·林產(chǎn)加工品、畜產(chǎn)加工品、水產(chǎn)加工品等。
本發(fā)明的食品，可以含有、添加一種或多種本發(fā)明的提取物，和/或用一種或多種本發(fā)明的提取物稀釋，不特別限定形狀，也包含片狀、顆粒狀、膠囊狀等形狀的可以經(jīng)口攝取的形狀的物質。
作為片狀食品的制備方法，可以通過已知的方法制備，沒有特別的限定，例如，用60(v/v)％乙醇水溶液提取當歸干燥粉末，然后在濃縮的提取物中添加賦形劑，例如，糊精、難消化性糊精、玉米淀粉、木薯淀粉、環(huán)糊精等，并通過冷凍干燥、粉碎得到當歸提取物的干燥粉末后，再適當混合乳糖、結晶纖維素、蔗糖脂肪酸酯、還原麥芽糖、磷酸鈣、卵殼鈣、微粒二氧化硅、CMC-Ca、海藻糖、維生素C等各種維生素類、檸檬酸、葡萄糖、砂糖、糖醇、斯特維亞菊等甜味料、香料、粉末果汁、來自海藻的粉末(例如，含有巖藻依聚糖的粉末、瓊脂低聚糖粉末等)、蘑菇粉、干蔬菜粉末(例如，當歸等水芹科植物粉末)等，根據(jù)需要實施造粒工序，采用旋轉式打片機打片來制備。
另外，作為顆粒狀食品的制備方法，可以采用已知的方法制備，沒有特別的限定，例如，可以在上述片狀食品的制備工序中，在用旋轉式打片機打片前得到的各種混合的粉末中，添加乙醇并進行混煉，再通過擠出造粒機進行造粒，使其干燥并用振動篩進行整粒來制備顆粒狀食品。
另外，作為膠囊狀食品的制備方法，可以采用已知的方法制備，沒有特別的限定，例如，可以在上述片狀食品的制備工序中，將用旋轉式打片機打片前得到的各種混合的粉末，填充到1號膠囊中來制備。另外，還可以在填充前的粉末中添加甘油脂肪酸酯、蜂蠟等進行乳化，將明膠和甘油作為包覆材料來制備軟膠囊。
另外，本發(fā)明的提取物降低了水芹科植物獨有的苦味和澀味，作為食品原料也是優(yōu)異的。即，本發(fā)明的食品或飲料也是優(yōu)異的嗜好食品或飲料。
另外，作為本發(fā)明的飲料，可以采用已知的方法制備，沒有特別的限定，例如，可以通過用60(v/v)％乙醇水溶液提取當歸的干燥粉末，在濃縮的提取物中添加例如糊精、難消化性糊精、玉米淀粉、木薯淀粉、環(huán)糊精等，冷凍干燥并通過粉碎得到當歸提取物的干燥粉末后，在其中添加適當?shù)南懔稀⑻鹞秳?、果汁、粉末果汁、蔬菜提取物、蔬菜泥、來自海藻的粉末或海藻提取?例如，含有巖藻依聚糖的粉末、瓊脂低聚糖粉末等)、蘑菇粉、水芹科植物的干燥粉末等，并溶解在水或醇中來制備本發(fā)明的飲料。另外，還可以將當歸提取物的干燥粉末溶解在水中后，按照已知的清涼飲料的制備方法來制備本發(fā)明的飲料。另外，還可以使用當歸提取物的濃縮物來代替當歸提取物的干燥粉末。此外，也可以使用當歸的含水醇提取物制備作為本發(fā)明的飲料的酒精飲料。
本發(fā)明的食品或飲料中上述有效成分的含量沒有特別限定，可以從其官能和活性表達的觀點進行適當選擇，例如，上述有效成分以干燥重量計，在食品中，優(yōu)選0.00001重量％或0.00001重量％以上，更加優(yōu)選0.0001～90重量％，特別優(yōu)選0.0006～80重量％，例如，在飲料中，優(yōu)選0.00001重量％或0.00001重量％以上，更加優(yōu)選0.0001～90重量％，特別優(yōu)選0.0006～80重量％。另外，本發(fā)明的食品或飲料中所含的有效成分可以以例如，成人每天優(yōu)選0.01mg～10g/kg體重，更加優(yōu)選0.1mg～1g/kg體重的量攝取。
另外，本發(fā)明還提供一種含有、添加和/或稀釋本發(fā)明的提取物而得到的生物用飼料，另外，作為另一個方式，還提供一種以給與生物本發(fā)明的提取物為特征的生物的飼養(yǎng)方法。此外，作為本發(fā)明的另一個方式，還提供一種以含有本發(fā)明的提取物為特征的生物飼養(yǎng)劑。
在這些發(fā)明中，所謂生物，是養(yǎng)殖動物、寵物動物等，作為養(yǎng)殖動物，可以列舉出家畜、實驗動物、家禽、魚類、甲殼類或貝類。作為飼料，可以列舉出身體狀態(tài)的維持和/或改善用飼料。作為生物飼養(yǎng)劑，可以列舉出浸漬用劑、飼料添加劑、飲料添加劑。
按照這些發(fā)明，在適用這些的如上述列舉出的生物中，基于本發(fā)明使用的本發(fā)明的提取物的胰島素樣作用、醛糖還原酶抑制作用，可以期待表現(xiàn)出與本發(fā)明的上述治療藥或預防藥同樣的效果。即，本發(fā)明的飼料等，可以發(fā)揮在該生物中的伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病和糖尿病的并發(fā)癥的治療或預防效果。
本發(fā)明使用的本發(fā)明的提取物，通常相對于對象生物體重1kg，每天優(yōu)選給藥0.01～2000mg。給藥可以通過例如將該有效成分添加混合到提供給對象生物的人工配合飼料的原料中，或與人工配合飼料的粉末原料混合后，再添加混合到其他的原料中來進行。另外，本發(fā)明的提取物在飼料中的含量沒有特別的限定，可以根據(jù)目的適當設定，例如，以上述有效成分的干燥重量計，0.001～15重量％的比例是合適的。在生物飼養(yǎng)劑中的本發(fā)明的有效成分的含量也可以是同等程度。
對本發(fā)明的飼料的制備方法沒有特別限定，另外，其配合也可以基于一般飼料的方法，還可以在制備的飼料中含有本發(fā)明的提取物。生物飼養(yǎng)劑也可以同樣地制備。
