低溫下進(jìn)行干燥。
[0049][有益效果]
[0050]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下的有益效果:
[0051]本發(fā)明利用了閃式提取技術(shù)提取煙籽中的蛋白質(zhì)，本發(fā)明的提取方法具有速度快、提取條件溫和、提取效率高、操作簡單和易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點，是一種新型的種子蛋白提取方法；與傳統(tǒng)的種子蛋白提取方法相比，本法可降低能耗，從而降低生產(chǎn)成本。同時，本發(fā)明為香料煙廢棄煙籽的利用及相應(yīng)產(chǎn)品的開發(fā)提供了可借鑒的方法。
【附圖說明】
[0052]圖1為本發(fā)明從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的流程圖。
【具體實施方式】
[0053]下面結(jié)合本發(fā)明的實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述和說明。
[0054]下面實施例1?6使用圖1所示的流程圖提取蛋白質(zhì)。
[0055]實施例1
[0056]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0057]取干燥后的濾渣，置容器中，加入濃度為0.02mol/L、pH值為7.0的磷酸鹽緩沖液1000g，浸泡10h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為100V，提取轉(zhuǎn)速為5000rpm/min，每次提取時間為30s，提取5次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0058]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為30 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置1h ;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)15.3g ;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為83.5%。
[0059]實施例2
[0060]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0061]取干燥后的濾渣，置容器中，加入濃度為0.03mol/L、pH值為7.2的磷酸鹽緩沖液1200g，浸泡12h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取6次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0062]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為40 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置15h;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)15.9g;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為83.9%。
[0063]實施例3
[0064]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0065]取干燥后的濾澄，置容器中，加入濃度為0.04mol/L、pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液1200g，浸泡12h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為130V，提取轉(zhuǎn)速為7000rpm/min，每次提取時間為60s，提取7次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0066]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為40 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置15h ;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)16.5g ;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為84.3 %。
[0067]實施例4
[0068]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0069]取干燥后的濾澄，置容器中，加入濃度為0.04mol/L、pH值為7.6的磷酸鹽緩沖液1400g，浸泡15h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為130V，提取轉(zhuǎn)速為7000rpm/min，每次提取時間為60s，提取7次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0070]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為50 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置18h ;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)16.7g ;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為84.5%。
[0071]實施例5
[0072]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0073]取干燥后的濾渣，置容器中，加入濃度為0.05mol/L、pH值為7.8的磷酸鹽緩沖液1500g，浸泡18h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為140V，提取轉(zhuǎn)速為8000rpm/min，每次提取時間為75s，提取7次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0074]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為50 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置18h ;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)17.2g ;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為84.6%。
[0075]實施例6
[0076]稱取篩選過的煙籽100g，置容器中，加入正己烷500g，浸泡lh，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，每次提取時間為45s，提取5次；提取完畢后，過濾，濾澄低溫干燥。
[0077]取干燥后的濾澄，置容器中，加入濃度為0.05mol/L、pH值為8.0的磷酸鹽緩沖液1500g，浸泡20h，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓150V，提取轉(zhuǎn)速為8000rpm/min，每次提取時間為75s，提取8次；提取完畢后過濾，濾液離心除去沉淀，分取上清液置容器中備用。
[0078]根據(jù)上清液體積向其中添加無水硫酸銨至硫酸銨飽和度為60 %，充分?jǐn)嚢韬箪o置20h;離心，取沉淀用透析法脫鹽后，置真空干燥箱中低溫干燥，得煙籽蛋白質(zhì)17.6g;以牛血清白蛋白為標(biāo)樣，采用Lorry法測定其中蛋白的含量為85.2%。
[0079]盡管這里參照本發(fā)明的解釋性實施例對本發(fā)明進(jìn)行了描述，上述實施例僅為本發(fā)明較佳的實施方式，本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，應(yīng)該理解，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以設(shè)計出很多其他的修改和實施方式，這些修改和實施方式將落在本申請公開的原則范圍和精神之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于它包括以下步驟: A，脫色脫脂 首先，取篩選過的廢棄煙籽置于容器中，然后加入有機溶劑浸泡0.8?1.2h，所述煙籽與有機溶劑的質(zhì)量比為1:4?6 ;接著，將浸泡在有機溶劑中的煙籽置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓、轉(zhuǎn)速、提取次數(shù)和每次提取時間；提取完畢后過濾，濾渣低溫干燥備用；濾液回收利用； B，蛋白質(zhì)的提取 將步驟A得到的濾渣置于容器中，加入磷酸鹽緩沖液浸泡一段時間后，置于閃式提取器上，設(shè)定提取電壓、轉(zhuǎn)速、提取次數(shù)和每次提取時間；提取完畢后過濾，濾液離心去除沉淀，分取上清液備用；濾渣回收利用； C，蛋白質(zhì)的沉淀及其干燥 將中性鹽加入到步驟B得到的上清液中至鹽溶液呈飽和狀態(tài)，靜置一定時間使蛋白質(zhì)充分沉淀后，離心，沉淀采用透析法脫鹽后，置于真空干燥箱中低溫干燥，即得所述蛋白質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟A中，采用有機溶劑脫除煙籽中的色素及脂溶性成分，所述的有機溶劑選自正己烷、石油醚或乙酸乙酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟A中，所述提取電壓為120V，提取轉(zhuǎn)速為6000rpm/min，提取5次，每次提取時間為45s。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟A中，所述廢棄煙籽浸泡在有機溶劑中的時間為lh，所述廢棄煙籽和有機溶劑的質(zhì)量比為1:5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟B中，所述磷酸鹽緩沖液的濃度為0.02?0.05mol/L，pH值為6.8?8.0 ;所述濾渣與磷酸鹽緩沖液的質(zhì)量比為1: 10?30 ;加入磷酸鹽緩沖液后浸泡的時間為10?20h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟B中，所述提取電壓為100?150V，提取轉(zhuǎn)速為5000?10000rpm/min，提取5?10次，每次提取時間為30?90s。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟C中，所述中性鹽選自無水硫酸銨或無水氯化鈉；所述飽和狀態(tài)的飽和度為25?70%;所述的靜置時間為10?20h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法，其特征在于在步驟A和C中，所述的低溫干燥是指在溫度不高于50°C的條件下進(jìn)行的干燥。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從香料煙廢棄煙籽中提取蛋白質(zhì)的方法。本發(fā)明利用閃式提取技術(shù)，經(jīng)過脫色脫脂、蛋白質(zhì)提取、蛋白質(zhì)沉淀及干燥的過程，從香料煙廢棄煙籽中提取得到蛋白質(zhì)。本發(fā)明方法具有速度快、提取條件溫和、提取效率高、操作簡單和易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點，并且本發(fā)明為香料煙廢棄煙籽的利用及相應(yīng)產(chǎn)品的開發(fā)提供了可以借鑒的方法。
【IPC分類】A23J3-14, A23J1-14
【公開號】CN104738306
【申請?zhí)枴緾N201510150342
【發(fā)明人】沈怡, 戴亞, 馮廣林, 施豐成, 肖克毅, 薛芳, 譚蘭蘭, 寇明鈺, 李東亮, 汪長國
【申請人】川渝中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年3月31日