專利名稱：B型慢性肝炎治療劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明是關于含有以乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作為有效成分的B型慢性肝炎治療劑。更具體地，本發(fā)明是關于乳鐵蛋白是金屬非飽和乳鐵蛋白、金屬飽和乳鐵蛋白、或脫鐵乳鐵蛋白(以下將這些都記載為乳鐵蛋白類)、益生菌是選自屬于雙歧桿菌屬的微生物、屬于乳桿菌屬的微生物和屬于鏈球菌屬的微生物中至少1種或以上的微生物菌末的B型慢性肝炎治療劑、益生素是低聚糖的B型慢性肝炎治療劑、以及以飲食品方式的B型慢性肝炎治療劑。本發(fā)明還關于使用乳鐵蛋白以制造B型慢性肝炎治療劑使用乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物以制造B型慢性肝炎治療劑，涉及服用含乳鐵蛋白的B型慢性肝炎治療方法，以及給藥以乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物的B型慢性肝炎治療方法。
本說明書中的百分率，若沒有明確限定時，都以質量表示。
背景技術：
作為稱為所說肝炎病的有病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、醇性肝炎、藥物性肝炎等，這些通過進行血中肝炎病毒標記的測定、抗體測定、血液檢查等檢查，可以鑒別。無論是什么原因，肝炎在放置時都會慢性化，根據肝炎癥的程度，一部分會發(fā)展成肝硬變。隨著肝硬變的進行，會出現肝癌的發(fā)生、所謂肝不健全的嚴重綜合癥。在B型肝炎病毒的感染下，會形成重病癥，有時也會形成惡性病癥，所以根據慢性肝炎的成因，治療目的也不同。
病毒性肝炎，雖然是肝炎病毒感染結果的引發(fā)癥，但其病癥也隨感染的肝炎病毒種類而有很大差異。到目前為止，已知引發(fā)病毒肝炎的肝炎病毒，有A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、E型肝炎病毒、G型肝炎病毒等。其中，A型肝炎不會慢性化、E型肝炎是在污染地區(qū)飲用被污染的飲用水和生物，而引發(fā)病癥、G型肝炎的臨床現象還不清楚，等等。日常屢屢遇到的病毒肝炎是慢性的B型肝炎和C型肝炎。
B型肝炎病毒的特征是DNA病毒，不僅和RNA病毒的C型肝炎病毒等其他肝炎病毒不同，而且，在其基因復制過程中，可以是RNA中間體，并能將其逆轉為DNA上，而且基因可頻繁地組合到肝細胞的染色體中。由于B型肝炎病毒的感染力比C型肝炎病毒更強，所以B型肝炎病毒的感染途徑是多方面的。
B型肝炎中有經過無癥狀而形成慢性肝炎化的病態(tài)，和明顯形成急性肝炎的引發(fā)癥病態(tài)。B型肝炎的病態(tài)及其發(fā)展，與C型肝炎有很大差異，不僅演變成肝硬變和肝細胞癌，而且是極其多樣而復雜的(佐藤信絋編、增刊，醫(yī)學的進展、第1版、第27頁、醫(yī)齒藥出版株式會社、1999年)。C型肝炎時，可將減少病毒的干擾素療法作為第一選擇。另一方面，B型肝炎時，不僅使用從根本上減少排除病毒的根治療法，而且使用保護肝免受肝炎病毒侵害的非根治療法等的適宜的治療法(佐藤信絋編，增刊，醫(yī)學的進展、第1版、第31頁、醫(yī)齒藥出版株式會社、1999)，但存在有效率低，具有種種副作用等問題。
以前，作為針對B型慢性肝炎的治療藥物，可使用類固醇、干擾素、強力新明諾法近C(ミノフア一クン制藥社制，以下簡寫作SNMC)和熊去氧膽酸等。
然而，這些治療劑仍存在有效性低、并有以下的問題。即，在短期內使用較大劑量類固醇后，急速中斷的，發(fā)揮很強免疫激活作用的類固醇脫離療法，有可能導致肝炎加重。另外，使用干擾素療法，很容易引起間質性肺炎和心病性肝硬變等的嚴重副作用。使用SNMC等，很容易引起高血壓和浮腫等副作用。
如上所述，以前的B型慢性肝炎治療劑，因為存在副作用和與其他藥物并用的有關擔心的問題，所以當務之急的課題是開發(fā)研制一種治療效果的有效性高、副作用少、針對B型慢性肝炎的治療藥物。
進而，根據世界衛(wèi)生組織的推測，世界范圍內，B型肝炎病毒的感染者超過了20億人，其中，約5億人是慢性感染者，所以當前的課題是在世界范圍內預防B型肝炎病毒，和治療B型慢性肝炎。
