專利名稱：絲氨酸蛋白酶抑制劑的制作方法
背景說明發(fā)明領(lǐng)域一方面，本發(fā)明涉及新穎的化合物，其為組織因子(TF)/因子VIIa，因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽釋放酶抑制劑，還涉及含此類化合物的組合物。該類化合物可用來抑制這些因子并用來治療由這些因子為介導(dǎo)的疾病。例如，該類化合物可以通過抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽釋放酶來預(yù)防哺乳動(dòng)物的血栓形成或者治療異常血栓形成。
背景技術(shù)：
正常止血是凝血塊開始、形成和凝血塊溶解過程之間復(fù)雜平衡的結(jié)果。血細(xì)胞、特定的血漿蛋白和血管表面之間的復(fù)雜相互作用維持血液的流動(dòng)性，除非受傷或發(fā)生血液損失。
很多重大的疾病狀態(tài)與異常的止血有關(guān)。例如，因動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂而形成的局部血栓是急性心肌梗死和不穩(wěn)定絞痛的主要原因。通過溶解血栓治療法或經(jīng)皮血管成形術(shù)治療閉塞性冠狀血栓時(shí)，可能伴有損傷血管的急性溶解血栓再閉合。而且，高百分比的手術(shù)病人會(huì)在靜脈血管系統(tǒng)，特別是在較低的末端形成血栓，這導(dǎo)致流到受侵襲區(qū)域的血液減少。
一直需要安全并有效的抗凝血?jiǎng)?，以限制或預(yù)防血栓的形成。
血液凝結(jié)對(duì)組織受傷時(shí)體液的保持至關(guān)重要，并且是宿主防御機(jī)制的重要組成部分。凝結(jié)或結(jié)塊是多種酶原連續(xù)激活的過程，該過程導(dǎo)致凝血酶的產(chǎn)生和纖維蛋白原轉(zhuǎn)為不能滲透的交聯(lián)纖維蛋白凝塊。凝血酶產(chǎn)生是血液凝結(jié)級(jí)聯(lián)的結(jié)果，對(duì)血液凝結(jié)級(jí)聯(lián)已經(jīng)進(jìn)行了深入的研究，并且日益具特色。例如見Lawson，J.H.，et al.(1994)J.Biol.Chem.26923357。這種級(jí)聯(lián)的凝結(jié)反應(yīng)包括開始、放大和增殖階段。另外，該級(jí)聯(lián)還被分為外在途徑和內(nèi)在途徑。內(nèi)在途徑包括因子XII，XI和IX，并導(dǎo)致因子IXa與其輔助因子，即因子VIIIa一起形成復(fù)合體。該復(fù)合體將因子X轉(zhuǎn)化成Xa。因子Xa是與其輔助因子，即因子Va一起形成復(fù)合體的酶，并迅速地將凝血素轉(zhuǎn)化成凝血酶。凝血酶將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白單體，該纖維蛋白單體聚合成凝塊。外在途徑包括因子VIIa和組織因子，其形成復(fù)合體(TF/因子VIIa)，并將因子X轉(zhuǎn)化成Xa。象在內(nèi)在途徑中一樣，因子Xa將凝血素轉(zhuǎn)化成凝血酶。
上面提到的凝血酶(因子IIa)通過將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白而占據(jù)凝結(jié)級(jí)聯(lián)的中心位置。因此，基本的合成努力方向是開發(fā)凝血酶抑制劑。例如見US 5,656,600；US 5,656,645；US 5,670,479；US 5,646,165；US5,658,939；US 5,658,930和WO 97/30073。已經(jīng)制備的作為合成的凝血酶抑制劑的其它化合物是N-芳基亞磺?；谋交彼狨０?。
已知的Xa因子抑制劑包括雙脒化合物(Katakura，S.(1993)Biochem.Biophys.Res.Commun.，197965)和基于精氨酸結(jié)構(gòu)的化合物(WO93/15756；WO 94/13693)。也表明，苯基和萘基磺酰胺是因子Xa的抑制劑(WO 96/10022；WO 96/16940；WO 96/40679)。
TF/因子VIIa是絲氨酸蛋白酶復(fù)合體，該復(fù)合體通過激活因子X和/因子IX而參與血液凝結(jié)。因子VIIa產(chǎn)生于它的前體，即因子VII，其是在肝臟中合成并分泌到血液中的，它在血液中以單鏈的糖肽循環(huán)?，F(xiàn)已表示出因子VII的cDNA序列特征(Hagen et al.，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，832412-2416)。
很多天然和合成的TF/因子VIIa抑制劑是已知的，并且具有不同的功效和選擇性。組織因子途徑抑制劑(TFPI；Broze，1995，Thromb.Haemostas.，7490)和線蟲抗凝血肽c2(NAPc2；Stanssens et al.，1996，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，932149)在與TF/因子VIIa復(fù)合物形成季銨抑制復(fù)合體之前束縛住因子Xa。小蛋白直接抑制劑(Dennis et al，1994，J.Biol.Chem.，3522137)和非活性的TF/因子VIIa也是已知的(Kirchhofer et al，1995，Arteriosclerosis，Thrombosis and Vascular Biol.，151098；Jang et al，1995，Circulation，923041)。另外，已經(jīng)制備了合成肽和可溶性的TF突變體，該突變體保留著束縛親和力，但對(duì)輔助因子的活性降低了(Roenning et al，1996，Thromb.Res.，8273；Kelley et al，1997，Blood，893219)。US 5,679,639描述了抑制絲氨酸蛋白酶活性的多肽和抗體。US 5,580,560描述了半衰期提高了的因子VIIa突變體。US 5,504,067和US 5,504,064描述了治療出血的截短的TF。同時(shí)又指出了作為雙功能抗凝血?jiǎng)┑腒unitz功能區(qū)組織因子融合蛋白(Lee et al，1997，Biochemistry，365607-5611)。已經(jīng)指出，TF/因子VIIa復(fù)合物是抑制劑開發(fā)中引人注目的目標(biāo)，所述抑制劑開發(fā)的基礎(chǔ)是外科手術(shù)出血和預(yù)防血管內(nèi)血栓形成之間的解離(Harker et al，1995，Thromb.Haemostas.，74464)。
從治療學(xué)來看，在凝結(jié)級(jí)聯(lián)中阻斷或抑制酶的化合物，可用于治療或預(yù)防懷哺乳動(dòng)物的血栓形成，該哺乳動(dòng)物被懷疑具有異常的血栓形成特征。例如，對(duì)于動(dòng)脈血管系統(tǒng)來說，因已確立的動(dòng)脈粥樣硬化斑的惡化而異常的血栓形成是急性心肌梗死和不穩(wěn)定絞痛的主要原因。通過溶解血栓治療法或經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(PTCA)治療閉塞性冠狀動(dòng)脈血栓時(shí)，可能伴有血管的再閉合。在靜脈血管系統(tǒng)中，很多手術(shù)病人，特別是在腹部或下體部分進(jìn)行手術(shù)的病人都體驗(yàn)過血栓的形成，這種血栓的形成降低了血流并可能導(dǎo)致肺部栓塞。靜脈和動(dòng)脈系統(tǒng)中的彌散性血管內(nèi)凝血病常發(fā)生于敗血病休克、某些病毒引起的感染和癌癥期間，并且可能導(dǎo)致迅速分布廣泛的血栓形成和器官故障。
PTCA和再通術(shù)是治療血管堵塞的有利方法。但是，在這些方法之后的動(dòng)脈血栓形成仍然是其失敗的首要原因。肝素，使用最廣泛的抗凝血?jiǎng)€沒有顯示出對(duì)急性動(dòng)脈血栓形成或再血栓形成(rethrombosis)的治療和預(yù)防一概有效。
根據(jù)已知的蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)合成和開發(fā)小分子抑制劑，是對(duì)現(xiàn)代藥物開發(fā)的挑戰(zhàn)。很多凝血酶抑制劑被設(shè)計(jì)成具有水蛭素型的結(jié)構(gòu)。Stubbs和Bode，Current Opinion in Structural Biology 1994，4823-832。報(bào)導(dǎo)了新合成的凝血酶抑制劑以及因子Xa和TF/因子VIIa抑制劑。參見，例如AnnualReports inMedicinal Chemistry，1995-1997，Academic Press，San Diego，CA。
US 5,589,173描述了組織因子拮抗劑和溶血栓劑治療心肌梗死的用途。
US 5,399,487描述了萘磺酰胺，其可用于蛋白水解酶活性的測(cè)定或用作酶抑制劑。
現(xiàn)在依然需要化合物，該化合物為凝結(jié)級(jí)聯(lián)中酶的有效抑制劑，并具有提高了的抑制活性和/或?qū)?jí)聯(lián)中所選擇的酶的選擇性。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供新穎的化合物，該化合物在凝結(jié)級(jí)聯(lián)中抑制因子/酶，并可用于預(yù)防或治療動(dòng)脈血管或靜脈血管中血栓的形成。這些化合物可用作凝結(jié)因子抑制劑和一般意義上的抗凝血?jiǎng)?br> 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的目的是提供抑制劑，該抑制劑相對(duì)于因子Xa、凝血酶或激肽釋放酶選擇性地抑制因子VIIa、TF/因子VIIa。該實(shí)施方案的化合物對(duì)TF/因子VIIa的抑制比對(duì)Xa因子、凝血酶和/或激肽釋放酶的抑制好優(yōu)選約1個(gè)數(shù)量級(jí)(10X)，更優(yōu)選約2個(gè)數(shù)量級(jí)(100X)，甚至更優(yōu)選約3個(gè)數(shù)量級(jí)(1000X)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的目的是提供相對(duì)于因子VIIa、TF/因子VIIa、凝血酶或激肽釋放酶而專門抑制因子Xa的化合物。該實(shí)施方案的化合物對(duì)因子Xa的抑制比對(duì)TF/因子VIIa、凝血酶和/或激肽釋放酶的抑制好優(yōu)選約1個(gè)數(shù)量級(jí)(10X)，更優(yōu)選約2個(gè)數(shù)量級(jí)(100X)，甚至更優(yōu)選約3個(gè)數(shù)量級(jí)(1000X)。
在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明的目的是提供化合物，該化合物相對(duì)于對(duì)因子VIIa、TF/因子VIIa、Xa或激肽釋放酶的抑制，抑制凝血酶。該實(shí)施方案的化合物對(duì)凝血酶的抑制比對(duì)TF/因子VIIa、因子Xa和/或激肽釋放酶的抑制好優(yōu)選約1個(gè)數(shù)量級(jí)(10X)，更優(yōu)選約2個(gè)數(shù)量級(jí)(100X)，甚至更優(yōu)選約3個(gè)數(shù)量級(jí)(1000X)。
本發(fā)明的進(jìn)一步目的是提供抑制TF/因子VIIa、Xa或凝血酶活性的方法，通過使這些酶與本發(fā)明有效抑制量的新穎抑制劑或含這些化合物的組合物接觸。再進(jìn)一步的目的是提供一種治療以TF/因子VIIa、Xa或凝血酶介導(dǎo)的疾病的方法，通過將有效量的本發(fā)明的化合物之一或含該化合物的組合物給藥于需要這種治療的哺乳動(dòng)物。另外一個(gè)目的是提供一種預(yù)防血栓形成或治療異常血栓形成的方法，通過將有效量的本發(fā)明的化合物之一或含該化合物和載體或賦形劑的組合物給藥于需要這種治療的哺乳動(dòng)物。
這些目的以及將在下面的描述中明確的其它目的，均可通過本發(fā)明的具有如下所示結(jié)構(gòu)式的化合物及其酸加成鹽和堿加成鹽和前藥來實(shí)現(xiàn) 其中A和B獨(dú)立地為CH，CR3或N；X為C＝O或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；Y為S(O)n-R1其中n＝1或2，S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，S(O)n-OR2其中n＝1或2，C(O)R1，C(S)R1，C(O)-OR1，C(O)-NR2R2；N1和N2為氮原子；Q和R1獨(dú)立地為(1)任選取代的具有1至約10個(gè)碳原子的烷基；(2)任選取代的芳基烷基，其中包含具有6至約10個(gè)環(huán)碳原子的芳基部分，該芳基部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(3)任選取代的雜芳基烷基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的雜芳基部分，該雜芳基部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(4)任選取代的碳環(huán)烷基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)碳原子的碳環(huán)部分，該碳環(huán)部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(5)任選取代的雜環(huán)烷基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)基部分，該雜環(huán)基部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(6)任選取代的具有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基；(7)任選取代的芳基鏈烯基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的芳基部分，該芳基部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(8)任選取代的雜芳基鏈烯基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的雜芳基部分，該雜芳基部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(9)任選取代的碳環(huán)鏈烯基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)碳原子的碳環(huán)部分，該碳環(huán)部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(10)任選取代的雜環(huán)鏈烯基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)部分，該雜環(huán)與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(11)任選取代的具有6至約10個(gè)環(huán)碳原子的芳基；(12)任選取代的雜芳基，其具有5至約10個(gè)選自碳原子和雜原子的環(huán)原子，其中所述的雜原子為氮、氧或硫；(13)任選取代的具有3至約10環(huán)碳原子的碳環(huán)基；(14)任選取代的雜環(huán)基，其具有3至約10個(gè)選自碳原子和雜原子的環(huán)原子，其中所述的雜原子為氮、氧或硫；每個(gè)R2獨(dú)立地為H，烷基，取代烷基，C(O)R7或C(NH)R7，或者N1R2和N2R2一起形成基團(tuán)N1-CO-N2；R3為H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素或OH；R4a和R5獨(dú)立地為選自下列基團(tuán)之一H，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烷氧基烷基，未取代或取代的鹵烷基，未取代或取代的芳基，烷基-OR7，烷基-NR7R8，烷基-OC(O)R7，烷基-C(O)OR7，烷基-C(O)R7，OC(O)R7，C(O)OR7，C(O)R7，以及其中的烷基、R7或R8被1-3個(gè)F、Cl、Br、I取代的基團(tuán)，OR7，SR7，NR7R8，OC(OR7)，C(O)OR7，C(O)R7，C(O)NR7R8，NHC(NH)NH2，PO3，未取代或取代的吲哚基或者未取代或取代的咪唑基；R4b為H，烷基或取代烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地選自H，C1-C6烷基，C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，C1-C6鹵代烷基，鹵素，氰基，OR7，SR7，NR7R8，OC(O)OR7，C(O)R7和OC(O)R7；R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。
另外，本發(fā)明的目的是通過含這些化合物的組合物以及下面所描述的方法實(shí)現(xiàn)的。
優(yōu)選實(shí)施方案詳述定義術(shù)語″因子VIIa，TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽釋放酶介導(dǎo)的疾病″是指與血液凝結(jié)有關(guān)的疾病或生理狀況，其中抑制這些酶中的一種或多種可減輕或消除至少一種該疾病或狀況的生理癥狀。
術(shù)語″血栓形成″是指在哺乳動(dòng)物血管或人造容器，如塑料或玻璃管或瓶中，血液凝塊或血栓的形成或發(fā)展。離開原始位置并在另一位置發(fā)現(xiàn)的血栓稱作血栓形成的栓子。
術(shù)語″異常血栓形成″是指發(fā)生于與健康狀況良好的哺乳動(dòng)物不同的哺乳動(dòng)物中的血栓形成。
術(shù)語″烷基″，單獨(dú)或作為其它術(shù)語的一部分使用，是指支鏈或非支鏈的飽和脂肪族烴基，其具有規(guī)定的碳原子數(shù)目，或者如果未規(guī)定碳原子數(shù)目時(shí)，具有最多和包括12個(gè)碳原子。烷基的實(shí)例包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，2-甲基丁基，2，2-二甲基丙基，正己基，2-甲基戊基，2，2-二甲基丁基，正庚基，3-庚基，2-甲基己基，等等。術(shù)語″低級(jí)烷基″、″C1-C6烷基″和″1-6個(gè)碳原子的烷基″是同義的，而且可以交替使用。優(yōu)選的″C1-C6烷基″是甲基，乙基，1-丙基，異丙基，1-丁基或仲丁基。
術(shù)語“取代烷基”或″取代的Cn-Cm烷基″其中m和n是確定烷基中所包含的碳原子范圍的整數(shù)，是指上述的烷基，該烷基被1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)鹵素(F，Cl，Br，I)，三氟甲基，羥基，未取代或取代的C1-C7烷氧基，受保護(hù)的羥基，氨基(包括烷基和二烷基氨基)，受保護(hù)的氨基，未取代或取代的C1-C7酰氧基，未取代或取代的C3-C7雜環(huán)基，未取代或取代的苯氧基，硝基，羧基，受保護(hù)的羧基，未取代或取代的烷氧羰基，未取代或取代的?；?，氨基甲?；被柞Ｑ趸?，氰基，甲基磺酰氨基，未取代或取代的卞氧基，未取代或取代的C3-C6碳環(huán)基或C1-C4烷氧基所取代。所述取代烷基可以被相同或不同的取代基取代一次(優(yōu)選)、兩次或三次。
