本發(fā)明涉及一種具有保健功能的飲品,特別涉及一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液,還涉及該發(fā)酵液的制備方法及其在解酒、治療輕微腦供血不足或血壓不穩(wěn)、防暈車、緩解心臟異常、解毒、安神催眠中的用途。本發(fā)明屬于保健品研究
技術(shù)領(lǐng)域:
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背景技術(shù):
:乳清是在奶酪生產(chǎn)過(guò)程中,牛奶凝結(jié)成凝乳塊后分離出的呈綠色的、半透明的液體,是牛奶生產(chǎn)奶酪過(guò)程中所產(chǎn)生的副產(chǎn)品。在現(xiàn)有的酪蛋白生產(chǎn)中,初步提取酪蛋白后,通常將剩余的乳清液直接作為廢水排放。研究發(fā)現(xiàn),現(xiàn)有的酪蛋白生產(chǎn)企業(yè)所排放的乳清液廢水中的乳清含量約為3.5%左右,而乳清中蛋白質(zhì)含量11.0-14.5%,乳糖含量63.0-75.0%,這種排放方式極大地浪費(fèi)了乳清液中含有的大量蛋白、乳糖等生物營(yíng)養(yǎng)資源。同時(shí)產(chǎn)生了大量的生產(chǎn)廢液,嚴(yán)重地污染了環(huán)境,增加了企業(yè)的廢水處理方面的支出,給企業(yè)帶來(lái)很大的負(fù)擔(dān)。通常而言,牛奶中包括2.8%的酪蛋白與0.7%的乳清蛋白。同酪蛋白相比,乳清蛋白的溶解性更好,同時(shí)含有質(zhì)量更高的必需氨基酸,具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、易消化吸收、含有多種活性成分等特點(diǎn),是公認(rèn)的人體優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)補(bǔ)充劑之一,乳清蛋白含有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、免疫球蛋白,還有其他多種活性成分,營(yíng)養(yǎng)豐富。在蛋白的世界里,乳清蛋白到目前為止被認(rèn)為是黃金標(biāo)準(zhǔn)。動(dòng)物來(lái)源的蛋白較植物蛋白質(zhì)量高很多。而在動(dòng)物來(lái)源的蛋白中,牛奶中的蛋白尤其是乳清蛋白,因?yàn)槟軌蛱峁┤梭w所需要的大部分的氨基酸,被認(rèn)為是最佳的蛋白之一。乳清蛋白中含硫氨基酸含量高,該物質(zhì)是生物合成谷胱甘肽的重要組成物質(zhì),谷胱甘肽則是與抗氧化、抗癌及提高肌體免疫力相關(guān)聯(lián)的一種三肽。乳清蛋白同時(shí)也是支鏈氨基酸的天然來(lái)源中含量最高的,而支鏈氨基酸被認(rèn)為能激發(fā)肌肉蛋白合成。鑒于此,本發(fā)明通過(guò)對(duì)乳清進(jìn)行二次發(fā)酵,然后進(jìn)行蒸餾的方法,制備得到了一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液,研究表明該乳清發(fā)酵液其具有排毒,調(diào)整血液循環(huán)以及提供大腦的熱量的保健作用。因此本發(fā)明的提出不但解決了奶酪過(guò)程中所產(chǎn)生的乳清大量排放所造成的污染以及資源浪費(fèi)的問(wèn)題,而且將乳清轉(zhuǎn)廢為寶使其成為了新一代的保健產(chǎn)品。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液及其制備方法和用途。為了達(dá)到上述目的,本發(fā)明采用了以下技術(shù)手段:本發(fā)明的一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液的制備方法,包括以下步驟:(1)初步發(fā)酵把鮮牛奶或用牛奶分離器分離奶油以后的不含奶油的鮮牛奶倒入容器中,封閉后將容器放在操作室里自然發(fā)酵成酸牛奶;(2)分離乳清將鮮牛奶發(fā)酵成的酸牛奶表面上的奶油撈取后,將容器里剩下的酸水加熱,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物,過(guò)濾,得到乳清液;或?qū)⒂梅蛛x器分離奶油以后剩下的鮮牛奶發(fā)酵而成的酸牛奶加熱,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物,用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)1-5h,讓奶酪和乳清自然分離,得到乳清液;(3)第二次發(fā)酵將乳清液冷卻后倒入新的容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始進(jìn)行自然發(fā)酵,期間用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng);(4)產(chǎn)品的提取第二次發(fā)酵完成后,將乳清液倒入蒸餾器里蒸餾,收集蒸餾出來(lái)的不含酒精的液體,即得本發(fā)明的乳清發(fā)酵液。