專利名稱：氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥的藥物組合物及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包括氨基酸鋅鹽，抗抑郁藥和/或藥用載體或賦形劑。本發(fā)明還涉及氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥或化合物混合或聯(lián)合在制備抗抑郁藥中的用途。
背景技術：
傳統(tǒng)單胺假說認為，抗抑郁劑通過增加突觸間隙單胺遞質(zhì)(去甲腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺)濃度發(fā)揮治療作用?，F(xiàn)在臨床上常用的抗抑郁劑都是作用于單胺系統(tǒng)，通過影響單胺遞質(zhì)重吸收或代謝發(fā)揮作用，如去甲腎上腺素、5-羥色胺重吸收抑制劑及單胺氧化酶抑制劑等。但現(xiàn)有抗抑郁劑起效慢，一般需要一周到兩周；尤其是大多數(shù)抗抑郁劑存在嚴重副作用；而且有20-30％病人對任何類型的抗抑郁劑不起作用。因此，提高抗抑郁劑藥效、降低毒副作用、開發(fā)新的抗抑郁藥物是十分需要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)研究現(xiàn)已出人意料發(fā)現(xiàn)將氨基酸鋅鹽與已知的抗抑郁藥聯(lián)合使用，可在保持或提高已知抗抑郁藥作用同時，明顯降低已知抗抑郁藥的用量，從而顯示出氨基酸鋅鹽與已知抗抑郁藥之間的協(xié)同作用，降低了抗抑郁藥的副作用，但氨基酸鋅鹽本身并無抗抑郁作用。本發(fā)明基于上述發(fā)現(xiàn)現(xiàn)已完成。
因此，本發(fā)明第一方面涉及一種藥物組合物，其包括氨基酸鋅鹽和抗抑郁藥。
本發(fā)明再一方面涉及氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥混合或結(jié)合在制備用于抗抑郁藥物中的用途。
本發(fā)明再一方面涉及氨基酸鋅鹽作為抗抑郁藥的增效劑。
本發(fā)明再一方面涉及治療抑郁癥的方法，其包括將氨基酸鹽與抗抑郁藥混合或聯(lián)合給于患有抑郁癥的患者。
根據(jù)本發(fā)明，適用于本發(fā)明的氨基酸鋅鹽可是任何氨基酸的鋅鹽，其包括但不限于已知的人體必需氨基酸或非必需氨基酸的鋅鹽，舉例講如組氨酸鋅。
根據(jù)本發(fā)明，適用于本發(fā)明的抗抑郁藥可是任何抗抑郁藥，其包括但不限于丙米嗪，鹽酸氟西汀或維拉發(fā)新等。
根據(jù)本發(fā)明，氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥之間的聯(lián)用比例原則上講無任何限定，但優(yōu)選抗抑郁藥的量氨基酸鋅鹽的量為1∶1-1∶3。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的氨基酸鋅鹽可市購或按本領域已知方法或文獻中相關方法制備，舉例講，組氨酸鋅可通過將氯化鋅溶于組氨酸溶液中制備。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中所述的氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥混合或聯(lián)合用藥可包括但不限于氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥混合在一起如放在一個藥盒或藥品包裝裝置中使用，或氨基酸鋅與抗抑郁藥放在不同的包裝中一起使用。進一步講，本發(fā)明所述的氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥聯(lián)用包括但不限于氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥同時使用，或分開使用如一個先用，一個后用，先用和后用的時間間隔可由本領域技術人員確定，例如立即至幾小時以內(nèi)聯(lián)用。
