專利名稱：具有抑制癌細胞生長功能的新的人蛋白及其編碼序列的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明涉及新的編碼具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸編碼的多肽。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的用途和制備。
人基因組學研究目前是國際上的熱點，除人染色體DNA大規(guī)模測序，表達序列測序(EST)的方法外，還缺少從功能開始的篩選具有功能基因的高通量的方法。
癌癥是危害人類健康的主要疾病之一。為了有效地治療和預防腫瘤，目前人們已越來越關注腫瘤的基因治療。因此，本領域迫切需要開發(fā)研究具有抑癌功能的人蛋白及其激動劑/抑制劑。
本發(fā)明的目的是提供一類新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、類似物和衍生物。
本發(fā)明的另一目的是提供編碼這些多肽的多核苷酸。
本發(fā)明的另一目的是提供生產(chǎn)這些多肽的方法以及該多肽和編碼序列的用途。
在本發(fā)明的第一方面，提供新穎的分離出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ IDNO11、SEQ ID NO14、SEQ ID NO17、SEQ ID NO20、SEQ ID NO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29；或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
較佳地，該多肽是具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ ID NO11、SEQ ID NO14、SEQ ID NO17、SEQ ID NO20、SEQ IDNO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29。
在本發(fā)明的第二方面，提供了一種分離的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，該核苷酸序列與選自下組的一種核苷酸序列有至少85％相同性(a)編碼上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸。較佳地，該多核苷酸編碼的多肽具有選自下組的氨基酸序列SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ IDNO11、SEQ ID NO14、SEQ ID NO17、SEQ ID NO20、SEQ ID NO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29。更佳地，該多核苷酸的序列選自下組SEQ ID NO3、SEQ ID NO6、SEQID NO9、SEQ ID NO12、SEQ ID NO15、SEQ ID NO18、SEQ ID NO21、SEQ ID NO24、SEQ ID NO27、SEQ ID NO30的編碼區(qū)序列或全長序列。
在本發(fā)明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的載體，以及被該載體轉化或轉導的宿主細胞或者被上述多核苷酸直接轉化或轉導的宿主細胞。
在本發(fā)明的第四方面，提供了制備具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制備方法，該方法包含(a)在適合表達具有抑癌功能的蛋白的條件下，培養(yǎng)上述被轉化或轉導的宿主細胞；(b)從培養(yǎng)物中分離出具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。
在本發(fā)明的第五方面，提供了與上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特異性結合的抗體。還提供了可用于檢測的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中連續(xù)10個核苷酸至全長核苷酸，較佳地它含有連續(xù)的約10-800個核苷酸。
在本發(fā)明的第六方面，提供了一種藥物組合物，它含有安全有效量的本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及藥學上可接受的載體。這些藥物組合物可治療癌癥以及細胞異常增殖等病癥。
本發(fā)明的其它方面由于本文的技術的公開，對本領域的技術人員而言是顯而易見的。
本發(fā)明采用大規(guī)模cDNA克隆轉染癌細胞，在獲得具有抑癌作用的基礎上，經(jīng)測序證明為新的基因，進一步得到全長cDNA克隆。DNA轉染試驗證明，本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白對癌細胞(肝癌細胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。
如本文所用，“分離的”是指物質從其原始環(huán)境中分離出來(如果是天然的物質，原始環(huán)境即是天然環(huán)境)。如活體細胞內(nèi)的天然狀態(tài)下的多聚核苷酸和多肽是沒有分離純化的，但同樣的多聚核苷酸或多肽如從天然狀態(tài)中同存在的其他物質中分開，則為分離純化的。
如本文所用，“分離的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然與其相關的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質。本領域的技術人員能用標準的蛋白質純化技術純化具有抑癌功能的蛋白。基本上純的多肽在非還原聚丙烯酰胺凝膠上能產(chǎn)生單一的主帶。具有抑癌功能的蛋白多肽的純度能用氨基酸序列分析。
本發(fā)明的多肽可以是重組多肽、天然多肽、合成多肽，優(yōu)選重組多肽。本發(fā)明的多肽可以是天然純化的產(chǎn)物，或是化學合成的產(chǎn)物，或使用重組技術從原核或真核宿主(例如，細菌、酵母、高等植物、昆蟲和哺乳動物細胞)中產(chǎn)生。根據(jù)重組生產(chǎn)方案所用的宿主，本發(fā)明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本發(fā)明的多肽還可包括或不包括起始的甲硫氨酸殘基。
本發(fā)明還包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和類似物。如本文所用，術語“片段”、“衍生物”和“類似物”是指基本上保持本發(fā)明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物學功能或活性的多肽。本發(fā)明的多肽片段、衍生物或類似物可以是(i)有一個或多個保守或非保守性氨基酸殘基(優(yōu)選保守性氨基酸殘基)被取代的多肽，而這樣的取代的氨基酸殘基可以是也可以不是由遺傳密碼編碼的，或(ii)在一個或多個氨基酸殘基中具有取代基團的多肽，或(iii)成熟多肽與另一個化合物(比如延長多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前導序列或分泌序列或用來純化此多肽的序列或蛋白原序列)。根據(jù)本文的教導，這些片段、衍生物和類似物屬于本領域熟練技術人員公知的范圍。
本發(fā)明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因組DNA或人工合成的DNA。DNA可以是單鏈的或是雙鏈的。DNA可以是編碼鏈或非編碼鏈。以PP4491蛋白(在本申請中，蛋白質的命名采用其克隆編號)為例，編碼成熟多肽的編碼區(qū)序列可以與SEQ ID NO3所示的編碼區(qū)序列相同或者是簡并的變異體。如本文所用，“簡并的變異體”在本發(fā)明中是指編碼具有SEQ ID NO2的蛋白質，但與SEQ IDNO3所示的編碼區(qū)序列有差別的核酸序列。以PP5644蛋白(在本申請中，蛋白質的命名采用其克隆編號)為例，編碼成熟多肽的編碼區(qū)序列可以與SEQ ID NO6所示的編碼區(qū)序列相同或者是簡并的變異體。如本文所用，“簡并的變異體”在本發(fā)明中是指編碼具有SEQ ID NO5的蛋白質，但與SEQ ID NO6所示的編碼區(qū)序列有差別的核酸序列。對于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此類推。對于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此類推。
編碼成熟多肽的多核苷酸包括只編碼成熟多肽的編碼序列；成熟多肽的編碼序列和各種附加編碼序列；成熟多肽的編碼序列(和任選的附加編碼序列)以及非編碼序列。
術語“編碼多肽的多核苷酸”可以是包括編碼此多肽的多核苷酸，也可以是還包括附加編碼和/或非編碼序列的多核苷酸。
本發(fā)明還涉及上述多核苷酸的變異體，其編碼與本發(fā)明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、類似物和衍生物。此多核苷酸的變異體可以是天然發(fā)生的等位變異體或非天然發(fā)生的變異體。這些核苷酸變異體包括取代變異體、缺失變異體和插入變異體。如本領域所知的，等位變異體是一個多核苷酸的替換形式，它可能是一個或多個核苷酸的取代、缺失或插入，但不會從實質上改變其編碼的多肽的功能。
本發(fā)明還涉及與上述的序列雜交且兩個序列之間具有至少50％，較佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本發(fā)明特別涉及在嚴格條件下與本發(fā)明所述多核苷酸可雜交的多核苷酸。在本發(fā)明中，“嚴格條件”是指(1)在較低離子強度和較高溫度下的雜交和洗脫，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)雜交時加有變性劑，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)僅在兩條序列之間的相同性至少在95％以上，更好是97％以上時才發(fā)生雜交。并且，可雜交的多核苷酸編碼的多肽與SEQ IDNO2所示的成熟多肽有相同的生物學功能(以PP4491蛋白為例)和活性。
本發(fā)明還涉及與上述的序列雜交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的長度至少含15個核苷酸，較好是至少30個核苷酸，更好是至少50個核苷酸，最好是至少100個核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的擴增技術(如PCR)以確定和/或分離編碼具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。
本發(fā)明中的多肽和多核苷酸優(yōu)選以分離的形式提供，更佳地被純化至均質。
本發(fā)明的DNA序列能用幾種方法獲得。例如，用本領域熟知的雜交技術分離DNA。這些技術包括但不局限于1)用探針與基因組或cDNA文庫雜交以檢出同源性核苷酸序列，和2)表達文庫的抗體篩選以檢出具有共同結構特征的克隆的DNA片段。
編碼具有抑癌功能的蛋白的特異DNA片段序列產(chǎn)生也能用下列方法獲得1)從基因組DNA分離雙鏈DNA序列；2)化學合成DNA序列以獲得所需多肽的雙鏈DNA。
上述提到的方法中，分離基因組DNA最不常用。當需要的多肽產(chǎn)物的整個氨基酸序列已知時，DNA序列的直接化學合成是經(jīng)常選用的方法。如果所需的氨基酸的整個序列不清楚時，DNA序列的直接化學合成是不可能的，選用的方法是cDNA序列的分離。分離感興趣的cDNA的標準方法是從高表達該基因的供體細胞分離mRNA并進行逆轉錄，形成質?；蚴删wcDNA文庫。提取mRNA的方法已有多種成熟的技術，試劑盒也可從商業(yè)途徑獲得(Qiagene)。而構建cDNA文庫也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。還可得到商業(yè)供應的cDNA文庫，如Clontech公司的不同cDNA文庫。當結合使用聚合酶反應技術時，即使極少的表達產(chǎn)物也能克隆。
可用常規(guī)方法從這些cDNA文庫中篩選本發(fā)明的基因。這些方法包括(但不限于)(1)DNA-DNA或DNA-RNA雜交；(2)標志基因的功能出現(xiàn)或喪失；(3)測定具有抑癌功能的蛋白的轉錄本的水平；(4)通過免疫學技術或測定生物學活性，來檢測基因表達的蛋白產(chǎn)物。上述方法可單用，也可多種方法聯(lián)合應用。
在第(1)種方法中，雜交所用的探針是與本發(fā)明的多核苷酸的任何一部分同源，其長度至少15個核苷酸，較好是至少30個核苷酸，更好是至少50個核苷酸，最好是至少100個核苷酸。此外，探針的長度通常在2kb之內(nèi)，較佳地為1kb之內(nèi)。此處所用的探針通常是在本發(fā)明的基因DNA序列信息的基礎上化學合成的DNA序列。本發(fā)明的基因本身或者片段當然可以用作探針。DNA探針的標記可用放射性同位素，熒光素或酶(如堿性磷酸酶)等。
在第(4)種方法中，檢測具有抑癌功能的蛋白基因表達的蛋白產(chǎn)物可用免疫學技術如Western印跡法，放射免疫沉淀法，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)等。
應用PCR技術擴增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；2301350-1354)被優(yōu)選用于獲得本發(fā)明的基因。特別是很難從文庫中得到全長的cDNA時，可優(yōu)選使用RACE法(RACE-cDNA末端快速擴增法)，用于PCR的引物可根據(jù)本文所公開的本發(fā)明的序列信息適當?shù)剡x擇，并可用常規(guī)方法合成?？捎贸Ｒ?guī)方法如通過凝膠電泳分離和純化擴增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本發(fā)明的基因，或者各種DNA片段等的核苷酸序列的測定可用常規(guī)方法如雙脫氧鏈終止法(Sanger et al.PNAS，1977，745463-5467)。這類核苷酸序列測定也可用商業(yè)測序試劑盒等。為了獲得全長的cDNA序列，測序需反復進行。有時需要測定多個克隆的cDNA序列，才能拼接成全長的cDNA序列。
本發(fā)明也涉及包含本發(fā)明的多核苷酸的載體，以及用本發(fā)明的載體或具有抑癌功能的蛋白編碼序列經(jīng)基因工程產(chǎn)生的宿主細胞，以及經(jīng)重組技術產(chǎn)生本發(fā)明所述多肽的方法。
通過常規(guī)的重組DNA技術(Science，1984；2241431)，可利用本發(fā)明的多聚核苷酸序列可用來表達或生產(chǎn)重組的具有抑癌功能的蛋白多肽。一般來說有以下步驟(1).用本發(fā)明的編碼具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或變異體)，或用含有該多核苷酸的重組表達載體轉化或轉導合適的宿主細胞；(2).在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的宿主細胞；(3).從培養(yǎng)基或細胞中分離、純化蛋白質。
本發(fā)明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重組表達載體中。術語“重組表達載體”指本領域熟知的細菌質粒、噬菌體、酵母質粒、植物細胞病毒、哺乳動物細胞病毒如腺病毒、逆轉錄病毒或其他載體。在本發(fā)明中適用的載體包括但不限于在細菌中表達的基于T7的表達載體(Rosenberg，et al.Gene，1987，56125)；在哺乳動物細胞中表達的pMSXND表達載體(Lee and Nathans，J Bio Chem.2633521，1988)和在昆蟲細胞中表達的來源于桿狀病毒的載體?？傊?，只要能在宿主體內(nèi)復制和穩(wěn)定，任何質粒和載體都可以用。表達載體的一個重要特征是通常含有復制起點、啟動子、標記基因和翻譯控制元件。
本領域的技術人員熟知的方法能用于構建含具有抑癌功能的人蛋白編碼DNA序列和合適的轉錄/翻譯控制信號的表達載體。這些方法包括體外重組DNA技術、DNA合成技術、體內(nèi)重組技術等(Sambroook，et al.Molecular Cloning，a Laboratory Manual，coldSpring Harbor Laboratory.New York，1989)。所述的DNA序列可有效連接到表達載體中的適當啟動子上，以指導mRNA合成。這些啟動子的代表性例子有大腸桿菌的lac或trp啟動子；λ噬菌體PL啟動子；真核啟動子包括CMV立即早期啟動子、HSV胸苷激酶啟動子、早期和晚期SV40啟動子、反轉錄病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核細胞或其病毒中表達的啟動子。表達載體還包括翻譯起始用的核糖體結合位點和轉錄終止子。
此外，表達載體優(yōu)選地包含一個或多個選擇性標記基因，以提供用于選擇轉化的宿主細胞的表型性狀，如真核細胞培養(yǎng)用的二氫葉酸還原酶、新霉素抗性以及綠色熒光蛋白(GFP)，或用于大腸桿菌的四環(huán)素或氨芐青霉素抗性。
包含上述的適當DNA序列以及適當啟動子或者控制序列的載體，可以用于轉化適當?shù)乃拗骷毎?，以使其能夠表達蛋白質。
宿主細胞可以是原核細胞，如細菌細胞；或是低等真核細胞，如酵母細胞；或是高等真核細胞，如哺乳動物細胞。代表性例子有大腸桿菌，鏈霉菌屬；鼠傷寒沙門氏菌的細菌細胞；真菌細胞如酵母；植物細胞；果蠅S2或Sf9的昆蟲細胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤細胞的動物細胞等。
本發(fā)明的多核苷酸在高等真核細胞中表達時，如果在載體中插入增強子序列時將會使轉錄得到增強。增強子是DNA的順式作用因子，通常大約有10到300個堿基對，作用于啟動子以增強基因的轉錄?？膳e的例子包括在復制起始點晚期一側的100到270個堿基對的SV40增強子、在復制起始點晚期一側的多瘤增強子以及腺病毒增強子等。
本領域一般技術人員都清楚如何選擇適當?shù)妮d體、啟動子、增強子和宿主細胞。
用重組DNA轉化宿主細胞可用本領域技術人員熟知的常規(guī)技術進行。當宿主為原核生物如大腸桿菌時，能吸收DNA的感受態(tài)細胞可在指數(shù)生長期后收獲，用CaCl2法處理，所用的步驟在本領域眾所周知?？晒┻x擇的是用MgCl2。如果需要，轉化也可用電穿孔的方法進行。當宿主是真核生物，可選用如下的DNA轉染方法磷酸鈣共沉淀法，常規(guī)機械方法如顯微注射、電穿孔、脂質體包裝等。
獲得的轉化子可以用常規(guī)方法培養(yǎng)，表達本發(fā)明的基因所編碼的多肽。根據(jù)所用的宿主細胞，培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)基可選自各種常規(guī)培養(yǎng)基。在適于宿主細胞生長的條件下進行培養(yǎng)。當宿主細胞生長到適當?shù)募毎芏群螅煤线m的方法(如溫度轉換或化學誘導)誘導選擇的啟動子，將細胞再培養(yǎng)一段時間。
在上面的方法中的重組多肽可包被于細胞內(nèi)、細胞外或在細胞膜上表達或分泌到細胞外。如果需要，可利用其物理的、化學的和其它特性通過各種分離方法分離和純化重組的蛋白。這些方法是本領域技術人員所熟知的。這些方法的例子包括但并不限于常規(guī)的復性處理、用蛋白沉淀劑處理(鹽析方法)、離心、滲透破菌、超處理、超離心、分子篩層析(凝膠過濾)、吸附層析、離子交換層析、高效液相層析(HPLC)和其它各種液相層析技術及這些方法的結合。
重組的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。這些用途包括(但不限于)直接做為藥物治療具有抑癌功能的蛋白功能低下或喪失所致的疾病，和用于篩選促進或對抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗體、多肽或其它配體。例如，抗體可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表達的重組具有抑癌功能的人蛋白篩選多肽庫可用于尋找有治療價值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。
本發(fā)明也提供了篩選藥物以鑒定提高(激動劑)或阻遏(拮抗劑)具有抑癌功能的人蛋白的藥劑的方法。激動劑提高具有抑癌功能的人蛋白刺激細胞增殖等生物功能，而拮抗劑阻止和治療與細胞過度增殖有關的紊亂如各種癌癥。例如，能在藥物的存在下，將哺乳動物細胞或表達具有抑癌功能的人蛋白的膜制劑與標記的具有抑癌功能的人蛋白一起培養(yǎng)。然后測定藥物提高或阻遏此相互作用的能力。
具有抑癌功能的人蛋白的拮抗劑包括篩選出的抗體、化合物、受體缺失物和類似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗劑可以與具有抑癌功能的人蛋白結合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的產(chǎn)生，或是與多肽的活性位點結合使多肽不能發(fā)揮生物學功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗劑可用于治療用途。
在篩選作為拮抗劑的化合物時，可以將具有抑癌功能的蛋白加入生物分析測定中，通過測定化合物影響具有抑癌功能的蛋白和其受體之間的相互作用來確定化合物是否是拮抗劑。用上述篩選化合物的同樣方法，可以篩選出起拮抗劑作用的受體缺失物和類似物。
本發(fā)明的多肽可直接用于疾病治療，例如，各種惡性腫瘤、和細胞異常增殖等。
本發(fā)明的多肽，及其片段、衍生物、類似物或它們的細胞可以用來作為抗原以生產(chǎn)抗體。這些抗體可以是多克隆或單克隆抗體。多克隆抗體可以通過將此多肽直接注射動物的方法得到。制備單克隆抗體的技術包括雜交瘤技術，三瘤技術，人B-細胞雜交瘤技術，EBV-雜交瘤技術等。
可以將本發(fā)明的多肽和拮抗劑與合適的藥物載體組合后使用。這些載體可以是水、葡萄糖、乙醇、鹽類、緩沖液、甘油以及它們的組合。組合物包含安全有效量的多肽或拮抗劑以及不影響藥物效果的載體和賦形劑。這些組合物可以作為藥物用于疾病治療。
本發(fā)明還提供含有一種或多種容器的藥盒或試劑盒，容器中裝有一種或多種本發(fā)明的藥用組合物成分。與這些容器一起，可以有由制造、使用或銷售藥品或生物制品的政府管理機構所給出的指示性提示，該提示反映出生產(chǎn)、使用或銷售的政府管理機構許可其在人體上施用。此外，本發(fā)明的多肽可以與其它的治療化合物結合使用。
藥物組合物可以以方便的方式給藥，如通過局部、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)或皮內(nèi)的給藥途徑。具有抑癌功能的蛋白以有效地治療和/或預防具體的適應癥的量來給藥。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和劑量范圍將取決于許多因素，如給藥方式、待治療者的健康條件和診斷醫(yī)生的判斷。