作為本發(fā)明可以適用的生物，沒有特別限定，作為養(yǎng)殖動物，可以舉出馬、牛、豬、羊、山羊、駱駝、美洲駝等家畜、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等實驗動物、雞、鴨、火雞、鴕鳥等家禽，作為寵物動物，可以舉出狗、貓等，可以廣泛適用。
在本發(fā)明中，通過例如攝取含有本發(fā)明提取物的飼料、或將對象生物浸漬在含有本發(fā)明提取物的液體中(例如，使上述浸漬用試劑溶解在水中的物質)中，可以良好地維持或改善家畜、實驗動物、家禽、寵物動物等的身體狀態(tài)。另外，這樣的方式是本發(fā)明中的生物飼養(yǎng)方法的一種方式。
另外，本發(fā)明還可以提供一種含有上述有效成分的促進細胞吸收葡萄糖的促進劑。作為該葡萄糖吸收促進劑，可以是上述有效成分本身，另外，也可以是含有上述有效成分的組合物。該葡萄糖吸收促進劑還可以將上述有效成分和可以與該有效成分用于相同用途的其他成分，例如，已知的胰島素制劑、胰島素分泌促進劑、胰島素耐受性改善劑、食后高血糖改善劑、胰島素樣作用劑等配合，按照上述治療藥或預防藥的制備方法制成通常使用的藥物形態(tài)。在該葡萄糖吸收促進劑中，上述有效成分的含量，考慮該葡萄糖吸收促進劑的給藥方法、使用目的等，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，則沒有特別的限定。作為典型的葡萄糖吸收促進劑中有效成分的含量，以干燥重量計，為0.1～100重量％左右。另外，該葡萄糖吸收促進劑的用量，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，也沒有特別的限定。特別是，在對生物體給藥時，優(yōu)選使用能以上述治療藥或預防藥中有效成分的給藥量范圍給藥有效成分的量。該葡萄糖吸收促進劑，在治療或預防上，對需要促進細胞的葡萄糖吸收作用的疾病的治療或預防是有用的。作為該疾病，除了例如需要上述的胰島素樣作用的疾病外，還可以列舉出心臟疾病、特別是心肌梗塞、缺血后的心臟損傷等。另外，由于該葡萄糖吸收促進劑促進細胞吸收葡萄糖，因此，在肌肉細胞中由于該作用發(fā)揮功能，可以誘發(fā)肌肉增強作用、恢復疲勞作用。另外，該葡萄糖吸收促進劑還可以用于制備這些疾病的治療或預防用食品、飲料或飼料。對于這些食品、飲料或飼料，可以根據(jù)本發(fā)明的上述食品、飲料或飼料來使用。另外，該葡萄糖吸收促進劑，在上述的治療或預防上，對需要促進細胞吸收葡萄糖的作用的疾病的藥物篩選也是有用的。另外，該葡萄糖吸收促進劑對細胞的葡萄糖吸收作用機理的研究或該細胞的物理變化等功能研究也是有用的。
另外，本發(fā)明還提供一種含有上述有效成分的誘導向脂肪細胞分化誘導劑。作為可以被該分化誘導劑誘導分化成脂肪細胞的前體細胞，只要是可以分化成脂肪細胞的細胞，則沒有特別的限定，例如，除了前體脂肪細胞以外，還可以舉出成纖維細胞和間葉干細胞等。作為該分化誘導劑，可以是上述有效成分本身，另外，也可以是含有上述有效成分的組合物。該分化誘導劑，例如，還可以將上述有效成分和可以與該有效成分用于相同用途的其他成分，例如，已知的胰島素制劑、胰島素分泌促進劑、胰島素耐受性改善劑、食后高血糖改善劑、胰島素樣作用劑等配合，按照上述治療藥或預防藥的制備方法制成通常使用的藥物形態(tài)。在該分化誘導劑中，上述有效成分的含量，考慮該分化誘導劑的給藥方法、使用目的等，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，則沒有特別的限定。作為典型誘導向脂肪細胞分化的該分化誘導劑中的有效成分含量，以干燥重量計，為0.1～100重量％左右。另外，該分化誘導劑的用量只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，也沒有特別的限定。特別是，在對生物體給藥時，優(yōu)選使用能以上述治療藥或預防藥中有效成分的給藥量范圍給藥有效成分的量。該分化誘導劑，在治療或預防上，對需要誘導向脂肪細胞分化的分化誘導作用的疾病的治療或預防是有用的。作為該疾病，除了例如上述的需要胰島素樣作用的疾病以外，還可以列舉出痛風、脂肪肝、膽石病、月經(jīng)異常、不孕癥等。另外，該分化誘導劑也可以用于制備這些疾病的治療或預防用食品、飲料或飼料。對于這些食品、飲料或飼料，可以按照本發(fā)明的上述食品、飲料或飼料使用。另外，該分化誘導劑，在上述的治療或預防上，對需要誘導分化成脂肪細胞的誘導劑的疾病的藥物篩選也是有用的。此外，該分化誘導劑，對誘導分化成脂肪細胞的分化誘導作用的機理研究及其物理變化等功能研究也是有用的。
另外，本發(fā)明還提供一種含有上述有效成分的醛糖還原酶抑制劑。作為該抑制劑，可以是上述有效成分本身，也可以是含有上述有效成分的組合物。該抑制劑，例如還可以將上述有效成分和可以與該有效成分用于相同用途的其他成分，例如，依帕司他等配合，按照上述治療藥或預防藥的制備方法制備成通常使用的藥物形態(tài)。在該抑制劑中的上述有效成分的含量，考慮該抑制劑的給藥方法、使用目的等，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，則沒有特別的限定。作為典型的醛糖還原酶抑制劑中的有效成分的含量，以干燥重量計，為0.1～100重量％左右。另外，該抑制劑的用量，只要是能夠實現(xiàn)本發(fā)明所需效果的量，也沒有特別的限定。特別是在對生物體給藥時，優(yōu)選使用能以上述治療藥或預防藥中有效成分的給藥量范圍給藥有效成分的量。該抑制劑，在治療或預防上，對需要醛糖還原酶抑制作用的疾病的治療或預防是有用的。作為該疾病，可以列舉出上述的糖尿病并發(fā)癥等。另外，該抑制劑也可以用于制備用于治療或預防這些疾病的食品、飲料或飼料。對于這些食品、飲料或飼料，可以按照上述本發(fā)明的食品、飲料或飼料使用。另外，該抑制劑對于篩選上述糖尿病并發(fā)癥的藥物也是有用的。此外，該抑制劑對于多元醇代謝和糖尿病并發(fā)癥的機理研究及其物理變化等功能研究也是有用的。