在本發(fā)明中,優(yōu)選的,所述的制備方法包括以下步驟:(1)初步發(fā)酵把鮮牛奶或用牛奶分離器分離奶油以后的不含奶油的鮮牛奶倒入容器中,封閉后將容器放在操作室里,室內(nèi)溫度保持在25-30℃,濕度保持在30%-40%,保持室內(nèi)清潔,自然發(fā)酵18-24小時(shí)后,使容器內(nèi)的鮮牛奶發(fā)酵成酸牛奶;(2)分離乳清鮮牛奶初步發(fā)酵后的酸牛奶表面上形成一層奶油,奶油撈取后,將容器里剩下的酸水加熱到55-65℃維持30-60mim,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物,用干凈紗布過(guò)濾,得到的液體就是乳清液;或?qū)⒂梅蛛x器分離奶油以后剩下的鮮牛奶發(fā)酵而成的酸牛奶加熱到55-65℃維持30-60mim,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物,用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)1-5h,讓奶酪和乳清自然分離,得到乳清液;(3)第二次發(fā)酵將得到的乳清液平均分成三份,分別按照以下方法進(jìn)行第二次發(fā)酵:a將乳清液冷卻后倒入新的容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在25-35℃,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵24小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)3-5分鐘,然后封閉容器,繼續(xù)自然發(fā)酵120小時(shí),其間每隔12小時(shí)再用柳木棒向同1個(gè)方向攪動(dòng)3-5分鐘,發(fā)酵完成后的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;b將乳清液冷卻后倒入新的容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在20-35℃,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí),48小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒攪動(dòng)5-20分鐘以后倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;c將乳清冷卻到冷卻后倒入新的容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在10-30℃,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵120小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)5-20分鐘,然后將容器的蓋封閉繼續(xù)發(fā)酵到240小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)10-30分鐘,然后把發(fā)酵完成的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;(4)產(chǎn)品的提取將步驟(3)采用不同方法發(fā)酵后的乳清一起倒入蒸餾器里,進(jìn)行乳清的蒸餾,乳清蒸發(fā)的蒸氣通過(guò)蒸餾管進(jìn)入冷卻管道,通過(guò)冷水冷卻以后流入液體管道,收集液體管道里滴流出來(lái)的不含酒精的液體,即為所述的富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液。在本發(fā)明所述方法中,優(yōu)選的,所述的鮮牛奶需滿足以下條件:(1)放養(yǎng)或圈養(yǎng)的奶牛在養(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)氣溫為35℃以下所產(chǎn)的鮮奶,或有蓄牧健康證的蓄牧養(yǎng)殖基地的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(2)提供鮮牛奶的奶牛沒(méi)有接受過(guò)抗生素,或雖接受過(guò)抗生素,但停藥后檢驗(yàn)牛奶中無(wú)抗生素的存在的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(3)患蛟蟲病一年內(nèi)的奶牛產(chǎn)的奶禁用,患有其他疾病的奶牛生產(chǎn)的奶禁用直至疾病徹底治好為止;(4)養(yǎng)殖奶牛的環(huán)境內(nèi)發(fā)生傳染病時(shí)禁用。在本發(fā)明所述方法中,優(yōu)選的,所述的容器為帶有密封蓋的鋁制或陶瓷制成的容器。