一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿的制作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿，包括圓形的皿體和與皿體配合的皿蓋，該皿蓋上設(shè)有手柄。所述皿蓋采用透明材質(zhì)，其內(nèi)表面設(shè)有等間距且相互垂直的縱橫交錯線條，形成若干計數(shù)方格，計數(shù)方格的分布是以皿蓋的中心呈“+”字形，形成上、下、左、右和中心共五個區(qū)域，每個區(qū)域為一個計數(shù)池。所述皿體的側(cè)壁上設(shè)有刻度線。本實用新型既有利于對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)，又能顯示培養(yǎng)基量的培養(yǎng)皿。
【專利說明】一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種醫(yī)藥實驗器具，具體涉及一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿。
【背景技術(shù)】
[0002]在生物醫(yī)學(xué)實驗中，細(xì)胞培養(yǎng)是最為常用的實驗技術(shù)之一。無論是在原代培養(yǎng)接種、細(xì)胞傳代培養(yǎng)以及對其增殖能力的觀察，還是為進(jìn)一步實驗提供細(xì)胞通常都需要對所獲得的細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)。目前對培養(yǎng)細(xì)胞計數(shù)的常用方法均是將細(xì)胞用胰酶進(jìn)行消化后制備細(xì)胞懸液，再取少量懸液用計數(shù)板或計數(shù)槍進(jìn)行計數(shù)，最后再將計數(shù)后的細(xì)胞進(jìn)行重新接種或用于其它的檢測。此兩種計數(shù)方法均存在以下明顯的缺陷:1、經(jīng)過酶消化后會對細(xì)胞的活性產(chǎn)生影響，甚至由于消化時間不當(dāng)可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。2、經(jīng)消化后的細(xì)胞再接種進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)可能會引起污染。3、在細(xì)胞懸液中存在一定濃度胰酶，用于進(jìn)一步實驗時可能會影響后續(xù)的研究結(jié)果。
[0003]因此，在實際的實驗操作過程中，需要研制一種可直接對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)并準(zhǔn)確控制懸液用量的培養(yǎng)裝置。如CN 203212574 U公開的菌落選點技術(shù)培養(yǎng)皿，雖然該培養(yǎng)皿能對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，但是該培養(yǎng)皿的選點位置受培養(yǎng)皿體底中方格位置的限制，另外該培養(yǎng)皿不能對培養(yǎng)基的量進(jìn)行控制。因此，在培養(yǎng)皿對培養(yǎng)細(xì)胞計數(shù)和培養(yǎng)基量的控制方面需要進(jìn)一步的改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本實用新型所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有細(xì)胞計數(shù)方法及裝置容易造成培養(yǎng)細(xì)胞二次污染、細(xì)胞額外損傷等缺陷，目的在于提供一種可以使細(xì)胞不離開培養(yǎng)皿而實現(xiàn)對其計數(shù)的細(xì)胞計數(shù)裝置。
[0005]本實用新型所述的一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿，包括圓形的皿體和與皿體配合的皿蓋，該皿蓋上設(shè)有手柄。所述皿蓋采用透明材質(zhì)，其內(nèi)表面設(shè)有等間距且相互垂直的縱橫交錯線條，形成若干計數(shù)方格，所述皿體的側(cè)壁上設(shè)有刻度線。
[0006]為了清晰地計數(shù)，所述計數(shù)方格的分布是以皿蓋的中心呈“ + ”字形，形成上、下、左、右和中心共五個區(qū)域，每個區(qū)域為一個計數(shù)池，每個計數(shù)池方格數(shù)量為3*3共9個。
[0007]在離體細(xì)胞培養(yǎng)實驗中，我們通過將該細(xì)胞培養(yǎng)裝置放置于倒置顯微鏡下，根據(jù)上蓋各方位的計數(shù)池,計數(shù)出不同部位方格內(nèi)細(xì)胞分部的個數(shù),結(jié)合培養(yǎng)皿的直徑大小就可算出培養(yǎng)皿中細(xì)胞的具體數(shù)量，且通過轉(zhuǎn)動上蓋側(cè)面的手柄可計數(shù)不同部位細(xì)胞的數(shù)量，使細(xì)胞計數(shù)更為客觀、準(zhǔn)確。
[0008]本實用新型具有以下優(yōu)點:
[0009]1、本實用新型針對現(xiàn)有培養(yǎng)細(xì)胞計數(shù)需進(jìn)行酶消化、重新接種培養(yǎng)容易造成培養(yǎng)細(xì)胞二次污染以及影響細(xì)胞活性的缺點，其設(shè)計的皿體和皿蓋使得細(xì)胞培養(yǎng)和計數(shù)可以一體化實現(xiàn)，可以實現(xiàn)對細(xì)胞實時計數(shù)而不離開培養(yǎng)環(huán)境，有效避免二次污染和額外損傷。
[0010]2、本實用新型可將培養(yǎng)細(xì)胞種植在皿體內(nèi)，并根據(jù)皿體外壁上的刻度，可判斷培養(yǎng)基的加入量，使用方便，并且還可對培養(yǎng)細(xì)胞突起生長及突起長短進(jìn)行初步的測量。
[0011]3、通過皿蓋上手柄的轉(zhuǎn)動，可計數(shù)培養(yǎng)皿內(nèi)不同部位細(xì)胞的數(shù)量，通過對多次計數(shù)細(xì)胞進(jìn)行平均后就可算出培養(yǎng)皿內(nèi)細(xì)胞的總數(shù)，使細(xì)胞計數(shù)更為客觀、準(zhǔn)確。
