一種用于診斷Xpll.2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤的探針組合及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于熒光原位雜交探針應(yīng)用領(lǐng)域，公開了一種用于診斷Xpll.2易位性PEComa的探針組合及其應(yīng)用。該探針組合為BAC克隆片斷RP11-918B12，RP11-916D13，RP11-416B14，RP11-344N17。該探針組合診斷Xpll.2易位性PEComa的特異性和敏感性均達(dá)到了100%，不但方便、快速、可靠，而且成功率高，可用于制備Xpll.2易位性PEComa診斷試劑盒。
【專利說明】-種用于診斷XP11.2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤的探 針組合及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于熒光原位雜交探針應(yīng)用領(lǐng)域，涉及一種用于診斷XplL 2易位性 PEComa的探針組合及其在制備XplL 2易位性PEComa診斷試劑中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤（perivascular epithelioid cell neoplasms， PEComa)是一種在組織學(xué)和免疫表型上具有血管周上皮樣細(xì)胞特征的間葉性腫瘤。 PEComa家族包括肝臟和腎臟的血管平滑肌脂肪瘤（angiomyolipoma，AML)、淋巴管肌瘤病 (Iymphangioleiomyomatosis)、肺透明細(xì)胞"糖"瘤（clear cell "sugar"tumor)以及發(fā)生 于腹盆腔、消化道、泌尿生殖道、周圍軟組織和皮膚等部位的不能完全歸入上述這幾種特殊 類型的PEComa，因此被稱為非特殊性PEComa。PEComa的發(fā)生部位及形態(tài)特征多樣，因此診 斷難度較大。
[0003] 從分子遺傳學(xué)角度出發(fā)，大部分PEComa的發(fā)病和TSCl和TSC2基因的突變和缺失 相關(guān)，如果該基因是胚系突變，則表現(xiàn)為常染色體顯性遺傳性疾病結(jié)節(jié)性硬化癥。除此以 夕卜，最近的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一部分PEComa的發(fā)病機(jī)制和TFE3基因的易位相關(guān)，并且該部分病 例不存在TSC基因的改變。提示他們存在不同的發(fā)病機(jī)制，從而也存在不同的分子治療靶 點(diǎn)。隨著個體化分子靶向治療時代的到來，根據(jù)基因型，來精確診斷此類腫瘤顯得十分重 要。
[0004] 目前國內(nèi)外文獻(xiàn)中僅僅通過RT-PCR的方法檢測出該類PEComa存在1號染色體 PSF基因和X染色體TFE3基因融合，形成PSF-TFE3融合基因。目前認(rèn)為由于啟動子的變 換，這些融合基因最終高表達(dá)TFE3融合蛋白。因此應(yīng)用免疫組化檢測細(xì)胞核TFE3融合蛋 白是目前診斷XplL 2易位性PEComa重要方法之一。但其缺點(diǎn)是該方法容易受到多種因素 影響，如組織固定時間、組織修復(fù)方式、抗體克隆號以及人為的判讀因素等等。使得結(jié)果可 能出現(xiàn)假陽性或假陰性。尤其是當(dāng)組織學(xué)形態(tài)不典型時診斷往往更加困難。
[0005] 由于不同腫瘤PSF或TFE3基因的融合或易位的節(jié)點(diǎn)不一定，RT-PCR方法檢測所 用的引物很難設(shè)計。實(shí)際工作中常常出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，其操作也不便捷。更精確且便捷 的分子病理診斷方法有待于進(jìn)一步建立。
