專利名稱：治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染的藥物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制劑領(lǐng)域，涉及一種治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的藥物，同時(shí)涉及制備該藥物的中間體黃蜀葵花總黃酮提取物的制備方法，以及黃蜀葵花總黃酮提取物各種制劑的制備方法。其劑型包括片劑、貼片劑、膜劑、噴霧劑、凝膠劑、散劑、溶液劑、粉霧劑、膠囊劑、滴丸、軟膠囊、顆粒劑、糖漿劑、口服液、注射液以及其他劑型。
背景技術(shù)：
口腔潰瘍，中醫(yī)稱為口瘡，為口腔粘膜疾病中最常見的疾病，其臨床表現(xiàn)為口腔粘膜反復(fù)出現(xiàn)孤立的圓形或橢圓形的淺表性潰瘍，以局部有明顯的灼熱疼痛為口瘡主癥，并且口瘡可發(fā)生于口腔粘膜任何部位。目前臨床上經(jīng)常使用西藥一般是對(duì)癥或免疫藥物治療，其復(fù)發(fā)率較高，療效較差。如意可貼、西咪替丁，表皮生長因子等，其療效均不十分理想。燒燙傷是由于外界物理化學(xué)因素對(duì)人體體表皮膚及粘膜造成急性損傷的疾病，其臨床表現(xiàn)為創(chuàng)面疼痛紅腫，創(chuàng)面感染等。胃潰瘍是消化系統(tǒng)常見的疾病，屬于祖國醫(yī)學(xué)的“胃脘痛”等范疇，其臨床表現(xiàn)為上腹部疼痛，胃粘膜損傷或局部胃粘膜缺血壞死而致潰瘍。西藥治療副作用較大，長期服用也會(huì)對(duì)身體其它器官產(chǎn)生危害，并且不能根除，易于復(fù)發(fā)。因此應(yīng)用中醫(yī)中藥治療口腔潰瘍、燒燙傷、胃潰瘍、外傷感染(瘡癤)是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域一項(xiàng)重要的課題。近年來，中醫(yī)藥在治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)等方面已有很大的進(jìn)展。
黃蜀葵花為錦葵科植物黃蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic的干燥花，又名秋葵、甲花、側(cè)金盞、水棉花等，古代為著名的一種觀賞花卉，作為藥用始于宋代，其味甘、辛，性涼。我國古代醫(yī)藥學(xué)家對(duì)黃蜀葵花的功用有詳細(xì)的闡述?！都斡颖静荨酚涊d黃蜀葵花“甘、寒、滑、無毒，主治小便淋及催生，治諸惡瘡、膿水久不痤者，作末敷之即愈，為瘡家要藥?！薄侗静菥V目》“消癰腫，浸油，涂湯火傷?！薄侗静菅芰x》“瘡家為要藥”?！端拇ǔＳ弥嗅t(yī)藥》“下乳，排膿，通血脈，解瘡毒。治燙傷”。我國古代也有用黃蜀葵花治療口腔潰瘍的記載，《直指方》小兒口瘡，燒末敷之，具有良好的清熱利濕解毒功效。據(jù)現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)報(bào)道該藥具有明顯的抗炎，抗菌，鎮(zhèn)痛，促進(jìn)愈合等藥理作用。實(shí)驗(yàn)表明黃蜀葵花乙醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌等革蘭氏陽性菌及陰性菌均有很好的抑菌效果；并表明黃蜀葵花治療口腔潰瘍、燒燙傷、胃潰瘍、外傷感染(瘡癤)有其科學(xué)的理論基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于利用黃蜀葵花研究一種新的藥物，將其作為治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的藥物。
本發(fā)明的另一目的在于提供從黃蜀葵花中提取分離用于治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的總黃酮有效部位的提取制備方法。
本發(fā)明的又一目的在于提供該黃蜀葵花總黃酮提取物制備成各種口服及外用劑型的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是將黃蜀葵花用10～95％醇提工藝進(jìn)行提取1～2次，提取時(shí)間1～4小時(shí)，醇提液濃縮成濃縮液后水沉，濾過，濃縮成濃縮液(d＝1.13～1.16，60℃)；或醇提液減壓回收乙醇，濃縮成濃縮液(d＝1.13～1.16，60℃)；將上述兩種濃縮液加水稀釋后通過以下三種柱層析分離提取有效部位，1.提取液通過大孔吸附樹脂柱，采用醇水梯度洗脫[水～(10％乙醇～90％乙醇)]，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到黃蜀葵花提取物，總黃酮含量為5～95％；2.