本發(fā)明屬于動(dòng)物保健領(lǐng)域，具體涉及含有25-羥基維生素d3的乳液組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：維生素d(例如麥角鈣化醇d2和膽鈣化固醇d3)是由其生物活性定義的一組脂溶性化合物，維生素d可促進(jìn)骨的再吸收，也可調(diào)控心血管、免疫和肌肉系統(tǒng)的功能。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)了維生素d攝入及其對(duì)血壓或葡萄糖代謝之間的關(guān)聯(lián)。維生素d的活性受甲狀旁腺激素的負(fù)反饋控制。維生素d缺乏在兒童中引起佝僂病，在成人中引起骨軟化癥。但在數(shù)月慢性攝入多于100倍推薦每日允許量(即5～15μg或200～600iu)維生素d后可能會(huì)發(fā)生毒性，大于375nmol/l25羥基維生素d的血藥濃度下可發(fā)生血鈣過(guò)多。對(duì)維生素d而言，毒性閾值是每日500～600mcg/kg體重，成人通常不應(yīng)長(zhǎng)期消耗多于rda的三倍。近年來(lái)，安全的維生素d上限水平被鑒定為至少250μg/天(10000iu)，這樣的膳食補(bǔ)充劑的攝入已顯示導(dǎo)致約200nmol/l25-羥基維生素d3的血藥濃度。維生素d是一種激素原，其必須在肝中被羥基化，產(chǎn)生25-羥基維生素d3(25-ohd3)，其隨后在腎和其他組織經(jīng)歷另外的羥基化，產(chǎn)生維生素d的活性激素形式——1,25-二羥基維生素d。1,25-二羥基維生素d被釋放到血液中，1,25-二羥基維生素d和維生素d結(jié)合蛋白(dbp)結(jié)合，并被轉(zhuǎn)運(yùn)至目標(biāo)組織。1,25-二羥基維生素d和維生素d受體之間的結(jié)合允許復(fù)合物在細(xì)胞核中發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子的作用。基于上述原因，將25-羥基維生素d3作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充提供給動(dòng)物是有益的。維生素d和25-羥基維生素d3的組合物已經(jīng)在動(dòng)物飼料中使用。專利us2005/0064018公開(kāi)了向動(dòng)物飼料添加25-羥基維生素d3和維生素d3的組合，來(lái)促進(jìn)豬的骨強(qiáng)度。具體地，向豬飼料中添加約10μg/kg～100μg/kg的25-羥基維生素d3和約200iu/kg～4000iu/kg的維生素d3。專利us5695794公開(kāi)了對(duì)家禽飼料添加25-羥基維生素d3和維生素d3的組合，來(lái)改善家禽脛骨軟骨發(fā)育不良的影響。專利us5043170公開(kāi)了維生素d3和1-α-羥基膽鈣化固醇或1α，25-羥基膽鈣化固醇的組合，用于在下蛋母雞和老母雞中改善蛋強(qiáng)度和腿強(qiáng)度。但是直接加入飼料中的25-羥基維生素d3在常規(guī)儲(chǔ)存條件下并不穩(wěn)定，儲(chǔ)存過(guò)程中易于氧化，這種降解對(duì)動(dòng)物飼料中的25-羥基維生素d3的劑量產(chǎn)生不利影響，因而需要提供在廣泛的條件25-羥基維生素d3組合物穩(wěn)定存在形式。中國(guó)專利cn1278690c公開(kāi)了含有25-羥基維生素d3的組合物，劑型包括油組合物、乳液、微囊化油組合物。其中，其乳液劑型為微囊化油組合物沒(méi)有噴霧干燥的狀態(tài)，其粘度很高，不利于實(shí)際應(yīng)用。而且在常規(guī)制備條件下25-羥基維生素d3不穩(wěn)定，導(dǎo)致單位劑量的活性呈現(xiàn)時(shí)間依賴性損失，尤其在較高的溫度下，活性成分易于降解，在使用的過(guò)程中這種降解對(duì)25-羥基維生素d3的劑量產(chǎn)生不利影響。