另外，本發(fā)明的提取物還可以作為化妝品原料使用。該提取物可以與可以作為化妝品使用的任意的物質混合使用。一般地，可以與水、醇類、油脂類、脂肪酸類、甘油、無機鹽類、防腐劑、表面活性劑、維生素類、氨基酸類、糖類等混合，作為洗液、乳液、乳膏等使用。作為化妝品中的本發(fā)明提取物的含量，以干燥重量計，0.1～80重量％左右是合適的。
另外，作為本發(fā)明的其他實施方式，還提供一種醛糖還原酶抑制劑，其特征在于含有選自黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、補骨脂色滿查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F中的至少1種或1種以上作為有效成分。作為這些有效成分的制備方法，可以通過已知的方法得到。另外，作為該醛糖還原酶抑制劑的制備方法，可以按照上述本發(fā)明的治療藥或預防藥的制備來制備。
本發(fā)明中使用的上述有效成分，即使是對生物體進行發(fā)揮該作用所需有效量的給藥，也沒有發(fā)現(xiàn)毒性。例如，口服給藥時，即使是將當歸的60(v/v)％乙醇水溶液提取物的干燥物分別以1g/kg體重對小鼠單次給藥，也沒有發(fā)現(xiàn)死亡例。另外，上述有效成分，在對大鼠的口服給藥時，即使口服單次給藥1g/kg體重，也沒有發(fā)現(xiàn)死亡例。
實施例以下舉出實施例更具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不受這些記載的任何限制。另外，在實施例中如果沒有特別的說明，所有的％都是指體積(v/v)％。
實施例1在當歸莖葉部分的冷凍干燥物的粉碎物2g中，加入40mL的提取溶劑(40、50、60、70、80％乙醇水溶液以及100％乙醇)，在25℃下進行30分鐘的提取。離心后的上清液用HPLC測定查耳酮類的含量。柱使用TSK gel ODS-80Ts QA(4.6mm×25cm東ソ一公司制)。溶劑A(蒸餾水和乙腈以體積比4比1混合的混合溶劑，并含有0.1％三氟乙酸)和溶劑B(蒸餾水和乙腈以體積比1比9混合的混合溶劑，并含有0.1％三氟乙酸)的洗脫比從0到45分鐘直線地使溶劑B的比從0變到100％，隨后10分鐘保持溶劑B的比為100％。洗脫速度為1mL/分，檢測在215nm、柱溫30℃下進行。
其結果示于表1。由表1可知，從當歸莖葉部分提取TB1和TB2時，與100％乙醇相比，含水乙醇的提取效率更好。另外，還可以知道，對于從當歸莖葉部分提取黃色當歸醇、4-羥基德里辛，60％、70％、80％乙醇水溶液比100％乙醇的效率更好。
表1從當歸莖葉部分提取查耳酮類時的含水乙醇的效果

將通過100％乙醇提取的提取量表示為100％實施例2對將當歸根部的冷凍干燥物的粉碎物進行與實施例1同樣的提取，并測定提取液中查耳酮類的量。結果如表2所示。由表2可知，從當歸根部提取TB1和TB2時，含水乙醇的提取效率比100％的乙醇好。另外，還可以明確，從當歸根部提取黃色當歸醇、4-羥基德里辛時，60％、70％、80％乙醇水溶液比100％乙醇的效率更好。
表2從當歸根部提取查耳酮類時的含水乙醇的效果

將通過100％乙醇提取的提取量表示為100％實施例3在當歸莖葉部分的冷凍干燥物的粉碎物2g中，加入40mL的提取溶劑(40、50、60、70、80％乙醇水溶液以及100％乙醇)，在室溫下進行30分鐘的提取。將離心后的上清液30mL濃縮干固，并溶解到0.75mL的二甲亞砜中。
實施例4在當歸根部的冷凍干燥物的粉碎物2g中，加入40mL的提取溶劑(40、50、60、70、80％乙醇水溶液以及100％乙醇)，在室溫下進行30分鐘的提取。將離心后的上清液30mL濃縮干固，并溶解到0.75mL的二甲亞砜中。
實施例5當歸莖葉部分提取物誘導向脂肪細胞分化的活性(1)向脂肪細胞的分化誘導向脂肪細胞的分化誘導是部分改良Rubin C.S.等的方法(J.Biol.Chem.，Vol.253，No.20，p7570～7578(1978年))來進行的。在包含200μM抗壞血酸的含10％胎牛血清(ギブコ公司制)的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(シグマ公司制，D6046)(以下，稱為A-D-MEM培養(yǎng)基)中，以4×103個/mL懸浮前體脂肪細胞株3T3-L1(ATCC CCL-92.1)，并在12孔微量滴定板的孔中，每孔各加入2mL，在5％二氧化碳存在下，在37℃培養(yǎng)7天。其中在第2、4天用同樣的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)基更換。在第7天，更換為含有0.25μM地塞米松的A-D-MEM培養(yǎng)基后，分別將實施例3制備的當歸莖葉部分的40％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％；50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％、0.011％；另外，60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.2％、0.067％、0.022％的量添加到各孔中。