提取液通過聚酰胺柱，采用醇水梯度洗脫[水～(10％乙醇～90％乙醇)]，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，總黃酮含量為5～95％；3.提取液拌樣后通過硅膠柱，采用氯仿-甲醇梯度洗脫，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，總黃酮含量為5～95％；總黃酮提取物通過加入輔料和防腐劑制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、滴丸、軟膠囊、糖漿劑、注射液、溶液劑、凝膠劑、噴霧劑、粉霧劑、貼片劑、膜劑等制劑。本發(fā)明不同劑型中加入的不同輔料，并不影響本發(fā)明的臨床效果，這些輔料包括卡波姆、卡波姆鈉鹽、羥丙甲纖維素、乙基纖維素、淀粉、微晶纖維素、硬脂酸鎂、糊精、乳糖、碳酸鎂、氧化鎂、吐溫80、甘油、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、葡萄糖、滑石粉、甲基纖維素、羥甲基纖維素、苯甲酸、山梨酸、尼泊金乙酯(甲酯)等。因此本發(fā)明可以滿足廣大口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)患者對(duì)不同劑型的要求。
本發(fā)明技術(shù)方案中，從黃蜀葵花中所得到的總黃酮含量為5～95％的黃蜀葵花提取物，其提取分離制備工藝不僅局限于上述工藝，亦可采用其他提取分離手段得到。
利用上述工藝得到的黃蜀葵花總黃酮提取物中的總黃酮含量為5～95％，經(jīng)檢測其各組成成分如下1.黃蜀葵花總黃酮提取物經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析、聚酰胺柱層析、重結(jié)晶得到如金絲桃苷(hyperin)、楊梅素(myricetin)、槲皮素(quercetin)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(1-6)-β-D-半乳糖(quercetin-3-O-α-L-rhamno-pyranosy(1-6)-β-D-galactopyranoside)、槲皮素-3`-葡萄糖苷(quercetin-3`-glucoside)等黃酮及其苷類化合物。
2.黃蜀葵花總黃酮總黃酮提取物干燥后，總黃酮含量按《中國藥典》2000年版一部第292頁[含量測定]項(xiàng)下方法測定，本品含總黃酮(以蘆丁計(jì))為5～95％。
2.1黃蜀葵花總黃酮提取物干燥后，經(jīng)測定金絲桃苷(hyperoside)含量在0.5％～95％。
2.2黃蜀葵花總黃酮提取物干燥后，經(jīng)測定楊梅素(myricetin)含量在0.5％～95％。
2.3黃蜀葵花總黃酮提取物干燥后，經(jīng)測定槲皮素(quercetin)含量在0.5％～95％。
2.4黃蜀葵花提取物干燥后，經(jīng)測定槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(1-6)-β-D-半乳糖(quercetin-3-O-α-L-rhamno-pyranosy(1-6)-β-D-galacto-pyranoside)含量在0.5％～95％。
2.5黃蜀葵花提取物干燥后，經(jīng)測定槲皮素-3′-葡萄糖苷(quercetin-3′-glucoside)含量在0.5％～95％。
另外還包括十余種其他黃酮及其苷類成分。部分化學(xué)成分結(jié)構(gòu)式如下 槲皮素 楊梅素 金絲桃苷 槲皮素-3′-葡萄糖苷 槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(1-6)-β-D-半乳糖本發(fā)明的使用方法口服，每日1～2次，每次1～2片片劑(或2～4粒膠囊；1～2支口服液)；注射液每日一次，每次1～2支；外用每日2～3次，每次1～2片膜劑，或1～2片貼片劑，或每日噴于患處多次，或每日涂于患處多次，或?qū)⑸┓笥诨继帯?br> 下面用藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果闡明其藥效作用
1.觀察黃蜀葵花總黃酮提取物對(duì)醋酸致傷、機(jī)械損傷和細(xì)菌感染建立的三種兔口腔潰瘍模型的藥效作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表。