中國(guó)專利201610070588.7公開(kāi)了一種豬用速效補(bǔ)能復(fù)合維生素微乳液制劑，組合物中80％以上組成成分的中鏈甘油三脂成本較高，得到的是油包水型微乳液在稀釋使用過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生破乳致使用不便，儲(chǔ)存過(guò)程中需要防止酸敗，產(chǎn)品穩(wěn)定性差，對(duì)產(chǎn)品的制備、貯存及運(yùn)輸條件要求更加苛刻。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明目的之一是提供含有25-羥基維生素d3的乳液組合物，通過(guò)優(yōu)化乳化劑用量及比例，調(diào)節(jié)油相的種類及比例，制備更加穩(wěn)定的水包油型乳劑劑型，使25-羥基維生素d3更加方便的應(yīng)用于家禽及豬的飼料中，改善其骨密度或骨強(qiáng)度。本發(fā)明目的之二是提供含有25-羥基維生素d3的乳液組合物的制備方法，此制備方法制備的乳劑能夠維持較好的制劑穩(wěn)定性，可定劑量的分散于飲用水中，作為家禽及豬的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：含有25-羥基維生素d3的乳液組合物，由以下質(zhì)量百分比的組份組成：活性成分25-羥基維生素d30.001～5％、抗氧化劑0.5～1.5％、親油性乳化劑2.0～2.8％、親水性乳化劑4.0～5.0％、分散相油相溶劑5～10％和連續(xù)相水相溶劑65.0～90.0％。通過(guò)優(yōu)化乳化劑用量及比例，調(diào)節(jié)水相、油相的種類及比例，制備更加穩(wěn)定的水包油型乳劑劑型，使用時(shí)稀釋25-羥基維生素d3的過(guò)程只需將本發(fā)明乳液組合物加入水中，直接稀釋而不引起性狀外觀的改變，克服油包水型乳劑在稀釋過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生破乳而致使使用不便的缺陷，使用便利。而且本發(fā)明的水包油型乳化劑產(chǎn)品穩(wěn)定性良好，便于制備、運(yùn)輸和貯存，更加適用于工業(yè)化應(yīng)用。本發(fā)明的水相溶劑占組合物質(zhì)量的65％以上，成本優(yōu)勢(shì)不言而喻。優(yōu)選的，所述的乳液組合物通過(guò)乳化劑調(diào)節(jié)其親水親油值(hlb)為10～11。優(yōu)選的，所述油相溶劑為中鏈甘油三脂、甘油二乙酸酯、甘油三乙酸酯、玉米油、芝麻油、豆油、杏仁油、花生油、桃仁油、菜籽油、棉籽油、葵花籽油、蓖麻油、橄欖油、氫化蓖麻油、椰子油中的一種或多種。優(yōu)選的，所述親油性乳化劑為單亞油酸甘油酯、乙二醇單硬脂酸酯、乙二醇單油酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油單硬脂酸酯、三甘油辛癸酸酯的一種或多種。優(yōu)選的，所述親水性乳化劑包括吐溫-60、吐溫-20、吐溫-80、十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鉀、月桂酸異丙醇酰胺的一種或多種。優(yōu)選的，所述的抗氧化劑為2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、乙二胺四乙酸、二丁基羥基甲苯、木糖醇、反丁烯二酸、α-生育酚、龍膽乙醇胺、抗壞血酸、抗壞血酸鈉、沒(méi)食子酸的一種或多種。優(yōu)選的，所述25-羥基維生素d3結(jié)構(gòu)式如式1所示：本發(fā)明還提供一種含有25-羥基維生素d3的乳液組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)油相制備：在10～100℃水浴條件下，將抗氧化劑溶于油性分散相，攪拌5～60min，再加入25-羥基維生素d3，攪拌5～60min；(2)乳化劑制備：將親油性乳化劑和親水性乳化劑混合均勻；(3)初乳制備將步驟(2)制備的乳化劑加入步驟(2)制備的油相中，攪拌使之形成初乳，攪拌3～30min，使其成為初乳；(4)水處理水在水浴條件下維持與步驟(1)油相相同的溫度，備用；(5)乳液制備將步驟(3)制備的初乳加入到步驟(4)的水中，使用高速剪切設(shè)備制備或者其他勻質(zhì)設(shè)備制備乳液，剪切速度定為25000rpm，剪切合適的時(shí)間制備乳劑，制備完畢后放冷至室溫。