此外，作為陽性對照，設定添加4μL的5mg/mL胰島素(タカラバイオ公司制)水溶液的區(qū)域，作為陰性對照，設定添加二甲亞砜的區(qū)域。45小時后，更換為A-D-MEM培養(yǎng)基，分別將當歸莖葉部分的40％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％；50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％、0.011％；另外，60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.2％、0.067％、0.022％的量添加到各孔中，此外，作為陽性對照，添加2μL的5mg/mL胰島素水溶液，作為陰性對照，添加二甲亞砜，再培養(yǎng)7天，在第2、4天更換培養(yǎng)基。此時，將當歸莖葉部分的40％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％；50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.1％、0.033％、0.011％；另外，60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物的二甲亞砜溶液以終濃度為0.2％、0.067％、0.022％的量添加到各孔中。作為陽性對照，添加2μL的5mg/mL胰島素水溶液，作為陰性對照，添加二甲亞砜。
(2)甘油三酯生物合成量的測定作為誘導向成熟脂肪細胞分化的指標，測定了細胞中的甘油三酯的量作為胰島素樣作用評價。培養(yǎng)結束后，除去培養(yǎng)基，用磷酸緩沖鹽溶液將細胞洗滌2次，添加1mL的己烷∶異丙醇＝3∶2的溶劑，在室溫下放置30分鐘后，回收上清液。再次重復此操作，將得到的2mL上清液濃縮干固。將沉淀溶解在100μL的異丙醇中之后，使用甘油三酯E-檢測器(和光純藥公司制，代號432-40201)測定在10μL溶液中含有的甘油三酯的量。另外，測定全部以2連進行。
結果是，與二甲亞砜添加區(qū)域相比，在當歸莖葉部分的40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物添加區(qū)域中，與添加了胰島素的區(qū)域同樣，確認了甘油三酯生物合成的誘導。即，在當歸莖葉部分的40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物中，確認了誘導向脂肪細胞分化的活性。
實施例6由當歸根部提取物產(chǎn)生的葡萄糖吸收促進作用(1)成熟脂肪細胞的制備向成熟脂肪細胞的分化誘導是部分改良Rubin C.S.等的方法來進行的。在包含200μM抗壞血酸的含10％胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基中，以4×103個/mL懸浮3T3-L1細胞，并在12孔微量滴定板的孔中，每孔各加入2mL，在5％二氧化碳存在下，在37℃培養(yǎng)7天。在第7天，更換為2mL包含0.25μM地塞米松以及10μg/mL胰島素、0.5mM的3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(ナカライテスク公司制，19624-44)的含10％胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基。45小時后，更換為2mL含有200μM抗壞血酸和5μg/mL胰島素的含10％胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基，再于2天后、4天后更換相同的培養(yǎng)基并培養(yǎng)7天，制備成熟脂肪細胞。
(2)對成熟脂肪細胞的葡萄糖吸收促進作用的測定作為葡萄糖吸收促進作用的評價，測定了在成熟脂肪細胞中的試樣(實施例4中制備的當歸根部提取物)刺激時的吸收到細胞內的2-脫氧葡萄糖量作為胰島素樣作用的評價。
培養(yǎng)結束后，除去培養(yǎng)基，用含有0.1(w/v)％牛血清白蛋白(シグマ公司制，A8022)的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基將細胞洗滌2次后，分別在各孔中添加1mL的含有終濃度為0.1％、0.067％、0.022％的實施例4制備的當歸根部40％、50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.2％、0.067％、0.022％的當歸根部60％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.067％、0.022％的當歸根部70％、80％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液或當歸根部100％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液的相同培養(yǎng)基，在5％二氧化碳存在下，在37℃培養(yǎng)一晚。另外，設定不添加試樣的區(qū)域作為陰性對照。