[0006] 染色體熒光原位雜交（FISH)始于傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué)和DNA技術(shù)的結(jié)合，快速靈 敏、特異性好，可以檢測隱匿或微小的染色體畸變以及復(fù)雜核型；還可以使用多種熒光標(biāo) 記，顯示DNA片段及基因之間的相對位置與方向，空間定位精確。此外，F(xiàn)ISH的方法，可以 在石蠟包埋的樣本上進(jìn)行回顧性研究，大大降低了對研究樣本的要求。目前，利用熒光原位 雜交（FISH)來檢測PSF-TFE3融合基因的方法國內(nèi)外均未見報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是針對上述技術(shù)問題提供一種用于診斷XplL 2易位性PEComa的探 針組合。
[0008] 本發(fā)明另一個目的是提供上述探針組合在制備XplL 2易位性PEComa診斷試劑中 的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明再一個目的是提供含有上述探針組合的診斷試劑盒。
[0010] 本發(fā)明的目的是通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0011] -種用于診斷XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤的探針組合，該探針組合 由 BAC 克隆片斷 RP11-918B12, RP11-916D13, RP11-416B14, RP11-344N17 組成；其中， RP11-918B12和RP11-916D13定位于PSF著絲粒一側(cè)，二者標(biāo)記為相同的任意一種顏色的熒 光；RP11-416B14和RP11-344N17定位于TFE3端粒一側(cè)，二者標(biāo)記為相同但與PSF著絲粒 一側(cè)標(biāo)記的顏色不同的熒光。
[0012] RP11-918B12 和 RP11-916D13 均標(biāo)記為綠色熒光，RP11-416B14 和 RP11-344N17 均 標(biāo)記為紅色熒光；或者將標(biāo)記的熒光顏色互換。
[0013] 上述探針組合在制備XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤診斷試劑中的應(yīng)用。
[0014] 一種XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤診斷試劑盒，該試劑盒包含上述探針 組合。
[0015] 以下是本發(fā)明技術(shù)方案詳細(xì)的說明：
[0016] 本發(fā)明采用的探針組合為國內(nèi)外首次利用FISH方法檢測PSF-TFE3融合基因，是 基于對染色體上PSF基因著絲粒側(cè)和TFE3基因端粒側(cè)的不同的BAC克隆片段結(jié)合位點(diǎn)的 分布位置、大小等情況的分析而采取的優(yōu)選方案。相比于本研究小組之前公開的TFE3分離 探針有本質(zhì)區(qū)別，二者檢測的內(nèi)容和設(shè)計原理均是不一樣的。TFE3分離探針是檢測TFE3基 因有無斷裂分離，一旦TFE3基因斷裂則出現(xiàn)分離信號，更重要的是無法得知斷裂后的TFE3 基因和誰融合?；赬plL 2易位性PEComa的最新研究結(jié)果（該腫瘤含有PSF-TFE3融合 基因），本發(fā)明公開的是PSF-TFE3融合基因探針，一旦腫瘤含有PSF-TFE3融合基因，則出 現(xiàn)融合信號，其檢測到的不僅是TFE3基因的斷裂，同時檢測到TFE3基因融合的對象PSF基 因。相比于TFE3分離探針，PSF-TFE3融合探針對Xpl 1. 2易位性PEComa的診斷更具有特異 性。此外融合探針和分離探針在制片判讀過程中也會存在優(yōu)劣差異。由于FISH是在2 的組織切片上進(jìn)行，分離信號由于距離遠(yuǎn)，很容易被切散，而不在同一張切片上。因此給觀 察和判讀信號帶來不便。而融合信號本身幾乎沒有距離，不容易被切散，所以觀察和判讀信 號更具優(yōu)勢。