優(yōu)選的，上述含有25-羥基維生素d3的乳液組合物制備過(guò)程中各組分及質(zhì)量比為：優(yōu)選的，所述乳液包裝為將乳液裝入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。優(yōu)選的，所述乳液的儲(chǔ)存條件為組合物應(yīng)貯存于低于15℃密封避光的條件下，有效期為十二個(gè)月。本發(fā)明還提供一種上述制備方法制備的含有25-羥基維生素d3的乳液組合物，乳液組合物為水包油型乳劑，性狀為乳白色液體，在4000rpm15min離心條件下不發(fā)生分層現(xiàn)象。優(yōu)選的，乳液組合物中25-羥基維生素d3的質(zhì)量百分比為0.001～5％。本發(fā)明中還提供了上述含有25-羥基維生素d3的乳液組合物作為飼料添加劑的應(yīng)用。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果是：(1)本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化乳化劑用量及比例，調(diào)節(jié)水相、油相的種類及比例，制備更加穩(wěn)定的水包油型乳劑劑型，產(chǎn)品穩(wěn)定性良好，便于制備、運(yùn)輸和貯存，更加適用于工業(yè)化應(yīng)用。(2)本發(fā)明制備的乳液組合物使用時(shí)稀釋25-羥基維生素d3的過(guò)程只需將本發(fā)明乳液組合物加入水中，直接發(fā)生稀釋效果而不引起性狀外觀的改變，克服油包水型乳劑在稀釋過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生破乳而致使使用不便的缺陷，使用便利。(3)本發(fā)明的水相溶劑占組合物質(zhì)量的65％以上，成本優(yōu)勢(shì)不言而喻。(4)此制備方法制備的乳劑能夠維持較好的制劑穩(wěn)定性，可定劑量的分散于飲用水中，使25-羥基維生素d3更加方便的應(yīng)用于家禽及豬的飼料中，作為家禽及豬的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，改善其骨密度或骨強(qiáng)度。具體實(shí)施方式應(yīng)該指出，以下詳細(xì)說(shuō)明都是例示性的，旨在對(duì)本申請(qǐng)?zhí)峁┻M(jìn)一步的說(shuō)明。除非另有指明，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本申請(qǐng)所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。需要注意的是，這里所使用的術(shù)語(yǔ)僅是為了描述具體實(shí)施方式，而非意圖限制根據(jù)本申請(qǐng)的示例性實(shí)施方式。如在這里所使用的，除非上下文另外明確指出，否則單數(shù)形式也意圖包括復(fù)數(shù)形式，此外，還應(yīng)當(dāng)理解的是，當(dāng)在本說(shuō)明書中使用術(shù)語(yǔ)“包含”和/或“包括”時(shí)，其指明存在特征、步驟、操作、器件、組件和/或它們的組合。術(shù)語(yǔ)解釋部分：乳劑系，指互不相溶的兩種液體混合，其中一相以液滴狀態(tài)分散于另一相液體中形成的非均相液體制劑，屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定體系。一般來(lái)說(shuō)乳劑由水相、油相和乳化劑組成，可分為油包水型、水包油型及復(fù)合乳液，其中水包油型乳劑可掩蓋藥物的不良臭味，并具有良好的水稀釋特性，適用于油溶性好的藥物活性成分。