表1 不同給藥時(shí)間醋酸致潰瘍縮小百分率(％)組別 給藥3天 給藥6天 給藥9天總黃酮陰性對(duì)照13.536.863.5總黃酮陽性對(duì)照34.159.987.3總黃酮大劑量組35.264.686.0總黃酮中劑量組23.053.572.5總黃酮小劑量組26.947.973.4表2 不同給藥時(shí)間機(jī)械致潰瘍縮小百分率(％)動(dòng)物數(shù) 藥后 藥后 藥后 藥后 藥后組別(只) 2天 3天 4天 5天 6天陰性對(duì)照 523.8 49.8 75.6 93.7 99.7陽性對(duì)照 550.4 81.3 94.0 99.5 100總黃酮大劑量組545.2 75.4 91.7 99.5 100總黃酮中劑量組545.2 73.5 91.1 99.4 99.5總黃酮小劑量組535.0 61.3 79.9 95.5 99.6表3不同給藥時(shí)間細(xì)菌致潰瘍縮小百分率(％)給藥給藥 給藥 給藥 給藥 給藥 給藥組別2天 3天 4天 5天 6天 7天8天陰性對(duì)照 16.435.6 49.7 70.6 84.2 88.7 92.1陽性對(duì)照 35.850.9 85.6 98.3 99.3 100.0 100.0總黃酮大劑量組34.957.8 83.7 91.6 97.6 100.0 100.0總黃酮中劑量組18.732.3 66.7 91.9 96.5 98.0 99.0總黃酮小劑量組6.8 15.2 50.3 79.1 87.4 92.7 93.7藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃蜀葵花總黃酮提取物對(duì)三種家兔口腔潰瘍模型均有明顯的治療作用(P＜0.05)。
2.采用平皿二倍稀釋法測定了黃蜀葵花提取物對(duì)臨床分離的90株細(xì)菌進(jìn)行了抗菌抑菌試驗(yàn)。結(jié)果見表4。
表4總黃酮提取物對(duì)90株細(xì)菌的MIC測定MIC范圍 MIC50 MIC90細(xì)菌 株數(shù) 藥物(mg/ml) (mg/ml) (mg/ml)金黃色葡萄球菌 20總黃酮提取物0.03125-4 0.5 4西瓜霜 0.25-16 4 16表皮葡萄球菌 10總黃酮提取物0.0625-81 4西瓜霜 0.125-161 8大腸桿菌 20總黃酮提取物0.015625-8 0.5 4西瓜霜 0.25-16 4 16綠膿桿菌 20總黃酮提取物1-648 64西瓜霜 4-641664變形桿菌 15總黃酮提取物0.25-16 4 16西瓜霜 0.0625-42 4克氏肺炎桿菌 15總黃酮提取物0.5-16 4 16西瓜霜 0.2-32 1632抗菌試驗(yàn)結(jié)果顯示黃蜀葵花總黃酮提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)中的革蘭氏陽性及陰性菌均具有較強(qiáng)的殺滅或抑制作用，抗菌譜較為廣泛。
3.采用熱板法和小鼠扭體法測定了黃蜀葵花總黃酮提取物的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果見表5。
表5.對(duì)小鼠熱板致痛的影響(n＝10)
劑量藥后不同時(shí)間(秒鐘) 痛閾值(s，X±SD)組別(mg/kg) 90 120 150陰性對(duì)照 - 19.3±4.74 18.8±3.52 20.1±4.31陽性對(duì)照 500 25.6±7.23*23.8±5.35*20.6±3.13總黃酮大劑量組500 28.0±9.60*24.1±6.26*22.1±4.56總黃酮中劑量組250 25.4±6.57*23.7±4.60*20.7±4.03總黃酮小劑量組125 21.8±4.52 21.1±4.53 21.0±5.19*分別與空白對(duì)照組相比P＜0.05結(jié)果表明黃蜀葵花總黃酮提取物具有一定的鎮(zhèn)痛作用。
綜上所述，黃蜀葵花提取物可以明顯的促進(jìn)潰瘍面的愈合，并具有較好的抑菌作用和一定的鎮(zhèn)痛作用，從而對(duì)口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)具有良好的治療作用。


附圖為黃蜀葵花總黃酮提取物高效液相圖。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)黃蜀葵花提取物的提取方法作進(jìn)一步詳述。
實(shí)施例1將黃蜀葵花20kg置提取罐中，加80％乙醇15倍量，提取二次，每次1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成相對(duì)密度為1.13～1.16(60℃)的濃縮液；加入適量水稀釋，通過大孔吸附樹脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10％及30％乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70％乙醇洗脫1個(gè)柱體積。洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，其總黃酮含量為5～95％。