具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多種治療目的?；蛑委熂夹g可用于治療由于具有抑癌功能的蛋白的無表達或異常/無活性的具有抑癌功能的蛋白的表達所致的細胞增殖、發(fā)育或代謝異常。重組的基因治療載體(如病毒載體)可設計成表達變異的具有抑癌功能的蛋白，以抑制內(nèi)源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一種變異的具有抑癌功能的蛋白可以是縮短的、缺失了信號傳導功能域的具有抑癌功能的蛋白，雖可與下游的底物結合，但缺乏信號傳導活性。因此重組的基因治療載體可用于治療具有抑癌功能的蛋白表達或活性異常所致的疾病。來源于病毒的表達載體如逆轉錄病毒、腺病毒、腺病毒相關病毒、單純皰疹病毒、細小病毒等可用于將具有抑癌功能的蛋白基因轉移至細胞內(nèi)。構建攜帶具有抑癌功能的蛋白基因的重組病毒載體的方法可見于已有文獻(Sambrook，et al.)。另外重組具有抑癌功能的人蛋白基因可包裝到脂質體中轉移至細胞內(nèi)。
抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反義RNA和DNA)以及核酶也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。核酶是一種能特異性分解特定RNA的酶樣RNA分子，其作用機制是核酶分子與互補的靶RNA特異性雜交后進行核酸內(nèi)切作用。反義的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技術獲得，如固相磷酸酰胺化學合成法合成寡核苷酸的技術已廣泛應用。反義RNA分子可通過編碼該RNA的DNA序列在體外或體內(nèi)轉錄獲得。這種DNA序列已整合到載體的RNA聚合酶啟動子的下游。為了增加核酸分子的穩(wěn)定性，可用多種方法對其進行修飾，如增加兩側的序列長度，核糖核苷之間的連接應用磷酸硫酯鍵或肽鍵而非磷酸二酯鍵。
多聚核苷酸導入組織或細胞內(nèi)的方法包括將多聚核苷酸直接注入到體內(nèi)組織中；或在體外通過載體(如病毒、噬菌體或質粒等)先將多聚核苷酸導入細胞中，再將細胞移植到體內(nèi)等。
本發(fā)明的多肽還可用作肽譜分析，例如，多肽可用物理的、化學或酶進行特異性切割，并進行一維或二維或三維的凝膠電泳分析。
本發(fā)明還提供了針對具有抑癌功能的人蛋白抗原決定簇的抗體。這些抗體包括(但不限于)多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、單鏈抗體、Fab片段和Fab表達文庫產(chǎn)生的片段。
抗具有抑癌功能的人蛋白的抗體可用于免疫組織化學技術中，檢測活檢標本中的具有抑癌功能的人蛋白。
與具有抑癌功能的人蛋白結合的單克隆抗體也可用放射性同位素標記，注入體內(nèi)可跟蹤其位置和分布。這種放射性標記的抗體可作為一種非創(chuàng)傷性診斷方法用于腫瘤細胞的定位和判斷是否有轉移。
本發(fā)明中的抗體可用于治療或預防與具有抑癌功能的人蛋白相關的疾病。給予適當劑量的抗體可以刺激或阻斷具有抑癌功能的人蛋白的產(chǎn)生或活性。
抗體也可用于設計針對體內(nèi)某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高親和性的單克隆抗體可與細菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，紅豆堿等)共價結合。一種通常的方法是用巰基交聯(lián)劑如SPDP，攻擊抗體的氨基，通過二硫鍵的交換，將毒素結合于抗體上，這種雜交抗體可用于殺滅具有抑癌功能的人蛋白陽性的細胞。
多克隆抗體的生產(chǎn)可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫動物，如家兔，小鼠，大鼠等。多種佐劑可用于增強免疫反應，包括但不限于弗氏佐劑等。
具有抑癌功能的人蛋白單克隆抗體可用雜交瘤技術生產(chǎn)(Kohler and Milstein.Nature，1975，256495-497)。將人恒定區(qū)和非人源的可變區(qū)結合的嵌合抗體可用已有的技術生產(chǎn)(Morrison et al，PNAS，1985，816851)。而已有的生產(chǎn)單鏈抗體的技術(U.S.PatNo.4946778)也可用于生產(chǎn)抗具有抑癌功能的人蛋白的單鏈抗體。
能與具有抑癌功能的人蛋白結合的多肽分子可通過篩選由各種可能組合的氨基酸結合于固相物組成的隨機多肽庫而獲得。篩選時，必須對具有抑癌功能的人蛋白分子進行標記。
本發(fā)明還涉及定量和定位檢測具有抑癌功能的人蛋白水平的診斷試驗方法。這些試驗是本領域所熟知的，且包括FISH測定和放射免疫測定。試驗中所檢測的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解釋具有抑癌功能的人蛋白在各種疾病中的重要性和用于診斷具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。
具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相關疾病的診斷和治療。在診斷方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于檢測具有抑癌功能的蛋白的表達與否或在疾病狀態(tài)下具有抑癌功能的蛋白的異常表達。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于對活檢標本的雜交以判斷具有抑癌功能的蛋白的表達異常。雜交技術包括Southern印跡法，Northern印跡法、原位雜交等。這些技術方法都是公開的成熟技術，相關的試劑盒都可從商業(yè)途徑得到。本發(fā)明的多核苷酸的一部分或全部可作為探針固定在微陣列(Microarray)或DNA芯片(又稱為“基因芯片”)上，用于分析組織中基因的差異表達分析和基因診斷。用具有抑癌功能的蛋白特異的引物進行RNA-聚合酶鏈反應(RT-PCR)體外擴增也可檢測具有抑癌功能的蛋白的轉錄產(chǎn)物。
檢測具有抑癌功能的蛋白基因的突變也可用于診斷具有抑癌功能的蛋白相關的疾病。具有抑癌功能的蛋白突變的形式包括與正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的點突變、易位、缺失、重組和其它任何異常等。可用已有的技術如Southern印跡法、DNA序列分析、PCR和原位雜交檢測突變。另外，突變有可能影響蛋白的表達，因此用Northern印跡法、Western印跡法可間接判斷基因有無突變。
本發(fā)明的序列對染色體鑒定也是有價值的。該序列會特異性地針對某條人染色體具體位置且并可以與其雜交。目前，需要鑒定染色體上的各基因的具體位點?，F(xiàn)在，只有很少的基于實際序列數(shù)據(jù)(重復多態(tài)性)的染色體標記物可用于標記染色體位置。根據(jù)本發(fā)明，為了將這些序列與疾病相關基因相關聯(lián)，其重要的第一步就是將這些DNA序列定位于染色體上。
簡而言之，根據(jù)cDNA制備PCR引物(優(yōu)選15-35bp)，可以將序列定位于染色體上。然后，將這些引物用于PCR篩選含各條人染色體的體細胞雜合細胞。只有那些含有相應于引物的人基因的雜合細胞會產(chǎn)生擴增的片段。
體細胞雜合細胞的PCR定位法，是將DNA定位到具體染色體的快捷方法。使用本發(fā)明的的寡核苷酸引物，通過類似方法，可利用一組來自特定染色體的片段或大量基因組克隆而實現(xiàn)亞定位?？捎糜谌旧w定位的其它類似策略包括原位雜交、用標記的流式分選的染色體預篩選和雜交預選，從而構建染色體特異的cDNA庫。
將cDNA克隆與中期染色體進行熒光原位雜交(FISH)，可以在一個步驟中精確地進行染色體定位。此技術的綜述，參見Verma等，Human Chromosomesa Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。
一旦序列被定位到準確的染色體位置，此序列在染色體上的物理位置就可以與基因圖數(shù)據(jù)相關聯(lián)。這些數(shù)據(jù)可見于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通過與Johns Hopkins University Welch Medical Library聯(lián)機獲得)。然后可通過連鎖分析，確定基因與業(yè)已定位到染色體區(qū)域上的疾病之間的關系。
接著，需要測定患病和未患病個體間的cDNA或基因組序列差異。如果在一些或所有的患病個體中觀察到某突變，而該突變在任何正常個體中未觀察到，則該突變可能是疾病的病因。比較患病和未患病個體，通常涉及首先尋找染色體中結構的變化，如從染色體水平可見的或用基于cDNA序列的PCR可檢測的缺失或易位。根據(jù)目前的物理作圖和基因定位技術的分辨能力，被精確定位至與疾病有關的染色體區(qū)域的cDNA，可以是50至500個潛在致病基因間之一種(假定1兆堿基作圖分辨能力和每20kb對應于一個基因)。
本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全長序列或其片段通?？梢杂肞CR擴增法、重組法或人工合成的方法獲得。對于PCR擴增法，可根據(jù)本發(fā)明所公開的有關核苷酸序列，尤其是開放閱讀框序列來設計引物，并用市售的cDNA庫或按本領域技術人員已知的常規(guī)方法所制備的cDNA庫作為模板，擴增而得有關序列。當序列較長時，常常需要進行兩次或多次PCR擴增，然后再將各次擴增出的片段按正確次序拼接在一起。
一旦獲得了有關的序列，就可以用重組法來大批量地獲得有關序列。這通常是將其克隆入載體，再轉入細胞，然后通過常規(guī)方法從增殖后的宿主細胞中分離得到有關序列。
此外，還可用人工合成的方法來合成有關序列，尤其是片段長度較短時。通常，通過先合成多個小片段，然后再進行連接可獲得序列很長的片段。
目前，已經(jīng)可以完全通過化學合成來編碼本發(fā)明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可將該DNA序列引入本領域中的各種DNA分子(如載體)和細胞中。此外，還可通過化學合成將突變引入本發(fā)明蛋白序列中。
此外，由于本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，與來源于其他物種的同族蛋白相比，預計在施用于人時將具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人體內(nèi)的免疫原性更低或沒有)。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆實驗室手冊(New YorkCold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。
實施例1cDNA基因的獲得及對癌細胞克隆形成的抑制作用PP4491、PP5644、PP6068、PP6361、PP6455、PP6489、PP6614、PP6781、PP6832和PP6933是通過用常規(guī)方法構建人胎盤cDNA文庫獲得的。取3、6、10月齡的胎盤組織，用Trizol試劑(GIBCO BRL公司)按廠方說明書提取總RNA，用mRNA提純試劑盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXRcDNA文庫構建試劑盒(Stratagene公司)構建上述mRNA的cDNA文庫。其中反轉錄酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反轉錄反應在42℃進行。轉化XL 10-Gold感受細胞，獲得了1×106cfu/μg cDNA滴度的cDNA文庫。第一輪隨機挑取cDNA克隆，其后以高豐度cDNA克隆和已證明有抑癌細胞生長功能的cDNA克隆為探針，雜交篩選cDNA文庫，挑取弱陽性及陰性克隆。用Qiagen 96孔板質粒抽提試劑盒，按廠家說明書進行質粒DNA的提取。質粒DNA和空載體同時轉染肝癌細胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μlH2O溶解，待轉染。每份DNA樣品中加0.74μl脂質體及9.3μl無血清培液，混勻后，室溫放置10分鐘。每管中加150μl無血清培液，均分加入3孔生長于96孔板的7721細胞中，37℃放置2小時，每孔再加50μl無血清培液，37℃24小時。每孔換100μl全培液，37℃24小時，換含G418的全培液100μl，37℃ 24～48小時，邊觀察，邊換G418濃度不等的培液。約2～3次后，直到鏡檢細胞有克隆形成，計數(shù)。發(fā)現(xiàn)以上克隆有抑制細胞克隆形成作用，結果如下表所示。
cDNA克隆轉染細胞(7721)克隆形成情況
對上述cDNA克隆采用雙脫氧終止法，在ABI377 DNA自動測序儀上測定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，確定為新基因克隆，進行另一端測序，仍未獲得全長cDNA序列，設計引物，再次進行測序，直到獲得全長序列(SEQ ID NO1、4、7、10、13、16、19、22、25、28)。
實施例2從胎盤cDNA中PCR獲得全長基因取3、6、10月齡的胎盤組織，用Trizol試劑(GIBCO BRL公司)按廠方說明書提取總RNA，用mRNA提純試劑盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反轉錄酶在42℃進行反轉錄反應，獲得胎盤cDNA。利用各個基因的轉異引物(如下表所示)，按97℃3分鐘、1個循環(huán)；94℃30秒→60℃30秒→72℃1分鐘，共35個循環(huán)；72℃10分鐘，1個循環(huán)，進行PCR擴增，獲得含有完整開放閱讀框序列的各蛋白基因的擴增產(chǎn)物。擴增產(chǎn)物經(jīng)測序驗證，與實施例1測得的序列相符，隨后用常規(guī)技術將擴增產(chǎn)物轉入宿主細胞，從而獲得重組蛋白。
基因特異引物
實施例3cDNA克隆序列分析1.PP4491A核苷酸序列(SEQ ID NO1) 長度2058bp1 CGACCTTTAT TGCTGGGAGC TGGCTTCTGT CCCTTTCTTC CCCCCCCCAC GAGTCTTGCC61 CTTGACTTCT GCTCTGGATT CACTCTTCCC TGTCGGCCGC GCATGTGCTC ATCCCACTCT121 CCGCTAAGCG GGAGGCTGCT GTTAGAGCAG GCTGCTTCCT GCCTAAAGCA GGCCCTTCGG181 GGCTCGCTGC ACACACATCT CTGGCTCTCC AGGCTTCGTG TTCTGTCTTT TCATCAGCAT241 GGCGGGGCGG GGGGCGGGGG GCGGGGGTGT GTTTGGGAAT CCCTCCCCCT CTTACTTTTT301 CTCTTGTGGA ACTTGGCCAC AGTTTCTGAA CAATGTGCCT ACATTACCAG CTGGTTTCAG361 TGATTCCTCT GTGTCCCTTT TTGGTTTCTG GAAAGATTCT TTGTCAACAT TAGTAACTGA421 TACATAGAAC CAAGGAGCAC TCAAATAGGG AGCCAGGAGC CAGGGAGCTG GTGACACTTG481 TGTGCTGTGG GGCAGCTGGG ATCCAGGTAA GACCGGATTG AAGCTTTGAA ATTAGACTAA541 CAAAGCTCCA GACAGCAAGA GCCCAGGTGC ACTGCTCACA CCCCCACCTG CATTTTGAAG601 TCATATTATT TTTTGTTTTG TTTTTTAAGA CGGTCTGGCT CTGTCGCCTA AGCTGGAGTG661 TGGTGGCACG ATCACAGCTC ACTGCAGCCT CCATCTCCTA GGCTCAAGCC ATTTTCCCAC721 CTCAGCCTCC CGAGTAGCTG GGACTACAGG TGCACACCAC CACACCTGGC TAATTTTTTG781 TATTTTTAGT AGAGACGGGG GTTTCTTCCA TGTTGCCCAG 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TGT CTT TTC ATC AGC 238239 ATG GCG GGG CGG GGG GCG GGG GGC GGG GGT GTG TTT GGG AAT CCC TCC 286287 CCC TCT TAC TTT TTC TCT TGT GGA ACT TGG CCA CAG TTT CTG AAC AAT 334335 GTG CCT ACA TTA CCA GCT GGT TTC AGT GAT TCC TCT GTG TCC CTT TTT 382383 GGT TTC TGG AAA GAT TCT TTG TCA ACA TTA GTA ACT GAT ACA TAG AAC 430431 CAA GGA GCA CTC AAA TAG GGA GCC AGG AGC CAG GGA GCT GGT GAC ACT 478479 TGT GTG CTG TGG GGC AGC TGG GAT CCA GGT AAG ACC GGA TTG AAG CTT 526527 TGA AAT TAG ACT AAC AAA GCT CCA GAC AGC AAG AGC CCA GGT GCA CTG 574575 CTC ACA CCC CCA CCT GCA TTT TGA AGT CAT ATT ATT TTT TGT TTT GTT 622623 TTT TAA GAC GGT CTG GCT CTG TCG CCT AAG CTG GAG TGT GGT GGC ACG 670671 ATC ACA GCT CAC TGC AGC CTC CAT CTC CTA GGC TCA AGC CAT TTT CCC 718719 ACC TCA GCC TCC CGA GTA GCT GGG ACT ACA GGT GCA CAC CAC CAC ACC 766767 TGG CTA ATT TTT TGT ATT TTT AGT AGA GAC GGG GGT TTC TTC CAT GTT 814815 GCC CAG GCT GGT CTC GAA CTC CTG GAC TCA AGC AAT CCG CCC ACC TTG 862863 ACT TCC CAA AGT GCT GGG ATT ATG GGT GGG TGT GAG CCA TTG CGC CCA 910911 GCC TTG AAG TCA TGT TCT AAA TTG TAT TTG AAT TTG TGC CTC TTT GTT 958959 TTT CCC CAA ACC AAA GCC CTC AAA TTG TAG TCT CTG TCG GCT TCT GCA10061007 GAA TTC TGG AAA ATG CCA GTT TTC CTC CCC CGC CCT TGT TTT CCA TAA10541055 AAC ATA TTT ATA TAT TGT GAT GAG GAG TAC TTT CTG AAG AGT ACT TCG11021103 TAT TTT TTT TTA ATT GCC TTG TTT GCC TTC AAC TTC CTT GAT TTT CAT11501151 AGT TTA CAT GGG TGT GTG TAG GGG TGT GTG TGT GTA TGT GTG TGG GTT11981199 AGG GCT TTT TTC GTT GCA TGT GAT GGT TCT GTG GAC ATA TGA TCC CCA12461247 CAA ACT GTG GGA GTG ATT GGC CAG GCC TTG TTT TGT TTG TTT GTT TGT12941295 TTG TGT TTT TGT TCT TTT GAA GAA TAG AGT GGT ATT TAG AAA ATA AAT13421343 TGC ATT GCA AAG CTC TTA TCG GCT CAT ATG AGA GAG CAG GTT CCT GCC13901391 CTT GAA AAT GCC GGT AAG CTA TAG CAT ATG TTT TTT AAG ACT TAA GCA14381439 TTT CAT GCT TTA AAA TAC CTT CAC AAG TGA ACA TTA CAC ACA GAA GTT14861487 CAT TTG GTT TTC CTT TGT TTT ATG GTG CAT ATA GCA ATA AAG ACC CCC15341 Met Val His Ile Ala Ile Lys Thr Pro 91535 CTC CAC CCT GCA ACC CCC ATC CCC CAC CGG GCC TTT GTC CCT GCC TTG158210 Leu His Pro Ala Thr Pro Ile Pro His Arg Ala Phe Val Pro Ala Leu 251583 GCT TTT CTC CCC TTC TCA TTC TCC TCT CCC CTT TCC TCA CTG AAG GCT163026 Ala Phe Leu Pro Phe Ser Phe Ser Ser Pro Leu Ser Ser Leu Lys Ala 411631 GTG AGT TGC TTT CAA TGT GAC AAC ACT ATG ATG TCA TTT GGA AGG ATT167842 Val Ser Cys Phe Gln Cys Asp Asn Thr Met Met Ser Phe Gly Arg Ile 571679 TGC CAG GAC AGA CTG ATT CTG AGT CCT GGG TGC CGT ATG TGT ATG CGG172658 Cys Gln Asp Arg Leu Ile Leu Ser Pro Gly Cys Arg Met Cys Met Arg 731727 CAG TGT TGT CAG GCG ATC TTG TTT GAA GCT CTA TGT TGC CAT AAT TAC177474 Gln Cys Cys Gln Ala Ile Leu Phe Glu Ala Leu Cys Cys His Asn Tyr 891775 CAT CAA GTA CAC ACT GTT GGC AAA AGG CTA ACA CCT GAC TTT AGA AAA182290 His Gln Val His Thr Val Gly Lys Arg Leu Thr Pro Asp Phe Arg Lys 1051823 TGC TGA TTT GAG AAC AAA AGG AAA GGT CTT TTT TCA CTG CTT AAA GTG1870106 Cys *** 1071871 GGG TCA CTT TGA TAC CTT TGC GGT CAT GTC TGT GTC TGA TGA GTG TAG19181919 AAT CTC TGG ATG TGC ACT GTC AGT CAT GTG TCC ACC AGG CCT CGA ATA19661967 TCA TAT GGG AAA TGT CAT AGT TAA AAA CGT ACA GCC AGG CCC GTG TGC20142015 TGT TAA TAG TGT GAA ATT GTC ATG TTA AAA AAA AAA AAA AAA AA 20582.PP5644A核苷酸序列(SEQ ID NO4)長度2293bp1 GCACGCATAG GGGCTTGGTT CTATGTCCCT