具體實施例方式
下面的實施例用于進一步說明本發(fā)明，但其不意味著對本發(fā)明的任何限制。
制備例1組氨酸鋅的制備將15.516mg L-組氨酸位于1000ml蒸餾水中，得L-組氨酸濃度為100μmol的水溶液。將氯化鋅75mg加入100μmol組氨酸至25ml混均，濃度為3mg/ml，再按1∶0.6的比例等比例稀釋成不同濃度的組氨酸鋅溶液。用100μmol濃度的組氨酸溶液作為溶劑對照。
下面生物活性試驗中所用材料與方法說明受試動物、受試藥品與試劑雄性昆明種小鼠(20-24g，二級，合格證號BDW95007)和Wistar大鼠(220-260g，二級，合格證號BDW95012)均由軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心提供；丙米嗪(imipramine，IMI)均購自美國Sigma公司；鹽酸氟西汀(批號931201)購于常州四藥廠；維拉發(fā)新購自浙江仙居欣宏醫(yī)藥化工有限公司；氯化鋅(ZnCl2)購于北京北化精細化學品有限公司；L-組氨酸(L-Histidine)購于北京化學試劑公司。
小鼠強迫游泳實驗原理強迫性游泳是利用動物不能逃逸出惡劣環(huán)境，造成動物行為絕望(behavioral despair)而設計的一種穩(wěn)定、可靠的抑郁模型。這種行為絕望(表現(xiàn)為動物在強迫性游泳期間的不動行為)類似于臨床抑郁狀態(tài)。具有抗抑郁作用的藥物可顯著縮短絕望動物的不動時間.
方法昆明種雄性小鼠，20-24克。在實驗前24、5、1小時，分別給動物腹腔(或皮下)注射10ml/kg不同劑量受試藥，最后一次給藥后1小時，將小鼠放入高20cm，直徑10cm的圓柱型玻璃缸中，每缸一只，缸中水深10cm，水溫25℃，小鼠游泳2分鐘后，立即開始觀察，觀察持續(xù)4分鐘，累計動物游泳的不動時間(秒，即動物后肢無動作時間)。
實驗內(nèi)容與劑量比值a小鼠腹注丙米嗪強迫游泳實驗，劑量設計為2.16-10mg.kg-1五個組(比值1∶0.6)；b小鼠皮下注射組氨酸強迫游泳實驗，劑量設計為3.89-30mg.kg-1五個組(比值1∶0.6)；c小鼠皮下注射維拉新強迫游泳實驗，劑量設計為13.72-40mg.kg-1四個組(比值1∶0.7)；d小鼠皮下分別注射丙米嗪、維拉發(fā)新、氟西汀與組氨鋅(1∶3)聯(lián)用的強迫游泳實驗，聯(lián)用劑量設計為3.11-24mg.kg-1五個組(比值1∶0.6)。
e小鼠皮下分別注射丙米嗪、維拉發(fā)新與組氨鋅(1∶1)聯(lián)用的強迫游泳實驗，復方劑量設計為0.5-12mg.kg-1五個組(比值1∶0.5)。
大鼠強迫游泳實驗原理同小鼠強迫游泳方法Wistar雄性大小鼠，220-260克。將大鼠置于直徑18cm，高40cm玻璃缸，盛28℃水溫的自來水，水深23cm，游泳15分鐘，取出立即用布將皮毛上的水擦干，再用紅外電暖爐烤干。試游后24小時，分別在試驗前24、5、1小時給動物皮下注射1ml/kg不同劑量的受試藥，最后一次給藥后1小時，將動物置入上述同條件水缸中，觀察在5分鐘，并累計動物游泳的不動時間(秒，即動物后肢無動作時間)。
實驗內(nèi)容與劑量比值a.大鼠皮下分別注射丙米嗪、維拉發(fā)新與組氨鋅(1∶3)聯(lián)用的強迫游泳實驗，復方劑量設計為3.11-24mg.kg-1五個組(比值1∶0.6)。
b.大鼠皮下分別注射丙米嗪、維拉發(fā)新與組氨鋅(1∶1)伍用復方強迫游泳實驗，復方劑量設計為1.50-12mg.kg-1四個組(比值1∶0.5)。