本發(fā)明就是鑒于上述狀況，是提供治療有效率高的，而且可連續(xù)服用的B型慢性肝炎治療劑、使用有效成分以制造該B型慢性肝炎治療劑，使用該B型慢性肝炎治療劑的有效成分治療B型慢性肝炎的方法。
發(fā)明的公開本發(fā)明者們對具有優(yōu)良的B型慢性肝炎治療效果的化合物進行了深入的研究，結果注意力集中在乳鐵蛋白上。
乳鐵蛋白是淚、唾液、末梢血、乳汁等中所含的無害，而且天然的結合鐵的蛋白質(每1個分子中可結合2個鐵離子)，其分子量，牛的乳鐵蛋白是86000道爾頓，人的乳鐵蛋白是88000道爾頓(今堀和友·山川民夫監(jiān)修，“生化學辭典”、第2版、第1390頁、東京化學同人、1990年)。
到目前為止，分別報導了乳鐵蛋白的效果，它對大腸菌、念珠菌、梭狀芽孢桿菌等有害微生物，顯示出抗菌作用[兒科學雜證(Journal of pediatrics)、第94卷、第1頁、1979年]、能有效固定人和動物腸內的雙尾(ビフィズス)菌、乳酸菌等有用細菌(特許第2532911號公報)、是雙尾菌的增殖因子(特開平2-225419號公報)，以及對細胞巨化病毒、皰疹病毒、人免疫不全病毒呈現出抗病毒的作用[實驗藥物和生物學的進展(Advances in ExperimentalMedicine and Biology)、第443卷、第199頁、1998年]。
進而，乳鐵蛋白，作為具有各種作用的乳蛋白質而有所公開，即，免疫激活作用(特開平7-179355號公報)、細胞增殖作用(特開平6-48955號公報)、抗腫瘤作用[癌癥研究(Cancer Research)、第54卷、第2310頁、1994年]、疾病治療劑中應用的抗風濕劑(特開平5-186368號公報)、及顯示因藥物引起的慢性肝障礙的改善效果的肝功能改善劑(WO 00/06192號公報)等。
然而，乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物，在肝炎中能有效治療因B型肝炎病毒引發(fā)的慢性肝炎，還無人知曉，而且也無文獻記載。
本發(fā)明人發(fā)現，將乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物，給藥B型慢性肝炎患者而口服3個月以上，結果發(fā)現，暫時緩和了丙氨酸轉氨酶(alanine aminotransferase以下簡寫為ALT)值的上升，確認宿主的免疫激活化后，導致對B型肝炎高有效率的治療效果，而且伴隨著治療沒有副作用，由此完成了本發(fā)明。
解決上述課題的本發(fā)明第一個發(fā)明是含有以乳鐵蛋白作有效成分的B型慢性肝炎治療劑。
解決上述課題的本發(fā)明第二個發(fā)明是含有以乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作有效成分的B型慢性肝炎治療劑，益生菌是選自屬于雙歧桿菌屬的微生物、屬于乳桿菌屬的微生物和鏈球菌屬的微生物中的至少1種以上的微生物菌末，而益生素是低聚糖，進而最好的方式是飲食品方式。
解決上述課題的本發(fā)明第三個發(fā)明是為制造第一發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑，使用乳鐵蛋白解決上述課題的本發(fā)明第四個發(fā)明是為制造第二發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑，使用乳鐵蛋白、益生素和益生菌的混合物。
解決上述課題的本發(fā)明第五個發(fā)明是給藥含乳鐵蛋白的B型慢性肝炎治療方法。解決上述課題的本發(fā)明第六個發(fā)明是給藥含乳鐵蛋白、益生素和益生菌混合物的B型慢性肝炎治療方法。
實施發(fā)明的最佳形態(tài)以下對本發(fā)明作具體說明。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑中，作為有效成分使用的乳鐵蛋白是市售品，或者是哺乳類(例如，人、牛、水牛、馬、山羊、綿羊等)的初乳、轉移乳、常乳、末期乳等，從這些的處理物的脫脂乳、乳清等，利用離子交換色譜柱等的常規(guī)方法進行分離，根據需要進行精制的乳鐵蛋白。進而，利用常規(guī)方法，從乳鐵蛋白去除鐵的脫鐵乳鐵蛋白，在脫鐵乳鐵蛋白中部分或完全螯合了鐵、銅、鋅、錳等金屬的金屬非飽和乳鐵蛋白或金屬飽和乳鐵蛋白。