GTGGCTATGT TTCCAGTGTC CTCTGGGTGT61 TTCCAAGAGC AACAAGAAAC GAATAAATCT CTGCCCCGCA GCGCCTCCAC CCCAGAGACC121 CGGACCAAGT TCACACAGGA CAATCTGTGC CACGCCCAGC GCGAGCGCCT GGACTCGGCC181 AACCTGTGGG TGCTGGTGGA CTGCATCCTT CGCGACACCT CCGAGGACCT GGGACTCCAG241 TGTGACGCCG TGAACCTGGC CTTCGGGCGC CGCTGTGAGG AACTGGAGGA CGCGCGGCAC301 AAGCTGCAGC ACCACCTGCA CAAGGTGGGG CACCCTTGAA CCCCGAAGAC GGCTCCGGCG361 CCTGCCCACC ACTCTGCCCC CTCTCATCAC CTGGCCTGGG CCCTCAACAC CTTTCTCCTC421 TGTCCCACTT ATCCCGAGGG ACCCCAGAAG CAAGTGTCAC CTCTCCGTAA ACCTATGTAA481 AACCAGGTGA CACTGGGTAT GATCGCAGTG TGTTGCAACC CCCATGACTG AGAAGGAGGA541 GCTGTGGGGA GGATGGAGGC AGGAGCTGGT CTGGGGAGCA TTGACTGCCT GGGAGGTCCC601 CAAGAGTCCT GGCCTGGCAG GCAGGGCTCT GACTCTAGGG CCTCAGCATG GCCTTTACCA661 CCTCTGAGTC CCCAGTCCTT GAGCAGGATT TGGGTCCTGG TGACCACCAA GGATGGGGGT721 TCTTGGACCA GAGCTAAGAG ACAACAGGCT GCCTGACTCT CCAGAGCCCG CTGGGGGCCC781 CAGTGCACAT TGGTTCCCCT CACCCACGCC TCCCCAGGGC CACTGGTCAG GACCACCCTC841 TGGACACAGC CCCAGGAGCT GGGTAGGACC AGACTGGTCT CTACATTCCA TATGCCCGGG901 CATGGGGGCA CAGGCCCAAG GGGCACTGTC CTGTCTGCAG ATGCTGCGGG AAATCACAGA961 TCAGGAACAC AACGTGGTGG CACTGAAGGA GGCCATCAAG GACAAGGAGG AACCTCTGCA1021 CATAGCCCAG ACCCGGCTGT AGCTTGCTCT CACACCGGCC CAACATGCAG CTGTCGGCGA1081 TGCACGCCCA GTTCAGGTAC TGCCTGGGCC TCTGAGGCAG TCCCAGGTGC CCCCGTCCAC1141 CTCCTCGCTG CGACCCTCTC CAATAAACAC TCCAATCTCC ACACACACAT CCCCCACAGG1201 TGCTGAGAGG GGAGGGAGAC TCTGCGGCCA CACACAACAT GCAAGCACGC CTTAAACACA1261 CAGATATAGA CATGACACTG GGCAGGTCAT GGGTCGGGGG CCTCCCCGTG CCAGGGACCT1321 GTGCCCACGT GGTCTCACCC CACCCTGTGC TACCTCATCT TCCCGGGAGG AAGCTCCTTC1381 AGACAAGGTG AGCTCCTGGA GGCCACGGGG CCAGAGAGGC CAGAGAGGGC CATTCCCTGC1441 TGCCCTGAGG GTGCTGTCCC CACCTCTGGT GGAAAGTATG ACCTACGCCT GGGCTACAGG1501 CATAGATGGG CCGTCCTTTT GTTTCCCTTG TTAACGGATG CCTGGTGGCC CCTTCTGAGC1561 CTAAGTACCT TTCTTCCTTC CCTGCCCCTC AGTTCCTTCA AGGAACTGGG TGCCTCCTTC1621 CGTCAAATAT CAGGAATGGA AAGAACTGAG CCTGGTCGGC TGAGGCCAGT CCTGTCCTGT1681 CAGGGTCGAG ATTGCACGCG GGTCACTCAT TCCCACTCAG GTCCGCGCTC CCTGGGAGGA1741 CCCTCGTAAT TTATGCTCTG CCCTAGAGCC GCTTTCCTGG TAGGATCCTT TCATGGCGTC1801 TTCCCAGGAC CTCCTGCCAG CTCCCATTGG GAGTTTTGGG TCCCCTCCAC CCCAGTAGGT1861 GCATACTTCT GCCCTCCCCA GCCCCAGCTC ACACCCCCCA ACACCCCCAA GCTGGTGAGT1921 GAGGTGGAGG AGCTGTACAA GTCCATCACA GCGCTGCGGG AGAAGCTTCT ACAAGCGGAG1981 CAGTCCCTGC GCAACCTCAA GGACATCCAC ATGAGCCTGG AGAAGGACGT CACCGCCATG2041 ACCAACAGTG TCTTCATCGA CCGCCAGAAG TGCATGGCCC ATCGTACTTG CTACCCCACC2101 ATTCTGCAGC TGGCTGGCTA CCAGTGAGCA GCGGCACGGT GCTTCCCCCC AATCCCCCAA2161 ATAAACAGTG CGTTAGTTTC TGCAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA2221 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA2281 AAAAAAAAAA AAAB氨基酸序列(SEQ ID NO5)長度124個氨基酸1 MLCPRAAFLV GSFHGVFPGP PASSHWEFWV PSTPVGAYFC PPQPQLTPPN TPKLVSEVEE61 LYKSITALRE KLLQAEQSLR NLKDIHMSLE KDVTAMTNSV FIDRQKCMAH RTCYPTILQL121 AGYQC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO6)克隆號PP5644起始編碼子1753 ATG終止編碼子2125 TGA蛋白質分子量13946.471 GCA CGC ATA GGG GCT TGG TTC TAT GTC CCT GTG GCT ATG TTT CCA GTG 4849 TCC TCT GGG TGT TTC CAA GAG CAA CAA GAA ACG AAT AAA TCT CTG CCC 9697 CGC AGC GCC TCC ACC CCA GAG ACC CGG ACC AAG TTC ACA CAG GAC AAT 144145 CTG TGC CAC GCC CAG CGC GAG CGC CTG GAC TCG GCC AAC CTG TGG GTG 192193 CTG GTG GAC TGC ATC CTT CGC GAC ACC TCC GAG GAC CTG GGA CTC CAG 240241 TGT GAC GCC GTG AAC CTG GCC TTC GGG CGC CGC TGT GAG GAA CTG GAG 288289 GAC GCG CGG CAC AAG CTG CAG CAC CAC CTG CAC AAG GTG GGG CAC CCT 336337 TGA ACC CCG AAG ACG GCT CCG GCG CCT GCC CAC CAC TCT GCC CCC TCT 384385 CAT CAC CTG GCC TGG GCC CTC AAC ACC TTT CTC CTC TGT CCC ACT TAT 432433 CCC GAG GGA CCC CAG AAG CAA GTG TCA CCT CTC CGT AAA CCT ATG TAA 480481 AAC CAG GTG ACA CTG GGT ATG ATC GCA GTG TGT TGC AAC CCC CAT GAC 528529 TGA GAA GGA GGA GCT GTG GGG AGG ATG GAG GCA GGA GCT GGT CTG GGG 576577 AGC ATT GAC TGC CTG GGA GGT CCC CAA GAG TCC TGG CCT GGC AGG CAG 624625 GGC TCT GAC TCT AGG GCC TCA GCA TGG CCT TTA CCA CCT CTG AGT CCC 672673 CAG TCC TTG AGC AGG ATT TGG GTC CTG GTG ACC ACC AAG GAT GGG GGT 720721 TCT TGG ACC AGA GCT AAG AGA CAA CAG GCT GCC TGA CTC TCC AGA GCC 768769 CGC TGG GGG CCC CAG TGC ACA TTG GTT CCC CTC ACC CAC GCC TCC CCA 816817 GGG CCA CTG GTC AGG ACC ACC CTC TGG ACA CAG CCC CAG GAG CTG GGT 864865 AGG ACC AGA CTG GTC TCT ACA TTC CAT ATG CCC GGG CAT GGG GGC ACA 912913 GGC CCA AGG GGC ACT GTC CTG TCT GCA GAT GCT GCG GGA AAT CAC AGA 960961 TCA GGA ACA CAA CGT GGT GGC ACT GAA GGA GGC CAT CAA GGA CAA GGA10081009 GGA ACC TCT GCA CAT AGC CCA GAC CCG GCT GTA GCT TGC TCT CAC ACC10561057 GGC CCA ACA TGC AGC TGT CGG CGA TGC ACG CCC AGT TCA GGT ACT GCC11041105 TGG GCC TCT GAG GCA GTC CCA GGT GCC CCC GTC CAC CTC CTC GCT GCG11521153 ACC CTC TCC AAT AAA CAC TCC AAT CTC CAC ACA CAC ATC CCC CAC AGG12001201 TGC TGA GAG GGG AGG GAG ACT CTG CGG CCA CAC ACA ACA TGC AAG CAC12481249 GCC TTA AAC ACA CAG ATA TAG ACA TGA CAC TGG GCA GGT CAT GGG TCG12961297 GGG GCC TCC CCG TGC CAG GGA CCT GTG CCC ACG TGG TCT CAC CCC ACC13441345 CTG TGC TAC CTC ATC TTC CCG GGA GGA AGC TCC TTC AGA CAA GGT GAG13921393 CTC CTG GAG GCC ACG GGG CCA GAG AGG CCA GAG AGG GCC ATT CCC TGC14401441 TGC CCT GAG GGT GCT GTC CCC ACC TCT GGT GGA AAG TAT GAC CTA CGC14881489 CTG GGC TAC AGG CAT AGA TGG GCC GTC CTT TTG TTT CCC TTG TTA ACG15361537 GAT GCC TGG TGG CCC CTT CTG AGC CTA AGT ACC TTT CTT CCT TCC CTG15841585 CCC CTC AGT TCC TTC AAG GAA CTG GGT GCC TCC TTC CGT CAA ATA TCA16321633 GGA ATG GAA AGA ACT GAG CCT GGT CGG CTG AGG CCA GTC CTG TCC TGT16801681 CAG GGT CGA GAT TGC ACG CGG GTC ACT CAT TCC CAC TCA GGT CCG CGC17281729 TCC CTG GGA GGA CCC TCG TAA TTT ATG CTC TGC CCT AGA GCC GCT TTC17761 Met Leu Cys Pro Arg Ala Ala Phe 81777 CTG GTA GGA TCC TTT CAT GGC GTC TTC CCA GGA CCT CCT GCC AGC TCC18249 Leu Val Gly Ser Phe His Gly Val Phe Pro Gly Pro Pro Ala Ser Ser 241825 CAT TGG GAG TTT TGG GTC CCC TCC ACC CCA GTA GGT GCA TAC TTC TGC187225 His Trp Glu Phe Trp Val Pro Ser Thr Pro Val Gly Ala Tyr Phe Cys 401873 CCT CCC CAG CCC CAG CTC ACA CCC CCC AAC ACC CCC AAG CTG GTG AGT192041 Pro Pro Gln Pro Gln Leu Thr Pro Pro Asn Thr Pro Lys Leu Val Ser 561921 GAG GTG GAG GAG CTG TAC AAG TCC ATC ACA GCG CTG CGG GAG AAG CTT196857 Glu Val Glu Glu Leu Tyr Lys Ser Ile Thr Ala Leu Arg Glu Lys Leu 721969 CTA CAA GCG GAG CAG TCC CTG CGC AAC CTC AAG GAC ATC CAC ATG AGC201673 Leu Gln Ala Glu Gln Ser Leu Arg Asn Leu Lys Asp Ile His Met Ser 882017 CTG GAG AAG GAC GTC ACC GCC ATG ACC AAC AGT GTC TTC ATC GAC CGC206489 Leu Glu Lys Asp Val Thr Ala Met Thr Asn Ser Val Phe Ile Asp Arg 1042065 CAG AAG TGC ATG GCC CAT CGT ACT TGC TAC CCC ACC ATT CTG CAG CTG2112105 Gln Lys Cys Met Ala His Arg Thr Cys Tyr Pro Thr Ile Leu Gln Leu 1202113 GCT GGC TAC CAG TGA GCA GCG GCA CGG TGC TTC CCC CCA ATC CCC CAA 2160121 Ala Gly Tyr Gln ***1252161 ATA AAC AGT GCG TTA GTT TCT GCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 22082209 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 22562257 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 22933.PP6068A核苷酸序列(SEQ ID NO7)長度1851bp1 GAAATTCCAC AGCTCCCGTC CTGGCCACCC TGGAAGCTCA TCAGGCCAAG ACCCGGACAG61 AGCTTCAGAG GAGTGTTGAG TGACACCTGA GGATGCGGCT GCACACACTC AGCCAAGGGC121 CGAGTCTCAC CTGCGGTGGG GTTTCGGCTC TGCCTGGGGG CTCCATCCCT TTCAGCCACT181 CGTGGCCTTG GGGATTTCTG GTTGTCCCCA GCTGGGACTG TTCACAGTTG TCACCTGCAG241 ACCTGCCTCT CCCTGGCCTG AGGTTCAAAG GCCTCATCGG ATGGTCAGTA CAGTGGGGTC301 ACCTGTTGTT TCTATACAAC AGCAGGGAAG GGGCCATGGA GCTTTTCCCT GCTGGGTGCT361 CCTGCTTTGG CCCAGCCCAC CTTTCCTGGT GCTCCAAGCT AGGAGGCTGT GGCCCCAGCC421 TGAGGAGGGT GTCCTGGCCT CCAGGTGTGC AGCAGGGGCT GTGTGCTGGG GGAGGTTCCA481 GTTAGGCGAT GGGATCCTGC AGTGGTCTGG TGGCATTTCT TGGAACCAGA TTTACCTGAG541 GAGCTCTGTC CTGCTCCCTG TGGAGGGCTC CAGATAGCTC AGAAATGACC AGCCAATGGC601 CTTTTGTTTG GGGGCCTGAG GTCAAGAGAG CTGAGAGTAT TCGCTCGACT GAGCACATTC661 AGGAAGATCA GGGCAGGCGT GTGGGAGGTC CCTCACTCCA CGGGACAGAG GCCCCTGGAC721 AGCAGAGGAA ACCTACAGCT CTGGGTGAGG GGACACTTGG CTTTGGTGTT TGCACTTTAC781 AGATCCTGCG GTCCACGAGG GGCCTCAGGA GAGGACGTGT CAGGACGTGG CTTCCCAGCC841 TTCTGCCTTG GGCAGTGGGG GTGCTCCTGT CTGTCCTTTT CCCCCACACC CTGGACTGTG901 CTTGGCTGTT GGTGCACATG GTTGGCACAC GGTGGGCAGA GGGCAGAGAA TGCCACTGCT961 TGGTTATTGG TCCCCTTTGA CCAGGAAACC CAAGAGGAGA CACCTCAGTC AGCAGAAAGG1021 CCACCTGGCT CACTGGCTCA TTCCAGGAGT GGGAGAGACG GCAGGGTCTC CTCTTTGTCC1081 TCCGGCATCA GGAAGGGGAT GGTGTCCACT CCCCACTGTG GTGGCTTTAG GCAAGGTTCT1141 TATTGTCTGC TCTGCCTCGG TTTCCCCATC TGGAAAATGG GGGCAGGGGT CCTGACCTAC1201 CTCAGGTGGA ACGGTGAGCA GGGAACATGT CGGAGTCCTT CAGAGAATGT GATGTGAGGT1261 TGGATCAACA GTGTGGGTTC CTGTCCTGTT TCCCCTTCCT CTTTGGGGCT GAGGAGGAGG1321 TTAAAGGCCA AATGCTGTTT CCCAACACCC CAAAGTCTGC ACACGTCTCA TGAATGCATC1381 ACATTTCTGT CATATGGATA TTAGCCATTC CGAAATCTGT GTAATCAACT TCACATTATT1441 CAAGTTACAA ATCACTGTGT CCATAGAAAA ACTGTGCTGG TATTTGCTGG ACAAAGGGTT1501 GGGCCCCTTT TATTTTTACC TGCCACCCAG CATCTCCCCC ACCTGCCCCT TCTGGGTGAC1561 ACAGCCGGTA AACGGAATCA CGTATGGTTC TTTCTGTGGG TCTGTGGCAC AGCAGGAAGA1621 GCCCGGTGCC GCCAGCACCT TGTGGAAGAC CACACATGGG TGGTCCCACA GCATGGGACC1681 AGGCTGGCCT GAGGGATGCC CAGTTGTAAC AATGCTGCTG TCACTGTCTC ATTAAATATA1741 CATCCTTTAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA1801 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AB氨基酸序列(SEQ ID NO8)長度131個氨基酸1 MTSQWPFVWG PEVKRAESIR STEHIQEDQG RRVGGPSLHG TEAPGQQRKP TALGEGTLGF61 GVCTLQILRS TRGLRRGRVR TWLPSLLPWA VGVLLSVLFP HTLDCAWLLV HMVGTRWAEG121 RECHCLVIGP LC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO9)克隆號PP6068起始編碼子585 ATG 終止編碼子978 TGA