配制方法使用溶劑為蒸餾水或100μmol濃度的組氨酸溶液。按動物給藥容量及劑量比值(小鼠腹腔或皮下注射為10ml.kg-1，大鼠皮下注射為(1ml.kg-1)，用等比稀釋成所需濃度，所有組氨酸鋅及聯(lián)用母液用100μmol組氨酸溶液溶解后，用蒸餾水等比稀釋成系列濃度。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示。多組均數(shù)顯著性檢驗用方差分析，兩組間均數(shù)顯著性比較用t檢驗。
實驗結(jié)果實施例小鼠腹腔注射丙米嗪對強迫游泳不動時間的影響小鼠腹腔注射丙米嗪(IMI)2.16-10mg.kg-1，與溶劑對照組比較，IMI 6mg.k-1和10mg.kg-1組均可顯著降低小鼠強迫游泳不動時間；而IMI其他劑量組對小鼠強迫游泳的不動時間未見有顯著性影響(見表1)。
表1.小鼠腹腔注射丙米嗪對強迫游泳的影響藥物與劑量 動物數(shù) 強迫游泳不動時間(mg.kg-1) (n)(S，X±SD)溶劑對照 -16 104.0±65.1IMI 2.16 10 72.7±35.53.60 10 85.8±67.46.00 10 41.7±27.7**10.0010 57.0±35.4*溶劑對照為蒸餾水、丙米嗪(IMI)均為實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05；**P＜0.01與溶劑對照組比較。
小鼠皮下注射維拉發(fā)新對強迫游泳的影響小鼠皮下注射維拉發(fā)新(VEN)13.72-40mg.kg-1，與溶劑對照組比較，除小劑量組之外，其他各劑量組均顯著降低小鼠強迫游泳不動時間(見表2)。
表2.小鼠皮下注射維拉發(fā)新對強迫游泳的影響藥物與劑量動物數(shù) 強迫游泳不動時間(mg.kg-1)(n) (S，X±SD)溶劑對照 14 124.9±48.2VEN-13.72 12 95.4±45.222.50 12 58.4±47.6***28.00 12 67.7±46.3**40.00 12 49.3±54.6***溶劑對照為蒸餾水、維拉發(fā)新(VEN)均為實驗前24、5和1小時3次給藥。**P＜0.01，***P＜0.001與溶劑對照組比較。
小鼠皮下注射組氨酸鋅對強迫游泳的影響皮下注射組氨酸鋅(HIS-Zn2+)3.89-30mg.kg-1對小鼠強迫游不動時間未見顯著影響。高劑量組動物(HIS-Zn2+30mg.kg-1(3mg.ml-1))給藥后19小時(第2次給藥時)，注射部位發(fā)現(xiàn)有輕度水腫，同時伴有體重下降(見表3)。
表3.小鼠皮下注射組氨酸鋅對強迫游泳不動時間及體重增長的影響藥物與劑量 動物數(shù)強迫游泳不動時間 體重(g，M±SD)變化(mg.kg-1) (n) (S，X±SD) 給藥前 給藥后溶劑對照 - 10128.5±42.9 25.2±1.525.5±2.0IMI6.001088.9±51.6*25.2±1.525.9±2.0HIS-Zn2+3.899 97.9±54.1 25.3±1.326.3±1.96.4810122.5±55.2 25.4±1.426.0±1.910.80 1096.9±46.7 25.4±1.426.0±1.718.00 10107.4±45.4 25.5±1.625.1±2.030.00 9 113.4±67.9 25.2±1.424.2±1.4*溶劑對照為組氨酸100μmol；陽性對照藥為丙米嗪(IMI)；組氨酸鋅(HIS-Zn2+)均為實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05；與溶劑對照組比較。
綜上實驗結(jié)果表明丙米嗪或維拉發(fā)新分別腹腔和皮下注射多次給藥，分別在6mg.kg-1和22.5mg.kg-1以上劑量，顯著降低小鼠強迫游泳不動時間，顯示有抗抑郁作用。而小鼠皮下注射組氨酸鋅13.72-40mg.kg-1，未顯示有明顯的抗抑郁作用。
實施例2，IMI與HIS-Zn2+不同配比復方對小鼠強迫游泳的影響IMI與HIS-Zn2+按1∶3或1∶1兩種不同配比組成IMI-Zn(1∶3)、IMI-Zn(1∶1)兩種復方。