又，天然的人的乳鐵蛋白，不可能大量制造，通過重組DNA技術得到的重組類菌、重組乳牛(轉基因學·母牛)生產的人乳鐵蛋白也能用于本發(fā)明。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑中配合的益生菌表明對人體健康有益作用的活的細菌，例如有屬于雙歧桿菌屬的微生物、屬于乳桿菌屬的微生物和屬于鏈球菌屬的微生物的菌末等。菌末可以使用市售品或者利用公知方法(例如，特開平1-221319號公報中記載的方法)調制的。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑中配合的益生素，通過特異增殖限定寄生在腸管內的雙尾菌等，表示對人類健康有益作用的，是難消化性的食品成分，可以乳酰糖(ラクチユロ一ス)等低聚糖為例。已知乳酰糖具有降低肝性腦癥和肝性昏迷癥狀的作用(精神醫(yī)學、第15卷、第10號、第1101頁、1973年)，但并不知道對治療B型慢性肝炎有效。
上述含有以乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作為有效成分的本發(fā)明B型慢性肝炎治療劑可通過公知方法制成各種方式的制劑，而進行口服。作為具體制劑，可列舉出有片劑(糖衣劑、涂敷劑、口腔片劑)、散劑、囊劑、(軟膠囊)、顆粒劑(含包覆涂敷的)、丸劑、糖劑、液劑，或它們在制劑學中允許的可慢慢釋放的制劑等。
上述制劑，按照公知制劑學中的制法，作為制劑，與藥理學中允許的載體、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑等一起形成醫(yī)藥組合物而進行制劑。
作為這些制劑中使用的載體和賦形劑，可列舉有乳糖、葡萄糖、白糖、甘露糖醇、馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、碳酸鈣、磷酸鈣、硫酸鈣、結晶纖維素、萱草末、龍膽末等。作為粘結劑，可列舉有淀粉、明膠、糖漿、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素等。
作為崩解劑，可列舉有淀粉、瓊脂、明膠、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、結晶纖維素、碳酸鈣、碳酸氫鈉、藻酸鈉等。
作為潤滑劑有硬脂酸鎂、加氫植物油、和聚乙二醇等，作為著色劑可舉出有藥物中允許添加的紅色2號、黃色4號、和蘭色1號等。
片劑和顆粒劑，根據需要也可使用以下物質形成包衣，例如白糖、羥丙基纖維素、精制紫膠、明膠、山梨糖醇、甘油、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、苯二甲酸纖維素乙酸酯、羥丙基甲基纖維素苯二甲酸酯、甲基丙烯酸甲酯、及甲基丙烯酸聚合物等。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑，每1g制劑最好至少含有1mg有效成分乳鐵蛋白。服用量隨年齡、癥狀等而異，以每1kg人體重至少1mg的比率，每人每天最好服用20mg～15g，更好100mg～10g。服用方法最好是口服，可1天內服用1次或數次。本發(fā)明的第二發(fā)明B型慢性肝炎治療劑，即，以乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作為有效成分時，每1g藥劑最好至少含有2.5mg的該混合物。服用量隨年齡、癥狀等而異，以每1kg人體重至少2.5mg的比率，每人每天最好服用50mg～40g、更好200mg～30g。服用方法，優(yōu)選是口服，1天內可服用1次或數次。但是，益生菌，例如是菌末時，最好每天至少服用1億個。益生素，例如是低聚糖時，最好每天至少服用30mg。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑，主成分是來自食品的成分，由于安全性高，所以可與其他肝疾病治療劑，如干擾素、SNMC等并用，由此可降低這些藥劑的服用量，并能獲得改善肝功能的復合效果。