蛋白質分子量14556.151 GA AAT TCC ACA GCT CCC GTC CTG GCC ACC CTG GAA GCT CAT CAG GCC 4748 AAG ACC CGG ACA GAG CTT CAG AGG AGT GTT GAG TGA CAC CTG AGG ATG 9596 CGG CTG CAC ACA CTC AGC CAA GGG CCG AGT CTC ACC TGC GGT GGG GTT 143144 TCG GCT CTG CCT GGG GGC TCC ATC CCT TTC AGC CAC TCG TGG CCT TGG 191192 GGA TTT CTG GTT GTC CCC AGC TGG GAC TGT TCA CAG TTG TCA CCT GCA 239240 GAC CTG CCT CTC CCT GGC CTG AGG TTC AAA GGC CTC ATC GGA TGG TCA 287288 GTA CAG TGG GGT CAC CTG TTG TTT CTA TAC AAC AGC AGG GAA GGG GCC 335336 ATG GAG CTT TTC CCT GCT GGG TGC TCC TGC TTT GGC CCA GCC CAC CTT 383384 TCC TGG TGC TCC AAG CTA GGA GGC TGT GGC CCC AGC CTG AGG AGG GTG 431432 TCC TGG CCT CCA GGT GTG CAG CAG GGG CTG TGT GCT GGG GGA GGT TCC 479480 AGT TAG GCG ATG GGA TCC TGC AGT GGT CTG GTG GCA TTT CTT GGA ACC 527528 AGA TTT ACC TGA GGA GCT CTG TCC TGC TCC CTG TGG AGG GCT CCA GAT 575576 AGC TCA GAA ATG ACC AGC CAA TGG CCT TTT GTT TGG GGG CCT GAG GTC 6231 Met Thr Ser Gln Trp Pro Phe Val Trp Gly Pro Glu Val 13624 AAG AGA GCT GAG AGT ATT CGC TCG ACT GAG CAC ATT CAG GAA GAT CAG 67114 Lys Arg Ala Glu Ser Ile Arg Ser Thr Glu His Ile Gln Glu Asp Gln 29672 GGC AGG CGT GTG GGA GGT CCC TCA CTC CAC GGG ACA GAG GCC CCT GGA 71930 Gly Arg Arg Val Gly Gly Pro Ser Leu His Gly Thr Glu Ala Pro Gly 45720 CAG CAG AGG AAA CCT ACA GCT CTG GGT GAG GGG ACA CTT GGC TTT GGT 76746 Gln Gln Arg Lys Pro Thr Ala Leu Gly Glu Gly Thr Leu Gly Phe Gly 61768 GTT TGC ACT TTA CAG ATC CTG CGG TCC ACG AGG GGC CTC AGG AGA GGA 81562 Val Cys Thr Leu Gln Ile Leu Arg Ser Thr Arg Gly Leu Arg Arg Gly 77816 CGT GTC AGG ACG TGG CTT CCC AGC CTT CTG CCT TGG GCA GTG GGG GTG 86378 Arg Val Arg Thr Trp Leu Pro Ser Leu Leu Pro Trp Ala Val Gly Val 93864 CTC CTG TCT GTC CTT TTC CCC CAC ACC CTG GAC TGT GCT TGG CTG TTG 91194 Leu Leu Ser Val Leu Phe Pro His Thr Leu Asp Cys Ala Trp Leu Leu 109912 GTG CAC ATG GTT GGC ACA CGG TGG GCA GAG GGC AGA GAA TGC CAC TGC 959110 Val His Met Val Gly Thr Arg Trp Ala Glu Gly Arg Glu Cys His Cys 125960 TTG GTT ATT GGT CCC CTT TGA CCA GGA AAC CCA AGA GGA GAC ACC TCA 1007126 Leu Val Ile Gly Pro Leu *** 1321008 GTC AGC AGA AAG GCC ACC TGG CTC ACT GGC TCA TTC CAG GAG TGG GAG 10551056 AGA CGG CAG GGT CTC CTC TTT GTC CTC CGG CAT CAG GAA GGG GAT GGT 11031104 GTC CAC TCC CCA CTG TGG TGG CTT TAG GCA AGG TTC TTA TTG TCT GCT 11511152 CTG CCT CGG TTT CCC CAT CTG GAA AAT GGG GGC AGG GGT CCT GAC CTA 11991200 CCT CAG GTG GAA CGG TGA GCA GGG AAC ATG TCG GAG TCC TTC AGA GAA 12471248 TGT GAT GTG AGG TTG GAT CAA CAG TGT GGG TTC CTG TCC TGT TTC CCC 12951296 TTC CTC TTT GGG GCT GAG GAG GAG GTT AAA GGC CAA ATG CTG TTT CCC 13431344 AAC ACC CCA AAG TCT GCA CAC GTC TCA TGA ATG CAT CAC ATT TCT GTC 13911392 ATA TGG ATA TTA GCC ATT CCG AAA TCT GTG TAA TCA ACT TCA CAT TAT 14391440 TCA AGT TAC AAA TCA CTG TGT CCA TAG AAA AAC TGT GCT GGT ATT TGC 14871488 TGG ACA AAG GGT TGG GCC CCT TTT ATT TTT ACC TGC CAC CCA GCA TCT 15351536 CCC CCA CCT GCC CCT TCT GGG TGA CAC AGC CGG TAA ACG GAA TCA CGT 15831584ATG GTT CTT TCT GTG GGT CTG TGG CAC AGC AGG AAG AGC CCG GTG CCG16311632CCA GCA CCT TGT GGA AGA CCA CAC ATG GGT GGT CCC ACA GCA TGG GAC16791680CAG GCT GGC CTG AGG GAT GCC CAG TTG TAA CAA TGC TGC TGT CAC TGT17271728CTC ATT AAA TAT ACA TCC TTT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA17751776AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA18231824AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A18514.PP6361A核苷酸序列(SEQ ID NO10) 長度1630bp1GGTGATGGTG GTGGCAGGTG TGGTGGTGCT GATTCTAGCC TTGGTCCTAG CTTGGCTCTC61TACCTACGTA GCAGACAGCG GTAGCAACCA GCTCCTGGGC GCTATTGTGT CAGCAGGCGA121CACATCCGTC CTCCACCTGG GGCATGTGGA CCACCTGGTG GCAGGCCAAG GCAACCCCGA181GCCAACTGAA CTCCCCCATC CATCAGAGGA CAAGCAGGTG CAGGCAGCAG CAGTCCAGAG241GCCCCCCTGA GATCTGAGGA TAGCACCTGC CTCCCTCCCA GCCCTGGCCT CATCACTGTG301CGGCTCAAAT TCCTCAATGA TACCGAGGAG CTGGCTGTGG CTAGGCCAGA GGATACCGTG361GGTGCCCTGA AGAGCAAATA CTTCCCTGGA CAAGAAAGCC AGATGAAACT GATCTACCAG421GGCCGCCTGC TACAAGACCC AGCCCGCACA CTGCGTTCTC TGAACATTAC CGACAACTGT481GTGATTCACT GCCACCGCTC ACCCCCAGGG TCAGCTGTTC CAGGCCCCTC AGCCTCCTTG541GCCCCCTCGG CCACTGAGCC ACCCAGCCTT GGTGTCAATG TGGGCAGCCT CATGGTGCCT601GTCTTTGTGG TGCTGTTGGG TGTGGTCTGG TACTTCCGAA TCAATTACCG CCAATTCTTC661ACAGCACCTG CCACTGTCTC CCTGGTGGGA GTCACCGTCT TCTTCAGCTT CCTAGTATTT721GGGATGTATG GACGATAAGG ACATAGGAAG AAAATGAAAG GCATGGTCTT TCTCCTTTAT781GGCCTCCCCA CTTTTCCTGG CCAGAGCTGG GCCCAAGGGC CGGGGAGGGA GGGGTGGAAA841GGATGTGATG GAAATCTCCT CCATAGGACA CAGGAGGCAA GTATGCGGCC TCCCCTTCTC901ATCCACAGGA GTACAGATGT CCCTCCCGTG CGAGCACAAC TCAGGTAGAA ATGAGGATGT961CATCTTCCTT CACTTTTAGG GTCCTCTGAA GGAGTTCAAA GCTGCTGGCC AAGCTCAGTG1021GGGAGCCTGG GCTCTGAGAT TCCCTCCCAC CTGTGGTTCT GACTCTTCCC AGTGTCCTGC1081ATGTCTGCCC CCAGCACCCA GGGCTGCCTG CAAGGGCAGC TCAGCATGGC CCCAGCACAA1141CTCCGTAGGG AGCCTGGAGT ATCCTTCCAT TTCTCAGCCA AATACTCATC TTTTGAGACT1201GAAATCACAC TGGCGGGAAT GAAGATTGTG CCAGCCTTCT CTTATGGGCA CCTAGCCGCC1261TTCACCTTCT TCCTCTACCC CTTAGCAGGA ATAGGGTGTC CTCCCTTCTT TCAAAGCACT1321TTGCTTGCAT TTTATTTTAT TTTTTTAAGA GTCCTTCATA GAGCTCAGTC AGGAAGGGGA1381TGGGGCACCA AGCCAAGCCC CCAGCATTGG GAGCGGCCAG GCCACAGCTG CTGCTCCCGT1441AGTCCTCAGG CTGTAAGCAA GAGACAGCAC TGGCCCTTGG CCAGCGTCCT ACCCTGCCCA1501ACTCCAAGGA CTGGGTATGG ATCGCTGGGC CCTAGGCTCT TGCTTCTGGG GCTATTGGAG1561GGTCAGTGTC TGTGACTGAA TAAAGTTCCA TTTTGTGGTC CTGCAAAAAA AAAAAAAAAA1621AAAAAAAAAAB氨基酸序列(SEQ ID NO11)長度164個氨基酸1 MSAPSTQGCL QGQLSMAPAQ LRREPGVSFH FSAKYSSFET EITLAGMKIV PAFSYGHLAA61 FTFFLYPLAG IGCPPFFQST LLAFYFIFLR VLHRAQSGRG WGTKPSPQHW ERPGHSCCSR121 SPQAVSKRQH WPLASVLPCP TPRTGYGSLG PRLLLLGLLE GQCLC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO12)克隆號PP6361起始編碼子1081 ATG終止編碼子1573 TGA蛋白質分子量17998.951 GGT GAT GGT GGT GGC AGG TGT GGT GGT GCT GAT TCT AGC CTT GGT CCT4849 AGC TTG GCT CTC TAC CTA CGT AGC AGA CAG CGG TAG CAA CCA GCT CCT9697 GGG CGC TAT TGT GTC AGC AGG CGA CAC ATC CGT CCT CCA CCT GGG GCA 144145 TGT GGA CCA CCT GGT GGC AGG CCA AGG CAA CCC CGA GCC AAC TGA ACT 192193 CCC CCA TCC ATC AGA GGA CAA GCA GGT GCA GGC AGC AGC AGT CCA GAG 240241 GCC CCC CTG AGA TCT GAG GAT AGC ACC TGC CTC CCT CCC AGC CCT GGC 288289 CTC ATC ACT GTG CGG CTC AAA TTC CTC AAT GAT ACC GAG GAG CTG GCT 336337 GTG GCT AGG CCA GAG GAT ACC GTG GGT GCC CTG AAG AGC AAA TAC TTC 384385 CCT GGA CAA GAA AGC CAG ATG AAA CTG ATC TAC CAG GGC CGC CTG CTA 432433 CAA GAC CCA GCC CGC ACA CTG CGT TCT CTG AAC ATT ACC GAC AAC TGT 480481 GTG ATT CAC TGC CAC CGC TCA CCC CCA GGG TCA GCT GTT CCA GGC CCC 528529 TCA GCC TCC TTG GCC CCC TCG GCC ACT GAG CCA CCC AGC CTT GGT GTC 576577 AAT GTG GGC AGC CTC ATG GTG CCT GTC TTT GTG GTG CTG TTG GGT GTG 624625 GTC TGG TAC TTC CGA ATC AAT TAC CGC CAA TTC TTC ACA GCA CCT GCC 672673 ACT GTC TCC CTG GTG GGA GTC ACC GTC TTC TTC AGC TTC CTA GTA TTT 720721 GGG ATG TAT GGA CGA TAA GGA CAT AGG AAG AAA ATG AAA GGC ATG GTC 768769 TTT CTC CTT TAT GGC CTC CCC ACT TTT CCT GGC CAG AGC TGG GCC CAA 816817 GGG CCG GGG AGG GAG GGG TGG AAA GGA TGT GAT GGA AAT CTC CTC CAT 864865 AGG ACA CAG GAG GCA AGT ATG CGG CCT CCC CTT CTC ATC CAC AGG AGT 912913 ACA GAT GTC CCT CCC GTG CGA GCA CAA CTC AGG TAG AAA TGA GGA TGT 960961 CAT CTT CCT TCA CTT TTA GGG TCC TCT GAA GGA GTT CAA AGC TGC TGG10081009 CCA AGC TCA GTG GGG AGC CTG GGC TCT GAG ATT CCC TCC CAC CTG TGG10561057 TTC TGA CTC TTC CCA GTG TCC TGC ATG TCT GCC CCC AGC ACC CAG GGC11041 Met Ser Ala Pro Ser Thr Gln Gly 81105 TGC CTG CAA GGG CAG CTC AGC ATG GCC CCA GCA CAA CTC CGT AGG GAG11529 Cys Leu Gln Gly Gln Leu Ser Met Ala Pro Ala Gln Leu Arg Arg Glu 241153 CCT GGA GTA TCC TTC CAT TTC TCA GCC AAA TAC TCA TCT TTT GAG ACT120025 Pro Gly Val Ser Phe His Phe Ser Ala Lys Tyr Ser Ser Phe Glu Thr 401201 GAA ATC ACA CTG GCG GGA ATG AAG ATT GTG CCA GCC TTC TCT TAT GGG124841 Glu Ile Thr Leu Ala Gly Met Lys Ile Val Pro Ala Phe Ser Tyr Gly 561249 CAC CTA GCC GCC TTC ACC TTC TTC CTC TAC CCC TTA GCA GGA ATA GGG129657 His Leu Ala Ala Phe Thr Phe Phe Leu Tyr Pro Leu Ala Gly Ile Gly 721297 TGT CCT CCC TTC TTT CAA AGC ACT TTG CTT GCA TTT TAT TTT ATT TTT134473 Cys Pro Pro Phe Phe Gln Ser Thr Leu Leu Ala Phe Tyr Phe Ile Phe 881345 TTA AGA GTC CTT CAT AGA GCT CAG TCA GGA AGG GGA TGG GGC ACC AAG139289 Leu Arg Val Leu His Arg Ala Gln Ser Gly Arg Gly Trp Gly Thr Lys 1041393 CCA AGC CCC CAG CAT TGG GAG CGG CCA GGC CAC AGC TGC TGC TCC CGT1440105 Pro Ser Pro Gln His Trp Glu Arg Pro Gly His Ser Cys Cys Ser Arg 1201441 AGT CCT CAG GCT GTA AGC AAG AGA CAG CAC TGG CCC TTG GCC AGC GTC1488121 Ser Pro Gln Ala Val Ser Lys Arg Gln His Trp Pro Leu Ala Ser Val 1361489 CTA CCC TGC CCA ACT CCA AGG ACT GGG TAT GGA TCG CTG GGC CCT AGG1536137 Leu Pro Cys Pro Thr Pro Arg Thr Gly Tyr Gly Ser Leu Gly Pro Arg 1521537 CTC TTG CTT CTG GGG CTA TTG GAG GGT CAG TGT CTG TGA CTG AAT AAA1584153 Leu Leu Leu Leu Gly Leu Leu Glu Gly Gln Cys Leu *** 1651585 GTT CCA TTT TGT GGT CCT GCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 16305.PP6455A核苷酸序列(SEQ ID NO13) 長度2331bp1GCAAATTATG GGTGAAATGT CCCAACTGCC GGAAGGTGAA AGTGTTCTGT GATGTAAAAT61TTAGGTCACA CTCTATAAAG CTTCTCCTTA TTCTATGTGT GAACAGCTAG TCTGTATCTT121CACCTATGCA TATTTAAAAA TCAACCTTAC GAAGGCTCTT GGCCACCATA ATCCTTCCTA181CCCTGTAGCA AGAGCCCAGC CTCAGACTAT GCTTCCTTCT GCCTCCGAGT GCAATGCCTT241CCCCCGAGTC TCCAAGGTAC CAAACCGGTC AGGGGCAGCT GAGACAGCTC TACTTGTACG301AGTCCTCCCC AAGCCCTTGA AATCACAGGC ATCTCTGCTG TCCCTGCCCT TTATCCACAT361CACTGAACAA CTAAGCACAC ACATCTGTGT AGTTTTATTT AAAGTGTTCC ATGTGTGTTT421GTTTACAATT AACAACATGA ATGACTGCAG TATGGATGCA GCAGAAAGGA ATGCTGAGGG481AGGACTCCAG TTGGAATGAG CCACTTTTCC AGGACTAGGA ATGAACTTTC CCCAGTACCA541ACAAGGCAGC CTCCAGGGCA AGAAATGGTA ACAGAATCCA TCCTGTTGAC AGTCAAGATG601GAATTACAGA GAATTCTCAC CTCTTTTTTG ACTCTCAGGT GGAAACCCCC TTCCCATGGG661GTGAAGCGCA GTCTGCTCCA GAGACCCACT GTTAGGGTCG GGGATGTCAC AGAAATTAAC721AGGGCAGCCA ATTCCCATCC AGAGGGGCCC AGGATGACCC CGAACCCTCT AGCTCAGCCC781CAAGCTCGGG CCAGGGAGTG AAGCCTTTGT CCCCAAGCAA CAGAGTGAGG GTCTGTCTCT841AACCCGGTGG GCTCCAGTGA AAGGAAAATG GCCTGGAGGT GCCCACAGGA GGGCGCCCTA901GTTCTGAGAC AGGTCTACGG CTCCCAGACT GCGTCCCCAT GAGTAACAGA GGGACACGCA961GAGGGGCATA CTGAGTGCCT ATAGGGGACT CACAGACTGC AGATGCACGC TGCGGATCCA1021GAAGCCGGTC AGGTAATGAG GTGCAGAGGT GTGGGGAAGA CCTGGATGCC TCCCTGGGTG1081CCAACCAGCC TAACCAGCCG GGGCCACCAA ACAGAAGTGC TTCTGACATT AACGCGACAC1141ACAGAAGGTG TGTAGGGTGG GTAGTGGAAG TGACCGCAGA GGCCTCTGGG GATTGTAGTT1201TTGGAGCTAG AGAGGCGGGC AAGCAGTTGG CTTCGCCCAC ACGGTGTGCC TCTCACATCT1261GCACAGCGCA CACAACCAAG CTTAGGAGCC GACTGTTAAG ATGCCCCAGT GACACGGACA1321AGTTTCTCCT CTGCAACCCA ATGAGAGCTG CTGACCACGA GAGCATCGCG GGACCGCCAA1381AGGATTCTGG AAAATGTGGT CCCGGGTGGC CAGTGTGCGC TGACCTTCAC CTGAAGGTGA1441GCTGAGCTCA CCATGCAAGT CTCCACCCTG GGGTGCCCTT CCCCAAGCAG ATGCCAGGTT1501GGGGCAGAAG CAGTTCAGGG AGAAGCGATG CGCTCCTGGG ACTGCCGGTT TGGGGGCAAC1561ATCGGCCCTG TGTCCCCTAG AGTAGGAGGG TGTACCAGGA TGGGGAACCC CAAGGCCGTT1621TTCAGGGAGA ACAAGATTGG CTTGAGGCAA ACTCCCGGAA TGGAGATGGG GAGAGTCTGG1681TCGCATTTCC CCAGGAGTTT AGGGGATGAA GGCTGGACTT GGGTGAACAG CAAAAGATCC1741CCTGGTGATA GTGGTGGTGA GGATCAGAGG CTTGAGCCAG AAATTCCCGA GGTGTTTGTT1801TGTTTTGTTT TTTTTGAGAC AGAGTCTTGA TCTGTCTCCC AGGATGTAGT GCAATGGCAT1861GCTCTTGGCT CATTGCAACC TCCGCCTCCC AGGTTCAGGC GATTCTCCTG CCTCAGCCTC1921CCAAGTAGCT GAGATTATAG GCACCTGCCA CTGTGCCCAC CTAAATTTTT TTTGTTTTTT1981TGTATTTTTG GTAGAGACGA TGTTTCACCA CATTGCCCAG CCTGGTCTCG AACTCCTGAC2041CTCAAGTGAT CCACCTGCCT CGGCCTCCCA AAGTGCTGGG ATTACAGGCA TGAGCCCCCA2101CACCCAGCTC ATTTTTATCT TTTAACTTAA AGGTTTTTAT TTTTCTCTAT TTTTACTCTT2161ACAGGTACGG CTTGAAGGAG ACTTCTGGAG GGTGGGGTGG TGTTGAAGAG AAGGCACAAT2221TGTCACCATT TTGTTCAACA TGGGCGTTTT CTTTGTGCAT TGATTTGCAT TTTTAAAGGT2281ATTCCATTAA AAATATGTTT ATCTAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AB氨基酸序列(SEQ ID NO14)長度134個氨基酸1 MCEQLVCIFT YAYLKINLTK ALGHHNPSYP VARAQPQTML PSASECNAFP RVSKVPNRSG61 AAETALLVRV LPKPLKSQAS LLSLPFIHIT EQLSTHICVV LFKVFHVCLF TINNMNDCSM121 DAAERNAEGG LQLE
