專利名稱：神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抑郁癥是一種以持久的心境低落為主要臨床特征的、病程遷延的神經(jīng)癥。常伴有焦慮、身體不適和睡眠障礙等?，F(xiàn)代社會中這種病發(fā)病率高，能嚴重危害人類身心健康且具有高自殺風險的精神性疾病。隨著社會競爭的日益劇烈，在日常生活、學習和工作中，人們承受的生理、心理壓力越來越大，抑郁癥的發(fā)病率有不斷升高的趨勢，且給家庭和社會帶來了巨大的負擔。
常用的抗抑郁藥主要是三環(huán)類抗抑郁藥(TCA)，其產(chǎn)生作用的原因是增加神經(jīng)細胞突觸間隙中的NE(去甲腎上腺素)和5-HT(5羥色胺)這兩種神經(jīng)遞質(zhì)，使抑郁癥狀得以好轉(zhuǎn)。但它們都有一些嚴重的副作用，如便秘、視物模糊、排尿困難、尿儲留，少數(shù)可發(fā)生震顫或癲癇發(fā)作等。同時三環(huán)類抗抑郁藥存在許多治其它的缺點，如治療的有效率低；奏效較慢，一般在2周左右起效，對于重癥病人來說，療效尚未出現(xiàn)時，不良反應(yīng)卻先出現(xiàn)，常在此1周～2周內(nèi)不肯堅持服藥，甚至在這段時期中發(fā)生自殺行為，因而影響了其使用。新型的抗抑郁藥四環(huán)類抗抑郁藥(以麥普替林為代表)、不抑制胺攝取藥(以米安舍林為代表)和血清素攝取抑制劑(以氟西汀為代表)盡管這些新型抗抑郁藥較傳統(tǒng)抗抑郁藥的藥效強、毒副作用減弱，但仍然難免有心血管、錐體外系及神經(jīng)等系統(tǒng)的副作用，而且患者容易產(chǎn)生耐藥性，病情易復發(fā)，給治療帶來一定困難。
早在40年代末，Bucker發(fā)現(xiàn)小鼠肉瘤S180細胞刺激正在發(fā)育的3日齡雞胚體壁的感覺神經(jīng)和交感神經(jīng)的生長，而相應(yīng)的感覺神經(jīng)節(jié)的體積也明顯增大，提示S180可能產(chǎn)生一種促進上述神經(jīng)發(fā)育生長的活性大分子。50年代，Levi-Montalcini和Cohen一起從蛇毒和小鼠頜下腺分離純化到這種活性大分子，根據(jù)其理化性質(zhì)和生物學作用將其命名為神經(jīng)生長因子(NGF)。之后對其分子結(jié)構(gòu)及外周神經(jīng)系統(tǒng)的生物效應(yīng)進行了深入的研究，小鼠、蛇毒和人NGF的生化性質(zhì)，氨基酸組成序列逐步得到闡明，證實NGF是神經(jīng)系統(tǒng)最重要的生物活性分子之一，是中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)交感神經(jīng)元、感覺神經(jīng)元及膽堿能神經(jīng)元分化、發(fā)育、維持正常功能必不可少的營養(yǎng)分子。
NGF對神經(jīng)系統(tǒng)主要有以下作用(1)神經(jīng)發(fā)育期促進神經(jīng)元分化的作用；(2)正常情況下神經(jīng)的營養(yǎng)作用；(3)對神經(jīng)遞質(zhì)合成的調(diào)節(jié)作用；(4)損傷情況下，在神經(jīng)損傷的早期，對損傷神經(jīng)具有保護作用，恢復期則促進神經(jīng)再生和神經(jīng)功能的恢復；(5)對神經(jīng)元凋亡的調(diào)控作用。
目前NGF的臨床應(yīng)用主要是治療神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不良，包括弱視、腫瘤包括雪旺氏細胞瘤、神經(jīng)纖維瘤等神經(jīng)瘤、黑色素細胞瘤；神經(jīng)萎縮，包括視神經(jīng)萎縮、青光眼、早老性癡呆、亨丁頓氏千蹈病、神經(jīng)性耳聾、腦萎縮；神經(jīng)修復，包括各種神經(jīng)損傷，如腦外傷后的恢復和后遺癥、脊髓損傷、斷肢再植、脊髓移植、腦梗塞、腦血管意外等；神經(jīng)系變性疾病，包括運動神經(jīng)元病、帕金森氏病、脊髓小腦變性等，尚未有研究顯示NGF具有治療抑郁癥的功能。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用。
抑郁癥是以顯著而持久的抑郁情感或心境改變?yōu)橹饕卣鞯囊唤M疾病，也是與應(yīng)激密切相關(guān)的一類精神病。在研究中我們發(fā)現(xiàn)，實驗性抑郁癥大鼠海馬神經(jīng)元有損傷；實驗性抑郁癥大鼠海馬區(qū)神經(jīng)生長因子含量及其mRNA表達減少，提示內(nèi)源性NGF減少可能是海馬神經(jīng)元受損的原因之一。因此推測給予外源性NGF可能對海馬神經(jīng)元損傷起一定的保護和修復作用，從而改善抑郁癥的行為。通過臨床試驗，我們的推測得到了證實。
