專利名稱：環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，確切地說它是一種環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體(包括前體脂質(zhì)體)及其制備方法。
背景技術：
環(huán)磷酰胺(cyclophosvnamide，CTX)為白色結(jié)晶、無臭、味微苦。不溶于乙醚、丙酮，可略溶于水，水溶液不穩(wěn)定，微溶于乙酸。CTX是一種烷化劑，1958年首次人工合成，CTX為潛伏化型氮芥類藥物，體外無抗瘤活性，進入體內(nèi)被肝臟或腫瘤組織內(nèi)存在的過量磷酰胺酶或磷酸酶水解，釋放出氮芥基而起抗腫瘤作用。屬于細胞周期非特異性藥物，抗瘤譜較氮芥廣、而毒性低于氮芥。主要用于腫瘤免疫，對多種腫瘤有明顯的抑制作用，近年來因證實它有免疫抑制作用而用于多種自身免疫性疾病的治療，已取得明顯療效。主要用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡，尤其有腎、腦受累者更應立即使用，而不要只想調(diào)整激素用量(需要時可與激素沖擊療法并用)。對不同系統(tǒng)性壞死性血管炎病、皮肌炎及多發(fā)性肌炎、硬皮病，都有很強指征，即或臨床緩解后也宜長時間維持用藥。近年美國倡導沖擊用藥，劑量750-1000mg/m2體表面積，約每次800mg～1000mg～1200mg，靜脈點滴半小時內(nèi)注入，每月一次直至病情緩解，以后改為每2個月一次，再過渡至每3個月一次維持。美國認為效果與口服或隔日注射法相同，但副作用明顯減少。加味當歸補血顆粒對環(huán)磷酰胺的骨髓抑制及荷瘤小鼠免疫功能的影響 田峰，張蕻，任連生 中國藥物與臨床2004年06期 比較加味當歸補血顆粒(JW)與當歸補血湯(DG)對環(huán)磷酰胺(CTX)所致小鼠的骨髓抑制及抑瘤作用，觀察JW對荷瘤小鼠紅細胞免疫功能的影響。方法清潔級KM小鼠隨機分為CTX組、荷瘤組及正常對照組。CTX組腹腔注射CTX，同時灌胃給予JW或DG，10d后檢測動物外周血象白細胞、紅細胞、血小板及骨髓有核細胞數(shù)，進行組間比較；荷瘤組常規(guī)接種H22(小鼠肝癌)造模后，灌胃給予JW，10d后檢測小鼠紅細胞免疫功能、紅細胞免疫復合物花環(huán)率(RBC-ICRR)及紅細胞C3b受體花環(huán)率(RBC-C3BRR)，同時測定對CTX抑瘤作用的影響。環(huán)磷酰胺在翼狀胬肉術后應用療效觀察 侯元友 實用醫(yī)技雜志2004年05期 翼狀胬肉是常見的外眼病之一，臨床治療方法很多，但術后復發(fā)率較高。東阿縣人民醫(yī)院自1999年至2001年間對58例(60只眼)行冀狀胬肉切除+結(jié)膜轉(zhuǎn)位術，術后一周滴1％環(huán)磷酰胺，收到顯著療效 紫杉醇與環(huán)磷酰胺分別聯(lián)合鉑類藥治療卵巢癌的對比研究 李從鑄，翟玉霞，黃萍，周莉，徐嵐，李燕 中國臨床藥理學與治療學2004年04期 比較紫杉醇聯(lián)合鉑類藥物(TP方案)與環(huán)磷酰胺加鉑類藥物(CP方案)治療III、IV期卵巢上皮癌的療效。方法化療方案每一療程采用2d療法，每種藥物d1或d2給藥，采用大劑量單次給藥。對24例III、IV期卵巢上皮癌給予TP方案化療紫杉醇劑量為135mg·m-2，溶于5％GS500ml中，靜滴，3h，d1；順鉑(DDP)75mg·m-2，d2(或卡鉑按AUC＝5計算所得的劑量)，前3～4個療程采用腹腔給藥，以后均靜脈給藥。30例對照組病人采用環(huán)磷酰胺加鉑類藥為主的CP方案。環(huán)磷酰胺(CTX)600mg·m-2，靜注，d1；阿霉素(ADM)40～60mg·m-2，靜注 周劑量紫杉醇聯(lián)合異環(huán)磷酰胺治療晚期非小細胞肺癌 23例 許紅霞，聶春蘭，洪專 中國肺癌雜志2004年02期 評價周劑量紫杉醇與異環(huán)磷酰胺聯(lián)合化療治療晚期非小細胞肺癌的療效和安全性。方法紫杉醇50～65mg/m2靜脈滴注，第1、8、15天，異環(huán)磷酰胺1.3g/m2靜脈注射，第2～4天。每28天重復，2～3周期為一療程。使用紫杉醇前常規(guī)給予抗過敏等處理，異環(huán)磷酰胺使用后第0、4、8小時給予美安解毒。結(jié)果本組完全緩解1例，部分緩解8例，穩(wěn)定11例，進展3例，總有效率為39.1％(9/23)，臨床受益率為87.0％(20/23)?；熀驥PS評分顯著提高(P＜0.01)。隨防20例，中位生存期為8.9月，1年生存率為40％(8/20)。全組毒性反應主要為血液學毒性和消化道反應，其中白細胞降低發(fā)生率為69.6％ 卡莫氟與阿霉素和環(huán)磷酰胺聯(lián)合化療治療晚期乳腺癌 何雪娟，金小民，孫巖 中國腫瘤2003年05期觀察卡莫氟聯(lián)合阿霉素、環(huán)磷酰胺治療35例晚期乳腺癌的療效及副作用。而將環(huán)磷酰胺制成脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體未見推薦。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體及其制備方法，以改善環(huán)磷酰胺難溶于水，口服吸收差，且生物利用度低。
本發(fā)明是由環(huán)磷酰胺與磷脂加膽固醇，也可不加膽固醇等輔料制備而成的(納米)脂質(zhì)體。制備方法可以采用前體脂質(zhì)體法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、PH梯度法、擠出法、機械法等制備脂質(zhì)體和納米脂質(zhì)體的各種方法。機械法可為乳勻機、高壓乳勻機、納米機、勻漿機、高壓微射流等各種機械設備制備脂質(zhì)體的方法。制備脂質(zhì)體的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氫化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出法、機械法制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，其組成包括環(huán)磷酰胺磷脂、膽固醇、VE等輔料。其中磷脂與環(huán)磷酰胺的重量比為0.1∶1～50∶1，膽固醇與磷脂的重量比為0～2∶1。