C.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO15)克隆號PP6455起始編碼子95 ATG終止編碼子497 TGA蛋白質分子量14783.531G CAA ATT ATG GGT GAA ATG TCC CAA CTG CCG GAA GGT GAA AGT GTT 4647 CTG TGA TGT AAA ATT TAG GTC ACA CTC TAT AAA GCT TCT CCT TAT TCT 9495 ATG TGT GAA CAG CTA GTC TGT ATC TTC ACC TAT GCA TAT TTA AAA ATC 1421 Met Cys Glu Gln Leu Val Cys Ile Phe Thr Tyr Ala Tyr Leu Lys Ile 16143 AAC CTT ACG AAG GCT CTT GGC CAC CAT AAT CCT TCC TAC CCT GTA GCA 19017 Asn Leu Thr Lys Ala Leu Gly His His Asn Pro Ser Tyr Pro Val Ala 32191 AGA GCC CAG CCT CAG ACT ATG CTT CCT TCT GCC TCC GAG TGC AAT GCC 23833 Arg Ala Gln Pro Gln Thr Met Leu Pro Ser Ala Ser Glu Cys Asn Ala 48239 TTC CCC CGA GTC TCC AAG GTA CCA AAC CGG TCA GGG GCA GCT GAG ACA 28649 Phe Pro Arg Val Ser Lys Val Pro Asn Arg Ser Gly Ala Ala Glu Thr 64287 GCT CTA CTT GTA CGA GTC CTC CCC AAG CCC TTG AAA TCA CAG GCA TCT 33465 Ala Leu Leu Val Arg Val Leu Pro Lys Pro Leu Lys Ser Gln Ala Ser 80335 CTG CTG TCC CTG CCC TTT ATC CAC ATC ACT GAA CAA CTA AGC ACA CAC 38281 Leu Leu Ser Leu Pro Phe Ile His Ile Thr Glu Gln Leu Ser Thr His 96383 ATC TGT GTA GTT TTA TTT AAA GTG TTC CAT GTG TGT TTG TTT ACA ATT 43097 Ile Cys Val Val Leu Phe Lys Val Phe His Val Cys Leu Phe Thr Ile 112431 AAC AAC ATG AAT GAC TGC AGT ATG GAT GCA GCA GAA AGG AAT GCT GAG 478113 Asn Asn Met Asn Asp Cys Ser Met Asp Ala Ala Glu Arg Asn Ala Glu 128479 GGA GGA CTC CAG TTG GAA TGA GCC ACT TTT CCA GGA CTA GGA ATG AAC 526129 Gly Gly Leu Gln Leu Glu *** 135527 TTT CCC CAG TAC CAA CAA GGC AGC CTC CAG GGC AAG AAA TGG TAA CAG 574575 AAT CCA TCC TGT TGA CAG TCA AGA TGG AAT TAC AGA GAA TTC TCA CCT 622623 CTT TTT TGA CTC TCA GGT GGA AAC CCC CTT CCC ATG GGG TGA AGC GCA 670671 GTC TGC TCC AGA GAC CCA CTG TTA GGG TCG GGG ATG TCA CAG AAA TTA 718719 ACA GGG CAG CCA ATT CCC ATC CAG AGG GGC CCA GGA TGA CCC CGA ACC 766767 CTC TAG CTC AGC CCC AAG CTC GGG CCA GGG AGT GAA GCC TTT GTC CCC 814815 AAG CAA CAG AGT GAG GGT CTG TCT CTA ACC CGG TGG GCT CCA GTG AAA 862863 GGA AAA TGG CCT GGA GGT GCC CAC AGG AGG GCG CCC TAG TTC TGA GAC 910911 AGG TCT ACG GCT CCC AGA CTG CGT CCC CAT GAG TAA CAG AGG GAC ACG 958959 CAG AGG GGC ATA CTG AGT GCC TAT AGG GGA CTC ACA GAC TGC AGA TGC10061007 ACG CTG CGG ATC CAG AAG CCG GTC AGG TAA TGA GGT GCA GAG GTG TGG10541055 GGA AGA CCT GGA TGC CTC CCT GGG TGC CAA CCA GCC TAA CCA GCC GGG11021103 GCC ACC AAA CAG AAG TGC TTC TGA CAT TAA CGC GAC ACA CAG AAG GTG11501151 TGT AGG GTG GGT AGT GGA AGT GAC CGC AGA GGC CTC TGG GGA TTG TAG11981199 TTT TGG AGC TAG AGA GGC GGG CAA GCA GTT GGC TTC GCC CAC ACG GTG12461247 TGC CTC TCA CAT CTG CAC AGC GCA CAC AAC CAA GCT TAG GAG CCG ACT12941295 GTT AAG ATG CCC CAG TGA CAC GGA CAA GTT TCT CCT CTG CAA CCC AAT13421343GAG AGC TGC TGA CCA CGA GAG CAT CGC GGG ACC GCC AAA GGA TTC TGG13901391AAA ATG TGG TCC CGG GTG GCC AGT GTG CGC TGA CCT TCA CCT GAA GGT14381439GAG CTG AGC TCA CCA TGC AAG TCT CCA CCC TGG GGT GCC CTT CCC CAA14861487GCA GAT GCC AGG TTG GGG CAG AAG CAG TTC AGG GAG AAG CGA TGC GCT15341535CCT GGG ACT GCC GGT TTG GGG GCA ACA TCG GCC CTG TGT CCC CTA GAG15821583TAG GAG GGT GTA CCA GGA TGG GGA ACC CCA AGG CCG TTT TCA GGG AGA16301631ACA AGA TTG GCT TGA GGC AAA CTC CCG GAA TGG AGA TGG GGA GAG TCT16781679GGT CGC ATT TCC CCA GGA GTT TAG GGG ATG AAG GCT GGA CTT GGG TGA17261727ACA GCA AAA GAT CCC CTG GTG ATA GTG GTG GTG AGG ATC AGA GGC TTG17741775AGC CAG AAA TTC CCG AGG TGT TTG TTT GTT TTG TTT TTT TTG AGA CAG18221823AGT CTT GAT CTG TCT CCC AGG ATG TAG TGC AAT GGC ATG CTC TTG GCT18701871CAT TGC AAC CTC CGC CTC CCA GGT TCA GGC GAT TCT CCT GCC TCA GCC19181919TCC CAA GTA GCT GAG ATT ATA GGC ACC TGC CAC TGT GCC CAC CTA AAT19661967TTT TTT TGT TTT TTT GTA TTT TTG GTA GAG ACG ATG TTT CAC CAC ATT20142015GCC CAG CCT GGT CTC GAA CTC CTG ACC TCA AGT GAT CCA CCT GCC TCG20622063GCC TCC CAA AGT GCT GGG ATT ACA GGC ATG AGC CCC CAC ACC CAG CTC21102111ATT TTT ATC TTT TAA CTT AAA GGT TTT TAT TTT TCT CTA TTT TTA CTC21582159TTA CAG GTA CGG CTT GAA GGA GAC TTC TGG AGG GTG GGG TGG TGT TGA22062207AGA GAA GGC ACA ATT GTC ACC ATT TTG TTC AAC ATG GGC GTT TTC TTT22542255GTG CAT TGA TTT GCA TTT TTA AAG GTA TTC CAT TAA AAA TAT GTT TAT23022303CTA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 23316.PP6489A核苷酸序列(SEQ ID NO16)長度2571bp1GGTGATGTGG GGGTGGCCCA TGATGTGGGA ATGGGGGCCT GGCCGGTACC GACATCTCCA61GCCAGAGCTC AGGGTTGCCT CTGCCATCAT CACCTCGGCC ACATCCCCTT TCCTTCTGAT121CCCAGACACA TTGGGCTCTG TCTTGCCTGC TGTTCTGTCT GCCTGGAAAG CTAATGTTGT181TGGTGCCAAA TTCCTGAAGA GTCCTCCCTG ATGGCCCGTC CACCACGCGA AGCTGTGGAA241ATTGCCCGCT GCTGGGAGGA ACAGTGCCGC CCGGCCGAGT CCTGCGCGTG TGTGGAAGCG301GAGGCCAAGG GTTGGTATTC GTAAGGTCTG GGAGTTTGGT TTAAGGCAGA TCTTTCAATG361TGGGTGGCTG GTCTGATTTG GACTGGGACA TGTTTACAAT GTGTAATAAG ACTTTAAGAT421CAGTGGACGC AGCAGAGGGC GTGAAGCCAG CCTGATGGTG GTTTGCTGAG GGAGCAGCTT481GCCCAGGAGA GTGGCTTGTT GTTCTTAGAA GGACTCCCTG GGTGAGCAGG TCAAACAACT541TTCAGGAGCT CTGATCAGTC AAGTTGCATG CTGTTTTGCC CTCTTGGGTG GAAATTTGCT601GCAGTAGTCC AGTTAAAGTG TACTTGTGCA TTTCTGACAC CTCACCCTTC AGGTCCAACT661TAGCCTCCTC ACCAGGCCAG CTTGTCTCCT GTAGTTCTCT TGGCACCCTG TGTGTTCCTA721CTCAGGACTT GTCACAGTGT GTCATCACAC ACACGCAAGC ACATGCTGTG GGACATTGAT781GTCTTGCCCA CTGGAAGGGT TCCGTAGGGT GGAGTCAGCC CCATTTTGCT CTGCTGGCAC841TTAGCACGGC ATGTGGCACG TAGCAAGTAG TTAGGAAATG TTTGCAGAGG AACATGAATA901AGTCTTGCAC GAGGTGCCGG GGAGCTCAGA GGAGGAAGCA GCCTCCTTTT TTTCCAGGAG961ACCAGGGGAC GCTTTACCCA GAAGGGCCCT GCTGCTGTGG AGGGTGCAGC CTCCTTGGGG1021GCTGAGTGTG GAGGGCAAGC GGAGGGTAGG GCTCAGGGGC CAGGGTGATG GGTGCGGGTG1081GGAGGTGGAT CAGACAGCAT TGTGAGGGTA AAGGGTTGGG ATTTTAAGCA AAAGGCAGCA1141AAGAGCTGTT GAAGGCTTTT TGGCAGAGGC ATGTCAAGAC CAGATTTGGA GTTTCGAGAT1201ACTCATGTAG CTATACCATG GGGGTGGGTG AAAGCGTGGG TGGGAGAAGG CACAGGGGCT1261GGAGAGGAAT GGGAGGGAAG GCGTTGTGGT CACTGCTTCC TGGCAGGGGC GGGGAGGGAG1321CCTCAACTGG GTCTGTGGGG CAGAGGAGCC AGCACCACTC CAGGGCTCGT CCCGGGTGGG1381TGTGGATGGA GATCGCCACA GCCTGCGTGG CTCCCAGGGT GAGGGTCAGG CTCACAGGGA1441GGACACCAGG CCTCTTATCG TGGCTCCATT CTCTGTGGAC TGCCCTTGGT GGGACTAAGA1501GCAGGCAGGT CTCCATGTGT CCTGGACACG GCTCCTGACC CAGCACGTGT GTCCACTTTT1561GGGCTGTGGT GAGGGTGATT GAGGGGCAGT GTGCCAATGT AGAATGACTA TATGGCATGT1621TTGTGGGCTA AAGTAAGTGA ATGCTTAAAT TGACACTAAG ATGCGGTGAG CTTGATCGTG1681GGTCGGCCGG TTTCCATTCA GCTAAAATTC GTGAAGTGGG GGCATCACTG ACTTTTTTTG1741TAAAGAGAAA ATAACCTGTA AATAGGCTTT TAAAAATAGA CACTTACTCT TGCTTTTTTT1801GTAAATCAGA TTGACCTGTC AGTGCACTCT GGGGTCCGGC CAGCTGCGAT GATCTTTAGA1861CCAGTCAGCC GCCGGCTGAG CTGACACCTT TTAGATGGAA ATGGAATAAA TGCTGCACCA1921CATTGTTCGT GTGGGTGGTG AATGCAGGTG TTTGAAACCA TTAGCTTCTT TGCATAATTA1981AAAACCTTAA TTTTTTGTGA AATCTTTAAT CATAGAAGAA ATGCTTCTTT CCAGTTTGAG2041TGTTTCTCTT AATATTACCA TTGCTTTAAG ACAATTACCT TCAGGGCTCA TTACTTTCCT2101GGACAGTTTA CAGGCCAGAG TGGTCTCCAC TCAGCCACTA GATCTTAGAG GATTCTAAGA2161AACCCTATTC GTTAAGCCAG GTAACTCATA TATTCTGAAT CTATAAACAT GTCTGAAAAT2221TGTGAAACAT ACTGTAGAGT TTATAGAAGT TCTTAAAATA CATACATTGT GCCGGGTACG2281GTGGCTCATG CCTGTAATCC CAGCACTTTG GGAAGCCAAG GTGGGCGGAT CATGAGGTTA2341GGAGTTTGAG ACCAGCCTGG CCAACATGGT GGAAACATGT CTCTAATAAA AATACAAAAA2401TTAGCCGGGC GTAGTGGTGG GTGCCTGTAA TCCCAGCTAC TCAGGAGGCG GAGGCAGGAG2461GATCGCTGGA ATCCGGGAGG CAGAGGTTGC AGTGAGCGGA GATCAAGCCA TTGCATTCCA2521GCCTGGGCGA TAGAGCGAGA CTCCATGTTA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AB氨基酸序列(SEQ ID NO17) 長度106個氨基酸1 MGVGESVGGR RHRGWRGMGG KALWSLLPGR GGEGASTGSV GQRSQHHSRA RPGWVWMEIA61 TACVAPRVRV RLTGRTPGLL SWLHSLWTAL GGTKSRQVSM CPGHGSC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO18)克隆號PP6489起始編碼子1218 ATG終止編碼子1536 TGA蛋白質分子量11280.361 GG TGA TGT GGG GGT GGC CCA TGA TGT GGG AAT GGG GGC CTG GCC GGT4748ACC GAC ATC TCC AGC CAG AGC TCA GGG TTG CCT CTG CCA TCA TCA CCT9596CGG CCA CAT CCC CTT TCC TTC TGA TCC CAG ACA CAT TGG GCT CTG TCT 143144TGC CTG CTG TTC TGT CTG CCT GGA AAG CTA ATG TTG TTG GTG CCA AAT 191192TCC TGA AGA GTC CTC CCT GAT GGC CCG TCC ACC ACG CGA AGC TGT GGA 239240AAT TGC CCG CTG CTG GGA GGA ACA GTG CCG CCC GGC CGA GTC CTG CGC 287288GTG TGT GGA AGC GGA GGC CAA GGG TTG GTA TTC GTA AGG TCT GGG AGT 335336TTG GTT TAA GGC AGA TCT TTC AAT GTG GGT GGC TGG TCT GAT TTG GAC 383384TGG GAC ATG TTT ACA ATG TGT AAT AAG ACT TTA AGA TCA GTG GAC GCA 431432GCA GAG GGC GTG AAG CCA GCC TGA TGG TGG TTT GCT GAG GGA GCA GCT 479480TGC CCA GGA GAG TGG CTT GTT GTT CTT AGA AGG ACT CCC TGG GTG AGC 527528AGG TCA AAC AAC TTT CAG GAG CTC TGA TCA GTC AAG TTG CAT GCT GTT 575576TTG CCC TCT TGG GTG GAA ATT TGC TGC AGT AGT CCA GTT AAA GTG TAC 623624TTG TGC ATT TCT GAC ACC TCA CCC TTC AGG TCC AAC TTA GCC TCC TCA 671672CCA GGC CAG CTT GTC TCC TGT AGT TCT CTT GGC ACC CTG TGT GTT CCT 719720ACT CAG GAC TTG TCA CAG TGT GTC ATC ACA CAC ACG CAA GCA CAT GCT 767768GTG GGA CAT TGA TGT CTT GCC CAC TGG AAG GGT TCC GTA GGG TGG AGT 815816CAG CCC CAT TTT GCT CTG CTG GCA CTT AGC ACG GCA TGT GGC ACG TAG 863864CAA GTA GTT AGG AAA TGT TTG CAG AGG AAC ATG AAT AAG TCT TGC ACG 911912AGG TGC CGG GGA GCT CAG AGG AGG AAG CAG CCT CCT TTT TTT CCA GGA 959960GAC CAG GGG ACG CTT TAC CCA GAA GGG CCC TGC TGC TGT GGA GGG TGC 10071008AGC CTC CTT GGG GGC TGA GTG TGG AGG GCA AGC GGA GGG TAG GGC TCA 10551056GGG GCC AGG GTG ATG GGT GCG GGT GGG AGG TGG ATC AGA CAG CAT TGT 11031104GAG GGT AAA GGG TTG GGA TTT TAA GCA AAA GGC AGC AAA GAG CTG TTG 11511152AAG GCT TTT TGG CAG AGG CAT GTC AAG ACC AGA TTT GGA GTT TCG AGA 11991200 TAC TCA TGT AGC TAT ACC ATG GGG GTG GGT GAA AGC GTG GGT GGG AGA12471 Met Gly Val Gly Glu Ser Val Gly Gly Arg 101248 AGG CAC AGG GGC TGG AGA GGA ATG GGA GGG AAG GCG TTG TGG TCA CTG129511 Arg His Arg Gly Trp Arg Gly Met Gly Gly Lys Ala Leu Trp Ser Leu 261296 CTT CCT GGC AGG GGC GGG GAG GGA GCC TCA ACT GGG TCT GTG GGG CAG134327 Leu Pro Gly Arg Gly Gly Glu Gly Ala Ser Thr Gly Ser Val Gly Gln 421344 AGG AGC CAG CAC CAC TCC AGG GCT CGT CCC GGG TGG GTG TGG ATG GAG139143 Arg Ser Gln His His Ser Arg Ala Arg Pro Gly Trp Val Trp Met Glu 581392 ATC GCC ACA GCC TGC GTG GCT CCC AGG GTG AGG GTC AGG CTC ACA GGG143959 Ile Ala Thr Ala Cys Val Ala Pro Arg Val Arg Val Arg Leu Thr Gly 741440 AGG ACA CCA GGC CTC TTA TCG TGG CTC CAT TCT CTG TGG ACT GCC CTT148775 Arg Thr Pro Gly Leu Leu Ser Trp Leu His Ser Leu Trp Thr Ala Leu 901488 GGT GGG ACT AAG AGC AGG CAG GTC TCC ATG TGT CCT GGA CAC GGC TCC153591 Gly Gly Thr Lys Ser Arg Gln Val Ser Met Cys Pro Gly His Gly Ser 1061536 TGA CCC AGC ACG TGT GTC CAC TTT TGG GCT GTG GTG AGG GTG ATT GAG1583107 *** 1071584 GGG CAG TGT GCC AAT GTA GAA TGA CTA TAT GGC ATG TTT GTG GGC TAA16311632 AGT AAG TGA ATG CTT AAA TTG ACA CTA AGA TGC GGT GAG CTT GAT CGT16791680 GGG TCG GCC GGT TTC CAT TCA GCT AAA ATT CGT GAA GTG GGG GCA TCA17271728 CTG ACT TTT TTT GTA AAG AGA AAA TAA CCT GTA