[0012]4、裝置結(jié)構(gòu)簡單，成本低廉。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0014]圖2為圖1中皿蓋的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0015]圖3為本實用新型方格的使用狀態(tài)圖。
【具體實施方式】
[0016]下面結(jié)合附圖和實施例對本實用新型作進(jìn)一步的詳細(xì)闡述:
[0017]參見圖1至圖3所示的一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿，其包括圓形的皿體I和與皿體配合的皿蓋2，皿體I的直徑為35mm，該皿蓋2的側(cè)壁上設(shè)有手柄21，所述皿蓋2采用透明材質(zhì)，其內(nèi)表面設(shè)有等間距且相互垂直的縱橫交錯線條，形成若干計數(shù)方格22，所述計數(shù)方格22的分布是以皿蓋2的中心呈“ + ”字形，形成上、下、左、右和中心共五個區(qū)域，每個區(qū)域為一個計數(shù)池。較有的設(shè)計是每個計數(shù)池方格數(shù)量為3*3共9個，所述每個計數(shù)池的長、寬各
0.3mm,其內(nèi)的9個計數(shù)方格每個長0.1毫米、寬0.1毫米，面積為0.01平方毫米，所述每個計數(shù)池都是一個凹槽。所述皿體I的側(cè)壁上設(shè)有刻度線11，所述側(cè)壁上設(shè)有刻度線11從下至上分別為0.5ml, 1.0ml, 1.5ml和2ml，可大體顯示培養(yǎng)皿內(nèi)加入培養(yǎng)基的量。
[0018]本實用新型的工作原理:
[0019]將從孵箱中取出的培養(yǎng)細(xì)胞，根據(jù)皿體側(cè)壁上的刻度，可判斷培養(yǎng)基的加入量，然后在低倍鏡下找到計數(shù)池后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù)。每個計數(shù)池區(qū)均要觀察(各計數(shù)池的計數(shù)區(qū)見圖2標(biāo)示)，為了保證計數(shù)的準(zhǔn)確性，避免重復(fù)計數(shù)和漏記，在計數(shù)時，對分部在方格線上的細(xì)胞的統(tǒng)計應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)定。如細(xì)胞位于方格的雙線上，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。即位于本格上線和左線上的細(xì)胞計入本格，本格的下線和右線上的細(xì)胞按規(guī)定計入相應(yīng)的格中。對于分裂的細(xì)胞，當(dāng)新生細(xì)胞達(dá)到正常細(xì)胞大小一半時，即可作為兩個細(xì)胞計算(見圖3所示)。計數(shù)完畢后，用75%的酒精消毒培養(yǎng)皿后，可將觀察的細(xì)胞放回孵箱繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行下一步實驗。根據(jù)我們所設(shè)計的計數(shù)裝置的大小，所計數(shù)的細(xì)胞數(shù)量如下:
[0020]N為:1個方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)
[0021]公式簡化后:細(xì)胞數(shù)/皿=N/計數(shù)池面積(0.0lmm2) X培養(yǎng)皿的底面積(直徑35mm)
[0022]計算后每皿細(xì)胞數(shù)大約=NX 105
[0023]進(jìn)行離體培養(yǎng)細(xì)胞計數(shù)時，本實用新型提供了一種簡便的具有計數(shù)功能的培養(yǎng)皿，該培養(yǎng)皿皿蓋上的方格，可在不離開培養(yǎng)條件下對培養(yǎng)或需要接種的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，實現(xiàn)計數(shù)過程不需要酶的消化以及離開培養(yǎng)環(huán)境，減少實驗的中間環(huán)節(jié)并能較好的維持細(xì)胞活性。
【權(quán)利要求】
1.一種可計數(shù)的培養(yǎng)皿，包括圓形的皿體(I)和與皿體(I)配合的皿蓋(2)，其特征在于:所述皿蓋(2)采用透明材質(zhì)，其內(nèi)表面設(shè)有等間距且相互垂直的縱橫交錯線條，形成若干計數(shù)方格(22 );所述皿體(I)的側(cè)壁上設(shè)有刻度線(11);所述皿蓋(2 )上設(shè)有手柄(21)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)皿，其特征是:所述計數(shù)方格(22)的分布是以皿蓋(2)的中心呈“ + ”字形，形成上、下、左、右和中心共五個區(qū)域，每個區(qū)域為一個計數(shù)池，每個計數(shù)池方格數(shù)量為3*3共9個。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)皿，其特征是:所述每個計數(shù)池的長、寬各0.3mm，其內(nèi)的9個計數(shù)方格每個長0.1毫米、寬0.1毫米，面積為0.0l平方毫米。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)皿，其特征是:所述每個計數(shù)池都是一個凹槽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之任一項所述的培養(yǎng)皿，其特征是:所述側(cè)壁上設(shè)有刻度線(11)從下至上分別為0.5ml, 1.0ml, 1.5ml和2ml。
【文檔編號】C12M3/00GK203794906SQ201420180788
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年4月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月15日
【發(fā)明者】劉媛, 伍亞民, 王莉, 高潔, 李森 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院