本發(fā)明屬于功能性食品加工，具體涉及一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的方法。

背景技術(shù)：

1、葉黃素是一種廣泛存在于水果和蔬菜等食物中的天然色素，是眼睛黃斑色素的主要組成成分之一，具有吸收藍(lán)光、增強(qiáng)視網(wǎng)膜組織的功能，在保護(hù)視覺、預(yù)防白內(nèi)障等方面具有顯著功效，受到人們的廣泛關(guān)注，但葉黃素的分子結(jié)構(gòu)中碳鏈較長且含有多個疏水基團(tuán)，使其在水中的溶解性差、在人體的生物利用度低，限制了在食品、藥品等領(lǐng)域的應(yīng)用。葉黃素在機(jī)體內(nèi)與脂類混合并包裹在脂滴中，從脂滴中轉(zhuǎn)移后在小腸中與膽鹽、油脂、磷脂一起被轉(zhuǎn)化為水溶性的混合脂質(zhì)體。混合脂質(zhì)體與小腸上皮細(xì)胞產(chǎn)生親和作用，通過小腸上皮細(xì)胞的刷狀緣薄膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。吸收的葉黃素經(jīng)過細(xì)胞內(nèi)各種酶的催化，從脂質(zhì)體相中釋放出來，進(jìn)一步經(jīng)過酯水解生成單體后，被包裹在乳糜微粒中釋放到淋巴系統(tǒng)，最終被運(yùn)送進(jìn)入血液循環(huán)以及在肝臟中轉(zhuǎn)化或儲存。目前改善葉黃素生物利用度的方法以提高其溶解度為主，如中國專利(cn111903846a)一種穩(wěn)定、高生物利用度的葉黃素微膠囊及其制備方法及中國專利(cn111714466a)一種高生物利用度高穩(wěn)定性的葉黃素制劑的制備方法。上述專利雖涉及到使葉黃素生物利用度提高的方法，但只是從單一的提高溶解度角度開展，具有一定的局限性，因為葉黃素在人體內(nèi)是一個復(fù)雜的吸收過程，受多種因素的影響。葉黃素在機(jī)體內(nèi)與脂類混合并包裹在脂滴中，在小腸中經(jīng)過脂肪酶的作用從脂滴中釋放出來，以脂質(zhì)體的形式存在于胃腸環(huán)境中，之后通過脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白介導(dǎo)的通路被腸道吸收。有研究發(fā)現(xiàn)，在磷脂分子上聯(lián)接含多羥基基團(tuán)的物質(zhì)，使脂質(zhì)體表面暴露一些親水性的基團(tuán)，可以增加脂質(zhì)體在血液中的穩(wěn)定性。egcg、黃腐酚、花青素、姜黃素或槲皮素等是食物中富含的植物多酚，是多羥基的活性物質(zhì)，具有抗氧化、抗炎癥、抗突變、抗心血管疾病等多種生物活性。

2、本專利利用egcg、黃腐酚、花青素、姜黃素或槲皮素等復(fù)合多酚修飾葉黃素，可促進(jìn)葉黃素脂質(zhì)體水解及其在胃腸環(huán)境中穩(wěn)定性，通過調(diào)控受體蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞吸收通路來促進(jìn)葉黃素的腸道吸收，進(jìn)而顯著提高葉黃素的體內(nèi)生物利用度。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的方法，該方法制備的葉黃素脂質(zhì)體胃腸穩(wěn)定性好、腸道吸收好、生物利用度高。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

2、(1)將葉黃素、脂相溶解于體積比為2∶1的三氯甲烷-甲醇溶液中，得到葉黃素脂溶液；

3、(2)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，使復(fù)合物在圓底燒瓶底部形成均勻薄膜，提高真空度至0.1mpa繼續(xù)抽干30min；

4、(3)復(fù)合多酚溶解于熱磷酸鹽溶液中，得到復(fù)合多酚溶液，向步驟(2)得到的薄膜中滴加復(fù)合多酚溶液，水化溫度35～65℃，時間30～150min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，使復(fù)合物在圓底燒瓶底部形成均勻薄膜；