通過前體脂質(zhì)體法制備脂質(zhì)體的處方為環(huán)磷酰胺、支持劑、磷脂、膽固醇、VE等。磷脂與環(huán)磷酰胺的重量比為0.1∶1～50∶1，膽固醇與磷脂的重量比為0～2∶1，支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～500∶1。支持劑可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等所用可用于凍干支持劑的藥用材料或藥用輔料。制備前脂質(zhì)體的方法，可以采用減壓旋轉(zhuǎn)薄膜法、噴霧干燥法、流化床法或凍干法等各種造粒方法和干燥及包衣方法。前體脂質(zhì)體使用前加水或緩沖液通過振搖、攪拌、超聲水化形成脂質(zhì)體，或制備成膠囊劑、片劑、顆粒劑等。在消化道中遇水直接自發(fā)形成脂質(zhì)體。
用環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體(或前體脂體)可以制成片劑、口服液、口服乳、膠囊劑、顆粒劑、注射液、凍干粉針、輸液乳劑、微乳劑、粉針劑等劑型。
本發(fā)明的優(yōu)點是改善環(huán)磷酰胺口服吸收差，生物利用度低的不足，利用磷脂作膜材，將環(huán)磷酰胺制成脂質(zhì)體，磷脂能與環(huán)磷酰胺發(fā)揮協(xié)同和輔助作用，提高環(huán)磷酰胺的療效。
具體實施例方式本發(fā)明的具體制備方法，由下列實施實例舉例說明，但本發(fā)明的保護范圍，不局限于此。
實施例1乙醇注入法制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體取大豆磷脂，膽固醇，VE加無水乙醇溶解后注入環(huán)磷酰胺水溶液中，恒溫高速攪拌，減壓蒸發(fā)除去乙醇，過微孔濾膜整粒，即得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，包封率可達66.8％。
實施例2薄膜分散法制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體取大豆磷脂，膽固醇，VE用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器上減壓成膜并除盡有機溶劑，加10ml環(huán)磷酰胺水溶液水化，過微孔濾膜整粒，得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，包封率可達63.1％。
實施例3反相蒸發(fā)法制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體稱取大豆磷脂、膽固醇、VE加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml環(huán)磷酰胺的磷酸鹽緩沖液中，浴式超聲使形成均一單相體系，減壓蒸發(fā)去除氯仿乙醚至凝膠形成，繼續(xù)減壓蒸發(fā)5～10分鐘，渦旋振蕩至水性懸濁液即脂質(zhì)體形成。包封率可達33.5％。
實施例4減壓旋轉(zhuǎn)薄膜法制備環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體取山梨醇和環(huán)磷酰胺以等量遞加法混合均勻后置于100ml茄形瓶中，于一經(jīng)改良的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓預熱30分鐘，取大豆磷脂、膽固醇、VE適量溶于乙醇液，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。在乙醇液全部加完后繼續(xù)減壓蒸發(fā)30～40分鐘，將粉末取出置于干燥器中過夜后過篩(40目，450μm)，即得環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體。包封率可達32.8％。
實施例5流化床法制備環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體山梨醇和環(huán)磷酰胺以等量遞加法混合均勻后置于流化床中，取大豆磷脂、膽固醇、VE適量溶于無水乙醇中，通過流化床沸騰一步制粒，過篩，即得環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體。
實施例6流化床法制備環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體環(huán)磷酰胺加蒸餾水，再加0.1N NaOH調(diào)PH使溶解，用蒸餾水調(diào)整體積(A液)；另取大豆磷脂、膽固醇、VE溶于無水乙醇中，通過流化床沸騰一步制粒，過20目和60目篩，即得環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體顆粒。
實施例7噴霧干燥法制備環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體環(huán)磷酰胺加水，0.1N NaOH調(diào)PH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、膽固醇、VE溶于100ml無水乙醇中(B液)。將B液在攪拌下緩慢加入A液中，噴霧干燥制粒，過篩，即得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體。
實施例8乙醇注入法、薄膜分散法制備的脂質(zhì)體，噴霧干燥，即得環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體。
實施例9由前體脂質(zhì)體制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體。取實施例7制得的前體脂質(zhì)體2g，，加水10ml振搖10分鐘并水化，即得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，顯微鏡放大1000倍觀察可看到脂質(zhì)體。