培養(yǎng)一晚后，用HEPES緩沖鹽溶液(140mM NaCl、5mM KCl、2.5mM MgSO4、1mM CaCl2、20mMHEPES-Na(pH 7.4))將細胞洗滌2次，在各孔中添加0.9mL含有終濃度為0.1％、0.067％、0.022％的當歸根部40％、50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.2％、0.067％、0.022％的當歸根部60％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.067％、0.022％的當歸根部70％、80％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液或當歸根部100％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液的相同緩沖液，在37℃培養(yǎng)75分鐘。此時，設定在經(jīng)過45分鐘的時刻，在沒有添加試樣的孔中以終濃度為1μg/mL的量添加了胰島素的區(qū)域作為陽性對照。然后，添加100μL含有0.5μCi/mL的2-脫氧-[1，2-3H(N)]葡萄糖(パ一キンエルマ一ライフサイエンス公司制，NET549A)、1mM的2-脫氧葡萄糖(ナカライテスク公司制，10722-11)的HEPES鹽緩沖液，進一步在37℃培養(yǎng)10分鐘。培養(yǎng)結束后，除去上清液，用冷卻到4℃的磷酸鹽緩沖液洗滌細胞3次后，通過添加0.5mL含有1％ノニデツトP-40的磷酸鹽緩沖液來溶解細胞，溶出吸收到細胞中的2-脫氧[1，2-3H(N)]葡萄糖。使用25μL上清液，將ウルチマゴ一ルド(パ一キンエルマ一ライフサイエンス公司制，6013329)作為シンチレ一シヨンカウンタ一，通過液體放射線檢測器LS6500(ベツクマン公司制)測定放射活性。
其結果，添加了當歸根部40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物的區(qū)域與陰性對照相比，與添加了胰島素的區(qū)域同樣地，發(fā)現(xiàn)了2-脫氧[1，2-3H(N)]葡萄糖吸收的促進。即，在當歸根部40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物中，確認了葡萄糖吸收促進活性。
實施例7當歸根部提取物誘導向脂肪細胞的分化基于實施例5的方法測定按照實施例4制備的當歸根部40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物誘導向成熟脂肪細胞分化的作用(胰島素樣作用)。
即，設定在各孔中分別添加了終濃度為0.1％、0.033％的當歸根部40％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.033％、0.011％的當歸根部50％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.022％的當歸根部70％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液、終濃度為0.067％、0.022％的當歸根部60％、80％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液或100％乙醇水溶液提取物的二甲亞砜溶液的區(qū)域作為試樣。另外，設定添加4μL的5mg/mL胰島素(タカラバイオ公司制)水溶液的區(qū)域作為陽性對照，設定添加二甲亞砜的區(qū)域作為陰性對照。此后，與實施例5所述的方法同樣地，進行培養(yǎng)基以及試樣的更換，在試樣添加7天后，測定細胞中甘油三酯的量。
其結果，在添加了當歸根部40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物的區(qū)域中，確認了甘油三酯生物合成的誘導。即，在當歸根部40％、50％、60％、70％、80％乙醇水溶液提取物或100％乙醇提取物中，確認了誘導向成熟脂肪細胞分化的作用。
制備例1當歸葉莖部分、根部水提取物的制備在當歸葉莖部、根部的冷凍干燥物的粉碎物2g中，加入40mL的水，在室溫下進行30分鐘的提取。將離心后的上清液30mL濃縮干固，溶解到0.75mL水中，制成當歸葉莖部分、根部水提取物。
實施例8當歸根部提取物的醛糖還原酶抑制作用按照以下方法測定當歸根部提取物的醛糖還原酶抑制作用。將20μL的100mM甲基乙二醛溶液加入到10μL作為試樣的實施例4制備的當歸根部各種乙醇提取物以及制備例1制備的當歸根部水提取物(溶解在50％二甲亞砜水溶液中的物質)、100μL的0.2M磷酸緩沖液(pH6.2)、20μL的1mM NADPH(磷酸緩沖液)、10μL來自人肌肉細胞的醛糖還原酶溶液(0.1U/M1，和光純藥工業(yè)公司制，磷酸緩沖液)中，測定從經(jīng)過30秒后的180秒內NADPH在340nm的吸光度的變化。使用50％二甲亞砜水溶液代替試樣作為陰性對照。另外，使用蒸餾水代替甲基乙二醛溶液作為各試樣的空白測定吸光度。測定值用2次實驗值的平均值表示。按照以下的式子計算出醛糖還原酶抑制率(％)。抑制率(％)＝[1-(ΔAs-ΔAsb)/(ΔAc-ΔAcb)]×100式中，ΔAs以及ΔAc分別表示試樣溶液、陰性對照溶液每分鐘的吸光度變化，ΔAsb以及ΔAcb分別表示試樣溶液、陰性對照溶液的空白溶液每分鐘的吸光度變化。
試樣的添加量是使最終濃度如表3所示。由表3可知，當歸根部的含水乙醇提取物比水提取物或乙醇提取物顯示高的醛糖還原酶抑制作用。