實(shí)施例2將黃蜀葵花20kg置提取罐中，加70％乙醇適量，提取二次，每次1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成相對(duì)密度為1.13～1.16(60℃)的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過大孔吸附樹脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10％及30％乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70％乙醇洗脫1個(gè)柱體積。洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，其總黃酮含量為5～95％。
實(shí)施例3將黃蜀葵花20kg置提取罐中，加60％乙醇20倍量，提取二次，每次1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成相對(duì)密度為1.13～1.16(60℃)的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過聚酰胺柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10％及30％乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70％乙醇洗脫1個(gè)柱體積。洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，其總黃酮含量為5～95％。
實(shí)施例4將黃蜀葵花20kg置提取罐中，加90％乙醇14倍量，提取二次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成相對(duì)密度為1.13～1.16(60℃)的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至稠膏，拌樣，采用硅膠柱層析，采用氯仿-甲醇(0.5∶99.5～50∶50)梯度洗脫，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮提取物，其總黃酮含量為5～95％。
實(shí)施例5片劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉加入230g淀粉，混勻，制粒，過篩，加2g硬脂酸鎂，混勻，壓片，即為本發(fā)明的片劑。
實(shí)施例6膠囊劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉加入230g淀粉，混勻，制粒，過篩，裝膠囊，即為本發(fā)明的膠囊劑。
實(shí)施例7顆粒劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉加入乳糖100g，糊精300g，制粒，整粒，過篩，制成顆粒，即成本發(fā)明的顆粒劑。
實(shí)施例8散劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉研細(xì)，加入50g糊精，過篩，即成本發(fā)明的散劑。
實(shí)施例9溶液劑取上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉研細(xì)，加蒸餾水100ml，加甘油50g，攪拌使溶，再加入適量蒸餾水，即成本發(fā)明的溶液劑。
實(shí)施例10糖漿劑取上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉研細(xì)，加蒸餾水100ml，加甘油50g，攪拌使溶，加單糖漿至1000ml，即成本發(fā)明的糖漿劑。
實(shí)施例11注射液將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物中，加入600ml蒸餾水，水沉(0～-2℃)48小時(shí)，微孔濾膜濾過，灌裝，即為本發(fā)明的注射液。
實(shí)施例12貼片劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉加入200g羥丙甲纖維素、100g卡波姆、100g卡波姆鈉鹽，混勻，制粒，烘干，過篩，加入3.0g硬脂酸鎂，混勻，壓片，二次壓片，壓制隔離層，即為本發(fā)明的貼片實(shí)施例13膜劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉中加入1％卡波姆，2％羥丙甲纖維素，2％羧甲基纖維素鈉，5％甘露醇，5％聚乙二醇，制膜，即成本發(fā)明的膜劑。