上述取代烷基的實(shí)例包括但不限于氰基甲基，硝基甲基，羥基甲基，三苯甲氧基甲基，丙酰氧基甲基，氨基甲基，羧基甲基，羧基乙基，三氟乙基，三氟丙基，羧基丙基，2-氨基丙基，烷氧基羰基甲基，烷氧基羰基氨基甲基，氨基甲酰氧基甲基，甲氧基甲基，乙氧基甲基，叔丁氧基甲基，乙酰氧基甲基，氯甲基，溴甲基，碘甲基，三氟甲基，6-羥基己基，2，4-二氯(正丁基)，2-氨基(異丙基)，2-氨基甲酰氧基乙基等。所述烷基還可以被碳環(huán)基取代。其實(shí)例包括環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基甲基，環(huán)戊基甲基，和環(huán)己基甲基，還包括相應(yīng)碳環(huán)基的-乙基，-丙基，-丁基，-戊基，-己基等。在上述基團(tuán)內(nèi)，優(yōu)選的基團(tuán)實(shí)例包括取代的甲基，如被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的甲基。取代甲基的實(shí)例包括如羥基甲基，受保護(hù)的羥基甲基(如四氫吡喃氧基甲基)，乙酰氧基甲基，氨基甲酰氧基甲基，三氟甲基，氯甲基，羧基甲基，溴甲基和碘甲基。
術(shù)語″烷氧基″是指具有規(guī)定碳原子數(shù)的基團(tuán)，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。術(shù)語″取代的烷氧基″是指那些被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的烷氧基，如2，2，2-三氟乙氧基，2，2，2-三氟丙氧基等。
本文中，術(shù)語″酰氧基″是指具有規(guī)定碳原子數(shù)的碳酰氧基，如甲酰氧基，乙酰氧基，丙酰氧基，丁酰氧基，戊酰氧基，己酰氧基，庚酰氧基等。術(shù)語″取代的酰氧基″是指那些被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的酰氧基。
在本文中，術(shù)語″烷基羰基″、″烷酰基″和″?；蹇梢越惶媸褂?，并包括具有規(guī)定碳原子數(shù)的基團(tuán)，如甲?；阴；?，丙?；?，丁?；?，戊?；?，己?；?，庚酰基，苯甲酰基等。
術(shù)語″碳環(huán)基(carbocyclyl)″，″碳環(huán)的(carbyclylic)″和″碳環(huán)(carbocyclo)″單獨(dú)使用或作為復(fù)合基團(tuán)如碳環(huán)烷基的一部分使用時(shí)，是指1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)環(huán)的脂族環(huán)，具有3-14個(gè)碳原子，并優(yōu)選具有3-7個(gè)碳原子。優(yōu)選的碳環(huán)基包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基。術(shù)語″取代的碳環(huán)基″和″碳環(huán)″是指那些被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的基團(tuán)。
“碳環(huán)烷基”是上面定義的碳環(huán)基通過共價(jià)鍵與上面定義的烷基連接。
術(shù)語″鏈烯基″是指支鏈或非支鏈的烴基，該烴基具有指定的碳原子數(shù)，并且包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵，每個(gè)雙鍵獨(dú)立地為順式、反式或非幾何異構(gòu)體。術(shù)語″取代的鏈烯基″是指那些被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的鏈烯基。
術(shù)語″炔基″是指支鏈或非支鏈的烴基，該烴基具有指定的碳原子數(shù)，并且包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳三鍵。術(shù)語″取代的炔基″是指那些被與″取代的Cn-Cm烷基″相同的取代基取代的炔基。
術(shù)語″烷硫基″和″C1-C12取代的烷硫基″分別是指附有硫原子的C1-C12烷基和C1-C12取代烷基，而該硫原子又是該烷硫基或取代烷硫基連接指定基團(tuán)或取代基的連接點(diǎn)。
術(shù)語″芳基″單獨(dú)使用或作為另一術(shù)語的一部分時(shí)，是指同素環(huán)的芳香性基團(tuán)，不論稠合與否，均具有指定的碳原子數(shù)，或如果未指定碳原子數(shù)，最高為14個(gè)碳原子。優(yōu)選的芳基包括苯基，萘基，聯(lián)苯基，菲基，并四苯基等(參見例如Lang′s Handbook of Chemistry(Dean，J.A.，ed)13thed.Table 7-2)。
術(shù)語″取代苯基″或″取代芳基″是指被1、2、3、4或5個(gè)，優(yōu)選1-2、1-3或1-4個(gè)取代基取代的苯基或芳基，所述的取代基選自鹵素(F，Cl，Br，I)，羥基，受保護(hù)的羥基，氰基，硝基，烷基(優(yōu)選C1-C6烷基)，烷氧基(優(yōu)選C1-C6烷氧基)，卞氧基，羧基，受保護(hù)的羧基，羧基甲基，受保護(hù)的羧基甲基，羥基甲基，受保護(hù)的羥基甲基，氨基甲基，受保護(hù)的氨基甲基，三氟甲基，烷基磺酰氨基，芳基磺酰氨基，雜環(huán)基磺酰氨基，雜環(huán)基，芳基或規(guī)定的其它基團(tuán)。而這些取代基之一或其中的次甲基(CH)和/或亞甲基(CH2)，又可以被與上面所指出的基團(tuán)相同的基團(tuán)所取代。術(shù)語″取代苯基″的實(shí)例包括但不限于一或二(鹵代)苯基如4-氯苯基，2，6-二氯苯基，2，5-二氯苯基，3，4-二氯苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，4-溴苯基，3，4-二溴苯基，3-氯-4-氟苯基，2-氟苯基等；一或二(羥基)苯基如4-羥基苯基，3-羥基苯基，2，4-二羥基苯基，及其羥基受保護(hù)的衍生物等；硝基苯基如3-或4-硝基苯基；氰基苯基如4-氰基苯基；一或二(低級(jí)烷基)苯基如4-甲基苯基，2，4-二甲基苯基，2-甲基苯基，4-(異丙基)苯基，4-乙基苯基，3-(正丙基)苯基等；一或二(烷氧基)苯基如3，4-二甲氧基苯基，3，4-二乙氧基苯基，3-乙氧基-4-異丙氧基苯基，3-乙氧基-S-丁氧基苯基，3-甲氧基-4-卞氧基苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-苯基，3-乙氧基苯基，4-(異丙氧基)苯基，4-(叔丁氧基)苯基，3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；一或二羧基苯基或(受保護(hù)的羧基)苯基如4-羧基苯基；一或二(羥基甲基)苯基或(受保護(hù)的羥基甲基)苯基如3-(受保護(hù)的羥基甲基)苯基或3，4-二(羥基甲基)苯基；一或二(氨基甲基)苯基或(受保護(hù)的氨基甲基)苯基如2-(氨基甲基)苯基或2，4-二(受保護(hù)的氨基甲基)苯基；或一或二(N-(甲基磺酰氨基))苯基如3-(N-甲基磺酰氨基))苯基。同時(shí)，術(shù)語″取代苯基″也代表其中的取代基不同的二取代苯基，如3-甲基-4-羥基苯基，3-氯-4-羥基苯基，2-甲氧基-4-溴苯基，4-乙基-2-羥基苯基，3-羥基-4-硝基苯基，2-羥基-4-氯苯基等，和其中的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)取代基不同的三取代苯基，如3-甲氧基-4-卞氧基-6-甲基磺酰氨基，3-甲氧基-4-卞氧基-6-苯基磺酰氨基，以及其中的取代基不同的四取代苯基，如3-甲氧基-4-卞氧基-5-甲基-6-苯基磺酰氨基。優(yōu)選的取代苯基包括3-甲氧基苯基，3-乙氧基-苯基，4-卞氧基苯基，4-甲氧基苯基，3-乙氧基-4-卞氧基苯基，3，4-二乙氧基苯基，3-甲氧基-4-卞氧基苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-苯基，3-甲氧基-4-(1-氯甲基)卞氧基-6-甲基磺酰基氨基苯基。同樣，術(shù)語″取代苯基″還代表其中稠合了芳基、苯基或雜芳基的苯基。所述的稠環(huán)也可以被任意，優(yōu)選1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)取代基所取代，該取代基為上文中為″取代烷基″確定的取代基。
術(shù)語″芳烷基″是指具有指定碳原子數(shù)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)芳基連接在一個(gè)具有指定碳原子數(shù)的烷基上，包括但不限于苯甲基，萘甲基，苯乙基，二苯基甲基，三苯甲基等。優(yōu)選的芳基烷基是苯甲基。
術(shù)語″取代芳烷基″是指烷基，優(yōu)選C1-C8烷基在任意碳上被芳基，優(yōu)選C6-C10芳基取代，該芳基通過芳環(huán)的任意位置連接到烷基上并在烷基部分被1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)基團(tuán)所取代，所述的基團(tuán)選自鹵素(F，Cl，Br，I)，羥基，受保護(hù)的羥基，氨基，受保護(hù)的氨基，C1-C7酰氧基，硝基，羧基，受保護(hù)的羧基，氨基甲?；被柞Ｑ趸?，氰基，C1-C6烷硫基，N-(甲基磺酰氨基)或C1-C4烷氧基。任選該芳基可以被1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)基團(tuán)所取代，所述的基團(tuán)選自鹵素，羥基，受保護(hù)的羥基，硝基，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羧基，受保護(hù)的羧基，羧基甲基，受保護(hù)的羧基甲基，羥基甲基，受保護(hù)的羥基甲基，氨基甲基，受保護(hù)的氨基甲基或N-(甲基磺酰氨基)。如前所述，當(dāng)C1-C8烷基部分或芳基部分或二者均被二取代時(shí)，所述的取代基可以相同或相異。該基團(tuán)也可以作為取代的芳烷氧基的取代的芳烷基出現(xiàn)。
術(shù)語″取代的芳烷基″及其出現(xiàn)在″取代的芳烷氧基″中的該基團(tuán)的實(shí)例包括2-苯基-1-氯乙基，1-苯基-1-氯甲基，1-苯基-1-溴甲基，2-(4-甲氧基苯基)乙基，2，6-二羥基-4-苯基(正己基)，5-氰基-3-甲氧基-2-苯基(正戊基)，3-(2，6-二甲基苯基)正丙基，4-氯-3-氨基苯甲基，6-(4-甲氧基苯基)-3-羧基(正己基)，5-(4-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)(正戊基)等。
本文中所使用的術(shù)語″羧基保護(hù)基團(tuán)″是指羧酸基團(tuán)的一種酯衍生物，常用來在化合物的其它基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時(shí)阻斷或保護(hù)羧酸基團(tuán)。這種羧基保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括4-硝基苯甲基，4-甲氧基苯甲基，3，4-二甲氧基苯甲基，2，4-二甲氧基苯甲基，2，4，6-三甲氧基苯甲基，2，4，6-三甲基苯甲基，五甲基苯甲基，3，4-亞甲基二氧基苯甲基，二苯甲基，4，4′-二甲氧基二苯甲基，2，2′，4，4′-四甲氧基二苯甲基，烷基如甲基、乙基、異丙基、叔丁基或叔戊基，三苯甲基，4-甲氧基三苯甲基，4，4′-二甲氧基三苯甲基，4，4′，4″-三甲氧基三苯甲基，2-苯基丙-2-基，三甲基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，苯甲酰甲基，2，2，2-三氯乙基，β-(三甲基甲硅烷基)乙基，β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基，對(duì)甲苯磺?；一?-硝基苯磺?；一?，烯丙基，肉桂基，1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等部分。所采用的羧基保護(hù)基團(tuán)的種類沒有嚴(yán)格的限制，只要所衍生的羧基在分子其它位置上進(jìn)行的后續(xù)反應(yīng)條件是穩(wěn)定的，且能在適宜的時(shí)候脫除該羧基保護(hù)基團(tuán)而不破壞分子的其余部分。特別重要的是，不要使羧基保護(hù)的分子接觸強(qiáng)親核性的堿或使用高活性金屬催化劑如阮內(nèi)鎳的還原條件(這種苛刻的脫除條件在脫除下面討論的氨基保護(hù)基團(tuán)和羥基保護(hù)基團(tuán)時(shí)也應(yīng)避免)。優(yōu)選的羧基保護(hù)基團(tuán)是烯丙基和對(duì)硝基苯甲基。也可以用類似于頭孢菌素、青霉素和肽技術(shù)中所用的羧基保護(hù)基團(tuán)來保護(hù)羧基取代基。這些基團(tuán)的進(jìn)一步實(shí)例可參見E.Haslam，″Protective Groups in OrganicChemistry″，J.G.W. McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 5，and T.W.Greene，″Protective Groups in Organic Synthesis″，JohnWiley and Sons，New York，NY，1981，Chapter 5。術(shù)語″受保護(hù)的羧基″是指被上述羧基保護(hù)基團(tuán)取代的羧基。
本文中所使用的術(shù)語″氨基保護(hù)基團(tuán)″是指肽技術(shù)中為保護(hù)肽氮原子不發(fā)生不合乎需要的副反應(yīng)而常常使用的任何基團(tuán)。這種基團(tuán)包括對(duì)甲氧基苯基，3，4-而甲氧基苯甲基，芐基，鄰-硝基苯甲基，二(對(duì)甲氧基苯基)甲基，三苯基甲基，(對(duì)甲氧基苯基)聯(lián)苯基甲基，聯(lián)苯基-4-吡啶基甲基，m-2-(吡啶甲基)-N′-氧化物，5-二苯并環(huán)庚基，三甲基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基等。對(duì)這些保護(hù)基團(tuán)的進(jìn)一步描述，可參見″Protective Groups in OrganicSynthesis″，by Theodora W.Greene，1981，John Wiley and Sohs，New York。
術(shù)語″雜環(huán)基″、″雜環(huán)的″、“雜環(huán)基(heterocyclyl)”或“雜環(huán)(heterocyclo)”單獨(dú)以及用作復(fù)合基團(tuán)如雜環(huán)基烷基的一部分使用時(shí)，可交替使用并且是指任何飽和的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)或非芳香性的不飽和環(huán)，其具有規(guī)定的碳原子數(shù)，一般具有3至約10個(gè)環(huán)原子，其中該環(huán)原子為碳和1、2、3或4個(gè)氮、硫或氧原子。通常，5元環(huán)具有0-2個(gè)雙鍵，而6元或7元環(huán)具有0-3個(gè)雙鍵，且氮或硫雜原子可任選地被氧化，此外任何氮雜原子還可以被季銨化。實(shí)例包括吡咯烷基，環(huán)氧乙烷基，氧雜環(huán)丁烷基，四氫呋喃基，2，3-二氫呋喃基，2H-吡喃基，四氫吡喃基，硫雜環(huán)丙基，硫雜環(huán)丁基(thietanyl)，四氫硫雜環(huán)丁基，氮雜環(huán)丙烯基，氮雜環(huán)丁烷基，1-甲基-2-吡咯基，哌啶基和3，4，5，6-四氫哌啶基。
“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)鏈烯基”是上面定義的雜環(huán)基通過共價(jià)鍵與上面定義的烷基或鏈烯基相連接的基團(tuán)。
除非另外說明，″雜芳基″本身以及用作復(fù)合基團(tuán)如雜芳基烷基的一部分時(shí)，均是指1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)環(huán)的芳環(huán)體系，該芳環(huán)體系具有指定的碳原子數(shù)，其中至少1個(gè)環(huán)為5、6或7元環(huán)，并含有1-4個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子，而且優(yōu)選至少一個(gè)雜原子為氮(Lang′s Handbood of Chemistry，supra)。該定義中包括上述任何雜芳環(huán)與苯環(huán)稠合成的任何雙環(huán)基團(tuán)。雜原子為氮和氧的雜芳基優(yōu)選。
下面的環(huán)系是術(shù)語″雜芳基″所表示的雜芳基(取代或未取代的)的實(shí)例噻吩基，呋喃基，咪唑基，吡唑基，噻唑基，異噻唑基，噁唑基，異噁唑基，三唑基，噻二唑基，噁二唑基，四唑基，噻三唑基，噁三唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噠嗪基，噻嗪基，噁嗪基，三嗪基，噻二嗪基，噁二嗪基，二噻嗪基，二噁嗪基，噁噻嗪基，四嗪基，噻三嗪基，噁三嗪基，二噻二嗪基，咪唑啉基，二氫嘧啶基，四氫嘧啶基，四唑并[1，5-b]噠嗪基和嘌呤基，以及苯并稠環(huán)衍生物，如苯并噁唑基，苯并呋喃基，苯并噻唑基，苯并噻二唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基和吲哚基。
含硫原子或氧原子以及1-3個(gè)氮原子的雜5元環(huán)體系也適用于本發(fā)明。這種基團(tuán)的優(yōu)選實(shí)例包括噻唑基，特別是噻唑-2-基和噻唑-2-基N-氧化物，噻二唑基，特別是1，3，4-噻二唑-5-基和1，2，4-噻二唑-5-基，噁唑基，優(yōu)選噁唑-2-基和噁二唑基，如1，3，4-噁二唑-5-基和1，2，4-噁二唑-5-基。進(jìn)一步優(yōu)選的具有2-4個(gè)氮原子的5元環(huán)系的實(shí)例包括咪唑基，優(yōu)選咪唑-2-基；三唑基，優(yōu)選1，3，4-三唑-5-基；1，2，3-三唑-5-基，1，2，4-三唑-5-基和四唑基，優(yōu)選1H-四唑-5-基。優(yōu)選的苯并稠環(huán)衍生物的實(shí)例為苯并噁唑-2-基，苯并噻唑-2-基和苯并咪唑-2-基。
上述雜環(huán)體系的其他適宜的特例是含有1-3個(gè)氮原子的6元環(huán)系。這種實(shí)例包括吡啶基，如吡啶-2-基，吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基，優(yōu)選嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；噻嗪基，優(yōu)選1，3，4-噻嗪-2-基和1，3，5-噻嗪-4-基；噠嗪基，特別是噠嗪-3-基和吡嗪基。吡啶N-氧化物和噠嗪N-氧化物，以及吡啶基，嘧啶-2-基，嘧啶-4-基，噠嗪基和1，3，4-三嗪-2-基是優(yōu)選的基團(tuán)。