本發(fā)明的B型慢性肝炎治療劑也可以飲食品方式使用。飲食品方式的B型慢性肝炎治療劑，制作時可將乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物添加到飲料或食品中。作為飲食品的最好方式，例如有清涼飲料、乳制品、健康食品、糖果類、尤其是乳飲料、發(fā)酵乳、果片、流食等。本發(fā)明飲食品中的乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物添加量，在將該飲食品用于保持健康和增進健康目的時，沒有特殊限定，但最好是每1kg飲食品中至少含有100mg，更好是每1kg飲食品中含有300mg～800g。由于乳鐵蛋白是來自食品的成分，安全性高，所以通過添加乳鐵蛋白，可提供既安全又能保持和增進健康的有益飲食品。
以下以試驗例詳細說明本發(fā)明。
試驗例1進行該試驗是為研究乳鐵蛋白對B型慢性肝炎的治療效果。
1)試料配制試料按下述實施例1中片劑相同的方法進行制造。
2)試驗方法將4名B型慢性肝炎患者(男性3名，女性1名)作為患者A～D，每天口服含1.2g乳鐵蛋白的片劑(下述實施例1的片劑)，連服4個月。
從服用開始隨時間采取血樣，測定血清中的丙氨酸轉氨酶(alanineaminotransferase以下以ALT表示)、和天冬氨酸轉氨酶(aspartateaminotransferase以下以AST表示)。
3)試驗結果乳鐵蛋白對B型慢性肝炎患者的效果，如表1、表2所示。表1中示出了各患者的ALT值(單位IU/L)，表2中示出了各患者的AST值(單位IU/L)。
試驗結果，與服用前比較，4例中有2例，在服用1個月后和2個月后，ALT呈現出緩慢上升，繼續(xù)口服，服用3個月后，與服用前相比，呈現低值。從該結果可以確認，宿主伴隨著免疫激活而改善效果。關于其余2例，服用1個月就呈現出緩慢降低。
4例中有1例，在服用1個月后，AST就呈現出緩慢上升，繼續(xù)口服，服用2個月后，與服用前比較，呈現低值，可以確認宿主伴隨免疫激活而改善效果，其余3例，服用1個月就開始呈現緩慢降低。
表1

表2

試驗2進行該試驗是研究乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物對B型慢性肝炎的治療效果。
1)試料配制試料按下述實施例2中片劑相同的方法進行制造。
2)試驗方法將4名B型慢性肝炎患者(男性3名，女性1名)作為患者E～H，每天口服12片下述實施例2的片劑，連續(xù)服用4個月。
從服用開始隨時間采取血樣，測定血清中的ALT和AST。
3)試驗結果乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物對B型慢性肝炎患者的效果如表3、表4所示。表3示出了各患者的ALT值(單位IU/L)、表4示出了各患者的AST值(單位IU/L)。
試驗結果是與服用前比較，服用1個月后和2個月后，ALT、AST呈現出緩慢上升，繼續(xù)口服，服用3個月后，與服用前比呈現低值，服用4個月后，顯著降低。即，可與單獨服用乳鐵蛋白相比，可以確認所有例的宿主產生了免疫激活，可以認為ALT值和AST值的減小表明治療效果。
表3

表4

實施例以下以實施例更詳細地說明本發(fā)明。但本發(fā)明并不受以下實施例所限定。
實施例1(配制?！と殍F蛋白的片劑制備)按如下方法制備由以下組成形成的B型慢性肝炎治療劑的片劑。
?！と殍F蛋白(ミラィ社制) 50.0(％)還原麥芽糖(東和化成工業(yè)社制) 28.5甜味劑(日研化學社制) 17.1潤滑劑(理研ビタミン社制) 4.0香料(長谷川香料社制) 0.4利用常規(guī)方法，將?！と殍F蛋白、還原麥芽糖、甜味劑、潤滑劑和香料的混合物壓制成片，每片為1.2g，得到含600mg乳鐵蛋白的片劑。
實施例2(配制牛·乳鐵蛋白、益生菌和益生素的片劑制備)按下方法由以下組成制備B型慢性肝炎治療劑的片劑。
牛·乳鐵蛋白(ミライ社制)20.0(％)
長雙歧桿菌菌末(森永乳業(yè)社制) 15.0乳酰糖(森永乳業(yè)社制) 20.0還原麥芽糖(東和化成工業(yè)社制) 27.6甜味劑(日研化學社制) 15.2潤滑劑(理研ビタミン社制) 1.8香料(長谷川香料社制) 0.4按照常規(guī)方法，將?！と殍F蛋白、長雙歧桿菌菌末、乳酰糖、還原麥芽糖、甜味劑、潤滑劑及香料的混合物壓制成片劑，每片為0.5g，得到分別含有100mg乳鐵蛋白、1億個長雙歧桿菌、100mg乳酰糖的片劑。