實(shí)施例14凝膠劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花總黃酮提取物干粉中加入PEG-400、甘油、交聯(lián)型聚丙烯酸鈉、水至研缽中，研勻后加水至1000g，即成本發(fā)明的膜劑。
實(shí)施例15噴霧劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花提取物干粉中加入丙二醇50ml，無菌蒸餾水500ml，充分混勻，裝入噴霧器或霧化器中，即成本發(fā)明的噴霧劑。
實(shí)施例16粉霧劑將上述各實(shí)施例中任何一黃蜀葵花提取物干粉中加入潤滑劑，混勻，裝入粉末霧化器，即成本發(fā)明的粉霧劑。
權(quán)利要求
1.一種治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的藥物，其特征在于所述的中藥制劑是由黃蜀葵花中提取黃蜀葵花總黃酮提取物制備而成。
2.權(quán)利要求1所述的黃蜀葵花總黃酮提取物的制備方法，其特征在于所述制劑的工藝流程為將黃蜀葵花用10～95％乙醇提工藝進(jìn)行提取，將黃蜀葵花用10～95％乙醇提工藝進(jìn)行提取1～2次，每次提取時(shí)間1～4小時(shí)，醇提液濃縮成濃縮液后水沉，水沉液濾過，濃縮成濃縮液(d＝1.13～1.16，60℃)；或醇提液減壓回收乙醇，濃縮成濃縮液(d＝1.13～1.16，60℃)；將上述兩種濃縮液加水稀釋后通過以下三種柱層析分離提取有效部位，1.提取液通過大孔吸附樹脂柱，采用醇水梯度洗脫[水～(10％～90％乙醇)]，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮含量在5～95％的黃蜀葵花總黃酮提取物；2.提取液通過聚酰胺柱，采用醇水梯度洗脫[水～(10％～90％乙醇)]，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮含量在5～95％的黃蜀葵花總黃酮提取物；3.提取液通過硅膠柱，采用氯仿-甲醇梯度洗脫，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到總黃酮含量在5～95％的黃蜀葵花總黃酮提取物。
3.權(quán)利要求1及權(quán)利要求2制劑過程中所述的黃蜀葵花總黃酮提取物，其成分包括金絲桃苷(hyperin)0.5％～95％、楊梅素(myricetin)0.5％～95％、槲皮素(quercetin)0.5％～95％、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(1-6)-β-D-半乳糖(quercet in-3-O-α-L-rhamno-pyranosy(1-6)-β-D-galacto-pyranoside)0.5％～95％、槲皮素-3｀-葡萄糖苷(quercetin-3｀-glucoside)0.5％～95％，以及其他十幾種黃酮類成分。
4.權(quán)利要求1所述的中藥制劑，其特征在于是由總黃酮含量為5～95％黃蜀葵花總黃酮提取物，通過加入各種輔料，制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、口服液、溶液劑、糖漿劑、注射液、貼片劑、膜劑、噴霧劑、粉霧劑、凝膠劑、軟膏劑、口服及外用劑型，加入的輔料有卡波姆、卡波姆鈉鹽、羥丙甲纖維素、乙基纖維素、淀粉、微晶纖維素、硬脂酸鎂、糊精乳糖、碳酸鎂、氧化鎂、吐溫80、甘油、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、葡萄糖、滑石粉、甲基纖維素、羥甲基纖維素、苯甲酸、山梨酸、尼泊金乙酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療口腔潰瘍、胃潰瘍、燒燙傷、外傷感染(瘡癤)的藥物，利用黃蜀葵花總黃酮提取物作為藥物活性成分。本發(fā)明提供了黃蜀葵花總黃酮提取物的提取制備方法及黃蜀葵花總黃酮提取物不同制劑的制備方法。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1615947SQ20041003574
公開日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2004年9月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月16日
發(fā)明者張玲, 凌沛學(xué), 盧志強(qiáng), 胡慶文, 劉妍妍, 趙春榮 申請(qǐng)人:凌沛學(xué)