實施例10冷凍干燥法制備環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體大豆磷脂、膽固醇、適量VE加無水乙醇溶解后在高速攪拌緩慢注入環(huán)磷酰胺水溶液中，減壓蒸發(fā)除去乙醇。冷凍干燥24小時，得環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體。
實施例11將環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體過0.22μm微孔濾膜滅菌，充氮氣，灌封，得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體注射液。
實施例12將環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體加入10％蔗糖，過0.22μm微孔濾膜滅菌，分裝，冷凍干燥，得粉針劑。
實施例13將環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體過篩，分裝，得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體顆粒劑。
實施例14將環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體過篩，裝膠囊，得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體膠囊劑。
實施例15將環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體過篩，壓片，得環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體片劑。
本發(fā)明不限于以上所述的實施例。
權利要求
1.環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體及其制備方法，其特征在于由環(huán)磷酰胺與磷脂等輔料制備而成的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體。
2.根據(jù)權利要求1所述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，其特征在于其中可以加入膽固醇和支持劑。
3.根據(jù)權利要求1所述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于膜材磷脂可以采用天然磷脂，也可以是采用氫化大豆磷脂和合成磷脂等。
4.根據(jù)權利要求1所述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于磷脂與藥物的重量比為0.1∶1～50∶1。
5.根據(jù)權利要求2述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于支持劑可以山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等，其中支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～500∶1。
6.根據(jù)權利要求1所述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于用該脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可制得膠囊劑、片劑、顆粒劑、注射液、口服液、凍干粉針、輸液等劑型。
7.一種如權利要求1所述的環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于制備方法可以采用前體脂質(zhì)體法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出儀、機械法，PH梯度法等；機械法包括使用均質(zhì)機、乳勻機、擠出機、納米機、勻漿機、高壓微射流等各種機械設備制備脂質(zhì)體的方法。
8.一種如權利要求7所述的環(huán)磷酰胺前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于采用前體脂質(zhì)體法制備環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體，先制備前體脂質(zhì)體，由制備的前體脂質(zhì)體在使用前形成脂質(zhì)體，或前體脂質(zhì)體制備成膠囊劑、片劑、顆粒劑等，在消化道中遇水直接自發(fā)形成脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明是環(huán)磷酰胺脂質(zhì)體及其制備方法，它克服了環(huán)磷酰胺口服吸收差，生物利用度低的缺點，提高了制劑的穩(wěn)定性。由環(huán)磷酰胺與磷脂、膽固醇等輔料制備而成的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其中還可加入支持劑等輔料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂與藥物的重量比為0.1∶1～ 50∶1。制備方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出法、機械法，支持劑可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等。支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～500∶1。CTX為潛伏化型氮芥類藥物，體外無抗瘤活性，進入體內(nèi)被肝臟或腫瘤組織內(nèi)存在的過量磷酰胺酶或磷酸酶水解，釋放出氮芥基而起抗腫瘤作用。
文檔編號A61P35/00GK1775218SQ20041009082
公開日2006年5月24日 申請日期2004年11月15日 優(yōu)先權日2004年11月15日
發(fā)明者胡才忠 申請人:胡才忠