本發(fā)明所述的神經(jīng)生長因子的劑型采用注射劑或經(jīng)鼻粘膜給藥的制劑劑型，以避免肝臟的首過效應(yīng)(first-pass effect)。
注射劑包括溶液型注射劑、混懸型注射劑、乳劑型注射劑、注射用凍干粉針和注射用無菌粉末。注射劑給藥的劑量為每日0.01μg-500μg，相當于10-20000AU，優(yōu)選范圍為0.1-50μg，相當于100-10000AU，可靜脈注射、肌肉注射及皮下注射。
鼻粘膜給藥劑型包括鼻噴霧劑、滴鼻劑、鼻用溶液、鼻塞劑和鼻氣霧劑。鼻粘膜給藥劑量為每日0.005-100μg，相當于5-20000AU；優(yōu)選范圍為0.01-50μg，相當于10-10000AU，可噴鼻、滴鼻。
本發(fā)明的優(yōu)點是1)有效治療抑郁癥與目前治療抑郁癥的許多藥物相比，神經(jīng)生長因子能直接作用于抑郁癥時受損的神經(jīng)元，促進其存活和自身的功能恢復，改善患者的抑郁癥狀；2)無明顯不良反應(yīng)與現(xiàn)有的藥物相比，本研究中未發(fā)現(xiàn)NGF有明顯的不良反應(yīng)；因此利用神經(jīng)生長因子治療抑郁癥具有很好的社會及市場前景。
下面結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明作進一步說明，凡依照本發(fā)明的提示所進行的任何本領(lǐng)域的等同替換均屬于本發(fā)明的保護范圍。
具體實施例方式
實施例1、藥效學實驗一、病例和試驗方法1.病例入選標準符合美國精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊第4版(DSM-IV)及國際疾病分類第10版精神和行為障礙分類中的抑郁診斷標準；年齡17～70歲；漢密爾頓抑郁量表(Hamilton Rating Scale of Depression，HAMD)評分20分以上；軀體和實驗室檢查正常，患者有自知力并能簽署知情同意書。
2.給藥方法將神經(jīng)生長因子(舒泰神藥業(yè)(北京)有限責任公司生產(chǎn))制成30ug/ml的溶液，鼻腔給藥，每次0.2ml，3.臨床評定工具于治療前及治療過程中每2周對所有患者評定HAMD抑郁量表，Asberg抗抑郁藥副作用量表，抑郁自評量表(Self-rating Depression Scalt，SDS)，臨床總體印象量表(Clinical Global Impression，CGI)。
4.統(tǒng)計學分析采用末次觀察延伸法(Last Observation Carried Forward，LOCF)將全部資料用SPSS8.0軟件進行分析。
二、結(jié)果與結(jié)論1.結(jié)果通過6周的治療，于第6周末對試驗資料進行統(tǒng)計，結(jié)果如表1、表2和表3所示表1 神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑治療前后HAMD總分比較

注HAMD為漢密爾頓抑郁量。
表2 患者經(jīng)神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑治療前后SDS評分的比較

注SDS為抑郁自評量表。
表3 患者經(jīng)神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑治療前后CGI嚴重程度和總體進步的

注CGI為臨床總體印象量表。
治療前后Asberg量表評分的比較治療第6周末時，神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑組Asberg量表分為(3.45±1.23)，安慰劑組Asberg量表評分為(5.65±4.56)。
2.結(jié)論通過以上比較可知，患者在使用神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑與安慰劑前后HAMD、SDS和CGI減分率看，神經(jīng)生長因子應(yīng)用前后有明顯的統(tǒng)計學差異，提示神經(jīng)生長因子治療抑郁癥療效確切，作用可靠。實驗過程中，未見神經(jīng)生長因子鼻噴霧劑組出現(xiàn)任何副作用，與安慰劑組無差別。
實施例2、安全性試驗一、急性毒性試驗1.藥物神經(jīng)生長因子(舒泰神藥業(yè)(北京)有限責任公司生產(chǎn))凍干粉，臨用時用生理鹽水配制成注射液。