表3

實施例9當歸莖葉部分提取物的醛糖還原酶抑制作用按照與實施例8同樣的方法測定實施例3制備的當歸莖葉部分提取物的醛糖還原酶抑制活性。結果示于表4。由表4可知，當歸莖葉部分的60％乙醇水溶液提取物比水提取物或乙醇提取物顯示高的醛糖還原酶抑制作用。
表4

實施例10黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、補骨脂色滿查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F的制備對實施例3制備的當歸莖葉部分的40、50、60、70以及80％乙醇提取物和實施例4制備的當歸根部的40、50、60、70以及80％乙醇提取物，用實施例1所示的條件進行通過HPLC的分析，結果確認在這些提取物中含有黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、補骨脂色滿查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F。使用各種色譜法分離這些化合物。
實施例11在當歸根部提取物中含有的物質的醛糖還原酶抑制活性用與實施例8同樣的方法測定實施例10制備的黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、補骨脂色滿查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F的醛糖還原酶抑制活性。
結果示于表5。由表5可知，黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、補骨脂色滿查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratolF存在濃度依賴性的醛糖還原酶抑制活性。
在實施例1和2中，可以確認在含水乙醇提取物中含有TB1、TB2，本發(fā)明者們在國際公開2004/031165號小冊子中明確了TB1以及TB2具有醛糖還原酶抑制活性。即，可以明確，在實施例1和2中所示的含水乙醇提取物中，除了TB1、TB2以外，還含有很多具有醛糖還原酶抑制作用的物質。
表5

N.T.表示未試驗參考例1黃色當歸醇、4-羥基德里辛、TB1、TB2、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratolF誘導向脂肪細胞分化的活性基于實施例5的方法測定黃色當歸醇、4-羥基德里辛、TB1、TB2、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F誘導向脂肪細胞分化的作用(胰島素樣作用)。
即，設定在各孔中分別添加了黃色當歸醇(終濃度1、3、10μM)、4-羥基德里辛(終濃度3、10μM)、TB1(終濃度3、10μM)、TB2(終濃度3、10μM)、異補骨脂查耳酮(終濃度3、10μM)、黃色當歸醇H(終濃度1.3、4、13μM)、munduleaflavanone A(終濃度3、10μM)、異補骨脂黃酮(終濃度3、10、30μM)、prostratol F(終濃度3、10μM)的二甲亞砜溶液的區(qū)域作為試樣。另外，設定添加4μL的5mg/mL胰島素(タカラバイオ公司制)水溶液的區(qū)域作為陽性對照，設定添加二甲亞砜的區(qū)域作為陰性對照。此后，與實施例5所述的方法同樣地進行培養(yǎng)基以及試樣的更換，在試樣添加7天后，測定細胞中的甘油三酯的量。
其結果，在添加了黃色當歸醇、4-羥基德里辛、TB1、TB2、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F的區(qū)域中，分別確認了甘油三酯的生物合成的誘導。即，在黃色當歸醇、4-羥基德里辛、TB1、TB2、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮、munduleaflavanone A、異補骨脂黃酮、prostratol F中，確認了誘導向成熟脂肪細胞分化的作用。
參考例2黃色當歸醇、4-羥基德里辛、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮的葡萄糖吸收促進作用基于實施例6的方法，測定了在成熟脂肪細胞中的試樣刺激時的細胞內吸收的2-脫氧葡萄糖量作為黃色當歸醇、4-羥基德里辛、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮的葡萄糖吸收促進作用的評價，并作為胰島素樣作用的評價。
即，在各孔中分別使用黃色當歸醇(終濃度3、10μM)、4-羥基德里辛(終濃度3、10、30μM)、黃色當歸醇H(終濃度30μM)、異補骨脂查耳酮(終濃度3、10、30μM)的二甲亞砜溶液作為試樣。另外，設定不添加試樣的區(qū)域作為陰性對照，設定以終濃度為1μg/mL的量添加了胰島素的區(qū)域作為陽性對照。此后，同樣地測定在細胞中吸收的2-脫氧-[1，2-3H(N)]葡萄糖。
其結果，添加了黃色當歸醇、4-羥基德里辛、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮的區(qū)域與陰性對照相比，與添加了胰島素的區(qū)域同樣地，發(fā)現(xiàn)了2-脫氧[1，2-3H(N)]葡萄糖吸收的促進。即，在黃色當歸醇、4-羥基德里辛、黃色當歸醇H、異補骨脂查耳酮中，確認了葡萄糖吸收促進活性。