在本發(fā)明所述方法中,優(yōu)選的,步驟(3)中所述的乳清液冷卻是指將乳清液冷卻至0-5℃。在本發(fā)明所述方法中,優(yōu)選的,所述的柳木棒為3-5cm粗,長(zhǎng)為至少可深入到容器底上部25-30cm。進(jìn)一步的,本發(fā)明還提出了按照以上所述的制備方法制備得到富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液。更進(jìn)一步的,本發(fā)明還提出了所述的乳清發(fā)酵液在制備保健品、飲品、飼料或或飼料添加劑中的用途。其中,優(yōu)選的,所述的保健品、飲品或飼料添加劑具有排毒,調(diào)整血液循環(huán)以及提供大腦的熱量的作用。更具體的,所述的保健品、飲品、飼料或或飼料添加劑具有解酒、治療輕微腦供血不足或血壓不穩(wěn)、防暈車、緩解心臟異常、解毒、安神催眠的作用。在本發(fā)明的發(fā)酵過(guò)程中,本發(fā)明發(fā)明人不可預(yù)見(jiàn)的發(fā)現(xiàn)使用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)發(fā)酵液,能夠起到使乳清中的多種氨基酸與渣子和酒精起分離作用,在后續(xù)蒸餾的過(guò)程中大大減少產(chǎn)品中的酒精含量。而且用于制備柳木棒的材料——柳樹,也是用于制造北方民間傳統(tǒng)日常生活用具的材料,例如用柳樹做木桶,菜板等,說(shuō)明柳樹對(duì)人體無(wú)害。發(fā)明人也嘗試使用其他材料,例如其他樹種的樹枝、鐵或塑料類性材料作為攪動(dòng)器,結(jié)果發(fā)現(xiàn)攪動(dòng)乳清時(shí)乳清中的渣子和各種氨基酸以及酒精無(wú)法分離,而且通過(guò)蒸餾器蒸餾足夠發(fā)酵的乳清時(shí),會(huì)無(wú)法從滴出的液體中提取酒精,會(huì)造成液體酒精含量超標(biāo)。相較于現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:1、解決了奶酪過(guò)程中所產(chǎn)生的乳清大量排放所造成的污染以及資源浪費(fèi)的問(wèn)題;2、提供了一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液,其具有排毒,調(diào)整血液循環(huán)以及提供大腦的熱量的作用,能夠用于解酒、治療輕微腦供血不足或血壓不穩(wěn)、防暈車、緩解心臟異常、解毒以及安神催眠,若每天飲用100到200克可以達(dá)到養(yǎng)生的目的。此外,本發(fā)明的乳清發(fā)酵液也可用于制備飼料或飼料添加劑,能夠明顯的促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)并提高肉質(zhì)。附圖說(shuō)明圖1為蒸餾器結(jié)構(gòu)示意圖;其中,1-鋁鍋、2-乳清、3-蒸餾罐、4-蒸餾蓋、5-蒸餾管、6-冷卻管道、7-冷卻桶、8-液體管道、9-接液體容器、10-冷水注入管道、11-排熱水管口;圖2為發(fā)酵后的乳清蒸餾流程圖;圖3為20種氨基酸檢測(cè)的xic離子流圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明,本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的,并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是,在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換,但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)施例1一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液的制備1、方法包括以下步驟:(1)初步發(fā)酵把儲(chǔ)存溫度為0-5℃的鮮牛奶60公斤倒入容積為25l的鋁制容器中,用干凈白布蓋好后,將容器放在操作室里,室內(nèi)溫度保持在25-30℃,濕度保持在30%-40%,保持室內(nèi)清潔,自然發(fā)酵22小時(shí)后,使容器內(nèi)的鮮牛奶發(fā)酵成酸牛奶;(2)分離乳清初步發(fā)酵后的酸牛奶表面上形成一層奶油(約6公斤),奶油撈取后,將容器里剩下的酸水加熱到60℃維持40mim,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物(約6公斤),用干凈紗布過(guò)濾,得到的液體就是乳清液(約48公斤);(3)第二次發(fā)酵將得到的乳清液平均分成三份(約16公斤),分別按照以下方法進(jìn)行第二次發(fā)酵:a將乳清液冷卻至0-5℃后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在30℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵24小