實施例3(配制牛·乳鐵蛋白的糖漿劑)利用常規(guī)方法由如下組成制造B型慢性肝炎治療劑的糖漿劑。
?！と殍F蛋白(ミライ社制) 8.0(％)果糖葡萄糖液體糖(參松工業(yè)社制) 12.4檸檬酸(上野制藥社制) 0.2檸檬酸鈉(丸善制藥社制) 0.2羧甲基纖維素鈣(五德藥品社制) 0.2精制水(大塚制藥社制) 79.0實施例4(裝入膠囊中的牛·乳鐵蛋白的制備)按下制造B型慢性肝炎治療劑的膠囊。
將600g乳糖(如光純藥工業(yè)社制)、400g玉米淀粉(日清制粉社制)、400g結晶纖維素(和光純藥工業(yè)社制)和600g?！と殍F蛋白(ミラィ社制)，用50目篩(ヤマト科學社制)進行篩分，采用0.5mm的聚乙烯制的袋，進行顛倒混合，用全自動膠囊填充機(Cesere Pedini社制，擠壓式)，將上述粉末以275mg裝入膠囊內(日本エランユ社制，1號明膠膠囊、Op.Yellow No.6 Body，空重量75mg)，得到7000個裝入82.5mg乳鐵蛋白的膠囊劑。
實施例5(人·乳鐵蛋白散劑的配制)按如下制造B型慢性肝炎治療劑散劑。
在研缽中，將100g預先用6號篩(井內盛榮堂社制)篩分的人·乳鐵蛋白粉末(ミラィ社制)和500g乳糖(森永乳業(yè)社制)進行混合，向其中添加400g預先用5號篩(井內盛榮堂社制)篩分的乳糖(森永乳業(yè)社制)，進行混合，將總量再次用5號篩篩分，利用分包機(東京商會，OMP-90A)以每包5g進行分包，得到200包10％的人·乳鐵蛋白的散劑。
實施例6(加有乳鐵蛋白的飲料的配制)將90g脫脂奶粉(森永乳業(yè)社制)溶解在800ml的50℃熱水中，在攪拌下依次添加30g砂糖(日新制糖社制)、14g速溶咖啡粉末(ネスレ社制)、2g焦糖(昭和化工社制)、和0.01g咖啡香料(三榮化學社制)，進行溶解，冷卻到10℃，添加1g乳鐵蛋白(ミラィ社制)，調制成含有約0.1％乳鐵蛋白的B型慢性肝炎治療劑的乳飲料。
工業(yè)應用性如以上所詳細記載的，本發(fā)明取得了如下效果，可應用于醫(yī)藥品和健康食品等領域。
(1)由于含有將日常攝取的食品成分作為主成分，所以經濟，且長期服用也不會產生副作用。
(2)在治療B型慢性肝炎中明顯有效。
權利要求
1.一種含有以乳鐵蛋白作為有效成分的B型慢性肝炎治療劑。
2.一種含有以乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作為有效成分的B型慢性肝炎治療劑。
3.根據權利要求2記載的B型慢性肝炎治療劑，特征是益生菌是選自屬于雙岐桿菌屬的微生物、屬于乳桿菌屬的微生物和屬于鏈球菌屬的微生物中的至少1種以上的微生物菌末。
4.根據權利要求2記載的B型慢性肝炎治療劑，特征是益生素是低聚糖。
5.根據權利要求1～4中任一項記載的B型慢性肝炎治療劑，特征是其方式為飲食品。
6.乳鐵蛋白的應用，它用于制造B型慢性肝炎治療劑。
7.乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物的應用，它用于制造B型慢性肝炎治療劑。
8.服用含乳鐵蛋白的B型慢性肝炎治療方法。
9.服用含乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物的B型慢性肝炎治療方法。
全文摘要
本發(fā)明是關于含有以乳鐵蛋白作為有效成分的B型慢性肝炎治療劑；含有以乳鐵蛋白、益生菌和益生素的混合物作為有效成分的B型慢性肝炎治療劑；使用乳鐵蛋白以制造B型慢性肝炎治療劑；使用乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物以制造B型慢性肝炎治療劑；服用含有乳鐵蛋白的B型慢性肝炎治療方法；服用含有乳鐵蛋白、益生菌和益生素混合物的B型慢性肝炎治療方法。這種B型慢性肝炎治療劑，經濟、無副作用，可有效應用于醫(yī)藥品、飲食品領域內。
文檔編號A61P1/16GK1446099SQ01813981
公開日2003年10月1日 申請日期2001年11月30日 優(yōu)先權日2000年11月30日
發(fā)明者渡辺明治, 樋口清博, 早澤宏紀, 寺口進, 山內恒治 申請人:森永乳業(yè)株式會社