2.動物上海種小鼠(購于軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心)，20只，雌雄各半。
小鼠靜脈注射NGF，容量為0.17ml/10g，劑量為10萬單位/公斤體重，給藥后連續(xù)觀察14天，未見動物出現(xiàn)異常表現(xiàn)，亦未發(fā)現(xiàn)死亡動物。故小鼠靜脈注射神經(jīng)生長因子的半數(shù)致死量大于10萬單位/公斤體重。
二、長期毒性實驗1.藥物神經(jīng)生長因子(舒泰神藥業(yè)(北京)有限責任公司生產(chǎn))凍干粉，臨用時用生理鹽水配制成注射液。
2.動物Wistar大鼠(購于軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心)，20只，雌雄各半。
大鼠肌肉注射NGF，劑量為2萬單位/公斤體重，每天一次，連續(xù)給藥12周，共檢測8項生理指標、8項血液學指標、13項血液生化指標、20多種組織臟器及注射部位的病理學檢查，均未發(fā)現(xiàn)有毒理意義的變化，表明該藥的安全范圍是比較大的。
三、生殖毒性試驗1.藥物神經(jīng)生長因子(舒泰神藥業(yè)(北京)有限責任公司生產(chǎn))凍干粉，臨用時用生理鹽水配制成注射液。
2.動物昆明種小鼠(購于軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心)，20只，雌雄各半。
(一)一般生殖毒性試驗小鼠肌肉注射，劑量為4000、8000、16000單位/公斤體重/日，按一般毒性試驗的規(guī)范要求進行試驗和檢查。試驗結(jié)果表明，試驗期間，小鼠體重增長正常，生長發(fā)育良好，胎仔外觀、骨骼及內(nèi)臟均未見畸形，雌性小鼠受孕率正常。
(二)致畸敏感期毒性試驗小鼠肌肉注射，劑量為4000、8000、16000單位/公斤體重/日，按致畸敏感期毒性試驗的規(guī)范要求進行試驗和檢查。試驗結(jié)果表明，試驗期間，小鼠體重增長正常，生長發(fā)育良好，胎仔外觀、骨骼及內(nèi)臟均未見畸形。
四、全身過敏試驗1.藥物神經(jīng)生長因子(舒泰神藥業(yè)(北京)有限責任公司生產(chǎn))凍干粉，臨用時用生理鹽水配制成液體。
2.動物成熟健康豚鼠(購于軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心)，8只，雄性。
豚鼠口服，劑量為85ug/只，隔日1次，共3次致敏后，首次給藥14天膠21天以靜脈注射每只豚鼠170ug劑量攻擊，注射后未見異常表現(xiàn)。表明在本試驗條件下，神經(jīng)生長因子無全身過敏反應(yīng)。
通過上述神經(jīng)生長因子的急性毒性、長期毒性、生殖毒性及全身過敏試驗未見致毒、致畸、致敏等毒性作用，安全使用的范圍大。
權(quán)利要求
1.神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述神經(jīng)生長因子為注射劑或經(jīng)鼻粘膜給藥劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述注射劑包括溶液型注射劑、混懸型注射劑、乳劑型注射劑、注射用凍干粉針和注射用無菌粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述經(jīng)鼻粘膜給藥劑型包括鼻噴霧劑、滴鼻劑、鼻用溶液、鼻塞劑和鼻氣霧劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了神經(jīng)生長因子在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明的優(yōu)點是1)有效治療抑郁癥與目前治療抑郁癥的許多藥物相比，神經(jīng)生長因子能直接作用于抑郁癥時受損的神經(jīng)元，促進其存活和自身的功能恢復，改善患者的抑郁癥狀；2)無明顯不良反應(yīng)與現(xiàn)有的藥物相比，本研究中未發(fā)現(xiàn)NGF有明顯的不良反應(yīng)；因此利用神經(jīng)生長因子治療抑郁癥具有很好的社會及市場前景。
文檔編號A61K38/18GK1698882SQ20041004255
公開日2005年11月23日 申請日期2004年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月21日
發(fā)明者周志文, 馮宇霞, 張洪山 申請人:舒泰神(北京)藥業(yè)有限公司