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)4分鐘,然后封閉容器,繼續(xù)自然發(fā)酵120小時(shí),其間每隔12小時(shí)再用柳木棒向同1個(gè)方向攪動(dòng)3-5分鐘,發(fā)酵完成后的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;b將乳清液冷卻后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在30℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí),48小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒攪動(dòng)10分鐘以后倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;c將乳清冷卻到冷卻后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在20℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵120小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)10分鐘,然后將容器的蓋封閉繼續(xù)發(fā)酵到240小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)20分鐘,然后把發(fā)酵完成的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;其中所用柳木棒為4cm粗,長(zhǎng)60cm,可深入到容器底上部30cm;(4)產(chǎn)品的提取將步驟(3)采用不同方法發(fā)酵后的乳清一起倒入蒸餾器里,進(jìn)行乳清的蒸餾,蒸餾器的結(jié)構(gòu)示意圖如圖1所示,乳清蒸餾流程圖如圖2所示。將步驟(3)采用不同方法發(fā)酵后的乳清2一起倒入位于蒸餾罐3內(nèi)部的鋁鍋1中,采用明火或者暗火加熱,使蒸餾器溫度達(dá)到80-100℃,乳清蒸發(fā)的蒸氣通過(guò)與蒸餾蓋4連接的蒸餾管5進(jìn)入冷卻管道6,冷卻管道6位于冷卻桶7內(nèi),冷卻桶7下部與冷水注入管道10連接,上部與排熱水管口11連接,通過(guò)冷水冷卻以后乳清2通過(guò)液體管道8流入接液體容器9,液體管道8里剛滴流出來(lái)的液體外排出700毫升左右(因?yàn)閯偭鞒鰜?lái)的液體里含酒精,所以不需要),收集之后液體管道8里滴流出來(lái)的不含酒精的液體,即為所述的富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液(12公斤)。其中,所述的鮮牛奶需滿足以下條件:(1)放養(yǎng)或圈養(yǎng)的奶牛在養(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)氣溫為35℃以下所產(chǎn)的鮮奶,或有蓄牧健康證的蓄牧養(yǎng)殖基地的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(2)提供鮮牛奶的奶牛沒(méi)有接受過(guò)抗生素,或雖接受過(guò)抗生素,但停藥后檢驗(yàn)牛奶中無(wú)抗生素的存在的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(3)患蛟蟲病一年內(nèi)的奶牛產(chǎn)的奶禁用,患有其他疾病的奶牛生產(chǎn)的奶禁用直至疾病徹底治好為止;(4)養(yǎng)殖奶牛的環(huán)境內(nèi)發(fā)生傳染病時(shí)禁用。2、產(chǎn)品外觀、味道以及保質(zhì)期該產(chǎn)品是無(wú)色的液體,微酸味。保質(zhì)期為0到4℃下6到8個(gè)月。實(shí)施例2一種富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液的制備1、方法包括以下步驟:(1)初步發(fā)酵儲(chǔ)存溫度為0-5℃的鮮牛奶60公斤用牛奶分離器分離奶油(約6公斤)后,將不含奶油的鮮牛奶倒入容積為25l的鋁制容器中,用干凈白布蓋好后,將容器放在操作室里,室內(nèi)溫度保持在25-30℃,濕度保持在30%-40%,保持室內(nèi)清潔,自然發(fā)酵22小時(shí)后,使容器內(nèi)的鮮牛奶發(fā)酵成酸牛奶;(2)分離乳清將用分離器分離奶油以后剩下的鮮牛奶發(fā)酵而成的酸牛奶加熱到60℃維持40mim,使酸水變成白色軟體和淡綠黃色液體的混合物(約6公斤),用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)3h,讓奶酪和乳清自然分離,得到乳清液(約48公斤);(3)第二次發(fā)酵將得到的乳清液平均分成三份(約16公斤),分別按照以下方法進(jìn)行第二次發(fā)酵:a將乳清液冷卻至0-5℃后