[0017] 本發(fā)明中，PSF著絲粒一側(cè)BAC克隆片段為RP11-918B12(片段長度182kb) 和RP11-916D13(片段長度176kb)，TFE3端粒一側(cè)BAC克隆片段為RP11-416B14(片 段長度182kb)和RP11-344N17(片段長度202kb)，這些片段為細(xì)菌人工染色體 (Bacterial artificial chromosome, BAC)克隆，其在人類染色體上的定位已經(jīng)公 開，分別為 RPl 1_918B12(1 號染色體 35566945-35749420)、RPl 1-916D13(1 號染色體 35979254-36155316)、RP11-416B14(X 染色體 48465815-48648142)、RP11-344N17(X 染色 體 48010297-48212489)。PSF 基因的定位為（1 號染色體 35421787-35431322)。TFE3 基 因的定位為（X染色體48771185-48787934)。BAC克隆片段與PSF基因的鏈接順序?yàn)镻SF， RP11-918B12, RP11-916D13,1號染色體著絲粒；BAC克隆片段與TFE3基因的鏈接順序?yàn)閄 染色體著絲粒，TFE3, RP11-416B14, RP11-344N17。
[0018] TFE3基因與染色體上結(jié)合的BAC克隆片段之間以及相鄰BAC克隆片段之間保持 一定距離而不會重疊（本發(fā)明中最大為202kb，最小為176kb)。這樣，由于采用的BAC克隆 片段大小相近（本發(fā)明中最大和最小之間相差僅為26kb)，兩端BAC克隆片段之間最遠(yuǎn)距 離控制在1500kb以內(nèi)，彼此之間存在適當(dāng)?shù)拈g隔，使得在進(jìn)行熒光觀察時，TFE3端粒側(cè)兩 個BAC克隆片段顯示為一個熒光信號，如紅色，PSF著絲粒側(cè)兩個BAC克隆片段顯示另一個 熒光信號，如綠色，在非XplL 2易位性PEComa不存在PSF-TFE3融合基因時，紅綠兩種熒光 離得比較遠(yuǎn)，觀察時無需放大即可見到分離較遠(yuǎn)的紅綠兩種信號；當(dāng)XplL 2易位性PEComa 存在PSF-TFE3融合基因時，紅綠兩種熒光靠得比較近，觀察時出現(xiàn)紅綠融合信號（表現(xiàn)為 紅綠相連或黃色信號點(diǎn)），很容易觀察。
[0019] 在X染色體TFE3基因端粒側(cè)和1號染色體PSF著絲粒側(cè)，每端連接2個標(biāo)記同種 顏色的熒光的BAC克隆片段是為了增強(qiáng)熒光強(qiáng)度及范圍，通過實(shí)驗(yàn)觀察，2個BAC克隆片段 的熒光強(qiáng)度及范圍已經(jīng)足夠觀察，既避免了 1個BAC克隆片段可能出現(xiàn)熒光強(qiáng)度不夠范圍 過小的情形，又避免了采用多個BAC克隆片段會導(dǎo)致熒光范圍較分散容易產(chǎn)生干擾并且成 本也較高的弊端。
[0020] 選擇這4種BAC克隆片段有以下幾個方面的考慮：①這幾個BAC克隆片段大小相 近，帶來的好處是：每一端的熒光強(qiáng)度保持一致，防止一端過強(qiáng)而另一端過弱而影響觀察； 另外可使原位雜交條件保持一致性。②結(jié)合位置使相鄰BAC克隆片段之間能夠保持適當(dāng)?shù)?距離，能夠增強(qiáng)每一端熒光強(qiáng)度及范圍。③可使TFE3基因端粒側(cè)和PSF基因著絲粒側(cè)BAC 克隆片段最遠(yuǎn)距離控制在1500kb之內(nèi)，當(dāng)兩基因融合時呈現(xiàn)融合信號（如表現(xiàn)為紅綠相連 或黃色信號點(diǎn)），而在TFE3基因和PSF基因不存在融合時，兩種熒光顏色分離比較遠(yuǎn)，很容 易觀察。否則，若TFE3基因端粒側(cè)和PSF基因著絲粒側(cè)BAC克隆片段最遠(yuǎn)距離過大，如超過 1500kb甚至更大，則無論兩基因是否融合，均觀察到明顯分離的兩種熒光，就很難判斷是否 存在PSF-TFE3融合基因。