任選取代的雜環(huán)體系的取代基以及上述5元和6元環(huán)系的其他實(shí)例，可參見W.Druckheimer等人的美國(guó)專利4,278,793。
特別優(yōu)選的雜芳基包括1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基鈉鹽，1，2，4-噻二唑-5-基，3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基，1，3，4-三唑-5-基，2-甲基-1，3，4-三唑-5-基，2-羥基-1，3，4-三唑-5-基，2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基鈉鹽，2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基，1，3-噁唑-2-基，1，3，4-噁二唑-5-基，2-甲基-1，3，4-噁二唑-5-基，2-(羥基甲基)-1，3，4-噁二唑-5-基，1，2，4-噁二唑-5-基，1，3，4-噻二唑-5-基，2-硫羥-1，3，4-噻二唑-5-基，2-(甲硫基)-1，3，4-噻二唑-5-基，2-氨基-1，3，4-噻二唑-5-基，1H-四唑-5-基，1-甲基-1H-四唑-5-基，1-(1-(二甲基氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基鈉鹽，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基鈉鹽，2-甲基-1H-四唑-5-基，1，2，3-三唑-5-基，1-甲基-1，2，3-三唑-5-基，2-甲基-1，2，3-三唑-5-基，4-甲基-1，2，3-三唑-5-基，吡啶-2-基N-氧化物，6-甲氧基-2-(N-氧化物)-噠嗪-3-基，6-羥基噠嗪-3-基，1-甲基吡啶-2-基，1-甲基吡啶-4-基，2-羥基嘧啶-4-基，1，4，5，6-四氫-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基，1，4，5，6-四氫-4-(甲?；谆?-5，6-二氧代-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-as三嗪-3-基鈉鹽，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-2-甲基-as-三嗪-3-基鈉鹽，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-6-甲氧基-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-2-甲基-as-三嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-2，6-二甲基-as-三嗪-3-基，四唑并[1，5-b]噠嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]-噠嗪-6-基。
其他的″雜芳基″包括4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基，4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基鈉鹽，1，3，4-三唑-5-基，2-甲基-1，3，4-三唑-5-基，1H-四唑-5-基，1-甲基-1H-四唑-5-基，1-(1-(二甲基氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基，1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基鈉鹽，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基，1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基鈉鹽，1，2，3-三唑-5-基，1，4，5，6-四氫-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基，1，4，5，6-四氫-4-(2-甲?；谆?-5，6-二氧代-as-噻嗪-3-基，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-2-甲基-as-三嗪-3-基鈉鹽，2，5-二氫-5-氧代-6-羥基-2-甲基-as-三嗪-3-基，四唑并[1，5-b]噠嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]噠嗪-6-基。
“雜芳基烷基”或“雜芳基鏈烯基”是上面定義的雜芳基通過共價(jià)鍵與上面定義的烷基或鏈烯基相連接的基團(tuán)。
″可藥用的鹽″既包括酸加成鹽又包括堿加成鹽。″可藥用的酸加成鹽″是指那些保持游離堿的生物效力和性質(zhì)的鹽，否則在生物學(xué)上就不合乎需要，該鹽是與無機(jī)酸或有機(jī)酸形成的，所述無機(jī)酸有如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸，碳酸，磷酸等，所述的有機(jī)酸可以選自脂肪族，環(huán)脂肪族，芳香族，芳脂肪族，雜環(huán)羧酸和磺酸類的有機(jī)酸，如甲酸，乙酸，丙酸，羥基乙酸，葡糖酸，乳酸，丙酮酸，草酸，蘋果酸，馬來酸，丙二酸，琥珀酸，富馬酸，酒石酸，檸檬酸，天冬氨酸，抗壞血酸，谷氨酸，氨茴酸，苯甲酸，肉桂酸，苦杏仁酸，embonic acid，苯乙酸，甲磺酸，乙磺酸，對(duì)甲苯磺酸，水楊酸等。
″可藥用的堿加成鹽″包括那些衍生于無機(jī)堿的鹽，如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁鹽等。特別優(yōu)選銨、鉀、鈉、鈣和錳鹽。衍生于可藥用的有機(jī)無毒堿的鹽包括伯胺、仲胺及叔胺，取代胺包括天然存在的取代胺，環(huán)胺和堿性離子交換樹脂，如異丙胺，三甲胺，二乙胺，三乙胺，三丙胺，乙醇胺，2-二乙基氨基乙醇，三甲胺(trimethamine)，二環(huán)己胺，賴氨酸，精氨酸，組氨酸，咖啡因，普魯卡因，哈胺青霉素，膽堿，甜菜堿，乙二胺，葡糖胺，甲基葡糖胺，可可堿，嘌呤，哌嗪，哌啶，N-乙基哌啶，聚胺樹脂等的鹽。特別優(yōu)選的有機(jī)無毒堿是異丙胺，二乙胺，乙醇胺，三甲胺，二環(huán)己基胺，膽堿和咖啡因。
本文中所使用的術(shù)語″前藥″是指母體藥分子的衍生物，該衍生物加強(qiáng)藥學(xué)上所需的特征或性能(如輸運(yùn)，生物可利用性，藥物動(dòng)力學(xué)等)，并且需要在生物體內(nèi)進(jìn)行自發(fā)的或酶的生物轉(zhuǎn)化，以釋放活性的母體藥。
實(shí)施方案本發(fā)明一般是指具有下列結(jié)構(gòu)的化合物 在該結(jié)構(gòu)中，R2，R5，R6，A，B，N1，N2，Q，X以及Y的定義同上。在這些定義中，烷基優(yōu)選未取代或取代的C1-C6烷基；鏈烯基優(yōu)選未取代或取代的C2-C6鏈烯基；炔基優(yōu)選未取代或取代的C2-C6炔基；芳基優(yōu)選未取代或取代的萘基或苯基，更優(yōu)選苯基；芳烷基優(yōu)選未取代或取代的芐基。所述的變量m優(yōu)選為1。
基團(tuán)Y優(yōu)選為S(O)n-R1其中n＝1或2，或者為基團(tuán)S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，更優(yōu)選為S(O)n-R1。
在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1，例如當(dāng)Y為S(O)n-R1時(shí)，選自C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C3-C6環(huán)烷基，苯基，萘基，芐基和具有5-6個(gè)選自碳原子和1-2個(gè)雜原子的環(huán)原子的雜芳基，其中所述的的雜原子為N，S或O，而且R1任選地被1-3個(gè)選自鹵素，硝基，C1-C6烷基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，C1-C6鹵代烷基，C1-C6烷基-NR7R8，C(O)OR7，OC(O)R7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7和NHC(O)NR7R8的取代基所取代，其中的R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。在該實(shí)施方案中，其余的每個(gè)基團(tuán)R2，R5，R6，A，B，Q，X和Y可以獨(dú)立地選自上面各自定義中的任何基團(tuán)。
在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Q為苯基，該苯基任選地被1-5個(gè)、優(yōu)選2-4個(gè)、更優(yōu)選2-3個(gè)取代基所取代，所述的取代基選自鹵素，硝基，C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，OC1-C6烷基-NR7R8，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6鹵代烷基，O-芳烷基(如卞氧基)，C(O)OR7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7，NHC(O)NR7R8，NR7S(O)nR1，NR7S(O)nR7，S(O)nR7，S(O)nNR7，其中R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。在該實(shí)施方案中，其余的每個(gè)基團(tuán)R2，R5，R6，A，B，X和Y(以及R1)可以獨(dú)立地選自上面各自定義中的任何基團(tuán)。同時(shí)，每個(gè)烷基、鏈烯基和炔基部分還可以按上述的定義被取代。
在第三個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Q具有如下結(jié)構(gòu) 其中R9為H，C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，羥基，NR7R8，SR7或OR7，其中R7和R8獨(dú)立地為H或未取代或取代的C1-C6烷基；R10，R11和Z2獨(dú)立地選自H，鹵素，硝基，氰基，C1-C6烷基，C6-C10芳基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OC(O)R7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-OC(O)R7，O-C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6鹵代烷基，OR12，C1-C6烷基-R12，O-C1-C6烷基-R12，C(O)OR7，C(O)OR12，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NR7C(O)R7，NR7C(O)R12，NR7C(O)-NR7R8，NR7C(O)OR7，NR7C(O)OR12，NR7S(O)n-R1，NR7S(O)n-R7和NR7S(O)n-R12，其中R7和R8獨(dú)立地為H或未取代或取代的C1-C6烷基，R12為未取代或取代的C6-C10芳基或上面定義的雜芳基且n為1或2；Z1為H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素或硝基。在該實(shí)施方案中，其余的每個(gè)基團(tuán)R2，R5，R6，A，B，X和Y可以獨(dú)立地選自上面各自定義中的任何基團(tuán)。每個(gè)烷基、鏈烯基和炔基部分還可以按上面的定義被取代。
在本發(fā)明的各種情況下，Z1和Z2可以為氫；Z1，Z2和R11可以為氫；或者Z1，R10和R11可以為氫；而其余的環(huán)取代基的定義同上。
在另一實(shí)施方案中，當(dāng)Q為取代苯基時(shí)，位于該環(huán)的4-位和5-位或者位于5-位和6-位的取代基，可以結(jié)合在一起形成未取代或取代的碳環(huán)或雜環(huán)。這類化合物的實(shí)例示于下面，其中符號(hào) 優(yōu)選為5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)按如下位置與苯環(huán)稠合。 適宜的可與苯環(huán)稠合的5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)的實(shí)例包括如下所示的環(huán)系，其中R6的定義同上。 在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，Y為S(O)n-R1其中n為1或2，優(yōu)選為2。在該實(shí)施方案中，R1的定義可以同上，而且其余的每個(gè)基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。
也優(yōu)選這樣的化合物，其中的Q為取代的苯基而R10選自C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6氨基烷基，C1-C6鹵代烷基，C1-C6羥基烷基，苯基，苯氧基，芐基，卞氧基，以及被下列基團(tuán)取代的苯氧基和卞氧基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素，C1-C6鹵代烷基，C1-C6羥基烷基，C1-C6氨基烷基，C(O)-C1-C6烷基，C(O)O-C1-C6烷基合C(O)OH，其中剩余的每個(gè)基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。
這樣的化合物也是重要的，這些化合物中的R11為NR7C1-C6烷基-C(O)NR7R8，NR7S(O)n-R7或N R7S(O)n-R12，n為1或2和/或其中的Z1＝Z2＝H和/或其中的R10為OR7，OR12，OC7-C10-芳烷基，OC1-C6烷基-OR7或OC1-C6烷基-OR12其中R7和R12為未取代或取代的上面定義的基團(tuán)。適宜的取代的R7和R12包括如上所述的那些取代基團(tuán)，例如具有1或2個(gè)C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基-C1-C6烷氧基，鹵素，C1-C6鹵代烷基，C1-C6羥基烷基，C1-C6氨基烷基，OC(O)-C1-C6烷基，C(O)O-C1-C6烷基，C1-C6烷基C(O)OR7，C1-C6烷基OC(O)R7或C(O)OH的基團(tuán)。在這些化合物中，其余的每個(gè)基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。當(dāng)Y為S(O)n-R1且n為1或2時(shí)，即為二磺酰胺化合物時(shí)，這些化合物也是重要的。
在另一實(shí)施方案中，A和B獨(dú)立地為CH或CR3，其中R3為H、C1-6烷基或OH，其中剩余的基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。
在另一實(shí)施方案中，R6為H或者R3為CH，其中剩余的基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為羰基(C＝O)，其中剩余的基團(tuán)可以獨(dú)立地選擇具有任何上述的定義。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選m＝1。
在下面示出的表1中，給出了本發(fā)明的某些化合物在各個(gè)位置的某些優(yōu)選基團(tuán)的實(shí)例。該表中公開了一組特定的化合物，這組化合物是通過選擇取代基的的全部獨(dú)特的組合而得到的，即對(duì)每個(gè)基團(tuán)從該表的每列中選擇一個(gè)取代基，并將這些基團(tuán)與下表1所公開的結(jié)構(gòu)相結(jié)合。
表1
制備方法本發(fā)明的化合物可以通過使用標(biāo)準(zhǔn)教科書中所描述的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)方法來制備(如March，J.″Advanced Organic Chemistry″McGraw-Hill，New York，1977；Collman，J.P.，Hegedus，L.S.，Norton，J.R.，F(xiàn)inke，R.G.″Principles andApplications of Organotransition Metal Chemistry″University Science，MillValley，1987；Larock，R.C.″Comprehensive Organic Transformations″Verlag，New York，1989)。
合成本發(fā)明化合物的關(guān)鍵中間體具有下式的結(jié)構(gòu) 在該式中，A，B，R2，R4a，R4b，R5，R6，m和Q具有并且優(yōu)選具有上述含義?？梢杂萌舾煽晒┻x擇的合成途徑制備該化合物。制備之后，可以將氰基轉(zhuǎn)化成脒基(C(NH)NH2)，例如，使用諸如Pinner反應(yīng)等已知的方法。具有上式所示的氰基化合物可以與羥胺反應(yīng)，優(yōu)選在乙醇溶劑中反應(yīng)，然后用阮內(nèi)鎳還原，優(yōu)選在乙醇溶劑中還原，或者先與乙醇HCl反應(yīng)，然后與醇氨反應(yīng)，生成相應(yīng)的脒基化合物。作為選擇，改進(jìn)的Pinner反應(yīng)，即先使用吡啶/二乙胺(1/1)/硫化氫，緊接著使用碘甲烷/乙腈，然后使用乙酸銨/乙醇，也會(huì)提供合乎需要的脒基產(chǎn)物。
合成上式所示化合物的途徑之一是使用適宜的取代前體而進(jìn)行的縮合反應(yīng)，所述的前體如下面的方案所示。
該縮合反應(yīng)是在存在催化劑和烷醇(ROH)的情況下進(jìn)行的，所述的催化劑優(yōu)選路易斯酸催化劑，所述烷醇優(yōu)選低級(jí)烷醇，如甲醇，乙醇，異丙醇等，然后通過中間體水解，優(yōu)選使用過量的水，通常使用相當(dāng)于約10當(dāng)量的水。合適的路易斯酸包括BF3乙醚合物，AlCl3等。W-NC是一種異腈，其中W可以是任何適宜的烴基，通常為烷基，碳環(huán)烷基或芳烷基，優(yōu)選具有不超過約12個(gè)碳原子。特別優(yōu)選的異腈是芐基異腈。酯產(chǎn)物可以通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，包括高壓液相色譜(HPLC)，柱色譜，重結(jié)晶等進(jìn)行純化。