小鼠皮下注射IMI-Zn(1∶3)復方3.11-24mg.kg-1。與溶劑對照組比較，其中5.18mg.kg-1和8.64mg.kg-1組對小鼠強迫游泳不動時間有顯著減少。IMI用量降低3倍(見表4)。
小鼠皮下注射IMI-Zn(1∶1)復方0.75-12mg.kg-1。與溶劑對照組比較，其中3mg/kg可顯著減少小鼠強迫游泳不動時間。等效情況下，IMI用量降低4倍(見表5)。
表4.小鼠皮下注射IMI-Zn(1∶3)復方對強迫游泳的影響IMI-Zn(1∶3)復方配比劑量(mg.kg-1)動物數(shù) 強迫游泳不動時間組別 IMIHIS-Zn2+(n)(S，X±SD)溶劑對照 - -18 94.3±52.0陽性對照 6.00 -16 47.6±37.8*3.11 0.78 2.33 16 65.3±62.05.18 1.30 3.89 16 61.3±45.4*8.64 2.16 6.48 16 51.4±28.7**溶劑對照(組氨酸100μmol)、陽性對照(IMI)與IMI-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05；與溶劑對照組比較。
表5.小鼠皮下注射IMI-Zn2+(1∶1)復方對強迫游泳的影響IMI-Zn2+(1∶1)復方配比劑量 動物數(shù)強迫游泳不動時間(mg.kg-1)組別 IMI HIS-Zn2+(n)(S，X±SD)溶劑對照 - - 19 113.4±60.0陽性對照 6.00 - 12 70.8±39.4*3.00 1.50 1.5012 71.9±57.3*溶劑對照(組氨酸100μmol)、陽性對照(IMI)與IMI-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05與溶劑對照組比較。
表4和表5說明在小鼠強迫游泳模型上，IMI與Zn2+有顯著的協(xié)同抗抑郁作用。
實施例3 VEN與HIS-Zn2+不同配比復方對小鼠強迫游泳的影響VEN與HIS-Zn2+組成二種不同配比的VEN-Zn2+復方(1∶3和1∶1)。
小鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶3)復方3.11-24mg.kg-1，與溶劑對照組比較，在5.18-24mg.kg-1劑量范圍內(nèi)可聯(lián)合劑量范圍均可顯著降低小鼠強迫游泳不動時間(見表6)。
小鼠皮下注射復方VEN-Zn2+(1∶1)0.75-12mg.kg-1，與溶劑對照組比較，其中6mg.kg-1和12mg.kg-1可非常顯著減少小鼠強迫游泳不動時間(見表7)。而單獨給予同量的VEN(6mg.kg-1)對小鼠強迫游泳無顯著性影響。在此HIS-Zn2+在1∶1配伍復方中，顯示有較強的協(xié)同抗抑郁作用。
表6.小鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶3)對強迫游泳的影響VEN-Zn2+(1∶3)復方配比劑量 動物數(shù)強迫游泳不動時間(mg.kg-1)組別 VEN HIS-Zn2+(n) (S，X±SD)溶劑對照 - - 16 115.9±45.6VEN 6.00- 16 97.6±40.13.11 0.782.3312 99.6±79.95.18 1.303.8912 79.3±56.9*8.64 2.166.4812 97.3±43.614.40 3.6010.80 12 63.3±53.0**24.00 6.0018.00 12 70.5±55.9*溶劑對照(組氨酸100μmol)、維拉發(fā)新(VEN)與VEN-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05，**P＜0.01；與溶劑對照組比較。