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在30℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵24小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)4分鐘,然后封閉容器,繼續(xù)自然發(fā)酵120小時(shí),其間每隔12小時(shí)再用柳木棒向同1個(gè)方向攪動(dòng)3-5分鐘,發(fā)酵完成后的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;b將乳清液冷卻后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在30℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵時(shí)間為48小時(shí),48小時(shí)后把容器的蓋打開,用柳木棒攪動(dòng)10分鐘以后倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;c將乳清冷卻到冷卻后倒入容積20l的陶瓷容器內(nèi),封閉后將容器放在操作室里開始自然發(fā)酵,室內(nèi)溫度保持在20℃左右,濕度保持在20%-30%,發(fā)酵120小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒反復(fù)攪動(dòng)10分鐘,然后將容器的蓋封閉繼續(xù)發(fā)酵到240小時(shí)后把容器蓋打開,用柳木棒向一個(gè)方向攪動(dòng)20分鐘,然后把發(fā)酵完成的乳清倒入蒸餾器里準(zhǔn)備蒸餾;其中所用柳木棒為4cm粗,長(zhǎng)60cm,可深入到容器底上部30cm;(4)產(chǎn)品的提取將步驟(3)采用不同方法發(fā)酵后的乳清一起倒入蒸餾器里,進(jìn)行乳清的蒸餾,蒸餾器的結(jié)構(gòu)示意圖如圖1所示,乳清蒸餾流程圖如圖2所示。將步驟(3)采用不同方法發(fā)酵后的乳清2一起倒入位于蒸餾罐3內(nèi)部的鋁鍋1中,采用明火或者暗火加熱,使蒸餾器溫度達(dá)到80-100℃,乳清蒸發(fā)的蒸氣通過(guò)與蒸餾蓋4連接的蒸餾管5進(jìn)入冷卻管道6,冷卻管道6位于冷卻桶7內(nèi),冷卻桶7下部與冷水注入管道10連接,上部與排熱水管口11連接,通過(guò)冷水冷卻以后乳清2通過(guò)液體管道8流入接液體容器9,液體管道8里剛滴流出來(lái)的液體外排出700毫升左右(因?yàn)閯偭鞒鰜?lái)的液體里含酒精,所以不需要),收集之后液體管道8里滴流出來(lái)的不含酒精的液體,即為所述的富含多種氨基酸的乳清發(fā)酵液(12公斤)。其中,所述的鮮牛奶需滿足以下條件:(1)放養(yǎng)或圈養(yǎng)的奶牛在養(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)氣溫為35℃以下所產(chǎn)的鮮奶,或有蓄牧健康證的蓄牧養(yǎng)殖基地的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(2)提供鮮牛奶的奶牛沒(méi)有接受過(guò)抗生素,或雖接受過(guò)抗生素,但停藥后檢驗(yàn)牛奶中無(wú)抗生素的存在的奶牛所產(chǎn)的鮮奶;(3)患蛟蟲病一年內(nèi)的奶牛產(chǎn)的奶禁用,患有其他疾病的奶牛生產(chǎn)的奶禁用直至疾病徹底治好為止;(4)養(yǎng)殖奶牛的環(huán)境內(nèi)發(fā)生傳染病時(shí)禁用。2、產(chǎn)品外觀、味道以及保質(zhì)期該產(chǎn)品是無(wú)色的液體,微酸味。保質(zhì)期為0到4℃下6到8個(gè)月。實(shí)施例3、產(chǎn)品中氨基酸含量的測(cè)定1、檢測(cè)單位:委托北京普瑞華盛生物科技有限公司進(jìn)行檢測(cè)。2、樣本信息樣本:乳清發(fā)酵液(實(shí)施例1制備),4℃儲(chǔ)存檢測(cè)內(nèi)容:20種游離氨基酸定量檢測(cè)3、儀器試劑信息儀器型號(hào):hplc-ms/ms(ultimate3000-api3200qtrap);氨基酸試劑盒:北京質(zhì)譜醫(yī)學(xué)研究有限公司mslab-45+aa批號(hào):mslab451561#甲醇、已腈等均購(gòu)自fisher4、樣本前處理衍生化過(guò)程:取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)(混標(biāo)濃度見(jiàn)原始數(shù)據(jù)中s1-s5)、待測(cè)樣本50ul加50ul蛋白沉淀劑(含nvl),混勻后13200轉(zhuǎn)冷凍離心4分鐘。取上清10ul,加50ul標(biāo)記緩沖液混勻,瞬離。再加20ul衍生液混勻、瞬離后置55度恒溫衍生15min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離,取50ul上機(jī)檢測(cè)。