可以使用任何已知的還原劑([H])將所生成的酯還原成醇，所述的還原劑優(yōu)選在腈之前還原酯。適宜的還原劑和還原方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。參見，例如，Modem Synthetic Reactions，H.O.House，W.A.Benjami，Inc.，Second Ed.，1972。一種有用的還原劑是硼氫化鋰。然后用已知的化學(xué)反應(yīng)將醇轉(zhuǎn)化成胺。適宜的條件包括先使醇與疊氮化氫，DEAD，以及三苯基磷(PPh3)反應(yīng)，然后與PPh3和水反應(yīng)，或者先與鄰苯二甲酰亞胺，DEAD和PPh3反應(yīng)，然后再與肼反應(yīng)。這些反應(yīng)示于下面的方案中。作為選擇，也可以使酯與具有親核碳原子的試劑反應(yīng)，以引入適宜的R4a基團(tuán)。這種試劑可以包括活化的亞甲基碳，例如，與一個(gè)或多個(gè)吸電子更強(qiáng)的基團(tuán)如硝基(NO2)、烷氧羰基(COOR4a)等相鄰的亞甲基，Grignard試劑(R4aMgHal，其中Hal為鹵素)等，然后轉(zhuǎn)化成醇再轉(zhuǎn)化成胺。 氨基官能團(tuán)向磺酰胺的轉(zhuǎn)化以及腈官能團(tuán)向脒的轉(zhuǎn)化可以按任何所需的順序來進(jìn)行。優(yōu)選的反應(yīng)方案示于下列方案之中。 用已知的化學(xué)反應(yīng)、純化和分離方法來完成這些轉(zhuǎn)化。可以通過在堿的存在下與適宜的取代磺酰氯(ClSO2R1)反應(yīng)，將胺轉(zhuǎn)化成磺酰胺。腈可以先在醇溶劑中與羥胺反應(yīng)，然后還原，如用阮內(nèi)鎳和氫還原，或者與HCl/醇反應(yīng)，然后再與氨/醇反應(yīng)。
適宜的反應(yīng)順序的實(shí)例如下所示。 在該順序中，a＝BF3OEt2/EtOH，b＝LiBH4/DME，c＝鄰苯二甲酰亞胺，DIAD/PPh3/THF，d＝H2NNH2/EtOH，e＝R1SO2Cl，f＝H2/Pt/C/EtOH，而g＝R7SO2Cl/NEt3，NH2OH-HCl/NEt3，H2/Ra-Ni/MeOH。
可以按如下所示，用有關(guān)類似的合成方案來制備其中的X為羰基的化合物。 其中m＝2的化合物可以根據(jù)下面的方案來制備，該方案提供一種醇，所述的醇與上述方案所示中的醇是同系的，并且可以按相似的方式轉(zhuǎn)化成胺(將進(jìn)一步詳述的化合物)。在下面的方案中，(a)為堿而(b)為還原劑，如LiBH4。
其中的Y為C(O)-R1；C(O)-OR1；C(O)-NR1R2的化合物，用如上所述的相應(yīng)酰鹵(優(yōu)選酰氯)，鹵代甲酸烷基酯(優(yōu)選氯代甲酸酯)或異氰酸酯，按如下所示的方案來制備 適宜反應(yīng)順序的實(shí)例如下所示
由上面所示的縮合反應(yīng)得到酯，也可以作為合成其中的X為羰基的化合物的中間體。酯向羧酸的轉(zhuǎn)化可以容易地通過用堿金屬氫氧化物，如鋰、鈉或鉀的氫氧化物的皂化反應(yīng)來進(jìn)行。磺酰胺與該羧酸的偶聯(lián)可以通過先用例如羰基二咪唑?qū)υ擊人猁}進(jìn)行偶聯(lián)的活化來實(shí)現(xiàn)，或者通過肽合成中所使用的活化劑而進(jìn)行活化的其他途徑來實(shí)現(xiàn)。可以通過將烷基或芳基磺酰胺與強(qiáng)堿，如DBU或氫化鈉，優(yōu)選在無水溶劑，例如烴溶劑或醚溶劑，如四氫呋喃中混合來完成偶聯(lián)的第二步?？赏ㄟ^已經(jīng)描述過的方法將腈轉(zhuǎn)化成脒。 在本實(shí)施方案的更優(yōu)選的變化中，Q為具有如下所述的Z1，Z2和R9-R11取代基的取代苯基。
用來制備本發(fā)明化合物的中間體化合物的另一制備方法如下所示，其中包括由易得的醛和酮合成亞胺化合物，然后與含親核碳原子的試劑，即一般為″Nu-″的試劑進(jìn)行親核加成?！錘u″可以是如CHR4aNO2，CHR4aCOOR，CH(NO2)(COOR)等的一部分，由著名的Grignard反應(yīng)來產(chǎn)生，在反應(yīng)中，用堿去掉與吸電子基團(tuán)(CO，COO，NO2等)相鄰的碳原子上的質(zhì)子。 ″Nu″可以通過如下所示的已知的還原反應(yīng)轉(zhuǎn)化成如CHR4aNH2或CHR4aCH2OH或CHR4aNH2CH2OH的基團(tuán)。在這些中間體中，氨基可以按上面所描述的那樣進(jìn)一步磺化，或者?；?。適宜的反應(yīng)順序的實(shí)例如下所示。 可以使用另一種合成方法，來制備如上所述的醇中間體。如下面的方案所示，初始的苯乙烯衍生物與過酸的反應(yīng)通常得到產(chǎn)物的混合物，該產(chǎn)物包含如下所示的非氫R4a和/或R5取代基，而且無須分離就可以通過與氰基苯胺或相應(yīng)的氰基吡啶反應(yīng)而轉(zhuǎn)化成醇。 然后可以按如上所述的那樣用該醇來制備本發(fā)明的化合物。
當(dāng)所需要的化合物為相應(yīng)于其中的A和B為氮的化合物時(shí)，用相應(yīng)的氨基吡啶或取代的氨基吡啶化合物代替上述反應(yīng)中所使用的苯胺或取代的苯胺。
根據(jù)已知的方法，可以用熟知的反應(yīng)，如用硫酸二烷基酯、鹵代烷等的烷基化，通過常規(guī)的氮原子烷基化來制備磺酰胺氮上具有取代基的化合物。
在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，O為取代的芳基，更優(yōu)選取代的苯基，并且具有如下所示的結(jié)構(gòu)。 在該結(jié)構(gòu)中，Z1，Z2，R9-R11的定義通常情況下和在優(yōu)選的實(shí)施方案中均與上面的相同。本實(shí)施方案的化合物按上面方案1中所描述的方法用適當(dāng)取代的具有Q-CHO(R5為H)結(jié)構(gòu)的苯甲醛來制備。這些取代的苯甲醛可以很容易地從商業(yè)來源得到，也可容易用熟知的合成化學(xué)方法由已知的苯甲醛來制備。
在一個(gè)實(shí)施方案中，O被硝基所取代。所述硝基的優(yōu)選位置是位于R11(其中Z1，Z2，R9和R10的定義通常情況下和在優(yōu)選的實(shí)施方案中均與上面的相同)，該硝基可用適宜的還原劑進(jìn)一步還原成氨基。一般地，方案3中示出的氰基-胺化合物或氰基-磺酰胺化合物將與一還原劑反應(yīng)，以優(yōu)選還原氰基對(duì)面的R11的硝基?？梢允褂镁哂羞@些性質(zhì)的任何還原劑，如氫和Pt/C催化劑。然后可以使還原得到的苯胺與磺酰氯(ClSO2W，其中W的定義同上)反應(yīng)，以生成二磺酰胺化合物。
其中N1-R2和N2-R2一起形成脲聯(lián)接，即N1-C(O)-N2的環(huán)脲衍生物的制備，提供了本發(fā)明的另外的化合物，并且提供了制備對(duì)映異構(gòu)體純的本發(fā)明化合物的另外的方法。例如，可用該環(huán)脲化合物制備二烷氧基二磺酰胺和本發(fā)明的其他化合物，如下面的方案所示。
作為選擇，在下面方案中可以用硫酸代替硝酸，以得到磺酸衍生物，該磺酸衍生物可以通過已知的反應(yīng)進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成磺酰胺和砜。 由可用于上述合成方案中的簡(jiǎn)單的原料，容易地制備本發(fā)明的其他化合物，包括雜環(huán)化合物。例如，以簡(jiǎn)單的硝基和羥基取代的醛開始，經(jīng)上述的縮合，得到相應(yīng)的可直接轉(zhuǎn)化成環(huán)尿烷或噁唑化合物的酯，然后再按已描述過的方法進(jìn)一步制備所述的環(huán)尿烷或噁唑化合物，以得到本發(fā)明的化合物。這些于5-位和6-位稠合成環(huán)的反應(yīng)圖解如下。 在苯環(huán)的4-位和5-位稠合成環(huán)的化合物，是通過類似的方法以如下所示的適當(dāng)取代的醛為原料來制備的。 其他的稠合雜環(huán)化合物是用常規(guī)的合成化學(xué)反應(yīng)和化學(xué)合成領(lǐng)域中熟知的適當(dāng)取代的原料制備的，進(jìn)而提供本發(fā)明的其他化合物。例如，可以由相應(yīng)的鹵素和羥基取代的醛，按如下所示的方法制備稠合的呋喃環(huán)。 本發(fā)明還包括上述化合物的前藥。適宜的前藥包含公知的氨基保護(hù)基和羧基保護(hù)基，該保護(hù)基在生理?xiàng)l件下，如通過水解釋放，得到母體化合物。優(yōu)選的一類前藥是這樣的化合物，在該化合物中，氨基，脒基，氨基亞烷基氨基，亞氨基亞烷基氨基或胍基中的氮原子被羥基(OH)，烷基羰基(-CO-W)，烷氧基羰基(-CO-OW)，酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-W-O-CO-W)所取代，其中W如上面定義的那樣為一價(jià)或二價(jià)的基團(tuán)，或者具有式-C(O)-O-CP1P2-鹵代烷基的基團(tuán)，其中P1和P2相同或相異，并且為氫，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，氰基，鹵代低級(jí)烷基或芳基。優(yōu)選該氮原子為本發(fā)明化合物的脒基的氮原子之一。這些前藥化合物是這樣制備的，即使上述本發(fā)明的化合物與活性的?；衔锇l(fā)生反應(yīng)，使本發(fā)明化合物中的氮原子與活性?；衔锏聂驶Y(jié)合。適宜的活性羰基化合物含有良好的連接于羰基碳上的離去基團(tuán)，并且包括?；u，酰基胺，酰基吡啶翁鹽，?；檠趸?，特別是?；窖趸?，如對(duì)硝基苯氧基?；?，二硝基苯氧基?；窖趸；投窖趸；?。該反應(yīng)通常是放熱的，而且在惰性溶劑中和降低溫度如-78℃-約50℃的條件下進(jìn)行。該反應(yīng)也常在諸如碳酸鉀或碳酸氫鈉等無機(jī)堿或者包括吡啶、三乙胺等胺的有機(jī)堿的存在下進(jìn)行。制備前藥的一種方法描述于1998年10月22日公布的WO98/46576中。
用上述合成方法，可以制備下面表2中所示的本發(fā)明的示例性化合物(m＝1)。對(duì)于該表中的每個(gè)條目，X可以為羰基或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；而卞脒環(huán)可以帶有鹵素、羥基或烷基取代基。
表2
本發(fā)明的化合物含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子。因此，該化合物可以是非對(duì)映異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或它們的混合物。上述的合成方法可以使用外消旋體、非對(duì)映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體作為原料或中間體。非對(duì)映異構(gòu)化合物可以通過色譜或結(jié)晶法拆分。類似地，對(duì)映異構(gòu)體的混合物也可以通過相同的技術(shù)或本領(lǐng)域已知的其它技術(shù)進(jìn)行拆分。每個(gè)不對(duì)稱碳原子均可以為R或S構(gòu)型，這兩種構(gòu)型均包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
實(shí)用性已經(jīng)發(fā)現(xiàn)按本文所公開的方法制備和選擇的本發(fā)明的化合物，是絲氨酸蛋白酶，例如因子VIIa，TF/因子VIIa，因子Xa，激肽釋放酶和/或凝血酶抑制劑。這些化合物能夠抑制這些酶的催化活性，同樣具有抑制凝結(jié)級(jí)聯(lián)并預(yù)防或限制凝結(jié)和/或血管中血栓或栓塞形成和/或增加血液凝結(jié)時(shí)間的作用。因此，本發(fā)明的化合物具有抑制TF/因子VIIa將因子X轉(zhuǎn)化成因子Xa的活性，抑制因子Xa將凝血酶原轉(zhuǎn)化成凝血酶(因子IIa)的活性；和/或凝血酶將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白單體的活性。
作為這些酶的抑制劑，本發(fā)明化合物的選擇性可以用下面實(shí)施例中所描述的Ki值來確定。典型的選擇性如下表所示。
本發(fā)明化合物的抗凝血?jiǎng)┗钚?，可以用試?yàn)來測(cè)試?？梢栽诨旌系恼Ｑ獫{(人或各種動(dòng)物的)中，進(jìn)行凝血酶原時(shí)間(PT)和活化部分凝血激酶時(shí)間(APTT)凝結(jié)時(shí)間試驗(yàn)，然后向該血漿中加入增加濃度的抑制劑。用ACL 300自動(dòng)凝結(jié)分析儀(CoulterCorp.，Miami，F(xiàn)L)和如下可商購(gòu)的試劑，測(cè)定凝結(jié)時(shí)間。
PT試驗(yàn)將不同濃度的抑制劑水溶液按1份抑制劑對(duì)9份血漿的比例加到混合的正常血漿中。然后將這些混合物加到分析儀的樣品杯中。將Innovin(Dade International Inc.，Miami，F(xiàn)L)，重新脂質(zhì)化的(relipidated)人類組織因子與Ca++離子的混合物，加到試劑杯中。將精確體積的樣品和Innovin自動(dòng)地轉(zhuǎn)移至丙烯酸轉(zhuǎn)子池中，該轉(zhuǎn)子池預(yù)先平衡至37℃。培養(yǎng)2分鐘之后，將這兩個(gè)組分通過離心作用混合在一起凝結(jié)就開始了。通過視覺監(jiān)視凝結(jié)，并按秒來記錄凝結(jié)時(shí)間。與Janson等人(Janson，T.L.，et al.，1984，Haemostasis 14440-444)相一致，重新脂質(zhì)化的人類組織因子是全部凝結(jié)試驗(yàn)種類的有效抑制劑。在該體系中，對(duì)照血漿(血漿加抑制劑稀釋劑)的凝結(jié)時(shí)間通常為8-10秒。測(cè)定適合每個(gè)抑制劑的凝結(jié)時(shí)間對(duì)抑制劑濃度數(shù)據(jù)以及PT為對(duì)照血漿兩倍處的濃度的曲線。
APTT試驗(yàn)將抑制劑和血漿混合在一起并轉(zhuǎn)移至上述ACL 300樣品杯中。將Actin FS和CaCl2(Dade InternationalInc.，Miami，F(xiàn)L)分別加到試劑杯1和2中。精確體積的樣品和活化劑(Actin FS)自動(dòng)地轉(zhuǎn)移至預(yù)平衡的轉(zhuǎn)子池(37℃)中，并通過離心作用混合。活化2分鐘之后，通過加入CaCl2開始凝結(jié)。監(jiān)視凝結(jié)，并按PT方法中所描述的那樣，計(jì)算數(shù)據(jù)。對(duì)照血漿的APTT通常為12-32秒，取決于試驗(yàn)中所使用的血漿種類。
代表性的PT和APTT試驗(yàn)結(jié)果如下面的表3所示。
表3
本發(fā)明的化合物可用作體外診斷試劑，用來抑制抽血試管中的凝結(jié)。其中作為抽血手段的具有真空的帶塞試管的用途是眾所周知的。Kasten，B.L.，“Specimen Collection”，Laboratory Test Handbook，2nd Ed.，Lexi-CompInc.，Cleveland，PP 16-17，Eds.Jacobs，D.S.et al，1990。這種真空試管可以不含抑制凝結(jié)的添加劑，在這種情況下，它們可用來從血液中分離出哺乳動(dòng)物血清。它們也可以包含抑制凝結(jié)的添加劑，如肝素鹽，檸檬酸鹽，草酸鹽，這種情況下，它們可用來從血液中分離出哺乳動(dòng)物血漿。本發(fā)明的化合物可以加到收集血液的試管中，以抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶和/或激肽釋放酶并防止抽到試管中的哺乳動(dòng)物的血液凝結(jié)。
當(dāng)用于收集血液的試管中時(shí)，本發(fā)明的化合物可以作為混合物單獨(dú)使用，或者與該領(lǐng)域中已知的其它抑制凝結(jié)的化合物結(jié)合起來使用。本發(fā)明化合物的用量應(yīng)當(dāng)為足以防止或抑制血液抽到試管中時(shí)發(fā)生凝結(jié)的量。這些化合物可以按與已知的凝結(jié)抑制化合物如肝素鹽相同的方式引入試管中。液體常用已知的方法凍干。有代表性地，試管會(huì)含約2-10毫升哺乳動(dòng)物血液，而所述化合物是按足以防止該數(shù)量血液凝結(jié)的量加入的。適宜的濃度為約10-1000nM。
這些化合物還抑制哺乳動(dòng)物循環(huán)系統(tǒng)中栓塞和血栓的形成，因此可用于體內(nèi)。已經(jīng)表明，血栓栓塞病與哺乳動(dòng)物對(duì)栓塞和血栓的形成的敏感度直接相關(guān)。例如，靜脈血管中血栓的形成導(dǎo)致血栓性靜脈炎，通常通過休息和給藥抗凝血?jiǎng)﹣碇委??？梢酝ㄟ^本發(fā)明的抗凝血?jiǎng)┗衔镏委煹钠渌膊“ㄑㄐ粤馨凸苎祝ㄐ杂材じ]炎，血栓性心內(nèi)膜炎，血栓性脈管炎和血栓性動(dòng)脈炎。
接觸醫(yī)學(xué)處理方法如血管成形術(shù)和溶解血栓療法的哺乳動(dòng)物特別容易形成血栓。本發(fā)明的化合物可用來抑制血管成形術(shù)之后的血栓形成。它們也可以與抗血栓劑，如組織血纖維蛋白溶酶原活化劑及其衍生物(US4,752,603；4,766,075；4,777,043；EP 199 574；EP 238 304；EP 228 862；EP 297 860；PCT WO89/04368；PCT WO89/00197)，鏈激酶及其衍生物或尿激酶及其衍生物結(jié)合起來使用，以防止溶解血栓療法之后動(dòng)脈的再次堵塞。當(dāng)與上述溶血栓劑組合使用時(shí)，本發(fā)明的化合物可以先于、同時(shí)或后于抗血栓劑給藥。
接受腎透析，血充氧，心導(dǎo)管插入法及類似醫(yī)學(xué)處理方法的哺乳動(dòng)物，以及安裝某種假體裝置的哺乳動(dòng)物也容易患有血栓栓塞病。因已知或未知原因引起的生理性疾病同樣可以導(dǎo)致血栓栓塞癥。
因此，本文所描述的化合物可用于治療哺乳動(dòng)物的血栓栓塞病。本文所描述的化合物還可用作抗凝血療法附屬劑，如與阿司匹林，肝素或芐丙酮羥香豆素以及其它抗凝血?jiǎng)┙M合起來使用。上述各種凝血疾病是用本發(fā)明的化合物以防止該疾病導(dǎo)致的出血的方式來治療的。將本文所述的化合物應(yīng)用于這些以及有關(guān)的疾病，這對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是顯而易見的。
一般地，本發(fā)明的化合物也可以用作中間體或凝結(jié)絲氨酸蛋白酶抑制劑的前體，因此，除了可以治療心血管疾病之外，這些化合物還可用于治療新陳代謝疾病或需要抑制凝血的任何疾病。
通常，在本發(fā)明的方法中所使用的抑制劑是這樣配制的，即將該抑制劑在環(huán)境溫度和適當(dāng)?shù)膒H下，并以所需的純度與生理上可接受的載體混合，所述的載體即那些在使用劑量和濃度下對(duì)收受者無毒的載體。制劑的pH主要取決于特定的用途和化合物的濃度，但無論何處均優(yōu)選約3至約8。適宜的實(shí)例是pH為5的乙酸鹽緩沖液制劑。
這里所使用的抑制化合物優(yōu)選為無菌的。該化合物平常以固體組合物儲(chǔ)存，盡管合用的是凍干制劑或水溶液。
本發(fā)明的組合物將按時(shí)下流行的優(yōu)秀醫(yī)學(xué)實(shí)踐進(jìn)行配制、下藥和給藥。本文所考慮的因素包括要治療的特定疾病，要治療的特定哺乳動(dòng)物，單個(gè)病人的臨床狀態(tài)，病因，藥劑的遞送部位，給藥方法，給藥日程，以及醫(yī)療從業(yè)者已知的其它因素。要給藥的化合物的″治療有效量″受這些考慮支配，并且為預(yù)防、改善或治療以凝結(jié)因子介導(dǎo)的疾病所需的最小量。這種量?jī)?yōu)選低于對(duì)宿主有毒或致使宿主顯著地更易出血的量。
作為一般性的建議，每劑量不經(jīng)胃腸給藥的抑制劑的最初藥學(xué)有效量為每天約0.01-100mg/kg，優(yōu)選約0.1-20mg/kg病人體重，所使用的化合物的一般最初范圍為0.3-15mg/kg/天。