AAT AGG CTT TTA AAA17751776 ATA GAC ACT TAC TCT TGC TTT TTT TGT AAA TCA GAT TGA CCT GTC AGT18231824 GCA CTC TGG GGT CCG GCC AGC TGC GAT GAT CTT TAG ACC AGT CAG CCG18711872 CCG GCT GAG CTG ACA CCT TTT AGA TGG AAA TGG AAT AAA TGC TGC ACC19191920 ACA TTG TTC GTG TGG GTG GTG AAT GCA GGT GTT TGA AAC CAT TAG CTT19671968 CTT TGC ATA ATT AAA AAC CTT AAT TTT TTG TGA AAT CTT TAA TCA TAG20152016 AAG AAA TGC TTC TTT CCA GTT TGA GTG TTT CTC TTA ATA TTA CCA TTG20632064 CTT TAA GAC AAT TAC CTT CAG GGC TCA TTA CTT TCC TGG ACA GTT TAC21112112 AGG CCA GAG TGG TCT CCA CTC AGC CAC TAG ATC TTA GAG GAT TCT AAG21592160 AAA CCC TAT TCG TTA AGC CAG GTA ACT CAT ATA TTC TGA ATC TAT AAA22072208 CAT GTC TGA AAA TTG TGA AAC ATA CTG TAG AGT TTA TAG AAG TTC TTA22552256 AAA TAC ATA CAT TGT GCC GGG TAC GGT GGC TCA TGC CTG TAA TCC CAG23032304 CAC TTT GGG AAG CCA AGG TGG GCG GAT CAT GAG GTT AGG AGT TTG AGA23512352 CCA GCC TGG CCA ACA TGG TGG AAA CAT GTC TCT AAT AAA AAT ACA AAA23992400 ATT AGC CGG GCG TAG TGG TGG GTG CCT GTA ATC CCA GCT ACT CAG GAG24472448 GCG GAG GCA GGA GGA TCG CTG GAA TCC GGG AGG CAG AGG TTG CAG TGA24952496 GCG GAG ATC AAG CCA TTG CAT TCC AGC CTG GGC GAT AGA GCG AGA CTC25432544 CAT GTT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 25717.PP6614A核苷酸序列(SEQ ID NO19) 長度3096bp1 GATTCGCTAC CGCCTGGGCA CCATCCGCCC ATCTTCCTCG GTCATGAACA TGCATGAAAT61 TTATGTAAGT CCATCCTTCC CCACAATGCT GCCATCTCCC CATGGCTCAG AACCTCAGGG121 ATGCTGGCCC TGTGCCCTGC TCCTCCAAGG GCCTGGACCA TCCCCTACTA CAAGGCTGTG181TGTCCCTGGA CAAGTTACTC CCCTTCTCTG GGCCTCTGTT CCCTGCTTCC ACAGGATGTG241CTGTGCTGGA AGAACTGATG CTCAGATTGA ATTTCGTGGT CTTGGCATCA GCTCCCCCCT301GATCTCTCCA GCCTGGGAAA AATGCTGTTG GTCTCAGTAC AGCTGGGTTA GGGCCCAAGG361GGACAGGGGG TCACCTTGGT ATTTTGGGAA GGGAAGGACA CACACTCCTC CAGTTCTGGC421CAGAGGGCAG CAGTTCTCGG AAATAAATGC CGGTTCAGCG GAACCCCAAG GGAGGAGAGG481GCTTCTCCCT TCCCACCAGT GGGACCCTCT GGGAGAGGAA TGAAAACCAG GCCCAAAGTG541AAAGGGTGAG GAAGGGGAGC TTCAGCAGGC CTGGACCGGG ACATGTGCCG GAGCATTTGT601CCATCAGTGG CAGGCAGCGG GGAGGCAGGG GCTGGCAGGA GTGGCCCTCC CTGCGGAGAC661TTCGGCCTTG GGTGACCAGA CCCTGGCCCT GCCCTTATTC CCCTGGGCCT CTGGCTATTT721TCTGCCTCTT GCTGTTTGTG TTGGCAGACT GCCTGGTCAC GGGACCCTAC TGCCTCTTCC781CTCCCCTGAG GGAAAGCTAA GGCCTGAAGA AAGCTAAGGC CGATCAGAAG GTGCAGAGGA841AAGAGGCAGG GGTTGAGAAT GGAAAGCTGA GGGACCTGGC CTGGCCACTT CTCTGTGCCT901GGCCTCAGCT GCCTCATCTG GGAAGCAGGA CTAGTCACCA CCGCCACCCC GCCCCGCCCC961ACCACCTGAT ACCTGGGAGG CACTAAATGG TGCTTGGTTC TTCAACACAA GTCAAAATTG1021GAGGCAGCTG GAATCCTGCA GCAGCAGGAG GGCTCAAGAT TAAACTGCAG AAGGCCCTGG1081ACTTGGTGGC CCTCCAGTGC CAATGGGCAC CTGAGGGGCA GGCCAGGGCA GAGCAGGAGG1141CAGACAGGGC AACCTTTATC TTGCAGACAG TGCTGAACCC AGGGGAGGTG CTTCCCACAG1201CCTTCGAGGC CTCTGAGAAG TGGCCCAACC TGATTCATGA GCCTCTTGAC CAAGGCAACT1261GTGCAGGCTC CTGGGCCTTC TCCACAGCAG CTGTGGCATC CGATCGTGTC TCAATCCATT1321CTCTGGGACA CATGACGCCT GTCCTGTCGC CCCAGAACCT GCTGTCTTGT GACACCCACC1381AGCAGCAGGG CTGCCGCGGT GGGCGTCTCG ATGGTGCCTG GTGGTTCCTG CGTCGCCGAG1441GGTATGCAGC AACAGGGGAT GTGGGCAGAG AAGAGGGCAA GGAGCTCCGT GGGCATGGCC1501TGGGCCATGA TGCACTGAGT CTTTCTGCCT TTGCTCCCTC TTGCTGCCTT TGCAGGGTGG1561TGTCTGACCA CTGCTACCCC TTCTCGGGCC GTGAACGAGA CGAGGCTGGC CCTGCGCCCC1621CCTGTATGAT GCACAGCCGA GCCATGGGTC GGGGCAAGCG CCAGGCCACT GCCCACTGCC1681CCAACAGCTA TGTTTATAAC AATGACATCT ACCAGGTCAC TCCTGTCTAC CGCCTCGGCT1741CCAACGACAA GGAGATCATG AAGGAGCTGA TGGAGAATGG CCCTGTCCAA GGTAAACCCC1801CTTATCCAGC ACCCTGGTTC CAGAAGCTTG TGCCTGCTTG AGAGTGGGCA CAGTAGCACA1861AGTGGCCTGC ACAGCATTCA GCAGCATGTC CAGTAGGGCC AGGAGTAGGG GTCCCCCCCT1921CCCACAGGCA GCACCTGGAG GGAGCACTTA GAGCTTTGGT ATGGAGGGAC CCTGGTGCCT1981GGGCACATCT CAATAGACTC AGGCTCCAGT GCCTGTGCCA ACGGGCTGAG TGGACCCTAC2041CTTGACATCT GCCCACAGCC CTCATGGAGG TGCATGAGGA CTTCTTCCTA TACAAGGGAG2101GCATCTACAG CCACACGCCA GTGAGCCTTG GGAGGCCAGA GAGATACCGC CGGCATGGGA2161CCCACTCAGT CAAGATCACA GGATGGGGAG AGGAGACGCT GCCAGATGGA AGGACGCTCA2221AATACTGGAC TGCGGCCAAC TCCTGGGGCC CAGCCTGGGG CGAGAGGGGC CACTTCCGCA2281TCGTGCGCGG CGTCAATGAG TGCGACATCG AGAGCTTCGT GCTGGGCGTC TGGGGCCGCG2341TGGGCATGGA GGACATGGGT CATCACTGAG GCTGCGGGCA CCACGCGGGG TCCGGCCTGG2401GATCCAGGCT AAGGGCCGGC GGAAGAGGCC CCAATGGGGC GGTGACCCCA GCCTCGCCCG2461ACAGAGCCCG GGGCGCAGGC GGGCGCCAGG GCGCTAATCC CGGCGCGGGT TCCGCTGACG2521CAGCGCCCCG CCTGGGAGCC GCGGGCAGGC GAGACTGGCG GAGCCCCCAG ACCTCCCAGT2581GGGGACGGGG CAGGGCCTGG CCTGGGAAGA GCACAGCTGC AGATCCCAGG CCCTCTGGCGC2641CCCCACTCAA GACTACCAAA GCCAGGACAC CTCAAGTCTC CAGCCCCACT ACCCCACCCC2701ACTCCTGTAT TCTTTTTTTT TTTTTTTTAG ACAGGGTCTT GCTCCGTTGC CCAGGTTGGA2761GTGCAGTGGC CCATCAGGGC TCACTGTAAC CTCCGACTCC TGGGTTCAAG TGACCCTCCC2821ACCTCAGCCT CTCAAGTAGC TGGGACTACA GGTGCACCAC CACACCTGGC TAATTTTTGT2881ATTTTTTGTA AAGAGGGGGG TCTCACTGTG TTGCCCAGGC TGGTCTCGAA CTCCTGGGCT2941CAAGCGGTCC ACCTGCCTCC GCCTCCCAAA GTGCTGGGAT TGCAGGCATG AGCCACTGCA3001CCCAGCCCTG TATTCTTATT CTTCAGATAT TTATTTTTCT TTTCACTGTT TTAAAATAAA3061ACCAAAGTAT TGATAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAB氨基酸序列(SEQ ID NO20) 長度284個氨基酸1 MVLGSSTQVK IGGSWNPAAA GGLKIKLQKA LDLVALQCQW APEGQARAEQ EADRATFILQ61 TVLNPGEVLP TAFEASEKWP NLIHEPLDQG NCAGSWAFST AAVASDRVSI HSLGHMTPVL121 SPQNLLSCDT HQQQGCRGGR LDGAWWFLRR RGYAATGDVG REEGKELRGH GLGHDALSLS181 AFAPSCCLCR VVSDHCYPFS GRERDEAGPA PPCMMHSRAM GRGKRQATAH CPNSYVYNND241 IYQVTPVYRL GSNDKEIMKE LMENGPVQGK PPYPAPWFQK LVPAC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO21)克隆號PP6614起編碼子987 ATG終止編碼子1839 TGA蛋白質分子量30892.431 GA TTC GCT ACC GCC TGG GCA CCA TCC GCC CAT CTT CCT CGG TCA TGA 4748 ACA TGC ATG AAA TTT ATG TAA GTC CAT CCT TCC CCA CAA TGC TGC CAT 9596 CTC CCC ATG GCT CAG AAC CTC AGG GAT GCT GGC CCT GTG CCC TGC TCC 143144 TCC AAG GGC CTG GAC CAT CCC CTA CTA CAA GGC TGT GTG TCC CTG GAC 191192 AAG TTA CTC CCC TTC TCT GGG CCT CTG TTC CCT GCT TCC ACA GGA TGT 239240 GCT GTG CTG GAA GAA CTG ATG CTC AGA TTG AAT TTC GTG GTC TTG GCA 287288 TCA GCT CCC CCC TGA TCT CTC CAG CCT GGG AAA AAT GCT GTT GGT CTC 335336 AGT ACA GCT GGG TTA GGG CCC AAG GGG ACA GGG GGT CAC CTT GGT ATT 383384 TTG GGA AGG GAA GGA CAC ACA CTC CTC CAG TTC TGG CCA GAG GGC AGC 431432 AGT TCT CGG AAA TAA ATG CCG GTT CAG CGG AAC CCC AAG GGA GGA GAG 479480 GGC TTC TCC CTT CCC ACC AGT GGG ACC CTC TGG GAG AGG AAT GAA AAC 527528 CAG GCC CAA AGT GAA AGG GTG AGG AAG GGG AGC TTC AGC AGG CCT GGA 575576 CCG GGA CAT GTG CCG GAG CAT TTG TCC ATC AGT GGC AGG CAG CGG GGA 623624 GGC AGG GGC TGG CAG GAG TGG CCC TCC CTG CGG AGA CTT CGG CCT TGG 671672 GTG ACC AGA CCC TGG CCC TGC CCT TAT TCC CCT GGG CCT CTG GCT ATT 719720 TTC TGC CTC TTG CTG TTT GTG TTG GCA GAC TGC CTG GTC ACG GGA CCC 767768 TAC TGC CTC TTC CCT CCC CTG AGG GAA AGC TAA GGC CTG AAG AAA GCT 815816 AAG GCC GAT CAG AAG GTG CAG AGG AAA GAG GCA GGG GTT GAG AAT GGA 863864 AAG CTG AGG GAC CTG GCC TGG CCA CTT CTC TGT GCC TGG CCT CAG CTG 911912 CCT CAT CTG GGA AGC AGG ACT AGT CAC CAC CGC CAC CCC GCC CCG CCC 959960 CAC CAC CTG ATA CCT GGG AGG CAC TAA ATG GTG CTT GGT TCT TCA ACA10071 Met Val Leu Gly Ser Ser Thr 71008 CAA GTC AAA ATT GGA GGC AGC TGG AAT CCT GCA GCA GCA GGA GGG CTC10558 Gln Val Lys Ile Gly Gly Ser Trp Asn Pro Ala Ala Ala Gly Gly Leu 231056 AAG ATT AAA CTG CAG AAG GCC CTG GAC TTG GTG GCC CTC CAG TGC CAA110324 Lys Ile Lys Leu Gln Lys Ala Leu Asp Leu Val Ala Leu Gln Cys Gln 391104 TGG GCA CCT GAG GGG CAG GCC AGG GCA GAG CAG GAG GCA GAC AGG GCA115140 Trp Ala Pro Glu Gly Gln Ala Arg Ala Glu Gln Glu Ala Asp Arg Ala 551152 ACC TTT ATC TTG CAG ACA GTG CTG AAC CCA GGG GAG GTG CTT CCC ACA119956 Thr Phe Ile Leu Gln Thr Val Leu Asn Pro Gly Glu Val Leu Pro Thr 711200 GCC TTC GAG GCC TCT GAG AAG TGG CCC AAC CTG ATT CAT GAG CCT CTT124772 Ala Phe Glu Ala Ser Glu Lys Trp Pro Asn Leu Ile His Glu Pro Leu 871248 GAC CAA GGC AAC TGT GCA GGC TCC TGG GCC TTC TCC ACA GCA GCT GTG129588 Asp Gln Gly Asn Cys Ala Gly Ser Trp Ala Phe Ser Thr Ala Ala Val 1031296 GCA TCC GAT CGT GTC TCA ATC CAT TCT CTG GGA CAC ATG ACG CCT GTC1343104 Ala Ser Asp Arg Val Ser Ile His Ser Leu Gly His Met Thr Pro Val 1191344 CTG TCG CCC CAG AAC CTG CTG TCT TGT GAC ACC CAC CAG CAG CAG GGC1391120 Leu Ser Pro Gln Asn Leu Leu Ser Cys Asp Thr His Gln Gln Gln Gly 1351392 TGC CGC GGT GGG CGT CTC GAT GGT GCC TGG TGG TTC CTG CGT CGC CGA1439136 Cys Arg Gly Gly Arg Leu Asp Gly Ala Trp Trp Phe Leu Arg Arg Arg 1511440 GGG TAT GCA GCA ACA GGG GAT GTG GGC AGA GAA GAG GGC AAG GAG CTC1487152 Gly Tyr Ala Ala Thr Gly Asp Val Gly Arg Glu Glu Gly Lys Glu Leu 1671488 CGT GGG CAT GGC CTG GGC CAT GAT GCA CTG AGT CTT TCT GCC TTT GCT1535168 Arg Gly His Gly Leu Gly His Asp Ala Leu Ser Leu Ser Ala Phe Ala 1831536 CCC TCT TGC TGC CTT TGC AGG GTG GTG TCT GAC CAC TGC TAC CCC TTC1583184 Pro Ser Cys Cys Leu Cys Arg Val Val Ser Asp His Cys Tyr Pro Phe 1991584 TCG GGC CGT GAA CGA GAC GAG GCT GGC CCT GCG CCC CCC TGT ATG ATG1631200 Ser Gly Arg Glu Arg Asp Glu Ala Gly Pro Ala Pro Pro Cys Met Met 2151632 CAC AGC CGA GCC ATG GGT CGG GGC AAG CGC CAG GCC ACT GCC CAC TGC1679216 His Ser Arg Ala Met Gly Arg Gly Lys Arg Gln Ala Thr Ala His Cys 2311680 CCC AAC AGC TAT GTT TAT AAC AAT GAC ATC TAC CAG GTC ACT CCT GTC1727232 Pro Asn Ser Tyr Val Tyr Asn Asn Asp Ile Tyr Gln Val Thr Pro Val 2471728 TAC CGC CTC GGC TCC AAC GAC AAG GAG ATC ATG AAG GAG CTG ATG GAG1775248 Tyr Arg Leu Gly Ser Asn Asp Lys Glu Ile Met Lys Glu Leu Met Glu 2631776 AAT GGC CCT GTC CAA GGT AAA CCC CCT TAT CCA GCA CCC TGG TTC CAG1823264 Asn Gly Pro Val Gln Gly Lys Pro Pro Tyr Pro Ala Pro Trp Phe Gln 2791824 AAG CTT GTG CCT GCT TGA GAG TGG GCA CAG TAG CAC AAG TGG CCT GCA1871280 Lys Leu Val Pro Ala *** 2851872 CAG CAT TCA GCA GCA TGT CCA GTA GGG CCA GGA GTA GGG GTC CCC CCC19191920 TCC CAC AGG CAG CAC CTG GAG GGA GCA CTT AGA GCT TTG GTA TGG AGG19671968 GAC CCT GGT GCC TGG GCA CAT CTC AAT AGA CTC AGG CTC CAG TGC CTG20152016 TGC CAA CGG GCT GAG TGG ACC CTA CCT TGA CAT CTG CCC ACA GCC CTC20632064 ATG GAG GTG CAT GAG GAC TTC TTC CTA TAC AAG GGA GGC ATC TAC AGC21112112 CAC ACG CCA GTG AGC CTT GGG AGG CCA GAG AGA TAC CGC CGG CAT GGG21592160 ACC CAC TCA GTC AAG ATC ACA GGA TGG GGA GAG GAG ACG CTG CCA GAT22072208 GGA AGG ACG CTC AAA TAC TGG ACT GCG GCC AAC TCC TGG GGC CCA GCC22552256 TGG GGC GAG AGG GGC CAC TTC CGC ATC GTG CGC GGC GTC AAT GAG TGC23032304 GAC ATC GAG AGC TTC GTG CTG GGC GTC TGG GGC CGC GTG GGC ATG GAG23512352 GAC ATG GGT CAT CAC TGA GGC TGC GGG CAC CAC GCG GGG TCC GGC CTG23992400 GGA TCC AGG CTA AGG GCC GGC GGA AGA GGC CCC AAT GGG GCG GTG ACC24472448 CCA GCC TCG CCC GAC AGA GCC CGG GGC GCA GGC GGG CGC CAG GGC GCT24952496 AAT CCC GCC GCG GGT TCC GCT GAC GCA GCG CCC CGC CTG GGA GCC GCG25432544 GGC AGG CGA GAC TGG CGG AGC CCC CAG ACC TCC CAG TGG GGA CGG GGC25912592 AGG GCC TGG CCT GGG AAG AGC ACA GCT GCA GAT CCC AGG