實施例12將當歸干燥粉末40kg加入到400L的55％乙醇中，在25℃下進行1小時的提取。然后，將當歸粉末過濾分離，并通過濃縮罐減壓濃縮該提取液，得到150L當歸提取濃縮液。在該濃縮液中添加10kg糊精作為賦形劑，進行冷凍干燥、粉碎，得到當歸提取粉末22kg。
實施例13將2.5kg實施例12中得到的當歸提取粉末、10.0kg結晶纖維素、0.6kg蔗糖脂肪酸酯依次投入到混合機中，攪拌15分鐘。將該混合物通過旋轉式打片機打片，得到片劑13.1kg。另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備當歸干燥粉末的片劑。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的片劑苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例14將5.0kg實施例12中得到的當歸提取粉末、5.0kg結晶纖維素、5.0kg乳糖、0.7kg蔗糖脂肪酸酯依次投入到混合機中，攪拌15分鐘。將該混合物通過旋轉式打片機打片，得到片劑15.7kg。另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備當歸干燥粉末的片劑。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的片劑苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例15將2.5kg實施例12中得到的當歸提取粉末、10.0kg結晶纖維素、0.6kg蔗糖脂肪酸酯依次投入到混合機中，攪拌15分鐘。再添加60％乙醇水溶液并進行混煉，將得到的混合物通過擠出造粒機進行造粒。再用擱板式溫風干燥機將其在60℃下干燥6小時，用振動篩進行整粒，得到20～100目的顆粒物13.1kg。另外，除了使用實施例12中所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備當歸干燥粉末的顆粒物。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的顆粒品苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例16將2.0kg實施例12中得到的當歸提取粉末、3.0kg乳糖、3.0kg海藻糖、3.5kg結晶纖維素、0.8kg蔗糖脂肪酸酯、0.5kg維生素C、0.2kg檸檬酸依次投入到混合機中，攪拌15分鐘。再添加60％乙醇水溶液并進行混煉，通過擠出造粒機進行造粒。再用擱板式溫風干燥機將其在60℃下干燥6小時，用振動篩進行整粒，得到20～100目的顆粒物15kg。另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備當歸干燥粉末的顆粒物。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的顆粒品苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例17將2.9kg實施例12中得到的當歸提取粉末、10.78kg乳糖、0.9kg蔗糖脂肪酸酯、0.1kg維生素C、0.07kg滑石、0.25kg香料依次投入到混合機中，攪拌15分鐘，得到15kg混合粉末。然后，將該混合粉末以每個300mg填充到1號膠囊中，得到配合了當歸提取粉末的膠囊。
實施例18在混合機中加入10.0kg大豆油作為基質油，并向其中添加2.0kg實施例12中得到的當歸提取粉末、1.0kg維生素E、1.0kg甘油脂肪酸酯、0.8kg蜂蠟，并進行乳化。將得到的乳化物填充到將明膠和甘油作為包覆材料的軟膠囊中。
實施例19制備含有當歸提取物的清涼飲料水。組分如表6所示。


依次混合表6的材料至均勻后，用加熱板在95℃下加熱殺菌15秒鐘，填充到容量50mL的玻璃瓶中。然后，進一步用巴氏滅菌器在75℃下進行15分鐘的殺菌。
另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備含有當歸干燥粉末的清涼飲料水。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的清涼飲料水苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例20制備含有當歸提取物的清涼飲料水。組分如表7所示。

依次混合表7的材料至均勻后，用加熱板在95℃下加熱殺菌15秒鐘，填充到容量50mL的玻璃瓶中。然后，進一步用巴氏滅菌器在75℃下進行15分鐘的殺菌。
另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備含有當歸干燥粉末的清涼飲料水。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的清涼飲料水苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例21制備含有當歸提取物的清涼飲料水。組分如表8所示。

依次混合表8的材料至均勻后，用加熱板在98℃下加熱殺菌15秒鐘，填充190g到容量200mL的罐中后，進一步用巴氏滅菌器在85℃下進行5分鐘的殺菌。
