一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括22.6g/L皰肉培養(yǎng)基、3.8g/L醋酸鈉、0.48g/LL-半胱氨酸鹽酸鹽、0.68g/L檸檬酸鐵銨、0.05g/L磷酸二氫鉀、0.002g/L刃天青、0.77g/L亞硫酸鈉、16g/L瓊脂，pH值為7.4-7.8。所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；菌生長(zhǎng)迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
[0003]培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及生長(zhǎng)素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。
[0004]培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基)，較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3~6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。
[0005]產(chǎn)氣莢膜梭菌(C.perfringens)是臨床上氣性壞疽病原菌中最多見(jiàn)的一種梭菌，因能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)，造成組織大面積壞死，加之本菌在體內(nèi)能形成莢膜，故名產(chǎn)氣夾膜梭菌。
[0006]肉毒桿菌是一種生長(zhǎng)在缺氧環(huán)境下的細(xì)菌，在罐頭食品及密封腌潰食物中具有極強(qiáng)的生存能力，是毒性最強(qiáng)的毒素之一。肉毒桿菌是一種致命病菌，在繁殖過(guò)程中分泌毒素，是毒性最強(qiáng)的蛋白質(zhì)之一。軍隊(duì)常常將這種毒素用于生化武器。人們食入和吸收這種毒素后，神經(jīng)系統(tǒng)將遭到破壞，出現(xiàn)頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等癥狀。
[0007]培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基)，較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3~6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，現(xiàn)在均改制成粉末。
[0008]培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類(lèi)為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類(lèi)為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類(lèi)為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
[0010]本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無(wú)機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對(duì)不同的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、維生素、生長(zhǎng)促進(jìn)劑等諸類(lèi)營(yíng)養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選，對(duì)培養(yǎng)基的PH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢(shì)、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較，研究出了本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0011]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:
[0012]一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括22.6g/L皰肉培養(yǎng)基、
3.8g/L醋酸鈉、0.48g/LL-半胱氨酸鹽酸鹽、0.68g/L檸檬酸鐵銨、0.05g/L磷酸二氫鉀、
0.002g/L刃天青、0.77g/L亞硫酸鈉、16g/L瓊脂，pH值為7.4-7.8。
[0013]在以上方案的基礎(chǔ)上，所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.Sg、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉
2.0g。
[0014]本發(fā)明還公開(kāi)了所述的強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)。
[0015]牛肉浸粉、胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母粉提供氮源、維生素和礦物質(zhì)，葡萄糖提供碳源，檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉是硫化氫指示劑，瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑。
[0016]稱(chēng)取本品45g，加熱攪拌溶解于100ml蒸餾水中，分裝試管，121°C高壓滅菌15分鐘備用。
[0017]本發(fā)明的有益效果:
[0018]1、培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；
[0019]2、菌生長(zhǎng)迅速，變異率低；
[0020]3、便于觀察，分析。

【具體實(shí)施方式】
[0021]實(shí)施例1:
[0022]一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括22.6g/L皰肉培養(yǎng)基、
3.8g/L醋酸鈉、0.48g/LL-半胱氨酸鹽酸鹽、0.68g/L檸檬酸鐵銨、0.05g/L磷酸二氫鉀、
0.002g/L刃天青、0.77g/L亞硫酸鈉、16g/L瓊脂，pH值為7.4-7.8。
[0023]所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.Sg、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。
[0024]牛肉浸粉、胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母粉提供氮源、維生素和礦物質(zhì)，葡萄糖提供碳源，檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉是硫化氫指示劑，瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑。
[0025]稱(chēng)取本品45g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，121°C高壓滅菌15分鐘備用。
[0026]在36±1°C 培養(yǎng) 18-24 小時(shí)
[0027]

【權(quán)利要求】
1.一種強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括22.6g/L皰肉培養(yǎng)基、3.8g/L醋酸鈉、0.48g/LL-半胱氨酸鹽酸鹽、0.68g/L檸檬酸鐵銨、0.05g/L磷酸二氫鉀、0.002g/L刃天青、0.77g/L亞硫酸鈉、16g/L瓊脂，pH值為7.4-7.8。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。
3.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特征在于用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的 計(jì)數(shù)和培養(yǎng)。
【文檔編號(hào)】C12Q1/04GK104178551SQ201410459278
【公開(kāi)日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月9日
【發(fā)明者】王雪梅 申請(qǐng)人:青島潤(rùn)鑫偉業(yè)科貿(mào)有限公司