本發(fā)明的化合物可按任何適宜的方式給藥，包括口服，局部給藥，經(jīng)皮給藥，不經(jīng)胃腸給藥，皮下給藥，腹膜內(nèi)給藥，肺內(nèi)給藥和鼻內(nèi)給藥，而且如果局部免疫抑制治療需要，則還包括內(nèi)傷處給藥(包括灌注或相反在移植前使移植物接觸該抑制劑)。不經(jīng)胃腸的灌注包括肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下給藥。
參照下面的實(shí)施例，可以更全面地理解本發(fā)明。但是，不能將所述的實(shí)施例當(dāng)作是對(duì)本發(fā)明的范圍的限制。所引用的所有專利和文獻(xiàn)全部引作本發(fā)明的參考文獻(xiàn)。
實(shí)施例本發(fā)明的化合物一般可以通過如下所示的反應(yīng)方案來制備。除了所示的特定產(chǎn)物外，這些化合物均可按上面所描述的方法用相應(yīng)的原料來制備。例如，其他的化合物可以用不同的起始苯乙烯化合物來制備，所述的苯乙烯化合物容易由商業(yè)上得到的起始化合物和本領(lǐng)域中熟知的反應(yīng)來制備。 實(shí)施例1 將4-卞氧基-3-甲氧基-苯乙烯(10g，42mmole)溶解于二氯甲烷(400ml)。加入固體碳酸氫鉀(11g，110mmole)，并將反應(yīng)物冷卻至0℃。加入間氯過苯甲酸(12g，約42mmole)，將反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?6小時(shí)。通過薄層色譜監(jiān)測(cè)反應(yīng)。加入額外量的間氯過苯甲酸(4g)，并且再攪拌4小時(shí)，以完全消耗掉初始材料。將反應(yīng)物倒入分液漏斗，并先用水洗滌，然后用碳酸氫鈉、最后用NaOH洗滌。分出有機(jī)層并用無水硫酸鈉干燥。過濾該溶液，并在真空中脫出溶劑，得到約11g的粗產(chǎn)物。
然后將該粗產(chǎn)物溶解于乙腈(60ml)，并加入高氯酸鋰(8.5g，80mmole)。攪拌該懸浮液5分鐘，這時(shí)反應(yīng)物變成均相的。加入4-氨基-卞腈(9.5g，80mmole)，并將反應(yīng)物在60℃加熱12小時(shí)。薄層色譜表明在低Rf處出現(xiàn)了新產(chǎn)物。在真空中脫出溶劑，溶解于乙酸乙酯中的剩余物用水洗滌并用用無水硫酸鈉干燥。然后用快速色譜(己烷∶乙酸乙酯1∶1)處理該粗產(chǎn)物，得到6克4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-羥基-乙基氨基]-卞腈A。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45，(m，7H)，6.8(m，3H)，6.5(d，2H)，5.18(s，2H)，4.42(m，1H)，3.95(dd，1H)，3.85(s，3H)，3.8(dd，1H). 將4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-羥基-乙基氨基]-卞腈A(470mg，1.25mmole)，鄰苯二甲酰亞胺(1.47g，10mmole)和三苯基磷(787mg，3mmole)加到40ml的四氫呋喃中。攪拌該混合物10分鐘，然后冷卻至0℃。然后慢慢地加入偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD，0.6ml，3mmole)。攪拌反應(yīng)物1小時(shí)。TLC(薄層色譜)顯示有新產(chǎn)物產(chǎn)生。在真空中脫出溶劑，并將剩余物溶解于50ml的乙酸乙酯中。該溶液用2N的氫氧化鈉洗滌3次并用水洗滌2次。分出有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥并過濾。在真空中脫出溶劑，剩余物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)處理，得到478 mg的4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B(76％產(chǎn)率)產(chǎn)物。1HNMR(CDCl3)7.85(m，2H，)，7.75(m，2H)，7.23-7.45(m，9H)，6.9(m，3H)，6.42(d，2H)，5.45(d，1H)，5.15(s，2H)，4.62(m，1H)，4.0(m，2H)，3.83(s，3H)。 然后將4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B溶解于乙醇(60ml)，并加入水合肼(2 g)。將該溶液在60-70℃加熱1.5小時(shí)。TLC表明反應(yīng)完成了。過濾該懸浮液以除去副產(chǎn)物，并在真空中脫出乙醇。剩余物經(jīng)硅膠快速色譜(乙酸乙酯2N的NH3甲醇溶液，9∶1)，得到372mg的4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈D(100％)。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45(m，7H)，6.32(m，3H)，6.5(d，2H)，5.52(d，1H)，4.3(q，1H)，3.83(s，3H)，3.08(m，2H)，1.95(s，2H)。 將4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈D(300mg，0.8mmole)溶解于乙醇(3ml)，并加入鹽酸羥胺(350mg，5mmole)和三乙胺(1ml，5.7mmole)。將反應(yīng)物在65-70℃加熱2小時(shí)。剩余物溶解于乙酸乙酯和水中。分出有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥并過濾。在真空中脫出溶劑，并替換成帶有0.5ml乙酸的4ml甲醇。加入阮內(nèi)鎳(約300ul于氫氧化鈉中的混懸體，Aldrich)，并將反應(yīng)物置于氫氣氛下。劇烈攪拌反應(yīng)物3小時(shí)，濾出催化劑，并在真空中脫出溶劑。用硅膠快速色譜(乙酸乙酯∶丙酮∶甲醇∶氨，2∶1∶1∶0.05)純化粗產(chǎn)物，得到160mg的4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒E。MS(M+H)＝391。 將4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒E(20mg，0.03mmole)溶解于乙腈(2m1)，所述乙腈含三乙胺(17ul，0.12mmole)和水(0.3ml)。向其中加入所需的具有式ClSO2R的磺酰氯(0.03mmole)，并攪拌反應(yīng)物4小時(shí)。在真空中脫出溶劑，并通過逆相制備HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)純化該化合物，在凍干的基礎(chǔ)上得到最終產(chǎn)物。
實(shí)施例2a-2dd用類似的方法制備本發(fā)明的其它化合物，這些化合物包括a)4-[苯磺酰氨基-1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝531，b)N-{4-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基(carbamimidoyl)-苯基氨基)-乙基氨磺酰基]-苯基}-乙酰胺MS(M+H)＝588，c)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝576，d)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝549，e)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝565，f)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝576，g)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，5-二氯-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝599，h)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2-溴-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝609，611，i)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-溴-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝609，j)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-異丙基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝573，k)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-苯基甲磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝545，1)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-羧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝575，m)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-羧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝575，n)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，4-二硝基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝621，o)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，3，5，6-四甲基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝587，p)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3，5-二氯-2-羥基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝615，q)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3，4-二甲氧基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝591，r)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(噻吩-2-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝537，s)N-{5-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺?；鵠-4-甲基-噻唑-2-基}-乙酰胺MS(M+H)＝595，t)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(萘-2-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝581，u)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(萘-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝581，v)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2-苯基-乙烯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝557，w)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝599，x)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝521，y)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝469，z)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-乙磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝483，aa)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-丙磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝497，bb)4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-丁磺酰氨基-乙基氨基]-苯甲脒M(jìn)S(M+H)＝511，cc)[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺?；鵠-乙酸乙酯MS(M+H)＝541，dd)[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基氨磺?；鵠-乙酸.
實(shí)施例3 將4-[1-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈B(1.8g)溶解于乙醇(50ml)，乙酸(3ml)，甲醇(5ml)和乙酸乙酯(5ml)的混合物。將該溶液加到含10％Pd/C(500mg)的Parr燒瓶中，并在35psi下氫化16小時(shí)。通過塞力特硅藻土過濾除去催化劑，并在真空中脫出溶劑，得到1g的4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-1-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(68％)產(chǎn)物。
將4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-1-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(1g，2.43mmole)溶解于四氫呋喃(30ml)，并加入三苯基磷(1.27g，4.84mmole)，(S)-2-氯-1-苯基-乙醇(1.13g，7.26mmole)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并加入偶氮二羧酸二乙酯(0.842g，4.8mmole)。將反應(yīng)溫度達(dá)到室溫并攪拌2.5小時(shí)。在真空中脫出溶劑，并將剩余物溶解于乙酸乙酯中，用0.5N的氫氧化鈉洗滌若干次，用鹽水洗滌1次并用無水硫酸鈉干燥。粗產(chǎn)物通過硅膠快速色譜(30％的乙酸乙酯己烷溶液)純化，得到1.1g的4-[1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(82％)。 將4-[1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(0.5g)溶解于乙醇(40ml)，并加入水合肼(0.14g)。將反應(yīng)物在65℃下加熱2小時(shí)。脫出溶劑并代之以乙酸乙酯。該溶液用水洗滌2次并用鹽水洗滌1次。該溶液用無水硫酸鈉干燥，并在真空中脫出溶劑，得到318mg所需的胺4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈(83％)。 將4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈(0.1g，0.237mmole)溶解于二氯甲烷(6ml)，并加入三乙胺(34ul，0.3mmole)。加入苯磺酰氯(46ul，0.26mmole)并攪拌反應(yīng)物90分鐘。反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，并用飽和的碳酸氫鈉洗滌1次、用水洗滌1次。該溶液用硫酸鈉干燥并于真空中脫出溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠純化，得到100mg所需的產(chǎn)物N-[2-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-苯磺酰胺。 將N-[2-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-苯磺酰胺(100mg 0.18mmole)溶解于乙醇(3ml)，并加入鹽酸羥胺(62mg，0.89mmole)。向其中加入三乙胺(90mg，0.89mmole)，稍后加入碳酸鉀(62mg)。將反應(yīng)物在80℃下加熱48小時(shí)。冷卻反應(yīng)物并于真空中脫出溶劑。溶解于乙酸乙酯中的剩余物用水洗滌2次并用鹽水洗滌1次。該溶液用硫酸鈉干燥并脫出溶劑。將粗中間體溶解于甲醇(4ml)并加入幾滴乙酸。加入大約50-100mg混懸 于氫氧化鈉中的阮內(nèi)鎳(Aldrich)，并將反應(yīng)物置于氫氣氛下。劇烈攪拌該懸浮液8小時(shí)，濾出催化劑并于真空中脫出溶劑。粗產(chǎn)物通過逆相色譜純化，得到4-{2-苯磺酰氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-苯甲脒(32mg)。MS(M+H)＝579。
實(shí)施例4類似于實(shí)施例2，制備4-{2丙磺酰氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-苯甲脒，只是在與4-{2-氨基-1-[4-(2-氯-1-苯基-乙氧基)-3-甲氧基-苯基]-乙基氨基}-卞腈的反應(yīng)中用苯磺酰氯代替丙磺酰氯。MS(M+H)＝545。