[0021] 本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明根據(jù)XplL 2易位性PEComa的特點(diǎn)，設(shè)計結(jié)合在TFE3 基因端粒側(cè)和PSF基因著絲粒側(cè)的熒光標(biāo)記DNA探針組合，利用該探針組合，在石蠟包埋 組織切片的基礎(chǔ)上與腫瘤組織芯片進(jìn)行原位雜交，檢測是否存在PSF-TFE3融合基因，可大 大提高診斷該類腫瘤的準(zhǔn)確率。為診斷分型及分子靶向治療提供依據(jù)。根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn) 結(jié)果，該探針組合診斷的特異性和敏感性均達(dá)到了 100%，且操作對象只需要在石蠟包埋組 織切片上進(jìn)行，時間僅為兩個工作日。采用本發(fā)明提供的探針組合進(jìn)行檢測XplL 2易位性 PEComa,不但方便、快速、可靠，而且成功率高，可用于制備XplL 2易位性PEComa診斷試劑 盒，為XplL 2易位性PEComa的快速準(zhǔn)確的診斷提供了新的工具。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0022] 圖I :BAC克隆探針定位模式圖。
[0023] 圖2 =RT-PCR方法檢測出XplL 2易位性PEComa的融合基因。測序結(jié)果顯示1號 染色體和X染色體存在易位，形成PSF-TFE3融合基因（PSF外顯子6與TFE3外顯子2相 連）。
[0024] 圖3:組織芯片的平面圖。
[0025] 圖4 :PSF-TFE3融合探針FISH對XplL 2易位性PEComa檢測結(jié)果，腫瘤存在融合 信號，記為陽性結(jié)果。
[0026] 圖5 :用PSF-TFE3融合探針對正常組織FISH檢測結(jié)果，組織中不存在融合信號， 記為陰性結(jié)果。

【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明做更進(jìn)一步地解釋。
[0028] 實(shí)施例中所述的探針即BAC克隆片段，也可以叫BAC克隆探針。
[0029] 實(shí)施例I :DNA探針組合的制備：
[0030] 選擇能夠在X染色體TFE3基因端粒側(cè)和1號染色體PSF基因著絲粒側(cè)分別連接 的2個BAC克隆片段，控制兩端探針之間最遠(yuǎn)距離在1500kb以內(nèi)，BAC克隆片段之間保持 一定距離不重疊，片段大小相近?？寺∑纬鎏帪镋mpireGenomics公司的人類BAC克隆中 心（http://www. empiregenomics. com/helixhq/clonecentral/search/human) 〇 PSF 著絲 粒一側(cè)BAC克隆片段為RP11-918B12 (片段長度182kb)和RP11-916D13 (片段長度176kb)， TFE3端粒一側(cè)BAC克隆片段為RP11-416B14(片段長度182kb)和RP11-344N17(片段長度 202kb)。BAC克隆片段與PSF基因的鏈接順序?yàn)镻SF，RP11-918B12，RP11-916D13,1號染色 體著絲粒；BAC克隆片段與TFE3基因的鏈接順序?yàn)閄染色體著絲粒，TFE3, RP11-416B14， RP11-344N17。探針組合的定位結(jié)構(gòu)如圖1所示。利用缺口平移方法將TFE3端粒側(cè)的二 個BAC克隆片段標(biāo)記成相同的任意一種顏色的熒光，優(yōu)選紅色熒光，將PSF著絲粒側(cè)的二個 BAC克隆片段標(biāo)記成相同但與TFE3端粒側(cè)標(biāo)記的顏色不同的熒光，優(yōu)選綠色熒光；兩端標(biāo) 記的突光顏色可以互換。這些方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知（由美國EmpireGenomics公 司提供上述這些服務(wù)）。PSF著絲粒一側(cè)兩個BAC克隆片段在熒光顯微鏡下為一個綠色熒 光信號，代表PSF基因著絲粒側(cè)。TFE3端粒一側(cè)兩個BAC克隆片段在熒光顯微鏡下為一個 紅色熒光信號，代表TFE3基因端粒側(cè)。兩端標(biāo)記的熒光顏色可以互換。正常情況下紅綠信 號分離，在PEComa存在PSF-TFE3融合基因時，則觀察到融合信號。
[0031] 進(jìn)一步，可將制備的探針組合采用熒光原位雜交方法，在XplL 2易位性PEComa、 非XplL 2易位性PEComa和腫瘤旁組織中驗(yàn)證其定位和/或診斷效果是否可靠。
[0032] 實(shí)施例2 :熒光原位雜交過程：
[0033] 一、標(biāo)本的組織芯片構(gòu)建：