另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備含有當歸干燥粉末的清涼飲料水。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的清涼飲料水苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例22制備使用了實施例12中得到的當歸提取濃縮液的清涼飲料水。組分如表9所示。


依次混合表9的材料至均勻后，用加熱板在95℃下加熱殺菌15秒鐘，填充到容量50mL的玻璃瓶中。然后，進一步用巴氏滅菌器在75℃下進行15分鐘的殺菌。
另外，除了使用實施例12所述的當歸干燥粉末作為對照以外，用同樣的方法制備含有當歸干燥粉末的清涼飲料水。由20名成員對這些進行官能檢查，結果評價為含有當歸提取物的清涼飲料水苦味和澀味降低，并且嗜好性優(yōu)異。
實施例23將由上述實施例19～22制備的清涼飲料水以同樣的方法填充到帶有塞口的容量200mL的小袋或容量100mL的殺菌袋中來代替玻璃瓶或罐，殺菌，作成袋裝飲料。
工業(yè)實用性本發(fā)明提供一種來自水芹科植物的含水醇提取物及其制備方法。在該提取物中，存在大量來自天然物的生理活性物質(例如，上述顯示胰島素樣作用、醛糖還原酶抑制作用的物質等)，該提取物作為對糖尿病或肥胖等伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥有效的藥物、食品、飲料或飼料的原料是有用的。另外，該食品或飲料通過作為日常的飲食品來攝取，可以預防、改善伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥的癥狀。因此，含有本發(fā)明的提取物的功能性飲食品，由于具有該胰島素樣作用和/或醛糖還原酶抑制作用，是對于維持機體穩(wěn)定性的有用的功能性飲食品。另外，本發(fā)明還提供一種含有本發(fā)明的提取物的胰島素樣作用劑，該胰島素樣作用劑對于胰島素的功能研究、胰島素關連的疾病用藥物的篩選是有用的。此外，本發(fā)明還提供一種含有本發(fā)明提取物的促進細胞吸收葡萄糖的促進劑，該葡萄糖吸收促進劑，在治療或預防上，對需要促進細胞吸收葡萄糖的作用的疾病的治療或預防、該疾病的治療或預防用食品、飲料或飼料的制備、對于需要促進細胞吸收葡萄糖的作用的疾病的藥物篩選也是有用的。另外，本發(fā)明還提供一種含有本發(fā)明提取物的誘導向脂肪細胞分化的誘導劑，該分化誘導劑，在治療或預防上，對需要誘導分化成脂肪細胞的分化誘導作用的疾病的治療或預防、該疾病的治療或預防用食品、飲料或飼料的制備、對于需要該分化誘導作用的疾病的藥物篩選也是有用的。另外，本發(fā)明還提供一種含有本發(fā)明提取物的醛糖還原酶抑制劑，該抑制劑，在治療或預防上，對需要醛糖還原酶抑制作用的疾病的治療或預防、該疾病的治療或預防用食品、飲料或飼料的制備、對于需要該抑制作用的疾病的藥物篩選也是有用的。
權利要求
1.一種提取物，該提取物是用含水醇提取水芹科植物或其處理物而得到的。
2.權利要求1所述的提取物，其中，水芹科植物為當歸。
3.權利要求1或2所述的提取物，其中，含水醇為濃度大于或等于40(v/v)％且小于100(v/v)％的乙醇水溶液。
4.一種來自水芹科植物或其處理物的提取物的制備方法，包括用含水醇提取水芹科植物或其處理物的工序。
5.權利要求4所述的制備方法，其中，水芹科植物為當歸。
6.權利要求4或5所述的制備方法，其中，含水醇為濃度大于或等于40(v/v)％且小于100(v/v)％的乙醇水溶液。
7.一種伴隨胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥的治療藥或預防藥，其特征在于，含有權利要求1～3中任一項所述的提取物作為有效成分。
8.一種胰島素樣作用劑，其特征在于，含有權利要求1～3中任一項所述的提取物作為有效成分。
9.一種食品、飲料或飼料，其特征在于，含有權利要求1～3中任一項所述的提取物。
10.權利要求9所述的食品、飲料或飼料，所述食品、飲料或飼料用于治療或預防伴隨胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥。
11.一種促進細胞吸收葡萄糖的促進劑，其特征在于，含有權利要求1～3中任意一項所述的提取物作為有效成分。
12.一種誘導分化成脂肪細胞的誘導劑，其特征在于，含有權利要求1～3中任一項所述的提取物作為有效成分。
13.一種醛糖還原酶抑制劑，其特征在于，含有權利要求1～3中任一項所述的提取物作為有效成分。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用含水醇提取水芹科植物或其處理物而得到的提取物；以及該提取物的制備方法；以含有上述提取物作為有效成分為特征的伴隨著胰島素量或胰島素應答異常的疾病和/或糖尿病的并發(fā)癥的治療藥或預防藥；以含有上述提取物作為有效成分為特征的胰島素樣作用劑；以含有上述提取物作為有效成分為特征的食品、飲料或飼料；以含有上述提取物作為有效成分為特征的細胞吸收葡萄糖促進劑；以含有上述提取物作為有效成分為特征的誘導向脂肪細胞的分化的誘導劑；以含有上述提取物作為有效成分為特征的醛糖還原酶抑制劑。
文檔編號A61P3/08GK1809369SQ200480017300
公開日2006年7月26日 申請日期2004年6月18日 優(yōu)先權日2003年6月20日
發(fā)明者大野木宏, 杉山勝美, 村木信子, 榎龍嗣, 佐川裕章, 加藤郁之進 申請人:寶生物工程株式會社