實(shí)施例5 將4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基苯甲醛(12.2g 42mmole)和4-氨基卞腈(5g，42mmole)溶解于甲醇(165ml)并攪拌2小時(shí)，然后在60℃下加熱30分鐘。將反應(yīng)物冷卻至室溫并加入芐基異腈(5g.42mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并在5分鐘內(nèi)滴加三氟化硼醚合物(16ml，126mmole)。在0℃下攪拌反應(yīng)物20分鐘，然后使之達(dá)到室溫并于環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。加水(4ml)并使混合物于室溫下攪拌過夜。第二天早晨黃色沉淀清晰可見，將所述的固體濾出。該固體用甲醇洗滌并空氣干燥，得到8克所需的產(chǎn)物。在真空中中從濾出液中脫出溶劑，并代之以乙酸乙酯。該溶液用水和飽和的碳酸氫鈉洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并脫出溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷乙酸乙酯，1∶1)處理，得到另外7g的所需產(chǎn)物(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。1HNMR(CDCl3)7.68(s，1H)，7.4(m，7H)，7.0(s，1H)，6.61(d，2H)，6.2(s，1H)，5.2(s，2H)，3.87(s，3H)，3.75(s，3H)。 將(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(4.5g，10mmole)溶解于二甲氧基乙烷，并加入硼氫化鋰(0.210g，10mmole)。將反應(yīng)物加熱回流3小時(shí)并冷卻至室溫。將該反應(yīng)用含乙酸的水淬滅，并用乙酸乙酯稀釋。轉(zhuǎn)移至分液漏斗之后，用水洗滌有機(jī)層若干次。該有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾并脫出溶劑。然后用快速色譜處理所得的粗產(chǎn)物，得到3.1g的4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-羥基-乙基氨基]-卞腈(74％)。1HNMR(CDCl3)7.77(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.15(s，1H)，6.42(d，2H)，5.4(bs，1H)，5.18(dd AB syst.，2H)，4.15(dd，1H)，3.83(s，3H)，3.79-3.86(dd，1H)。 將4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-羥基-乙基氨基]-卞腈(3.1g，7.4mmole)溶解于四氫呋喃(120ml)并加入三苯基磷(5.9g，22mmole)和鄰苯二甲酰亞胺(5.4g，37mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并滴加偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD，4.6g)。使反應(yīng)物達(dá)到室溫并攪拌過夜。在真空中脫出溶劑，并代之以乙酸乙酯。該溶液用1N的NaOH洗滌若干次并用無水硫酸鈉干燥。經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)處理，得到所需的產(chǎn)物，該產(chǎn)物中還存在一些DIAD。該固體用乙醇洗滌幾次，得到3.2g所需的鄰苯二甲酰亞胺4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(3.2g)。1HNMR(CDCl3)7.83(m，2H)，7.75(m，2H)，7.37(m，7H)，6.91(s，1H)，6.41(d，2H)，6.17(d，1H)，5.65(m，1H)，5.18(s，2H)，4.27(m，2H)，3.61(s，3H)。 將4-[1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-乙基氨基]-卞腈(2.7g，5mmole)溶解于乙醇(100ml)并加入水合肼(0.65ml，20mmole)。將反應(yīng)物在60℃加熱3小時(shí)，然后在室溫下48小時(shí)。濾出沉淀的固體，剩余物經(jīng)快速色譜處理，得到4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(1.5g)。1HNMR(CDCl3)7.75(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.05(s，1H)，6.45(d，2H)，5.80(bs，1H)，5.32(m，1H)，5.19(s，2H)，3.81(s，3H)，3.25(dd，1H)，3.0(dd，1H)，1.65(bs，2H)。 將4-[2-氨基-1-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-乙基氨基]-卞腈(0.227g，0.66mmole)溶解于二氯甲烷(4ml)和三乙胺(0.14ml，1mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并加入1-丙磺酰氯(0.085ml，0.75mmole)。攪拌反應(yīng)物20分鐘，產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)純化，得到260mg所需的產(chǎn)物-丙烷-1-磺酸[2-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.77(s，1H)，7.3-7.5(m，7H)，7.12(s，1H)，6.41(d，2H)，6.0(d，1H)，5.3(m，1H)，5.17(dd，A-B，2H)，4.75(t，1H)，3.85(s，3H)，3.65(m，1H)，3.5(m，1H)，3.04(m，2H)，1.83(m，2H)，1.05(t，3H)。 將丙烷-1-磺酸[2-(4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺(0.250g)溶解于乙醇(10ml)并加入Pt/C(5％)。將反應(yīng)物置于氫氣氛下并劇烈攪拌3小時(shí)。濾出催化劑，產(chǎn)物經(jīng)色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶2)處理，得到133mg的丙烷-1-磺酸[2-(2-氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.3-7.45(m，7H)，6.71(s，1H)，6.52(d，2H)，6.3(s，1H)，5.33(2，1H)，5.08(s，2H)，5.0(t，1H)，4.42(q，1H)，3.75(s，3H)，3.70(bs，2H)，3.45(t，2H)，2.97(m，2H)，1.80(m，2H)，1.03(t，3H)。 將丙烷-1-磺酸[2-(2-氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-2-(4-氰基-苯基氨基)-乙基]-酰胺(133mg，0.27mmole)溶解于二氯甲烷并加入三乙胺(0.05ml，0.35mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并滴加甲磺酰氯(0.023ml，0.3mmole)。將反應(yīng)物攪拌2小時(shí)，并用快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)純化產(chǎn)物。然后將產(chǎn)物溶解于乙醇中并加入鹽酸羥胺(35mg，0.5mmole)。加入乙醇鈉(48mg，0.7mmole)并加熱反應(yīng)物48小時(shí)。脫出乙醇并加水(4ml)。濾出固體并用水洗滌。然后將粗產(chǎn)物溶解于含有0.5ml乙酸的4ml甲醇中。加入阮內(nèi)鎳(約50 mg，在氫氧化鈉中的混懸體，Aldrich)并將其置于氫氣氛下。將反應(yīng)物劇烈攪拌3小時(shí)，然后濾出催化劑。粗產(chǎn)物經(jīng)逆相制備色譜處理，得到最終的產(chǎn)物4-[1-(4-卞氧基-2-甲磺酰氨基-5-甲氧基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒(12mg)MS(M+H)＝590。
實(shí)施例6a-6g用類似于實(shí)施例5的方法制備下列化合物a)4-[2-苯磺酰氨基-1-(2-苯磺酰氨基-4-卞氧基-5-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是用苯磺酰氯代替丙磺酰氯和甲磺酰氯。MS(M+H)＝686。b)4-[2-苯磺酰氨基-1-(2-苯磺酰氨基-4-卞氧基-5-乙氧基-苯基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是原料為3-乙氧基-4-卞氧基-6-硝基-苯甲醛。MS(M+H)＝700。c)4-[1-(4-卞氧基-5-乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法同上，只是原料為3-乙氧基-4-卞氧基-6-硝基-苯甲醛。MS(M+H)＝604。d)4-[1-(4，5-二乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。方法相同，只是原料為3，4-二乙氧基-6-硝基苯甲醛。MS(M+H)＝542。e){5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺?；鶀-乙酸乙酯。方法相同，只是用氯磺?；宜嵋阴ゴ婕谆酋Ｂ?。MS(M+H)＝676。f){5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺酰基}-乙酸。將{5-卞氧基-2-[1-(4-脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4-甲氧基-苯基氨磺酰基}-乙酸乙酯(10mg)溶解于水(2ml)并加入四氫呋喃(2ml)和LiOH(3mg)。使之?dāng)嚢柽^夜。經(jīng)逆相制備HPLC純化，得到3mg產(chǎn)物。MS(M+H)＝648。g)4-[1-(3，4-二甲氧基-2-甲磺酰氨基苯基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基氨基]-苯甲脒。該化合物用類似于上述的方法制備，只是用2-溴-3，4-二甲氧基苯甲醛大體4-卞氧基-5-甲氧基-2-硝基苯甲醛。MS(M+H)＝499。
實(shí)施例7a-7g化合物7a-7g通常制備如下。將化合物E(20mg，0.03mmole)溶解于乙腈(2ml)，該乙腈中含三乙胺(17ul，0.12mmole)和水(0.3ml)。向其中分別加入酰氯，氯甲酸烷基酯或異氰酸酯(0.03mmole)，并將反應(yīng)物攪拌4小時(shí)。在真空中脫出溶劑，并通過逆相制備HPLC(乙腈/水，含有0.1％三氟乙酸)純化該化合物，在凍干后得到最終產(chǎn)物。7aN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-2，2，2-三氟-乙酰胺，MS(M+H)＝487。7bN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-乙酰胺，MS(M+H)＝433。7cN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-丁酰胺，MS(M+H)＝461。7dN-[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-2-氯-乙酰胺，MS(M+H)＝467。7e[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸甲酯，MS(M+H)＝449。7f[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸異丁酯，MS(M+H)＝491。7g[2-(4-卞氧基-3-甲氧基-苯基)-2-(4-脒基-苯基氨基)-乙基]-碳酸2，2，2-三氯-乙基酯，MS(M+H)＝565。
實(shí)施例8 將如上所示的酸的甲酯(920mg 2.85mmole)懸浮于3/1的THF/水(40ml)中并冷卻至0℃。該溶液用1N的LiOH(7.1ml，7.1mmole)處理，并攪拌過夜。將反應(yīng)物用三氟乙酸酸化，直至pH＝4.0。在真空中脫出溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(乙酸乙酯，含有0.5％乙酸)純化，得到1g的羧酸。 將羰基二咪唑(131mg，0.8mmole)溶解于無水THF(1.6ml)，并滴加上面所制備的羧酸(251mg，0.8mmole)的THF(1.6ml)溶液。室溫下攪拌反應(yīng)物30分鐘、回流30分鐘，然后再次冷卻至室溫。加入正丙基磺酰胺(100mg)并攪拌10分鐘。加入DBU(123mg)的THF(1.6ml)溶液。反應(yīng)混合物酸化和萃取到乙酸乙酯中。脫出溶劑，并通過快速色譜(SiO2，乙酸乙酯)純化粗產(chǎn)物，得到195mg上述的酰基磺酰胺。 將上面制備的腈(90mg，0.2mmole)溶解于乙醇(2.5ml)。加入二異丙基乙基胺(202mg，1.56mmole)，之后加入鹽酸羥胺(83mg，1.2mmole)。將反應(yīng)物在70℃加熱21小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻并在真空中脫出溶劑。將剩余物溶解于30％乙腈/水(4ml)中，并通過制備逆相色譜(水/乙腈梯度，有0.1％TFA)純化，得到14mg如上所示的羥基脒。 將該羥基脒產(chǎn)物溶解于乙醇(2ml)和乙酸(8滴)中。加入阮內(nèi)鎳(約100mg)并在氫氣氛下劇烈攪拌反應(yīng)物2小時(shí)45分鐘。通過塞力特硅藻土過濾出產(chǎn)物，并用含0.1％TFA的30％乙腈/水沖洗該塞力特硅藻土，然后用乙腈沖洗該塞力特硅藻土。在真空中脫出溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)制備逆相色譜(水/乙腈梯度，含有0.1％TFA)純化，得到所需的產(chǎn)物(6mg)。M+H＝435。
實(shí)施例9.對(duì)映體純的6-烷基磺酰氨基磺酰胺的合成 將3-乙氧基-4-羥基苯甲醛(40g)加到二甲基甲酰胺(600mL)中，然后加入碳酸鉀(40g，1.2當(dāng)量)。加入碘乙烷(28.87mL，1.5當(dāng)量)并將該溶液在60℃加熱6小時(shí)。將得到的溶液冷卻至室溫并在減壓下脫出溶劑。該溶液用乙酸乙酯(500mL)稀釋，用水、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物3，4-二乙氧基苯甲醛(49g，104％)。將該3，4-乙氧基苯甲醛(45g)溶解于乙醇(300mL)，并將溶液冷卻至0℃。在單獨(dú)的燒瓶中，將氫氧化鉀(19.5g，1.5當(dāng)量)加到乙醇(300mL)中，然后加入硝基甲烷(26g，1.5當(dāng)量)，將溶液在室溫下攪拌10分鐘并冷卻至0℃。將該溶液加到3，4-二乙氧基苯甲醛中并攪拌20分鐘，然后倒入0℃的濃鹽酸(200mL)中。減壓脫出乙醇并用水(300mL)稀釋該溶液，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用硫酸鎂干燥并脫出溶劑得到粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物經(jīng)乙酸乙酯(47g，87％)重結(jié)晶進(jìn)行純化。MS(M+H)＝238。 將1-硝基-2-(3，4-二乙氧基苯基)乙烯(16.64g)和4-氨基卞腈(9.12g，1.1當(dāng)量)加到四氫呋喃(350mL)中，并冷卻至0℃。慢慢加入二異丙基氨基鋰(47.8mL，1.02當(dāng)量)直至形成持久不變的紫色。加入一份鋅(50g)，然后加入乙酸(35mL)。將該溶液加熱至室溫并攪拌2小時(shí)，然后加入乙酸(35mL)和鋅(10g)。又過2小時(shí)之后，加入乙酸(25mL)并將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。加入濃鹽酸(15mL)并將該溶液再攪拌1小時(shí)。將該溶液通過塞力特硅藻土填料進(jìn)行過濾并加水(250mL)。將溶液減壓濃縮至300mL，并加到檸檬酸(0.5M，500mL)和乙酸乙酯/己烷(500mL)中。收集檸檬酸層并加入氫氧化銨直至溶液成堿性為止。該溶液用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，并用硫酸鎂干燥合并后的有機(jī)層，減壓蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。將該粗產(chǎn)物用二氯甲烷稀釋(350mL)稀釋并冷卻至0℃。加入碳酰氯(40.88mL 20％的甲苯溶液，1.1當(dāng)量)，然后加入Hunigs堿(24.46mL，2當(dāng)量)。攪拌該溶液10分鐘并加水(200mL)。收集二氯甲烷，用硫酸鎂干燥，并通過快速硅膠色譜(80％乙酸乙酯/20％己烷)純化，得到白色的固體產(chǎn)物(9.76g，40％)。MS(M+H)＝352。 將4-[5-(3，4-二乙氧基苯基)-2-氧代-咪唑烷-1-基-卞腈(2.10g)加到四氫呋喃(200mL)中并冷卻至-78℃。滴加正丁基鋰(3.74mL，1當(dāng)量)，并攪拌溶液10分鐘。加入一份固體(S)-(+)-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰氯(1.49g，1當(dāng)量)并攪拌反應(yīng)物1小時(shí)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀p壓蒸發(fā)至50mL。該溶液用乙酸乙酯(300mL)稀釋，用檸檬酸(0.5M)、水、鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥。將該溶液在減壓下蒸發(fā)并通過硅膠快速色譜(50％乙酸乙酯/50％己烷)純化，得到產(chǎn)物4-{5-(3，4-二乙氧基苯基)-3-[2-(6-甲氧基萘-2-基)-丙?；鵠-2-氧代-咪唑啉-1-基}-卞腈，其為非對(duì)映異構(gòu)體(1.20g，71％)。將該產(chǎn)物加到甲醇(200mL)中，然后加入氫氧化鋰(1mL 10％的水溶液)并攪拌15分鐘。加入乙酸(10滴)，減壓脫出甲醇，產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜(80％乙酸乙酯/20％己烷)純化，得到白色的固體產(chǎn)物(0.71g，95％)。[α]Na-55.0(c 2.20，丙酮)。MS(M+H)＝352。 將(R)-(-)-4-[5-(3，4-二乙氧基苯基)-2-氧代-咪唑烷-1-基-卞腈(0.710g)加到四氫呋喃(20mL)中并冷卻至-78℃。滴加正丁基鋰(1.27mL 1.6M的己烷溶液，1當(dāng)量)并攪拌該溶液10分鐘。加入1-丙基磺酰氯(0.275mL，1.2當(dāng)量)并攪拌該溶液15分鐘，然后加熱至室溫。加入乙酸(10滴)，減壓脫出溶劑，產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜(50％乙酸乙酯/50％己烷)純化，得到產(chǎn)物(0.740g，80％)。該產(chǎn)物(0.300g)用二氯乙烷(10mL)稀釋并冷卻至0℃。滴加硝酸(0.137mL，5當(dāng)量)并攪拌該溶液1小時(shí)。溶液用二氯乙烷(100mL)稀釋，用水、飽和的碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥，并減壓蒸發(fā)溶劑。該物質(zhì)用甲醇(50mL)和乙酸(1mL)稀釋，并加入鉑(0.050g，5％，載于碳上)。將該溶液氫化1小時(shí)，通過塞力特硅藻土填料過濾，并減壓蒸發(fā)溶劑。將該物質(zhì)溶解于二氯甲烷(5mL)，并加入Hunigs堿(0.177mL，1.5當(dāng)量)和氯磺?；宜嵋阴?0.189g，1.5當(dāng)量)，然后攪拌該溶液2小時(shí)。該溶液通過直接硅膠快速色譜(50％乙酸乙酯/50％己烷)純化，得到產(chǎn)物(0.160g)(R)-{2-[3-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-(丙烷-1-磺?；?-咪唑烷-4-基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺?；鶀-乙酸乙酯。MS(M+H)＝624。 將(R)-{2-[3-(4-氰基苯基)-2-氧代-1-(丙烷-1-磺?；?-咪唑烷-4-基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺?；鶀-乙酸乙酯(0.160g)用乙醇(5mL)、然后用氫氧化鋰(1mL 10％的水溶液，10當(dāng)量)稀釋，然后攪拌該溶液48小時(shí)。該溶液通過直接硅膠快速色譜(20％甲醇/80％二氯甲烷)純化，得到產(chǎn)物。該產(chǎn)物用乙醇(1mL)稀釋，并加入羥胺(0.035g，10當(dāng)量)和Hunigs堿(0.088mL，10當(dāng)量)，然后將溶液在60℃加熱6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并攪拌12小時(shí)。加入乙醇(3mL)、乙酸(0.5mL)和阮內(nèi)鎳(0.025g)，并將該溶液氫化1小時(shí)。通過塞力特硅藻土填料過濾反應(yīng)混合物，并減壓脫出溶劑。產(chǎn)物經(jīng)逆相制備色譜純化，得到{2-[1-(4-脒基苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基苯基氨磺?；鶀乙酸(52mg)。[α]Na-42.1(c1.01，甲醇)，MS(M+H)＝587。