[0034] 收集南京軍區(qū)南京總醫(yī)院診斷PEComa61例。由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生參照WHO 軟組織腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)、免疫組化TFE3陽性、及RT-PCR檢測融合基因結(jié)果（圖2，61例患者中 有1例是在mRNA層面得到了診斷，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相互對應(yīng)更能體現(xiàn)出本實(shí)驗(yàn)的可靠性），進(jìn) 行診斷評估，結(jié)果最終診斷XplL 2易位性PEComa5例、其他類型PEComa 56例。將以上標(biāo) 本（包括腫瘤和腫瘤旁組織）制作成組織芯片（圖3)，所有標(biāo)本均為10%福爾馬林固定， 常規(guī)組織處理、石蠟包埋。采用手工制作組織芯片。所用組織芯片制作儀為美國Beecher 手動點(diǎn)樣議，取樣針直徑2mm。每個樣本分別選取腫瘤及腫瘤旁組織，并重復(fù)2次。
[0035] 二、熒光原位雜交：
[0036] 組織芯片311111厚切片，在脫蠟后，依次置于100%、85%、70%乙醇中各2111111， 隨后浸入去離子水中，KKTC水浴15min。將組織切片放入胃蛋白酶K溶液（0. Ig胃蛋白 酶，40mL0. 01MHC1)37°C，15min ;2XSSC(氯化鈉、檸檬酸鈉）漂洗2次，各5min，切片置于 0? lmol/L HCl中室溫浸泡lOmin，用2XSSC漂洗2次，各5min ;經(jīng)70%、85%、100%乙醇各 脫水2min，于空氣中干燥；在組織區(qū)域加10 L探針混合液（其中每個探針各0. 5 L，4個 探針共2 ii L，另加8 ii L的雜交緩沖液，雜交緩沖液在購買探針時由EmpireGenomics公司提 供，內(nèi)含人類CotlDNA)，加蓋玻片，用橡皮膠封邊；放入原位雜交儀（GeneAmp In Situ PCR System 1000)中88°C變性6min后37°C過夜（16h);移去蓋玻片，將玻片置于0. 4XSSC(氯 化鈉、檸檬酸鈉、〇. 3% NP-40)溶液中，69°C漂洗Imin ;2XSSC(氯化鈉、檸檬酸鈉、0. 1% NP-40)溶液中漂洗lmin，70%乙醇3min，室溫暗處干燥；靶區(qū)域滴加10iil4'，6-二脒 基-2-苯基卩引哚（4'，6-diamidino_2-phenylindole DAPI)，用蓋玻片封片后，再用突光顯 微鏡觀察結(jié)果。
[0037] 結(jié)果判定：
[0038] 正常細(xì)胞X染色體,男性標(biāo)本可見1個紅色信號,女性可見2個紅色信號，1號染色 體，無論男女都可見2個綠色信號。無論男女所有信號均為獨(dú)立信號。
[0039] 腫瘤細(xì)胞，男性標(biāo)本可見一對紅綠融合的異常信號，和1個綠色野生型信號。女性 可見一對紅綠融合的異常信號，和紅綠各1個野生型信號。無論男女都可見融合信號。
[0040] 為排除假陽性和假陰性，每個樣本計數(shù)100個細(xì)胞，只有當(dāng)4個熒光信號（女性） 或3個熒光信號（男性）均存在時，才納入計數(shù)對象（在女性，無論正常和腫瘤我們都會看 到4個單信號（兩綠和兩紅），只不過在正常女性紅綠信號是分離的，看上去是四個單信號 組成。在腫瘤中見到一個融合信號和一對紅綠分離的單信號，表面上看是3個信號，但實(shí)際 還是由4個單信號組成的）。紅綠熒光信號之間的距離小于一個信號寬度時計為融合信號。 當(dāng)異常信號大于10%時記為陽性。以上結(jié)果判斷方法依據(jù)市面上多數(shù)類似的商業(yè)化探針?biāo)?行使的評判標(biāo)準(zhǔn)，如Vysis公司和Dako公司的探針使用方法。
[0041] 結(jié)果：
[0042] 我們對61例PEComa進(jìn)行檢測，其中Xp 11 ? 2易位性PEComa5例、其他類型PEComa56 例。結(jié)果5例XplL 2易位性PEComa均檢測出異常分離信號，其陽性細(xì)胞數(shù)范圍在30% - 75% (熒光顯微鏡無法給出100個細(xì)胞的視野供人觀察，因此30% - 75%的數(shù)據(jù)只能靠多 次計數(shù)得來），其余腫瘤及腫瘤旁正常組織均未檢測出異常信號（圖3 - 5給出了組織芯 片、XplL 2易位性PEComa代表性陽性圖片、正常組織的陰性圖片）。說明使用該探針檢測 XplL 2易位性PEComa的特異性和敏感性同為100%