本發(fā)明涉及的25-羥基維生素d3，其信息及理化特性如下表1所示表1名稱25-羥基維生素d3化學(xué)名稱(3β,5z,7e)-9,10-secocholesta-5,7,10(19)-triene-3,25-diolmonahydrate分子式c27h44o2·分子量400.66熔點(diǎn)100～120℃性狀白色至粉紅色結(jié)晶性粉末溶解性不溶于水，可溶于乙腈、乙醇、dmso及其他有機(jī)溶劑實(shí)施例1：含有25-羥基維生素d3的乳液組合物組成成分如表2所示：表2組成成分處方量/g處方比例/％作用25-羥基維生素d31.5840.176活性成分中鏈甘油三酯63.07.00油分散相2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚9.01.00抗氧劑單亞油酸甘油酯21.92.44親油性乳化劑吐溫-6041.14.50親水性乳化劑水763.484.8連續(xù)相合計(jì)約900g100--上述含有25-羥基維生素d3的乳液組合物采用以下工藝過(guò)程制備：1、油相制備：采用水浴鍋維持70℃水浴溫度，將中鏈甘油三脂加入到燒杯中，檢測(cè)溫度至70℃；向其中加入處方量2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，采用磁力攪拌設(shè)備攪拌使之溶解，攪拌時(shí)間15min；加入處方量25-羥基維生素d3，攪拌使之溶解，攪拌時(shí)間10min。2、乳化劑制備將處方量的單亞油酸甘油酯和吐溫-60混合均勻；3、初乳制備將處方量乳化劑倒入油相中，攪拌使之形成初乳，攪拌時(shí)間5min；4、水處理水相在水浴中維持70℃，備用；5、乳液制備將制備的初乳加入到處方量的水中，使用高速剪切設(shè)備制備乳液，剪切速度定為25000rpm，剪切合適的時(shí)間制備乳劑，制備完畢后放冷至室溫6、包裝將上述乳液裝入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。應(yīng)貯存于低于15℃密封避光的條件下，有效期為十二個(gè)月。實(shí)施例1所制備的產(chǎn)品具有以下制劑特性如表3所示：表3制劑特性實(shí)施案例1性狀乳白色液體外觀穩(wěn)定性4000rpm15min離心不出現(xiàn)分層密度～1.00g/mlph5.50裝量900ml含量0.176％w/w實(shí)施例2含有25-羥基維生素d3的乳液組合物組成成分如表4所示：表4上述含有25-羥基維生素d3的乳液組合物采用以下工藝過(guò)程制備：1、油相制備：采用水浴鍋維持70℃水浴溫度，將中鏈甘油三脂加入到燒杯中，檢測(cè)溫度至70℃；向其中加入處方量2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，采用磁力攪拌設(shè)備攪拌使之溶解，攪拌時(shí)間15min；加入處方量25-羥基維生素d3，攪拌使之溶解，攪拌時(shí)間60min。2、乳化劑制備將處方量的單亞油酸甘油酯和吐溫-20與燒杯中混合均勻；3、初乳制備將處方量乳化劑倒入油相中，攪拌使之形成初乳，攪拌時(shí)間5min；4、水處理水相在水浴中維持70℃，備用；5、乳液制備將制備的初乳加入到處方量的水中，使用高速剪切設(shè)備制備乳液，剪切速度定為25000rpm，剪切時(shí)間為15min，制備完畢后放冷至室溫6、包裝將上述乳液裝入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。應(yīng)貯存于低于15℃密封避光的條件下，有效期為十二個(gè)月。實(shí)施案例所制備的產(chǎn)品具有以下制劑特性如表5所示：表5制劑特性實(shí)施案例2性狀乳白色液體外觀穩(wěn)定性4000rpm15min離心不出現(xiàn)分層密度～1.00g/mlph5.50裝量900ml含量0.176％w/w實(shí)施例3穩(wěn)定性測(cè)試：將實(shí)施案例1及實(shí)施案例2制備的樣品放置在25℃，60％rh的條件下，考察其含量、性狀、ph等項(xiàng)。穩(wěn)定性結(jié)果如表6所示：表6結(jié)果顯示，實(shí)施案例1及實(shí)施案例2均具有良好的穩(wěn)定性，在加速25℃，60％rh的條件下，放置90天穩(wěn)定。上述雖然對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行了描述，但并非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員不需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12