實(shí)施例10.6-烷氧基取代的磺酰胺 將氨基乙腈(14.25g，92.5mmole)溶解于1，2-二氯乙烷(150ml)，并將反應(yīng)物置于N2下。加入三乙胺(32.76g，324mmole)，并將反應(yīng)物冷卻至0℃。滴加丙烷-1-磺酰氯(13.19g，92.5mmole)的1，2-二氯乙烷(20ml)溶液，將反應(yīng)物加熱至室溫并攪拌16小時(shí)。薄層色譜表明出現(xiàn)了Rf較高的新產(chǎn)物。在真空中脫出溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷∶乙酸乙酯，9∶1)處理，得到10.56g的丙烷-1-磺酸氰基甲基-酰胺。1HNMR(CDCl3)5.40(s，1H)，4.11(s，2H)，3.15(m，2H)，1.89(q，2H)，1.10(t，3H)。 3-乙氧基-4-羥基苯甲醛(Aldrich，100g，0.602mole)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(1L)，將反應(yīng)物置于N2下。加入固體碳酸鉀(103g，0.662moles)并將反應(yīng)物攪拌10分鐘。加入碘乙烷(175g，1.26moles)并將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。該反應(yīng)通過薄層色譜監(jiān)測(cè)，所述的薄層色譜表明苯酚的耗盡以形成新產(chǎn)物。過濾反應(yīng)混合物以除去碳酸鉀，并于真空中脫出溶劑。將剩余物溶解于二氯甲烷并過濾。加入硅膠(200g)并于真空中脫出二氯甲烷。吸附于硅膠上的粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷，100％，2L，然后乙酸乙酯∶己烷，1∶3，2L，然后乙酸乙酯∶己烷，1∶1)處理，得到109.36g的3，4-二乙氧基苯甲醛。1HNMR(CDCl3)9.83(s，1H)，7.41(m，2H)，6.96(d，1H)，4.17(m，4H)，1.50(t，3H)1.47(t，3H)。 將3，4-二乙氧基苯甲醛(31.45g，0.162moles)溶解于二氯甲烷(500ml)。加入3-氯過苯甲酸，并將反應(yīng)物加熱回流4小時(shí)。薄層色譜指示醛的消耗。將反應(yīng)物冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋，并用飽和的碳酸鉀使該反應(yīng)淬滅。分層并用二氯甲烷萃取水溶液。合并二氯甲烷萃取物，用水、鹽水洗滌，并用無水硫酸鈉干燥，過濾并在真空中脫出溶劑，得到粗的油狀產(chǎn)物。
將該粗的油狀產(chǎn)物溶解于甲醇(300ml)并加入10％的KOH水溶液(60ml)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。薄層色譜指示已經(jīng)生成的中間體的消耗。真空中脫出甲醇，并用1.2NHCl酸化該水溶液。該溶液用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取物用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并在真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，3∶1)處理，得到22.08g的3，4-二乙氧基-苯酚。1HNMR(CDCl3)6.56(d，1H)，6.25(d，1H)，6.10(dd，1H)，3.82(m，4H)，1.22(t，3H)，1.20(t，3H)。 將硝基苯(100ml)冷卻至0℃并用HCl氣體飽和。向該溶液加入3，4-二乙氧基苯酚(11.64g，64mmole)，丙烷-1-磺酸氰基甲基酰胺(10.36g，64mmole)和氯化鋅(17.45g，128mmole)。在0℃下攪拌反應(yīng)物1小時(shí)，然后使之溫?zé)嶂潦覝?。繼續(xù)攪拌2小時(shí)。薄層色譜指示3，4-二乙氧基苯酚的消耗。小心地加水(100ml)并將反應(yīng)物在100℃加熱1小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻，并用二氯甲烷萃取。萃取物用水、鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并在真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)快速色譜(2.5-5％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)。純化過產(chǎn)物用醚研制，過濾并空氣干燥，得到17.3g的丙烷-1-磺酸[2-(4，5-二乙氧基-2-羥基-苯基)-2-氧代-乙基]酰胺。1HNMR(CDCl3)11.86(s，1H)，6.93(s，1H)，6.46(s，1H)，5.26(t，1H)，4.55(d，2H)，4.14(q，2H)，4.03(q，2H)，3.05(m，2H)，1.90(m，2H)，1.45(m，6H)，1.07(t，3H)。 將丙烷-1-磺酸[2-(4，5-二乙氧基-2-羥基-苯基)-2-氧代-乙基]-酰胺(200mg，0.579mmole)溶解于四氫呋喃(5ml)，置于N2下，并冷卻至0℃。滴加硼烷THF復(fù)合物(1.74ml，1.0M于THF中，1.74mmole)。將反應(yīng)物攪拌15分鐘并使之在2小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝?。薄層色譜指示原料的消耗和較低Rf的新產(chǎn)物的生成。反應(yīng)用1.2N的HCl(2.5ml)水溶液淬滅，用水稀釋并用乙酸乙酯萃取。萃取物用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并在真空中脫出溶劑，得到190mg油狀的粗產(chǎn)物。
將該油狀的粗產(chǎn)物溶解于乙腈(5ml)。加入4-氨基卞腈(194mg，1.64mmole)和高氯酸鋰(233mg，2.19mmole)。將反應(yīng)物在90℃加熱3.5小時(shí)，然后在室溫下攪拌18小時(shí)。薄層色譜表明有較高Rf的新產(chǎn)物出現(xiàn)，對(duì)應(yīng)于還原產(chǎn)物。將反應(yīng)用水淬滅，并用乙酸乙酯萃取。該乙酸乙酯萃取物用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并在真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)快速色譜(乙酸乙酯∶二氯甲烷，1∶9)處理，得到134mg的丙烷-1-磺酸[2-(4-氰基-苯基氨基)-2-(4，5-二乙氧基-2-羥基-苯基)-乙基]-酰胺。1HNMR(CDCl3)7.34(d，2H)，6.71(s，1H)，6.61(d，2H)，6.41(s，1H)，5.58(d，1H)，4.79(m，1H)，4.57(m，1H)，3.99(m，4H)，3.48(t，2H)，3.00(m，2H)，1.80(q，2H)，1.41(t，3H)，1.34(t，3H)，1.03(t，3H)。
將丙烷-1-磺酸[2-(4-氰基-苯基氨基)-2-(4，5-二乙氧基-2-羥基-苯基)-乙基]-酰胺(100mg，0.223mmole)溶解于二甲基甲酰胺(1.5ml)并用固體碳酸氫鉀(22mg，0.223mmole)處理，然后用溴乙酸乙酯(0.37ml，0.223mmole)處理。反應(yīng)物在N2下攪拌67小時(shí)。薄層色譜顯示出現(xiàn)了Rf較高的新產(chǎn)物。將反應(yīng)用水淬滅，并用乙酸乙酯萃取。該乙酸乙酯萃取物用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，并在真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)快速色譜(乙酸乙酯∶二氯甲烷，1∶9)，得到78mg的{2-[1-(4-氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸乙酯。1HNMR(CHCl3)7.35(d，2H)，6.81(s，1H)，6.57(d，2H)，6.43(s，1H)，4.81(t，1H)，4.68(ABq，2H)，4.56(t，1H)，4.26(q，2H)，4.05(q，2H)，3.95(m，2H)，3.54(t，2H)，2.98(m，2H)1.80(m，2H)1.42(t，3H)，1.32(t，6H)，1.02(t，3H)。MS(M+H)534。 將{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸乙酯(76mg，0.142mmole)溶解于四氫呋喃(3ml)。加水(1ml)并將反應(yīng)物冷卻至0℃。將LiOH水溶液(1.0M，0.42ml，0.42mmol)加到反應(yīng)物中。攪拌5分鐘之后，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫下攪?6小時(shí)。借助于分析高壓液相色譜監(jiān)視酯的消失。加入另外的LiOH(1.0M.0.14ml)。室溫下攪拌反應(yīng)物8小時(shí)。酯沒有消耗完，則再加入新制備的LiOH(1.0M，0.14ml)并攪拌反應(yīng)物24小時(shí)。67小時(shí)之后再加入LiOH(1.0M，0.28ml)，用分析的RP HPLC指示酯的消耗(總計(jì)1.0 M的LiOH＝0.98mL，6.9當(dāng)量)。反應(yīng)物用乙酸酸化，并使THF在N2氣流下蒸發(fā)。該溶液通過加入乙腈澄清，然后通過制備逆相HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)純化，經(jīng)冷凍干燥后得到44mg的{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸的單-TFA鹽。1NMR(CD3OD)7.15(d，2H)，6.70(s，1H)，6.48(d，2H)，6.45(s，1H)，4.76(t，1H)，4.60(s，2H)，3.85(q，2H)，3.73(m，2H)，3.43(dd，1H)，3.26(dd，1H部分模糊，原因是CH3OH溶劑峰)，2.76(m，2H)，1.52(m，2H)，1.18(t，3H)，1.07(t，3H)，0.77(t，3H)。MS(M+H)506。 將{2-[1-(氰基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸單-TFA鹽(44mg，0.071mmole)溶解于乙醇(1ml)，并用二異丙基乙基胺(0.89ml，0.515mmole)和固體鹽酸羥胺(25mg，0.355mmole)處理。將反應(yīng)物置于N2下并在60℃加熱3小時(shí)。3小時(shí)之后，分析高壓液相色譜顯示反應(yīng)還沒有完成。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并在室溫下攪拌16小時(shí)，通過HPLC評(píng)價(jià)該轉(zhuǎn)化過程。將反應(yīng)混合物在60℃下加熱8小時(shí)，在室溫下攪拌16小時(shí)，在70℃下加熱8小時(shí)并在室溫下攪拌16小時(shí)。用HPLC指示原料的消耗。將反應(yīng)物用乙酸酸化，加入阮內(nèi)鎳使反應(yīng)物在約1atm的氫氣球下氫化3小時(shí)。用分析HPLC指示羥基脒中間體的消耗。濾出阮內(nèi)鎳催化劑并在真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)制備逆相HPLC(含有0.1％三氟乙酸的梯度乙腈/水)純化，經(jīng)冷凍干燥后得到5.6mg雙-TFA鹽形式的{2-[1-(脒基-苯基氨基)-2-(丙烷-1-磺酰氨基)-乙基]-4，5-二乙氧基-苯氧基}-乙酸。MS(M+H)523。
實(shí)施例11.6-烷基磺?；?烷基-氨基取代的?；酋０返暮铣?
將4，5-二乙氧基-2-硝基苯甲醛(55.5g 206mmole)和4-氨基卞腈(23g，195mmole)溶解于甲醇(700ml)并在60℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并加入甲苯磺酰甲基異腈(45g，230mmole)。在10分鐘內(nèi)滴加三氟化硼醚合物(78ml，620mmole)。將反應(yīng)物在0℃攪拌30分鐘，并使之達(dá)到室溫，然后在環(huán)境溫度下攪拌1.5小時(shí)。加水(18ml)并使反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。第二天于真空中脫出甲醇并將剩余物溶解于乙酸乙酯中。有機(jī)層用水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。濾出硫酸鈉并在真空中脫出乙酸乙酯。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，2∶1然后1∶1)處理，得到46g所需的產(chǎn)物(4-乙氧基-5-乙氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。 將(4-乙氧基-5-乙氧基-2-硝基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(11g，27.5mmole)溶解于乙酸乙酯(300m)并加到氮?dú)夥障潞?％Pt/C(3g)的燒瓶中。除去氮?dú)獯詺錃?氣瓶)，并劇烈攪拌反應(yīng)物6小時(shí)。濾出催化劑并于真空中脫出溶劑。剩余物溶解于二氯甲烷(約300ml)中并加入吡啶(5.6ml，70mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并滴加甲磺酰氯(2.5ml，33mmole)。將反應(yīng)物攪拌過夜。該溶液用水洗滌并在真空中脫出溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)處理，得到5g所需的產(chǎn)物(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺酰氨基)-苯基]-乙酸甲酯。
將(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺酰氨基-苯基)-乙酸甲酯(5g，10.7mmole)產(chǎn)物溶解于干燥的DMF(100ml)并加入碳酸銫(7.25g，22mmole)和碘甲烷(1ml，16mmole)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時(shí)并于真空中脫出溶劑。剩余物溶解于乙酸乙酯中，用1N的鹽酸酸化，并用水洗滌有機(jī)層1次。產(chǎn)物用無水硫酸鈉干燥并于真空中脫出溶劑。剩余物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)處理，得到2.6g所需的產(chǎn)物(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺?；?甲基-氨基)-苯基]-乙酸甲酯。 將上面得到的(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺酰基-甲基-氨基-苯基)-乙酸甲酯(2.6g，5mmole)溶解于甲醇。加入1N的LiOH(25ml)并將反應(yīng)物在室溫下攪拌5小時(shí)。真空下脫出甲醇并用1N的鹽酸使反應(yīng)物酸化。將產(chǎn)物萃取于乙酸乙酯中并用水洗滌。快速色譜(含有5％乙酸的乙酸乙酯)給出1.9g所需的酸(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺?；?甲基-氨基)-苯基]-乙酸。
將上面得到的(4-氰基-苯基氨基)-4，5-二乙氧基-2-甲磺?；?甲基-氨基-苯基)-乙酸(350mg，0.75mmole)與羰基二咪唑(610mg，3.77mmole)在干燥的THF(6ml)中化合。將反應(yīng)物在60℃加熱1小時(shí)并冷卻至室溫。向該溶液加入苯磺酰胺(650mg，4.14mmole)和DBU(5mmole)在5ml THF中的溶液。攪拌反應(yīng)物3小時(shí)并在真空中脫出THF。將剩余物溶解于乙酸乙酯中并用1N的鹽酸酸化。分出的有機(jī)層用水洗滌并用無水硫酸鈉干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1；然后為含有5％乙酸的乙酸乙酯)純化，得到302mg所需的產(chǎn)物N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺?；?甲基-氨基)-苯基]-乙酰基}苯磺酰胺。 將上面得到的N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺?；?甲基-氨基)-苯基]-乙?；鶀苯磺酰胺(126mg，0.21mmole)溶解于乙醇(1.8ml)并加熱至60℃。加入二異丙基乙基胺(DIPEA-260ul，1.5mmole)，其后加入鹽酸羥胺(74mg，1.04mmole)。將反應(yīng)物于60℃在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。然后使反應(yīng)物冷卻至室溫。用甲醇(5ml)和乙酸(2ml)稀釋該溶液，并加入阮內(nèi)鎳RaneyNickel 2800(約50mg)混懸體。然后將反應(yīng)物在氫氣氛下劇烈攪拌1小時(shí)。濾出催化劑并除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)制備逆相HPLC純化，用水-乙腈(含有0.1％TFA)梯度洗脫劑，得到40mg所需的4-{2-苯磺酰氨基-1-[4，5-二乙氧基-2-(甲磺?；?甲基-氨基)-苯基]-2-氧代-乙基氨基}苯甲酰胺的三氟乙酸鹽。MS(M+H)＝604.