5、實(shí)驗(yàn)參數(shù)5.1.液相條件:色譜柱:mslab45+aa-c18(150*4.6mm5um)柱溫:50℃流速:1ml/min流動(dòng)相:a水相:水(1‰甲酸);b有機(jī)相:乙腈(1‰甲酸)進(jìn)樣量:5ul梯度:見(jiàn)下表1表11234567retention0.011212.11515.120%a909030009090%b10107010010010105.2質(zhì)譜條件:離子源:+esi電噴霧離子源is:+5500v(噴霧電壓)gs1:55psi(霧化氣)gs2:60psi(輔助氣)掃描方式:mrm多反應(yīng)監(jiān)測(cè)cad:medium(碰撞氣)tem:500℃(霧化溫度)cur:20psi(氣簾氣)cxp:2.0(碰撞室射出電壓)ep:10(射入電壓)6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果20種游離氨基酸定量檢測(cè)結(jié)果如表2所示,20種氨基酸檢測(cè)的xic離子流圖如圖3所示。表2氨基酸含量(單位umol/l)gly2.62ser32.10pro1.65val0.29thr2.46cys0.12ile2.13asn0.00asp0.00gln1.11glu6.00met0.28his0.06phe1.41arg0.50trp0.15lys9.34tyr0.45leu3.11ala0.00實(shí)施例4產(chǎn)品中vc、ve、ld以及ca含量的檢測(cè)1、檢測(cè)單位:委托北京華英生物技術(shù)研究所(beijingsino-ukinstituteofbiologicaltechnology)進(jìn)行檢測(cè)2、樣本信息樣本:乳清發(fā)酵液(實(shí)施例1制備),4℃儲(chǔ)存檢測(cè)內(nèi)容:vc、ve、ld以及ca含量的檢測(cè)3、試劑ca檢測(cè)試劑盒:中生北控股份有限公司vc、ve、ld檢測(cè)試劑盒:北京華英生物技術(shù)研究所儀器廠家:日本日立7160全自動(dòng)生化儀4、檢測(cè)方法:比色法(具體操作見(jiàn)說(shuō)明書)5、檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果如表3所示。表3樣品vc(umol/l)ve(umol/l)ld(mmol/l)ca(mmol/l)乳清發(fā)酵液6.98912.8920.6160.664實(shí)施例5本產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)結(jié)果1、受試產(chǎn)品:乳清發(fā)酵液(實(shí)施例1制備),4℃儲(chǔ)存2、本產(chǎn)品在臨床試驗(yàn)中的說(shuō)明(2015年---2017年)飲酒后飲用本液體50--100g之后,解酒并舒心安神。具體試驗(yàn)如下表4所示:表4經(jīng)醫(yī)生確診以下幾人輕微腦供血不足和血壓不穩(wěn),不過(guò)醫(yī)生叮囑不必吃藥。在飲用本液體50--100g半小時(shí)后頭腦清醒明目,血壓恢復(fù)正常。具體試驗(yàn)如下表5所示:表5心臟有異常的人吃肉或油膩的食物之后飲用本產(chǎn)品50--100g之后能暫時(shí)緩解心跳加速或心悶的情況。具體試驗(yàn)如下表6所示:表6輕微食物中毒者或誤食含有農(nóng)藥成分食物的人在飲用50--100g本產(chǎn)品后,能達(dá)到解毒效果。具體試驗(yàn)如下表7所示:表7注:胡西風(fēng)和陳忠和倆位老人在2016年5月因吃菠菜后出現(xiàn)了嘔吐的癥狀。經(jīng)醫(yī)生診斷是輕微食物中毒。菜店人員確定蔬菜上的農(nóng)藥失效期未到。老人飲用了本產(chǎn)品50--100g之后嘔吐的癥狀得到緩解。發(fā)明人陳迎春在2016年6月,因吃了未熟豆角之后出現(xiàn)了嘔吐的癥狀。飲用本產(chǎn)品50--100g之后嘔吐癥狀得到緩解。此外陳迎春多次親自實(shí)驗(yàn)吃過(guò)期的瓜子和不是純綠色的水果蔬菜(用藥物儲(chǔ)藏的)后出現(xiàn)了頭痛頭暈惡心的癥狀。飲用了本產(chǎn)品50g后恢復(fù)效果良好。以上30位平時(shí)腦力和體力消耗較大,在勞累后飲用本產(chǎn)品50g之后能達(dá)到安神催眠醒腦的作用。實(shí)施例6本發(fā)明產(chǎn)品在作為飼料中的應(yīng)用1、方法同樣斤數(shù)的豬崽三個(gè),第一個(gè)豬崽喂常規(guī)飼料,第二個(gè)豬崽喂粗糧,第三個(gè)豬崽喂本發(fā)明的乳清發(fā)酵液,每日稱重,記錄豬崽體重。2、結(jié)果通過(guò)稱重發(fā)現(xiàn)飼喂乳清發(fā)酵液的豬崽明顯長(zhǎng)的快,毛順滑,精神好。屠宰后發(fā)現(xiàn)飼喂乳清發(fā)酵液的豬崽脂肪少,瘦肉多,味道新鮮。當(dāng)前第1頁(yè)12