5、(4)將步驟(3)得到薄膜加入膽鹽溶液復(fù)溶，在冰水浴攪拌條件下超聲，超聲功率800w，脈沖5s/5s，處理時間10～30min后，35～40℃溫度下繼續(xù)攪拌4～6h，攪拌轉(zhuǎn)速800～1200rpm/min；

6、(5)將步驟(4)得到的分散液12000rpm/min速度條件下離心15min，除去未包埋的葉黃素；

7、(6)將步驟(5)得到的分散液經(jīng)200nm的聚碳酸酯膜擠壓10～20次，g200葡聚糖凝膠柱去除過量的復(fù)合多酚，得到復(fù)合多酚-葉黃素脂質(zhì)體。

8、作為優(yōu)選，步驟(1)脂相由膽固醇、單酰甘油脂和油酸組成，膽固醇、單酰甘油脂和油酸質(zhì)量比2∶2∶1，葉黃素脂溶液中葉黃素濃度為0.1～2.0％。

9、作為優(yōu)選，步驟(3)復(fù)合多酚為egcg、黃腐酚、花青素、姜黃素或槲皮素一種或幾種，葉黃素和復(fù)合多酚的摩爾比1∶2～1∶10，滴加速度為10～30滴每分鐘，攪拌速度為100～700rpm/min。

10、作為優(yōu)選，步驟(4)中膽鹽與脂相的摩爾比為2∶1～5∶1。

11、本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：

12、(1)本發(fā)明利用復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體，避免脂質(zhì)體的聚集，降低脂質(zhì)體的粒徑，粒徑為0.1～0.6μm；經(jīng)過長期貯存后，平均粒徑增加比例低于5％，在貯藏期間有效抑制氧氣、水分子等的滲透，脂質(zhì)體中葉黃素保留率≥80％，對葉黃素脂質(zhì)體有良好的保護(hù)作用。

13、(2)本發(fā)明復(fù)合多酚、膽鹽修飾脂質(zhì)體，提高葉黃素脂質(zhì)體在胃腸道中的穩(wěn)定性，制備的脂質(zhì)體可通過可抵御胃腸道中胃酶、酸及膽汁的破壞，抑制葉黃素的快速釋放，有效提高葉黃素生物利用度。

14、(3)本發(fā)明利用復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體，利于葉黃素轉(zhuǎn)移到消化液上層，使葉黃素脂質(zhì)體生物可及性提高≥1.5倍。

15、(4)本發(fā)明復(fù)合多酚、膽鹽修飾脂質(zhì)體，顯著提高葉黃素細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)，提高葉黃素腸道細(xì)胞的吸收；增加葉黃素吸收相關(guān)腸道菌群的豐度，使葉黃素及代謝產(chǎn)物在小鼠肝臟累積量提高≥2倍、小鼠血漿累積量提高≥20％。

技術(shù)特征：

1.一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟(1)中脂相由膽固醇、單酰甘油脂和油酸組成，膽固醇、單酰甘油脂和油酸質(zhì)量比2∶2∶1，葉黃素脂溶液中葉黃素濃度為0.1～2.0％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟(3)中的復(fù)合多酚為沒食子兒茶素沒食子酸酯(egcg)、黃腐酚、花青素、姜黃素或槲皮素中的一種或幾種，葉黃素和復(fù)合多酚的摩爾比1∶2～1∶10，滴加速度為10～30滴每分鐘，攪拌速度為100～700rpm/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟(4)中膽鹽與脂相的摩爾比為2∶1～5∶1。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種復(fù)合多酚修飾葉黃素脂質(zhì)體的方法，具體方法如下：(1)將葉黃素和脂材溶解，獲得葉黃素脂溶液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)形成薄膜；(2)復(fù)合多酚溶解于熱磷酸鹽溶液，對葉黃素薄膜進(jìn)行水化；(3)水化后旋蒸形成薄膜，加入膽鹽溶液復(fù)溶；(4)經(jīng)超聲處理后，過聚碳酸酯膜擠壓，獲得葉黃素脂質(zhì)體。本發(fā)明復(fù)合多酚修飾后的葉黃素脂質(zhì)體具有高穩(wěn)定性、高生物利用度的特性，可顯著提高葉黃素在肝臟和血漿中的累積。

技術(shù)研發(fā)人員：張鐘元,李大婧,肖亞茹,戴竹青,徐亞元,聶梅梅,張國棟,張興
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6