實(shí)施例12 將4-異丙氧基-5-乙氧基苯甲醛(10.6g 50mmole)和4-氨基卞腈(5.9g，50mmole)溶解于甲醇(150ml)，并于60℃攪拌1.6小時(shí)。使反應(yīng)物冷卻至0℃并加入甲苯磺酰甲基異腈(9.75g.50mmole)。在10分鐘內(nèi)滴加三氟化硼醚合物(19ml，150mmole)。將反應(yīng)物在0℃攪拌30分鐘，使之達(dá)到室溫并在環(huán)境溫度下攪拌1.5小時(shí)。加水(4.5ml)并在室溫下攪拌該混合物2天。在真空中脫出甲醇，并將剩余物溶解于乙酸乙酯中。有機(jī)層用水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。濾出硫酸鈉并于真空中脫出乙酸乙酯。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)處理，得到12.5g所需的產(chǎn)物(4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯。
在THF(約150ml)中，用1N的LiOH(約50ml)處理上面得到的產(chǎn)物(4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸甲酯(6g，16.3mmole)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌6小時(shí)，并用1N的鹽酸酸化。真空脫出THF，并將產(chǎn)物萃取于乙酸乙酯中。粗產(chǎn)物經(jīng)逆相色譜(乙酸乙酯，3％乙酸)純化。得到4.85g所需的酸(4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸。 將上面得到的(4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基)-(4-氰基-苯基氨基)-乙酸(200mg，0.57mmole)與羰基二咪唑(200mg，1.2mmole)在干燥的THF(4ml)中混合。將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時(shí)。向該溶液加入相應(yīng)的烷基或芳基磺酰胺(2.2mmole)與DBU(2.2mmole)在3ml THF中的溶液。將反應(yīng)物攪拌過夜，并在真空中脫出THF。剩余物溶解于乙酸乙酯中，并用乙酸酸化。分出的有機(jī)層用水洗滌，并用無水硫酸鈉干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，1∶2)純化，得到所需的產(chǎn)物N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基]-乙酰基}(烷基或芳基)磺酰胺。
將上面得到的N-{(4-氰基-苯基氨基)-[4-異丙氧基-5-乙氧基-苯基]-乙?；鶀(烷基或芳基)磺酰胺(約0.24mmole)溶解于乙醇(1-3ml)并加熱至60℃。加入二異丙基乙基胺(DIPEA-260ul，1.5mmole，6當(dāng)量)，其后加入鹽酸羥胺(84mg，1.25mmole，5當(dāng)量)。將反應(yīng)物于60℃和氮?dú)夥障聰嚢杓s6小時(shí)。然后使反應(yīng)物冷卻至室溫。用甲醇(5ml)和乙酸(2ml)稀釋該溶液，并加入阮內(nèi)鎳Raney Nickel2800(約50mg)混懸體。然后將反應(yīng)物在氫氣氛下劇烈攪拌1-6小時(shí)。濾出催化劑并除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)以水-乙腈(0.1％TFA)為洗脫劑的制備逆相HPLC純化，或經(jīng)快速色譜(乙酸乙酯∶丙酮∶水∶乙酸，6∶2∶1∶1)純化，得到所需的4-{2-(烷基或芳基)磺酰氨基-1-[4-異丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲酰胺的三氟乙酸或乙酸鹽。
用類似的方法制備下列具有不同R1基團(tuán)的化合物R1＝乙基4-{2-乙基磺酰氨基-1-[4-異丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝463。
R1＝正丙基4-{2-丙基磺酰氨基-1-[4-異丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝477。
R1＝正丁基4-{2-丁基磺酰氨基-1-[4-異丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝491。
R1＝CH2CH2CO2Me3-[(4-脒基-苯基氨基)-(3-乙氧基-4-異丙氧基-苯基)-乙?；被酋；鵠-丙酸甲酯，MS(M+H)＝521。
R1＝苯基4-{2-苯磺酰氨基-1-[4-異丙氧基-5-乙氧基]-苯基}-2-氧代-乙基氨基}苯甲脒，MS(M+H)＝511。
實(shí)施例13.氨基苯甲酰胺環(huán)被取代的?；酋０?將2-羥基-4-硝基-卞腈(11.2g，68mmole)溶解于DMF(200ml)。加入碳酸鉀(11g.80 mmole)和溴化芐(9ml，75mmole)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。真空脫出DMF并將剩余物溶解于乙酸乙酯和水中。分出的有機(jī)層用1N的NaOH洗滌，然后用水洗滌，并通過硫酸鈉干燥。將粗產(chǎn)物(5g)溶解于乙酸乙酯(75ml)并加到含5％Pt/C(500mg)的燒瓶中。將反應(yīng)物置于氫氣氛下(氣瓶)并劇烈攪拌幾小時(shí)，直至反應(yīng)完成為止(TLC)。濾出催化劑并除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化，得到4.12g的4-氨基-2-卞氧基卞腈。 將4，5-二乙氧基苯甲醛(3.6g，17.8mmole)和4-氨基-2-卞氧基卞腈(3.7g，17.8mmole)溶解于甲醇(40ml)并攪拌2小時(shí)。加入甲苯磺酰甲基異腈(3.48g.17.8mmole)。將反應(yīng)物冷卻至0℃并滴加三氟化硼醚合物(6.7ml，54mmole)。將反應(yīng)物在0℃攪拌30分鐘，使之達(dá)到室溫并在環(huán)境溫度下攪拌3.5小時(shí)。加水(1.6ml)并在室溫下攪拌該混合物2天。真空脫出甲醇并將剩余物溶解于乙酸乙酯中。有機(jī)層用水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。濾出硫酸鈉并在真空中脫出乙酸乙酯。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(己烷∶乙酸乙酯，4∶1)處理，得到4.2g所需的產(chǎn)物(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸甲酯。
在水(50ml)、甲醇(100m)和THF(50ml)中，用LiOH(1.96g)處理上面得到的產(chǎn)物。將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時(shí)并用乙酸酸化。在真空中脫出溶劑并將產(chǎn)物萃取于乙酸乙酯中。粗產(chǎn)物經(jīng)逆相色譜(乙酸乙酯，3％乙酸)純化，得到5g所需的酸產(chǎn)物(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸。 將(3-卞氧基-4-氰基-苯基氨基)-3，4-二乙氧基-苯基)-乙酸(750mg，1.68mmole)溶解于干燥的THF(3ml)并加入羰基二咪唑(CDI-545mg，3.36mmole)。將反應(yīng)物在40℃加熱1小時(shí)，然后冷卻至室溫。向此中加入苯磺酰胺(1.05g，6.7mmole)和DBU(1.02g 6.72mmole)的THF(3ml)溶液。將反應(yīng)物攪拌過夜，然后加入1N的鹽酸。在真空中脫出THF，產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(乙酸乙酯，2％乙酸)純化得到所需的產(chǎn)物。將該產(chǎn)物(215mg)溶解于含有乙酸(1滴)的乙醇(5ml)并加入5％Pd/C(100mg)。將反應(yīng)物置于氫氣氛下劇烈攪拌，直到反應(yīng)完成為止。濾出催化劑，然后真空脫出溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化，得到150mg所需的產(chǎn)物N-[(3-羥基-4-氰基-苯基氨基)-(3，4-二乙氧基-苯基-乙酰基)苯磺酰胺。
將上面得到的N-[(3-羥基-4-氰基-苯基氨基)-(3，4-二乙氧基-苯基-乙?；?苯磺酰胺(75mg，0.15mmole)溶解于乙醇(2ml)并加熱至60℃。加入二異丙基乙基胺(DIPEA-185ul，1mmole)，其后加入鹽酸羥胺(53mg，0.75mmole)。將反應(yīng)物于60℃和氮?dú)夥障聰嚢杓s6小時(shí)。然后使反應(yīng)物冷卻至室溫過夜。用乙酸(1ml)和甲醇(1ml)稀釋該溶液。加入阮內(nèi)鎳RaneyNickel 2800混懸體(約50mg)。然后在氫氣氛下劇烈攪拌反應(yīng)物0.5小時(shí)。濾出催化劑并除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)制備逆相HPLC純化，以水-乙腈(0.1％TFA)為洗脫劑，得到所需的脒產(chǎn)物4-[2-苯磺酰氨基-1-(3，4-二乙氧基-苯基)-2-氧代-乙基氨基]-2-羥基苯甲脒。MS(M+H)＝513。
用類似的方法，可以由2-氯-4-硝基-卞腈和2-溴-4-硝基-卞腈制備相應(yīng)的含鹵素的化合物。
實(shí)施例14.組織因子/因子VIIa對(duì)抗試驗(yàn)可用下述法測(cè)定本發(fā)明的樣品化合物的抑制常數(shù)(Ki)。
材料試驗(yàn)緩沖液100mM Hepes pH7.8，140mM NaCl，0.1％PEG-8000，0.02％Tween-80，5mM CaCl2凝結(jié)因子重組人類因子VIIa(NB#25942-16)輔因子可溶解的組織因子(1-219)基質(zhì)Chromozym-tPA(Boehringer Mannheim，Cat.#1093 037)在H2O中以20mM重組。用前于含有CaCl2的試驗(yàn)緩沖液中稀釋至4mM。
樣品在試驗(yàn)緩沖液中(乏CaCl2)，將樣品稀釋至3％DMSO。
方法1.在含有CaCl2的試驗(yàn)緩沖液中，制備2μg/mL(90nM)組織因子和1.5μg/mL(30nM)因子VIIa的溶液。
2.在室溫下培養(yǎng)15分鐘。
3.每孔加入50μL樣品。
4.向每孔中加入50μL組織因子/因子VIIa的溶液。
5.在室溫和溫和的攪拌下培養(yǎng)15分鐘。
6.每孔加入50μL基質(zhì)。
7.攪拌多孔板20-25秒。
8.室溫下，每10秒監(jiān)測(cè)一次在405nM處的吸光度，共監(jiān)測(cè)5分鐘。
9.計(jì)算超過10個(gè)點(diǎn)的Vmax。實(shí)施例15.因子Xa、凝血酶和血漿激肽釋放酶試驗(yàn)可用這些方法測(cè)定本發(fā)明的樣品化合物的抑制常數(shù)(Ki)。材料試驗(yàn)緩沖液100mM Hepes pH7.8，140mM NaCl，0.1％PEG-8000，0.02％Tween-80。
凝結(jié)因子人類因子Xa、凝血酶或血漿激肽釋放酶(HematologicTechnologies)在試驗(yàn)緩沖液中稀釋至0.45μg/mL(9.8nM)。
基質(zhì)S-2222，S2366或S2302(見下面-Chromogenix Inc.)以5mM在H2O中重組。使用前于試驗(yàn)緩沖液中稀釋至1.5mM。
樣品在試驗(yàn)緩沖液中將樣品稀釋至3％DMSO。方法1.每孔加入50μL樣品。
2.向每孔加入50μL適當(dāng)稀釋的凝結(jié)因子。
3.在室溫和溫和的攪拌下培養(yǎng)5分鐘。
4.向每孔加入50μL適當(dāng)稀釋的基質(zhì)。
5.攪拌多孔板20-25秒。
6.室溫下，每10秒監(jiān)測(cè)一次在405nM處的吸光度，共監(jiān)測(cè)5分鐘。
7.計(jì)算超過10個(gè)點(diǎn)的Vmax。
試驗(yàn)-酶、基質(zhì)和最終濃度
權(quán)利要求
1.具有下面結(jié)構(gòu)的化合物及其酸加成鹽、堿加成鹽和前藥 其中A和B獨(dú)立地為CH，CR3或N；X為C＝O或(CR4aR4b)m其中m＝1或2；Y為S(O)n-R1其中n＝1或2，S(O)n-NR2R2其中n＝1或2，S(O)n-OR2其中n＝1或2，C(O)R1，C(S)R1，C(O)-OR1，C(O)-NR2R2；N1和N2為氮原子；Q和R1獨(dú)立地為(1)任選取代的具有1至約10個(gè)碳原子的烷基；(2)任選取代的芳基烷基，其中包含具有6至約10個(gè)環(huán)碳原子的芳基部分，該芳基部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(3)任選取代的雜芳基烷基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的雜芳基部分，該雜芳基部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(4)任選取代的碳環(huán)烷基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)碳原子的碳環(huán)部分，該碳環(huán)部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(5)任選取代的雜環(huán)烷基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)基部分，該雜環(huán)部分與含有1至約10個(gè)碳原子的烷基部分相連；(6)任選取代的具有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基；(7)任選取代的芳基鏈烯基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的芳基部分，該芳基部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(8)任選取代的雜芳基鏈烯基，其中包含具有5至約10個(gè)環(huán)原子的雜芳基部分，該雜芳基部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(9)任選取代的碳環(huán)鏈烯基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)碳原子的碳環(huán)部分，該碳環(huán)部分與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(10)任選取代的雜環(huán)鏈烯基，其中包含具有3至約10個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)部分，該雜環(huán)與含有2至約10個(gè)碳原子的鏈烯基部分相連；(11)任選取代的具有6至約10個(gè)環(huán)碳原子的芳基；(12)任選取代的雜芳基，其具有5至約10個(gè)選自碳原子和雜原子的環(huán)原子，其中所述的雜原子為氮、氧或硫；(13)任選取代的具有3至約10環(huán)碳原子的碳環(huán)基；(14)任選取代的雜環(huán)基，其具有3至約10個(gè)選自碳原子和雜原子的環(huán)原子，其中所述的雜原子為氮、氧或硫；每個(gè)R2獨(dú)立地為H，烷基，取代烷基，C(O)R7或C(NH)R7，或者N1R2和N2R2一起形成基團(tuán)N1-CO-N2；R3為H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素或OH；R4a和R5獨(dú)立地為選自下列基團(tuán)之一H，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烷氧基烷基，未取代或取代的鹵烷基，未取代或取代的芳基，烷基-OR7，烷基-NR7R8，烷基-OC(O)R7，烷基-C(O)OR7，烷基-C(O)R7，OC(O)R7，C(O)OR7，C(O)R7，以及其中的烷基、R7或R8被1-3個(gè)F、Cl、Br、I取代的基團(tuán)，OR7，SR7，NR7R8，OC(OR7)，C(O)OR7，C(O)R7，C(O)NR7R8，NHC(NH)NH2，PO3，未取代或取代的吲哚基或者未取代或取代的咪唑基；R4b為H，烷基或取代烷基；R6選自H，C1-C6烷基，C1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，C1-C6鹵代烷基，鹵素，氰基，OR7，SR7，NR7R8，OC(O)OR7，C(O)R7和OC(O)R7；R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中Q為苯基，該苯基任選地被1-5個(gè)，優(yōu)選2-4個(gè)，更優(yōu)選2-3取代基所取代，所述的取代基選自鹵素，硝基，C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-OR7，C1-C6烷基-NR7R8，OC1-C6烷基-NR7R8，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，OC1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6鹵代烷基，O-芳基烷基(例如苯甲氧基)，C(O)OR7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7，NHC(O)NR7R8，NR7S(O)nR1，NR7S(O)nR7，S(O)nR7，S(O)nNR7，其中R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。
3.權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)的化合物，其中Q具有如下的結(jié)構(gòu) 其中R9為H，C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷氧基，羥基，NR7R8，SR7或OR7，這里R7和R8獨(dú)立地為H或未取代或取代的C1-C6烷基；R10，R11和Z2每個(gè)均獨(dú)立地選自H，鹵素，硝基，氰基，C1-C6烷基，C6-C10芳基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，OC1-C6烷基-C(O)OR7，OC1-C6烷基-C(O)R7，O-C1-C6烷基-OR7，OC1-C6烷基-C(O)NR7R8，C1-C6鹵代烷基，OR12，C1-C6烷基-R12，O-C1-C6烷基-R12，C(O)OR7，C(O)OR12，C(O)NR7R8，C(O)NR7R8，NR7C(O)R7，NR7C(O)R12，NR7C(O)-NR7R8，NR7C(O)OR7，NR7C(O)OR12，NR7S(O)n-R1，NR7S(O)n-R7和NR7S(O)n-R12，這里R7和R8獨(dú)立地為H或未取代或取代的C1-C6烷基，R12為定義同上的未取代或取代的C6-C10芳基或雜環(huán)基和n為1或2；Z1為H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素或硝基。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R10選自C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6氨基烷基，C1-C6鹵代烷基，C1-C6羥基烷基，苯基，苯氧基，芐基，卞氧基，以及被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C1-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、C1-C6氨基烷基、C(O)-C1-C6烷基、C(O)O-C1-C6烷基和C(O)OH取代的苯氧基和卞氧基。
5.權(quán)利要求3-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R11為NR7C1-C6烷基-C(O)NR7R8，NR7S(O)n-R7或NR7S(O)n-R12，n為1或2和/或其中Z1＝Z2＝H和/或其中R10為OR7，OR12，OC7-C10-芳基烷基，OC1-C6烷基-OR7或OC1-C6烷基-OR12。
6.權(quán)利要求3-5中任一項(xiàng)的化合物，其中Z1和Z2為氫；Z1，Z2和R11為氫；或者Z1，R10和R11為氫。
7.權(quán)利要求3-6中任一項(xiàng)的化合物，其中Z1或Z2為C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵素或硝基。
8.權(quán)利要求3-7中任一項(xiàng)的化合物，其中R10為OR7，OR12，C1-C6烷基-OR7或C1-C6烷基-OR12。
9.權(quán)利要求3-8中任一項(xiàng)的化合物，其中Y為S(O)nR1，這里n＝1或2和R11為NR7S(O)n-R7或NR7S(O)n-R12，n為1或2。
10.權(quán)利要求3-9中任一項(xiàng)的化合物，其中R10和Z2或Z2和R11連接在一起形成稠合的未取代或取代的碳環(huán)或雜環(huán)。
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物，其中X為羰基。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中R1選自C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C3-C6環(huán)烷基，苯基，萘基，芐基和具有5-6個(gè)選自碳原子和1-2個(gè)雜原子的雜芳基，其中所述的雜原子為N，S或O，而R1任選地被1-3個(gè)選自鹵素，硝基，C1-C6烷基，NR7R8，OR7，SR7，C1-C6烷基-C(O)OR7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-C(O)R7，C1-C6烷基-OR7，C1-C6鹵代烷基，C1-C6烷基-NR7R8，C(O)OR7，OC(O)R7，C(O)NR7R8，OC(O)NR7R8，NHC(O)R7和NHC(O)NR7R8的取代基所取代，這里R7和R8獨(dú)立地為H或C1-C6烷基。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中A和B為CH。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的化合物，其中R6為H。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的化合物，其中Y為S(O)nR1，這里n＝1或2。
16.一種組合物，其中包含權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物以及載體或賦形劑。
17.一種抑制TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽釋放酶活性的方法，包括使TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽釋放酶與有效量的權(quán)利要求16的組合物接觸。
18.一種治療以TF/因子VIIa，因子Xa，凝血酶或激肽釋放酶介導(dǎo)的疾病的方法，包括將有效量的權(quán)利要求16的組合物給藥于需要治療的哺乳動(dòng)物。
19.一種預(yù)防血栓形成或治療異常血栓形成的方法，包括將有效量的權(quán)利要求16的組合物給藥于需要預(yù)防和治療的哺乳動(dòng)物。
全文摘要
具有結(jié)構(gòu)(A)的化合物,其可用于抑制絲氨酸蛋白酶,如TF/因子VIIa、因子Xa、凝血酶和激肽釋放酶。這些化合物可用于預(yù)防和/或治療凝血性疾病的方法中。
文檔編號(hào)A61K31/216GK1342139SQ00804422
公開日2002年3月27日 申請(qǐng)日期2000年1月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月13日
發(fā)明者伊格內(nèi)西奧·阿利亞加斯-馬丁, 迪安·R·阿蒂斯, 邁克爾·S·迪納, 約翰·A·弗萊加里, 理查德·A·戈德史密斯, 里賈納·A·芒羅, 艾倫·G·奧利弗羅, 理查德·帕斯特, 托馬斯·E·羅森, 柯克·D·羅巴格, 丹尼爾·P·薩瑟林, 肯尼思·J·威斯, 周愛河, 朱延 申請(qǐng)人:杰南技術(shù)公司