[0043] 敏感性=真陽性/所有XplL 2易位性PEComa腫瘤病人數(shù)X 100% ;5真陽性病例 /5Xpll. 2易位性腎癌=100% ;
[0044] 特異性=真陰性/所有非XplL 2易位性PEComa腫瘤病人數(shù)X 100% ;56真陰性 病例/56非XplL 2易位性PEComa腫瘤病人。
[0045] 評價：
[0046] 本組探針使用的克隆片段相對較少，且克隆片段大小相對一致，最大和最小之間 相差僅為26kb。在設(shè)計上即考慮到了經(jīng)濟(jì)性又考慮到了原位雜交條件的一致性。此外，在 本實(shí)驗(yàn)中該熒光原位雜交探針的特異性和敏感性均達(dá)到了 1〇〇%。利用FISH技術(shù)，使用 PSF-TFE3雙色融合熒光原位雜交探針來診斷XplL 2易位性PEComa，快速、可靠且成功率 高，是診斷XplL 2易位性PEComa的一項新技術(shù)，值得推廣。
[0047] 實(shí)施例3 :XplL 2易位性PEComa診斷試劑盒
[0048] 試劑盒中含有實(shí)施例1所述的探針組合，該探針組合的特征主要是：
[0049] ⑴PSF著絲粒一側(cè)BAC克隆探針為RP11-918B12(片段長度182kb)和 RP11-916D13(片段長度176kb)，標(biāo)記綠色熒光。這兩個探針在熒光顯微鏡下為一個綠色熒 光信號，代表PSF基因著絲粒側(cè)。
[0050] ⑵TFE3端粒一側(cè)BAC克隆探針為RP11-416B14(片段長度182kb)和 RP11-344N17 (片段長度202kb)，標(biāo)記紅色熒光。這兩個探針在熒光顯微鏡下為一個紅色熒 光信號，代表TFE3基因端粒側(cè)。
[0051] ⑶正常情況下紅綠信號分離，在XplL 2易位性PEComa時，由于X染色體TFE3基 因和1號染色體PSF基因融合，使得雜交結(jié)果出現(xiàn)融合信號。
【權(quán)利要求】
1. 一種用于診斷XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤的探針組合，其特征在于，該探 針組合由 BAC 克隆片斷 RP11-918B12, RP11-916D13, RP11-416B14, RP11-344N17 組成；其 中，RP11-918B12和RP11-916D13定位于PSF著絲粒一側(cè)，二者標(biāo)記為相同的任意一種顏色 的熒光；RP11-416B14和RP11-344N17定位于TFE3端粒一側(cè)，二者標(biāo)記為相同但與PSF著 絲粒一側(cè)標(biāo)記的顏色不同的熒光。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于診斷XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤的探針組合， 其特征在于，RP11-918B12 和 RP11-916D13 均標(biāo)記為綠色熒光，RP11-416B14和 RP11-344N17 均標(biāo)記為紅色熒光；或者將標(biāo)記的熒光顏色互換。
3. 權(quán)利要求1或2所述的探針組合在制備XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤診斷 試劑中的應(yīng)用。
4. 一種XplL 2易位性血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤診斷試劑盒，其特征在于，該試劑盒包含 權(quán)利要求1或2所述的探針組合。
【文檔編號】C12N15/11GK104212889SQ201410410230
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月19日
【發(fā)明者】饒秋, 沈勤, 夏秋媛, 時姍姍, 周曉軍 申請人:中國人民解放軍南京軍區(qū)南京總醫(yī)院