CCT CTG GCG26392640 CCC CCA CTC AAG ACT ACC AAA GCC AGG ACA CCT CAA GTC TCC AGC CCC26872688 ACT ACC CCA CCC CAC TCC TGT ATT CTT TTT TTT TTT TTT TTA GAC AGG27352736 GTC TTG CTC CGT TGC CCA GGT TGG AGT GCA GTG GCC CAT CAG GGC TCA27832784 CTG TAA CCT CCG ACT CCT GGG TTC AAG TGA CCC TCC CAC CTC AGC CTC28312832 TCA AGT AGC TGG GAC TAC AGG TGC ACC ACC ACA CCT GGC TAA TTT TTG28792880 TAT TTT TTG TAA AGA GGG GGG TCT CAC TGT GTT GCC CAG GCT GGT CTC29272928 GAA CTC CTG GGC TCA AGC GGT CCA CCT GCC TCC GCC TCC CAA AGT GCT29752976 GGG ATT GCA GGC ATG AGC CAC TGC ACC CAG CCC TGT ATT CTT ATT CTT30233024 CAG ATA TTT ATT TTT CTT TTC ACT GTT TTA AAA TAA AAC CAA AGT ATT30713072 GAT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 30968.PP6781A核苷酸序列(SEQ ID NO22) 長度2028bp1GTTGTGCCGC TGGGGAGCCA AACGATTGGG AGTTGCCTCC ACAGAGGCCC AGAGAGGCGT61CAGTTTCAAA CTGGAAGAAA AAACCGCCCA CAGCAGCCTG GCACTCTTCA GAGATGATAC121GGGTGTCAAA TATGGCTTGG TGGGATTGGA GCCCACCAAG GTGGCCTTGA ATGTGGAGCG181CTTCCGGGAG TGGGCAGTGG TGCTGGCAGA CACAGCGGTC ACCAGTGGCA GACACTACTG241GGAAGTGACA GTGAAGCGCT CCCAGCAGTT TCCGATAGGA GTGGCAGATG TGGACATGTC301CCGGGATAGC TGCATTGGTG TTGATGATCA GTTCCTGGGT GTTCACCTAT GCCCAGCGCA361AGTGGTACAC CATGTTGGCC AACGAGAAAG CCCCAGTTGA GGGTATTGGG CAACCAGAGA421AGGTGGGGCT GTTGCTTGGA ATATGAAGGC CCATAAGCTG AGCCTGGTGG ATCGTGAAGC481CAGGTCTCTG TGAGTTCACA CGCTACAGAC AGATTTCCGG GGTCCAGTGG TGCCTGGCCT541TTGCTCTCTG GGATGGGGAG CTGCTGACCC ATTCAGGGCT TGAGGTGCCC GAGGGCCTCT601AGTATGTCCA TTACTGGAGT CCCTAATCAC GCCTTTGGCC AGCCTCCTTT TGAAAGTGTC661CGAAGCCTTT TTACTTTGCC TCAAGCAACC TCTAGCTCCC ACAATTCAGT GTTGGGTCCT721CTGTGCAATA TCATGATCAT CTTCCTCATC CCCTACCTTG TGAAAGCTAG GCATACAGCC781AAACCCTCCT TTTCCCCACC CACCAACACT ACTGCCAATT TCCTAGGCTA CCATGGGTGT841ATCTTCCTTG ACCTGCTTCC TTCAGTCCCT CTGCCTCCCT TTGCCCAGGC CTTTCTCAGA901CTGTATTCCA TCCTGGGGTC TTATCATTCA GCTTTGTTTG AATTTATTTA ATCACCATGA961TACCTCTCCC TCCCTTTGTC CACATGTAAC TTGTTCTTGG GGCTCTACCA GATGGCTGAA1021GAGTAAATCC TTTCTACCTC TGGCTGAAGG AGTGGTGCAG TCAATGACTT GGCCCTTTTT1081CTACAGCACA TTTAGAGTTT GGGCTCTGGC TCCCTCAGTA AGTGCTTTAT TAACTCAGTG1141TGTCAAAATG AAAACAGAGC CCTCCTTCCC CAGTAGCTCA GTGCCACAGA CCTTCAGCCC1201CACACAGCTG TAGCTATCCT TACCCTGAGT CCATCTACCT TAAATCTGTA CCTCTGACAC1261CCAGCCAGTC TGTCATAATC ATTATCCCAG TTATAACCTT GACCAAAGGG GAAGAGAGAC1321ACTTGGGGGA TATCTAGGGG ATGAGTGCTA GAAACTATTT ATTTATTTTT GAGACAGAGT1381CTCACTCTGT CACCCAGGCT GGAGTGCAGT GGCATGATCT TGGCTCACTG CAAACTCTGC1441CTTTTGGGTT CAAGCGACTC TCGTGCCTCA GCCTCCTGAG TAGCTAGGAT TACAGGTGTG1501TGCCACCATG CCCGTCTCAT TTTTATATTT TTAGTAGAGA TGGGGTTTTG CCATATTGGC1561CAGGCTGGTC TCGAACTCCT GGCCTCATGT GATCAGCCCA CCTTGGCCTC CCAAAGTGCT1621GGGATTTCAG GCGTGAGCCA CCACACCCGG CCAAAACTGT TTATTCTTGA GAAGTTCCAT1681CTTCATTTCT GCCACAGTTG GAACTTCCCG AGGAAGGAAG GAGGCCTGAG GTTTTGCACA1741ATCTGTTTCA GAGCCTGTTT AGACTCAAAC CTATGCTTCC CTTGGCAGCA GAATACACTT1801AACCTAAAGC AGTATTTGGA GTTGAGAAAA ACCTGGTGGG GTAAGTGAAT ATGTACTGTT1861TGGTAGGGTA GGTAGAGAAG CTGTGCTTTG ACCCTGTGAT TCCATCTTTT TCTACCTTCT1921ATGATGGTGA TGAAGCTAGA TACCCCTAGG GAAGAAAGAA GGACTGGGTT TAGCAAAAAT1981GATTTGGTAA TTAAAGTTTA TTTGAACACA AAAAAAAAAA AAAAAAAAB氨基酸序列(SEQ ID NO23) 長度126個氨基酸1 MGVSSLTCFL QSLCLPLPRP FSDCIPSWGL IIQLCLNLFN HHDTSPSLCP HVTCSWGSTR61 WLKSKSFLPL AEGVVQSMTW PFFYSTFRVW ALAPSVSALL TQCVKMKTEP SFPSSSVPQT121 FSPTQLC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO24)克隆號PP6781起始編碼子833 ATG終止編碼子1211 TAG蛋白質分子量14013.621G TTG TGC CGC TGG GGA GCC AAA CGA TTG GGA GTT GCC TCC ACA GAG 4647 GCC CAG AGA GGC GTC AGT TTC AAA CTG GAA GAA AAA ACC GCC CAC AGC 9495 AGC CTG GCA CTC TTC AGA GAT GAT ACG GGT GTC AAA TAT GGC TTG GTG 142143 GGA TTG GAG CCC ACC AAG GTG GCC TTG AAT GTG GAG CGC TTC CGG GAG 190191 TGG GCA GTG GTG CTG GCA GAC ACA GCG GTC ACC AGT GGC AGA CAC TAC 238239 TGG GAA GTG ACA GTG AAG CGC TCC CAG CAG TTT CCG ATA GGA GTG GCA 286287 GAT GTG GAC ATG TCC CGG GAT AGC TGC ATT GGT GTT GAT GAT CAG TTC 334335 CTG GGT GTT CAC CTA TGC CCA GCG CAA GTG GTA CAC CAT GTT GGC CAA 382383 CGA GAA AGC CCC AGT TGA GGG TAT TGG GCA ACC AGA GAA GGT GGG GCT 430431 GTT GCT TGG AAT ATG AAG GCC CAT AAG CTG AGC CTG GTG GAT CGT GAA 478479 GCC AGG TCT CTG TGA GTT CAC ACG CTA CAG ACA GAT TTC CGG GGT CCA 526527 GTG GTG CCT GGC CTT TGC TCT CTG GGA TGG GGA GCT GCT GAC CCA TTC 574575 AGG GCT TGA GGT GCC CGA GGG CCT CTA GTA TGT CCA TTA CTG GAG TCC 622623 CTA ATC ACG CCT TTG GCC AGC CTC CTT TTG AAA GTG TCC GAA GCC TTT 670671 TTA CTT TGC CTC AAG CAA CCT CTA GCT CCC ACA ATT CAG TGT TGG GTC 718719 CTC TGT GCA ATA TCA TGA TCA TCT TCC TCA TCC CCT ACC TTG TGA AAG 766767 CTA GGC ATA CAG CCA AAC CCT CCT TTT CCC CAC CCA CCA ACA CTA CTG 814815 CCA ATT TCC TAG GCT ACC ATG GGT GTA TCT TCC TTG ACC TGC TTC CTT 8621 Met Gly Val Ser Ser Leu Thr Cys Phe Leu 10863 CAG TCC CTC TGC CTC CCT TTG CCC AGG CCT TTC TCA GAC TGT ATT CCA 91011 Gln Ser Leu Cys Leu Pro Leu Pro Arg Pro Phe Ser Asp Cys Ile Pro 26911 TCC TGG GGT CTT ATC ATT CAG CTT TGT TTG AAT TTA TTT AAT CAC CAT 95827 Ser Trp Gly Leu Ile Ile Gln Leu Cys Leu Asn Leu Phe Asn His His 42959 GAT ACC TCT CCC TCC CTT TGT CCA CAT GTA ACT TGT TCT TGG GGC TCT100643 Asp Thr Ser Pro Ser Leu Cys Pro His Val Thr Cys Ser Trp Gly Ser 581007 ACC AGA TGG CTG AAG AGT AAA TCC TTT CTA CCT CTG GCT GAA GGA GTG105459 Thr Arg Trp Leu Lys Ser Lys Ser Phe Leu Pro Leu Ala Glu Gly Val 741055 GTG CAG TCA ATG ACT TGG CCC TTT TTC TAC AGC ACA TTT AGA GTT TGG110275 Val Gln Ser Met Thr Trp Pro Phe Phe Tyr Ser Thr Phe Arg Val Trp 901103 GCT CTG GCT CCC TCA GTA AGT GCT TTA TTA ACT CAG TGT GTC AAA ATG115091 Ala Leu Ala Pro Ser Val Ser Ala Leu Leu Thr Gln Cys Val Lys Met 1061151 AAA ACA GAG CCC TCC TTC CCC AGT AGC TCA GTG CCA CAG ACC TTC AGC1198107 Lys Thr Glu Pro Ser Phe Pro Ser Ser Ser Val Pro Gln Thr Phe Ser 1221199 CCC ACA CAG CTG TAG CTA TCC TTA CCC TGA GTC CAT CTA CCT TAA ATC1246123 Pro Thr Gln Leu *** 1271247TGT ACC TCT GAC ACC CAG CCA GTC TGT CAT AAT CAT TAT CCC AGT TAT12941295AAC CTT GAC CAA AGG GGA AGA GAG ACA CTT GGG GGA TAT CTA GGG GAT13421343GAG TGC TAG AAA CTA TTT ATT TAT TTT TGA GAC AGA GTC TCA CTC TGT13901391CAC CCA GGC TGG AGT GCA GTG GCA TGA TCT TGG CTC ACT GCA AAC TCT14381439GCC TTT TGG GTT CAA GCG ACT CTC GTG CCT CAG CCT CCT GAG TAG CTA14861487GGA TTA CAG GTG TGT GCC ACC ATG CCC GTC TCA TTT TTA TAT TTT TAG15341535TAG AGA TGG GGT TTT GCC ATA TTG GCC AGG CTG GTC TCG AAC TCC TGG15821583CCT CAT GTG ATC AGC CCA CCT TGG CCT CCC AAA GTG CTG GGA TTT CAG16301631GCG TGA GCC ACC ACA CCC GGC CAA AAC TGT TTA TTC TTG AGA AGT TCC16781679ATC TTC ATT TCT GCC ACA GTT GGA ACT TCC CGA GGA AGG AAG GAG GCC17261727TGA GGT TTT GCA CAA TCT GTT TCA GAG CCT GTT TAG ACT CAA ACC TAT17741775GCT TCC CTT GGC AGC AGA ATA CAC TTA ACC TAA AGC AGT ATT TGG AGT18221823TGA GAA AAA CCT GGT GGG GTA AGT GAA TAT GTA CTG TTT GGT AGG GTA18701871GGT AGA GAA GCT GTG CTT TGA CCC TGT GAT TCC ATC TTT TTC TAC CTT19181919CTA TGA TGG TGA TGA AGC TAG ATA CCC CTA GGG AAG AAA GAA GGA CTG19661967GGT TTA GCA AAA ATG ATT TGG TAA TTA AAG TTT ATT TGA ACA CAA AAA20142015AAA AAA AAA AAA AA20289.PP6832A核苷酸序列(SEQ ID NO25) 長度1692bp1GGGCCGGTCT TGCAGAGTAG CTGCGGTGAG TGGGCGTGTG CGCCGAGCGG TCTGGCCCAA61GGGCTGGGGG CCGGCCGAGG GTCTTCGGGA GCAGGCCGCA GGGCGCGGAG AGATCCTGGG121ATCGCCGTCC GCCGCTGCTA CCCGGCATGT CGGCGGAGGC CTCGGGCCCG GCTGCGGCCG181CGGCCCCGTC CCTGGAAGCC CCCAAGCCCT CGGGTCTCGA GCCTGGCCCC GCCGCCTACG241GTCTCAAGCC GCTGACCCCG AACAGCAAAT ACGTGAAGCT GAACGTGGGC GGCTCGTTGC301ACTACACCAC GCTGCGCACC CTCACGGGAC AGGACACCAT GCTCAAAGCC ATGTTCAGCG361GCCGCGTGGA GGTGCTGACC GATGCCGGAG GTTGGGTGCT GATTGACCGG AGCGGCCGTC421ACTTTGGTAC AATCCTCAAT TACCTGCGGG ATGGGTCTGT GCCACTGCCG GAGAGTACGA481GAGAACTGGG GGAGCTGCTG GGCGAAGCAC GCTACTACCT GGTGCAGGGC CTGATTGAGG541ACTGCCAGCT GGCGCTGCAG CAAAAAAGGG AGACGCTGTC CCCGCTGTGC CTCATCCCCA601TGGTGACATC TCCCCGGGAG GAGCAGCAGC TCCTGGCCAG CACCTCCAAG CCCGTGGTGA661AGCTCCTGCA CAACCGCAGT AACAACAAGT ACTCCTACAC CAGCACTTCA GATGACAACC721TACTTAAGAA CATCGAGCTG TTCGACAAGC TGGCCCTGCG CTTCCACGGG CGGCTACTCT781TCCTCAAGGA TGTCCTGGGG GACGAGATCT GCTGCTGGTC TTTCTACGGG CAGGGCCGCA841AAATCGCCGA GGTGTGCTGC ACCTCCATTG TCTATGCTAC GGAGAAGAAG CAGACCAAGG901TGGAATTTCC AGAGGCCCGG ATCTTCGAGG AGACCCTGAA CATCCTCATC TACGAGACTC961CCCGGGGCCC AGACCCAGCC CTCCTGGAGG CCACAGGGGG AGCAGCTGGA GCTGGTGGGG1021CTGGCCGCGG GGAGGATGAA GAGAACCGAG AGCACCGTGT CCGCAGGATC CATGTCCGGC1081GCCATATCAC CCACGACGAG CGTCCTCATG GCCAACAAAT TGTCTTCAAG GACTGACCTC1141TGACCCTCCC CCTGCCTTCC TCTTGCCTTG GGACCCAGTC CCTCTCTCTT TCCCTCCCCT1201TCCCAGACTT TTGCCCCGGC TCTGCTGGCC AAGTCGTGGG TCCTCCTCTG TCCCTTCATT1261GCATGGCACA GCTCACTTTG GCCCTTCTCC ACCCATCCCA ACCCCATTGC TAACAACATG1321GTACATTCCG GCCCCACCAC TCAGAGCCTT CCGAAGCCAA CACTTGTCCC CACCCTGGCC1381CTGCGTCCTT CCCTCTCCAG CTGGTTAAGA GGGATTTAGA ATTCCCTTTC TCTTTTTTTA1441GTGCATCGTC CATGCCAAAG TGTGCGGCCC TTCCTGACAT CACCACAGTC TGAGCAGCCT1501CCCGCGTCCT GCAGGGTAGT CCGCCCCCTC CTCCCCACCA TCCTCCCTAC CTCCTTAACT1561TTGTACTAGA CTGGCCTGGG CCTGCCCAGC TCAGCGTTAT CAGTCTGTTT CATATTATTT1621ATTATTTTAA TTTTCTATTA AATTATTGAA ATAAAGTTAA GTTGAGAAAC TGAAAAAAAA1681AAAAAAAAAA AA
B氨基酸序列(SEQ ID NO26) 長度329個氨基酸1 MSAEASGPAA AAAPSLEAPK PSGLEPGPAA YGLKPLTPNS KYVKLNVGGS LHYTTLRTLT61 GQDTMLKAMF SGRVEVLTDA GGWVLIDRSG RHFGTILNYL RDGSVPLPES TRELGELLGE121 ARYYLVQGLI EDCQLALQQK RETLSPLCLI PMVTSPREEQ QLLASTSKPV VKLLHNRSNN181 KYSYTSTSDD NLLKNIELFD KLALRFHGRL LFLKDVLGDE ICCWSFYGQG RKIAEVCCTS241 IVYATEKKQT KVEFPEARIF EETLNILIYE TPRGPDPALL EATGGAAGAG GAGRGEDEEN301 REHRVRRIHV RRHITHDERP HGQQIVFKDC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO27)克隆號PP6832起始編碼子147 ATG終止編碼子1134 TGA蛋白質分子量36355.481 GG GCC GGT CTT GCA GAG TAG CTG CGG TGA GTG GGC GTG TGC GCC GAG 4748 CGG TCT GGC CCA AGG GCT GGG GGC CGG CCG AGG GTC TTC GGG AGC AGG 9596 CCG CAG GGC GCG GAG AGA TCC TGG GAT CGC CGT CCG CCG CTG CTA CCC 143144 GGC ATG TCG GCG GAG GCC TCG GGC CCG GCT GCC GCC GCG GCC CCG TCC 1911 Met Ser Ala Glu Ala Ser Gly Pro Ala Ala Ala Ala Ala Pro Ser 15192 CTG GAA GCC CCC AAG CCC TCG GGT CTC GAG CCT GGC CCC GCC GCC TAC 23916 Leu Glu Ala Pro Lys Pro Ser Gly Leu Glu Pro Gly Pro Ala Ala Tyr 31240 GGT CTC AAG CCG CTG ACC CCG AAC AGC AAA TAC GTG AAG CTG AAC GTG 28732 Gly Leu Lys Pro Leu Thr Pro Asn Ser Lys Tyr Val Lys Leu Asn Val 47288 GGC GGC TCG TTG CAC TAC ACC ACG CTG CGC ACC CTC ACG GGA CAG GAC 33548 Gly Gly Ser Leu His Tyr Thr Thr Leu Arg Thr Leu Thr Gly Gln Asp 63336 ACC ATG CTC AAA GCC ATG TTC AGC GGC CGC GTG GAG GTG CTG ACC GAT 38364 Thr Met Leu Lys Ala Met Phe Ser Gly Arg Val Glu Val Leu Thr Asp 79384 GCC GGA GGT TGG GTG CTG ATT GAC CGG AGC GGC CGT CAC TTT GGT ACA 43180 Ala Gly Gly Trp Val Leu Ile Asp Arg Ser Gly Arg His Phe Gly Thr 95432 ATC CTC AAT TAC CTG CGG GAT GGG TCT GTG CCA CTG