表7.小鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶1)復方對強迫游泳的影響VEN-Zn2+(1∶1)復方配比劑量 動物數(shù)強迫游泳不動時間(mg.kg-1)組別VEN HIS-Zn2+(n) (S，X±SD)溶劑對照-- 16 114.1±48.6VEN 6.00 - 12 85.0±47.80.750.38 0.3812 104.6±45.91.500.75 0.7512 85.8±48.93.001.50 1.5012 100.3±51.66.003.00 3.0012 57.7±53.9**12.00 6.00 6.0012 49.1±35.8***溶劑對照(組氨酸100μmol)、維拉發(fā)新(VEN)與VEN-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。**P＜0.01；***P＜0.001；與溶劑對照組比較。
實施例3 FLU與HIS-Zn2+不同配比復方對小鼠強迫游泳的影響氟西汀(FLU)與HIS-Zn2+組成兩種不同配比FLU-Zn2+(1∶3和1∶1)的復方。
小鼠皮下注射FLU-Zn2+復方(1∶3)3.11-24mg.kg-1。與溶劑對照組比較，其中14mg/kg可顯著降低小鼠強迫游泳不動時間。而單獨給予FLU 6mg.kg-1對小鼠強迫游泳不動時間未見有顯著影響(見表8)。
表8.小鼠皮下注射FLU-Zn2+(1∶3)復方對強迫游泳的影響Flu-Zn(1∶3)復方配比劑量 動物數(shù)強迫游泳不動時間(mg.kg-1)組別 FLU HIS-Zn2+(n) (S，X±SD)溶劑對照 -- 14101.2±62.7FLU 6.00 - 1583.5±58.83.11 0.78 2.331281.6±51.55.18 1.30 3.891271.3±62.58.64 2.16 6.481269.8±56.914.40 3.60 10.80 1249.3±46.9*溶劑對照(組氨酸100μmol)、氟西汀(FLU)與FLU-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05與蒸餾水對照組比較。
實施例4 VEN與HIS-Zn2+不同配比對大鼠強迫游泳的影響大鼠皮下注射VEN-Zn2+復方(1∶1)1.5-12mg.kg-1，與溶劑對照組比較，3-12mg.kg-1均可顯著減少大鼠強迫游泳不動時間。而單獨給予VEN 6mg.kg-1對大鼠強迫游泳不動時間無顯著影響(表9)。
大鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶3)復方3.11-24mg.kg-1，與溶劑對照組比較，可劑量依賴性地降低大鼠強迫游泳不動時間。單獨給予HIS-Zn2+18mg.kg-1對大鼠強迫游泳不動時間無顯著影響(表10)。
表9.大鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶1)復方對強迫游泳的影響VEN-Zn2+(1∶1)復方配比劑量 動物數(shù) 強迫游泳不動時(mg.kg-1)間組別 VEN HIS-Zn2+(n)(S，X±SD)溶劑對照 -- 10 112.3±46.2VEN 6.00 - 10 89.6±38.51.5 0.75 0.759 89.0±38.23.0 1.50 1.5010 70.1±45.8*6.0 3.00 3.0010 80.6±25.5*12.0 6.00 6.0010 72.2±16.7**溶劑對照(組氨酸100μmol)、維拉發(fā)新(VEN)與VEN-Zn復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05，**P＜0.01與溶劑對照組比較。
表10.大鼠皮下注射VEN-Zn2+(1∶3)復方對強迫游泳的影響VEN-Zn2+(1∶3)復方配比劑量 動物數(shù) 強迫游泳不動時(mg.kg-1) 間組別VEN HIS-Zn2+(n) (S，X±SD)溶劑對照-- 11 81.0±38.5HIS-Zn2+-18.00 11 66.0±35.53.110.78 2.3310 75.7±50.35.181.30 3.8910 71.7±50.98.642.16 6.4810 50.9±33.4*14.43.60 10.80 10 45.6±28.5*24.06.00 18.00 11 37.6±23.9***P＜0.05，**P＜0.01與溶劑對照組比較，n＝9-11。
2.8 IMI與HIS-Zn2+不同配比復方對大鼠強迫游泳的影響大鼠皮下注射IMI-Zn2+復方(1∶1)1.5-12mg.kg-1，與溶劑對照組比較，6-12mg.kg-1均可顯著減少大鼠強迫游泳不動時間，IMI用量顯著降低(表11)。
大鼠皮下注射IMI-Zn2+復方(1∶3)3.11-24mg.kg-1，與溶劑對照組比較，只有24mg.kg-1組可顯著減少大鼠強迫游泳不動時間。
表11.大鼠皮下注射IMI-Zn2+(1∶1)復方對強迫游泳的影響IMI-Zn2+(1∶1)復方配比劑量(mg.kg-1)動物數(shù)強迫游泳不動時間組別IMI HIS-Zn2+(n) (S，X±SD)溶劑對照- -14113.6±37.8IMI 6.00-1181.4±46.1*1.5 0.750.75 1196.7±48.93.0 1.501.50 1191.3±29.26.0 3.003.00 1176.9±42.8*12.06.006.00 1187.3±34.3*溶劑對照(組氨酸100μmol)、丙米嗪(IMI)與IMI-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05，**P＜0.01與溶劑對照組比較。
表12.大鼠皮下注射IMI-Zn2+(1∶3)復方對強迫游泳的影響IMI-Zn2+(1∶3)復方配比劑量(mg.kg-1) 動物數(shù) 強迫游泳不動時間組別 IMI HIS-Zn2+(n)(S，X±SD)溶劑對照 --15 114.1±50.85.18 1.30 3.89 11 88.2±47.28.64 2.16 6.48 11 100.4±63.514.4 3.60 10.8011 99.0±40.424.0 6.00 18.0011 74.8±49.8*溶劑對照(組氨酸100μmol)、IMI-Zn2+復方均在實驗前24、5和1小時3次給藥。*P＜0.05，**P＜0.01與溶劑對照組比較。
權利要求
1.藥物組合物，其包括氨基酸鋅鹽和抗抑郁藥。
2.權利要求1的藥物組合物，其中抗抑郁藥與氨基酸鋅鹽的比為1∶1-1∶3。
3.權利要求1或2的藥物組合物，其中氨基酸鋅鹽為組氨酸鋅。
4.權利要求1或2的藥物組合物，其中抗抑郁藥選自丙米嗪，鹽酸氟西汀或特拉發(fā)新。
5.氨基酸鋅鹽與抗抑郁藥混合或結(jié)合在制備抗抑郁藥中用途。
6.權利要求5的用途，其中抗抑郁藥與氨基酸鋅鹽的比為1∶1-1∶3。
7.權利要求5或6的用途，其中氨基酸鋅鹽為組氨酸鋅。
8.權利要求5或6的用途，其中抗抑郁藥選自丙米嗪，鹽酸氟西汀或特拉發(fā)新。
9.氨基酸鋅鹽作為抗抑郁藥的增效劑。
10.權利要求9的增效劑，其中氨基酸鋅鹽為組氨酸鋅。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物組合物其包括氨基酸鋅鹽，抗抑郁藥和/或藥用載體或賦形劑。本發(fā)明還涉及氨基酸鋅與抗抑郁藥或化合物混合或聯(lián)合在制備抗抑郁藥中的用途。
文檔編號A61P25/24GK1628670SQ20031012139
公開日2005年6月22日 申請日期2003年12月16日 優(yōu)先權日2003年12月16日
發(fā)明者張鳳琴, 龔正華, 楊紅菊, 羅質(zhì)璞, 李錦 , 宮澤輝 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所