CCG GAG AGT ACG 47996 Ile Leu Asn Tyr Leu Arg Asp Gly Ser Val Pro Leu Pro Glu Ser Thr 111480 AGA GAA CTG GGG GAG CTG CTG GGC GAA GCA CGC TAC TAC CTG GTG CAG 527112 Arg Glu Leu Gly Glu Leu Leu Gly Glu Ala Arg Tyr Tyr Leu Val Gln 127528 GGC CTG ATT GAG GAC TGC CAG CTG GCG CTG CAG CAA AAA AGG GAG ACG 575128 Gly Leu Ile Glu Asp Cys Gln Leu Ala Leu Gln Gln Lys Arg Glu Thr 143576 CTG TCC CCG CTG TGC CTC ATC CCC ATG GTG ACA TCT CCC CGG GAG GAG 623144 Leu Ser Pro Leu Cys Leu Ile Pro Met Val Thr Ser Pro Arg Glu Glu 159624 CAG CAG CTC CTG GCC AGC ACC TCC AAG CCC GTG GTG AAG CTC CTG CAC 671160 Gln Gln Leu Leu Ala Ser Thr Ser Lys Pro Val Val Lys Leu Leu His 175672 AAC CGC AGT AAC AAC AAG TAC TCC TAC ACC AGC ACT TCA GAT GAC AAC 719176 Asn Arg Ser Asn Asn Lys Tyr Ser Tyr Thr Ser Thr Ser Asp Asp Asn 191720 CTA CTT AAG AAC ATC GAG CTG TTC GAC AAG CTG GCC CTG CGC TTC CAC 767192 Leu Leu Lys Asn Ile Glu Leu Phe Asp Lys Leu Ala Leu Arg Phe His 207768 GGG CGG CTA CTC TTC CTC AAG GAT GTC CTG GGG GAC GAG ATC TGC TGC 815208 Gly Arg Leu Leu Phe Leu Lys Asp Val Leu Gly Asp Glu Ile Cys Cys 223816 TGG TCT TTC TAC GGG CAG GGC CGC AAA ATC GCC GAG GTG TGC TGC ACC 863224 Trp Ser Phe Tyr Gly Gln Gly Arg Lys Ile Ala Glu Val Cys Cys Thr 239864 TCC ATT GTC TAT GCT ACG GAG AAG AAG CAG ACC AAG GTG GAA TTT CCA 911240 Ser Ile Val Tyr Ala Thr Glu Lys Lys Gln Thr Lys Val Glu Phe Pro 255912 GAG GCC CGG ATC TTC GAG GAG ACC CTG AAC ATC CTC ATC TAC GAG ACT 959256 Glu Ala Arg Ile Phe Glu Glu Thr Leu Asn Ile Leu Ile Tyr Glu Thr 271960 CCC CGG GGC CCA GAC CCA GCC CTC CTG GAG GCC ACA GGG GGA GCA GCT1007272 Pro Arg Gly Pro Asp Pro Ala Leu Leu Glu Ala Thr Gly Gly Ala Ala 2871008 GGA GCT GGT GGG GCT GGC CGC GGG GAG GAT GAA GAG AAC CGA GAG CAC1055288 Gly Ala Gly Gly Ala Gly Arg Gly Glu Asp Glu Glu Asn Arg Glu His 3031056 CGT GTC CGC AGG ATC CAT GTC CGG CGC CAT ATC ACC CAC GAC GAG CGT1103304 Arg Val Arg Arg Ile His Val Arg Arg His Ile Thr His Asp Glu Arg 3191104 CCT CAT GGC CAA CAA ATT GTC TTC AAG GAC TGA CCT CTG ACC CTC CCC1151320 Pro His Gly Gln Gln Ile Val Phe Lys Asp *** 3301152 CTG CCT TCC TCT TGC CTT GGG ACC CAG TCC CTC TCT CTT TCC CTC CCC11991200 TTC CCA GAC TTT TGC CCC GGC TCT GCT GGC CAA GTC GTG GGT CCT CCT12471248 CTG TCC CTT CAT TGC ATG GCA CAG CTC ACT TTG GCC CTT CTC CAC CCA12951296 TCC CAA CCC CAT TGC TAA CAA CAT GGT ACA TTC CGG CCC CAC CAC TCA13431344 GAG CCT TCC GAA GCC AAC ACT TGT CCC CAC CCT GGC CCT GCG TCC TTC13911392 CCT CTC CAG CTG GTT AAG AGG GAT TTA GAA TTC CCT TTC TCT TTT TTT14391440 AGT GCA TCG TCC ATG CCA AAG TGT GCG GCC CTT CCT GAC ATC ACC ACA14871488 GTC TGA GCA GCC TCC CGC GTC CTG CAG GGT AGT CCG CCC CCT CCT CCC15351536 CAC CAT CCT CCC TAC CTC CTT AAC TTT GTA CTA GAC TGG CCT GGG CCT15831584 GCC CAG CTC AGC GTT ATC AGT CTG TTT CAT ATT ATT TAT TAT TTT AAT16311632 TTT CTA TTA AAT TAT TGA AAT AAA GTT AAG TTG AGA AAC TGA AAA AAA16791680 AAA AAA AAA AAA A 169210.PP6933A核苷酸序列(SEQ ID NO28) 長度1649bp1GCTGGAGGAG CCGGGCCGAG GCCGCGGCGG AGGCCGCGGC TGGTACTGGG AGGGTGGCAG61GGAGGGACGG GGAAGGAAGA TGGCGACGTC GGGGGCGAAC GGGCCTGGTT CGGCCACGGC121CTCGGCTTCC AATCCGCGCA AATTTAGTGA GAAGATTGCG CTGCAGAAGC AGCGTCAGGC181TTCCCTGAGC AGTCCTCAGC CCCAGCTTCA GGGCTCCCAC AGCCACCCCT CTCTGCCTGC241CTCCTCCTTG GCCCGCCATG TACTGCCCAC CACCTCCCTG GGCCACCCCT CACTCAGTGC301TCCGGCTCTC TCCTCCTCCT CTTCCTCCTC CTCCACTTCA TCTCCTGTTT TGGGCGCCCC361CTCTTACCCT GCTTCTACCC CTGGGGCTCC CCCCACCACC GCCGTGTGCC CCTCAGCCCC421CTGAGTTTGC TCGCGGGCCC AGCCGACGCC AGAAGGTCCC AACAGCAGCT GCCCAAACAG481TTTTCGCCAA CAATGTCACC CACCTTGTCT TCCATCACTC AGGGCGTCCC CCTGGATACC541AGTAAACTGT CCACTGACCA GCGGTTACCC CCATACCCAT ACAGCTCCCC AAGTCTGGTT601CTGCCTACCC AGCCCCACAC CCCAAAGTCT CTACAGCAGC CAGGGCTGCC CTCTCAGTCT661TGTTCAGTGC AGTCCTCAGG TGGGCAGCCC CCAGGCAGGC AGTCTCATTA TGGGACACCG721TACCCACCTG GGCCCAGTGG GCATGGGCAA CAGTCTTACC ACCGGCCAAT GAGTGACTTC781AACCTGGGGA ATCTGGAGCA GTTCAGCATG GAGAGCCCAT CAGCCAGCCT GGTGCTGGAT841CCCCCTGGCT TTTCTGAAGG GCCTGGATTT TTAGGGGGTG AGGGGCCAAT GGGTGGCCCC901CAGGATCCCC ACACCTTCAA CCACCAGAAC TTGACCCACT GTTCCCGCCA TGGCTCAGGG961CCTAACATCA TCCTCACAGG GGACTCCTCT CCAGGTTTCT CTAAGGAGAT TGCAGCAGCC1021CTGGCCGGAG TGGCTGGCTT TGAGGTGTCA GCAGCTGGAT TGGAGCTAGG GCTTGGGCTA1081GAAGATGAGC TGCGCATGGA GCCACTGGGC CTGGAAGGGC TAAACATGCT GAGTGACCCC1141TGTGCCCTGC TGCCTGATCC TGCTGTGGAG GAGTCATTCC GCAGTGACCG GCTCCAATGA1201GGGCACCTCA TCACCATCCC TCTTCTTGGC CCCATCCCCC ACCACCATTC CTTTCCTCCC1261TTCCCCCTGG CAGGTAGAGA CTCTACTCTC TGTCCCCAGA TCCTCTTTCT AGCATGAATG1321AAGGATGCCA AGAATGAGAA AAAGCAAGGG GTTTGTCCAG GTGGCCCCTG AATTCTGCGC1381AAGGGATGGG CCTGGGGGAA CTCAAGGGAG GGCCTAAAGC ACTTGTAACT TTGAACCGTC1441TGTCTGGAGG TCAGAGCCTG TTGGAAAGCA GGGGTAGAGG GGAGCCCTGG AAGCAGGGCT1501TTTCCGGATG CCTAGGGGTG GGCAGTGCCA GCCCCTCCTC ACCACTCTTC CCCTTGCAGT1561GGAGGAGAGA GCCAGAGTGG ATACTATTTT TTATTAAATA TATTATTATA TGTTAATAAA1621AAAATCATAT CAAAAAAAAA AAAAAAAAAB氨基酸序列(SEQ ID NO29) 長度235個氨基酸1MSPTLSSITQ GVPLDTSKLS TDQRLPPYPY SSPSLVLPTQ PHTPKSLQQP GLPSQSCSVQ61SSGGQPPGRQ SHYGTPYPPG PSGHGQQSYH RPMSDFNLGN LEQFSMESPS ASLVLDPPGF121SEGPGFLGGE GPMGGPQDPH TFNHQNLTHC SRHGSGPNII LTGDSSPGFS KEIAAALAGV181PGFEVSAAGL ELGLGLEDEL RMEPLGLEGL NMLSDPCALL PDPAVEESFR SDRLQC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO30)克隆號PP6933起始編碼子493 ATG終止編碼子1198 TGA蛋白質分子量24632.011 GCT GGA GGA GCC GGG CCG AGG CCG CGG CGG AGG CCG CGG CTG GTA CTG 4849 GGA GGG TGG CAG GGA GGG ACG GGG AAG GAA GAT GGC GAC GTC GGG GGC 9697 GAA CGG GCC TGG TTC GGC CAC GGC CTC GGC TTC CAA TCC GCG CAA ATT 144145 TAG TGA GAA GAT TGC GCT GCA GAA GCA GCG TCA GGC TTC CCT GAG CAG 192193 TCC TCA GCC CCA GCT TCA GGG CTC CCA CAG CCA CCC CTC TCT GCC TGC 240241 CTC CTC CTT GGC CCG CCA TGT ACT GCC CAC CAC CTC CCT GGG CCA CCC 288289 CTC ACT CAG TGC TCC GGC TCT CTC CTC CTC CTC TTC CTC CTC CTC CAC 336337 TTC ATC TCC TGT TTT GGG CGC CCC CTC TTA CCC TGC TTC TAC CCC TGG 384385 GGC TCC CCC CAC CAC CGC CGT GTG CCC CTC AGC CCC CTG AGT TTG CTC 432433 GCG GGC CCA GCC GAC GCC AGA AGG TCC CAA CAG CAG CTG CCC AAA CAG 480481 TTT TCG CCA ACA ATG TCA CCC ACC TTG TCT TCC ATC ACT CAG GGC GTC 5281 Met Ser Pro Thr Leu Ser Ser Ile Thr Gln Gly Val 12529 CCC CTG GAT ACC AGT AAA CTG TCC ACT GAC CAG CGG TTA CCC CCA TAC 57613 Pro Leu Asp Thr Ser Lys Leu Ser Thr Asp Gln Arg Leu Pro Pro Tyr 28577 CCA TAC AGC TCC CCA AGT CTG GTT CTG CCT ACC CAG CCC CAC ACC CCA 62429 Pro Tyr Ser Ser Pro Ser Leu Val Leu Pro Thr Gln Pro His Thr Pro 44625 AAG TCT CTA CAG CAG CCA GGG CTG CCC TCT CAG TCT TGT TCA GTG CAG 67245 Lys Ser Leu Gln Gln Pro Gly Leu Pro Ser Gln Ser Cys Ser Val Gln 60673 TCC TCA GGT GGG CAG CCC CCA GGC AGG CAG TCT CAT TAT GGG ACA CCG 72061 Ser Ser Gly Gly Gln Pro Pro Gly Arg Gln Ser His Tyr Gly Thr Pro 76721 TAC CCA CCT GGG CCC AGT GGG CAT GGG CAA CAG TCT TAC CAC CGG CCA 76877 Tyr Pro Pro Gly Pro Ser Gly His Gly Gln Gln Ser Tyr His Arg Pro 92769 ATG AGT GAC TTC AAC CTG GGG AAT CTG GAG CAG TTC AGC ATG GAG AGC 81693 Met Ser Asp Phe Asn Leu Gly Asn Leu Glu Gln Phe Ser Met Glu Ser 108817 CCA TCA GCC AGC CTG GTG CTG GAT CCC CCT GGC TTT TCT GAA GGG CCT 864109 Pro Ser Ala Ser Leu Val Leu Asp Pro Pro Gly Phe Ser Glu Gly Pro 124865 GGA TTT TTA GGG GGT GAG GGG CCA ATG GGT GGC CCC CAG GAT CCC CAC 912125 Gly Phe Leu Gly Gly Glu Gly Pro Met Gly Gly Pro Gln Asp Pro His 140913 ACC TTC AAC CAC CAG AAC TTG ACC CAC TGT TCC CGC CAT GGC TCA GGG 960141 Thr Phe Asn His Gln Asn Leu Thr His Cys Ser Arg His Gly Ser Gly 156961 CCT AAC ATC ATC CTC ACA GGG GAC TCC TCT CCA GGT TTC TCT AAG GAG1008157 Pro Asn Ile Ile Leu Thr Gly Asp Ser Ser Pro Gly Phe Ser Lys Glu 1721009 ATT GCA GCA GCC CTG GCC GGA GTG CCT GGC TTT GAG GTG TCA GCA GCT1056173 Ile Ala Ala Ala Leu Ala Gly Val Pro Gly Phe Glu Val Ser Ala Ala 1881057 GGA TTG GAG CTA GGG CTT GGG CTA GAA GAT GAG CTG CGC ATG GAG CCA1104189 Gly Leu Glu Leu Gly Leu Gly Leu Glu Asp Glu Leu Arg Met Glu Pro 2041105 CTG GGC CTG GAA GGG CTA AAC ATG CTG AGT GAC CCC TGT GCC CTG CTG1152205 Leu Gly Leu Glu Gly Leu Asn Met Leu Ser Asp Pro Cys Ala Leu Leu 2201153 CCT GAT CCT GCT GTG GAG GAG TCA TTC CGC AGT GAC CGG CTC CAA TGA1200221 Pro Asp Pro Ala Val Glu Glu Ser Phe Arg Ser Asp Arg Leu Gln *** 2361201 GGG CAC CTC ATC ACC ATC CCT CTT CTT GGC CCC ATC CCC CAC CAC CAT12481249 TCC TTT CCT CCC TTC CCC CTG GCA GGT AGA GAC TCT ACT CTC TGT CCC12961297 CAG ATC CTC TTT CTA GCA TGA ATG AAG GAT GCC AAG AAT GAG AAA AAG13441345 CAA GGG GTT TGT CCA GGT GGC CCC TGA ATT CTG CGC AAG GGA TGG GCC13921393 TGG GGG AAC TCA AGG GAG GGC CTA AAG CAC TTG TAA CTT TGA ACC GTC14401441 TGT CTG GAG GTC AGA GCC TGT TGG AAA GCA GGG GTA GAG GGG AGC CCT14881489 GGA AGC AGG GCT TTT CCG GAT GCC TAG GGG TGG GCA GTG CCA GCC CCT15361537 CCT CAC CAC TCT TCC CCT TGC AGT GGA GGA GAG AGC CAG AGT GGA TAC15841585 TAT TTT TTA TTA AAT ATA TTA TTA TAT GTT AAT AAA AAA ATC ATA TCA16321633 AAA AAA AAA AAA AAA AA 1649在本發(fā)明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。
權利要求
1.一種分離的具有抑癌功能的人蛋白，其特征在于，它包含具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ ID NO11、SEQ ID NO14、SEQID NO17、SEQ ID NO20、SEQ ID NO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29；或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
2.如權利要求1所述的多肽，其特征在于，該多肽是具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ ID NO11、SEQ IDNO14、SEQ ID NO17、SEQ ID NO20、SEQ ID NO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29。
3.一種分離的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，該核苷酸序列與選自下組的一種核苷酸序列有至少85％相同性(a)編碼如權利要求1和2所述多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸。
4.如權利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸編碼的多肽具有選自下組的氨基酸序列SEQ ID NO2、SEQ ID NO5、SEQ ID NO8、SEQ ID NO11、SEQ ID NO14、SEQ ID NO17、SEQ ID NO20、SEQ ID NO23、SEQ ID NO26、SEQ ID NO29。
5.如權利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸的序列選自下組SEQ ID NO3、SEQ ID NO6、SEQ ID NO9、SEQ ID NO12、SEQ ID NO15、SEQ ID NO18、SEQ ID NO21、SEQ ID NO24、SEQ ID NO27、SEQ ID NO30的編碼區(qū)序列或全長序列。
6.一種載體，其特征在于，它含有權利要求3所述的多核苷酸。
7.一種遺傳工程化的宿主細胞，其特征在于，它是選自下組的一種宿主細胞(a)用權利要求6所述的載體轉化或轉導的宿主細胞；(b)用權利要求3所述的多核苷酸轉化或轉導的宿主細胞。
8.一種具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制備方法，其特征在于，該方法包含(a)在適合表達具有抑癌功能的人蛋白的條件下，培養(yǎng)權利要求7所述的宿主細胞；(b)從培養(yǎng)物中分離出具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽。
9.一種能與權利要求1所述的具有抑癌功能的人蛋白特異性結合的抗體。
10.一種藥物組合物，其特征在于，它含有安全有效量的權利要求1所述的多肽以及藥學上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類新的具有抑癌功能的人蛋白,編碼此多肽的多核苷酸和經(jīng)重組技術產(chǎn)生該多肽的方法。本發(fā)明還公開了此多肽用于治療多種疾病如癌癥等的方法。本發(fā)明還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發(fā)明還公開了編碼這類新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。
文檔編號C12N15/63GK1351080SQ0012710
公開日2002年5月29日 申請日期2000年10月31日 優(yōu)先權日2000年10月31日
發(fā)明者顧健人 申請人:上海市腫瘤研究所